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Universidad nacional abierta y a distancia (unad)

Laboratorio microbiologa
Pre-informes

Practicas: normas generales de bioseguridad y preparacin de medios de


cultivo

Grupo # 2

Jorge Andrs Castro Almciga

Bogot
sep- 2015

Practica # 1

RESUMEN

El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar donde no se deben permitir
descuidos e indisciplina. Para ello se tendrn siempre presente los posibles
riesgos asociados al trabajo con materiales peligrosos. Nunca hay excusa para los
accidentes en un laboratorio bien equipado en el cual trabaja personal bien
informado.

Qu es bioseguridad?
r-/ La bioseguridad es un tema generalmente dejado de lado en los bancos de
sangre, ya sea por desconocimiento, por cuestiones presupuestarias a la hora de
tener que invertir en equipamiento de seguridad, por falta de un entrenamiento
apropiado del personal tcnico, y por sobre todo el "a mi no me va a pasar nada".
Considerar el tema de bioseguridad para un banco de sangre no es solamente
tener contratada a una empresa para que retire mis desechos biolgicos y usar
guantes, es algo mucho ms integral que tiene que ver no solo con la salud del
personal involucrado sino con toda la sociedad. La bioseguridad en el banco de
sangre representa un componente vital del sistema de garanta de calidad. En el
caso especial de bioseguridad, pasando por los mtodos de operacin,
procedimientos de seguridad y de emergencias especficos para cada tarea; cada
error puede pagarse muy caro, ya sea por indiferencia o falta de actitud segura
Cules son las normas bsicas de bioseguridad en el laboratorio de
microbiologa?
Durante la estancia en el laboratorio el alumno debe ir provisto de bata, gafas de
seguridad, tapabocas, polainas y guantes de ltex. La bata, el tapabocas y las
polainas debern emplearse durante toda la estancia en el laboratorio. Las gafas
de seguridad siempre que se manejen productos peligrosos, se realice siembra de
tejidos en cmara y durante el calentamiento de disoluciones. Los guantes deben
utilizarse obligatoriamente en la manipulacin de productos txicos o custicos y
para la desinfeccin, siembra y manipulacin de material sujeto a estudio o
investigacin.
Qutese todos los accesorios personales que puedan comprender riesgos de
accidentes mecnicos, qumicos o por fuego, como son anillos, pulseras, collares,
gorras y sombreros, y adems, para crear un ambiente asptico adecuado. LA
RESPONSABILIDAD POR LAS CONSECUENCIAS DE NO CUMPLIR ESTA
NORMA DENTRO DEL LABORATORIO ES ENTERAMENTE DEL ESTUDIANTE.
Est PROHIBIDO FUMAR, BEBER O COMER en el laboratorio, as como dejar
encima de la mesa del laboratorio algn tipo de prenda. Mantenga las uas

recortadas. El cabello largo se llevar siempre recogido. Utilizar siempre zapato


cerrado. Debe conocerse la toxicidad y riesgos de todos los compuestos con los
que se trabaje. Debe consultarse siempre las etiquetas y libros sobre reactivos en
busca de informacin sobre seguridad.
Como regla general no se debe pipetear nunca con la boca utilizar peras o
pipeteadores. Los volmenes de cidos, bases concentradas y disolventes
orgnicos se medirn con probetas, en el caso de que se deban medir los
volmenes exactos se deben utilizar pipetas de vidrio o micropipetas.
Mantenga slo el material requerido para la sesin sobre la mesa de trabajo.
Los frascos de reactivos deben permanecer en los estantes respectivos. Los
dems objetos personales o innecesarios deben guardarse o colocarse lejos del
rea de trabajo (a la entrada del laboratorio).
Los frascos de los reactivos deben cerrarse inmediatamente despus de su uso,
durante su utilizacin los tapones deben depositarse siempre boca arriba sobre la
mesa.
No deben manipularse jams productos o disolventes inflamables cerca a
mecheros.
Si algn reactivo se derrama, debe retirarse inmediatamente dejando el lugar
perfectamente limpio. Las salpicaduras de sustancias bsicas deben neutralizarse
con un cido dbil (por ejm. cido ctrico) y las de sustancias cidas con una base
dbil (bicarbonato sdico). Consultar con el laboratorista para el uso del
Chemisorb.
Cuando se tengan dudas sobre las precauciones de manipulacin de algn
producto debe consultarse al profesor antes de proceder a su uso.
No calentar nunca enrgicamente una disolucin. La ebullicin debe ser siempre
suave.
El mechero debe cerrarse, una vez utilizado, tanto de la llave del propio
mechero como la toma del gas de la mesa o si es manual tapndolo.
Las disoluciones y recipientes calientes deben manipularse con cuidado. Para la
introduccin y extraccin de recipientes de hornos y estufas deben utilizarse las
pinzas y guantes adecuados (asbesto).
Las HERIDAS Y QUEMADURAS deben ser tratadas inmediatamente. En el
caso de salpicaduras de cidos sobre la piel lavar inmediatamente con agua
abundante, teniendo en cuenta que en el caso de cidos concentrados la reaccin
con el agua puede producir calor. Es conveniente retirar la ropa para evitar que el
corrosivo quede atrapado entre la ropa y la piel.
Deben conocerse la situacin especfica de los elementos de seguridad
(lavaojos, ducha, extintor, salidas de emergencia,...) En el laboratorio as como
todas las indicaciones sobre seguridad expuestas en el laboratorio.
No debe llevarse a la boca ningn material de laboratorio; si algn reactivo es
accidentalmente ingerido, avise de inmediato al Profesor o a la persona
encargada.
Practica # 2

