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FAVET-UFRGS
Prof. Marcos JP Gomes
2013
ATUALIDADE
Atualmente (2013), na List of Prokaryotic names with Standing in Nomenclature
do pesquisador J.P. Euzby h citao de 156 espcies e 13 subespcies no gnero
Clostridium spp, conforme o site www.bacterio.cict.fr/c/clostridium.html
INTRODUO
As
micobactrias
pertencem
ordem
Actinomycetales,
famlia
HISTRICO
humano realizado, em 1890, por Rivolta e Maffucci; descrio dos postulados de Koch;
preparao da tuberculina, em 1891 e a descrio do bacilo da tuberculose bovina por
Theobald Smith, em 1902.
A mortalidade de tuberculose diminuiu dramaticamente para 200/100.000 devido a
melhoria das condies sanitrias e sociais, melhoria da alimentao e nutrio e o uso de
sanatrios espalhados na Europa e Estados Unidos alem de terapia ativa baseada em
mtodos cirrgicos. A descoberta dos raios X tornou possvel o acompanhamento da
progresso da doena pela primeira vez.
Entre 1908 e 1920, Calmette e Gurin do Instituto Pasteur, na Frana, utilizaram um
meio de cultivo para atenuar a virulncia do M. bovis. Este trabalho proporcionou a base
para o desenvolvimento do bacilo da vacina de Calmette e Gurin ou BCG utilizada pela
primeira vez, em 1821 e ainda hoje utilizada. Outro marco importante foi a descoberta de
Waksman que em 1944 descobriu a estreptomicina um antimicrobiano que ainda utilizado
na quimioterapia da tuberculose. A subseqente descoberta de outras drogas
antimicobacterianas tais como o cido para aminosaliclicoem 1949 a isoniazida em 1952 e
a rifampicina em 1967 forneceram a base da quimioterapia contra a tuberculose em que 3 a
4 drogas so administradas por um perodo de 6 a 9 meses.
CARACTERSTICAS GERAIS
Bastonetes retos ou levemente curvos com 0,2 - 0,7m de dimetro e 1,0 - 10 m de
comprimento; podem possuir ramificaes; crescimento filamentoso ou miceliar que se
fragmenta em bastonetes ou cocos AAR em algum estgio do crescimento; Gram positivo
fraco; imvel; no esporulados; sem cpsulas; aerbios e quimiorganotrficos. Crescimento
lento ou muito lento; colnias visveis aps 2 - 20 dias em temperatura tima; colnias
geralmente rseas, laranjas ou amarelas, especialmente quando expostas luz; pigmento
no difuso; superfcie grosseira e rugosa; algumas espcies de difcil crescimento,
necessitando de meios especiais; outras no so cultivveis (M. leprae); catalase positivos;
Gnero Mycobacterium spp
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tarefa geralmente realizada por especialista. As espcies de crescimento rpido podem ser
identificadas com mais facilidade, enquanto que as de crescimento lento so mais difceis.
A distino entre as espcies com crescimento lento e rpido determinada pelos
seguintes critrios:
a) As espcies com crescimento lento requerem mais de sete dias em meios ricos
para produzir colnias, facilmente visveis de inculos diludos.
b) A espcie dita rpida evidencia crescimento em menos de sete dias. Certas
espcies so intermedirias quanto velocidade de crescimento.
Micobactrias devem ser manipuladas em cabinas de segurana para prevenir a
disseminao de patgenos ao homem. O material deve ser desinfetado pelo calor, pois as
micobactrias so resistentes aos desinfetantes qumicos.
As espcies saprfitas podem causar doena, em determinadas condies sendo
consideradas oportunistas. Outras podem causar infeco quando introduzidas em
ferimentos ou em animais tratados com imunossupressivos.
Relao Agente-Hospedeiro
a) Parasita intracelular obrigatrio (M. leprae e M. lepraemurium).
b) Parasita intracelular facultativo; Maioria das micobactrias patognicas est nesse
grupo; Principal clula que serve de hospedeiro para essas micobactrias so os
macrfagos; So parasitas do sistema fagoctico mononuclear (M. avium, M. bovis, M.
tuberculosis, M. fortuitum, M. marinum, M. ulcerans, M. kansasii, M. intracellulare, M.
scrofulaceum e M. fortuitum) na grande maioria das infeces iniciais.
c) Parasita saproftico (a maioria das espcies M. phlei, M. smegmatis, M.
butyricum, M. gordonae).
Tabela 1. Classificao clnica das micobactrias.
______________________________________________________________________________
Grupos
Exemplos
_______________________________________________________________________________
1. Patgeno Obrigatrio
2. Patgeno cutneo
M. marinum, M. ulcerans.
3. Patgeno oportunista
4. No ou raramente patgeno
M. gordonae, M. smegmatis.
5. Patgeno Animal
podem ulcerar ou formar abscessos com difuso linftica local. O M. marinum causa
tuberculose em peixes e anfbios e leso cutnea granulomatosa no homem, doena
conhecida como granuloma de piscina.
Outras espcies de micobacterias tm sido isoladas de vrios animais. O M.
fortuitum, uma micobacteria no cromognica e de crescimento rpido tem sido isolada de
ces e do homem com leses pulmonares; de mastite bovina e de linfonodos de bovinos e
sunos, no matadouro. O M. chelonae, uma micobacteria de crescimento rpido foi isolada
de suinos e do homem.
O M. kansasii, uma micobactria fotocromognica e de crescimento lento, tem sido
isoladas de leses granulomatosas em sunos e bovinos, as quais se assemelham s leses
causadas pelo M. bovis. A infeco pulmonar com o M. kansasii tem incio em pacientes
com doena pulmonar previa ou doena pulmonar crnica. Produz uma doena que
semelhante tuberculose pulmonar, mas um pouco mais lenta. O organismo pode ser
isolado em suprimentos dgua.
FATORES DE VIRULENCIA
Antigamente, na maioria dos livros didticos sobre o assunto, se dizia no haver
fator de virulncia produzido por micobactrias patognicas. No havia endotoxinas,
exotoxinas, enzimas extracelulares, hemolisinas, leucocidinas mesmo quando o fator corda
estivesse associado ao crescimento de bactrias virulentas.
Recentemente, muito progresso foi obtido na compreenso da patogenia e dos
fatores de virulncia associados s infeces causadas por micobactrias, especialmente na
aplicao de ferramentas moleculares, tais como o sequenciamento completo do genoma e
sua anlise comparativa. A cincia genmica tornou possvel elucidar o mapa gentico de
vrias micobactrias importantes (animais homem e ambiente). Sequncias genmicas
completas esto disponveis para o M. abscessus, M. avium subsp hominissuis, M. avium
subsp paratuberculosis, M. bovis, M. bovis BCG, M. gilvum, M. leprae, M. marinum, M.
Gnero Mycobacterium spp
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M. tuberculosis
(homens)
(homens)
M. africanum
(homens)
-------------------------------------------------------------------M. microti
M. bovis
M. pinnipedi M. caprae
(roedores)
(rumin homens)
(penpedes) (caprinos)
_________________________________________________________________________
Complexo M. avium
---------------------------------------------------------------------------------Ma hominissuis
M.a. avium
(aves)
M. intracellulare
Linhagens Bovinas
Ovinas
(aves; homens)
RESISTNCIA
No Brasil, o Ministrio da Sade, em seu manual sobre tuberculose (1994) instituiu
um protocolo padro de procedimentos para o diagnstico da tuberculose, ressaltando que a
resistncia s drogas antituberculosas tm oscilado entre 10 - 15% das amostras testadas. O
trabalho conjunto das diversas instituies envolvidas com epidemiologia da tuberculose no
Brasil resultou em pesquisa do gene de expresso da catalase (KatG) em cepas de M.
tuberculosis-MRD (resistentes a mltiplas drogas); resistncia estreptomicina (genes rpsL
e rrs), rifampicina (gene rpoB) e isoniazida (gene KatG e inhA). A resistncia a
pirazinamida caracterstica do M. bovis por mutaes do gene pncA e OxiR, enquanto a
resistncia estreptomicina, geralmente est associada reduo da associao do rRNA
16S e a protena S12 ribossomal.
