Desde los genes hasta las PROTENAS

Cmo los investigadores a descifrar la informacin en el ADN?

Virtualmente todos los materiales biolgicos, tales como esta muestra de
sangre, contienen ADN. Incluso pequeas cantidades de fluidos biolgicos
pueden producir trazas de ADN.
Debido a que la secuencia de nucletidos en una molcula de ADN es una
forma de informacin, la capacidad de leer e interpretar la secuencia hace que
sea posible identificar un individuo o diagnosticar una enfermedad. Por
ejemplo, el anlisis del ADN fetal en la circulacin materna puede revelar
anomalas cromosmicas, as como la presencia de variantes de secuencia que
pueden causar enfermedades. Sin embargo, las tcnicas para la lectura de las
secuencias de ADN, que se describen en este captulo, tambin generan
desafos en la recopilacin de grandes cantidades de datos y la comprensin de
cmo las clulas se almacenan a si mismas y utilizar esa informacin.

Todos los componentes estructurales de las clulas y la maquinaria que llevan

a cabo las actividades de las clulas son especificados fundamentalmente por
el material gentico de la clula-DNA. Por lo tanto, antes de examinar otros
tipos de molculas biolgicas y sus transformaciones metablicas, debemos
tener en cuenta la naturaleza del ADN, incluyendo su estructura qumica y
cmo su informacin biolgica est organizada y expresada. La seccin de
Herramientas y Tcnicas de este captulo incluye algunos de los mtodos
utilizados para estudiar y manipular el ADN en el laboratorio.

3-1 El DNA es el material gentico

Conceptos claves

El ADN y el ARN son polmeros de nucletidos, cada uno de los

cuales consta de una base de purina o pirimidina, desoxirribosa o
ribosa y fosfato.
Una molcula de ADN contiene dos hebras antiparalelas que se
enrollan alrededor de la otra para formar una doble hlice en la
que las bases de A y T estn en hebras opuestas, y las bases de C
y G estn en hebras opuestas, emparejndose a travs de enlaces
de hidrgeno.

Los cidos nucleicos de doble hebra se desnaturalizan a

temperaturas elevadas; en temperaturas muy bajas, los
polinucletidos complementarios unidos (Atravez de los puentes
de hidrogeno, para formar una doble hebra).

Gregor Mendel ciertamente no fue el primero en darse cuenta de que

las caractersticas de un organismo (por ejemplo, color de la flor o la
forma de las semillas en plantas de guisantes (arveja)) se pasaron a
su descendencia, pero en 1865 l fue el primero en describir sus
patrones predecibles de herencia. En 1903, los factores hereditarios
de Mendel (ahora llamados genes) fueron reconocidos como
pertenecientes a los cromosomas (una palabra que significa "cuerpos
de color"), que son visibles al microscopio ptico (Fig. 3-1).
Los cidos nucleicos han sido descubiertos en 1869 por Friedrich
Miescher, quien aisl este material de las clulas blancas de la sangre
en el pus de vendas quirrgicas. Sin embargo, cuando se hizo
evidente que los cromosomas estaban compuestas de ambas
protenas y nucleico cidos, los cidos nucleicos fueron descartados
como posibles portadores de la informacin gentica, debido a su
falta de complejidad: Ellos slo contena cuatro diferentes tipos de
unidades estructurales, llamadas nucletidos. En contraste, las
protenas contenan 20 tipos diferentes de aminocidos y mostro una
gran diversidad en la composicin, el tamao y la forma-atributos que
parecan ms apropiados para los portadores de la informacin
gentica.
Aos despus, los microbilogos mostraron que una sustancia de una
cepa de un patgeno muerto (causante de la enfermedad) de la
bacteria Streptococcus pneumoniae podra transformar las clulas de
una cepa normal al tipo de patgenos. En 1944, Oswald Avery, Colin
MacLeod y McCarty Maclyn demostraron que esta sustancia
transformadora era el cido desoxirribonucleico (ADN), pero sus
resultados no obtuvieron mucha atencin.
Otros siete aos pasaron hasta que Alfred Hershey y Martha Chase
demostraron que en bacterifagos (virus que infectan clulas
bacterianas y que consisten solamente de protenas y ADN), el ADN,
no la protena, fue el agente infeccioso (Fig. 3-2). Por este tiempo, el
ADN se sabe que contienen cadenas de nucletidos polimerizados-

abreviado A, C, G y T-pero stos se pensaban que se produjera tan

simple repeticin de tetranucleotidos, por ejemplo,
ACGT-ACGT-ACGT-ACGT

Figura 3-1 Los cromosomas humanos de la amniocentesis. En

esta imagen, los cromosomas han sido teidos con colorantes
fluorescentes.

