SILENCIAMIENTO GNICO

Es un proceso llevado a cabo en las plantas, con diferentes objetivos, dentro de

los cuales se destacan la regulacin de la expresin y la eliminacin y el control
de material gentico ajeno o externo (virus y transposones).
La principal utilidad de estos mecanismos consiste en combatir las infecciones
virales, formando fragmentos de ARN que son complementarios al ADN o al
ARN viral, buscando su silenciamiento y de esta forma deteniendo el proceso
de infeccin.
RESUMEN
En el primer enfoque silenciamiento de genes se demuestra despus de la
expresin transitoria de genes informadores en plantas no transgnicas. En el
segundo, el silenciamiento se dispara contra un gen informador integrado de
manera estable en una planta transgnica. El tercer enfoque consiste en la
activacin del silenciamiento de ARN contra genes endgenos utilizando
vectores virales.
TEV = Virus del grabado del tabaco es un virus patgeno de plantas en el
gnero Potyvirus y la familia del virus. TEV es una hebra de monopartite de
sentido positivo, el ARN de cadena simple rodeada por una cpside hecho para
una sola protena codificada vira.
HC-PRO = Ayudante Componente Proteinasa.
VIGS = Virus inducida por silenciamiento gnico
CLASES MECANICISTAS
Silenciamiento Gnico Post-Transcripcional (PTGS): Es un mecanismo que
acta directamente sobre el transcrito de ARN mensajero
Silenciamiento Gnico Transcripcional (TGS): Acta indirectamente y va a
establecer un control que impide la transcripcin del ADN.
Determinando que ambas clases de silenciamientos se asocian con la
acumulacin de ARN y la metilacin del gen correspondiente, es posible que las
dos clases principales de silenciamiento estn vinculados de una manera
todava por determinar. Informes recientes concluyen que el silenciamiento de
genes puede ser inducido por infecciones de virus y plantas en ausencia de
cualquier homologa conocida del genoma viral.

MATERIALES Y METODOS
Lneas transgnicas de tabaco: las secuencias de TEV se clonaron primero en el
vector intermedio y luego se transfieren junto con los 35S del virus del mosaico
de la coliflor secuencias promotoras y terminadoras para el vector binario. Este
anlisis confirm los lugares reportados del sitio NcoI para lneas de TEV-C,
TEV-I, y TEV-K. Sin embargo, la insercin en lnea de TEV-B, informado de que
en el nucletido 616 dentro de la secuencia de codificacin de P1 se determin
que era aproximadamente en el nucletido 973 de la secuencia P1-codificacin.
Transformantes primarios y T1 progenie de los transformantes primarios
La tincin histoqumica de GUS actividad: Las hojas se ensayaron para
determinar la actividad de GUS. Para la tincin de GUS en sitios de infeccin
PVX-GUS (focos), las hojas fueron parcialmente abrasin en el lado inferior
mediante el uso de carborundum, fijado durante 20 min en 90% de acetona,
fosfato de sodio y otros compuestos Los trozos de hoja fueron tratados
posteriormente con etanol 95% para eliminar la clorofila. La tincin GUS en
PVX-GUS focos es visible dentro de 15-60 min

TEV = Virus del grabado del tabaco es un virus patgeno de plantas en el

gnero Potyvirus y la familia del virus. TEV es una hebra de monopartite de
sentido positivo, el ARN de cadena simple rodeada por una cpside hecho para
una sola protena codificada vira.
HC-PRO = Ayudante Componente Proteinasa.
VIGS = Virus inducida por silenciamiento gnico