Analitica PDF

UNIVERSIDAD AUTNOMA METROPOLITANA
UNIDAD IZTAPALAPA
Manual de prcticas
de laboratorio
QumicaOrgnica
analticaI
Qumica
Jos Ramn Verde Calvo
Elisa Vega vila
Francisco
Cruz Sosa
Javier
Isidoro Lpez
Cruz
Ma. Elena Estrada Ziga
Ignacio Lpez y Clis
Frida P. Malpica Snchez
Felipe
Orta
Jorge Armando
HaroMartnez
Castellanos
Clara Pelayo Zaldvar
Jos Mara Adolfo Barba Chvez
Mara del Carmen Prez Csar
Patricia Ruiz Snchez
Gloria Maribel Trejo Aguilar
Luz Mara Zenit Tovar Castro

Dr. Salvador Vega y Len
Rector General
Mtro. Norberto Manjarrez lvarez
Secretario General
UNIDAD IZTAPALAPA
Dr. Javier Velzquez Moctezuma
Rector
Dr. Miguel ngel Gmez Fonseca
Secretario
Dr. Rubn Romn Ramos
Director de la Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud
Dra. Edith Ponce Alquicira
Jefe del Departamento de Biotecnologa.
Primera Impresin 2013
UNIDAD IZTAPALAPA
Av. San Rafael Atlixco No. 186, Col. Vicentina,
Del. Iztapalapa, C.P 09340, Mxico D.F. Tel.: 5804 4600
Impreso y hecho en Mxico/Printed in Mexico
Manual de prcticas de laboratorio. Qumica Analtica
Prefacio
En el ao 2002 se actualizaron los contenidos temticos de las asignaturas que componen las licenciaturas de Ingeniera de los
Alimentos e Ingeniera Bioqumica Industrial. Para llevar a cabo esta actualizacin se crearon academias de profesores al interior
del Departamento de Biotecnologa y de la Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud, entre ellas la Academia de Qumica Analtica. Posteriormente, se inici la revisin de los planes de estudio de ambas licenciaturas y su adecuacin a un nuevo modelo
educativo, con base en esta nueva concepcin y teniendo como marco de referencia las Polticas Operativas de Docencia de la
Unidad Iztapalapa, se plantearon nuevos planes de estudio y elaboraron las cartas descriptivas de los cursos que los componen.
Como resultado de este proceso, las asignaturas de Qumica Analtica I y Qumica Analtica II, que se imparten en los trimestres
V y VII-VIII, quedaron fusionadas en una sola denominada Qumica Analtica, la cual se ubic en el trimestre II de los nuevos
programas de licenciatura. Asimismo, se propuso como materia optativa Qumica Analtica Avanzada para ser cursada en uno de
los trimestres VII al XI y que cubre en su totalidad procedimientos analticos instrumentales.
El presente manual contiene las prcticas de laboratorio que acompaan al nuevo programa de Qumica Analtica y que
fueron elaboradas por los profesores de la Academia de Qumica Analtica. Considerando la normatividad existente en cuanto
al uso de los servicios e instalaciones de los laboratorios de docencia de nuestra unidad, el manual se inicia con un captulo
que contiene las medidas de seguridad que se deben conocer y adoptar en los laboratorios de docencia, as como informacin
relativa a grados o calidades de reactivos qumicos, el sistema internacional de unidades, las cifras significativas y los conceptos
de exactitud y precisin.
Las diez prcticas que integran el manual incluyen la preparacin de disoluciones y formas de expresar su concentracin,
gravimetra, valoracin de disoluciones y uso de patrones primarios, disoluciones amortiguadoras, titulaciones cido base y por
xido-reduccin, cromatografa en columna, capa fina y papel, y espectrofotometra en la regin del visible. Asimismo, el manual
contiene algunos apndices con informacin relativa al uso apropiado de varios instrumentos y materiales de laboratorio, y guas
para la operacin de algunos equipos. Considerando que el manual va dirigido a estudiantes de las licenciaturas de Ingeniera de
los Alimentos e Ingeniera Bioqumica industrial, cuando fue posible, se incorporaron como materiales de anlisis tanto alimentos
como formulaciones farmacuticas.
No se incluyeron prcticas de cromatografa de gases (CG) ni de cromatografa de lquidos de alta resolucin (HPLC) en este
curso bsico, debido a que son temas que se cubren ampliamente en forma terica y prctica en el curso de Qumica Analtica
Avanzada, en su lugar se elaboraron dos videos que ya se encuentran a disposicin de los estudiantes en la pgina de la Academia de Qumica Analtica (http:/docencia.izt.uam.mx).
Cabe mencionar que este manual no sustituye a las publicaciones La Teora y la Prctica en el Laboratorio de Qumica
General para Ciencias Biolgicas y de la Salud, La Teora y la Prctica en el Laboratorio de Qumica Analtica I y al Manual de
Prcticas de Qumica Analtica II, que se encuentran en lnea a travs del Sistema Multimedia de Apoyo a la Docencia de nuestra
unidad (http/:www.uamelinea.uam.mx) y que han sido y continuarn siendo materiales didcticos tiles para la enseanza de
la qumica analtica.
Finalmente, una breve mencin a la pgina de la Academia de Qumica Analtica. Esta pgina se elabor con el propsito de
poner a la disposicin de los estudiantes materiales e informacin que faciliten y complementen su aprendizaje, y para establecer
una comunicacin continua entre ellos y los profesores que impartimos estas asignaturas. Les invitamos cordialmente a que
visiten esta pgina y a que den sus opiniones del material aqu presentado. Asimismo, todas las observaciones y comentarios
acerca del contenido del presente manual son bienvenidos.
Los Autores
Contenido
Lo que debes saber antes de iniciar el trabajo en el laboratorio.
Medidas de seguridad en laboratorios de docencia . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 9
Prctica 1.
Preparacin de disoluciones. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 21
Prctica 2.

