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dessa reao que cada grupamento metila removido consome uma enzima O6-metilguaninametiltransferase, a qual no pode ser recuperada para nova utilizao.
REPARO POR EXCISO DE BASES
Ocorre quando a remoo da base defeituosa feita pela clivagem da ligao base nitrogenada
desoxirribose, seguida pelo preenchimento da regio com a base correta por ao da DNA-polimerase.
Um exemplo comum de reparo por exciso de base o que acontece na correo da desaminao da
citosina uracila. O sistema de reparao reconhece a uracila como uma base estranha ao DNA. Primeiramente, a uracila-DNA-glicosilase hidrolisa a ligao entre a uracila e a molcula de desoxirribose. Nesse
estgio, a cadeia de DNA est intacta, mas a base perdida. A enzima AP endonuclease reconhece, ento,
essa fenda e cliva a cadeia em regies adjacentes base perdida. A DNA-polimerase insere novamente
uma citosina, de acordo com a orientao fornecida pela fita complementar no-danificada, que contm
uma guanina. Finalmente, a integridade da fita corrigida restaurada pela DNA-ligase. Existem outras
glicosilases que reconhecem e removem hipoxantina, 3-metil-adenina e purinas com anel imidazol aberto
por radiao ionizante ou pH elevado.
REPARO POR EXCISO DE NUCLEOTDEOS (REN)
Ocorre quando a remoo da base defeituosa feita pela inciso endonucleoltica nos dois lados da
leso, com liberao dos nucleotdeos, seguida pelo preenchimento da regio por ao da DNA-polimerase. Em todos os organismos onde j foi estudado, o processo de REN consiste em cinco etapas:
DNA-polimerase;
Ligao/restaurao da molcula de DNA por ao da enzima DNA-ligase.
A extenso mdia do fragmento de DNA removido de 12 nucleotdeos, razo pela qual esse modelo
chamado de reparao de regies curtas ( uma funo constitutiva da clula). Em caso de grandes
quantidades de leses, em que a substituio envolve de 1500 a 9000 nucleotdeos, o modelo conhecido
como reparao de regies longas (induzido por leses no DNA pelo menos no que diz respeito clula
bacteriana).
O modelo proposto para o sistema de REN em mamferos o seguinte:
As protenas XPB, XPD e XPA esto envolvidas na deteco da leso, sendo que as duas primeiras percorrem a hlice e a segunda reconhece a leso;
Aps encontrar a leso, o DNA do local do dano desnaturado e as endonuclease XPF e XPG
fazem a dupla inciso na cadeia;
O oligonucleotdeo contendo a leso removido pelas DNAs-polimerases de e pelos seus cofatores PCNA e RF-C, que tambm so responsveis pelo passo seguinte;
Ocorre uma nova sntese do DNA utilizando a fita no danificada como molde;
Ligao da extremidade 5 da regio recm-sintetizada seqncia original, pela DNA-ligase.
Outro exemplo muito interessante de REN o sistema de reparao global X genes ativos. Foi
demonstrado em E. coli que, embora stios distintos contenham o mesmo tipo de leso, o sistema pode
diferenciar um gene ativo de uma regio no-codificadora; assim, os stios crticos do genoma so os
primeiros a ser reparados. Em mamferos, onde a quantidade de DNA presente no ncleo muito maior
do que na E. coli, a reparao preferencial de seqncias transcritas tambm ocorre.
REPARO DE BASES MALPAREADAS
Algumas bases incorretamente pareadas conseguem escapar da reviso realizada pela DNApolimerase durante o processo de replicao. Por isso, na E. coli, a etapa final que confere preciso ao
processo de replicao de responsabilidade do sistema de correo de erro, que consiste em vrias
protenas codificadas pelos genes mut. Esse sistema percorre o DNA recentemente sintetizado procura
de pares de base mal pareadas e remove os segmentos de fita simples contendo nucleotdeos incorretos.
Isso permite que a DNA-polimerase insira a base correta na lacuna formada. A dificuldade que surge,
aparentemente, a de distinguir qual das bases de um par erroneamente formado a incorreta, porque
ambas so componentes naturais do DNA. Se a remoo de uma das bases fosse ao acaso, haveria a
probabilidade de 50% de a base correta ser removida e a mutao poderia ser perpetuada, ao invs de ser
corrigida. Existe, porm, um sinal especfico que direciona o sistema de exciso do erro exclusivamente
para a fita recm-sintetizada: o reconhecimento de seqncias GATC prximas ao erro. GATC metiladas
indicam a fita parental, enquanto que ausncia de metilao nestas seqncias caracteriza a fita recmsintetizada. O sistema de correo detecta no somente pares nicos de bases mal pareadas, mas tambm
adies e delees, o que reduz a incidncia de mutaes por modificao no mdulo de leitura, alm
daquelas envolvendo substituio de bases.
REPARO POR RECOMBINAO
No processo de reparao por recombinao, a fita complementar no danificada utilizada como
molde na substituio do fragmento lesado. Algumas vezes, porm, esse molde no est disponvel, por
motivos diversos. A DNA-polimerase, ento, forada a passar pela leso sem replicar aquela regio.
Uma lacuna com um tamanho considervel deixada na fita recm-sintetizada. Toda a informao do
stio danificado perdida e somente pode ser recuperada pela utilizao de outra molcula idntica de
DNA. Como as clulas de organismos superiores so geralmente diplides, elas possuem a mesma
seqncia, ou praticamente a mesma, em cada um dos cromossomos homlogos. Uma fonte apropriada de
DNA, portanto, pode ser encontrada na clula. Assim, como esquematizado na figura abaixo, aps uma
mutao, a fita 1 do homlogo A (1A) no est disponvel; a fita 2 do homlogo A (2A) possui uma
lacuna. As fitas 1 e 2 do homlogo A (1A e 2A, respectivamente) esto ntegras. No reparo por
recombinao, a fita 1A permutada pela fita 2A, de modo que 1A sirva de molde para reconstruo de
1A; e 2A sirva de molde para 2A. Na E. coli, de fundamental importncia a protena RecA, pois s ela
capaz de parear duas molculas de DNA homlogas e catalisar as reaes de trocas de fitas, permitindo
reparao e recuperao de leses.