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Construo de curva de calibrao por padro externo para determinao de teor de

cobre em gua potvel da cidade Brejo do Cruz Paraba por Espectrofotometria de


Absoro Molecular
Construction of calibration curve by external standard for determination of copper in
drinking water of the city of Brejo do Cruz - Paraiba by Molecular Absorption
Spectrometry
Construccin de la curva de calibracin estndar externo para la determinacin de cobre
en el agua potable de la ciudad de Brejo do Cruz - Paraiba mediante espectrometra de
absorcin molecular
Franklin Kaic Dutra PEREIRA1, Milena Tarciana FACCIO1, Jonh Anderson Macdo SANTOS1, Cludia Las Arajo
ALMEIDA1, Maria Lidiane Macdo de ARAJO1, Cosme Silva SANTO1 Rayane de Oliveira SILVA1 Francisca Tase da Siva
ARAJO1
1

Curso de Licenciatura em Qumica, Universidade Federal de Campina Grande, CES, Cuit-PB. E-mail: franklin_kaic@hotmail.com.

RESUMO
Espectrofotmetros so instrumentos capazes de registrar dados de absorbncia ou transmitncia em funo do comprimento de onda. Este
registro chamado de espectro de absoro ou de espectro de transmisso, segundo o dado registrado for de absorbncia ou transmitncia,
respectivamente. O espectro de absoro caracterstico para cada espcie qumica, sendo possvel a identificao de uma espcie qumica por
seu espectro de absoro. A caracterstica mais importante dos espectrofotmetros a seleo de radiaes monocromticas, o que
possibilita inmeras determinaes quantitativas. O presente trabalho teve como objetivo preparar uma curva de calibrao por padro externo
e determinar a concentrao de cobre de uma amostra de gua potvel duma cidade do interior Paraibano, Brejo do Cruz.

PALAVRAS CHAVES: Anlise Espectrofotomtrica, Absorbncia e Transmitncia, Anlise Quantitativa da [Cu +2] em gua de
Brejo do Cruz.

ABSTRACT
Spectrophotometers are instruments capable of recording data in absorbance or transmittance as a function of wavelength. This record is called
an absorption spectrum or the transmission spectrum, the second data is recorded in absorbance or transmittance, respectively. The absorption
spectrum is characteristic for each chemical species, making it possible to identify a chemical species by their "absorption spectrum". The most
important feature of spectrophotometers is the selection of monochromatic radiation, which allows numerous quantitative determinations
governed by Beer's Law. This study aimed to prepare a calibration curve by external standard to determine the concentration of copper in a
sample of drinking water from a city in the interior of Paraba, of Cross Heath, and ascertain whether it is within the standards of potability in
accordance with Ordinance
PEREIRA, F. K. P.; FACCIO, M. T.; SANTO, J. A. M; ALMEIDA, C. L. A.; ARAJO, M. L. M; SILVA, R. O; ARAUJO, F. T. S. Construo de curva de
calibrao por padro externo para determinao de teor de cobre em gua potvel da cidade Brejo do Cruz Paraba por Espectrofotometria de Absoro
Molecular. In: 5 Congresso Norte-Nordeste de Qumica. Natal RN UFRN.

KEYWORDS: Spectrophotometric Analysis, absorbance and transmittance, Quantitative Analysis of [Cu +2] in water of Brejo do Cruz.
Todas as substncias podem absorver energia radiante,

1 INTRODUO

mesmo o vidro que parece completamente transparente absorve

Anlises qumicas so realizadas cotidianamente para


determinao de uma grande variedade de substncias. Anlises
clnicas, nutricionais e controle de qualidade so apenas algumas
das aplicaes da qumica analtica no nosso dia-a-dia. Em
algumas situaes, como por exemplo, nas anlises preliminares
de doping realizadas em atletas, o analista deseja apenas detectar a
presena de uma determinada substncia. Nesses casos, a
determinao denominada qualitativa. Por outro lado, quando
necessrio estabelecer a quantidade exata da substncia a ser
analisada executa-se uma anlise quantitativa.
Alguns dos experimentos comumente propostos
baseiam-se na capacidade que algumas substncias apresentam

comprimentos

de

ondas que

pertencem

ao espectro visvel.

