Repblica Bolivariana de Venezuela.

Ministerio del Poder Popular para la Educacin.

Pre Mdico.
Barinas Obispos.

CIDO DESOXIRRIBONUCLEICO.

Profesor:
Dr. Hctor C.

Bachiller:
Karelis Gonzlez.

Diciembre 2014.

cido Desoxirribonucleico.
El cido desoxirribonucleico, abreviado como ADN, es un cido
nucleico que contiene instrucciones genticas usadas en el desarrollo y
funcionamiento de todos los organismos vivos conocidos y algunos virus,
y es responsable de su transmisin hereditaria. La funcin principal de la
molcula de ADN es el almacenamiento a largo plazo de informacin.
Muchas veces, el ADN es comparado con un plano o una receta, o
un cdigo, ya que contiene las instrucciones necesarias para construir
otros componentes de las clulas, como las protenas y las molculas de
ARN. Los segmentos de ADN que llevan esta informacin gentica son
llamados genes, pero las otras secuencias de ADN tienen propsitos
estructurales o toman parte en la regulacin del uso de esta informacin
gentica.
Desde el punto de vista qumico, el ADN es un polmero de nucletidos,
es decir, un polinucletido. Un polmero es un compuesto formado por
muchas unidades simples conectadas entre s, como si fuera un
largo tren formado por vagones. En el ADN, cada vagn es
un nucletido, y cada nucletido, a su vez, est formado por un azcar
(la
desoxirribosa),
una base
nitrogenada (que
puede
ser adeninaA, timinaT, citosinaC o guaninaG) y un grupo
fosfato que acta como enganche de cada vagn con el siguiente. Lo
que distingue a un vagn (nucletido) de otro es, entonces, la base
nitrogenada, y por ello la secuencia del ADN se especifica nombrando
slo la secuencia de sus bases. La disposicin secuencial de estas
cuatro bases a lo largo de la cadena (el ordenamiento de los cuatro tipos
de vagones a lo largo de todo el tren) es la que codifica la informacin
gentica:
por
ejemplo,
una
secuencia
de
ADN
puede
ser ATGCTAGATCGC... En los organismos vivos, el ADN se presenta
como una doble cadena de nucletidos, en la que las dos hebras estn
unidas entre s por unas conexiones denominadas puentes de
hidrgeno.
Para que la informacin que contiene el ADN pueda ser utilizada por la
maquinaria celular, debe copiarse en primer lugar en unos trenes de
nucletidos, ms cortos y con unas unidades diferentes, llamados ARN.
Las molculas de ARN se copian exactamente del ADN mediante un

proceso denominado transcripcin. Una vez procesadas en el ncleo

celular, las molculas de ARN pueden salir al citoplasma para su
utilizacin posterior. La informacin contenida en el ARN se interpreta
usando el cdigo gentico, que especifica la secuencia de
los aminocidos de las protenas, segn una correspondencia de un
triplete de nucletidos (codn) para cada aminocido. Esto es, la
informacin gentica (esencialmente: qu protenas se van a producir en
cada momento del ciclo de vida de una clula) se halla codificada en las
secuencias de nucletidos del ADN y debe traducirse para poder
funcionar. Tal traduccin se realiza usando el cdigo gentico a modo de
diccionario. El diccionario "secuencia de nucletido-secuencia de
aminocidos" permite el ensamblado de largas cadenas de aminocidos
(las protenas) en el citoplasma de la clula. Por ejemplo, en el caso de
la secuencia de ADN indicada antes (ATGCTAGATCGC...), la
ARN polimerasa utilizara como molde la cadena complementaria de
dicha secuencia de ADN (que sera TAC-GAT-CTA-GCG-...) para
transcribir una molcula de ARNm que se leera AUG-CUA-GAUCGC-... ; el ARNm resultante, utilizando el cdigo gentico, se traducira
como la secuencia de aminocidos metionina-leucina-cido asprticoarginina-...
Las secuencias de ADN que constituyen la unidad fundamental, fsica y
funcional de la herencia se denominan genes. Cada gen contiene una
parte que se transcribe a ARN y otra que se encarga de definir cundo y
dnde deben expresarse. La informacin contenida en los genes
(gentica) se emplea para generar ARN y protenas, que son los
componentes bsicos de las clulas, los "ladrillos" que se utilizan para la
construccin de los orgnulos u organelos celulares, entre otras
funciones.
Dentro de las clulas, el ADN est organizado en estructuras
llamadas cromosomas que, durante el ciclo celular, se duplican antes de
que
la
clula
se divida.
Los organismos
eucariotas (por
ejemplo, animales, plantas, y hongos) almacenan la mayor parte de su
ADN dentro del ncleo celular y una mnima parte en elementos
celulares llamados mitocondrias, y en los plastos y los centros
organizadores de microtbulos ocentrolos, en caso de tenerlos;
los organismos procariotas (bacterias y arqueas) lo almacenan en
el citoplasma de la clula, y, por ltimo, los virus ADN lo hacen en el

interior de la cpsida de naturaleza proteica. Existen multitud de

protenas, como por ejemplo las histonas y los factores de transcripcin,
que se unen al ADN dotndolo de una estructura tridimensional
determinada
y
regulando
su
expresin.
Los factores
de
transcripcin reconocen secuencias reguladoras del ADN y especifican
la pauta de transcripcin de los genes. El material gentico completo de
una dotacin cromosmica se denomina genoma y, con pequeas
variaciones, es caracterstico de cada especie.
Historia de la gentica
El ADN lo aisl por primera vez, durante el invierno de 1869, el
mdico suizo Friedrich Miescher mientras trabajaba en la Universidad de
Tubinga. Miescher realizaba experimentos acerca de la composicin
qumica del pus de vendas quirrgicas desechadas cuando not un
precipitado de una sustancia desconocida que caracteriz qumicamente
ms tarde.2 3 Lo llam nuclena, debido a que lo haba extrado a partir
de ncleos celulares.4 Se necesitaron casi 70 aos de investigacin para
poder identificar los componentes y la estructura de los cidos nucleicos.
En 1919 Phoebus Levene identific que un nucletido est formado por
una base nitrogenada, un azcar y un fosfato.5 Levene sugiri que el
ADN generaba una estructura con forma de solenoide (muelle) con
unidades de nucletidos unidos a travs de los grupos fosfato. En 1930
Levene y su maestro Albrecht Kossel probaron que la nuclena de
Miescher es un cido desoxirribonucleico (ADN) formado por cuatro
bases nitrogenadas (citosina (C), timina (T), adenina (A) y guanina (G)),
el azcar desoxirribosa y un grupo fosfato, y que, en
su estructura bsica, el nucletido est compuesto por un azcar unido a
la base y al fosfato.6 Sin embargo, Levene pensaba que la cadena era
corta y que las bases se repetan en un orden fijo. En 1937 William
Astbury produjo el primer patrn de difraccin de rayos X que mostraba
que el ADN tena una estructura regular.7
La funcin biolgica del ADN comenz a dilucidarse en 1928, con una
serie bsica de experimentos de la gentica moderna realizados
por Frederick Griffith, quien estaba trabajando con cepas "lisas" (S) o
"rugosas" (R) de la bacteria Pneumococcus (causante de la neumona),
segn la presencia (S) o no (R) de una cpsula azucarada, que es la que