M. africanum
M. bovis*
M. caprae
M. microti
M. pinnipedii
M. tuberculosis
Presena sequncia
gentica mtp40
Cdon 57 do gene
pncA (amino cido)
CAC
(histidina)
GAC
(cido
asprtico)
CAC
(histidina)
CAC
(histidina)
CAC
(histidina)
CAC
(histidina)
CTG
(leucina)
CTG
(leucina)
CTG
(leucina)
CTG
(leucina)
CTG
(leucina)
CGG ou CTG
(arginina ou
leucina)
Cdon 95 do gene
gyrA (amino cido)
ACC
(treonina)
ACC
(treonina)
ACC
(treonina)
ACC
(treonina)
ACC
(treonina)
AGC ou ACC
(serina ou treonina)
Base em posio
285 do gene oxyR
Caract diferenciais
M. africanum
M. bovis*
M. caprae
Caract. dos
spoligotipos
Presena de ao
menos um
desses
espaadores
39-43
Ausncia de
espaadores
3, 9, 16 e 3943
Ausncia de
espaadores
1, 3-16, 3033 e 39-43
Disgnica
Disgnica
Excreo do
antgeno MPB70**
Aspecto das
colnias
Tipo respiratrio
Microaerfilo
M. microti
M. pinnipedii
Biovar
Ausncia dos
ratazanas:
espaadores
39-43.
presena
somente
espaadores Existncia de
4 spoligotipos
37 e 38
diferentes.
Biovar
Lhama
presena dos
espaadores
37, 38, 26,
24, 23 e
07/05.
-
Disgnica
M. tuberculosis
Presena de ao
menos um desses
espaadores 39-43
Disgnica
Eugnica
Microaerfilo Microaerfilo
Aerbio
Niacina
Geral -
Reduo de nitratos
Fosfatase cida
Hidrlise do Tween
80
+ (fraco)
Caract diferenciais
M. africanum
M. bovis*
M. caprae
M. microti
M. pinnipedii
M. tuberculosis
Caract diferenciais
M. africanum
M. bovis*
M. caprae
M. microti
M. pinnipedii
M. tuberculosis
Cresc. presena de
1 g/mL de
TCH***
+****
-*****
Cresc. presena de
50 ou de 100
g/mL de
pirazinamida
Cresc. presena de
500 g/mL
hidroxilamina
Cresc. presena de
0,2 % de cido
pcrico
Cresc. presena de
250 g/mL de cido
olico
Crescimento 25 C
Crescimento 30 C
Caract diferenciais
M. africanum
- (33 C)
M. bovis*
M. caprae
M. pinnipedii
M. tuberculosis
M. microti
Mycobacterium bovis
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Tuberculose Animais
Tuberculose Bovina
AGENTE.
O M. bovis o agente da tuberculose em bovinos, sunos, felinos, eqinos, primatas,
caninos, ovinos e caprinos. No acomete as aves.
MORFOLOGIA E COLORAO.
O M. bovis so bastonetes curtos; gordos em esfregaos de tecidos; so maiores e
mais finos, em meio lquido; cora-se em vermelho pelo Ziehl-Neelsen (A.A.R.).
RESISTNCIA
Destrudo pela luz solar, mas resiste bastante dissecao, ao cido e ao bsico.
PREJUZOS ECONMICOS
As perdas econmicas determinadas pela tuberculose incluem a morte e reduo de
10-20% na eficincia produtiva (infertilidade e condenao de carcaas).
Na Argentina, calcula-se um decrscimo em 18% na produo de vacas (leite)
quando comparadas com animais sadios. Alem disso, o leite e a carne originrios de pases
onde h tuberculose bovina no podem ser exportados para pases onde ela controlada,
causando prejuzos economia nacional pela menor cotao do produto e perda de mercado
para as exportaes.
EPIDEMIOLOGIA
Os dados da situao no Brasil no perodo de 1989 e 1998 esto no PNCEBT
(2001), indicando oficialmente uma prevalncia de 1,3% de animais infectados. Nesta
mesma publicao a epidemiologia da tuberculose bovina desperta maior ateno quando
verificamos que, no Estado de Minas Gerais, maior produtor de leite no pas, propriedades
produtoras de leite tecnificadas registraram prevalncias de 15% das propriedades com pelo
menos um animal positivo para o teste intradrmico. Os dados sugerem que h risco de
infeco direta para a populao humana numericamente significativa quer sejam
trabalhador rural da indstria de carnes ou veterinrios.
Na Provncia de Santa F, constatou-se entre 1984 e 1998, percentagens de infeco
por M. bovis de 2,4% e 6,2% entre os casos de tuberculose humana do perodo, destacando
a infeco de trabalhadores ligados s atividades que envolvem trabalho com bovinos e
seus derivados (Zanini, 2002).
ETIOPATOGENIA
A principal via de transmisso aergena, embora seja possvel a transmisso
atravs do leite, congnita e sexual. Tradicionalmente, bovinos leiteiros possuem uma taxa
de infeco maior que os bovinos de corte. O homem infectado pode albergar os
microrganismos em leses pulmonares abertas, podendo ser fonte de infeco para bovinos.
Bezerros podem ser infectados intrauterinamente ou pelo leite de vacas com infeco no
bere. H isolamentos do M. bovis do prepcio, sugerindo que a transmisso venrea seja
possvel, em bovinos. O M. bovis no elabora toxina ou outro fator de virulncia celular,
embora o "fator corda" esteja presente em cepas virulentas e no presentes em cepas
avirulentas. Seu papel sobre a virulncia no compreendido, mas se acredita que tenha
importncia na estimulao da resposta granulomatosa.
Inalao; as bactrias so depositadas nos sacos alveolares Ingesto
LESES
Tubrculos so agregados de macrfagos, linfcitos e outros leuccitos que so
formados no local primrio da infeco, no linfonodo regional e nos locais secundrios e
metastticos. Macroscopicamente, a leso translcida e semelhante a uma prola. Mais
tarde, as leses crescem, havendo necrose central de aparncia amarelo-esbranquiada.
Logo aps, surgem as clulas de Langhans, que so macrfagos que se fusionam ou
multiplicam continuamente, sem diviso do citoplasma. O citoplasma destas clulas claro
e o seu ncleo (2 a 10) arranjado em forma de crculos crescentes. Os bastonetes so
vistos dentro destas clulas. medida que a massa cresce, o centro necrtico torna-se
maior e mais clulas gigantes so observadas, em volta do processo granulomatoso. As
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massas tuberculosas antigas podem envolver o lobo pulmonar inteiro e grandes reas do
fgado, bao e linfonodos (20X o tamanho normal). A poro central consiste de um
material seco e semelhante a queijo leses caseosas em que h depsito de clcio,
produzindo um barulho caracterstico ao corte. As leses so envolvidas por um tecido
conetivo denso.
Leses nos bovinos: linfonodos bronquiais, mediastnicos, submaxilares e
retrofarngeos.
Leso ativa: So aquelas em que h evidncia de hiperemia, nas reas de leso
caseosa.
