SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

PRUEBAS TOXICOLGICAS:
CIANURO
Descripcin general: La intoxicacin aguda con cianuro (CN- ) puede producirse despus de la
inhalacin de cianuro de hidrgeno (HCN) o despus de la ingestin de cianuro de potasio o de
sodio. Las soluciones complejas de cianuro se usan en galvanoplastia y la acidificacin de tales
soluciones a menudo las lleva a la produccin de cianuro de hidrgeno. Los glicsidos
cianogenticos como la amigdalina, liberan cianuro en el organismo luego de su ingestin. Varias
plantas comestibles los contienen como el melocotn, las semillas de ciertos frutos (duraznos,
ciruelas, etc.), la raz de la yuca (mandioca) y ciertos porotos. Los insecticidas con tiocianato
(tiocianato de etilo, tiocianato de metilo) tambin se metabolizan a in cianuro en el organismo y
pueden causar serios problemas de toxicidad. El cianuro tambin es un metabolito del nitroprusiato
de sodio (usado como vasodilatador) y otros compuestos que contienen nitrilos, pero son raras las
intoxicaciones agudas con cianuro en estos casos. El tiocianato inorgnico y las sales de
ferricianuro y de ferrocianuro no liberan cianuro en el organismo y son relativamente poco txicos. 1
Sintomatologa clnica: La intoxicacin con cianuro se caracteriza por ataxia, dolor de cabeza,
ansiedad, disnea, confusin, coma, colapso, acidosis metablica, edema pulmonar y paro
respiratorio. La cianosis puede no estar presente. El tratamiento de soporte incluye la
administracin de oxgeno. Un nmero de antdotos se ha usado, incluso la hidroxicobalamina,
nitrito de sodio y tiosulfato de sodio, y edetato de dicobalto. En la intoxicacin aguda con sales de
cianuro o cido cianhdrico, las concentraciones del in cianuro en sangre son del orden de 2-10
mg/l. El ensayo cualitativo descripto anteriormente tiene insuficiente sensibilidad para detectar estas
concentraciones y slo deben usarse para contenido estomacal y residuos de la escena. La medida
cuantitativa de cianuros tiene muy poca relevancia en las intoxicaciones agudas ya que la terapia
debe comenzarse tan pronto como sea posible. El cianuro tambin puede estar presente en la sangre
de vctimas de incendios debido a la inhalacin de cianuro de hidrgeno generado por la
combustin parcial de lana, seda y los polmeros sintticos como poliuretanos y poliacrilonitrilos.
En tales casos, las concentraciones de cianuro en sangre pueden estar comprendidas entre 0,2 y 1,0
mg/l. El monxido de carbono puede tambin estar presente. Las concentraciones de cianuro en la
sangre de grandes fumadores de cigarrillos pueden ser tan altas como 0,3 mg/l. 1

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

LABORATORIO
ENSAYO CUALITATIVO
Se basa en la formacin de un complejo azul de ferriferrocianuro (azul de Prusia) con los iones
ferrosos.1
Muestras: Contenido estomacal y residuos de la escena. Tener cuidado con las muestras que
contienen cianuros ya que liberan cido cianhdrico en contacto con el agua y a pH cido. 1
Reactivos: Solucin acuosa de hidrxido de sodio (100 g/l). Solucin acuosa de sulfato ferroso (100
g/l) recientemente preparada. Solucin acuosa de cido clorhdrico (100 ml/l). 1
Procedimiento: Diluir 1 ml de la muestra con 2 ml de solucin del hidrxido de sodio. Agregar 2 ml
de solucin de sulfato ferroso. Agregar cido clorhdrico en cantidad suficiente para disolver el
precipitado de hidrxido ferroso.1
Resultado: Un color azul indica la presencia de cianuro. No existen fuentes comunes de
interferencia.1
Sensibilidad: 10 mg/l.
ENSAYOS CUANTITATIVOS
Muestras: sangre entera heparinizada (0,1 - 1,0 ml) que puede ser conservada a 4C durante 1-2 das
si el anlisis no se realiza inmediatamente. El cianuro en sangre es poco estable si se guarda a
temperatura ambiente (20C).1
MTODOS POR MICRODIFUSIN:
Se basan en la liberacin de cianuro de hidrgeno y la formacin subsiguiente de un complejo
coloreado.1
MTODO DEL P-NITROBENZALDEHDO / O-DINITROBENCENO :
Reactivos: Solucin acuosa de hidrxido de sodio (0,5 mol/l). Solucin acuosa de cido sulfrico
(3,6 mol/l). p-nitrobenzaldehdo (0,05 mol/l) en 2-metoxietanol. o-dinitrobenceno (0,05 mol/l) en 2metoxietanol.1
Testigos: Solucin acuosa de cianuro de potasio (10 mg/l, correspondiente a 4 mg/l de in de
cianuro).1

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Procedimiento: Tomar tres cmaras de microdifusin y agregar a cada una en el compartimiento
central:

0,5 ml de solucin del p-nitrobenzaldehdo.

0,5 ml de solucin del o-dinitrobenceno.
0,1 ml de solucin del hidrxido de sodio.

En el compartimiento exterior agregar 0,1 ml de:

* Cmara N 1 Agua destilada
* Cmara N 2 Solucin patrn de cianuro de potasio
* Cmara N 3 Muestra de sangre problema
A cada cmara en la parte exterior agregar 0,5 ml de agua destilada y en el lado opuesto, 1,0 ml de
cido sulfrico diludo. Se tapa cada cmara usando silicona y cuidadosamente se mezclan los
componentes del compartimiento externo. Incubar a temperatura ambiente durante 20 minutos y
agregar 1 ml de solucin acuosa de metanol (1:1) en el compartimiento interno. Transferir el
contenido del compartimiento interno de la cmara a un tubo graduado de 5,0 ml y llevar a volumen
(5 ml) con solucin acuosa de metanol (1:1).1
Resultados: El color rojo obtenido con las soluciones que contienen cianuro son estables durante
aproximadamente 15 minutos. Medir la absorbancia de las soluciones de las cmaras 2 y 3 a 560 nm
contra blanco de agua destilada (cmara N 1). Calcular la concentracin del in cianuro en la
muestra utilizando la concentracin y la absorbancia obtenida del patrn. 1
Sensibilidad: 0,5 mg/l.
MTODO DE LA PIRIDINA / CIDO BARBITRICO:
Reactivos:

Solucin acuosa de hidrxido de sodio (0,1 mol/l).

