CALIDAD MICROBIOLOGICA

DE LAS QUEBRADAS
QUINCEAERA Y BRISAS
DEL HUALLAGA
PARQUE NACIONAL TINGO
MARIA

INTRODUCCION
El Parque Nacional Tingo Mara se localiza en la ecorregin selva alta del Per, en el departamento de
Hunuco, provincia de Leoncio Prado, distrito de Mariano Dmaso Beran, su zona de
amortiguamiento se ubica en el Distrito de Rupa Rupa. La superficie del PNTM, es de 4, 777,80
hectreas.
El Parque Nacional Tingo Mara es una de las reas ms importantes a nivel nacional, encargada de
conservar la biodiversidad y ecosistemas que conforman la ecorregin selva alta, razn de existencia
del rea natural protegida, por consiguiente se tiene que proteger las nacientes de agua ubicadas dentro
de esta rea.
En cumplimiento de esto se analiz durante los meses de Enero y Febrero la calidad de agua de dos
captaciones, Alania y Brisas del Huallaga que por definicin implica que esta debe encontrarse libre de
organismos patgenos, sustancias qumicas, impurezas y cualquier tipo de contaminacin que cause
problemas a la salud humana (O.M.S, 2003); sin embargo el agua encontrada en estado natural nunca
est en estado puro, sino que presenta sustancias que pueden limitar, de modo igualmente natural, el
tipo de usos del agua.
Estas quebradas que proveen de agua en forma artesanal no presentan indicadores de contaminacin
fecal; sin embargo si contienen contaminantes microbiolgicos naturales como hongos,
microorganismos aerobios viables, staphylococos, etc.

OBJETIVOS
Objetivo General
-

Analizar la calidad microbiolgica del agua en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga.

Objetivo Especifico
-

Determinar la presencia de coliformes totales y fecales en las captaciones Alania y Brisas del

Huallaga.
Determinar la presencia de Microorganismos aerobios viables en las Alania y Brisas del

Huallaga.
Determinar la presencia de Mohos y Levaduras en las captaciones Alania y Brisas del Huallaga.
Determinar la presencia de Staphyloccus y Streptococcus fecales en las captaciones Alania y

Brisas del Huallaga.

Determinar la presencia de Vibrio cholerae y Salmonella en las captaciones Alania y Brisas del
Huallaga.
-

DESCRIPCION DE LA ZONA ESTUDIO

El Parque Nacional Tingo Mara es un bosque hmedo pre montano tropical, se caracteriza por tener
Clima hmedo - Clido, con temperatura media anual variable entre 22C y 24C; y la precipitacin
pluvial total, promedio anual, entre 2 200 y 3 000 milmetros. Es un bosque siempre verde.
La zona donde se ubica la captacin del sector Quezada se encuentra impactada por las actividades
humanas (agricultura migratoria y turismo), est ubicada en la zona de uso especial del Parque, la
vegetacin caracterstica esta predominada por especies arbreas y arbustivas. En esta zona an se
puede encontrar aves, insectos, etc. Aunque con mucha dificultad.
La zona donde se ubica la captacin para el AA HH Brisas del Huallaga ha sido poco impactada ya que
se encuentra en zona de proteccin estricta, las afectaciones existentes se deben a la construccin de
esta captacin con su respetivo reservorio, la vegetacin es densa, encontrndose especies arbreas de
gran altura, especies herbceas y arbustivas. El bosque se presenta cubierto de musgos, lquenes,
bromelias y otras epfitas. En esta zona todava se pueden observar monos, pavas, entre otras especies
representativas de la fauna del Parque.
PERIODO DE INVESTIGACION
Se evalu la calidad microbiolgica del agua en las captaciones de agua del sector Quezada y AA HH
Brisas del Huallaga, poca de lluvias (Enero y Febrero).
CALIDAD DEL AGUA
El trmino calidad del agua se aplic originalmente para la de consumo humano, despus para la de
uso agrcola e industrial. Con base en la composicin del agua y en consecuencias de sus
caractersticas, se puede clasificar para diversos usos. Los estndares de calidad ambiental establece las
siguientes categoras de uso de agua: poblacional y recreacional, actividades marino costeras, riego de
vegetales y bebida de animales, conservacin del ambiente acutico (MINAM, 2008).
Sin embargo el agua encontrada en estado natural nunca est en estado puro, sino que presenta
constituyentes orgnicos e inorgnicos. Estos pueden limitar, de modo igualmente natural, el tipo de
uso del agua.
Segn la CONAGUA (2004), los principales contaminantes del agua son: Los agentes patgenos,
bacterias, virus, protozoarios, parsitos que entran al agua, provenientes de desechos orgnicos de
origen natural o antropogenico.
La Organizacin Mundial de la Salud (OMS) en sus Guas para la calidad del agua potable, y otras
normas internacionales, establecen o recomiendan que el agua es apta bacteriolgicamente para