Leso inativa: So aquelas reas em que h leso calcria e muito encapsulada. Os
bastonetes so de difcil visualizao pela microscopia, mas o cultivo e a inoculao em
cobaia so positivos.
Pleurite tuberculosa e peritonite tuberculosa so freqentes em reas endmicas. As
massas so semelhantes a uvas, revestindo as serosas. Geralmente, o tecido pulmonar no
afetado. Em reas onde h grande ocorrncia de tuberculose, a doena causa adeso dos
pulmes parede torcica, sendo o tecido to forte que os pulmes s podem ser removidos
da cavidade pelo corte. Os rgos menos envolvidos so: fgado, bao e linfonodos
mesentricos.
A infeco do bere constatada em menos de 1% das vacas com pleurite ou
peritonite tuberculosa. Quando h envolvimento, os bastonetes podem ser detectados nos
ductos lactferos e o leite conter um grande nmero de bastonetes. Bezerros alimentados
com leite infectado podem desenvolver a doena (leso 1) na cavidade abdominal e
torcica.
A leso nos sunos pode ser progressiva e as leses mais freqentes so nos
linfonodos da cabea, pescoo e abdmen, acompanhando a porta de entrada da infeco.
IMUNIDADE
O resultado das infeces por micobactrias dependente de uma complexa
interao entre as bactrias invasoras e a resposta imune do hospedeiro. A resposta imune
tem sido extensivamente estudada nas infeces do complexo M. tuberculosis utilizando o
modelo murino ou em cobaias.
Aps a infeco ocorre uma interao entre a resposta inata, atraves dos macrfagos
e as micobactrias, desencadeando uma srie de eventos decorrentes desse encontro. Os
bastonetes podem ser mortos e eliminados; podem permanecer quiescentes; podem ativar o
desenvolvimento ativo da tuberculose ou reativar a dormencia em algum momento do
futuro. Recentemente, foi demonstrado que espcies do gnero Mycobacterium formam
esporos (Ghosh et al 2009, entretanto o papel dessa estrutura no foi ainda elucidado.
O M. bovis provoca uma reao de hipersensibilidade retardada e o reconhecimento
de clulas T aos antgenos desse agente a principal resposta imune para a tuberculose.
A reao alrgica tida como indicadora da resposta immune em consequencia da
infeco ou doena de diferentes micobactrias.
Pollock e Neill, em 2002, mensurou o papel das clulas B, relatando que estas
clulas induziu resposta humoral somente em estgios avanados da tuberculose bovina.
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Welsh, em 2005, documentou a passagem da resposta celular para a respsota humoral nos
animais tuberculosos. Inicialmente, os animais desenvolveram uma forte resposta celular,
mas com a progresso da doena, a resposta celular diminui enquanto que a resposta
humoral aumenta com a produo de IgG1. A resposta humoral no parece ser capaz de
controlar a infeco; a progresso da patologia e a aumento da eliminao do agente.
Waters e colaboradores, em 2006, relataram que em bovinos experimentalmente
infectados h uma produo de anticorpos precoce com produo de anticorpos especficos
IgM e IgG. A progresso da doena pode explicar a Anergia em alguns animais infectados
aos testes baseados na resposta celular. A ausncia da resposta celular nos animais
infectados ocorre quando a eliminao bacteriana grande.
Denis e colaboradores, em 2007, postularam que os bovinos anrgicos pertencem a
um grupo de animais em que esses componentes antinflamatrios so recrutados,
prevenindo a expresso de marcadores da imunidade da tuberculose, atravs da resposta
PPD. Dados recentes obtidos na tuberculose bovina sugerem que h uma liberao de IL-10
associado com a progresso da doena e relacionando o envolvimento da IL-10 na anergia
PPD. A perda de resposta PPD pode estar ligada ao aumento da ativao de moncitos e
macrfagos, especialmente na liberao de substancias oxidantes ou prostaglandinas
reduzindo a proliferao de linfcitos T e liberao de citocinas.
Informaes considerveis esto disponveis e teorias bem documentadas na
interao entre o agente e o sistema imune do hospedeiro infectado tm sido propostas. No
entanto, quando se aplicam essas hipteses obtidas em camundongos puros para o ser
humano no consanguineo ou bovinos, o resultado mais complexo.
A dificuldade em dissecar o papel individual do tipo celular e de citocinas so, em
parte, devido redundncia do sistema imunolgico. A sobreposio de funes dos
componentes do sistema imune , provavelmente, uma grande vantagem para o hospedeiro
contra as infeces por micobactrias e, na maioria dos indivduos infectados, o hospedeiro
ganha a batalha. No entanto, provvel que haja tambm redundncia e complexidade nos
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Espcie(s)
cobaia
coelho
ave
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M. tuberculosis
M. bovis
M. avium
CONTROLE
As doenas micobacterianas so normalmente progressivas e com um grande
nmero de animais subclinicamente infectados. A identificao desses animais difcil,
com os testes diagnsticos disponveis. O agente pode sobreviver no ambiente e muitas
espcies de animais silvestres podem ser infectadas. Estes fatores fazem da tuberculose
bovina e da paratuberculose um grande desafio no seu controle. A maioria dos pases
desenvolvidos tem programas de controle da tuberculose bovina, devido ao risco zoontico
que representa o M. bovis. Estes programas esto geralmente baseados no teste-e-abate e
restrio de circulao de animais.
O teste utilizado o teste alrgico intradrmico, em que o derivado protico
purificado (PPD) do M. bovis inoculado intradermicamente e posteriormente 72h +/- 6h
so mensuradas em mm, o aumento diferencial da espessura da pele como um ndice de
infeco. Apesar desses programas de controle, vrios pases no conseguiram erradicar a
tuberculose bovina. Isto particularmente verdadeiro para os pases que possuem um
reservatrio de vida selvagem, como o Reino Unido, Irlanda e Nova Zelndia. O M. bovis e
Map podem infectar uma grande variedade de animais domsticos e silvestres. At que
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ponto a vida selvagem constitui uma ameaa para os animais domsticos depende da
habilidade da espcie para atuar como hospedeiro de manuteno ou como hospedeito de
passagem. No hospedeiro de manuteno, a infeco pode persistir pela transmisso intraespcies sozinha, enquanto que no hospedeiro de passagem, a infeco no persiste
indefinidamente a menos que haja reinfeco de outro hospedeiro. importante focalizar
nos animais silvestres para controlar a infeco nos animais domsticos. As espcies que
so importantes para a disseminao da tuberculose bovina so os texugos (Meles meles) no
Reino Unido e na Irlanda; o gamb rabo-de-pincel (Trichosurus vulpecula), na Nova
Zelndia e os cervos de cauda branca (Odocoileus virginianus), em Michigan. O Map tem
sido isolado de uma vasta gama de espcies e com maior freqncia de veados e coelhos. A
paratuberculose em criao de cervos e nas reservas de veados prevalente em algumas
reas, parecendo claro que os animais podem manter a infeco em populaes com alta
densidade. No entanto, o significado dos cervos selvagens e outros animais selvagens para
a continuao ou a propagao de paratuberculose em animais no est clara.
Uma alternativa na estratgia da reduo da propagao da tuberculose a
vacinao dos animais silvestres. Essas vacinas injectveis so a melhor opo, mas no
uma alternativa realista para outros animais domsticos, exceto nos ensaios de pesquisa. A
BCG, uma vacina oral contra Tb humana, formulada com liberao lipdica reduziu a
gravidade da doena em um modelo animal com desafio, atraves de aerossis. A resposta
parcial obtida pode levar a uma reduo na excreo de bactrias e, consequentemente,
diminuiu a disseminao da infeco para os animais. A vacinao dos animais silvestres
em conjunto com melhorias no manejo quando complementadas com os programas de
controle atuais pode reduzir a transmisso e controlar a tuberculose nos bovinos. Outra
causa para a propagao da infeco por micobactrias o comrcio de animais.