Solucin acuosa de cloramina T (2,5 g/l). La cloramina T slida es inestable, las soluciones

deben prepararse en el momento de usar.

Solucin acuosa de ortofosfato de sodio (1 mol/l).
Reactivo Piridina - cido barbitrico: Disolver 6 g de cido barbitrico (no utilizar el dietil
del cido barbitrico), en 6 ml de cido clorhdrico concentrado (densidad relativa 1,18), y
diluir con 30 ml de piridina. Diluir la solucin resultante a 100 ml con agua destilada. Esta

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

solucin debe ser preparada en el momento de la reaccin. Solucin acuosa de cido
sulfrico (1 mol/l).
Testigos: Solucin patrn de cianuro. Disolver 50 mg de cianuro de potasio en 100 ml de solucin
acuosa de hidrxido de sodio (0,1 mol/l). Concentracin del in de cianuro: 200 mg/l. Tener
precaucin cuando se usan soluciones de cianuro. 1
Solucin de calibracin de cianuro: Diluir (1:99) la solucin patrn del in cianuro (200 mg/l) en
solucin acuosa de hidrxido de sodio (0,1 mol/l); obtenindose una solucin de concentracin de
in cianuro de 2 mg/l.1
Procedimiento: Rotular siete cmaras de microdifusin desde (a) a (g) y agregar en el
compartimiento exterior de la cmara, los reactivos de acuerdo a lo que indica la tabla que se detalla
mas adelante, y el cido sulfrico diludo en el lado opuesto de la misma, cuidando no mezclar
patrones o muestras con el reactivo liberante (cido sulfrico diludo) antes de tapar la cmara. 1
Agregar 2 ml de solucin del hidrxido de sodio al compartimiento interno. Se tapa cada cmara
usando silicona y cuidadosamente se mezclan los componentes de la parte externa y se dejan a
temperatura ambiente durante 4 horas. Pipetear 1,0 ml de la solucin del hidrxido de sodio de cada
uno de los compartimentos internos y transvasarlos a tubos rotulados. Agregar los reactivos
siguientes secuencialmente y agitar para mezclarlos: 1

2 ml de Buffer fosfato
1 ml de solucin de cloramina T
3 ml de reactivo piridina - cido barbitrico.

Resultados: La presencia de cianuro se indica por un color rojo/azulado o violeta. Medir la

absorbancia a 587 nm de cada solucin contra los blancos de agua diluyendo, si fuese necesario,
para permitir que entre en escala. Construir un grfico de calibracin con las concentraciones que se
obtuvieron de las soluciones patrones de cianuro y calcular la concentracin de cianuro en la
muestra.1

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Sensibilidad: 0,2 mg/l.
DETERMINACIN CUANTITATIVA DE CN- POR MICRODIFUSIN. MTODO DE
TOMPSETT
Reactivos:

SO4 H2 6N:16 ml de cido sulfrico concentrado, llevar a 100 ml con agua destilada.
NaOH 1N (4%): disolver 4 g de NaOH llevando a 100 ml con agua destilada.
NaOH 2N: disolver 8 g de NaOH llevando a 100 ml con agua destilada.
Agua de bromo a saturacin.
cido actico puro. HCL 0,5 N. HCL concentrado.
Solucin de arsenito de sodio: disolver 1g de As2O3 en el mnimo volumen posible de

solucin de NaOH 2 N y completar luego a 50 ml.

Reactivo piridina bencidina: disolver 0,36 g de bencidina en 10 ml de HCl 0,5 N. Por otra
parte en una probeta se colocan 12 ml de piridina pura y se llevan a 20 ml con agua
destilada agregando luego 2 ml de HCl concentrado. El reactivo se prepara agregando 5 ml
de la solucin de bencidina a 20 ml de la solucin de piridina cida. La mezcla debe
prepararse en el momento de usar. 1

Procedimiento: En una cmara de Conway, convenientemente preparada, colocar en el

compartimiento interno 1 ml de NaOH 1 N y en el compartimiento externo 2 ml de sangre (puede
adaptarse al mtodo utilizando en lugar de sangre 1 a 2 g de macerado de tejido). 89 Cubrir la
cmara con la tapa de vidrio dejando nicamente el lugar necesario para agregar 0,5 ml de SO4H2
6N al compartimiento externo. Una vez agregado el sulfrico tapar inmediatamente y mezclar con
cuidado. Dejar en reposo a temperatura ambiente durante 2 horas. Transcurrido dicho lapso agregar
en el compartimiento interno 0,1 ml de agua de bromo y 0,1 ml de arsenito de sodio. Despus de la
reduccin total del bromo agregar 0,5 ml del reactivo piridina bencidina. Mezclar bien y con una
pipeta o gotero se transfiere la solucin coloreada del compartimiento interno a un tubo de ensayo.
Se efectan dos lavados del compartimento interno con 0,6 ml de agua destilada cada vez juntando
estos lavados cuantitativamente con la solucin del tubo de ensayo. Se mezcla y se deja en reposo
durante 15 minutos a temperatura ambiente. Se determina la absorbancia a 520 nm contra un blanco
de reactivos.1
Testigos: Utilizar un testigo de sangre que contenga 10 mg de NaCN por cada 2 ml de sangre. Dos
mililitros de ese testigo se procesan de la misma manera y simultneamente con la muestra
problema en otra cmara.1

