Tabla 1.

Absorbencia del ADN de

espinaca segn la longitud de
onda
Longitud de onda
Absorbancia
(nm)
200
0.113
INTRODUCCIN
RESULTADOS.
205
0.160
El
cido
desoxirribonucleico
un
210 es
0.197
biopolmero
bicatenario 215
helicoidal
0.225
antiparalelo complementario. Formado
por
220
0.211
desoxirribonucletidos unidos225
mediante
0.202
enlaces fosfodister cuyas funciones son el
230
0.251
almacenamiento y transmisin de la
235
0.254
informacin gentica. En las clulas
240 dentro
0.221
eucariontes se encuentra presente
245
0.300
de los ncleos celulares.
DISCUSIN
DE
RESULTADOS.
0.502
Las bases nitrogenadas de 250
los cidos
255 delluz
nucleicos
fuertemente
Con base enabsorben
la tabla de absorbencia
ADN de 0.997
ultravioleta
en
la
regin
de
260
a
280
nm.
260
espinaca se verifica que
este tiene una 1.103
La
longitud
de
onda
de
mxima
265
absorbencia mxima en la reginabsorcin
del UV a una 0.981
de
mezclas
de
las
base
nitrogenadas
es
longitud de onda de 260 nm. Lo
que se muestra
270
0.870
aproximadamente
nm. Esta
propiedad
con
claridad en 260
la grfica
del
espectro
de
275
0.749
permite
ladel
deteccin
anlisis
cuantitativo
absorcin
mismo, ypuesto
que
a
esta
longitud
la cantidad de DNA en una muestra con
280
0.614
no
libres sino
losalto y
de solo
ondade
la bases
absorbencia
tienetambin
el285
valorde
ms
absorbencia de 1.0 a 260nm; y la
0.494
nuclesidos,
nucletidos,
molculas
de que
cercano a uno.
Adems seypuede
observar
determinacin con el nomograma, que
290
0.414
DNA
intactas.
la muestra
utilizada contena
otros
Tabla
2.componentes
Concentracin deaunque
cidosrpida y sencilla, tambin es solo una
295
0.355
Los absorban
nucletidos
componentes
de
que
luz son
UV, los
tales
como
protenas
con
nucleicos
por dos mtodos
aproximacin,
adems de que es propensa a
Tabla
3. Concentracin
de
0.290
los
cidos aromticos.
nucleicos, que300son distintos.*
los
aminocidos
errores
de
trazo
que conllevan a errores de
protenas y cidos nucleicos del
depositarios
de
la
Con base en lamoleculares
absorbencia
mxima
obtenida,
Mtodo
(mg/ml)
clculo.
ANEXOS
ADN segn Concentracin
el nomograma.
informacin
estn de
formados
por
se calcul lagentica,
concentracin
cidos
nucleicos
1
2.94
El
ADN no se encuentra exento de
Biomolcula
Concentracin Grafica
de absorbencia vs longitud de onda de
tres
componentes:
una del
base
nitrogenada,
y protenas
por medio
nomograma,
lo que(mg/ml)
2
3.3 contaminantes
puesto que su coeficiente de
espectro
de absorcin del ADN de espinaca.
una
pentosa
y un de
fosfato.
Las bases
dio una
aproximacin
la cidos
cantidad
de ambas. 2.58 pureza es ligeramente inferior a 2.0,
nitrogenadas
de de
dos
Al comparar elderivan
resultado
la compuestos
concentracin de
coeficiente de una muestra pura. Los
nucleicos
parentales,
purina. Tanto
el del
DISCUSIN
DEpirimidina
RESULTADOS.
cidos
nucleicos
con ely resultado
obtenido
son
principalmente
Protenas
7.8 contaminantes
DNA
como
RNA contienen
dos bases
mtodo
1, eldonde
se us como
dato la
aminocidos aromticos, o protenas que los
Con
base principales,
en la tabla de
purnicas
la absorbencia
adenina
y del
laligera
absorbencia
molar de DNA,
