Universidad Autnoma Del Estado De Mexico

Facultad De Qumica
Inmunologa General
Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

Nivel:
Laboratorio clnico

1. Objetivo: Observar y caracterizar las clulas del sistema inmune presentes en la

sangre perifrica a travs de una tincin de Wright, obteniendo la muestra por
puncin venosa.

2. Introduccin

CONTROL DE EQUIPO AL INICIO DEL PROCESO

EQUIPO

CDIGO
UAEM

REALIZ

Microscopio

VERIFIC

FECHA
14/02/15

SURTIDO DE REACTIVOS
INGREDIENTE

REALIZ

VERIFIC

FECHA

Colorante de Wright

14/02/15

Solucin amortiguadora de fosfato pH

7.4

14/02/15

REPORTE DE DESPEJE DE REA/VERIFICACIN DE CONDICIONES DE REA Y

EQUIPO

Universidad Autnoma Del Estado De Mexico

Facultad De Qumica
Inmunologa General
Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

ACTIVIDA
CUMPLE
D
El rea
est libre
de
producto,

materiales
y
documento
s
Los
equipos y

reas
estn
3.
limpios
Los
equipos

estn
ajustados
Etapas del proceso
A. MATERIALES Y REACTIVOS
C. TINCION DE WRIGHT
E. RESULTADOS
G. DESECHO DE RESIDUOS

NO
COMPLE

REALIZ

Judith
Rodrguez

Judith
Rodrguez
Judith
Rodrguez

Nivel:
Laboratorio clnico

VERIFIC

FECHA

Pablo
Ramrez

14/02/15

Pablo
Ramrez

14/02/15

Pablo
Ramrez

14/02/15

B. TOMA DE MUESTRA
D. OBSERVACIONES
F. CONCLUSIONES
H. CUESTIONARIO

A. MATERIALES Y REACTIVOS
Jeringas de plstico estriles de 3 o 5 mL,
Sistema Vacutainer
Torundas embebidas en etanol al 70%
1 caja de portaobjetos por grupo
Gradilla
Aplicadores de madera
Tubos de 13 x 100 con anticoagulante
EDTA
B. TOMA DE MUESTRA
ACTIVIDAD

Ligadura
Microscopio
Colorante de Wright
Solucin amortiguadora de fosfatos pH
7.4
Aceite de inmersin

REALIZ
O

VERIFIC
O

Universidad Autnoma Del Estado De Mexico

Facultad De Qumica
Inmunologa General
Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

Nivel:
Laboratorio clnico

1.-Localizar y palpar la vena en el brazo

Nayeli
Yaes

2.-Verificar que la aguja este atornillada en la jeringa y

que el embolo fluya sin ningn obstculo.

Nayeli
Yaes

3.-Colocar una ligadura (torniquete) aprox. 15 cm por

encima de la vena.

Nayeli
Yaes

4.-Desinfectar el rea donde se localiz la vena con una

torunda impregnada en etanol al 70% y con
movimientos circulares de antro hacia afuera se realiza
la desinfeccin.
5.-Colocar el bisel de la aguja con la perforacin hacia
arriba antes de introducirlo, una vez que se tiene el bisel
dentro de la vena, jalar el embolo lentamente hasta la
cantidad que se va a obtener (3 mL).
6.-Colocar la torunda encima del bisel antes de quitar la
jeringa y al mismo tiempo se quita la ligadura.

Nayeli
Yaes

7.- Vaciar la muestra lentamente por las paredes del

tubo con anticoagulante EDTA y mezclar por inversin 5
a 7 veces
8.-Si se utiliza el sistema vacutainer se debe colocar la
aguja doble en el soporte de plstico y realizar el mismo
procedimiento.

Nayeli
Yaes

C. TINCION DE WRIGHT
ACTIVIDAD
1.- Una vez que tengan su muestra debern colocar una
gota (10 L) en uno de los extremos del portaobjetos.

Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez

Nayeli
Yaes

Judith
Rodrgu
ez

Nayeli
Yaes

Judith
Rodrgu
ez
Judith
Rodrgu
ez

REALIZ
O
Nayeli
Yaes

2.- Inmediatamente con otro portaobjetos colocado a

45 del primero recorrer para hacer un extendido
3.- Secar la laminilla por 5 minutos

Nayeli
Yaes
Nayeli
Yaes

4.- Teir con el reactivo de Wright dejar por 3 min

Judith
Rodrgu

VERIFIC
O
Judith
Rodrgu
ez
Pablo
Ramrez
Judith
Rodrgu
ez
Nayeli
Yaes

Universidad Autnoma Del Estado De Mexico

Facultad De Qumica
Inmunologa General
Practica No. 1:
Toma De Muestra Sangunea Y Observacin De Las Clulas Del Sistema
Inmune
Elabor:
Revis:
Aprob:
Equipo 3