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Preparacin de la sangre testigo de 10 mg: Solucin madre de NaCN: pesar 100 mg de NaCN,
disolver y llevar a 100 ml en matraz aforado con agua destilada. Solucin hija de NaCN: se toman
10 ml de la solucin madre y se llevan a 100 ml en matraz aforado con agua destilada. Esta solucin
contiene 100 ug de NaCN por mililitro. En un tubo de ensayo se colocan 9,5 ml de sangre y se
agregan 0,5 ml de la solucin hija. Mezclar.1
Nota: Debe tenerse la precaucin de utilizar un NaCN de buena calidad. Adems el frasco que lo
contiene debe haber estado perfectamente tapado puesto que de no ser as, en funcin del tiempo, se
produce una carbonatacin con prdida de HCN.1
Resultado: Expresar el resultado como mg de NaCN por 100 ml de sangre. En las intoxicaciones
por inhalacin de HCN pueden registrarse valores de 100 mg o ms por 100 ml de sangre. En los
casos de muerte por ingestin de dosis elevadas (200 mg de NaCN) la concentracin sangunea
puede ser del orden de los miligramos por 100 ml. 1
ETANOL
Caractersticas:
Sinnimos: Alcohol etlico; alcohol
Frmula estructural: C2H5OH
Peso molecular: masa molecular relativa, 46 N CAS: 64175
Descripcin general: Las intoxicaciones agudas con etanol son el resultado de la ingestin de
bebidas alcohlicas. Tambin ocurren intoxicaciones con alcohol industrial conteniendo varias
sustancias desnaturalizantes como por ejemplo el metanol. 1
Propiedades fisicoqumicas: Es una sustancia voltil, rpidamente inflamable, higroscpica. Es
miscible en agua, cloroformo y ter.1
Sintomatologa clnica: El etanol se absorbe rpidamente por intestino y causa desinhibicin, visin
borrosa, adormecimiento, incoordinacin, confusin, nuseas, vmitos y coma en los casos severos.
La hipoglucemia y convulsiones pueden estar presentes, sobre todo en jvenes y nios. El
tratamiento de la intoxicacin aguda es sintomtico y de sostn, aunque la dilisis puede ser
considerada en los casos severos. Una gua simple para interpretar los resultados de la
concentracin de etanol en sangre se observa en la Tabla Sin embargo, se debe tener presente que el
etanol potencia los efectos depresivos de muchas otras drogas que actan sobre el sistema nervioso

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

central y que los alcohlicos crnicos pueden mostrar pocos efectos de intoxicacin incluso con
concentraciones de etanol sanguneo de 4 g/l o ms. 1

LABORATORIO
REACCIONES DE COLOR:
Muestras: orina, contenido estomacal, resto de la escena
Reactivos: Dicromato de potasio.
Procedimiento: Agregar 0,5 ml de reactivo a la muestra, calentar en bao mara durante 3 min.
Resultados: Color observado frente al Dicromato de potasio: verde
OTRAS REACCIONES DE COLOR:
Muestras: orina, contenido estomacal y residuos de la escena. 1
Reactivos: Dicromato de potasio (25 g/l) en solucin de cido sulfrico (500 ml/l). 1
Procedimiento: Aplicar 50 l de solucin de dicromato de potasio a una tira papel filtro e insertar el
papel en el cuello del tubo de vidrio que contiene 1 ml de muestra. Cerrar ligeramente el tubo con
tapn y colocarlo en un bao de agua hirviente durante 2 minutos. 1
Resultados: Un cambio en el color de naranja al verde indica la presencia de los agentes voltiles
reductores como etanol, acetaldehdo, metanol y paraldehdo los cuales tienen poder reductor frente
al dicromato.1
Sensibilidad: 0,5 g/l.

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

ENSAYO CUANTITATIVO
Muestras: sangre entera, plasma, suero, orina (0, 8 ml) u homogeneizado de tejido (4 ml de tejido
homogeneizado equivalente a 0,8 g de tejido).1
DETERMINACIN POR MICRODIFUSIN
Muestras: sangre entera, plasma, suero, orina u homogeneizado de tejido. En el caso de sangre,
usar sangre entera, de preferencia con fluoruro de sodio como anticoagulante. Tambin puede usarse
heparina o EDTA. Puede usarse suero o plasma, pero sus valores representarn 1,18 veces los
valores de la sangre total.1
Reactivos:

Solucin de dicromato de potasio en cido sulfrico: Se pesan 3,75 gr de dicromato de

potasio y se disuelven en 150 ml de agua destilada, calentando si fuera necesario. A
continuacin se agregan 280 ml de cido sulfrico concentrado en forma lenta y agitando
continuamente. Durante esta operacin se mantiene refrigerado el recipiente. Una vez

adquirida la temperatura ambiente se completa a un volumen de 650 ml con agua destilada. 1

Solucin saturada de Carbonato de potasio: Se pesan 112 g de carbonato de potasio anhidro
y se disuelven en agua destilada. Dejar a temperatura ambiente y llevar a un volumen de

100 ml.
Solucin Madre de alcohol: Se prepara una solucin al 1% en peso de etanol, midiendo
1,27 ml de alcohol absoluto o 1,34 ml de alcohol 95 y se lleva a un volumen de 100 ml con

agua destilada.
Soluciones de los testigos: Preparar a partir de la solucin madre testigos conteniendo, 0,5;
1,0; 2,0 y 3,0 g /l

Procedimiento: En cmara de Conway colocar en el compartimento interno 2 ml de solucin de

dicromato de potasio en medio cido. En el compartimento externo colocar 1 ml de solucin
saturada de carbonato de potasio como liberante. Colocar la tapa esmerilada lubricada hasta cerrar
parcialmente y depositar en el otro extremo del compartimento externo 0,8 ml de sangre o 4 ml de
tejido homogeneizado. Cerrar e imprimir un movimiento rotatorio sobre una superficie plana, a fin
de mezclar la muestra con el reactivo liberante. Es importante colocar la solucin de carbonato de
potasio en el lado opuesto al que se halla la muestra de sangre sin que tomen contacto hasta que la
cmara este perfectamente tapada. Si se mezclaran antes de tapar comenzara la liberacin de
alcohol de inmediato y se cometera error por defecto. Proceder de forma similar en otra cmara de
Conway colocando 0,8 ml de testigo en lugar de la muestra. Dejar difundir a temperatura ambiente