O perodo de incubao longo e a progresso lenta da doena juntamente com testes
com qualidade inferior tornam dificil identificao de todos os infectados.
Consequentemente, sempre haver risco na compra animais de um rebanho com histrico
Gnero Mycobacterium spp
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(sem reao)
Reagente
(qualquer reao)
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Reao
Diferena (mm)
Resultado em relao tuberculose
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Tb < Ta
Negativo
Negativo
Tb > Ta
0 - 1,9
Negativo
Tb > Ta
2,0 - 3,9
Suspeito
Tb > Ta
4,0 ou mais
Positivo
_______________________________________________________________________________
Tb = tuberculina bovina Ta = tuberculina aviria
VACINAO
O desenvolvimento de vacinas (BCG) contra o M. bovis foram realizadas no
passado. Entretanto a perda de eficcia dessas vacinas e o poder de confuso na
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TRATAMENTO
O tratamento da tuberculose bovina com ATMs no deve sequer ser pensado, pois
se trata de uma doena populacional. A indicao o envio de animais reagentes para o
matadouro. O tratamento de tuberculose em primatas, especialmente aqueles pertencentes a
particulares deve ser desencorajado pelo risco Sade Pblica. O clnico veterinrio
obrigado a recomendar cuidados mdicos s pessoas expostas. O M. bovis sensvel
isoniazida (INH), estreptomicina, e rifampicina. A eficincia do tratamento com INH
experimentalmente pode atingir 100 % (Leite e Lage, 1999), mas so citados resultados
clssicos onde a eficincia varia entre 50% e 96,4 %. Lamentavelmente, poucos
pesquisadores brasileiros insistem na utilizao da isoniazida no tratamento da tuberculose
bovina e bubalina, entretanto o tratamento com ATMs deve ser completamente rejeitado
pelo risco de falha no controle da infeco nos animais; pelo perigo Sade Pblica e
desenvolvimento de multirresistncia.
Em casos muito especiais pode ser tentado o tratamento, tendo em mente que a
doena infecciosa e dependente no somente do agente, mas tambm do hospedeiro e
ambiente. Quanto uma linhagem do M bovis resistente aos ATMs se observa uma
crescente preocupao com o aumento de casos de tuberculose, tanto no homem como em
animais. Na Itlia, foi detectada multirresistncia em amostras do M. bovis isoladas em
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Mycobacterium lepraemurium
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Lepra murina
Lepra do gato
Systmatique
La lpre du rat a t dcrite en 1902 lors d'une campagne de dratisation conduite en
Ukraine. Un an plus tard, la maladie a t identifie au Royaume Uni puis dans la plupart
des pays. La maladie du rat prsente des analogies clinique et anatomopathologique avec la
lpre de l'homme si bien que, durant de nombreuses annes, l'agent de la lpre du rat a t
assimil Mycobacterium leprae. La prsence de communauts antigniques entre l'agent
de la lpre du rat et Mycobacterium leprae ainsi que des similitudes dans les caractres
bactriologiques sont venus renforcer l'ide d'une identit entre les agents de la lpre
humaine et de la lpre du rat.
En se basant sur des arguments principalement morphologiques (contrairement
Mycobacterium leprae, l'agent de la lpre du rat n'est pas group en amas ou en palissades
au niveau des lsions) Marchoux et Sorel proposent l'appellation de Mycobacterium
lepraemurium pour l'agent de la lpre du rat. Cette dnomination a t incluse dans les
Approved Lists of Bacterial Names et des analyses antigniques ainsi que l'tude des sucres
de la paroi, l'analyse des acides mycoliques, la possibilit de cultiver cette bactrie in vitro,
l'tude des ADN et l'tude des squences des ARNr 16S montrent que Mycobacterium
lepraemurium est une espce distincte de Mycobacterium leprae.
Caractres bactriologiques
Gnero Mycobacterium spp
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de
la
"lpre
du
chat".
Chez le chien, des mycobactries non identifies sont responsables d'une infection
comparable la lpre et qualifie de "canine leproid granuloma syndrome".
La lpre du chat, dabord dcrite en Nouvelle Zlande, semble avoir une rpartition
mondiale (Australie, Amrique du Nord, Europe). Linfection du chat rsulterait de
morsures de rats et la maladie se traduit par lapparition de un ou de multiples nodules
cutans, de 1 3 cm de diamtre, ulcrs ou non, prsents sur toutes les parties du corps
mais avec une localisation prfrentielle la tte et aux membres. Les nodules sont non
douloureux, ltat gnral de lanimal est non affect mais on observe frquemment une
adnite des nuds lymphatiques drainant la rgion. Lexamen anatomopathologique rvle
Gnero Mycobacterium spp
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des granulomes inflammatoires prsentant parfois des foyers de ncrose caseuse, des
macrophages et des cellules gantes multinucles. La coloration de Ziehl permet de
visualiser de nombreuses mycobactries notamment dans les zones ncroses et dans le
cytoplasme des macrophages ou des cellules gantes.
Exprimentalement, linjection dun broyat de granulomes reproduit chez le rat ou la souris
une infection tout fait comparable la lpre du rat.
Le traitement fait gnralement appel une excision chirurgicale. La dapsone a t utilise,
notamment en Australie, mais cette substance provoque des effets secondaires importants
chez le chat (anmie hmolytique, troubles nerveux).
Diagnostic bactriologique
Le diagnostic repose sur la mise en vidence dans les lsions de nombreuses bactries
acido-alcoolo-rsistantes, souvent prsentes dans les macrophages, et ne cultivant pas sur
Lwenstein-Jensen (les autres mycobactries telles que Mycobacterium fortuitum,
Mycobacterium chelonae ou Mycobacterium smegmatis, capables de provoquer des
lsions cutanes chez le chat, sont cultivables in vitro sur les milieux couramment utiliss
pour les mycobactries). La technique de PCR dcrite par Hughes et al. peut tre mise en
uvre directement dans les prlvements et, selon les auteurs, donnent un diagnostic de
certitude.
Orientation bibliographique
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Gnero Mycobacterium spp
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Mycobacterium caprae
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Tuberculose Caprina
SINONMIA: Mycobacterium bovis subsp caprae.
INTRODUO
O gnero Mycobacterium o nico gnero da famlia das Mycobacteriaceae e,
dentro desse gnero esto includas as espcies M. africanum, M. bovis, M. canettii, M.
microti, M. pinnipedii e M. tuberculosis so responsveis pela tuberculose no homem ou
nos animais.
Os estudos de hibridizao de ADN-ADN; de polimorfismo eletrofortico de
isoenzimas; a seqncia dos ARNr 16S e 23S; o sequenciamento das seqncia intergnicas
ADNr 16S - ADNr 23S; o sequenciamento dos genes que codificam a protena do choque
trmico Hsp65; o sequenciamento dos genes rpoB, katG, rpsL, gyrA e dnaJ; eletroforese de
protenas celulares e anlise de fragmentos de restrio obtidos com EcoRI (tcnica RFEL
naqueles fragmentos marcados com
32
de fato uma nica espcie genmica. Todas as demais deveriam ser consideradas como
subespcie (ou biovar) de uma nica espcie que por razo das regras de prioridade deveria
ser chamada de M. tuberculosis.
