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CATALASA
Integrantes:
-
Valentina Guerrero
Gnesis Gonzlez
Katherine Reyes
Constanza Vega
Daniela Zapata
INTRODUCCIN
MATERIALES
-
EXPERIMENTO 1
ACCIN DE LA CATALASA
Materiales:
- 3 vasos precipitados
- Pipeta
- Agua oxigenada
- Cronmetro
- Pajuela
- Encendedor
- Papa rallada
- Papilla de hgado (temperatura ambiente)
Procedimiento
1. Coloque en cada tubo de ensayo 5 cc de agua oxigenada.
2. Proceda de la siguiente manera:
Vaso 1: 5 cc de agua oxigenada
Vaso 2: 5 cc de agua oxigenada
Vaso 3: 5 cc de agua oxigenada
(control)
+ raspado de papa
+ papilla de hgado
3
5cc de H2O2 +
papilla de hgado
Velocidad
de reaccin
No hay
reaccin.
6.5
segundos.
Caractersticas iniciales
(en cada vaso)
Slo presencia de H2O2.
Cantidad de
gas
Ninguno
Cambios
observados
No hay alteraciones
El raspado de papa,
color amarillo claro de
apariencia pastosa.
Moderado
5 segundos-
Abundante
La papa desprende
una cantidad
moderada de burbujas
que dan una
consistencia compacta
a la solucin.
La papilla de hgado
desprende gran
cantidad de burbujas
de consistencia ms
diluida y agua.
1.- A qu se debe que la velocidad de la reaccin enzimtica sea mayor en un tejido que en
otro?
Esto se debe a que el hgado, comparado con la papa, tiene una mayor cantidad de peroxisomas (por
ende, una elevada cantidad de catalasa) que son esenciales en la detoxificacin que realiza este
rgano.
2.- Introduzca la pajuela al interior del vaso de precipitado, registre sus observaciones. Qu
gas libera este compuesto por accin de la catalasa?
Al acercar la pajuela encendida al vaso, esta se aviva rpidamente. Esto se debe a que la reaccin
producida por la catalasa libera O2, producindose una mayor combustin.
3.- Qu sustancias cambian durante la reaccin en los vasos de precipitado 1 y 2?
En el vaso 1, el H2O2 se mantiene intacto ya que no hay presencia de catalasa. En el vaso 2, el H2O2 es
transformado en agua (H20) y oxgeno (O2) bajo la accin de la catalasa.
4.- A qu se debe el aumento de temperatura percibida en los vasos de precipitados? Explique.
Se debe a la accin de la enzima catalasa, sta acelera los movimientos de choque entre reactantes
liberando energa, producindose una reaccin exergnica.
5.- Qu se entiende por especificidad enzimtica? En qu forma podra demostrarlo
experimentalmente? (Hgalo a travs de otro ejemplo).
Que las enzimas actan sobre un sustrato determinado, produciendo una determinada reaccin. La
lipasa est especificada en disgregar grasas que sern posteriormente absorbidas por el organismo.
6.- Cul es el sustrato donde acta la catalasa?
Acta sobre el H2O2.
EXPERIMENTO 2
EFECTO DE LA TEMPERATURA
Materiales:
-
Procedimiento:
1.- Etiquete tres vasos de precipitado (1-2-3)
2.- La papilla de hgado debe ser molida y dividida en tres porciones: la 1era de estas
porciones ser cocida en agua hirviendo a 100C, la 2da porcin debe congelarse a
temperaturas -10 C por espacio de una semana, el hgado congelado debe ser
transportado en un pocillo que contenga hielo para mantener su baja temperatura. La 3era
porcin se descongelar la noche anterior al experimento, ya que se usar descongelado a
temperatura medio ambiente.
3.Vaso 1: agregue papilla de hgado
+
2cc de H2O2
Vaso 2: papilla de hgado cocida por 15
+
2cc de H2O23.
Vaso 3: papilla de hgado en hielo por 15 +
2cc de H2O2
N vaso
1
Papilla de hgado + 2cc de
H2O2
2
Papilla de hgado cocida +
2cc de H2O2
Condicin de la
enzima
Color
inicial
Temperatura
Cambios
observados
25C aprox.
Hay reaccin, se
genera una
espuma diluida.
No hubo
cambios
observados.