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

3 horas para muestras de sangre u orina; o toda la noche para muestras de tejido. Una vez cumplido
el tiempo de difusin, trasvasar el contenido del compartimento interno en forma cuantitativa
(enjuagando el compartimiento con pequeos volmenes de agua destilada varias veces) a un tubo
graduado de 10 ml de capacidad. Llevar a 10 ml con agua, mezclar por inversin. Preparar un
blanco en tubo graduado de 10 ml, colocando 2 ml de solucin sulfrica de dicromato de potasio y
llevar a 10 ml con agua. Mezclar por inversin. Leer en espectrofotmetro a 450 nm llevando a cero
con agua destilada.

O tambin puede realizarse una curva de calibracin con testigos de concentraciones conocidas
crecientes de etanol y calcular el valor en la muestra a partir de la curva obtenida. 1
Observaciones: La presencia de acetaldehido o alcohol isoproplico da lugar a reacciones similares
con formacin de cido actico y acetona respectivamente, con la consiguiente reduccin del
dicromato de potasio. La posibilidad de que ocurran estas reacciones le restan especificidad al
mtodo, siendo por ello conveniente informar los resultados de las determinaciones como
contenido en sustancias reductoras voltiles. Ante la sospecha de estar frente a una intoxicacin
por otro alcohol o sustancias reductoras deben efectuares previamente reacciones de identificacin
de estos compuestos mediante reacciones especficas. 1
DETERMINACIN POR EL MTODO ENZIMTICO:
Reactivos: Solucin testigo de etanol: 80 mg/dl. Buffer glicina. Viales individuales de NAD -ADH
Procedimiento: Reconstituir los viales de NAD -ADH con 3 ml de buffer glicina. No agitar. Agregar
a cada vial:

Tapar y mezclar por inversin.

Incubar por 10 minutos a una temperatura entre 22 y 37 C.

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Transferir las soluciones a una cubeta y leer las absorbancias a 340 nm de la muestra y del testigo
frente al blanco.1

Si la concentracin de alcohol en la muestra excede los 300 mg/dl diluir 1 parte de la muestra con 1
parte de solucin fisiolgica. Repetir la determinacin y el resultado multiplicarlo por 2.
MERCURIO
Caractersticas:
Sinnimos: Azogue, Hidrargirio
Smbolo qumico: Hg
Peso molecular: 200,6 N CAS: 7439-97-6
Descripcin general: El mercurio (Hg) y sus sales inorgnicas son usadas en la manufactura de
termmetros, filtros, pinturas, explosivos, lmparas, equipamiento elctrico y bateras. El dietil
mercurio, dimetil mercurio y una variedad de compuestos mercricos, incluyendo compuestos
mercuriales inorgnicos se utilizaron como fungicidas primariamente sobre semillas y bulbos y en
tierras con csped. El cloruro de mercurio (HgCl2) es extremadamente txico y la ingestin de 1 g
puede provocar una intoxicacin fatal en un adulto. Como el antimonio, arsnico y bismuto, el
mercurio puede detectarse usando el test de Reinsch. 1
Sintomatologa clnica: El mercurio elemental se absorbe muy poco en el aparato gastrointestinal y
no es considerado txico por esta va. Los vapores de mercurio son absorbidos a travs de piel y por
va respiratoria y producen estomatitis, se incrementa la salivacin, gusto metlico, diarrea y falla
renal. La ingestin de sales de mercurio produce dolor gstrico, vmitos, diarrea sanguinolenta y
tambin falla renal que usualmente causa la muerte. Los compuestos mercuriales son concentrados
en el sistema nervioso central y producen ataxia y convulsiones. El tratamiento es sintomtico y de
soporte y debe incluir terapia con quelantes. La concentracin de mercurio en sangre y orina son

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

buenos indicadores de exposicin pero slo mtodos de espectrofotometra de absorcin atmica
son confiables para estos casos.1
LABORATORIO
A) Ensayo cualitativo Ensayo de Reinsch
Muestras: Orina, contenido estomacal y residuos de la escena.
Reactivos :

cido clorhdrico concentrado (densidad relativa 1,18).

Solucin de cido clorhdrico (2 mol/l).
Lmina o malla de cobre (5 x 10 mm) o alambre (2-3 cm).
Solucin del cido ntrico (500 ml/l).

Procedimiento: Inmediatamente antes de usar la lmina, limpiarla con cido ntrico hasta que el
cobre adquiera una superficie luminosa. Enjuagar la lmina de cobre con agua destilada, colocarla
en un erlenmeyer de 100 ml y agregar 10 ml de cido clorhdrico concentrado y 20 ml de solucin a
investigar. Calentar en un bao de agua hirviente, bajo campana, durante 1 hora. Mantener el
volumen de la solucin agregando cido clorhdrico diludo cuando sea necesario. Enfriar y
suavemente lavar la laminilla de cobre con el agua destilada. 1
Resultados: Brillo plateado - Mercurio
B) Otras reacciones: Se utiliza para este ensayo la lmina metlica obtenida mediante el test de
Reinsch.
Reactivo: Suspensin de ioduro de cobre (I). Disolver 5 g de sulfato de cobre (II) y 3 g de sulfato
ferroso en 10 ml de agua destilada con movimientos continuos y agregar 7 g de ioduro de potasio en
50 ml de agua. Permitir la precipitacin de ioduro de cobre (I) filtrar y lavar con agua. Transferir a
un frasco de color marrn o caramelo. La suspensin es estable poco tiempo. 1
Procedimiento: Agregar 0,1 ml de suspensin de ioduro de cobre (I) en un papel de filtro, colocar la
lmina metlica sobre el papel de filtro, tapar y dejar por 1-12 horas.
Resultados: Una coloracin salmn indica la presencia de mercurio. El resultado positivo debe ser
obtenido dentro de 1 hora, pero con bajas concentraciones el color se desarrolla hasta en 12 horas.
Sensibilidad: 5 mg/l.