Determinacin gravimtrica de calcio como oxalato

de calcio monohidratado . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 31
Prctica 3.
Valoracin de disoluciones cidobase . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 37
Prctica 4.
Disoluciones amortiguadoras . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 43
Prctica 5.

Aplicaciones de las titulaciones de neutralizacin

cido - base. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 49
Prctica 6.

Determinacin de hierro (II) en vitaminas comerciales

por xido-reduccin . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 55
Prctica 7.
Cromatografa en columna. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 63
Prctica 8.
Cromatografa en capa fina . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 69
Prctica 9.

Cromatografa en papel. Separacin de mezclas

de indicadores de pH. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 77
Prctica 10.

Cuantificacin de hierro por espectrofotometra

en el visible. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 81
Apndice 1.

Uso adecuado de instrumentos y materiales

de laboratorio . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 87
Apndice 2.

Instrucciones de operacin del potencimetro

conductronic pH 120 . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 91
Apndice 3. Instrucciones de operacin del espectrofotmetro

biomateTM 3 thermo spectronic. . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . . 95
Jos Ramn Verde/Elisa Vega/Javier Isidoro Lpez/Ma. Elena Estrada/Frida P. Malpica/Felipe Martnez/Clara Pelayo/
Mara del Carmen Prez/Patricia Ruiz/Gloria Maribel Trejo/Luz Mara Zenit
Acerca de los autores