Razes ligadas a sua importncia veterinria e mdica (poder patognico e espectro
dos hospedeiros dessas espcies no so idnticas), nenhuma proposio formal foi feita e o
nome de M. africanum, M. bovis, M. microti, M. pinnipedii e M. tuberculosis conservam
seu status dentro da nomenclatura. Essas espcies so denominadas de micobactrias do
complexo M. tuberculosis.
Em 1999, num estudo com 119 amostras de caprinos foi isolada uma amostra de
carneiro e outra de suno, permitindo que Aranaz e colaboradores descrevessem o M.
tuberculosis subsp caprae.
dos bacilos da tuberculose. Como essas cepas foram isoladas principalmente de caprinos,
elas foram etiquetadas como M. bovis. Por outro lado, a tipificao molecular baseada na
deteco das seqncias nucleotdicas repetitivas como a seqncia de insero IS6110, as
seqncias polimorfas repetitivas ricas em guanina e citosinas (PGRS para Polymorphic
G+C-Rich Sequences) e as seqncias repetidas diretas (DR para Direct Repeat)
permitiram diferenciar essas cepas das outras representantes do complexo M. tuberculosis.
O mesmo se deu com a tipagem pelo spoligotyping.
Niemann e colaboradores, em 2001, demonstraram que as caractersticas culturais,
bioqumicas e genticas do M. tuberculosis subsp caprae eram mais prximas das
caractersticas do M. bovis do que as caractersticas do M. tuberculosis. Assim, os autores
propuseram transferir esta subespcie dentro da espcie M. bovis com a nomenclatura de M.
bovis subsp caprae. A validao do Mycobacterium bovis subsp caprae criou
automaticamente a subespcie M. bovis subsp bovis. M. bovis subsp caprae e o M. bovis
subsp bovis partilham caractersticas comuns, permitindo diferenci-las do M. tuberculosis:
suas colnias so disgnicas; so microaerfilas; no reduzem nitratos; do resposta
negativa ao teste da niacina; incapazes de crescer na presena de 1 ou de 2 g/mL de
hidrazida do cido tiofnico-2-carboxlico; apresentam mutao dos genes oxyR (posio
285) e gyrB (posio 756); desprovidos de espaadores 39 a 43 e desprovidos da seqncia
gentica mtp40. Contrariamente ao M. bovis subsp bovis, as cepas do M. bovis subsp
caprae so sensveis pirazinamida (codon 57 do gene pncA code para uma histidina);
desprovidos de espaadores 1, 3-16 e 30-33, as bases 1311 e 1410 do gene gyrB so G e C
(T e T no M. bovis subsp bovis) e produzem uma fosfatase alcalina uma beta-glucosidase e
uma Tween 80 esterase.
Em 2003, Aranaz e colaboradores propuseram elevar o M. bovis subsp caprae ao
nvel de espcie e em 13 de novembro de 2003, os autores validaram a nomenclatura de
Mycobacterium caprae.
CARACTERSTICAS MORFOTINTORIAIS
O M. caprae apresenta todas as caractersticas do gnero Mycobacterium. As
linhagens dessa espcie so constitudas de bastonetes AAR; no esporulados; imveis;
algumas vezes, agrupados em filamentos alongados e retorcidos (formao de corda).
CARACTERSTICAS BIOQUMICAS
Resposta positiva aos testes de:
Teste da catalase ( temperatura ambiente), hidrlise do Tween 80 (reao fraca
obtida em 10 dias) e sintetiza (galeria API ZYM) uma fosfatase cida; uma fosfatase
alcalina, uma beta-glucosidase e uma esterase.
CARACTERSTICAS CULTURAIS
O Crescimento estimulado pelo piruvato de sdio; colnias tornam-se visveis
aps 4 a 6 semanas de incubao a 36 C. Aps os subcultivos, o crescimento mais rpido
(3 a 4 semanas a 36 C), mas elas no so observadas temperatura de incubao a 25, a 30
ou a 43 C.
Em meios slidos, as colnias so lisas e no pigmentadas.
No meio 7H10, o cultivo inibido com 5% de NaCl; 1g/mL de hidrazida do cido
tiofnico-2-carboxlico, por 50 g/mL de pirazinamida; por 0,2 % de cido pcrico; por 500
g/mL de hidroxilamina; por 500 g/mL de p-nitrobenzoato e por 250 g/mL de cido
olico.
HABITAT E PATOGENICIDADE
DIAGNSTICO BACTERIOLGICO
As tcnicas utilizadas por Aranaz e colaboradores, em 1999, para isolamento e
identificao desse agente foram os seguintes:
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TSA
A amostra ou linhagem tpica sensvel a isoniazida (0,2 g/mL); rifampicina (1
g/mL); etambutol (5 g/mL); estreptomicina (2 g/mL); p-aminosalicilato (2g/mL);
ofloxacina (2,5 g/mL); a cicloserina (30 g/mL) e 50 g/mL de pirazinamida (1 % de
colnias resistentes).
IMPORTNCIA ECONMICA
A compreenso dos eventos associados aos prejuzos econmicos fundamental e
d suporte na tomada de deciso quanto a abordagem da doena local e/ou global.
Os prejuzos econmicos na pecuria leiteira so bem maiores do que nos animais de corte
(Barkema et al 2010). O impacto econmico da paratuberculose pode inclui perdas antes da
eliminao e durante a eliminao, antes das medidas de controle e preveno; as perdas
com o estabelecimeno das medidas de controle e preveno e os custos do controle e
preveno. Nos Estados Unidos, essas perdas foram estimadas em mais de 1,5 bilhes por
ano, segundo Jones (1989).
A maioria dos casos de paratuberculose subclnica e com isso, as estimativas no
so muito precisas o que torna difcil avaliar as perdas econmicas (National Research
Council, 2003). Merkal e colaboradores, em 1975, reportaram que 22,6% dos animais
infectados pelo Map foram descartados por mastite quando comparadas com 3,6% das
vacas no infectadas. Wilson e colaboradores, em 1995, relataram uma associao inversa
entre mastite e os reagentes para a infeco pelo Map.
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resultados obtidos sobre o efeito da infeco pelo Map e a produo de leite individual de
7.879 vacas de 38 rebanhos leiteiros provenientes de 16 estados. Concluram que vacas com
teste (Elisa) fortemente positivo produziram significativamente menos leite, tanto na
lactao equivalente quanto na lactao mxima (305 dias). No houve diferenas
significativas observadas na lactao de 305 dias para o percentual de gordura, protenas
idade, lactao e contagem celular somtica entre vacas com forte resultado positivo ou
resultado negativo.
Merkal e colaboradores, em 1975, quantificaram a associao entre infertilidade e
descarte de vacas. Obtiveram que 68,8% das vacas infectadas foram eliminadas por
infertilidade quando comparados com as 60,2% das no infectadas.
Abbas e colaboradores, em 1983, na Califrnia compararam o intervalo entre partos
entre infectados e no infectados. O intervalo entrepartos foi de 15,2 meses nos animais
infectados pelo Map e 13,5 meses entre os no infectados. Essa associao no foi
verificada pelos estudos de McNab e colaboradores, em 1991, no Canad.
Fallah e colaboradores, em 2010, no Iran, estudaram os efeitos da infeco pelo
Map sobre um rebanho leiteiro. Concluram que h associao entre os casos clnicos e o
baixo desempenho reprodutivo, incluindo absoro fetal, abortos e reduo da produo de
leite.
O valor da carcaa reduzido em pelo menos 30% (em casos extremos a carcaa
perde valor). Entretanto o peso reduzido pode significar diminuio da ingesta de alimento,
gerando um fator de correo. Benedictus e colaboradores, em 1987, contabilizaram o
prejuizo com a reduo de peso no matadouro em 129 libras.