consumo si se encuentra exenta de microorganismos patgenos de origen entrico y parasitario

intestinal. Ellos transmiten enfermedades tales como salmonelosis (Salmonella), shigelosis (Shigella),
colera (Vibrio Cholerae), amebiasis (Entamoeba histolytica), alteraciones gastrointestinales
(Aeromonas

mesfilas,

Helicobacter

pylori,

Campylobacter);

giardiasis

(Giardia

lamblia),

cristosporidiosis (Crystosporidium), esquistosomiasis (Schistosoma), desrdenes hepticos (virus de

hepatitis), etc.
La presencia de microorganismos patgenos en el agua de bebida es un riesgo que se incrementa en las
reas rurales sin disponibilidad de agua potable. La seguridad que un agua contaminada puede ser
causal de enfermedades, ha conducido a la necesidad de monitorear la calidad microbiolgica de
muestras de diversos orgenes.
COLIFORMES TOTALES Y FECALES
En los cuerpos de agua habitan, normalmente, muchos tipos de bacterias, las cuales son importantes,
pues ellas se alimentan de materia orgnica, y por consiguiente son las principales responsables por el
proceso de autodepuracin.
Coliformes totales: se encuentran comnmente en el medio ambiente (por ejemplo, en el suelo y las
plantas) y generalmente no causan enfermedades.
Coliformes fecales: es un subgrupo de bacterias coliformes totales que se encuentran en grandes
cantidades en los intestinos y excremento de los humanos y animales. Su presencia indica que el agua
est contaminada con materia fecal, y tiene el potencial de causar enfermedades (CAMPOS, 1999).
MICROORGANISMOS AEROBIOS VIABLES
Microorganismos aerobios mesfilos son aquellos microorganismos que se desarrollan en presencia de
oxgeno libre y a una temperatura comprendida entre 20C y 45C con una zona ptima entre 30C y
40C. Por lo general este grupo de microorganismos indican contaminacin ambiental; un nmero
elevado de estos no necesariamente significa presencia de patgenos (INEN, 2006).
MOHOS Y LEVADURAS
Los mohos son hongos filamentosos que viven como saprofitos en el suelo y agua donde contribuyen a
la descomposicin de la materia orgnica y al reciclado de materia orgnica. Se encuentran distribuidos
ampliamente en la naturaleza y algunos son causantes de alergias.
Las levaduras son clulas nicas, por lo general de forma esfrica a elipsoide. Algunas especies son
hongos dimorfos capaces de crecer como levaduras o mohos segn las condiciones del ambiente,

normalmente no son patgenas a excepcin de la Candida albicans, en su forma filamentosa puede

causar infecciones vaginales y pulmonares.
Las levaduras se distinguen de los mohos en que son unicelulares, no suelen formar filamentos
(GRANADOS y VILLAVERDE, 2003).
STAPHYLOCCUS Y ESTREPTOCOCUS
Los Staphylococcus son microorganismos relativamente extendidos en el medio ambiente, pero se
encuentran principalmente en la piel y las mucosas de los animales y humanos. Es anaerobio
facultativo y crece bien en manitol a 37C. Los Staphylococcus pueden ser liberados por contacto
humano en las aguas naturales de uso recreativo, tambin se ha detectado en aguas de consumo, aunque
su presencia se controla con facilidad mediante tratamientos y desinfeccin convencionales.
Los Streptococcus son bacterias integrantes de la flora normal de los animales homeotrmicos. El
gnero Streptococcus rene apenas dos especies: S. bovis y S.equinu, que son ms abundantes en heces
animales. Presentan tasas se supervivencia semejantes a la de los patgenos entricos (CAMPOS,
1999). Los Estreptococos fecales no se multiplican en el medio ambiente, o si esto ocurre es solamente
en raras ocasiones. Son ms persistentes en ambientes acuticos y en suelos contaminados que E. coli.
Son importantes en situaciones donde se sabe que hay contaminacin fecal y no se detectan coliformes,
como ocurre cuando las descargas son intermitentes o ms antiguas, de modo que mueren los
coliformes fecales y E. coli, y permanecen los estreptococos (CAMPOS, 1999).
SALMONELLA Y VIBRIO CHOLERAE
El gnero Salmonella son bacilos gram-negativos, crecen ptimamente a 37C y pueden catabolizar la
glucosa y otros carbohidratos con produccin de cido y gas, estn ampliamente distribuidos en la
naturaleza, siendo responsables de las siguientes enfermedades: fiebre tifoidea, paratifoidea y
salmonelosis, constituyendo un importante problema en la salud pblica (WAFAA y AMANI, 2011).
El medio ambiente se contamina por excretores humanos y animales. Por lo general, los animales son
slo portadores que eliminan Salmonellas de forma regular, aunque en pequeas cantidades, estas se
transmiten a travs de las aguas superficiales.
Los miembros del genero Vibrio son bacilos gramnegativos curvos o rectos, anaerobios facultativos,
habitantes naturales de aguas dulces y saladas.
La familia Vibrionaceae incluye muchas especies, que en su mayor parte son habitantes normales del
ambiente acutico. De ms de 30 especies Vibrio solo 12 se han reconocido como patogenos para el ser
humano y solo V cholerae se asocia con el clera epidmico (WAFAA y AMANI, 2011).