Ma. Elena Estrada Ziga. Ingeniera en Biotecnologa por la Unidad Profesional Interdisciplinaria de Biotecnologa del Instituto
Politcnico Nacional y Dra. En Biotecnologa por la Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa. Labora en la UAMI desde
2008 donde ha impartido cursos de Qumica Analtica I y II, Anlisis Sensorial, Tecnologa de Granos y Cereales e Introduccin a la
Biotecnologa. Ha colaborado en proyectos de investigacin con profesores de los Departamentos de Biotecnologa e Ingeniera
de Procesos e Hidrulica de la UAMI, y de la Facultad de Qumica de la Universidad Autnoma del Estado de Mxico, lo que le ha
permitido publicar un captulo de libro y artculos de investigacin y difusin en revistas nacionales e internacionales. Pertenece
al Sistema Nacional de Investigadores. lena21382@yahoo.com.mx
Javier Isidoro Lpez Cruz. Licenciado en Ingeniera Bioqumica Industrial, Maestro en Biloga Experimental y Doctor en
Biotecnologa por la Universidad Autnoma Metropolitana. Labora como profesor de tiempo parcial desde 1999. Imparte cursos
de Qumica Analtica, Qumica Orgnica, Anlisis Funcional Orgnico, Bioqumica e Ingeniera Bioqumica para la Divisin de
Ciencias Biolgicas y de la Salud. Ha colaborado en diversas investigaciones referentes a hongos comestibles comerciales y no
convencionales y publicado artculos sobre el tema en revistas nacionales, asimismo ha contribuido en la difusin del cultivo de
hongos a pequea y mediana escala. jilc@xanum.uam.mx
Frida P. Malpica Snchez. Obtuvo su licenciatura en Ingeniera de Alimentos en la Universidad Autnoma Metropolitana
Iztapalapa (UAMI) y su maestra en Formacin Permanente en el Centro Internacional de Prospectiva y Altos Estudios en la Cd.
de Puebla. Ha sido Profesor Asociado en la UAMI desde 1993, en donde ha colaborado en proyectos de investigacin para la
elaboracin de vinos de mesa y bebidas destiladas; ha escrito notas de curso y participado en la elaboracin de un manual de
laboratorio de qumica analtica; impartido cursos de Microbiologa de Alimentos, Qumica de Alimentos, Qumica Analtica y
Enologa, entre otros; y fungido como responsable de convenios con la industria para el desarrollo de investigacin, que adems
han favorecido la vinculacin de estudiantes con la industria alimentaria. frimalbec@yahoo.com.mx
Felipe Martnez Orta. Obtuvo el grado de Qumico Bacterilogo Parasitlogo en la Escuela Nacional de Ciencias Biolgicas
del Instituto Politcnico Nacional y la Maestra y el Doctorado en Biotecnologa en la Universidad Autnoma MetropolitanaIztapalapa. Actualmente labora en la UAM-I como Profesor Titular de tiempo parcial impartiendo las asignaturas de Qumica Analtica I y Qumica Analtica II en el nivel de licenciatura. Tambin participa como profesor de asignatura en el nivel de posgrado.
Desarrolla investigacin en procesos biotecnolgicos relacionados con la eliminacin de metano por medio de desnitrificacin.
Ha publicado artculos de investigacin en revistas internacionales y ha participado en eventos de difusin cientficos nacionales
e internacionales. acar@yahoo.com.mx
Clara Pelayo Zaldvar. Obtuvo su licenciatura en Qumica Farmacutica Biloga en la Facultad de Qumica de la Universidad
Nacional Autnoma de Mxico y su doctorado en la Universidad de California-Davis, EUA. Ha impartido cursos de licenciatura y
posgrado durante los ltimos 35 aos en diversas instituciones de educacin superior y en los ltimos 20 aos en la UAMI. Ha
escrito materiales didcticos, un libro, varios captulos de libros y diversos artculos de divulgacin y cientficos en el rea de la
fisiologa y tecnologa postcosecha de frutas y hortalizas. Actualmente imparte las asignaturas de Qumica Analtica I y Qumica
Analtica II en el nivel de licenciatura; realiza actividades docentes en el nivel de posgrado y desarrolla investigacin. Pertenece al
Sistema Nacional de Investigadores. cpel@xanum.uam.mx
Mara del Carmen Prez Csar. Licenciada en Qumica por la Universidad Autnoma MetropolitanaIztapalapa y Maestra
en Ciencias (Qumica Inorgnica) por la Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Labora en la UAM-I desde 1980, en donde
actualmente es profesora de tiempo parcial. Imparte cursos de Qumica Analtica I y Qumica Analtica II. Es coautora del manual
La teora y la prctica en el laboratorio de Qumica Analtica I, publicado en 2003 por la UAMI en versiones impresa y electrnica.
mcpcr@yahoo.com.mx
Patricia Ruiz Snchez. Obtuvo la Licenciatura en Ingeniera de los Alimentos y la Maestra en Biotecnologa por la Universidad Autnoma Metropolitana y su Doctorado en Ingeniera de Procesos Industriales y Desarrollo Sustentable por la Universit
de Technologie de Compigne, Francia. Actualmente labora en la UAM-I como Profesor Asociado de tiempo parcial impartiendo
Universidad Autnoma Metropolitana /Unidad Iztapalapa/Divisin de Ciencias Biolgicas y de la Salud
las asignaturas de Qumica Analtica I y Qumica Analtica II en el nivel de licenciatura. Desarrolla investigacin en el rea de
Ingeniera de Procesos Biotecnolgicos. Ha publicado artculos de investigacin en revistas internacionales y ha participado en
eventos de difusin cientificos nacionales e internacionales. rusanp_2002@yahoo.com.mx
Elisa Vega vila. Obtuvo la licenciatura en Qumica en la Escuela de Ciencias Qumicas de la Universidad Autnoma de
San Luis Potos. Obtuvo la Maestra en Biologa Experimental y el Doctorado en Ciencias Biolgicas en la Universidad Autnoma
Metropolitana. Labora en la UAM-I desde 1975, en donde actualmente es Profesora Titular C de tiempo completo. Imparte cursos
de Qumica General, Qumica Orgnica, Qumica Analtica y Mtodos Instrumentales en el nivel licenciatura, realiza actividades
docentes en el posgrado en Biologa Experimental. Ha publicado, con profesores de la Divisin de Ciencias Biolgicas y de la
Salud, libros que apoyan la enseanza de qumica general y qumica analtica en la DCBS de la UAM-I. Tambin ha publicado
artculos de investigacin y difusin en revistas nacionales e internacionales. vega@xanum.uam.mx
Jos Ramn Verde Calvo. Doctor en Ciencias por la Universidad Nacional Autnoma de Mxico. Efecta actividades de docencia e investigacin en enologa, alimentos fermentados, inocuidad alimentaria y productos nutracuticos en el Departamento
de Biotecnologa de la Universidad Autnoma Metropolitana - Unidad Iztapalapa. Es Profesor Investigador Titular desde 1986.
Ha participado en la elaboracin de 6 libros de texto, dos de los cuales son sobre qumica analtica; asimismo, ha colaborado
en la elaboracin de varios captulos de libros, publicaciones cientficas nacionales e internacionales, asesoras de tesis de licenciatura y posgrado y ha impartido ms de 200 cursos de licenciatura y posgrado adems de haber asumido diversos cargos de
participacin universitaria. Pertenece al Sistema Nacional de Investigadores. jrvc@xanum.uam.mx
Gloria Maribel Trejo Aguilar. Obtuvo su licenciatura en Ingeniera Bioqumica Industrial y su Maestra en Ingeniera Qumica
en la Universidad Autnoma Metropolitana Unidad Iztapalapa. Actualmente, est por concluir el Doctorado en Ciencias en la
misma institucin. Ha impartido cursos de licenciatura y posgrado durante los ltimos 10 aos en las divisiones de CBS y CBI de
la UAMI. Ha sido coautora de manuales de Laboratorio. Actualmente imparte Qumica Analtica I a nivel licenciatura y Mtodos
Analticos Instrumentales a nivel posgrado. Es responsable del Laboratorio de Cromatografa y Microscopa, en donde desarrolla
actividades de instruccin y capacitacin tcnica para alumnos de posgrado, adems de colaborar en proyectos de investigacin.
gmta@xanum.uam.mx
Luz Mara Zenit Tovar Castro. Realiz sus estudios de licenciatura en la Universidad Veracruzana en Xalapa, Veracruz obteniendo el ttulo de Qumico Farmacutico Bilogo, y sus estudios de Maestra y Doctorado en Biotecnologa en la Universidad Autnoma Metropolitana Unidad Iztapalapa. Ha sido Profesora Asociada en este mismo plantel desde 2007, en donde ha impartido
cursos de Anlisis Funcional Orgnico y los laboratorios de Qumica Orgnica I, Qumica Analtica I y II, y Bioqumica y Fisiologa
Vegetal; actualmente imparte el laboratorio de Qumica Analtica II. As mismo, ha colaborando en diferentes proyectos de investigacin relacionados con procesos de fermentacin en medio slido derivando en la publicacin de artculos de investigacin y
difusin en revistas nacionales e internacionales. Pertenece al Sistema Nacional de Investigadores. luzzenit@hotmail.com
Acerca de los autores
Lo que debes saber antes de iniciar el trabajo en el laboratorio