Mais importante do que prejuzos diretos, a reduo no preo do leite de rebanhos
infectados pode resultar em preocupao dos consumidores sobre o potencial zoontico de
paratuberculose. O papel potencial do Map na patognese da doena de Crohn no homem
ainda no foi resolvido (European Commission, 2000; Food Safety Authority of Ireland,
2000; Chacon et al, 2004). Se o Map estiver implicado, ento o leite seria o veculo de
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transmisso possvel do organismo para os seres humanos, pois o Map tem sido detectado
em leite cru e pode no ser eficazmente inativado pelos processos de tratamento trmico
(pasteurizao) industrial (Sweeney et al.1992; Streeter et al, 1995; Grant et al. 1996; Grant
et al. 1999; Grant et al, 2002a,b).
Juste, em 1997, na Espanha, calculou os prejuizos econmicos com cada caso da
forma clinica da paratuberculose ovina. Estimou em 120 euros /caso clinico para os ovinos
leiteiros e 60 euros/ caso para os animais d ecorte.
Brett, em 1998, na Nova Zelndia avaliou os prejuzos de uma vaca leiteira com DJ
em 1.616 dlares; de ovinos da raa Merino em 48 dlares e ovinos de duplo propsito em
42 dlares, considerando o impacto econmico de 1 nico animal com DJ / ano. Caldow e
Gunn, em 2000, na Inglaterra, estimaram os prejuzos econmicos em ovinos,
especialmente pelas mortes inesperadas causada pela paratuberculose. Eles estimaram um
valor entre 24 a 94 libras.
pigmentao colonial com cepas produtoras de pigmento amarelo ou laranja. As cepas com
pigmentao amarela ou laranja, primariamente so isoladas de ovinos.
CARACTERSTICAS CULTURAIS
O Map cresce muito lentamente com uma necessidade de micobactina P ou J
(agente quelante do ferro). Est muito mais relacionado com o M. avium.
Aps 9-16 semanas, as colnias (1 a 2 mm) podem ser visualizadas. O meio de
Herrold ou Dubos-Smith com 0,4% de piruvato de sdio promove o seu crescimento. As
amostras de fezes e contedo intestinal destinada ao isolamento podem ser tratadas com
cloreto de hexadecilpiridnio (HPC), cloreto de benzalcnio e/ou 5% de cido oxlico.
LEVANTAMENTOS EPIDEMIOLGICOS
Num levantamento realizado em 1983, ao nvel de abatedouro, em Wisconsin
demonstrou que 11% das leses eram compatveis com paratuberculose. Outro
levantamento semelhante detectou 18% quando o exame histopatolgico foi associado ao
cultivo bacteriolgico.
Testes sorolgicos de ELISA em bovinos no estado da Flrida indicaram amplo
contato dos animais com o agente sendo estimado em 8,6% de bovinos de corte positivos e
17,1% de bovinos leiteiros.
TRANSMISSO
--H penetrao do Map no epitlio do leo e clon---fagocitado pelo
macrfago (sobrevive semanas) ---multiplicao na mucosa----resposta
granulomatosa leo-cecal---leso intestinal (espessamento) ---proliferao de
massas epiteliais na mucosa e submucosa---diarria intermitente---caquexia
SUSCETIBILIDADE
Bovinos jovens so mais sensveis infeco embora as manifestaes clnicas
sejam tardias. Terneiros alimentados com leite de me com a doena possuem maior risco
de tornarem-se infectados. Machos so mais suscetveis, pois a incidncia maior em
touros. A doena manifesta-se, geralmente entre animais de dois a trs anos e raramente
com mais de cinco anos.
RESISTNCIA
O Map assim como outros membros do gnero possui parede celular rica em
lipdios; resistente a influencias fsica, tais como mudanas de pH e temperatura,
(acessibilidade de gua e nutrientes). Pode sobreviver em solos e fezes, durante 8 meses
mas provavelmente anos. Resiste aos cidos e bases, permanecendo viveis nas fezes por
15 semanas a -70C. sensvel a luz solar sua sobrevivncia reduzida por contato
constante com fezes e urina no ambiente. Em esterqueiras e pode sobreviver de 98 a 287
dias. Pode sobreviver nos solos e nas fezes por mais de um ano e mais tempo na gua.
destrudo pelo aquecimento moderado, por 5% de formol e lisol.
ETIOPATOGENIA
A infeco ocorre pela ingesto do leite, gua e alimento contaminado pelo agente.
A infeco pode ocorrer via intra-uterina particularmente, durante a ltima fase da doena
quando a bactria se dissemina, atingindo mltiplos rgos.
Bezerros nascidos de mes infectadas que se alimentam regularmente de sua me
tm uma grande chance de infectar-se porque o agente secretado pelo leite de animais
infectados. No gado leiteiro, onde os animais so individualmente, manejados com leite
integral est associado com rpida difuso da infeco num rebanho.
A paratuberculose progride e se difunde lentamente, podendo levar anos at que o
rebanho seja reconhecido como infectado. A percentagem media de animais infectados de
38-42% por rebanho. Rebanhos com boas prticas de manejo podem ter uma prevalncia de
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infeco menor enquanto que aqueles com pior manejo tm uma taxa de infeco maior.
Ocasionalmente podem ser detectados rebanhos em que todos os animais esto infectados
pelo Map.
As perdas anuais com mortes dentro de um rebanho variam de 3-10% dos animais
adultos. O perodo de incubao pode variar de 6 meses a 15 anos. Entretanto a maioria dos
casos ocorre entre trs a cinco anos de idade. A doena em animais jovens rara, ocorrendo
em propriedades com alta taxa de infeco, associada ao manejo deficiente. A doena
clnica tem sido observada em animais, variando de 4 meses a 15 anos. A doena clnica o
estgio terminal de uma infeco subclnica crnica, podendo ser precipitada por fatores
estressantes. O parto, a desnutrio, a grande produo leiteira, as infeces parasitrias, as
deficincias minerais e a permanncia em ambientes baixos e midos tm sido
incriminados como fatores precipitantes.
O primeiro sinal clnico observado a falha na teraputica contra a diarria crnica
e persistente. H perodos de remisso que podem levar semana e meses. A diarria,
geralmente ocorre durante a prenhez, retornando mais severa, aps o parto. Associado
diarria, h uma fraqueza generalizada, pelo sem brilho, perda de peso. O pelo pode ficar
descolorido, especialmente em raas leiteiras inglesas ou animais de pelagem vermelha.
Essa mudana de colorao representa o esforo compensatrio dos precursores da
vitamina A (carotenos) para outras necessidades metablicas. H febre intermitente, mas o
apetite permanece bom. No estgio terminal o apetite suspenso, sendo observadas fezes
diarreicas contendo sangue franco. H edema ventral, caquexia debilitao e morte.
O curso clnico pode variar de trs a seis meses ou mais longo. Alguns animais
parecem recuperar-se, mas os sinais recidivam posteriormente.
Animais com os sinais clnicos tornam o seu reconhecimento mais simples pelo
dono ou tratador, especialmente se a enfermidade j havia sido diagnosticada neste rebanho
e, sinais sutis da enfermidade tais como tosse, pelo sem brilho e diminuio na produo
leiteira, possam ser observadas. Nenhuns dos sinais clnicos mencionados so nicos na DJ,
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DIAGNSTICO DIFERENCIAL
O diagnstico diferencial inclui peritonite crnica, fasciolose, abscesso de fgado,
infeces parasitrias, disenteria de inverno, pielonefrite e salmonelose crnica. A DJ nos
outros ruminantes mais conhecida pelo quadro de caquexia e cronicidade do que aqueles
acompanhados de diarria e, por isso, o diagnstico clinico sozinho difcil.
