You are on page 1of 6

COOMBS DIRECTO E INDIRECTO

Se fundamenta en la separacin, a travs de un matriz de microsferas, de eritrocitos


aglutinados y de eritrocitos libres. Las reacciones se basan en la deteccin de hemates
sensibilizados con Ig y/o fracciones del Complemento mediante un reactivo de
antiglobulina humana polivalente.
COOMBS DIRECTO:
Dilumos 1 ml de suero de coombs (suero de conejo con antiglobulina humana,
anti Rh) con 10 UI de sangre del paciente (tubo de hematimetra).
Identificar dos pocillos de una tarjeta de coombs con los datos del paciente.
Dispersar en los pocillos 50 UI de la dilucin.
Centrifugar durante 10 min.
Interpretar: Si el tapn de hemates se encuentra en el fondo del pocillo,
significa que no ha aglutinado, por lo que el Coombs es negativo. Si aglutina
(Coombs Directo positivo), el paciente presenta una anemia hemoltica, genera
sus propios Ac.

PRUEBA DE COOMBS DIRECTA

Prueba de Coombs se refiere a dos anlisis de sangre clnicos utilizados en


inmunohematologa e inmunologa. Las dos pruebas de Coombs son la prueba de
Coombs directa y la prueba de Coombs indirecta.

La prueba de Coombs directa se utiliza para poner a prueba para la anemia


hemoltica autoinmune, es decir, una condicin de un recuento bajo de glbulos
rojos causado por lisis sistema inmune o ruptura de las membranas de glbulos
rojos que causan destruccin de glbulos rojos.

En ciertas enfermedades o condiciones de la sangre de un individuo puede


contener anticuerpos IgG que pueden unirse especficamente a los antgenos en la
membrana de la superficie de glbulos rojos, y sus glbulos rojos circulantes
puedan cubrirse de aloanticuerpos IgG y/o autoanticuerpos IgG. Las protenas del

complemento pueden posteriormente unirse a los anticuerpos unidos y causar la


destruccin de glbulos rojos. La prueba de Coombs directa se utiliza para
detectar estos anticuerpos o protenas del complemento que estn enlazados a la
superficie de las clulas rojas de la sangre, una muestra de sangre se toma y los
glbulos rojos se lavan y despus se incub con antiglobulina humana. Si esto
produce la aglutinacin de los glbulos rojos, la prueba de Coombs directa es
positiva, una indicacin visual de que los anticuerpos se unen a la superficie de
las clulas rojas de la sangre.

La prueba de Coombs indirecta se utiliza en la prueba prenatal de las mujeres


embarazadas y en las pruebas de sangre antes de una transfusin de sangre. Se
detecta anticuerpos contra los glbulos rojos que son no unido presente en el
suero del paciente. En este caso, el suero se extrae de la muestra de sangre
tomada del paciente. Entonces, el suero se incuba con los glbulos rojos de
antigenicidad conocida, es decir, los glbulos rojos con valores de referencia
conocidos de otras muestras de sangre de pacientes. Si se produce la aglutinacin,
la prueba de Coombs indirecta es positiva.

Mecanismo
Las dos pruebas de Coombs se basan en el hecho de que los anticuerpos antihumanos, que se producen mediante la inmunizacin de las especies no humanas
con suero humano, se unirn a los anticuerpos humanos, comnmente IgG o IgM.
Anticuerpos anti-humanos en animales tambin se unirn a los anticuerpos
humanos que pueden ser fijados a antgenos en la superficie de las clulas rojas
de la sangre, y en las condiciones de tubos de ensayo apropiados esto puede
conducir a la aglutinacin de los glbulos rojos. El fenmeno de la aglutinacin
de los glbulos rojos es importante aqu, debido a la aglutinacin de los glbulos
rojos resultante puede ser visualizado; formacin de grumos cuando se ve la
prueba es positiva y cuando la aglutinacin no se ve la prueba es negativa.

Aplicaciones clnicas ms comunes de la prueba de Coombs incluyen la


preparacin de la sangre para transfusin en pruebas cruzadas, la deteccin de
anticuerpos atpicos en el plasma de la sangre de las mujeres embarazadas como
parte de la atencin prenatal y la deteccin de anticuerpos para el diagnstico de
las anemias hemolticas autoinmunes.

Prueba de Coombs se realizan en el suero de muestras de sangre venosa, que se


han tomado de los pacientes por venopuncin. La sangre venosa se lleva a un
laboratorio, donde el personal tcnico cientfico capacitado hacer las pruebas de
Coombs. La importancia clnica de los resultados es evaluado por el mdico que
solicit la prueba de Coombs, tal vez con la ayuda de un hematlogo en
laboratorio.

PRUEBA DE COOMBS
Sinonimia: prueba de antiglobulina, PAG.