confiere virulencia (vase tambin experimento de Griffith). La inyeccin

de neumococos S vivos en ratones produce la muerte de stos, y Griffith
observ que, si inyectaba ratones con neumococos R vivos o con
neumococos S muertos por calor, los ratones no moran. Sin embargo, si
inyectaba a la vez neumococos R vivos y neumococos S muertos, los
ratones moran, y en su sangre se podan aislar neumococos S vivos.
Como las bacterias muertas no pudieron haberse multiplicado dentro del
ratn, Griffith razon que deba producirse algn tipo de cambio o
transformacin de un tipo bacteriano a otro por medio de una
transferencia de alguna sustancia activa, que denomin principio
transformante. Esta sustancia proporcionaba la capacidad a los
neumococos R de producir una cpsula azucarada y transformarse as
en virulentas. En los siguientes 15 aos, estos experimentos iniciales se
replicaron mezclando distintos tipos de cepas bacterianas muertas por el
calor con otras vivas, tanto en ratones (in vivo) como en tubos de ensayo
(in vitro). La bsqueda del factor transformante que era capaz de
hacer virulentas a cepas que inicialmente no lo eran continu hasta
1944, ao en el cual Oswald Avery,Colin MacLeod y Maclyn
McCarty realizaron un experimento hoy clsico. Estos investigadores
extrajeron la fraccin activa (el factor transformante) y, mediante anlisis
qumicos, enzimticos y serolgicos, observaron que no contena
protenas, ni lpidos no ligados, ni polisacridos activos, sino que estaba
constituido principalmente por "una forma viscosa de cido
desoxirribonucleico altamente polimerizado", es decir, ADN. El ADN
extrado de las cepas bacterianas S muertas por el calor lo mezclaron "in
vitro" con cepas R vivas: el resultado fue que se formaron colonias
bacterianas S, por lo que se concluy inequvocamente que el factor o
principio transformante era el ADN.9
A pesar de que la identificacin del ADN como principio transformante
an tard varios aos en ser universalmente aceptada, este
descubrimiento fue decisivo en el conocimiento de la base molecular de
la herencia, y constituye el nacimiento de la gentica molecular.
Finalmente, el papel exclusivo del ADN en la heredabilidad fue
confirmado
en 1952 mediante
los
experimentos
de Alfred
Hershey y Martha Chase, en los cuales comprobaron que el fago
T2 transmita su informacin gentica en su ADN, pero no en su
protena10 (vase tambin experimento de Hershey y Chase).

En cuanto a la caracterizacin qumica de la molcula, en

1940 Chargaff realiz algunos experimentos que le sirvieron para
establecer las proporciones de las bases nitrogenadas en el ADN.
Descubri que las proporciones de purinas eran idnticas a las de
pirimidinas, la "equimolecularidad" de las bases ([A]=[T], [G]=[C]) y el
hecho de que la cantidad de G+C en una determinada molcula de ADN
no siempre es igual a la cantidad de A+T y puede variar desde el 36
hasta el 70 por ciento del contenido total. 6 Con toda esta informacin y
junto con los datos de difraccin de rayos X proporcionados por Rosalind
Franklin, James Watson y Francis Crick propusieron en 1953 el modelo
de la doble hlice de ADN para representar la estructura tridimensional
del polmero.11 En una serie de cinco artculos en el mismo nmero
de Nature se public la evidencia experimental que apoyaba el modelo
de Watson y Crick.12 De stos, el artculo de Franklin y Raymond
Gosling fue la primera publicacin con datos de difraccin de rayos Xque
apoyaba el modelo de Watson y Crick, 13 14 y en ese mismo nmero
de Nature tambin apareca un artculo sobre la estructura del ADN
de Maurice Wilkins y sus colaboradores.15
Watson, Crick y Wilkins recibieron conjuntamente, en 1962, despus de
la muerte de Rosalind Franklin, el Premio Nobel en Fisiologa o
Medicina.16 Sin embargo, el debate contina sobre quin debera recibir
crdito por el descubrimiento.
Propiedades fsicas y qumicas
El ADN es un largo polmero formado por unidades repetitivas,
los nucletidos.18 19 Una doble cadena de ADN mide de 22 a
26 angstroms (2,2 a 2,6 nanmetros) de ancho, y una unidad (un
nucletido) mide 3,3 (0,33 nm) de largo. 20 Aunque cada unidad
individual que se repite es muy pequea, los polmeros de ADN pueden
ser molculas enormes que contienen millones de nucletidos. Por
ejemplo, el cromosoma humano ms largo, el cromosoma nmero 1,
tiene aproximadamente 220 millones de pares de bases.
En los organismos vivos, el ADN no suele existir como una molcula
individual, sino como una pareja de molculas estrechamente asociadas.
Las dos cadenas de ADN se enroscan sobre s mismas formando una
especie de escalera de caracol, denominada doble hlice. El modelo de

estructura en doble hlice fue propuesto en 1953 por ames

Watson y Francis Crick (el artculo Molecular Structure of Nucleic Acids:
A Structure for Deoxyribose Nucleic Acid fue publicado el 25 de
abril de 1953 en Nature), despus de obtener una imagen de la
estructura de doble hlice gracias a la refraccin por rayos X hecha
por Rosalind Franklin.22 El xito de este modelo radicaba en su
consistencia con las propiedades fsicas y qumicas del ADN. El estudio
mostraba adems que la complementariedad de bases poda ser
relevante en su replicacin, y tambin la importancia de la secuencia de
bases como portadora de informacin gentica. 23 24 25 Cada unidad que
se repite, el nucletido, contiene un segmento de la estructura de
soporte (azcar + fosfato), que mantiene la cadena unida, y una base,
que interacciona con la otra cadena de ADN en la hlice. En general,
una base ligada a un azcar se denomina nuclesido y una base ligada
a un azcar y a uno o ms grupos fosfatos reciben el nombre
de nucletido.
Cuando muchos nucletidos se encuentran unidos, como ocurre en el
ADN, el polmero resultante se denomina polinucletido.
Componentes
Estructura de soporte: La estructura de soporte de una hebra
de ADN est
formada
por
unidades
alternas
de
grupos fosfato y azcar (desoxirribosa). El azcar en el ADN es una
pentosa, concretamente, la desoxirribosa.

cido fosfrico:
Su frmula qumica es H3PO4. Cada nucletido puede contener uno
(monofosfato: AMP), dos (difosfato: ADP) o tres (trifosfato:ATP) grupos
de cido fosfrico, aunque como monmeros constituyentes de
los cidos nucleicos slo aparecen en forma de nuclesidos
monofosfato.
Desoxirribosa:
Es un monosacrido de 5 tomos de carbono (una pentosa) derivado de
la ribosa, que forma parte de la estructura de nucletidos del ADN. Su
frmula es C5H10O4. Una de las principales diferencias entre el ADN y
el ARN es el azcar, pues en el ARN la 2-desoxirribosa del ADN es
reemplazada por una pentosa alternativa, la ribosa.25