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SINAIS CLNICOS
A enfermidade caracterizada por alteraes intestinais graves, envolvendo o
intestino delgado (jejuno, leo), o ceco, os vasos linfticos (intestinais e mesentricos) e
linfonodos (ilacos e mesentricos). O processo inflamatrio causa uma enterite crnica e
granulomatosa que por sua vez provoca a sndroma de m absoro nos doentes e que e
traduzido clinicamente, pela perda de peso acentuada, enfraquecimento geral progressivo,
diarria intermitente, desidratao e queda brusca na produo leiteira. O curso clinico da
paratuberculose tem poucos meses de durao, culminando com diarria severa, debilidade
geral, edema ventral, caquexia e morte.
A paratuberculose mais comum no gado leiteiro, em ovinos e caprinos. Tem sido
relatado em animais silvestres criados livremente, podendo tornar-se um problema
importante para a criao de animais silvestres ou para os animais de zoolgicos,
particularmente quando diversas espcies so criadas no mesmo ambiente. A
paratuberculose pode ser um problema importante em fazendas de criao de veados e alces
assim como nos cameldeos tais como lhamas e alpacas. Infeces espordicas em sunos,
eqinos, pres, primatas e no homem.
DIAGNSTICO LABORATORIAL
O cultivo do Map em amostras de tecido o mtodo mais seguro para a deteco de
animais com DJ. O procedimento demorado, requerendo entre 8-16 semanas de
incubao em meios especiais (Herrold egg yolk agar com e sem micobactina) para cultivo
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palmitato)
Uma recente modificao do PCR, incluindo duas reaes de ampliao, utilizando nested
primers possibilitou o aumento da sensibilidade do teste, possibilitando detectar cerca de 50
organismos/g de fezes contra 104organismos/g fezes do kit comercial.
TRATAMENTO
Estudos in vivo e in vitro tm sido realizados nestes ltimos 30 anos para
avaliar a eficcia de diferentes drogas administradas sozinhas ou combinadas para controle
da infeco causada pelo Map ou doena de Johne, nos ruminantes. A eficcia do
tratamento pela combinao da rifampicina, pirazinamida e estreptomicina no tratamento
da infeco pelo Map foi previamente avaliada em bezerros experimentalmente infectados.
Essa combinao tem sido aplicada com sucesso para tratamento da tuberculose no homem.
As diferentes aes, isto , na ao intracelular (rifampicina e pirazinamida) e extracelular
(rifampicina e estreptomicina) resultou em sinergia. Entretanto esses frmacos no
mostraram efeito bloqueador na eliminao fecal das micobactrias noa animais com a
forma clnica natural. Durante a terapia e por um perodo de tempo posterior ao tratamento
no foram observados organismos alcool-acidos nas amostras coradas pelo ZN. Entretanto
as amostras cultivadas permaneceram positivas para o Map.
IMUNIZAO/VACINAO
A vacinao contra a doena de Johne foi primeiramente descrita por Vallee e
Ringjard, na Frana, em 1926, aps observaes de que a inoculao subcutnea de
amostras vivas e no atenuadas do Map no resultaram em infeco.
Desde ento, um nmero significativo de vacinas e bacterinas, utilizando cepas
tanto atenuadas e no atenuadas tem sido utilizadas mortas pelo calor e de cepas rompidas a
fragmentos foram avaliadas.
A imunidade da paratuberculose ocorre em algum estagio aps a hipersensibilidade
e, aparece desenvolver de maneira semelhante a outras infeces por micobactrias. As
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vacinas que provocam uma aprecivel hipersensibilidade tanto com organismos mortos ou
vivos e resduos extrados pelo metanol so efetivas agentes imunizantes enquanto que os
resduos extrados pelo lcool e fraes protoplasmticas causam pouco ou nenhuma
hipersensibilidade e no funcionam como vacinas efetivas.
A vacinao, geralmente reduz o nmero de animais com a enfermidade clinica,
diminuindo o nmero de animais eliminadores, atraves das fezes e reduzindo o nmero de
animais com infeces intestinais detectveis. A vacinao no confere imunidade absoluta.
Os animais vacinados podem desenvolver a doena e/ou eliminar o agente. A vacina pode
proteger o animal da doena clinica ou apenas retardar o seu aparecimento. Esse atraso no
aparecimento pode ser vantajoso, postergando a doena para alem do perodo produtivo.
Animais vacinados respondem positivamente aos testes diagnsticos e, desse modo, s
podem ser detectados, atravs do cultivo das fezes. Os vacinados no devem ser
considerados como livres de paratuberculose. O manejo e medidas de controle so
indispensveis para a obteno de benefcios mximos.
A desvantagem da vacinao o desenvolvimento no local de inoculao de um
processo inflamatrio e desenvolvimento posterior de ndulo fibrocaseoso, geralmente com
32 a 42 mm de dimetro. Esses ndulos podem tornar-se muito grandes (250 X 127 mm)
particularmente com a revacinao.
A vacinao com agente vivo provoca a recuperao de microrganismos viveis no
ndulo de inoculao mesmo aps 6 anos de inoculao. H o desenvolvimento seguido da
imunizao de uma forte e persistente sensibilidade a tuberculina aviria e mamfera,
segundo imuneros autores. As vacinas contra paratuberculose aumentaram em cerca de 8
vezes a sensibilidade tuberculina. Essa sensibilizao cruzada interfere com os programas
de erradicao tuberculose. Animais tuberculosos podem ser diferenciados dos vacinados
pelo teste cervical comparativo.
A vacinao com cepa viva do Map tem sido utilizada na Europa enquanto que nos
EU ela fundamentalmente uma bacterina preparada com a cepa 18 (conhecida agora como
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M. avium) morta pelo calor e suspensa em leo mineral. Embora ambas sejam capazes de
estimular a imunidade celular e humoral, segundo os ensaios diagnsticos, elas no so
capazes de produzir niveis bons de proteo.
A vacina indicada para controlar a doena em rebanhos endemicamente infectados
e no est indicada como medida profiltica em rebanhos livres da doena. Distribuio e
uso esto limitados aos veterinrios, especialmente treinados pelos perigos e possveis
efeitos irreversveis da inoculao acidental no homem. A vacina deve ser inoculada
subcutaneamente na regio do peito e, administrada entre 1-35 dias de idade, onde h
formao posterior de um ndulo. A imunidade dura aproximadamente 18 meses. A
revacinao no recomendada. Vrios estudos tm demonstrado uma queda na resistncia
aps a revacinao. Estudos efetuados com a bacterina e conduzidos em alguns desses
rebanhos demostraram que houve reduo em 90% dos casos clinicos e reduo em 50% no
nmero de animais infectados. Entretanto, esses resultados devem ser interpretados com o
conhecimento das necessidades da propriedade necessrio para qualificar a vacinao.
As propriedades devem instituir praticas de manejo consistente com aquelas
recomendadas para controle e erradicao dessa doena como parte no programa de
vacinao. Essa pratica de manejo se propriamente institudas podem efetivamente
controlar a doena. A bacterina, em essncia usada como incentivo para donos de
rebanhos para instituir programas de manejo. Ela portando difcil de determinar se efeito
benfico da vacinao com o resultado da bacterina ou as prticas de manejo visto que o
manejo sozinho pode produzir resultados semelhantes.