5.-Agregar el amortiguador de Wright dejar por 10 min

6.-Lavar con agua destilada la laminilla
7.- Vaciar la muestra lentamente por las paredes del
tubo con anticoagulante EDTA y mezclar por inversin 5
a 7 veces
8.- Observar al microscopio a un aumento de 100x con
aceite de inmersin.
9.- Comparar los datos obtenidos contra los valores de
referencia y registrarlos para su anlisis.
10.- Identificar las clulas del sistema y llevar a cabo un
conteo de 100.

Nivel:
Laboratorio clnico

ez
Judith
Rodrgu
ez
Nayeli
Yaes
Judith
Rodrgu
ez
Pablo
Ramrez
Pablo
Ramrez
Pablo
Ramrez
Nayeli
Yaes
Judith
Rodrgu
ez

Pablo
Ramrez
Judith
Rodrgu
ez
Nayeli
Yaes
Nayeli
Yaes
Nayeli
Yaes
Pablo
Ramrez
Nayeli
Yaes
Judith
Rodrgu
ez

D. OBSERVACIONES

Se observo y se palpo la vena de la cual se tomo sangre, lo cual facilito mucho la

puncion venosa, obteniendo 10mL.
Se necesita realizar un homogeneizado adecuado de la muestra para que salga
con la carga adecuada de clulas sanguneas.
Para realizar el extendido se necesita una gota de aproximadamente 5L, el
angulo correcto y una extencion continua sin pausas para que quede
correctamente.
Para la tincin de Wright despus de agregado el reactivo se dejo secar por
3min, el portaobjetos se tio de morado.
Despus se agrego el buffer y se dejo secar por 10min. Enseguida se enjuago
con agua destilada y se deco secar.

E. RESULTADOS
F. CONCLUSIONES

G. DISPOSICION DE RESIDUOS
-El contenido de los tubos Vacutainer se debe juntar y depositar en el
recipiente de desechos biolgico-infecciosos para su posterior
tratamiento
-Las muestras de las laminillas de deben inactivar con hipoclorito de
sodio y lavar posteriormente con jabn y agua; se pueden reutilizar.
-Los residuos de la tincin se deben depositar en el frasco de residuos
B
H. CUESTIONARIO
1. Qu es un anticoagulante?
Un anticoagulante es una sustancia de distinta naturaleza qumica que
afecta al proceso de coagulacin o bien de la agregacin de las plaquetas.
Poseen un efecto biolgico, lo cual permite que se puedan dividir en dos
tipos:
1. Anticoagulantes de accin indirecta: Este tipo de anticoagulantes son
aquellos que por medio de su intervencin con otras protenas alteran el
funcionamiento de las cascadas de
coagulacin, esta accin tambin sucede cuando actan en otras vas
metablicas.
Entre los anticoagulantes de accin indirecta se encuentran:

Inhibidores medianos de antitrombina III

Inhibidores de sntesis de factores de coagulacin
Derivados del dicumarol
Heparina no fraccionada
Heparina de bajo peso molecular
Danaparoide sdico

. Anticoagulantes de accin directa: Estos anticoagulantes son aquellos

que son capaces de inhibir la cascada de la coagulacin.
Entre los anticoagulantes de accin directa, se encuentran:

Inhibidores directos de trombina

Hirudina
Argatroban
Cules son las clulas granulocticas?
Leucocitos:
Neutrfilo
Eosinfilos Basfilos

Cules son los valores normales de las clulas sanguneas?

Valores normales

Hombres

Mujeres

Eritrocitos

4,5-5,6 mill./l

4,2-5,4 mill./l

Reticulocitos

3-18/1.000 eritrocitos

3-18/1.000 eritrocitos

Leucocitos

4.000-11.000/l

4.000-11.000/l

Trombocitos

150.000-4000.000/l

150.000-400.000/l

Hemoglobina

14-18g/dl

12-16g/dl

Hematocrito

42-52%

37-47%

1. Qu calores obtuviste en tu muestra?

Eusinofilos: Granulos de color rojo-naranja y unos azules.

Neutrofilo: Granulos azules.
Linfocitos: Presenta un color azul claro(agranulosos)
Basofilo: Granulos color azul oscuras.
Monocitos: Color azul con una forma caractersticas
HISTRICO DE CAMBIOS EN EL PRECEDIMIENTO DE OPERACIN
Revisin

Fecha

00A

14 Febrero 2015

Descripcin del
cambio
Primera versin