MATERIALES Y METODOS
Materiales
-

Envase de vidrio (1L)

Pipetas de 10mL y 1mL estriles

Mechero
Placas
Tubos de ensayo
Gradillas
Tubo Durham

con tapn de algodn

Asa bacteriolgica o inoculador

Equipos

Incubadora 37C, 44.5C y 20C

Horno para esterilizar material de vidrio a 160C. 180C
AutoClave
Bao Mara
Balanza digital

Medios de cultivo

Caldos: peptona, lactosado, Brilla, E. Coli, Tetrationato, Selenito Cistina

Agar: Plate Count, Sabouraud, Nutritivo, Manitol salado, Sangre, TCBS, SS

Preparacin de materiales
- Se prepar los frascos de muestreo, esterilizados y rotulados con el nombre del punto de

muestreo. Estos no fueron abiertos hasta el momento de la toma de muestra.

-

Mtodos

Muestra

El muestreo se realiz durante dos das, entre las 8:00 y 10:00 de la maana, una
muestra diaria. Cada muestra de agua fue colectada manualmente al inicio de la
captacin, muestreo puntual, en 1 frasco de vidrio de 1L de volumen (APHA, 1999),
sumergindolos en el agua de manera que la boca apunte hacia la corriente.
Inmediatamente se llev la muestra al laboratorio de microbiologa de la Universidad
Nacional Agraria de la Selva. La captacin del sector Quezada, quebrada Quinceaera se
encuentra ubicado en las coordenadas UTM 391563E, 8964491N a 1040 msnm y la
captacin del AA HH Brisas del Huallaga en las coordenadas 389308 E y 8968230 N a
913 msnm, estas zonas fueron geoposicionados con un GPS de la marca GARMIN.

La frecuencia de muestreo y anlisis se realiz 1 vez al mes, durante Enero y Febrero.

Anlisis microbiolgico

Para los anlisis se tomaron muestras de agua en recipientes 1 L de vidrio, previamente

esterilizadas en autoclave (120C/ 15-.20 min) las cuales permanecieron perfectamente
cerradas hasta la toma de la muestra.

Los mtodos utilizados para analizar las muestras fueron mediante medios selectivos
para cada grupo bacteriano.

Se utiliz medios lquidos para coliformes fecales y totales, y agar para el aislamiento de
los Staphylococcus y Streptococcus fecales, mohos, microorganismos aerobios viables,
Vibrio cholerae y Salmonella.

Para la determinacin de los grupos bacterianos se realizaron diluciones (10-1, 10-2 y

10-3).

Para el grupo de las coliformes totales se utiliz el caldo Brilla incubndo por 24 horas a
37C y para coliformes fecales el caldo E. Coli incubndose por 24 a 48 horas a
44.50.5C.

El grupo de microorganismos mesfilos aerobios viables se incubo en agar plate count

por 24 horas a 37C

El grupo de los mohos se incub en un medio sabouraud por 72 horas a temperatura

ambiente (20C).

El grupo de los Staphylococcus se incub en manitol por 24 a 48 horas a 37C.

El grupo Streptococcus se incub en agar sangre por 24 a 48 horas a 37C

El grupo Vibrio se incub en agar TCBS a 37C previo enriquecimiento con caldo
peptona y cloruro de sodio (NaCl).

El grupo Salmonella se incub en agar SS a 37C previo pre enriquecimiento con caldo
lactosado y enriquecimiento selectivo con caldo Tetrathionate y Selenite cistine.