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

METANOL
Caractersticas:
Sinnimos: alcohol metlico; alcohol de madera.
Frmula molecular: CH3OH
Peso molecular: 32
pKa:15,3. N CAS: 67-56-1
Descripcin general: El metanol es usado como solvente en laboratorios, como refrigerante (muchas
veces con etilenglicol), y como aditivo para lavar vidrios. En un adulto, la muerte puede ocurrir por
ingestin de 20-50 ml de metanol. Tambin otros solventes industriales como el etanol
desnaturalizado contienen metanol como desnaturalizante. El cuadro txico es menos serio que con
metanol puro. Esto es porque la toxicidad del metanol resulta del metabolismo a formaldehdo y
cido frmico por la alcohol deshidrogenasa, una reaccin inhibida por el etanol. 1
Propiedades fisicoqumicas: Altamente inflamable a 63,5 - 65,7. Miscible con agua, etanol,
benceno, cloroformo, ter, cetonas y otros solventes orgnicos. 1
Sintomatologa clnica: La intoxicacin aguda por metanol se caracteriza por coma, cianosis, falla
respiratoria, acidosis metablica marcada, desbalance electroltico, hiperglucemia y ceguera, la cual
puede ser permanente. El tratamiento comienza por corregir la anormalidad metablica dando
etanol y removiendo el metanol por dilisis peritoneal o hemodilisis. La medida de la
concentracin de etanol en plasma puede ser til en el monitoreo de la terapia con este compuesto. 1
LABORATORIO
ENSAYO CUALITATIVO
Muestras: El metanol puede ser analizado en orina, contenido estomacal y residuos de la escena. 1
Reactivos:

Reactivo de dicromato de potasio (25 g/l) en agua destilada.

cido sulfrico concentrado (densidad relativa 1,83) (1:1)

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Procedimiento: Aplicar 50 l de reactivo de dicromato de potasio en un papel de filtro en banda e
insertar el papel en la boca de un tubo donde hay 1 ml de muestra de orina. Colocar el tubo cerrado
en un vaso de agua hirviente por 2 minutos.1
Resultados: Un cambio de color de naranja a verde indica la presencia de sustancias voltiles
reductoras como el metanol. Aunque otros compuestos por ejemplo etanol, metaldehdo,
paraldehdo tambin dan la reaccin.1
Sensibilidad: 50 mg/l.
Microdifusin
Muestras: sangre, orina, contenido estomacal, residuos de la escena. 1
Reactivos:

SO4H2 10% (V/V).

Solucin saturada de carbonato de potasio.
Permanganato de potasio al 5%.
Solucin saturada de bisulfito de sodio (preparacin extempornea).
Solucin reciente de cido cromotrpico al 0,5%.
Solucin de salicilaldehdo en etanol 20 % (P/V) recientemente preparada.
NaOH al 40%.
Solucin madre de alcohol metlico: diluir 1 ml de metanol absoluto con cantidad
suficiente de agua destilada y completar a 1000 ml.

Soluciones testigos de alcohol metlico: diluir 2, 4, 6, 8 y 10 ml de la solucin madre de alcohol

metlico con cantidad suficiente de agua destilada para obtener 10 ml y llevar a 100 ml con solucin
acuosa de cido sulfrico al 10% (Las soluciones equivalen a 1,58; 3,16; 4,74; 6,32 y 7,9 mg/100
ml). 1
Procedimiento: En cmara de Conway colocar: Compartimiento interno: 2,2 ml de SO4H2 al 10%.
Compartimiento externo: 1 ml de sangre u orina o 5 ml de homogenato de tejido (equivalente a 1 g)
y 1 ml de carbonato de K. Tiempo de difusin: 2 hs a temperatura ambiente para sangre u orina y 5
hs para tejido. Luego de la difusin tomar 1 ml de la solucin del compartimiento interno y colocar
en dos tubos de ensayo para la investigacin de metanol e isopropanol respectivamente. En ambos
tubos agregar 1 gota de Mn04K al 5%, dejar 10 minutos y adicionar 1 gota de bisulfito de sodio
para decolorar. A uno de los tubos agregar 2 ml de solucin de cido cromotrpico y 2 ml de
SO4H2 concentrado, llevar a bao Mara hirviente.(Investigacin de metanol) Al segundo tubo con

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

la solucin ya oxidada, se le agrega 4 ml de solucin de HONa al 40% y 0,5 ml de solucin de
salicilaldehido al 20% en etanol y colocar en bao Mara hirviente. (Investigacin de Isopropanol).

Resultados: El desarrollo de una coloracin violeta en el primer tubo indica un resultado positivo
para el Metanol. La aparicin de una coloracin naranja o rojiza en el segundo tubo indica la
presencia de Isopropanol.