Las molculas de azcar se unen entre s a travs de grupos fosfato,

que forman enlaces fosfodister entre los tomos de carbono tercero (3,
tres prima) y quinto (5, cinco prima) de dos anillos adyacentes de
azcar. La formacin de enlaces asimtricos implica que cada hebra de
ADN tiene una direccin. En una doble hlice, la direccin de
los nucletidos en una hebra (3 5) es opuesta a la direccin en la
otra hebra (5 3). Esta organizacin de las hebras de ADN se
denomina antiparalela; son cadenas paralelas, pero con direcciones
opuestas. De la misma manera, los extremos asimtricos de las hebras
de ADN se denominan extremo 5 (cinco prima) y extremo 3 (tres
prima), respectivamente.
Bases nitrogenadas:
Las cuatro bases nitrogenadas mayoritarias que se encuentran en
el ADN son la adenina (A), la citosina (C), la guanina (G) y la timina (T).
Cada una de estas cuatro bases est unida al armazn de azcarfosfato a travs del azcar para formar el nucletido completo (baseazcar-fosfato).
Las
bases
son compuestos
heterocclicos y aromticos con dos o ms tomos de nitrgeno, y,
dentro de las bases mayoritarias, se clasifican en dos grupos: las bases
pricas o purinas (adenina y guanina), derivadas de la purina y formadas
por dos anillos unidos entre s, y las bases pirimidnicas o bases
pirimdicas o pirimidinas (citosina y timina), derivadas de la pirimidina y
con un solo anillo.25 En los cidos nucleicos existe una quinta base
pirimidnica, denominada uracilo (U), que normalmente ocupa el lugar de
la timina en el ARN y difiere de sta en que carece de un grupo metilo en
su anillo. El uracilo no se encuentra habitualmente en el ADN, slo
aparece raramente como un producto residual de la degradacin de la
citosina por procesos de desaminacin oxidativa.
Timina:
En el cdigo gentico se representa con la letra T. Es un derivado
pirimidnico con un grupo oxo en las posiciones 2 y 4, y un grupo
metil en la posicin 5. Forma el nuclesido timidina (siempre
desoxitimidina,
ya
que
slo
aparece
en
el
ADN)
y
el nucletido timidilato o timidina monofosfato (dTMP). En el ADN, la
timina siempre se empareja con la adenina de la cadena complementaria
mediante 2 puentes de hidrgeno, T=A. Su frmula qumica es
C5H6N2O2 y su nomenclatura 2, 4-dioxo, 5-metilpirimidina.
Citosina:
En el cdigo gentico se representa con la letra C. Es un derivado
pirimidnico, con un grupo amino en posicin 4 y un grupo oxo en
posicin 2. Forma el nuclesido citidina (desoxicitidina en el ADN) y

el nucletido citidilato o (desoxi)citidina monofosfato (dCMP en el ADN,

CMP en el ARN). La citosina siempre se empareja en el ADN con la
guanina de la cadena complementaria mediante un triple enlace, CG.
Su frmula qumica es C4H5N3O y su nomenclatura 2-oxo, 4
aminopirimidina. Su masa molecular es de 111,10 unidades de masa
atmica. La citosina se descubri en 1894, al aislarla del tejido
del timo de carnero.
Adenina:
En el cdigo gentico se representa con la letra A. Es un derivado de la
purina con un grupo amino en la posicin 6. Forma el
nuclesido adenosina (desoxiadenosina
en
el
ADN)
y
el
nucletido adenilato o (desoxi)adenosina monofosfato (dAMP, AMP). En
el ADN siempre se empareja con la timina de la cadena complementaria
mediante 2 puentes de hidrgeno, A=T. Su frmula qumica es C 5H5N5 y
su nomenclatura 6-aminopurina. La adenina, junto con la timina, fue
descubierta en 1885 por el mdico alemn Albrecht Kossel.
Guanina:
En el cdigo gentico se representa con la letra G. Es un derivado prico
con un grupo oxo en la posicin 6 y un grupo amino en la posicin 2.
Forma el nuclesido (desoxi)guanosina y el nucletido guanilato o
(desoxi)guanosina monofosfato (dGMP, GMP). La guanina siempre
se empareja en el ADN con la citosina de la cadena complementaria
mediante tres enlaces de hidrgeno, GC. Su frmula qumica es
C5H5N5O y su nomenclatura 6-oxo, 2-aminopurina.
Tambin existen otras bases nitrogenadas (las llamadas bases
nitrogenadas minoritarias), derivadas de forma natural o sinttica de
alguna otra base mayoritaria. Lo son por ejemplo la hipoxantina,
relativamente abundante en el tRNA, o la cafena, ambas derivadas de la
adenina; otras, como el aciclovir, derivadas de la guanina, son anlogos
sintticos usados en terapia antiviral; otras, como una de las derivadas
del uracilo, son antitumorales.
Las bases nitrogenadas tienen una serie de caractersticas que les
confieren unas propiedades determinadas. Una caracterstica importante
es su carcter aromtico, consecuencia de la presencia en el anillo de
dobles enlaces en posicin conjugada. Ello les confiere la capacidad de
absorber luz en la zona ultravioleta del espectro en torno a los 260 nm,
lo cual puede aprovecharse para determinar el coeficiente de
extincin del ADN y hallar la concentracin existente de los cidos

nucleicos.
Otra
de
sus
caractersticas
es
que
presentan tautomera o isomera de grupos funcionales, debido a que un
tomo de hidrgeno unido a otro tomo puede migrar a una posicin
vecina; en las bases nitrogenadas se dan dos tipos de tautomeras:
tautomera lactama-lactima, donde el hidrgeno migra del nitrgeno
al oxgeno del grupo oxo (forma lactama) y viceversa (forma lactima), y
tautomera imina-amina primaria, donde el hidrgeno puede estar
formando el grupo amina (forma amina primaria) o migrar al nitrgeno
adyacente (forma imina). La adenina slo puede presentar tautomera
amina-imina, la timina y el uracilo muestran tautomera doble lactamalactima, y la guanina y citosina pueden presentar ambas. Por otro lado, y
aunque se trate de molculas apolares, las bases nitrogenadas
presentan suficiente carcter polar como para establecer puentes de
hidrgeno, ya que tienen tomos muy electronegativos (nitrgeno y
oxgeno) que presentan carga parcial negativa, y tomos de hidrgeno
con carga parcial positiva, de manera que se forman dipolos que
permiten que se formen estos enlaces dbiles.
Se estima que el genoma humano haploide tiene alrededor de 3000
millones de pares de bases. Para indicar el tamao de las molculas de
ADN se indica el nmero de pares de bases, y como derivados hay dos
unidades de medida muy utilizadas, la kilobase (kb), que equivale a 1000
pares de bases, y la megabase (Mb), que equivale a un milln de pares
de bases.
Apareamiento de bases
La dble hlice de ADN se mantiene estable mediante la formacin
de puentes de hidrgeno entre las bases asociadas a cada una de las
dos hebras. Para la formacin de un enlace de hidrgeno una de las
bases debe presentar un "donador" de hidrgenos con un tomo de
hidrgeno con carga parcial positiva (-NH 2 o -NH) y la otra base debe
presentar un grupo "aceptor" de hidrgenos con un tomo
cargado electronegativamente (C=O o N). Los puentes de hidrgeno son
uniones ms dbiles que los tpicos enlaces qumicos covalentes, como
los que conectan los tomos en cada hebra de ADN, pero ms fuertes
que interacciones hidrfobas individuales, enlaces de Van der Waals,
etc. Como los puentes de hidrgeno no son enlaces covalentes, pueden
romperse y formarse de nuevo de forma relativamente sencilla. Por esta

