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PRACTICA 6
EL MICROSCOPIO ELECTRONICO
Con el M.E. se consigue un considerable aumento del poder de resolucin
al emplear en lugar de luz visible electrones acelerados cuya longitud de onda es
unas 100.000 veces menor. Al ser de pequea longitud de onda pueden
contornear muy bien los objetos, lo que proporciona un gran poder de resolucin.
Su masa es muy pequea por lo que pueden ser desviados con mucha facilidad.
El aire los desva y por ello se trabaja en tubos huecos con un alto vaco,
equivalente a 10-5 Torr (Torricelli o mm de mercurio). Para desviar los electrones
de

un

modo

controlado

se

utilizan

lentes

que

no

son

pticas

sino

electromagnticas.

Imagen fotogrfica de un Microscopio Electrnico

En resumen el funcionamiento es como sigue:
-

Un FILAMENTO de tungsteno (ctodo) en un tubo a alto vaco se calienta

emitiendo electrones que tienden a seguir una trayectoria rectilnea.
Los electrones liberados por este filamento son sometidos a una
diferencia de voltaje de 60-120 kV entre el ctodo y el nodo (un disco
metlico con un orificio en su centro). De esta manera los electrones son
atrados por el nodo y acelerados hasta que alcanzan altas velocidades.
Tras atravesar el orificio del nodo forman un haz de electrones que
recorren que recorre la columna del microscopio. En el interior de la
columna el haz pasa por el interior de bobinas elctricas y se desva de

manera anloga a lo que ocurre con un haz de luz que atraviesa una lente
de cristal, dado que los electrones desvan su trayecto cuando se
someten a campos magnticos. Por esta razn las bobinas del ME se
denominan lentes electromagnticas.
-

La primera lente es una lente electromagntica CONDESADORA que

focaliza los electrones sobre la muestra. Algunos electrones interaccionan
con los tomos del corte histolgico al atravesarlo y continuar su trayecto
hacia otras lentes, mientras que otros atraviesan la muestra sin
interaccionar con sta.
-

La
mayora
de
los
electrones alcanzan una
segunda
lente
Electromagntica que funciona
como OBJETIVO dando una
imagen ampliada del objeto
que
posteriormente
es
proyec-tada
en
otras
lentes.

Una tercera lente PROYECTORA acta de ocular,

volvien-do a ampliar la
imagen y pro-yectndola
sobre
una
pantalla
fluorescente
y/o
sobre
placas fotogrficas.

Entre ambas lentes hay una

lente
INTERMEDIA,
tambin electromagntica,
que amplia s una vez mas

la imagen.

ESQUEMA DEL ME CON SUS COMPONENTES

La imagen resultante siempre es en blanco y negro. Las reas oscuras de

una electromicrografa se denominan electrodensas, mientras que las
reas claras se denominan electrolcidas o electrotransparentes.

PREPARACION DEL MATERIAL

-

La fijacin se realiza en glutaraldehido, que preserva menor loa tejidos

que el formol, seguida de postfijacion con osmio que impregna muchas
estructuras proporcionando contraste al chocar los electrones con la
muestra.
La inclusin se realiza en resinas plsticas de epoxido o metacrilatos que
proporcionan una mayor dureza.

Los cortes han de ser extremadamente finos (entre 20 y 80 nm) lo que se

consigue con un ultramicrotomo.
Para contrastar el material no se usan colorantes, sino tomos de metales
pesados como el plomo y el uranilo, que acentan el contraste
proporcionado por el osmio.

FIGURA 1
Electronografa de un tumor endocrino constituido por
clulas que sintetizan serotonina.
Cuestiones:
1) La imagen comprende partes de varias clulas. Cul es la
razn de la diferente densidad entre la clula central (clara) y
las vecinas (oscuras)?.
2) Diferencias de la cromatina de los dos ncleos presentes.
3) Clasificar los orgnulos citoplasmticos segn densidades.

FIGURA 2
CORTE DE CELULA EPITELIAL
1. Describa la disposicin del RER
2. Qu imagen puede dar el RER as dispuesto en un corte
convencional al microscopio ptico
3. A que se debe la estrecha relacin entre el RER y las
mitocondrias
4. Describa la estructura A
5. Describa la disposicin de la cromatina.

FIGURA 3
CELULA PLASMATICA
1) Describa los componentes mas importantes de esta clula.
2) Debido a los orgnulos que posee Cul es la funcin de esta
clula?

FIGURA 4
PANORAMICA DE UN ACINO PANCREATICO
A) Que son los espacios blancos que aparecen en el centro de
la imagen?
B) Describa los orgnulos celulares. Estn dispuestos de algn
modo especial? Guardan alguna relacin con los procesos de
la secrecin proteica?
C) Hay alguna estructura de unin entre las clulas?

FIGURA 5
A) Cules son los componentes mas abundantes en el
citoplasma?
B) Qu puede ser el rea sealada por la flecha?
C) Cul es la actividad nuclear de la clula?