A gua absorve fortemente na regio do infravermelho. A


absoro das radiaes ultravioleta, visveis e infravermelhas
dependem das estruturas das molculas, e caracterstica para
cada substncia qumica. Quando a luz atravessa uma substncia,
parte da energia absorvida (absorbncia): a energia radiante no
pode produzir nenhum efeito sem ser absorvida. A cor das
substncias se deve a absoro (transmitncia) de certos
comprimentos de ondas da luz branca que incide sobre elas,
deixando

transmitir

aos

nossos

olhos

apenas

aqueles

comprimentos de ondas no absorvidos (Harris, 2005).

2.1 Energia radiante

para formar compostos coloridos. Segundo VOGEL (1981), o

As formas de energia radiante a que estamos

cido ascrbico (vitamina C), reage com hexacianoferrato de

habituados a luz visvel, produzida pelo sol, ou pelo

potssio (K3[Fe(CN)6]) na presena de Fe(III) para formar um

aquecimento do filamento de tungstnio de uma lmpada

composto colorido, denominado azul da Prssia. A intensidade da

incandescente comum. Ela designada luz visvel, porque

colorao azul da soluo depende da concentrao de cido

impressiona a retina do olho humano. Sabe-se, contudo, que

ascrbico presente na amostra. Dessa forma, a medida da

outros animais como as abelhas, por exemplo, percebem outras

intensidade da colorao possibilita a anlise quantitativa desse

radiaes alm daquela. Outras modalidades de energia radiante,

composto em uma determinada amostra. Esse procedimento foi

contudo, fazem parte do nosso cotidiano: os raios X empregados

adaptado por Nbrega e Lopes em um sistema de injeo em uxo

na medicina, as microondas dos fornos domsticos, as ondas de

com deteco espectrofotomtrica (KAMOGAWA, 2008).

rdio, os raios infravermelhos, radiaes eletromagnticas, entre


outros (Friori, 2013).

2 FUNDAMENTAO TERICA

Na Tabela 1 so apresentados os intervalos de


comprimento de onda que caracterizam os diferentes tipos de

A espectrofotometria o mtodo de anlises ptico mais

radiaes eletromagnticas. Observa-se ainda que, mesmo o que

se denomina luz visvel, pode ser decomposta em uma srie de

espectrofotmetro um instrumento que permite comparar a

radiaes, correspondentes a intervalos de comprimento de onda,

radiao absorvida ou transmitida por uma soluo que contm

diferenciadas pela colorao que exibem. Essas cores podem ser

uma quantidade desconhecida de soluto, e uma quantidade

percebidas ao se decompor a luz solar por meio de um prisma.

usado

nas investigaes biolgicas e

fisico-qumicas.

conhecida da mesma substncia.


Tabela 1 - Intervalo de comprimento de onda correspondente s vrias radiaes
Radiao

Luz

Raios X

Intervalo de comprimento de
onda
10-3 - 10 nm

Transies atmicas ou
moleculares envolvidas
Eltrons das camadas K e L

Ultravioleta

10-400 nm

Eltrons de camadas
intermedirias e de valncia

violeta
azul
verde

400-465 nm
465-493 nm
493-559 nm

Eltrons de

PEREIRA, F. K. P.; FACCIO, M. T.; SANTO, J. A. M; ALMEIDA, C. L. A.; ARAJO, M. L. M; SILVA, R. O; ARAUJO, F. T. S. Construo de curva de
calibrao por padro externo para determinao de teor de cobre em gua potvel da cidade Brejo do Cruz Paraba por Espectrofotometria de Absoro
Molecular. In: 5 Congresso Norte-Nordeste de Qumica. Natal RN UFRN.

559-580 nm
amarelo
580-617 nm
laranja
617-750 nm
vermelho
750 nm-1mm
Infravermelho
1 mm - 1 m
Microondas
1m-1000 m
Ondas de rdio
FONTE: HARRIS, 2005.