Sensibilidad: 50 mg/l.
ENSAYOS CUANTITATIVOS
Espectrofotomtrico luego de la microdifusin:
Luego de efectuada y transcurrido el tiempo de microdifusin, pipetear en un tubo de ensayo 1 ml
de la solucin del compartimiento interno y agregar una gota de permanganato de potasio al 5 %.
Procesar paralelamente un blanco de muestra colocando en otro tubo 1 ml de la solucin del
compartimiento interno, sin el agregado de la solucin de permanganato de potasio. Preparar un
blanco de reactivos utilizando 1 ml de cido sulfrico al 10% y una gota de solucin acuosa de
permanganato de potasio al 5%. Dejar en reposo 10 minutos. Agregar luego a todos los tubos una
gota de solucin saturada de bisulfito para decolorar (no agregar en exceso). Una vez incolora la
solucin, agregar 0,2 ml de cido cromotrpico y con los tubos en bao de hielo agregar
cuidadosamente 4 ml de cido sulfrico concentrado. Colocar luego los tubos en un bao de agua a
ebullicin durante 15 minutos, enfriar y diluir a 10 ml (en bao de hielo) y agitar cuidadosamente.
Se leen a 580 nm contra blanco de reactivos. Efectuar una curva de calibracin utilizando 1 ml de
las soluciones diluidas de los testigos y proseguir segn lo indicado a partir del agregado de
permanganato de potasio al 5%. 1
Clculo: Llevar el valor de la Absorbancia (Abs tubo muestra Abs del tubo blanco de muestra) a la
curva de calibracin, el resultado debe ser multiplicado por 1,21 en el caso de muestras de sangre y
orina. Se utiliza este factor debido a que la recuperacin de metanol no es completa (solo del 85%).
1

Metanol (g/l) = X (mg) x 1,21 x 2,2 x 0,001

Donde X = microgramos de metanol obtenidos de la curva de calibracin.
1,21= factor de correccin para muestras de sangre y orina por recuperacin no completa de
metanol.

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

2,2 = volumen del reactivo fijador, factor de dilucin. 0,001 = factor de conversin de las unidades.
Para muestras de tejido el factor de recuperacin debe ser calculado considerando la adicin de
metanol a muestras de tejido ya que solo el 42 % del contenido del compartimiento central es usado
para el anlisis.1
Mtodo espectrofotomtrico directo. Mtodo de Williams, L.A.; Linn, R.A. y Zak, B.
Muestra: Sangre. No usar etanol como antisptico; se recomienda el uso de cloruro mercrico al
0.5%. Extraer sangre usando como anticoagulante fluoruro de sodio al 1% y trasvasar a un tubo de
plstico provisto de tapa de rosca; llenar totalmente el tubo. Conservar en la heladera entre 0 y 4C.
En caso de no contar con fluoruro de sodio, usar citrato u oxalato. No usar EDTA ni heparina como
anticoagulante. 1
Drogas:

cido sulfrico p.a.

cido tricloroactico p.a.
Permanganato de potasio p.a.
Bisulfito de sodio p.a.
cido cromotrpico p.a.
Alcohol metlico p.a.

Reactivos:

Solucin acuosa de cido sulfrico al 10%(V/V).

Solucin acuosa sulfrica de tricloroactico al 10%.
Solucin acuosa de permanganato de potasio al 5%.
Solucin acuosa saturada de bisulfito de sodio (de preparacin reciente).
Solucin acuosa de cido cromotrpico al 0.5% (de preparacin reciente).
Solucin madre de alcohol metlico de 0.79 mg/ml.
Tomar 1 ml de metanol puro y llevar a 1 litro con cido sulfrico al 10% V/V. Conservar en

recipiente bien cerrado, en heladera (4C). Solucin hija de metanol de 0.079 mg/ml.
Tomar 10 ml de la solucin madre y llevar a 100 ml con cido sulfrico al 10% V/V.
Conservar en recipiente bien cerrado, en heladera (4C). Vaselina-parafina en la proporcin
apta para ser utilizada segn la temperatura. Soluciones testigo de alcohol metlico para la
curva de calibracin:

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Procedimiento: A 0.5 ml de sangre o suero agregar 9.5 ml de solucin acuosa sulfrica

tricloroactica. Centrifugar 5 minutos a 2000-3000 r.p.m. Se trabaja con el sobrenadante. Reaccin
de color: Se procesa paralelamente un blanco de reactivos y un blanco de muestra. Proseguir de la
siguiente manera, en tubos de ensayo:

Clculos: Interpolar el valor de absorbancia obtenido en la curva de calibracin, la cual est

graficada como Absorbancia en funcin de Masa (en g). luego hacer el clculo para expresar el
resultado en g/l.
MeOH (g/l) = masa (g) x 0.02
Sensibilidad: 0.030 g/l
Interferencias: Heparina, EDTA, Formalina, Metenamida. El efecto deshidratante del H2SO4
concentrado puede producir formaldehido a partir de compuestos orgnicos apropiados, con lo cual
se obtendr un falso positivo. Por esta razn, pacientes con severa acidosis pueden dar positiva la
reaccin. 1
Otros compuestos que reaccionan con el cido cromotrpico: el gliceraldehido, furfural, arabinosa,
fructosa y sucrosa dan una coloracin amarilla. Grandes concentraciones de furfural dan un color
rojizo. 1

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Interpretacin de los resultados: Valores normales: no dosable. Una concentracin superior a 0,8 g/l
de metanol indica severidad de la intoxicacin y riesgo de muerte para el paciente. 1

BENZODIACEPIONAS
Prueba de deteccin del medicamento benzodiacepina (benzodiazepine).
Es un anlisis de sangre para detectar la presencia de una clase de medicamentos denominados
benzodiacepinas. Las benzodiacepinas son depresores del sistema nervioso central. Se usan para
sedar a los pacientes, ayudarles a dormir, prevenir convulsiones, calmar la ansiedad y relajar los
espasmos musculares. Estos medicamentos son, a menudo, denominados de manera informal
tranquilizantes, pldoras para dormir y relajantes musculares.1
Las variaciones en las molculas de las diferentes benzodiacepinas proporcionan sus propiedades
qumicas y usos mdicos especficos.
Algunos ejemplos de medicamentos ansiolticos, relajantes musculares y medicamentos
anticonvulsivos comunes incluyen:

Alprazolam (Xanax)
Clordiacepxido (chlordiazepoxide) (Librium)
Clonazepam (Klonopin)
Cloracepato (clorazepate) (Tranxene)
Diazepam (Valium)
Lorazepam (Ativan)
Oxazepam (Serax)
Algunos ejemplos de medicamentos sedantes hipnticos comunes incluyen:
Temazepam (Restoril)
Triazolam (Halcion)
Flurazepam (Dalmane)
Estazolam (ProSom)

Adems del uso mdico, en ocasiones, las benzodiacepinas se usan de manera ilegal. El abuso
crnico de benzodiacepinas puede provocar adiccin, y la combinacin de estos medicamentos con
otros depresores, como el alcohol, puede ser mortal. Algunos nombres informales para estos
medicamentos incluyen "downers" ("sedantes"), "benzos", "nerve pills" ("pldoras para los
nervios"), "candy" ("dulce") y "tranks" ("tranquilizantes").