Medidas de seguridad en laboratorios de docencia
El laboratorio debe ser un lugar seguro para trabajar, los accidentes pueden originarse por negligencia en la prevencin, descuidos, bromas o por circunstancias fuera de control. Para garantizar seguridad en el laboratorio se debern tener siempre
presentes los posibles peligros asociados al trabajo con reactivos qumicos y conocer las medidas de seguridad que se aplican
a estos lugares de trabajo. El objetivo del presente captulo es dar a conocer al alumno las medidas de seguridad existentes en
un laboratorio qumico para que las aplique en su lugar de trabajo. Asimismo, se le proporciona informacin acerca de grados
o calidades de reactivos qumicos, el sistema internacional de unidades, el redondeo de las cifras, las cifras significativas y los
conceptos de precisin y exactitud.
Qu es la Seguridad?
Es un conjunto de medidas tcnicas, educacionales, mdicas y psicolgicas empleadas para prevenir accidentes, tendientes a
eliminar las condiciones inseguras del ambiente y a instruir o convencer a las personas acerca de la necesidad de implementar
prcticas preventivas.
El alumno estar obligado a utilizar el llamado Equipo de Proteccin Personal (EPP) y seguir al pie de la letra las indicaciones
dadas por el profesor acerca de cmo preparar reactivos y como llevar a cabo la prctica. El EPP se refiere a los objetos diseados
para proteger a los alumnos y al profesor durante su estancia en el laboratorio, stos son de uso personal y podrn variar segn
lo requiera la prctica a realizar.
Descripcin y Uso del EPP