Marrn
Activa
S
Cocida a 100C ,
pero trabaja a
25C
Caf
No
Desnaturalizada
3
Papilla de hgado congelada
+ 2cc de H2O2
Presencia
de
reaccin
Inactiva
Rojiza
S, en
poca
cantidad
Congelada a
-10C, pero
trabajada a 5C
aprox.
Escasa presencia
de espuma en el
contenido.
1.- Basndose en los resultados obtenidos, realice grficos en papel milimetrado; que
representen el efecto de la temperatura sobre la actividad de la catalasa.
ANEXO 1
2.- A partir de su grfica establezca la relacin entre la temperatura y la actividad enzimtica
en 2 lneas.
En una temperatura ptima la enzima realiza su actividad sin dificultad, pero en presencia de T mx. o
min. la accin de la catalasa se ve interrumpida, sin poder realizar su trabajo.
3.- A bajas temperaturas regularmente las enzimas se inactivan, fenmeno llamado
inactivacin; al respecto conteste:
a.- Qu diferencia esencial existe entre la desnaturacin y la inactivacin?
En la desnaturalizacin la enzima pierde su estructura nativa al subir la T, dejando de funcionar
(Irreversible). En la inactivacin, deja de actuar en bajas T, pero al volver a su rango ptimo, la enzima
vuelve a funcionar (reversible).
b.- En qu forma lo demostrara?
Si se aplica H2O2 en papa congelada, no se produce ninguna reaccin. Pero al repetir esta accin en la
papa en temperatura ambiente, se podr observar la accin de la catalasa sobre el agua oxigenada.
EXPERIMENTO 2
EFECTO DEL PH
Materiales:
-
Hgado de pollo
Tres vasos de precipitado
Pipetas
Cucharas
Hidrxido de sodio
Acido clorhdrico
Agua oxigenada
Agua destilada
Procedimiento:
1.- Etiquete tres vasos de precipitado (1-2-3)
2.- En cada vaso de precipitado coloque una cucharada de papilla de hgado, luego proceda como
muestra la tabla. A continuacin observe lo que sucede en los vasos 2 y 3 al agregar agua oxigenada,
no olviden registrar todas sus observaciones.
pOH = -log[OH-]
pH= 14 - pOH
>>
HCl
pH = -log [H+]
pOH = -log[0.05]
pH NaOH = 12.7
pH = -log [0,1]
pOH= 1.30
pH HCl = 1
2.- Basndose en los resultados obtenidos, realice un grfico en papel milimetrado; que
represente el efecto del pH sobre la actividad de la catalasa.
ANEXO 2
3.- A partir de su grfica establezca la relacin entre el pH y la actividad enzimtica.
La actividad enzimtica es mayor en un rango ptimo (catalasa = 7), si acta sobre un rango
mayor o menor, modifica su estructura, perdiendo o reduciendo su actividad enzimtica.
CONCLUSIONES
En el experimento realizado, pudimos comprender de forma clara, la funcin de las enzimas,
su especificidad y los factores que pueden alterar su accin.
Las clulas que forman el hgado y la papa poseen una gran concentracin de peroxisomas en
su citoplasma.
Notamos explcitamente la especificidad de las enzimas, que actan sobre sustratos y
condiciones especficas.
La temperatura y el pH son factores concluyentes en la accin enzimtica.
El pH ptimo de la catalasa es neutro, si se altera este rango, la funcionalidad enzimtica se
ve afectada.
El agua oxigenada es un compuesto que daa los tejidos, por esto, la catalasa acta
rpidamente sobre ella, transformndola en O2 y H2O. Es fundamental en el proceso de
detoxificacin celular
BIBLIOGRAFA
Enzimas
http://www.juntadeandalucia.es/averroes/recursos_informaticos/concurso1998/accesit6/enzimas.html
http://academia.cch.unam.mx/wiki/biologia3y4/index.php/Enzimas
http://es.wikipedia.org/wiki/Enzima
Especificidad enzimas
http://temasdebioquimica.wordpress.com/2008/07/12/especificidad-enzimatica/
pH y temperatura
http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz1.htm#ph
http://www.ehu.es/biomoleculas/enzimas/enz1.htm#t
Calculo del pH y pOH
http://www.forest.ula.ve/~rubenhg/acidez/