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TABLA 1
Magnitudes hematolgicas y bioqumicas generales y pruebas de hemlisis
en los 20 pacientes con esferocitosis hereditaria
Eritrocitos(x 1012/l)
Varones
Mujeres
Hemoglobina (g/l)
Varones
Mujeres
Hematcrito (l/l)
Varones
Mujeres
VCM (fl)
CCMH (g/l)
ADE (%)
Reticulocitos (x 109/l)
LDH (U/mol)
Bilirrubina total (mol/l)
Haptoglobina (mol/l)
Ferritina (mol/l)
ROE (g/l NaCl)
Inmediata
Incubada
PGA (s)
Esferocitos (%)
Esferocitosis
hereditaria
(X DE)
Valores de
referencia
(X DE)
4,0 0,4
3,6 0,3
4,9 0,3
4,6 0,3
116 20
109 9
156 9
142 8
0,33 0,05
0,31 0,03
84 5
350 11
18,3 2,5
237 81
510 189
43,6 17,3
3,17 3,36
1516 7,8
0,45 0,03
0,41 0,02
90 3
343 1
13,7 0,2
55 15
350 50
9,4 3,8
15,84 5,54
18,0 4,5
4,7 0,3
6,5 0,5
< 1.800
1,55 1,74
4,3 0,1
5,3 0,1
> 1.800
0
VCM: volumen corpuscular medio; CCMH: concentracin corpuscular media de hemoglobina; ADE: amplitud de la curva de
distribucin eritrocitaria (RDW); LDH: lacticodeshidrogenasa; ROE: resistencia osmtica eritrocitaria; PGA: prueba del glicerol
acidificado.
Resultados
Fig. 1. Eritrocito con amplias constricciones laterales que sugieren un procesoj de pinzamiento (sealado con una flecha). Sangre perifrica de uno de los pacientes
con esferocitosis hereditaria. a) microscopio ptico (MO x 800) y b) microscopio electrnico de barrrido (MEB x 7.400).
TABLA 2
Contenido relativo de las protenas de la membrana eritrocitaria obtenidas
mediante anlisis electrofortico en gel de poliacrilamida y dodecilsulfato sdico
(SDS-PAGE)
Paciente
B1
B2
B 2,1
B3
B 4,2
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
11
12
13
14
15
16
17
18
19
20
18,7
19,0
18,7
18,1
18,7
17,6
18,7
19,5
16,7
17,8
17,4
16,9
17,3
17,2
17,3
17,0
18,5
19,6
14,7a
16,2a
7,0
17,4
16,8
16,4
17,5
16,2
17,2
17,9
15,5
16,3
15,9
15,2
15,9
15,9
16,0
16,4
17,7
18,3
14,6
16,2
5,8
6,9
5,5
5,9
5,9
7,2
5,8
6,8
6,8
4,3
5,3
3,5a
3,4a
5,3
4,6
6,3
5,7
5,7
6,8
4,7
24,63
23,6a
24,5a
26,7
24,6a
24,9a
24,Oa
25,Oa
28,6
27,9
29,1
24,7a
26,3
26,8
26,6
28,8
25,5
22,7a
27,9
25,5
3,8
3,8
4,1
3,7a
3,6a
3,7a
4,1
4,3
4,5
4,3
4,1
4,2
4,9
3,7a
3,8
4,5
4,9
4,1
4,3
4,9
Controles (X DE)
18,6 1,0
16,8 1,1
5,3 0,5
27,7 1,3
4,4 0,3
B l: -espectrina; B 2: -espectrina; B 2,1: ankirina; B 3: banda 3; B 4,2: palidina. Resultados expresados en tanto por ciento.
a
Valores fuera del intervalo de normalidad.
TABLA 3
Alteraciones proteicas de la membrana eritrocitaria observadas en los 20
pacientes con esferocitosis hereditaria
Patrn electrofrico
Disminucin de B 3
Disminucin de B 3 y B 4,2
Disminucin de B 4,2
Disminucin de B 1
Disminucin de B 2,1
Normal
Intensidad
de la disminucin
(%)
Total
AD
AR
ND
10-20
10-15 y 20-15
20-25
10-20
30-35
-
6
2
2
2
2
6
5
2
3
2
2
2
1
1
2
N. de casos
B l: -espectrina; B 2,1: ankirina; B 3: banda 3; B 4,2: palidina; AD: autosmico dominante; AR: autosmico recesivo; ND: no
determinado.