Los accesorios de uso comn en los laboratorios de qumica son bata, lentes de seguridad, guantes de diferentes materiales,
mascarilla y zapatos apropiados. Las caractersticas de estos accesorios personales de seguridad se indican a continuacin.
Bata. Debe ser de algodn, de manga larga, 1 2 tallas ms grande de la talla habitual que usa el alumno y debe contar con
todos los botones para mantenerla cerrada (Fig. 1).
Figura No. 1. La bata de laboratorio es obligatoria.
Lentes de seguridad. Tambin llamados gafas, goggles, o anteojos panormicos, deben proteger toda la superficie frontal y
lateral de los ojos y ser de un material transparente que permita una completa visibilidad (Fig. 2).
Figura No. 2. Lentes de seguridad para el manejo de sustancias corrosivas como los cidos fuertes.
Mascarilla. Protege las vas respiratorias de polvos y/o vapores txicos o corrosivos. Las hay con diferentes filtros, para polvos
finos, vapores orgnicos y cidos (Fig. 3).
Figura No. 3. Mascarilla protectora contra polvos y/o vapores txicos o corrosivos.
Guantes. Los hay de diferentes materiales, de ltex o neopreno para el trabajo habitual de laboratorio, de asbesto para sujetar
objetos calientes y de neopreno para manejo de cidos (Fig. 4).

Para objetos calientes
Para manejo de cidos
Figura No. 4. Diferentes tipos de guantes para uso en el laboratorio.
Zapato. Se recomienda usar zapato cerrado, de suela antiderrapante. La zapatilla de tacn alto, las sandalias y en general los
zapatos abiertos no se consideran adecuados para trabajo de laboratorio.
Otras recomendaciones. Traer el cabello recogido, evitar el uso de anillos, pulseras y gorras, y en el caso de las mujeres, las
uas largas no son apropiadas para el trabajo de laboratorio y no se recomienda el uso de medias.
Normas de Laboratorio de Laboratorio

Las buenas prcticas son un conjunto de reglas, recomendaciones y prohibiciones relacionadas con el manejo de materiales de
laboratorio y sustancias qumicas. Su aplicacin requiere de conocimiento, sentido comn y apoyo en el ambiente de trabajo. Se
les puede dividir en normas generales y particulares de trabajo.
Normas generales de trabajo

El uso del EPP es obligatorio.
Nunca trabaje solo, procure realizar su actividad cuando al menos otra persona est trabajando en el laboratorio.
Queda estrictamente prohibido comer, beber, almacenar alimentos, correr, fumar, maquillarse o manipular lentes de contacto en el laboratorio, an cuando no se estn realizando prcticas.
Mantenga su rea de trabajo limpia y ordenada. No deben colocarse libros, abrigos y mochilas sobre las mesas de trabajo.
Se deber verificar que la mesa est limpia al comenzar y al terminar el trabajo realizado.
Los alumnos y docentes deben estar familiarizados con los elementos de seguridad disponibles, salidas de emergencia,
extintores, regaderas y ubicacin de botiquines.
Toda herida o quemadura, an los pequeos cortes, que se produzcan durante una prctica deben ser informados obligatoriamente al docente y debern ser tratadas inmediatamente.
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En el caso de salpicaduras de cidos sobre la piel lavar inmediatamente con agua abundante, teniendo en cuenta que en el
caso de cidos concentrados la reaccin con el agua puede producir calor. Es conveniente retirar la ropa de la zona afectada
para evitar que el corrosivo quede atrapado entre sta y la piel.
Normas Particulares de Trabajo