Valncia

Visvel

vibraes moleculares
rotaes moleculares
---------

no apresentam nveis de energia rotacional ou vibracional e s


A

interao

da

matria

com

radiaes

de

comprimento de onda entre 450 e 750 nm, denominada luz

podem absorver energia para alterar seu nvel de energia


eletrnica (HANKEN, 1995).

visvel, se manifesta atravs das cores das substncias (Harris,

0.70

2005). Por que motivo ento, uma soluo de sulfato de cobre

0.60

tem cor azul esverdeada, enquanto que uma soluo de


0.50

Quando a luz solar, ou a de uma lmpada, incide


sobre a soluo de sulfato de cobre, radiaes de todas as cores
penetram no seu interior, mas, praticamente, apenas as radiaes
de comprimento de onda acima de 600 nm so absorvidas

Absorbncia

permanganato de potssio vermelho prpura?

0.40

0.30

0.20

0.10

(Siebald, 2005). As radiaes que no so absorvidas,


correspondentes basicamente s cores: violeta, azul, verde e

0.00
400

450

500

soluo que percebida pelos nossos olhos. A cor que uma


substncia exibe corresponde, portanto, frao da luz visvel
que ela no absorve. A absoro

de radiaes ultravioletas

550

600

650

700

750

Figura 1 - Espectros de absoro de solues cuja


cor das mesmas corresponde a cor da linha
FONTE: OLIVEIRA, 2001.

abaixo de 400 nm no detectada pelo olho humano, e

2.3.1 Uso analtico da absoro ou emisso de

percebemos as radiaes infravermelhas como calor (Vogel,

energia radiante

1981).

800

Comprimento de onda (nm)

amarelo, constitui somada, a colorao azul esverdeada da

Os itens discutidos anteriormente servem de base


para compreender os fundamentos de mtodos analticos muito

2.3 Espectros

importantes: a espectrofotometria, fotometria de chama de

Submetendo uma molcula, ou tomo, a radiaes


eletromagnticas,

cujos

comprimentos

de

onda

variam

continuamente, e registrando a frao de energia absorvida,

emisso e espectrometria de absoro atmica. Para isso, temos


que relacionar a absoro de energia radiante com concentrao
da espcie responsvel por esse processo.

obtm-se um espectro de absoro. Podem ser obtidos tambm


espectros de emisso, quando se registra a emisso de energia
radiante em funo do comprimento de onda (Haken, 1995). Na
Figura 6, so mostrados dois espectros de absoro na regio
visvel; um para uma soluo azul de sulfato de cobre e outro
para a soluo vermelha do indicador vermelho de metila.
Pode-se observar que a soluo azul absorve
comprimentos de onda correspondentes cor vermelha, de modo
que as cores no absorvidas combinadas, azul, violeta, verde,
amarelo e alaranjado resultam na cor azul da soluo.
Os espectros moleculares se apresentam tipicamente
como os exibidos na Figura 1, ou seja, como bandas contnuas.
Espectros atmicos so muito mais simples que espectros

2.4 Espectrofotometria na regio do visvel


Voltando ao nosso exemplo da soluo de sulfato de
cobre, intuitivo que, quanto mais azul ela for, maior ser sua
concentrao nesse sal. Imagine-se agora, que uma espcie
qumica cuja concentrao queremos determinar colorida, ou
pode produzir um composto colorido por uma reao qumica. Se
tivermos um meio de expressar numericamente a intensidade da
colorao, estamos a um passo de determinar sua concentrao.
Isso poder ser obtido medindo-se a absoro de energia por essa
espcie, pois j sabemos que se ela colorida ela est absorvendo
alguma frao da luz visvel.

moleculares, exibindo em geral algumas linhas, pois os tomos


PEREIRA, F. K. P.; FACCIO, M. T.; SANTO, J. A. M; ALMEIDA, C. L. A.; ARAJO, M. L. M; SILVA, R. O; ARAUJO, F. T. S. Construo
de curva de calibrao por padro externo para determinao de teor de cobre em gua potvel da cidade Brejo do Cruz Paraba por
Espectrofotometria de Absoro Molecular. In: 5 Congresso Norte-Nordeste de Qumica. Natal RN UFRN.