Discusin
La esferocitosis hereditaria (EH) se considera un sndrome clnico relativamente
heterogneo, tanto desde el punto de vista clnico como gentico y molecular2-4. Su
forma ms habitual, caracterizada por un
sndrome hemoltico moderado o leve, se
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TABLA 4
Anlisis de la correlacin entre el
contenido relativo (CR) de protenas
de la membrana eritrocitaria y las
magnitudes hematolgicas generales
Protenas
(CR)
Magnitudes
hematolgicas
Palidina (4,2)
Banda 3
Ankirina (2,1)
CCMH (g/l)
EP (%)
ADE (%)
VCM (fl)
Hematcrito (l/l)
Hemoglobina (g/l)
-0,6
-0,6
-0,7
0,5
0,6
0,7
< 0,01
< 0,01
< 0,01
0,02
< 0,01
< 0,01
Fig. 2. Patrn electrofortico de las fracciones correspondientes a las protenas de la membrana eritrocitaria
obtenidas mediante SDS-PAGE segn los mtodos de Laemmli y Fairbanks. Carril 1: dficit de banda 3 y
protena 4,2; carril 2: dficit de protena 4,2; carril C: control (Laemmli); carril C': control (Fairbanks); carril
3: dficit de -espectrina; carril 4: dficit de ankirina.
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mtica entre el grupo control y el de pacientes (C 5,3 0,2 frente a P 3,4 0,07)
y se obtuvieron resultados significativamente diferentes (p < 0,0001).
Finalmente, otro de lo objetivos al estudiar
las protenas de ME en la EH ha sido investigar la posible existencia de correlacin entre la intensidad de los defectos
proteicos observados y las manifestaciones clnicas o biolgicas de la enfermedad. Para ello, se realiz un anlisis de
regresin lineal simple entre el CR de las
protenas halladas deficientes y las magnitudes hematolgicas presentes en el
hemograma. Este estudio permiti obtener una correlacin negativa (r = -0,6; p <
0,01) entre la protena 4,2 y la CCMH, lo
que sugiere que la disminucin de esta
protena podra estar relacionada con el
caracterstico aumento de la CCMH en la
EH. Asimismo, el hallazo de una correlacin mltiple (r2 = 0,6; p < 0,01) entre la
ankirina y diversas magnitudes
hematolgicas, como el VCM y la ADE, sugiere tambin una posible relacin entre
la intensidad de este defecto proteico y la
expresividad clnica de la enfermedad. En
cualquier caso, estos resultados contribuyen a corroborar el hecho, ya conocido,
de que las alteraciones proteicas de ME
con mayor incidencia clnica son el dficit
de ankirina y espectrina.
Por ltimo, el estudio comparativo de las
magnitudes hematolgicas generales entre las formas de EH con patrn AD y AR
pone de manifiesto la existencia de diferencias significativas (p < 0,03) en la concentracin de hemoglobina y de la CCMH
entre ambos grupos, con una media inferior para las formas AR. Ello corrobora la
idea de que las formas recesivas de EH
presentan un mayor grado de anemia que
las dominantes y que stas, junto con la
presencia de eritrocitos pinzados, se caracterizan por una disminucin parcial de
banda 3.
Aunque el anlisis electrofortico de las
protenas de ME constituye un buen procedimiento para caracterizar las formas clnicas de EH, slo el estudio del ADN permitir confirmar la hiptesis sobre la implicacin de diversas protenas en este tipo
de patologa. Mientras no se llegue a este
punto, la minuciosa observacin del frotis
sanguneo contina siendo una exploracin indispensable no slo para el diagnstico de la enfermedad, sino tambin
para detectar algunas de sus formas
moleculares ms frecuentes en nuestro
medio, tales como, por ejemplo, el dficit
de banda 3.
Agradecimiento
Este trabajo ha sido parcialmente subvencionado por la Ayuda a la Investigacin del FIS 93/
0561. Queremos expresar nuestro agradecimiento a la labor tcnica de las ATS Elena
Manrubia e Isabel Gonzlez.
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