Las balanzas deben dejarse en ceros y perfectamente limpias despus de su uso.
Cerca de las balanzas slo debern estar los estudiantes que en ese momento se encuentren pesando (uno por balanza).
Queda estrictamente prohibido pipetear con la boca cualquier lquido, para ello use propipetas.
Las pipetas con reactivo residual, se debern colocar con la punta hacia abajo sobre la tarja de cada mesa de trabajo y los
alumnos no debern trasladarlas de un lado a otro para evitar riesgos de salpicaduras a sus compaeros.
Siempre que trabaje con algn reactivo txico o corrosivo (como los cidos fuertes), deber realizar la operacin en la campana de extraccin, con la luz y el extractor encendidos, y el vidrio protector abajo dejando un espacio para poder manipular
el reactivo.
Siempre que diluya un cido fuerte con agua deber hacerlo de la siguiente manera. Coloque en el matraz volumtrico o
recipiente de vidrio donde va a llevar a cabo la dilucin, la mitad del volumen total de agua indicado en la preparacin del
reactivo, aada el cido manteniendo el recipiente receptor en un cierto ngulo que asegure que la boca del recipiente
seale hacia el lado contrario de su cara o la de su compaero. Nunca aada agua al cido!
Se deber etiquetar todo el material de vidrio con el nombre del reactivo, la concentracin a la que est preparado, fecha y
nombre o nmero de equipo.
Los frascos de los reactivos deben cerrarse inmediatamente despus de su uso, durante su utilizacin los tapones o las tapas
deben colocarse siempre boca arriba sobre la mesa.
No deben manipularse jams productos o disolventes inflamables en las proximidades de un mechero encendido o de la
flama de un encendedor.
Al agitar moderadamente un tubo de ensayo golpee con la punta del dedo la base del tubo. Cuando requiera una agitacin
vigorosa por inversin del recipiente, tpelo con un tapn de rosca o con parafilm, nunca lo haga con la mano.
Si algn reactivo se derrama, debe limpiarse inmediatamente dejando el lugar perfectamente ordenado. Las salpicaduras de
sustancias bsicas deben neutralizarse con un cido dbil (por ejemplo con cido ctrico) y las de sustancias cidas con una
base dbil (por ejemplo con bicarbonato sdico).
No deben verterse residuos slidos en los fregaderos, para ello deben emplearse los recipientes para residuos que se encuentran en el laboratorio.
No calentar nunca enrgicamente una disolucin. La ebullicin debe ser siempre suave, si hay necesidad utilice perlas de
vidrio para conseguir una ebullicin homognea y suave.
El mechero debe cerrarse una vez utilizado, tanto de la llave del propio mechero como de la toma del gas de la mesa.
Las disoluciones y recipientes calientes deben manipularse con cuidado. Para la introduccin y extraccin de recipientes de
muflas, hornos y estufas deben utilizarse pinzas largas (como las que se usan para el manejo de crisoles en las muflas) y/o
guantes para manejo de objetos calientes.
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No se deben oler directamente los vapores de sustancias voltiles, cuando se requiera dirija los vapores con las manos hacia
la nariz para percibirlos.
Nunca regrese reactivos (slidos o lquidos) al recipiente original, a menos que est seguro de su buen manejo y de que no
estn contaminados.
Grados o calidades de reactivos qumicos en el laboratorio

De acuerdo a su uso, pureza y residuos los reactivos se clasifican en varios grados.
Grado tcnico o comercial

Su calidad no est garantizada y por ello no se utilizan para anlisis qumico, pueden usarse en experimentos cualitativos donde
no se requiere cuantificar ni obtener resultados exactos.
Grado USP (United States Pharmacopeia)

Cumplen con las especificaciones que exigen las norma de Estados Unidos en cuanto a contenidos mximos de contaminantes
dainos a la salud. Pueden contener contaminantes no peligrosos, pero que interfieren en determinados procesos analticos por
lo que su uso no es aconsejable para estos propsitos.
Grado reactivo
Estas sustancias cumplen las especificaciones del Comit de Reactivos Qumicos de la Sociedad Qumica Americana (Reagent
Chemical Committee of the American Chemical Society) y son los indicados para el trabajo analtico. Se identifican por las siglas
en ingls ACS que aparecen en la etiqueta, la cual adems declara el porcentaje mximo de impurezas permitido por dicha
entidad internacional, as como el porcentaje de las impurezas que contiene.
Grado estndar primario

Son de alta pureza, se emplean como patrones primarios en la preparacin de soluciones estndares.
Simbologa para denotar los riesgos de los reactivos qumicos