2.4.1 Medida da absoro de energia

3. METODOLOGIA

Se quisermos quantificar a absoro de energia

Para a elaborao da curva de calibrao, foi-se

radiante, temos primeiramente que dispor de uma fonte de

utilizado uma soluo padro de Sulfato de Cobre a 0,1 mol.L-1

radiao (A). Trabalhando na regio visvel do espectro, com

para calibrar o equipamento. O padro (CuSO4) foi preparado em

espcies que produzem solues coloridas, uma lmpada

balo volumtrico de 100,0 mL. Inicialmente, as amostras foram

incandescente de filamento de tungstnio serve perfeitamente aos

diludas para que as concentraes dos analitos de interesse

nossos propsitos, pois emite radiaes de comprimento de onda

estivessem dentro da faixa de linearidade da curva de calibrao

entre 400 e 750 nm. De todas essas radiaes (comprimentos de

como mostra a Tabela 2.

onda)

temos

de

selecionar

aquele

que

absorvido

preferencialmente pela espcie qumica de interesse, o que se

Tabela 2 - Valor das concentraes de CuSO4 aps diluio


da soluo 0,1M

consegue por meio de um sistema monocromador (B).

Soluo

[CuSO4]diludo

Direcionado, por exemplo, um feixe luminoso sobre a face de um

0,2 mol.L-1

prisma, promovendo a decomposio da luz, podemos coletar

0,4 mol.L-1

radiaes de comprimento de onda definidas, atravs de

0,6 mol.L-1

mecanismos de lentes e espelhos. Essa seleo de comprimento

0,8 mol.L-1

de onda pode ser feita com redes de difrao ou com um filtro


que nada mais do que um pedao de vidro colorido. claro que

Fonte: Prpria da Pesquisa, 2013


Para

esta

anlise

instrumental

empregaram-se

os filtros so sistemas selecionadores de comprimento de onda

Espectrofotmetro SP-220 (Biospectro), cubeta de quartzo de 10

bem menos eficiente que grades de difrao, pois ser

mm de caminho ptico (Equilab), para validar o mtodo

selecionado um intervalo relativamente largo de comprimentos

proposto. Em todos os parmetros foram utilizadas balanas e

de onda. A radiao selecionada ento direcionada de modo a

vidrarias analticas.

atravessar a soluo contida em um tubo de vidro transparente, a

Realizado as diluies e calibrao do equipamento

cubeta (C). A potncia do feixe de radiao incidente diminuda

descrito metodologia acima, foram realizadas as leituras em

ao atravessar a soluo contida na cubeta, devido ao processo de

espectrofotmetro a 420 nm, utilizando-se todos os reagentes

absoro. Um sistema detector (D), como uma vlvula

anteriores (padro) como soluo-branco para zerar o aparelho.

fotomultiplicadora, capaz de medir a potncia da radiao,

Todos os solventes e reagentes utilizados so de grau analtico ou

indicando o resultado atravs de um sistema de leitura (E). Esses

adequados

so essencialmente os componentes de um espectrofotmetro

disponveis

empregado para medidas de absoro na regio visvel do

utilizadas neste estudo foram preparadas com gua deionizada.

aos

mtodos

espectrofotomtricos,

comercialmente.

Todas

as

desde

solues

que

aquosas

espectro, esquematizado na Figura 2. Costuma-se designar como

Na metodologia utilizada para elaborao da curva de

colormetros os equipamentos onde a seleo de comprimento de

calibrao e anlise das amostras empregou-se uma razo molar

onda feita por meio de filtros (Kamogawa, 2008).

de 0,1 mol.L-1 de CuSO4. A identificao e quantificao


desconhecida da concentrao do metal da alquota da gua foi
realizado por comparao entre absorbncia e concentrao
obtidos com padres previamente injetados.