razn, las dos hebras de la doble hlice pueden separarse como una
cremallera, bien por fuerza mecnica o por alta temperatura.28 La doble
hlice se estabiliza adems por el efecto hidrofbico y el apilamiento,
que no se ven influidos por la secuencia de bases del ADN. 29
Cada tipo de base en una hebra forma un enlace nicamente con un tipo
de base en la otra hebra, lo que se denomina complementariedad de las
bases. As, las purinas forman enlaces con las pirimidinas, de forma que
A se enlaza slo con T, y C slo con G. La organizacin de dos
nucletidos apareados a lo largo de la doble hlice se
denomina apareamiento de bases. Este emparejamiento corresponde a
la observacin ya realizada por Erwin Chargaff (1905-2002),30 que
mostr que la cantidad de adenina era muy similar a la cantidad de
timina, y que la cantidad de citosina era igual a la cantidad de guanina
en el ADN. Como resultado de esta complementariedad, toda la
informacin contenida en la secuencia de doble hebra de la hlice de
ADN est duplicada en cada hebra, lo cual es fundamental durante el
proceso de replicacin del ADN. En efecto, esta interaccin reversible y
especfica entre pares de bases complementarias es crtica para todas
las funciones del ADN en los organismos vivos.
Como se ha indicado anteriormente, los dos tipos de pares de bases
forman un nmero diferente de enlaces de hidrgeno: A=T forman dos
puentes de hidrgeno, y CG forman tres puentes de hidrgeno (ver
imgenes). El par de bases GC es por tanto ms fuerte que el par de
bases AT. Como consecuencia, tanto el porcentaje de pares de bases
GC como la longitud total de la doble hlice de ADN determinan la fuerza
de la asociacin entre las dos hebras de ADN. Las dobles hlices largas
de ADN con alto contenido en GC tienen hebras que interaccionan ms
fuertemente que las dobles hlices cortas con alto contenido en AT.31 Por
esta razn, las zonas de la doble hlice de ADN que necesitan separarse
fcilmente tienden a tener un alto contenido en AT, como por ejemplo la
secuencia TATAAT de la caja de Pribnow de algunos promotores.32 En el
laboratorio, la fuerza de esta interaccin puede medirse buscando la
temperatura requerida para romper los puentes de hidrgeno,
la temperatura de fusin (tambin denominado valor Tm, del
ingls melting temperature). Cuando todas las pares de bases en una
doble hlice se funden, las hebras se separan en solucin en dos hebras
completamente independientes. Estas molculas de ADN de hebra

simple no tienen una nica forma comn, sino que algunas

conformaciones son ms estables que otras.33
Otros tipos de pares de bases
Existen diferentes tipos de pares de bases que se pueden formar segn
el modo como se forman los puentes de hidrgeno. Los que se observan
en la doble hlice de ADN son los llamados pares de bases WatsonCrick, pero tambin existen otros posibles pares de bases, como los
denominados Hoogsteen y Wobble u oscilante, que pueden aparecer en
circunstancias particulares. Adems, para cada tipo existe a su vez el
mismo par reverso, es decir, el que se da si se gira la base pirimidnica
180 sobre su eje.

Watson-Crick (pares de bases de la doble hlice): los grupos de la

base prica que intervienen en el enlace de hidrgeno son los que
corresponden a las posiciones 1 y 6 (N aceptor y -NH 2 donador si la
purina es una A) y los grupos de la base pirimidnica, los que se
encuentran en las posiciones 3 y 4 (-NH donador y C=O aceptor si la
pirimidina es una T). En el par de bases Watson-Crick reverso
participaran los grupos de las posiciones 2 y 3 de la base
pirimidnica.

Hoogsteen: en este caso cambian los grupos de la base prica,

que ofrece una cara diferente (posiciones 6 y 7) y que forman
enlaces con los grupos de las pirimidinas de las posiciones 3 y 4
(como en Watson-Crick). Tambin puede haber Hoogsteen reversos.
Con este tipo de enlace pueden unirse A=U (Hoogsteen y Hoogsteen
reverso) y A=C (Hoogsteen reverso).

Wobble u oscilante: este tipo de enlace permite que se unan

guanina y citosina con un doble enlace (G=T). La base prica (G)
forma enlace con los grupos de las posiciones 1 y 6 (como en
Watson-Crick) y la pirimidina (T) con los grupos de las posiciones 2 y
3. Este tipo de enlace no funcionara con A=C, ya que quedaran
enfrentados los 2 aceptores y los 2 donadores, y slo se podra dar
en el caso inverso. Encontramos pares de bases de tipo oscilante en
el ARN, durante el apareamiento de codn y anticodn. Con este
tipo de enlace pueden unirse G=U (oscilante y oscilante reverso) y
A=C (oscilante reverso).

En total, en su forma tautomrica mayoritaria, existen 28 posibles pares

de bases nitrogenadas: 10 posibles pares de bases purina-pirimidina (2
pares Watson-Crick y 2 Watson Crick reverso, 1 par Hoogsteen y 2
pares Hoogsteen reverso, 1 par oscilante y 2 pares oscilante reverso), 7
pares homo purina-purina (A=A, G=G), 4 pares A=G y 7 pares pirimidinapirimidina. Esto sin contar con los pares de bases que pueden formarse
si tambin tenemos en cuenta las otras formas tautomricas minoritarias
de las bases nitrogenadas; stos, adems, pueden ser responsables
de mutaciones puntuales por sustitucin de tipo transicin.
Estructura
El ADN es una molcula bicatenaria, es decir, est formada por dos
cadenas dispuestas de forma antiparalela y con las bases nitrogenadas
enfrentadas. En su estructura tridimensional, se distinguen distintos
niveles:
1.

2.

Estructura primaria:
Secuencia de nucletidos encadenados. Es en estas
cadenas donde se encuentra la informacin gentica, y dado que el
esqueleto es el mismo para todos, la diferencia de la informacin
radica en la distinta secuencia de bases nitrogenadas. Esta
secuencia presenta un cdigo, que determina una informacin u
otra, segn el orden de las bases.
Estructura secundaria:

Es una estructura en doble hlice. Permite explicar el

almacenamiento de la informacin gentica y el mecanismo de
duplicacin del ADN. Fue postulada por Watson y Crick, basndose
en la difraccin de rayos X que haban realizado Franklin y Wilkins, y
en la equivalencia de bases de Chargaff, segn la cual la suma de
adeninas ms guaninas es igual a la suma de timinas ms citosinas.

Es una cadena doble, dextrgira o levgira, segn el tipo

de ADN. Ambas cadenas son complementarias, pues la adenina y la
guanina de una cadena se unen, respectivamente, a la timina y la
citosina de la otra. Ambas cadenas son antiparalelas, pues el
extremo 3 de una se enfrenta al extremo 5 de la homloga.

3.

Existen tres modelos de ADN. El ADN de tipo B es el ms

abundante y es el que tiene la estructura descrita por Watson y
Crick.
Estructura terciaria:
Se refiere a cmo se almacena el ADN en un espacio
reducido, para formar los cromosomas. Vara segn se trate de
organismos procariotas o eucariotas:

1. En procariotas el ADN se pliega como una sper-hlice,

generalmente en forma circular y asociada a una pequea cantidad
de protenas. Lo mismo ocurre en orgnulos celulares como
las mitocondrias y en los cloroplastos.
2. En eucariotas, dado que la cantidad de ADN de cada cromosoma es
muy grande, el empaquetamiento ha de ser ms complejo y
compacto; para ello se necesita la presencia de protenas, como
las histonas y otras protenas de naturaleza no histnica (en
los espermatozoides estas protenas son las protaminas).34
4. Estructura cuaternaria:

La cromatina presente en el ncleo tiene un grosor de 300 ,

pues la fibra de cromatina de 100 se enrolla formando una fibra de
cromatina de 300 . El enrollamiento de los nucleosomas recibe el
nombre de solenoide. Dichos solenoides se enrollan formando la
cromatina del ncleo interfsico de la clula eucariota. Cuando la
clula entra en divisin, el ADN se compacta ms, formando as
los cromosomas.
Estructuras en doble hlice
El ADN existe en muchas conformaciones. 27 Sin embargo, en
organismos vivos slo se han observado las conformaciones ADNA, ADN-B y ADN-Z. La conformacin que adopta el ADN depende de su
secuencia, la cantidad y direccin de superenrollamiento que presenta,
la presencia de modificaciones qumicas en las bases y las condiciones
de
la
solucin,
tales
como
la
concentracin
de iones de metalesy poliaminas. De las tres conformaciones, la forma
"B" es la ms comn en las condiciones existentes en las clulas. 37 Las
dos dobles hlices alternativas del ADN difieren en su geometra y
dimensiones.