Existen diversos sistemas convencionales para dar a conocer mediante smbolos los riesgos de las sustancias qumicas, los ms
usuales son:
Nmeros de riesgo de la Organizacin de Naciones Unidas (ONU)
Diamante de la National Fire Protection Association (NFPA).
Sistema del Departamento de Transporte de los Estados Unidos (DOT).
Cdigos de riesgo de empresas fabricantes de reactivos qumicos, como Merck y Baker.
De los sistemas anteriores el ms comn es el de NFPA cuyo smbolo es un rombo (Fig. 5) que representa visualmente la informacin sobre tres categoras de riesgo: salud, inflamabilidad y reactividad; identificadas y clasificadas en una escala del 0 al 4,
dependiendo del grado de peligro que presenten. Adicionalmente, seala riesgos especficos como poder oxidante, corrosividad,
si se trata de un compuesto radiactivo, su reactividad con el agua y si tiene carcter cido, bsico o neutro.
12
Nivel de riesgo
4 Mortal
3 Muy peligroso
2 Peligroso
1 Poco peligroso
0 Sin riesgo
Inflamabilidad
4 Debajo de 25C
3 Debajo de 37C
2 Debajo de 93C
1 Sobre 93C
0 No se inflama
Inflamabilidad
Salud
Riesgo
especfico
OX -Oxidante
COR-Corrosivo
Radiactivo
W No usar agua
ALC -Alcalino
Reactividad
Riesgo especfico
Reactividad
0 Estable
1 Inestable si se calienta.
2 Inestable en caso de cambio qumico violento.
3 Puede explotar en caso de
choque o calentamiento.
4 Puede explotar.
Figura 5. Smbolo en forma de rombo o diamante de la National Fire Protection Association (NFPA).
En cuanto a los smbolos de riesgo empleados por las empresas fabricantes de reactivos qumicos, algunos se encuentran ejemplificados en la Fig. 6. Finalmente, la Fig. 7 presenta algunos smbolos de riesgo empleados en laboratorios e industrias.
Corrosivo
Corrosive
Corrosif
Irritante
Irritant
Irritant
Xi
Txico
Toxic
Toxique
Explosivo
Explosive
Explosible
Comburente
Oxidising
Comburant
Nocivo
Hamful
Nooil
Muy Txico
Very Toxic
Trs Toxique
T+
Xn
Peligroso
para el Medio
Ambiente
Inflamable
Flammable
Inflammable
Figura 6. Algunos smbolos de riesgo empleados por las compaas fabricantes de reactivos qumicos.
13
ATENCION
ATENCION RIESGO
DE INCENDIO
ATENCION RIESGO
DE EXPLOSION
ATENCION RIESGO
DE CORROSION
ATENCION RIESGO
DE TOXICO
ATENCION RIESGO
DE RESBALAR
ATENCION RIESGO
CAIDA DE OBJETOS
ATENCION RIESGO
VEHICULOS INDUSTRIALES
ATENCION RIESGO
GARGAS SUSPENDIDAS
ATENCION HOMBRES
TRABAJANDO
ATENCION MAQUINAS
EN MOVIMIENTO
RIESGO CHOQUE
ELECTRICO
ATENCION
PEATONES
ATENCION MATERIAL
INFECCIOSO
ATENCION RIESGO
DE RADIOACTIVIDAD
ATENCION MATERIAL
COMBUSTIBLE
ATENCION RIESGO
DE ELECTROCUCION
ATENCION GAS
ENVASADO
ATENCION PUESTA
A TIERRA
Figura 7. Otros smbolos de riesgo empleados en laboratorios, plantas piloto e industrias.
Cdigo de colores para tuberias de servicios de laboratorios

Tuberas de
color
Agua
azul
Gas
Amarillo
Aire
verde
Electricidad
rojo
Sistema internacional de unidades y formas de expresar cantidades

Existe un Sistema Internacional de Unidades (SI) el cual rige como se deben expresar las unidades en el campo cientfico, es un
sistema decimal en el que las magnitudes difieren de la cantidad fundamental en potencias de diez mediante el uso de prefijos,
como mltiplos o como submltiplos, de la unidad bsica. Por ejemplo, el prefijo kilo significa mil veces (103) la unidad bsica
y se simboliza por k.
Abreviaturas Ms Usuales en Qumica

l litro
mg miligramo
ml mililitro
% Alc. Vol.
por ciento de alcohol en volumen a 20C
C
grados Celsius
K
grados Kelvin
F
grado Fahrenheit
N normalidad
kg kilogramo
g gramo
g microgramos
l microlitro
m/v
masa sobre volumen
M molaridad
m molalidad
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Qu son las Cifras Significativas?