CONTROLE E PREVENO
Atualmente, no h qualquer sinalizao dos rgos federais na criao de um
Programa Nacional de Controle da Paratuberculose. A cada ano acumulam-se casos
clnicos bem documentados em bovinos e bubalinos leiteiros, alguns deles, com isolamento
do agente, caracterizao molecular e exames anatomopatolgicos slidos. Precisamos com
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urgncia de laboratrios com experincia e pessoal nessa rea e os raros conhecidos esto
em Minas Gerais, Rio de Janeiro e Rio Grande do Sul. H uma grande carncia de
laboratrios prximos as bacias leiteiras (novas ou em expanso) como Amazonas, Par,
Pernambuco, Bahia, Gois, So Paulo, Paran etc. Infelizmente, no vislumbramos
mudanas num curto, mdio e no longo prazo.
A paratuberculose possui difcil controle, especialmente pelo longo perodo de
incubao, ausncia de sinais clnicos nos estgios iniciais da enfermidade, durante o qual
os animais podem ser disseminadores, atravs das fezes sem apresentar sinais clnicos;
testes diagnsticos com baixa sensibilidade (ELISA adsorvido e cultivo em HEY);
tratamento da amostra com HPC (fezes, tecido, leite); uso de micobactina como fator de
crescimento e uma variedade de metodologias.
fundamental conhecer e estimar a prevalncia da doena tanto do rebanho quanto
individual, especialmente na tomada de deciso se uma doena infecciosa importante ou
no e quais as medidas aplicveis. Assim podemos pensar e aplicar medidas de erradicao
em reas de baixa prevalncia; medidas de controle em reas de alta prevalncia e
monitoramento em reas onde no h histrico da enfermidade.
As estimativas de prevalncia so necessrias quando modelam e simulam a difuso
da doena. Entretanto as estimativas obtidas so influenciadas pela acurcia dos testes
diagnsticos aplicados e pela comparao entre estudos que precisam ser ajustados para
melhor estimar a prevalncia verdadeira.
No estudo epidemiolgico da paratuberculose no Brasil h passos que poderamos
economizar muito trabalho, muito tempo e muitos recursos econmicos. O esquema
simplificado, mas importante:
1-Detectar os rebanhos-leiteiro alvo (>3anos) suspeito (bovino, bubalino, ovino,
caprino, silvestres etc) com um teste de Elisa adsorvido como teste de triagem
(probabilidades)
de contaminaes fecais. As pastagens destes animais devem ser diferentes das dos animais
adultos.
TICA
Proprietrios de rebanhos infectados, assim como clnicos veterinrios e autoridades
oficiais devem estar atentos ao processo de responsabilidade na venda de um rebanho ou
animal infectado. As vendas de animais so disciplinadas pelas mesmas leis de garantia
legal que regem outros bens no comrcio e, desse modo, a responsabilidade civil tem base
na lei de fraude, negligncia ou no contrato de garantia. Fazendeiros podem ser
responsabilizados no somente pelo valor particular de um animal, mas tambm por todas
as avarias que tiveram conseqncias ao comprador e subsequente compradores.
A venda de um animal conhecido como infectado pelo Map constitui a falsa
interpretao de um produto e o vendedor responsvel por danos, tendo como base a lei de
fraude. O proprietrio que vende um animal aparentemente saudvel de um rebanho
conhecido como infectado pelo Map pode ser responsabilizado tendo como base a
negligncia. Os animais de uma propriedade infectada foram todos expostos doena e
como tal, podem estar infectado. Se um animal aparentemente saudvel, mas no exposto
encontrado infectado depois, a responsabilidade pelos danos podem advir na falha do
vendedor em cuidar na preveno de alteraes a outro, isto negligencia. Mesmo a venda
de um animal infectado de um rebanho na qual no se conhea paratuberculose pode
sujeitar o fazendeiro ao direito baseado na implicao de garantia.
Produtos podem ser vendidos sobre uma cobertura do cdigo comercial que
estabelece que produtos sejam indicados para os seus propsitos. Uma vez que a
paratuberculose subclnica e portadores assintomticos do Map no podem ser detectados, a
venda de um animal, aps a inspeo por outro no limita a responsabilidade do vendedor.
Assim, mesmo um fazendeiro, sem saber, vende um animal infectado, pode ser
responsabilizado por leso baseada na garantia expandida.
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PERSPECTIVAS
H pouca dvida que a paratuberculose seja um problema importante no Brasil
assim como em outros pases. Muito esforo travado na tentativa de deter a doena e
progressos tm sido alcanados.
No Brasil, no h um programa de controle oficial. Rara propriedade tem mostrado
algum interesse o controle, mas ele absolutamente voluntrio e limitado a um pequeno
nmero de rebanho; que na sua abrangncia essencialmente ineficaz no controle desta
enfermidade. Temos uma tendncia a pensar que a doena de Johne uma doena de
bovinos, ignorando outras categorias animais.
Doena de Johne no uma doena limitada a bovinos; ela causa problemas em
bubalinos, ovinos, caprinos, animais silvestre, exticos e ainda risco a Sade Pblica. A
pecuria o principal foco de ateno porque ela a principal atividade pecuria e, alm
disso, a maioria do conhecimento est baseada nesta espcie, por que o manejo de fcil
controle e modificao ou porque a industria tem interesse.
Existe uma imensa carncia com relao aos estudos nacionais sobre a
paratuberculose, envolvendo o ambiente, o agente e os diferentes hospedeiros. A
paratuberculose bovina nos bovinos leiteiros mais outro desafio sanitrio brasileiro.
Atualmente, no Brasil, no h nenhum estudo slido sobre essa enfermidade em outros
ruminantes domsticos (ovinos e caprinos) ou silvestres, alem de muitas outras espcies
susceptveis infeco causada pelo Map. Existe uma gama de novas e grandes
oportunidades, abrangendo o ensino a pesquisa e a extenso sobre doena de Johne, no
Brasil.
particular luz da nova atitude para com as zoonoses causadas pelos alimentos na era psBSE. Os relatrios da Food Standards Agency e o da Unio Europia indicaram a
necessidade de realizar a vigilncia para o Map. A FSA estabeleceu um programa de
vigilncia com o propsito de determinar os nveis de Map no leite cru e tambm para
determinar se o Mapa sobrevive aos tratamentos trmicos atualmente empregados em
fbricas de laticnios de pasteurizao de leite lquido. Este trabalho concluiu que vivel o
Map ser isolado ocasionalmente no leite de vaca pasteurizado e comercializado no RU. H
um nmero de opes possveis para o controle de Map quando pasteurizao. Uma opo
alterar o tempo / temperatura utilizada na pasteurizao, incluindo o ponto de inativao
da peroxidase. Isto resultaria na destruio de algumas propriedades funcionais do leite. A
separao dos grumos formados pelos Map antes do processo de pasteurizao pode ser
uma opo importante j que a o processo de aderncia uns aos outros confere proteo
trmica. No entanto, a fora de cisalhamento e a velocidade de reagregao, se houver, so
desconhecidas.
A literatura sobre o envolvimento do Map na etiologia da DC contraditria. O uso
de sondas genticas e a tcnica da PCR aplicadas em vrios estudos tm indicado a
presena de micobactrias e, entre elas, a presena do Map. Entretanto outros estudos no
foram capazes de confirmarem esses resultados. Dados conflitantes tm sido publicados,
utilizando tcnicas sorolgicas. O isolamento do Map em amostras de tecidos lesionados de
pacientes com DC provou ser extremamente difcil, especialmente pela baixa freqncia ou
pela presena de formas bacterianas alteradas ou esferoblastos. O envolvimento etiolgico
do Map na DC tem sido extensivamente revisado por vrios autores nas ultimas dcadas e,
essas revises refletem que uma resposta definitiva ainda no h.
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