La forma "A" es una espiral que gira hacia la derecha, ms amplia que la
"B", con una hendidura menor superficial y ms amplia, y una hendidura
mayor ms estrecha y profunda. La forma "A" ocurre en condiciones no
fisiolgicas en formas deshidratadas de ADN, mientras que en la clula
puede producirse en apareamientos hbridos de hebras ADN-ARN,
adems de en complejos enzima-ADN.38 39
Los segmentos de ADN en los que las bases han sido modificadas
por metilacin pueden sufrir cambios conformacionales mayores y
adoptar la forma "Z". En este caso, las hebras giran alrededor del eje de
la hlice en una espiral que gira a mano izquierda, lo opuesto a la forma
"B" ms frecuente.40 Estas estructuras poco frecuentes pueden ser
reconocidas por protenas especficas que se unen a ADN-Z y
posiblemente estn implicadas en la regulacin de la transcripcin.
Estructuras en cudruplex
En los extremos de los cromosomas lineales existen regiones
especializadas de ADN denominadas telmeros. La funcin principal de
estas regiones es permitir a la clula replicar los extremos cromosmicos
utilizando la enzima telomerasa, puesto que las enzimas que replican el
resto del ADN no pueden copiar los extremos 3' de los
cromosomas.43 Estas terminaciones cromosmicas especializadas
tambin protegen los extremos del ADN, y evitan que los sistemas de
reparacin del ADN en la clula los procesen como ADN daado que
debe ser corregido.44 En las clulas humanas, los telmeros son largas
zonas de ADN de hebra sencilla que contienen algunos miles de
repeticiones de una nica secuencia TTAGGG. 45
Estas secuencias ricas en guanina pueden estabilizar los extremos
cromosmicos mediante la formacin de estructuras de juegos apilados
de unidades de cuatro bases, en lugar de los pares de bases
encontrados normalmente en otras estructuras de ADN. En este caso,
cuatro bases guanina forman unidades con superficie plana que se
apilan una sobre otra, para formar una estructura cudruple-G
estable.46 Estas estructuras se estabilizan formando puentes de
hidrgeno entre los extremos de las bases y la quelatacin de un metal
inico en el centro de cada unidad de cuatro bases. 47 Tambin se
pueden formar otras estructuras, con el juego central de cuatro bases

procedente, o bien de una hebra sencilla plegada alrededor de las

bases, o bien de varias hebras paralelas diferentes, de forma que cada
una contribuye con una base a la estructura central.
Adems de estas estructuras apiladas, los telmeros tambin forman
largas estructuras en lazo, denominadas lazos telomricos o lazos-T (Tloops en ingls). En este caso, las hebras simples de ADN se enroscan
sobre s mismas en un amplio crculo estabilizado por protenas que se
unen a telmeros.48 En el extremo del lazo T, el ADN telomrico de hebra
sencilla se sujeta a una regin de ADN de doble hebra porque la hebra
de ADN telomrico altera la doble hlice y se aparea a una de las dos
hebras. Esta estructura de triple hebra se denomina lazo de
desplazamiento o lazo D (D-loop).46
Hendiduras mayor y menor
La doble hlice es una espiral dextrgira, esto es, cada una de las
cadenas de nucletidos gira a derechas; esto puede verificarse si nos
fijamos, yendo de abajo a arriba, en la direccin que siguen los
segmentos de las hebras que quedan en primer plano. Si las dos hebras
giran a derechas se dice que la doble hlice es dextrgira, y si giran a
izquierdas, levgira (esta forma puede aparecer en hlices alternativas
debido a cambios conformacionales en el ADN). Pero en la conformacin
ms comn que adopta el ADN, la doble hlice es dextrgira, girando
cada par de bases respecto al anterior unos 36.
Cuando las dos hebras de ADN se enrollan una sobre la otra (sea a
derechas o a izquierdas), se forman huecos o hendiduras entre una
hebra y la otra, dejando expuestos los laterales de las bases
nitrogenadas del interior (ver la animacin). En la conformacin ms
comn que adopta el ADN aparecen, como consecuencia de los ngulos
formados entre los azcares de ambas cadenas de cada par de bases
nitrogenadas, dos tipos de hendiduras alrededor de la superficie de la
doble hlice: una de ellas, la hendidura o surco mayor, que mide
22 (2,2 nm) de ancho, y la otra, la hendidura o surco menor, que mide
12 (1,2 nm) de ancho.51 Cada vuelta de hlice, que es cuando sta ha
realizado un giro de 360 o lo que es lo mismo, de principio de hendidura
mayor a final de hendidura menor, medir por tanto 34 , y en cada una
de esas vueltas hay unos 10,5 pb.

La anchura de la hendidura mayor implica que los extremos de las bases

son ms accesibles en sta, de forma que la cantidad de grupos
qumicos expuestos tambin es mayor lo cual facilita la diferenciacin
entre los pares de bases A-T, T-A, C-G, G-C. Como consecuencia de
ello, tambin se ver facilitado el reconocimiento de secuencias de ADN
por parte de diferentes protenas sin la necesidad de abrir la doble
hlice. As, protenas como los factores de transcripcin que pueden
unirse a secuencias especficas, frecuentemente contactan con los
laterales de las bases expuestos en la hendidura mayor.52 Por el
contrario, los grupos qumicos que quedan expuestos en la hendidura
menor son similares, de forma que el reconocimiento de los pares de
bases es ms difcil; por ello se dice que la hendidura mayor contiene
ms informacin que la hendidura menor.
Sentido y antisentido
Una secuencia de ADN se denomina "sentido" (en ingls, sense) si su
secuencia es la misma que la secuencia de un ARN mensajero que se
traduce en una protena. La secuencia de la hebra de ADN
complementaria se denomina "antisentido" (antisense). En ambas
hebras de ADN de la doble hlice pueden existir tanto
secuencias sentido, que codifican ARNm, como antisentido, que no lo
codifican. Es decir, las secuencias que codifican ARNm no estn todas
presentes en una sola de las hebras, sino repartidas entre las dos
hebras. Tanto en procariotas como en eucariotas se producen ARN con
secuencias antisentido, pero la funcin de esos ARN no est
completamente clara.53 Se ha propuesto que los ARN antisentido estn
implicados en la regulacin de la expresin gnica mediante
apareamiento ARN-ARN: los ARN antisentido se aparearan con los
ARNm complementarios, bloqueando de esta forma su traduccin.54
En unas pocas secuencias de ADN en procariotas y eucariotas (este
hecho es ms frecuente en plsmidos y virus), la distincin entre
hebras sentido y antisentido es ms difusa, debido a que presentan
genes superpuestos.55 En estos casos, algunas secuencias de ADN
tienen una funcin doble, codificando una protena cuando se lee a lo
largo de una hebra, y una segunda protena cuando se lee en la
direccin contraria a lo largo de la otra hebra. En bacterias, esta
superposicin puede estar involucrada en la regulacin de