4. RESULTADOS E DISCUSSES
Ao utilizar a tcnica analtica instrumental, pde-se
obter alguns resultados, principalmente o que estava a procura.
Tem-se ento uma forma de expressar numericamente a relao
da concentrao de uma espcie colorida e absoro de luz. Na
Tabela 2 so mostrados os valores de absorbncia e de %

Figura 2 - Esquema simplificado de um sistema medidor de


absoro de energia radiante por uma soluo (para identificao
das partes ver texto)
FONTE: Prpria, 2013.

transmitncia para diferentes concentraes de cobre. As medidas


foram efetuadas no comprimento de onda de 750 nm, pois nessa

PEREIRA, F. K. P.; FACCIO, M. T.; SANTO, J. A. M; ALMEIDA, C. L. A.; ARAJO, M. L. M; SILVA, R. O; ARAUJO, F. T. S. Construo de curva de
calibrao por padro externo para determinao de teor de cobre em gua potvel da cidade Brejo do Cruz Paraba por Espectrofotometria de
Absoro Molecular. In: 5 Congresso Norte-Nordeste de Qumica. Natal RN UFRN.

regio que ocorre a mxima absoro de radiao pela soluo


considerada.
Tabela 3. Valores de Transmitncia (%T) e da Absorbncia de soluo de cobre de diferentes concentraes, exceto da amostra de
concentrao desconhecida
Soluo

Concentrao molar de Cu

2+

% Transmitncia

Absorbncia

0,000

--

0,000

0,200

93,7

0,214

0,400

90,7

0,319

0,600

89,0

0,430

0,800

86,4

0,266

FONTE: Prpria da Pesquisa, 2013.


Analisando num espectrofotmetro a amostra de concentrao desconhecida, encontra-se um valor quantitativo para a
absorbncia e a % Transmitncia, no qual est representado na Tabela 3, a concentrao, a qual se busca nesta trabalho, ser encontrada de
acordo com uma Regresso Linear.
Tabela 4. Valores de Transmitncia (%T) e da Absorbncia de soluo de cobre de diferentes concentraes.
Soluo

Concentrao molar de Cu2+

% Transmitncia

Absorbncia

0,000

--

0,000

0,200

93,7

0,214

0,400

90,7

0,319

0,600

89,0

0,430

0,800

86,4

0,566

79,7

0,640

FONTE: Prpria da Pesquisa, 2013.


Qual seria o valor da concentrao da soluo 6?
Examinando-se os valores de absorbncia, fcil perceber que
2+,

deve estar entre 0,400 0,300 M Cu , mas qual o valor exato?


Atravs

interpolao

matemtica,

usando

os

dados

de

absorbncia, pode-se deduzir que 0,223 M. Desse exemplo


pode-se inferir que, disps-se de alguns dados que relacionem
concentraes conhecidas e suas respectivas medies de
absoro

de

luz,

pode-se

determinar

permite calcular concentraes graficamente, conforme indicado


na Figura 3 (Alcantara, 2012).
Com os valores encontrados da absorbncia e da %
transmitncia, descritos na Tabela 3, pode-se calcular a Mdia, e
o Desvio-padro das solues conhecidas e da soluo
desconhecida, que consta na tabela 4, para ajudar a encontrar a
concentrao do Cu+2 da alquota.

concentraes

desconhecidas, se medirmos a absoro de luz dessa soluo


problema. Em segundo lugar, a absorbncia o parmetro mais
indicado para essa finalidade, porque apresenta uma relao
linear com a concentrao, e no logartmica como ocorre com a
transmitncia. O conjunto de solues de nmeros 1 a 6 constitui
o que se denomina curva de calibrao ou curva padro, e o
nosso referencial indispensvel para determinar a concentrao
de qualquer soluo, desde que se conhea sua absorbncia. Ela
pode ser representada em um grfico de coordenadas cartesianas