Los resultados se reportaron en unidades formadoras de colonias por 100 mL (UFC/100

mL) en mohos y microorganismos mesfilos viables. Se cuantifico los coliformes por el
mtodo indirecto del nmero ms probable.

Para Staphylococcus, Streptococcus, Vibrio cholerae y Salmonella los resultados se

presentaron en presencia/ausencia

RESULTADOS

Cuadro 1. Resultados de los anlisis microbiolgicos, indicadores de contaminacin.

-

Str

a
p
h
y
l
o
c
o
c
c
u
-

1r

s
A

Au

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Pr

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a

1r

18

Au

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a

2d

21

Pr

e
s
e
n
c
i
a

Cuadro 2. Comparacin de resultados con los ECAs para Agua.

Parmetr
os

ECA
Categor
a 1 A1

ECA
Categor
a 4
Ros
Selva

Capta
cin
Secto
r
Queza
da

Coliforme
s totales

E. coli

2000
NMP/10
0ml
ND

2
NMP/1
00ml
-

Salmonel
la
Vibrio
cholerae
Mohos y
levaduras

ND

ND

50
NMP/10
0ml
0
NMP/10
0ml
Ausenci
a
Ausenci
a
ND

ND

Microorga
nismos
aerobio
viables
Staphylo
coccus
Streptoc
occus

ND

ND

3 x 103
col/ml

ND

ND

ND

ND

Ausencia de coliformes

Ausen
cia
Ausen
cia
1 x 103
col/ml

Presencia de mohos y levaduras

Presencia de Microorganismos mesofilos aerobios viables

Presencia de staphylococcus

Presencia de Streptococcus

Ausencia de Salmonella y Vibrio

DISCUSIONES

Los resultados de las muestras de agua indicaron la presencia de microorganismos

propios del ambiente acutico y tambin agentes patgenos, Staphylococcus y
Streptococcus provenientes de desechos orgnicos en su mayora de origen natural, si
estas bacterias se encuentran en grandes cantidades en el agua pueden causar afecciones
a la piel pero estos problemas pueden ser resueltos por desinfeccin convencional. Estos
gneros de bacterias naturalmente se encuentran en la piel y mucosas de los animales
por lo que se puede asegurar que solo la fauna local puede contaminar las aguas de estas
quebradas ya que las zonas muestreadas se encuentran dentro de un Area Natural
Protegida que limita el contacto de las aguas superficiales con los seres humanos.

Se descarta la presencia de contaminacin fecal en estas quebradas ya que los

indicadores mostraron un mnimo nmero de microorganismos coliformes totales y
fecales o la ausencia total de estos. As mismo estas aguas no contienen
microorganismos de los gneros Vibrio y Salmonella reafirmando la inexistencia de
contaminacin fecal antropognica, por tanto estas aguas son aptas para el consumo
humano previa desinfeccin simple para eliminar los microorganismos propios del
ambiente.

CONCLUSIONES

Las Quebradas Quinceaera y Brisas del Huallaga no se encuentran contaminadas por

desechos orgnicos antropognicos, no presentan indicadores de contaminacin fecal,
coliformes, vibrios y salmonellas. Por consiguiente estas aguas pueden ser aprovechadas
para el consumo humano previa desinfeccin simple.

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

APHA, 1999.Standard Methods for the Examination of Water and Wastewater,

American Public Health Association, New York, EUA

CAMPOS C, 1999. Indicadores de contaminacin fecal en la reutilizacin de aguas

residuales para riego agrcola. Tesis doctoral. Facultad de Biologa. Universidad de
Barcelona.

CONANP, 2011. Estudio para monitorear los parmetros de calidad de agua de las
lagunas comunicadas con el sistema lagunar Tepancoapan. Chiapas, Mxico.
INSTITUTO ECUATORIANO DE NORMALIZACION, 2006. Determinacin de la
Cantidad de Microorganismos Aerobios Mesfilos. Quito, Ecuador.

GRANADOS y VILLAVERDE, 2003. Microbiologa: Tomo II. Madrid, Espaa.

LECHEVALLIER y SEIDLER, 1980: Staphylococcus aguas de consumo rural.

Microbiologa ambiental.

MINAM, 2008. D.S-002- Estndares de Calidad Ambiental para Aguas.

SERNANP, 2012. Plan Maestro Parque Nacional Tingo Mara.

WAFAA y AMANI, 2011. Journal of American Science. Detection of Salmonella and
Vibrio species in some seafood in Alexandria.

Atentamente.

Yilssa Helen Tamani Aguirre

GUARDAPARQUE VOLUNTARIO DEL PNTM