la transcripcin del gen,56 mientras que en virus los genes superpuestos

aumentan la cantidad de informacin que puede codificarse en sus
diminutos genomas.
Superenrollamiento
El ADN puede retorcerse como una cuerda en un proceso que se
denomina superenrollamiento del ADN(supercoiling, en ingls).
Cuando el ADN est en un estado "relajado", una hebra normalmente
gira alrededor del eje de la doble hlice una vez cada 10,4 pares de
bases, pero si el ADN est retorcido las hebras pueden estar unidas ms
estrechamente o ms relajadamente.58 Si el ADN est retorcido en la
direccin de la hlice, se dice que el superenrollamiento es positivo, y las
bases se mantienen juntas de forma ms estrecha. Si el ADN se
retuerce en la direccin opuesta, el superenrollamiento se llama
negativo, y las bases se alejan. En la naturaleza, la mayor parte del ADN
tiene un ligero superenrollamiento negativo que es producido
por enzimas denominadas topoisomerasas.59 Estas enzimas tambin
son necesarias para liberar las fuerzas de torsin introducidas en las
hebras de ADN durante procesos como la transcripcin y lareplicacin.60
Modificaciones qumicas
Modificaciones de bases del ADN
La expresin de los genes est influenciada por la forma en la que el
ADN est empaquetado en cromosomas, en una estructura
denominada cromatina. Las modificaciones de bases pueden estar
implicadas en el empaquetamiento del ADN: las regiones que presentan
una expresin gnica baja o nula normalmente contienen niveles altos
de metilacin de las bases citosina. Por ejemplo, la metilacin de
citosina produce 5-metil-citosina, que es importante para la inactivacin
delcromosoma X.61 El nivel medio de metilacin vara entre organismos:
el gusano Caenorhabditis elegans carece de metilacin de citosina,
mientras que los vertebrados presentan un nivel alto - hasta 1% de su
ADN contiene 5-metil-citosina.62 A pesar de la importancia de la 5-metilcitosina, sta puede desaminarse para generar una base timina. Las
citosinas metiladas son por tanto particularmente sensibles
a mutaciones.63 Otras modificaciones de bases incluyen la metilacin

de adenina enbacterias y la glicosilacin de uracilo para

"base-J" en kinetoplastos.64 65

producir

la

Dao del ADN

El ADN puede resultar daado por muchos tipos de mutgenos, que
cambian la secuencia del ADN: agentes alquilantes, adems deradiacin
electromagntica de alta energa, como luz ultravioleta y rayos X. El tipo
de dao producido en el ADN depende del tipo de mutgeno. Por
ejemplo, la luz UV puede daar al ADN produciendo dmeros de timina,
que se forman por ligamiento cruzado entre bases pirimidnicas.67 Por
otro lado, oxidantes tales como radicales libres o el perxido de
hidrgeno producen mltiples daos, incluyendo modificaciones de
bases, sobre todo guanina, y roturas de doble hebra (double-strand
breaks).68 En una clula humana cualquiera, alrededor de 500 bases
sufren dao oxidativo cada da.69 70 De estas lesiones oxidativas, las ms
peligrosas son las roturas de doble hebra, ya que son difciles de reparar
y pueden producir mutaciones puntuales, inserciones y deleciones de la
secuencia de ADN, as como translocaciones cromosmicas.71
Muchos mutgenos se posicionan entre dos pares de bases adyacentes,
por lo que se denominan agentes intercalantes. La mayora de los
agentes intercalantes son molculas aromticas y planas, como
el bromuro de etidio, la daunomicina, la doxorubicina y la talidomida.
Para que un agente intercalante pueda integrarse entre dos pares de
bases, stas deben separarse, distorsionando las hebras de ADN y
abriendo la doble hlice. Esto inhibe la transcripcin y la replicacin del
ADN, causando toxicidad y mutaciones. Por ello, los agentes
intercalantes del ADN son a menudo carcingenos: el benzopireno,
las acridinas, la aflatoxina y el bromuro de etidio son ejemplos bien
conocidos.72 73 74 Sin embargo, debido a su capacidad para inhibir la
replicacin y la transcripcin del ADN, estas toxinas tambin se utilizan
en quimioterapia para
inhibir
el
rpido
crecimiento
de
las
75
clulas cancerosas.
El dao en el ADN inicia una respuesta que activa diferentes
mecanismos de reparacin que reconocen lesiones especficas en el
ADN, que son reparadas en el momento para recuperar la secuencia
original del ADN. Asimismo, el dao en el ADN provoca una parada en el

ciclo celular, que conlleva la alteracin de numerosos procesos

fisiolgicos, que a su vez implica sntesis, transporte y degradacin de
protenas (vase tambin Checkpoint de daos en el ADN).
Alternativamente, si el dao genmico es demasiado grande para que
pueda ser reparado, los mecanismos de control inducirn la activacin
de una serie de rutas celulares que culminarn en la muerte celular.
Funciones biolgicas
Las funciones biolgicas del ADN incluyen el almacenamiento de
informacin (genes y genoma), la codificacin de protenas (transcripcin
y traduccin) y su auto-duplicacin (replicacin del ADN) para asegurar
la transmisin de la informacin a las clulas hijas durante la divisin
celular.
Genes y genoma
El ADN se puede considerar como un almacn cuyo contenido es la
informacin (mensaje) necesaria para construir y sostener el organismo
en el que reside, la cual se transmite de generacin en generacin. El
conjunto de informacin que cumple esta funcin en un organismo dado
se denomina genoma, y el ADN que lo constituye, ADN genmico.
El ADN genmico (que se organiza en molculas de cromatina que a su
vez se ensamblan en cromosomas) se encuentra en el ncleo celular de
los eucariotas,
adems
de
pequeas
cantidades
en
las mitocondrias y cloroplastos. En procariotas, el ADN se encuentra en
un cuerpo de forma irregular denominado nucleoide.76
El ADN codificante
La informacin gentica de un genoma est contenida en los genes, y al
conjunto de toda la informacin que corresponde a un organismo se le
denomina su genotipo. Un gen es una unidad de herencia y es una
regin de ADN que influye en una caracterstica particular de un
organismo (como el color de los ojos, por ejemplo). Los genes contienen
un "marco de lectura abierto" (open reading frame) que puede
transcribirse,
adems
de secuencias
reguladoras,
tales
como promotores y enhancers, que controlan la transcripcin del marco
de lectura abierto.