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Incluso si le han recetado estos medicamentos, es posible que necesite esta prueba si muestra signos
de sobredosis. Los sntomas de sobredosis incluyen confusin, habla poco clara, prdida de la
coordinacin muscular, estupor y prdida del conocimiento. Las benzodiacepinas tambin pueden
causar presin arterial baja, respiracin lenta o superficial y paro cardaco.
Tambin es posible que le realicen esta prueba si un proveedor de atencin mdica sospecha que
usted est abusando de los medicamentos de manera ilegal o sin una receta.
Si usted parece confundido, no puede despertarse, tiene convulsiones o pierde el control muscular,
tambin es posible que le realicen esta prueba como parte de una prueba de deteccin general, a fin
de detectar la presencia de otros medicamentos de los que se abusa comnmente. Estas pruebas de
deteccin varan de un hospital a otro pero, a menudo, incluyen pruebas de deteccin de cocana,
opioides, anfetaminas, barbitricos, benzodiacepinas, marihuana o fenciclidina.
Si usted est consciente, puede hablar con los mdicos y est dispuesto a cooperar, puede
proporcionar informacin que ayude a los proveedores de atencin mdica a determinar cul es la
prueba apropiada para su situacin. Por ejemplo, si es vctima de agresin sexual, es posible que le
realicen esta prueba para determinar si alguna persona agreg una droga para la violacin en citas
perteneciente a la clase de las benzodiacepinas, como Rohypnol ("roofie"), a su bebida sin que usted
lo notara.
Es posible que tambin le realicen una prueba si los mdicos creen que usted ha tomado
benzodiacepinas de manera accidental o en un intento de suicidio.1
CODEINA
Este examen comprueba la presencia de codena en la orina. La codena es un tipo de medicina
llam un opioide, y es una medicina de dolor narctica. Este examen es usado cuando el abuso de
opioide es sospechado
Otros nombres para este examen
Urine codeine level
Urine codeine measurement

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Los exmenes de laboratorio pueden realizarse por muchas razones. Los exmenes se realizan para
exploratorias rutinarias o si se sospecha una enfermedad o toxicidad. Los exmenes de laboratorio
tambin se pueden usar para determinar si una condicin mdica esta mejorando o empeorando.
Tambin pueden ser utilizados para determinar la efectividad o fallecimiento de un medicamento o
plan de tratamiento. Pueden ser solicitados por razones mdicas o legales. Usted podra necesitar
esta prueba si tiene:
Abuso narctico
Existen varios factores para determinar cundo y con qu frecuencia se pueden realizar los
exmenes. Su duracin puede depender de los resultados o terminacin de otros exmenes,
procedimientos o tratamientos. Los exmenes pueden ser realizados inmediatamente en una
emergencia o pueden ser demorados conforme una condicin es tratada o monitoreada. Se puede
sugerir un examen o llegar a ser necesario cuando aparecen ciertos signos o sntomas.2
Debido a cambios de las funciones naturales del organismo durante el da, los exmenes pueden ser
realizados en una determinada hora. Si usted se ha preparado para este examen con cambios en la
ingesta de comida o lquidos, los exmenes pueden ser realizados de acuerdo con estos cambios.
Los intervalos para la realizacin de los exmenes pueden basarse en el aumento o disminucin de
los niveles de medicamentos, drogas u otras sustancias en el organismo.
La edad o el gnero de las personas pueden influir en la fecha y la frecuencia con que se requiere un
examen. Las condiciones crnicas o progresivas pueden necesitar un monitoreo continuo mediante
exmenes. Ciertos exmenes pueden ser repetidos para obtener una serie de resultados o para
confirmar o refutar resultados. Las veces que deban realizarse los exmenes y su frecuencia varan
dependiendo si se llevan a cabo por razones profesionales o legales.
Para obtener una muestra de orina, se le pedir que orine en un contenedor. Lo debe usted llenar lo
ms que pueda, pero sin que se desparrame. Las muestras de orina se pueden obtener tambin
utilizando un catter.
El grado de molestia que usted puede sentir depender de muchos factores, incluyendo su
sensibilidad para el dolor. Comunquele a la persona que realiza la prueba lo que est sintiendo.
Informe a dicha persona si usted no puede continuar con el procedimiento.
Esta prueba usualmente no causa molestia.

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Despus de obtener la muestra de orina es necesario cerrar el contenedor. Coloque el contenedor
donde el mdico le indique. Lave sus manos con agua y jabn.2
Riesgos
Orina: El examen general de orina se considera seguro. Consulte con su mdico en caso de duda
acerca de los riesgos de este examen.
Resultados normales para ste examen
Los resultados de las pruebas de laboratorio pueden variar dependiendo de la edad, gnero, historia
clnica, el mtodo usado para esta prueba y muchos otros factores. Si sus resultados son diferentes
de los resultados sugeridos a continuacin, esto no significa que usted tenga una enfermedad.
Contacte a su mdico para cualquier pregunta que tenga. Los siguientes resultados son considerados
normales para estas pruebas:
Negativo
NICOTINA
Este examen mide la cantidad de cotinine (un subproducto de nicotina) en la orina. Este examen es
usado para tasar el consumo de nicotina o la exposicin.
Otros nombres para este examen
Urine cotinine level
Urine cotinine measurement
Los exmenes de laboratorio pueden realizarse por muchas razones. Los exmenes se realizan para
exploratorias rutinarias o si se sospecha una enfermedad o toxicidad. Los exmenes de laboratorio
tambin se pueden usar para determinar si una condicin mdica est mejorando o empeorando.
Tambin pueden ser utilizados para determinar la efectividad o fallecimiento de un medicamento o
plan de tratamiento. Pueden ser solicitados por razones mdicas o legales. Usted podra necesitar
esta prueba si tiene:
Uso y exposicin al tabaco - datos