existe una
contengan, estos se encuentran junto con la
ADN de espinaca se verifica que este tiene
variacin. Sin embargo, al comparar con el
muestra debido a la centrifugacin realizada
una absorbencia mxima en la regin del
resultado del mtodo 2, donde se utiliz como
para obtener
ADN.
Se Lo
extrajo y purifico
el ADNelde
la espinaca.
UV a una longitud de onda de 260 nm.
dato la concentracin aproximada de DNA
Al
comparar
los
valores
Con un coeficiente de pureza de 1.79. de Rf de la citosina,
que se muestra con claridad en la grfica
cuando se tiene una absorbencia de 1.0, la
con las marcas
nmero 1,2
El mtodo msguanina
precisoy adenina
para determinar
la
del espectro de absorcin del mismo,
variacin es ms grande.
yBIBLIOGRAFIA
3
respectivamente,
del ADN y ARN, estas
concentracin
de
DNA
es:
puesto que a esta longitud de onda
la
De los mtodos utilizados anteriormente, se
tienen
valores
muy
cercanos
entre s, por.4a
lo
A260
Lehninger. Principios de Bioqumica
absorbencia tiene el valor ms alto y
mg
considera como ms preciso a aquel donde
[
DNA ]se = que
Fd
se
comprueba
que
estas
bases
OBJETIVOS
Edicin.
Ed. OMEGA, S.A. (2005) p.p. 274cercano a uno. Adems se puede observar
225
utiliza la absorbencia molar de DNA debido aml
nitrogenadas
se encuentran presentes en
275
354-355.
que la muestra utilizada contena otros
Aislar, purificar y caracterizar DNA de germen de
que este dato tiene ms certeza Se
que:
la
ambos
cidos
nucleicos.
identificaron a trigo.
la adenina, guanina y
componentes que absorban luz UV, tales
aproximacin de la cantidad de DNAcitosina
en unacomo bases
Para
el
caso
de lanitrogenadas
timina,
solo
marca
5, por
en
nitrogenadas
presentes
Separar
las bases
del la
DNA
y el RNA
como
protenas
con
aminocidos
muestra con absorbencia de 1.0 a 260nm;
y
la
la
parte
de
la
elucin
de
DNA,
tiene
un
valor
cromatografa en capa fina
a partir
tanto en el cido desoxirribonucleico
como
en de hidrolizados los
aromticos.
determinacin con el nomograma, queelaunque
correspondiente
con por
ella.
Esto
demuestra
que
mismos,
identificados
la
propiedad
que tienen
de
ribonucleico.
Sin
embargo,
ambos
cidos
Con base en la absorbencia mxima
rpida y sencilla, tambin es solo
una
la
timina
es
la
base
pirimdica
propia
del
contienen bases pirimidnicas
obtenida, se calcul la concentracinnucleicos
de
aproximacin, adems de que es propensa
ala timina
ADN.
uracilo, la marca 4 del
propias:
paraAl elanalizar
ADN y eleluracilo
cidos nucleicos y protenas por medio del
errores de trazo que conllevan a errores
de
ARN tiene el mismo Rf que l, por lo que se
para el ARN.
nomograma, lo que dio una aproximacin
clculo.
comprueba
la base
pirimdica propia
Adems de demostrar
que lacomo
muestra
de DNA
de la cantidad de ambas. De los mtodos
En cuanto a la pureza del ADN obtenido,seeste
no
del ARN. Sincon
embargo
encuentra contaminada
restos la
demarca
RNA nmero 4 del

( )

Tabla 1. Relacin de frentes

(Rf)
Sustancia
Rf
Bases
Uracilo
0.58
Nitrogenad
Adenina
0.50
as
Guanina
0.44
Citosina
0.34
Timina
0.69
RNA
1
0.32
2
0.43
3
0.51
4
0.58
DNA
1
0.33
2
0.46
3
0.52
4
0.62
5
0.68
6
0.79