Mtodo: suero antiglobulina

Muestra:
prueba de Coombs directa: sangre
prueba de Coombs indirecta: suero

entera

anticoagulada

con

EDTA

Na 2

Valores de referencia: negativo

Significado clnico:
La prueba de antiglobulinas (PAG) se basa en el principio de que los anticuerpos
antiglobulina humana inducen la aglutinacin de los eritrocitos revestidos con globulina.

Cuando la PAG se utiliza para detectar anticuerpos fijados en eritrocitos in vivo, se llama
prueba directa de antiglobulinas o de Coombs (PCD). Cuando la PAG se emplea para
detectar anticuerpos en el suero por sensibilizacin de los eritrocitos in vitro, se conoce
como prueba indirecta de antiglobulinas o de Coombs (PCI). Los sueros antiglobulinas que
se obtienen de conejos inmunizados pueden ser de amplio espectro (con anticuerpos contra
inmunoglobulinas humanas y componentes del complemento) o pueden ser
monoespecficos (anti IgG, anti-IgM, anti-IgA, anti- C3+C4, anti C3b, anti-C3d, anti-C4b y
anti
C4d).
Aunque la PAG de una prueba muy sensible, una prueba negativa no excluye la presencia
de anticuerpos en los eritrocitos (se calculan en 100 a 500 molculas de IgG fijadas a los
eritrocitos para que sean detectadas).

Prueba directa falsa positiva: algunas drogas incluyendo penicilinas


pueden causar PDC positiva: -metildopa, levodopa, quinidina,
mefenmico, sulfonamidas, tetraciclinas. Los anticuerpos contra
predominantemente
Observacin no son estrictamente falsos positivos ya que estas drogas
anemias hemolticas autoinmunes.

y cefalosporinas
insulina, cido
metildopa son
IgG.
pueden provocar

Causas de falsos positivos en PCD:


1- material mal lavado.
2-restos de detergentes.
3-muestra conservada en la heladera y no procesada de inmediato (hay activacin del
complemento.
4-exceso de refrigeracin.
5- lavado inadecuado de los hemates de sangre de cordn (gelatina de Wharton).

Causas de falsos positivo en PCI


dem 1,2,4,
5-Solucin fisiolgica inapropiada, pH, resina de intercambio etc.
6-restos de componente monoclonal por lavado insuficiente.

Prueba indirecta falsa positiva: la metildopa provoca aproximadamente el 25% de PIC


positivas en pacientes hospitalizados. La levodopa y el cido mefenmico tambin causan
reaccin positiva.

Utilidad clnica:
La prueba indirecta de Coombs se utiliza en los siguientes casos:

Screening de anticuerpos desconocidos en el suero usando hemates conocidos. Se


utiliza principalmente para el screening de anticuerpos pre-transfusionales y en el
primer trimestre de embarazo.
Evaluacin de anemias hemolticas. Esta prueba se usa en paneles, en titulaciones y
en cross-matches.
Evaluacin de antgenos: Muchos antgenos eritrocitarios se detectan con esta
prueba: Fy, K, k, S, s, como tambin antgenos poco frecuentes como: Lu a, Coa,
Kpb o variantes dbiles de antigenos : Du, DVI, Cw.

La prueba directa de Coombs se utiliza en los siguientes casos:

Diagnstico de hemlisis autoinmune.


Diagnstico de enfermedad hemoltica del recin nacido.
Diagnstico de hemlisis inducida por drogas.
Evaluacin de reaccin hemoltica aguda y retardada.

Variables por enfermedad:


Prueba positiva:
PIC: brucelosis, malaria, algunos pacientes con linfoma de Hodgkin, 20% de pacientes con
leucemia linfoctica crnica, 33% de pacientes con leucemia mieloctica crnica, prpura
trombocitopnica idioptica con anemia hemoltica, convalecencia de infeccin por
Mycoplasma pneumoniae, lupus eritematoso sistmico, eritroblastosis fetal (debido a
anticuerpos Rh, Kel, Kidd, Duffy).
PDC: lupus eritematoso sistmico.

Prueba negativa:
PIC: mieloma mltiple, eritroleucemia, abetalipoproteinemia, macroglobulinemia de
Waldenstrm, esferocitosis hereditaria, eliptocitosis hereditaria, hemoglobinuria paroxstica
nocturna, poliarteritis nodosa, enfermedad hemoltica del recin nacido debida a
incompatibilidad ABO.
Nota: tener en cuenta que de acuerdo a la concentracin del componente monoclonal puede
haber falsos positivos

Variables por drogas:


Prueba positiva:
PIC: asparaginasa, carbromal, metildopa, rifampicina.
PDC: cido aminosalcilico, ampicilina, ciclofosfamida, insecticidas, isoniazida, cido
mefenmico, meticilina, metildopa, penicilina G, quinina.

You might also like