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DETERMINACIN DEL
FACTOR RH (D)
Sistema Rh
Se descubri en 1940 por Weiner y Landsteiner.
Cromosoma: 1p34.-p36.2
Nombre de genes: RHD, RHCE
Nombre del producto de los genes: polipptido RhD
polipptido RhCE
Se han descrito 52 antgenos
Antgeno D (RH1): define condicin de POSITIVO.
Otros antgenos: C,c,E,e.
Antgeno D: mosaico antignico, determinado por epitopos
EXPRESIONES DBILES
D parcial: Se refiere a
los individuos que
han perdido eptopos
del antgeno D.
Sistema Rh
Anticuerpos Rh(D):
Los aloanticuerpos anti-Rh(D) son de origen inmunes
Fenotipificacin Antgeno D
IMPORTANTE
Utilizar un suero anti D que sea capaz de detectar las variantes
parciales y dbiles del antgeno D
COMPOSICIN DEL REACTIVO Anti D
Es una mezcla de anticuerpos IgG e IgM anti-D monoclonales humanos, o
mezcla policlonal humano (IgG) y monoclonal humano (IgM)
Ag D no es inmunognico para ratones BALB/c: difcil obtener monoclonales
murinos anti-D.
Se obtienen de humanos inmunizados:
(Leucocitos + VEB) + Cl Mieloma = Hibridoma
Cada Laboratorio informa la composicin del reactivo que produce:
ANTI-D (IgG+IgM)
Lnea celular IgG MS-26, IgM RUM-1.
Tampn fosfatos que incluye: Cloruro sdico 0,9 g %, Albmina bovina
3 g %, Azida sdica <0,1% y potenciadores macromoleculares.
Protocolo Clasificacin Rh
(Fenotipo D)
Muestra:
Reactivos:
GR 4% en PBS
Anti D : Mezcla Ig M e Ig G
SAGH
Cel control
SAGH
Muestra
Anti D
Rh positivo
Leer
Agregar ms
Anti D
15 a 37 C
Tcnica Du
SAGH
Rh negativo (-)
Leer
Realizar TAD muestra (+)
Lavar 4
veces
Leer
Lavar 4
veces
(-)
(+)
Rh
positivo
Leer
(+) Rh indeterminado
Nuevo tubo
Anti D
TAD
Conclusin
+++
Rh positivo
0/0
Rh Negativo
0/++
Rh positivo dbil
0/++
++
Rh indeterminado
Estudio incompleto
(no se puede informar Rh)
Controles:
Anti D GR R1/r
GR r/r
Macaco Rhesus