Tabela 5. Valores de Transmitncia (%T) e da Absorbncia de


soluo de cobre de diferentes concentraes.
Soluo
% Transmitncia
Absorbncia
-0,000
1
93,7
0,214
2
90,7
0,319
3
89,0
0,430
4
86,4
0,566
5
79,7
0,640
6
73,25
0,3655
Mdia
5,2957
0,2359
Desvio-Padro
FONTE: Prpria da Pesquisa, 2013.

como uma reta, o que j era indicado pela Lei de Beer, que

PEREIRA, F. K. P.; FACCIO, M. T.; SANTO, J. A. M; ALMEIDA, C. L. A.; ARAJO, M. L. M; SILVA, R. O; ARAUJO, F. T. S. Construo de curva de
calibrao por padro externo para determinao de teor de cobre em gua potvel da cidade Brejo do Cruz Paraba por Espectrofotometria de
Absoro Molecular. In: 5 Congresso Norte-Nordeste de Qumica. Natal RN UFRN.

Para calcular a concentrao da alquota desconhecida,


utiliza-se de um clculo, que vai de acordo com a Lei de Beer.

a equao e o valor da absorbncia descoberta na anlise no


espectrofotmetro:

Neste clculo, usa-se uma propriedade estatstica que chama-se

y = 0,575x + 0,175

regresso linear, que segundo Regazzi (2003), um mtodo para

x= 0,331 mol. L-1

se estimar a condicional (valor esperado) de uma varivel y,

Por fim, aps fazer todos os passos, encontrou-se o

dados os valores de algumas outras variveis x. A regresso, em

valor quantitativo ao qual buscava-se, um valor exato, no qual

geral, trata da questo de se estimar um valor condicional

esperava-se, que igual a 0,48 mol.L-1, j que a concentrao

esperado.

dada pela quantidade da matria dividida pelo volume.


Para o clculo da concentrao de Cu da amostra

desconhecida, plotou-se um grfico linear, como mostra a Figura

5 CONCLUSO

3 abaixo, pode-se observar que o prepara da diluio das solues

Com base nos resultados obtidos, pde-se concluir que

com concentraes conhecidas, estavam de acordo com os

a curva de calibrao est de forma linear com os pontos obtidos

clculos, concluindo que houve exatido no procedimento, j que

das concentraes das solues analisadas, e que a margem de

o desvio-padro resultou em nmeros esperados. O mais

erro foi pequena considerando as concentraes, e o desvio-

importante deste grfico, a equao, que ele nos fornece, pois

padro,

a partir desta equao de 2 grau que podemos calcular a

apresentou-se num valor muito prximo de 1, aproximadamente

concentrao. O grfico disponibiliza tambm o valor de R que

0,999. Contudo, imprescindvel ressaltar que para se obter uma

o valor do coeficiente angular.

curva de calibrao perfeita, com menor margem de erro

considerando

tambm,

que o

coeficiente linear

possvel, deve-se estar atento a todos os procedimentos


experimentas, tais como, a diluio das solues, no qual
acredita-se que se apresentar pontos desprezados, que estejam
muito fora da reta, ocorre-se devido ao acrscimo, ou recuo de
gua destilada.
Esse experimento pode ser adotado em cursos de
anlise instrumental e possibilita uma discusso mais ampla sobre
espectrofotometria de absoro molecular, considerando-se a
fonte de radiao e o tratamento de dados.

5 REFERNCIAS

Grfico 1 - Curva de calibrao por padro externo dos valores


de absorbncia versus concentrao de Cu+2 das substncias
conhecidas
FONTE: Prpria da Pesquisa, 2013
Assim, com construo do grfico, chegou a seguinte
equao 2 e ao coeficiente angular (), respectivamente:
y = 0,575x + 0,175 (eq. 2), e

R = 0,9886

sendo y a absorbncia e x a concentrao, e o coeficiente


angular, que quanto mais prximo a 1, as solues estavam bem
preparadas, assim para calcular a concentrao da amostra usa-se

[1] ALCANTARA, Petrus Jr. Espectroscopia Molecular.


Disponvel
em
www.universidadefederaldopara.com.br . Acesso em
29/10/2012.
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