Desde este punto de vista, las obreras de este mecanismo son las
protenas. Estas pueden ser estructurales, como las protenas de
los msculos, cartlagos,
pelo,
etc.,
o funcionales,
como
la hemoglobina o las innumerables enzimas del organismo. La funcin
principal de la herencia es la especificacin de las protenas, siendo el
ADN una especie de plano o receta para producirlas. La mayor parte de
las veces la modificacin del ADN provocar una disfuncin proteica que
dar lugar a la aparicin de alguna enfermedad. Pero en determinadas
ocasiones, las modificaciones podrn provocar cambios beneficiosos
que darn lugar a individuos mejor adaptados a su entorno.
Las aproximadamente treinta mil protenas diferentes en el cuerpo
humano estn constituidas por veinte aminocidos diferentes, y una
molcula de ADN debe especificar la secuencia en que se unen dichos
aminocidos.
En el proceso de elaborar una protena, el ADN de un gen se lee y se
transcribe a ARN. Este ARN sirve como mensajero entre el ADN y
la maquinaria que elaborar las protenas y por eso recibe el nombre
de ARN mensajero o ARNm. El ARN mensajero sirve de molde a la
maquinaria que elabora las protenas, para que ensamble los
aminocidos en el orden preciso para armar la protena.
El dogma central de la biologa molecular estableca que el flujo de
actividad y de informacin era: ADN ARN protena. No obstante, en
la actualidad ha quedado demostrado que este "dogma" debe ser
ampliado, pues se han encontrado otros flujos de informacin: en
algunos organismos (virus de ARN) la informacin fluye de ARN a ADN;
este proceso se conoce como "transcripcin inversa o reversa", tambin
llamada "retrotranscripcin". Adems, se sabe que existen secuencias
de ADN que se transcriben a ARN y son funcionales como tales, sin
llegar a traducirse nunca a protena: son los ARN no codificantes, como
es el caso de los ARN interferentes.34 35
El ADN no codificante
El ADN del genoma de un organismo puede dividirse conceptualmente
en dos: el que codifica las protenas (los genes) y el que no codifica. En
muchas especies, slo una pequea fraccin del genoma codifica
protenas. Por ejemplo, slo alrededor del 1,5% del genoma humano

consiste en exones que codifican protenas (20.000 a 25.000 genes),

mientras que ms del 90% consiste en ADN no codificante. 78
El ADN no codificante (tambin denominado ADN basura o junk DNA)
corresponde a secuencias del genoma que no generan una protena
(procedentes de transposiciones, duplicaciones, translocaciones y
recombinaciones de virus, etc.), incluyendo los intrones. Hasta hace
poco tiempo se pensaba que el ADN no codificante no tena utilidad
alguna, pero estudios recientes indican que eso es inexacto. Entre otras
funciones, se postula que el llamado "ADN basura" regula la expresin
diferencial de los genes.79 Por ejemplo, algunas secuencias tienen
afinidad hacia protenas especiales que tienen la capacidad de unirse al
ADN (como los homeodominios, los complejos receptores de hormonas
esteroides, etc.), con un papel importante en el control de los
mecanismos de trascripcin y replicacin. Estas secuencias se llaman
frecuentemente "secuencias reguladoras", y los investigadores suponen
que slo se ha identificado una pequea fraccin de las que realmente
existen. La presencia de tanto ADN no codificante en genomas
eucariticos y las diferencias en tamao del genoma entre especies
representan un misterio que es conocido como el "enigma del valor de
C".80 Recientemente, un grupo de investigadores de la Universidad de
Yale ha descubierto una secuencia de ADN no codificante que sera la
responsable de que los seres humanos hayan desarrollado la capacidad
de agarrar y/o manipular objetos o herramientas. 81
Por otro lado, algunas secuencias de ADN desempean un papel
estructural en los cromosomas: los telmeros y centrmeros contienen
pocos o ningn gen codificante de protenas, pero son importantes para
estabilizar la estructura de los cromosomas. Algunos genes no codifican
protenas, pero s se transcriben en ARN: ARN ribosmico, ARN de
transferencia y ARN de interferencia (ARNi, que son ARN que bloquean
la expresin de genes especficos). La estructura de intrones y exones
de algunos genes (como los de inmunoglobulinas y protocadherinas) son
importantes por permitir los cortes y empalmes alternativos del pre-ARN
mensajero que hacen posible la sntesis de diferentes protenas a partir
de un mismo gen (sin esta capacidad no existira el sistema inmune, por
ejemplo).
Algunas
secuencias
de
ADN
no
codificante
representan pseudogenes que tienen valor evolutivo, ya que permiten la
creacin de nuevos genes con nuevas funciones. 35 Otros ADN no

codificantes proceden de la duplicacin de pequeas regiones del ADN;

esto tiene mucha utilidad, ya que el rastreo de estas secuencias
repetitivas permite estudios de filogenia.
Transcripcin y traduccin
En un gen, la secuencia de nucletidos a lo largo de una hebra de ADN
se transcribe a un ARN mensajero (ARNm) y esta secuencia a su vez
se traduce a una protena que un organismo es capaz de sintetizar o
"expresar" en uno o varios momentos de su vida, usando la informacin
de dicha secuencia.
La relacin entre la secuencia de nucletidos y la secuencia
de aminocidos de la protena viene determinada por el cdigo gentico,
que se utiliza durante el proceso de traduccin o sntesis de protenas.
La unidad codificadora del cdigo gentico es un grupo de tres
nucletidos (triplete), representado por las tres letras iniciales de las
bases nitrogenadas (por ej., ACT, CAG, TTT). Los tripletes del ADN se
transcriben en sus bases complementarias en el ARN mensajero, y en
este caso los tripletes se denominan codones (para el ejemplo anterior,
UGA, GUC, AAA). En el ribosoma cada codn del ARN mensajero
interacciona con una molcula de ARN de transferencia (ARNt o tRNA)
que contenga el triplete complementario, denominado anticodn. Cada
ARNt porta el aminocido correspondiente al codn de acuerdo con
el cdigo gentico, de modo que el ribosoma va uniendo los
aminocidos para formar una nueva protena de acuerdo con las
"instrucciones" de la secuencia del ARNm. Existen 64 codones posibles,
por lo cual corresponde ms de uno para cada aminocido (por esta
duplicidad de codones se dice que el cdigo gentico es un cdigo
degenerado: no es unvoco); algunos codones indican la terminacin de
la sntesis, el fin de la secuencia codificante; estos codones de
terminacin o codones de parada son UAA, UGA y UAG (en
ingls, nonsense codons ostop codons).34
Replicacin del ADN
La replicacin del ADN es el proceso por el cual se obtienen copias o
rplicas idnticas de una molcula de ADN. La replicacin es
fundamental para la transferencia de la informacin gentica de una
generacin a la siguiente y, por ende, es la base de la herencia. El

mecanismo consiste esencialmente en la separacin de las dos hebras

de la doble hlice, las cuales sirven de molde para la posterior sntesis
de cadenas complementarias a cada una de ellas, que llevar por
nombre ARNm. El resultado final son dos molculas idnticas a la
original. Este tipo de replicacin se denomina semiconservativa debido a
que cada una de las dos molculas resultantes de la duplicacin
presenta una cadena procedente de la molcula "madre" y otra recin
sintetizada.
Hiptesis sobre la duplicacin del ADN
- Semiconservativa: Segn el experimento de Meselson-Stahl, cada
hebra sirve de molde para que se forme una hebra nueva, mediante la
complentariedad de bases, quedando al final dos dobles hlices
formadas por una hebra antigua (molde) y una nueva hebra (copia).
- Conservativa: Tras la duplicacin quedaran las dos hebras antiguas
juntas y, por otro lado, las dos hebras nuevas formando una doble hlice.
- Dispersiva: Segn esta hiptesis, las hebras resultantes estaran
formadas por fragmentos en doble hlice ADN antiguo y ADN recin
sintetizado.
Interacciones ADN-protena
Todas las funciones del ADN dependen de sus interacciones con
protenas. Estas interacciones pueden ser inespecficas, o bien la
protena puede unirse de forma especfica a una nica secuencia de
ADN. Tambin pueden unirse enzimas, entre las cuales son
particularmente importantes las polimerasas, que copian las secuencias
de bases del ADN durante la transcripcin y la replicacin.
Protenas que unen ADN
Interacciones inespecficas
Las protenas estructurales que se unen al ADN son ejemplos bien
conocidos de interacciones inespecficas ADN-protenas. En los
cromosomas, el ADN se encuentra formando complejos con protenas
estructurales. Estas protenas organizan el ADN en una estructura
compacta denominada cromatina. En eucariotas esta estructura implica
la unin del ADN a un complejo formado por pequeas protenas bsicas
denominadas histonas, mientras que en procariotas estn involucradas
una gran variedad de protenas. 82 83 Las histonas forman un complejo de
forma cilndrica denominado nucleosoma, en torno al cual se enrollan
casi dos vueltas de ADN de doble hlice. Estas interacciones