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Existen varios factores para determinar cundo y con qu frecuencia se pueden realizar los
exmenes. Su duracin puede depender de los resultados o terminacin de otros exmenes,
procedimientos o tratamientos. Los exmenes pueden ser realizados inmediatamente en una
emergencia o pueden ser demorados conforme una condicin es tratada o monitoreada. Se puede
sugerir un examen o llegar a ser necesario cuando aparecen ciertos signos o sntomas.
Debido a cambios de las funciones naturales del organismo durante el da, los exmenes pueden ser
realizados en una determinada hora. Si usted se ha preparado para este examen con cambios en la
ingesta de comida o lquidos, los exmenes pueden ser realizados de acuerdo con estos cambios.
Los intervalos para la realizacin de los exmenes pueden basarse
en el aumento o disminucin de los niveles de medicamentos, drogas u otras sustancias en el
organismo.
La edad o el gnero de las personas pueden influir en la fecha y la frecuencia con que se requiere un
examen. Las condiciones crnicas o progresivas pueden necesitar un monitoreo continuo mediante
exmenes. Ciertos exmenes pueden ser repetidos para obtener una serie de resultados o para
confirmar o refutar resultados. Las veces que deban realizarse los exmenes y su frecuencia varan
dependiendo si se llevan a cabo por razones profesionales o legales. 3
Prepararme para el examen
Debe tomar suficientes lquidos para obtener una muestra de orina, a menos que reciba otras
instrucciones. Trate de no vaciar la vejiga antes del examen.
Para obtener una muestra de orina, se le pedir que orine en un contenedor. Lo debe usted llenar lo
ms que pueda, pero sin que se desparrame. Las muestras de orina se pueden obtener tambin
utilizando un catter.
El grado de molestia que usted puede sentir depender de muchos factores, incluyendo su
sensibilidad para el dolor. Comunquele a la persona que realiza la prueba lo que est sintiendo.
Informe a dicha persona si usted no puede continuar con el procedimiento.3
Esta prueba usualmente no causa molestia.

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Despus de obtener la muestra de orina es necesario cerrar el contenedor. Coloque el contenedor
donde el mdico le indique. Lave sus manos con agua y jabn.
Riesgos
Orina: El examen general de orina se considera seguro. Consulte con su mdico en caso de duda
acerca de los riesgos de este examen.
Resultados normales para ste examen
Los resultados de las pruebas de laboratorio pueden variar dependiendo de la edad, gnero, historia
clnica, el mtodo usado para esta prueba y muchos otros factores. Si sus resultados son diferentes
de los resultados sugeridos a continuacin, esto no significa que usted tenga una enfermedad.
Contacte a su mdico para cualquier pregunta que tenga. Los siguientes resultados son considerados
normales para estas pruebas:
No-fumadores: 1-20 ng/mL (6-114 nmol/L) [1]
Fumadores: 300-1300 ng/mL (1703-7378 nmol/L) [1]
OPIACEOS
La Prueba de Drogas de Morfina / Opiceos en orina Instant-View es una prueba de diagnstico
rapido, de flujo lateral para detectar anfetaminas en orina humana en un punto de corte de 2000
ng/ml. El indice de Precision es > 96.2%. Este analyto tiene aprobacion por la FDA y Marca CE
Una gran clase de medicamentos utilizados legalmente como un calmante para el dolor y el
supresor de la tos (codena). La herona (diacetilmorfina) es un opiceo ilegal procedente de la
amapola del opio. Adems de los opiceos primarios, opiceos sintticos se utilizan a menudo en el
alivio del dolor.
La deteccin de la morfina en la orina humana es ampliamente utilizado para evaluar el consumo de
opiceos, la clase de drogas a las cuales la morfina pertenece. Los opiceos son estimulantes del
sistema nervioso y son detectables en la orina durante 2-4 das despus de su uso. La prueba InstantView esta destinado al sector salud para su uso Profesional y proporciona los resultados
preliminares de deteccin. Se recomienda que un mtodo qumico mas especifico (i.e. GC/MS) se
utiliza con el fin de obtener un resultado analtico confirmado.4

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO

Disponible en los siguientes formatos:

Cassette con Pipeta (Paquete con 25 Piezas) Tiras Sumerjibles (Paquete con 50 Piezas) Otros Puntos
de Corte Disponible:
300 ng / mL (Aprobado por la FDA, Marca CE y OTC)4

REFERENCIAS BIBLIOGRFICAS:
1._ Ataonline.org.ar [Internet]. Manual de procedimientos analticos toxicolgicos para laboratorio
de

baja

complejidad;

2007

[citado

Jul

2015].

Disponible

en:

http://www.ataonline.org.ar/bibliotecavirtual/documentos_utilies/toxicologia_libro_analitica.pdf
2.

Brady HR, Brenner BM. Mecanismos patognicos de la lesin glomerular. En: Harrison.

Principios de Medicina Interna. 14 ed. 2000. McGraw-Hill Interamericana. Mxico.

3. Argote E, castro AL, Otero LM.. Colomb Md 2004;35(1):38-45.
4. Waltkins S , Avner E. congnita y enfermedad hereditaria. Displasia renal , hipoplasia , y
miscelneo qusticas trastornos. Enfermedad. Es: Barrat M , Avner E. , W. Harmon Nefrologa
Peditrica . Ed Lippincott Williams & Wilkins, 1998 ; 415-425 , 459-474 .
5. Levy M. Qu tan bien que gestionar y apoyar a los pacientes y familias con herencia dominante
Dial Transplant 2001 ; 16 : 1-4 .

SEMINARIO N8 ANALISIS CLINICO