RESUMEN
Un medio de cultivo es un conjunto de nutrientes, factores de crecimiento y otros
componentes que crean las condiciones necesarias para el desarrollo de los
microorganismos. La diversidad metablica de estos es tan grande que la variedad
de medios de cultivo es enorme, no existiendo un medio de cultivo universal
adecuado para todos ellos, ni siquiera refirindonos a las bacterias con
exclusividad.

Qu es un medio de cultivo; de qu estn compuestos principalmente;


cmo se clasifican segn su proporcin de Agar y segn su suministro de
nutrientes?
El medio de cultivo constituye el aporte de nutrientes indispensables para el
crecimiento de los microorganismos. La composicin precisa depender de la
especie que se quiera cultivar, porque las necesidades nutricionales varan
considerablemente. Hay microorganismos muy poco exigentes que crecen bien
en medios de laboratorio normales y microorganismos muy exigentes que
necesitan determinadas sustancias como vitaminas, suero o sangre para crecer.

Existen medios cuya composicin permite el crecimiento de:


1. un gran nmero de especies (agar nutritivo, caldo ordinario, agar de
Sabouraud),
2. determinados microorganismos (impidiendo el desarrollo de otros), son los
denominados medios selectivos.
3. Otros en cambio, se desarrollan para el estudio de determinadas pruebas
fisiolgicas o test bioqumicos (utilizacin de citratos, acidificacin a partir de
azcares, etc.).

Los medios de cultivo poseen una serie de componentes:


1. Indispensables: Entre los primeros se incluye el agua, nutrientes orgnicos
(hidratos de carbono, aminocidos, vitaminas, etc) y nutrientes inorgnicos (P, Fe,
N, Mg, S, etc)

2. Alternativos: sustancias isosmotizantes (NaCl), agente solidifcate (agar-agar),


tampones, indicador de pH, etc.

Durante las prcticas se van a manejar medios de cultivo de composicin muy


variada y de tres tipos diferentes en cuanto a consistencia: medios slidos,
semislidos y lquidos. Este ltimo aspecto es importante a la hora de la
preparacin de los mismos. Aunque los medios artificiales o sintticos se pueden
preparar a partir de sus componentes individuales, se pueden adquirir
comercialmente como medios deshidratados a los que solamente hay que aadir
la cantidad de agua necesaria. El fabricante indica la composicin, la caducidad, y
la cantidad que debe pesarse por cada litro a preparar e incluso como debe
esterilizarse.
Cul es la utilidad de los medios de cultivo y qu diferencia un caldo de un
medio slido?

Con otros medios de cultivo se puede identificar si las bacterias producen


determinadas enzimas que digieren los nutrientes. As, algunas bacterias con
enzimas hemolticas (capaces de romper los glbulos rojos) producen hidrlisis y
cambios apreciables prosaicamente en las placas de agar-sangre.
Los diferentes medios y tcnicas de cultivo son Esenciales en un laboratorio
de microbiologa de un hospital, pues sirven para identificar las bacterias
causantes de las enfermedades infecciosas y los antibiticos a los que son
sensibles esas bacterias. Los cultivos suelen usarse en medicina para determinar
la presencia de agentes patgenos en fluidos corporales (como por ejemplo
la sangre o la orina)
En qu momento se esteriliza un medio de cultivo y por qu?
Es necesario cultivarlos, es decir, favorecer su multiplicacin in vitro, en
ambientes especiales que proporcionen las condiciones semejantes a las de sus
hbitats naturales. En estos ambientes se debe eliminar a todos aquello
microorganismos que interfieren en el estudio del microorganismo de inters, al

que adems de proporcionar los nutrientes necesarios para su crecimiento


multiplicacin.
Para preparar la esterilizacin:
Lavar, preparar y envolver correctamente el material que se someter a
esterilizacin. Seleccionar los mtodos de esterilizacin adecuados para las
diversas necesidades del laboratorio de microbiologa. Comprobar la efectividad
del proceso de esterilizacin. Elaborar adecuadamente los medios de cultivo
deshidratados y por componentes. Envasar los medios de cultivo de manera
adecuada en los diferentes recipientes de acuerdo al uso que se les dar.
Relacionar la composicin de los diversos medios de cultivo con sus
caractersticas y aplicaciones.

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