inespecficas quedan determinadas por la existencia de residuos bsicos

en las histonas, que forman enlaces inicos con el esqueleto de azcarfosfato del ADN y, por tanto, son en gran parte independientes de la
secuencia de bases.84 Estos aminocidos bsicos experimentan
modificaciones qumicas de metilacin, fosforilacin y acetilacin, que
alteran la fuerza de la interaccin entre el ADN y las histonas, haciendo
al ADN ms o menos accesible a los factores de transcripcin y por tanto
modificando la tasa de transcripcin.86
Otras protenas que se unen a ADN de manera inespecfica en la
cromatina incluyen las protenas del grupo de alta movilidad (HMG, High
Mobility Group) que se unen a ADN plegado o distorsionado. 87 Estas
protenas son importantes durante el plegamiento de los nucleosomas,
organizndolos en estructuras ms complejas para constituir los
cromosomas88 durante el proceso de condensacin cromosmica. Se ha
propuesto que en este proceso tambin intervendran otras protenas,
formando una especie de "andamio" sobre el cual se organiza la
cromatina; los principales componentes de esta estructura seran la
enzimatopoisomerasa II (topoIIalpha) y la condensina 13S.89 Sin
embargo, el papel estructural de la topoIIalpha en la organizacin de los
cromosomas an es discutido, ya que otros grupos argumentan que esta
enzima se intercambia rpidamente tanto en los brazos cromosmicos
como en los cinetocoros durante la mitosis.
Interacciones especficas
Un grupo bien definido de protenas que unen ADN es el conformado por
las protenas que se unen especficamente a ADN monocatenario o ADN
de hebra sencilla (ssDNA). En humanos, la protena A de replicacin es
la mejor conocida de su familia y acta en procesos en los que la doble
hlice se separa, como la replicacin del ADN, la recombinacin o
la reparacin del ADN.91 Estas protenas parecen estabilizar el ADN
monocatenario, protegindolo para evitar que forme estructuras de tallolazo (stem-loop)o que sea degradado por nucleasas.
Sin embargo, otras protenas han evolucionado para unirse
especficamente a secuencias particulares de ADN. La especificidad de
la interaccin de las protenas con el ADN procede de los mltiples
contactos con las bases de ADN, lo que les permite "leer" la secuencia

del ADN. La mayora de esas interacciones con las bases ocurre en

la hendidura mayor, donde las bases son ms accesibles.
Las protenas especficas estudiadas con mayor detalle son las
encargadas de regular la transcripcin, denominadas por ello factores de
transcripcin. Cada factor de transcripcin se une a una secuencia
concreta de ADN y activa o inhibe la transcripcin de los genes que
presentan estas secuencias prximas a sus promotores. Los factores de
transcripcin pueden efectuar esto de dos formas:

En primer lugar, pueden unirse a la polimerasa de ARN

responsable de la transcripcin, bien directamente o a travs de
otras protenas mediadoras. De esta forma. se estabiliza la unin
entre la ARN polimerasa y el promotor, lo que permite el inicio de la
transcripcin.

En segundo lugar, los factores de transcripcin pueden unirse

a enzimas que modifican las histonas del promotor, lo que altera la
accesibilidad del molde de ADN a la ARN polimerasa.

Como los ADN diana pueden encontrarse por todo el genoma del
organismo, los cambios en la actividad de un tipo de factor de
transcripcin pueden afectar a miles de genes. 96 En consecuencia, estas
protenas son frecuentemente las dianas de los procesos
de transduccin de seales que controlan las respuestas a cambios
ambientales o diferenciacin y desarrollo celular.

Enzimas que modifican el ADN

Nucleasas y ligasas
Las nucleasas son enzimas que cortan
las
hebras
de
ADN
mediante
la catlisis de la hidrlisis de los enlaces
fosfodister.
Las
nucleasas
que
hidrolizan nucletidos a partir de los
extremos de las hebras de ADN se denominanexonucleasas, mientras
que las endonucleasas cortan en el interior de las hebras. Las nucleasas
que se utilizan con mayor frecuencia en biologa molecular son
las enzimas de restriccin, endonucleasas que cortan el ADN por
determinadas secuencias especficas. Por ejemplo, la enzima EcoRV,
que se muestra a la izquierda, reconoce la secuencia de 6 bases 5-GAT|
ATC-3, y hace un corte en ambas hebras en la lnea vertical indicada,
generando dos molculas de ADN con los extremos romos. Otras
enzimas de restriccin generan sin embargo extremos cohesivos, ya que
cortan de forma diferente las dos hebras de ADN. En la naturaleza, estas
enzimas protegen a las bacterias contra las infecciones de fagos, al
digerir el ADN de dicho fago cuando entra a travs de la pared
bacteriana, actuando como un mecanismo de defensa. En biotecnologa,
estas nucleasas especficas de la secuencias de ADN se utilizan
en ingeniera gentica para clonar fragmentos de ADN y en la tcnica
de huella gentica.
Las enzimas denominadas ADN ligasas pueden reunir hebras de ADN
cortadas o rotas. Las ligasas son particularmente importantes en
la replicacin de la hebra que sufre replicacin discontinua en el ADN, ya
que unen los fragmentos cortos de ADN generados en la horquilla de
replicacin para formar una copia completa del molde de ADN. Tambin
se utilizan en la reparacin del ADN y en procesos de recombinacin
gentica.

CONCLUSIONES
El ADN contiene la informacin gentica que permite a la mayora de los
organismos vivientes funcionar, crecer y reproducirse. Sin embargo, no
est claro durante cunto tiempo ha ejercido esta funcin en los ~3000
millones de aos de la historia de la vida, ya que se ha propuesto que
las formas de vida ms tempranas podran haber utilizado ARN como
material gentico. El ARN podra haber funcionado como la parte central
de un metabolismo primigenio, ya que puede transmitir informacin
gentica y simultneamente actuar como catalizador formando parte de
las ribozimas. Este antiguo Mundo de ARN donde los cidos nucleicos
funcionaran como catalizadores y como almacenes de informacin
gentica podra haber influido en la evolucin del cdigo gentico actual,
basado en cuatro nucletidos. Esto se debera a que el nmero de bases
nicas en un organismo es un compromiso entre un nmero pequeo de
bases (lo que aumentara la precisin de la replicacin) y un nmero
grande de bases (que a su vez aumentara la eficiencia cataltica de las
ribozimas).
La

investigacin

sobre

el ADN

tiene

un

impacto

significativo,

especialmente en el mbito de la medicina, pero tambin en agricultura y

ganadera (donde los objetivos son los mismos que con las tcnicas
tradicionales que el hombre lleva utilizando desde hace milenios - la
domesticacin, la seleccin y los cruces dirigidos - para obtener

variedades de animales y plantas ms productivos). La moderna biologa

y

bioqumica

hacen

uso

intensivo

de

la tecnologa del ADN

recombinante, introduciendo genes de inters en organismos, con el

objetivo de expresar una protena recombinante concreta.