DETERMINACION DE LACTATO DESHIDROGENASA (LDH)

OBJETIVOS
Determinar la concentracin de lactato deshidrogenasa en suero sanguneo.
Explicar que posibles enfermedades se producen por el aumento de LDH.
Afianzar los conocimientos sobre las isoenzimas en el diagnstico clnico.
INTRODUCCION
La determinacin de la actividad lactato deshidrogenasa (LDH) tiene una gran variedad de
aplicaciones clnicas. Por ser una enzima intracelular, su elevacin es ndice de dao tisular con la
consecuente liberacin de sta a la circulacin. El dao puede variar desde una simple anoxia con
ligero dao celular y prdida de citoplasma hasta necrosis celular severa generando diversos grados
de elevacin de la actividad enzimtica.
En el infarto agudo de miocardio, la actividad de LDH total, constituye un elemento importante de
diagnstico. La misma comienza a elevarse 12-24 horas despus de producido el infarto; alcanza un
pico entre las 48-72 horas y permanece elevada hasta el sptimo o dcimo da. Tambin se registra
un aumento de actividad de LDH total en pacientes con necrosis heptica (producida por agentes
txicos o por infeccin aguda como la hepatitis viral) e incluso acompaando a necrosis tubular renal,
pielonefritis, etc. En los tumores sanguneos como leucemias y linfomas tambin se observan valores
aumentados de la LDH. En el lquido cefalorraqudeo (LCR) el valor normal es de aproximadamente el
10% de su valor en suero, aumentando marcadamente su valor en meningitis bacterianas. En las
meningitis virales la LDH aumenta su valor solo en el 10% de los casos.
FUNDAMENTOS DEL METODO
Basado en el siguiente esquema de reaccin:
LDH
Piruvato + NADH + H+

Lactato + NAD+

Los volmenes de muestra y reactivo se pueden reducir proporcionalmente sin que varen los factores
de clculo.
MATERIALES Y METODO
PROCEDIMIENTO
A) 25oC
En un tubo de ensayo mantenido a la temperatura de trabajo, colocar:
Reactivo A reconstituido

3 ml

Pre-incubar unos minutos, luego agregar:

Muestra

100 ul

Mezclar inmediatamente y disparar simultneamente el cronmetro. Esperar 30 segundos. Leer la

absorbancia inicial y luego a los 1, 2 y 3 minutos de la primera lectura. Determinar la diferencia
promedio de absorbancia/min (A/min), restando cada lectura de la anterior y promediando los
valores. Utilizar este promedio para los clculos.
CALCULO DE LOS RESULTADOS
LDH (U/l) = A/min x factor
En cada caso deber emplearse el factor de clculo correspondiente de acuerdo a la temperatura de
reaccin seleccionada (25 OC) y a la tcnica empleada como se indica en la siguiente tabla:
Absorbancia

Factor

340 nm
334 nm
366 nm
VALORES DE REFERENCIA

RESULTADOS

DISCUSION

CONCLUSIONES

REFERENCIAS BIBLIOGRAFICAS

100-240 U/l

4.921
5.016
9.118