Figura 3-2 Un tipo de bacterifago T. El fago o bacterifago

consiste sobre todo en una cubierta proteica que rodea a una
molcula de ADN. Alfred Hershey y Martha Chase identificaron el ADN
como el agente infeccioso.
Cuando Erwin Chargaff demostr en 1950 que los nucletidos en ADN
no estaban todos presentes en igual nmero y que la composicin de
nucletidos vari entre especies, se hizo evidente que el ADN podra
ser lo suficientemente compleja para ser el material gentico
despus de todo, y la carrera estaba en descifrar su estructura
molecular.
La estructura del ADN en ltima instancia aclarada por James Watson
y Francis Crick en 1953 incorporando observaciones de Chargaff.
Especficamente, Chargaff observ que la cantidad de A es igual a la
cantidad de T, la cantidad de C es igual a la cantidad de G, y la
cantidad total de A + G es igual a la cantidad total de C + T. Las
"reglas" de Chargaff podran ser satisfechas por una molcula con
dos cadenas de polinucletidos (polmeros de nucletidos) en la que
A y C en un par hebra con T y G en el otra.

Los cidos nucleicos son polmeros de

nucletidos
Cada nucletido de ADN incluye una base que contiene nitrgeno. El
bases adenina (A) y guanina (G) son conocidas como purinas porque
se asemejan a lo orgnico purina compuesto:

Las bases de citosina (C) y timina (T) son conocidas como pirimidinas
porque se parecerse al compuesto orgnico de pirimidina:

El cido ribonucleico (RNA) contiene el uracilo de pirimidina (U) en

lugar de timina:

De modo que el ADN contiene las bases A, C, G y T, mientras que el

ARN contiene A, C, G y U.
El tomo de vinculacin N9 en una purina o tomo N1 en una
pirimidina para una azcar de cinco carbonos forma un nuclesido. En
el ADN, el azcar es
2-desoxirribosa; en el ARN, el
azcar es ribosa (los tomos de azcar estn numerados con
nmeros primos para distinguirlos de los tomos de la bases unida).

Tabla 3-1

Los Nuclesidos y nucletidos que contienen 2-desoxirribosa en

lugar de ribosa pueden ser llamados desoxinuclesidos y
desoxinucletidos. La abreviatura de nucletidos est entonces
precedido por "d".
La Timina se encuentra en el ADN, pero no en RNA.
El uracilo se encuentra en el ARN pero no en el ADN.

Un nucletido es un nuclesido a la que est unido uno o ms grupos

fosfato, generalmente a C5 del azcar. Dependiendo de si hay uno,
dos, o tres grupos fosfato, el nucletido es conocida como un
nuclesido monofosfato, nuclesido de difosfato, o nuclesido de
trifosfato y est representado por una abreviatura de tres letras, por
ejemplo,

Los Desoxinucletidos se denominan de manera similar, y sus

abreviaturas estn precedidas por "d". Los homlogos desoxi de los

compuestos que se muestran arriba sera por lo tanto

desoxiadenosina monofosfato (dAMP), difosfato desoxiguanosina
(dGDP) y trifosfato de desoxicitidina (dCTP). Los nombres y siglas de
las bases comunes, nuclesidos y nucletidos se resumen en la Tabla
3-1.

Algunos nucletidos tienen otras funciones

Adems de servir como bloques de construccin de ADN y ARN,
nucletidos realizan una variedad de funciones en la clula. Estn
involucrados en la transduccin de la energa, la sealizacin
intracelular y la regulacin de la actividad enzimtica. Algunos
nucletidos derivados son actores esenciales en las vas metablicas
que sintetizan biomolculas o degradarlos con el fin de "captar" la
energa libre. Por ejemplo, la coenzima A (CoA; Fig. 3-3a) es un
portador de otras molculas durante su sntesis y la degradacin.
Dos nucletidos estn unidos en los compuestos de dinucletido
adenina nicotinamida (NAD; Fig. 3-3b) y la flavina adenina
dinucletido (FAD; 3-3c Fig.), que somete a oxidacin reversible y la
reduccin durante una serie de reacciones metablicas.
Curiosamente, una parte de las estructuras de cada una de estas
molculas se deriva de una vitamina, un compuesto que se debe
obtener de la dieta.
Figura 3-3 Algunos derivados de nucletidos. El grupo de
adenosina de cada uno de estos compuestos se muestra en rojo.
Tenga en cuenta que cada uno tambin contiene un derivado de la
vitamina. (a) la coenzima A (CoA) contiene un residuo de cido
pantotnico (pantotenato), tambin conocido como vitamina B5. El
grupo sulfhidrilo es el sitio de unin de otros grupos. (b) El grupo de
la nicotinamida adenina dinucletido de nicotinamida (NAD) es un
derivado de la vitamina niacina (tambin llamado cido nicotnico o
vitamina B3; ver recuadro) y se somete a oxidacin y reduccin.
El relacionado compuesto de nicotinamida adenina dinucletido
fosfato (NADP) contiene un grupo fosforilo en la posicin C2 de
adenosina. (c) La oxidacin y la reduccin de flavina adenina
dinucletido (FAD) se produce en el grupo de riboflavina (tambin
conocida como vitamina B2).