Los dgitos que no cambian al sumar y restarle la incertidumbre a la medida, contados de izquierda a derecha.
El nmero de cifras significativas se obtiene contando los dgitos de los que estamos seguros porque no cambian con la incertidumbre. Para conocer este nmero necesitamos identificar en qu posicin decimal se ubica la incertidumbre y cmo afecta
a los dgitos correspondientes de la medicin. En el ejemplo del Cuadro 1, la incertidumbre se localiza en la segunda posicin
despus del punto y por lo tanto, el nmero de cifras significativas es 3.
Cuadro 1. Ejemplo para ilustrar como obtener el nmero de cifras significativas.
Datos Obtenidos al Aplicar un Mtodo Experimental de Medicin

Valor central
Valor mximo
Valor mnimo
Cifras significativas
23.863 m
23.885 m
23.841 m
Redondeo de las Cifras Significativas

Un aspecto importante al reportar el resultado de operaciones matemticas con nmeros obtenidos de mediciones es el redondeo de cifras, el cual debe hacerse para expresar dicho resultado correctamente. Para ello deben tenerse en cuenta las siguientes
normas:
Si la cifra siguiente a la que se ha de redondear es menor de 5, la cifra por redondear se deja como tal. Por ejemplo, al
redondear a 3 cifras el nmero 0.438497, ste queda como 0.438.
Si la cifra siguiente a la que se ha de redondear es mayor de 5, la cifra por redondear se aumenta en una unidad. As, el
nmero 0.346013 redondeado a dos cifras significativas queda como 0.35.
Si la cifra siguiente a la que se ha de redondear es exactamente 5, la cifra por redondear se aumenta en una unidad si es
impar, o se deja como tal si es par. Por ejemplo, al redondear a 4 cifras significativas el nmero 7.01350 el resultado es 7.014,
y al redondear a 2 cifras significativas el nmero 3.4500, el resultado es 3.4.
Asimismo, el nmero de cifras decimales en el resultado de operaciones de adicin o sustraccin est determinado por el sumando con el menor nmero de decimales. Por ejemplo, el resultado de la operacin:
0.43 g + 132.1 g 18.46 g + 0.0021 g 35.49 g = 78.5821 g
debe redondearse a 78.6 g ya que el sumando 132.1 g es el que posee el menor nmero de decimales (un solo decimal) y el
resultado debe tener, por tanto, un solo decimal.
Conceptos de Precisin y Exactitud

En ingeniera, ciencia, industria y estadstica los trminos exactitud y precisin no son sinnimos y por lo tanto, no son equivalentes. A continuacin se definen ambos trminos
Precisin
Se refiere a la dispersin del conjunto de valores obtenidos de mediciones repetidas de una magnitud. Cuanto menor es la
dispersin mayor la precisin. Una medida comn de la dispersin o variabilidad de los datos es la desviacin estndar, la cual
se utiliza para describir la reproducibilidad de los resultados experimentales. Se puede definir como el nivel de similitud entre los
valores numricos de varias medidas de la misma propiedad, realizadas bajo las mismas condiciones experimentales.
15
Exactitud
Se refiere a que tan cerca del valor real se encuentra el valor medido. En trminos estadsticos, la exactitud est relacionada con
el sesgo de una estimacin. Cuanto menor es el sesgo ms exacta es una estimacin. La Fig. 8 ilustra ambos conceptos.

Alta exactitud, pero baja precisin.
Alta precisin pero baja exactitud
Figura 8. Tiro al blanco para ilustrar la diferencia entre exactitud y precisin.
En la Fig. 8 aparece el resultado de varios tiros con arco hacia un objetivo. La exactitud describe la proximidad de las flechas al
centro del objetivo, las flechas que llegaron ms cerca del centro se consideran ms exactas. Cuanto ms cerca estn las medidas
a un valor real o aceptado, ms exacto es el sistema de medicin.
La precisin, en este ejemplo, es la distancia entre los impactos de las flechas, es decir, que tan distantes quedaron unos de
otros; cuanto ms cercanos entre s hayan quedado estos impactos, ms precisos fueron los lanzamientos. Similarmente, entre
ms cercanos estn los resultados de varias mediciones efectuada, ms preciso ser el sistema de medicin. En s, se puede decir
que la precisin es el grado de repetitividad del resultado.
Hay que notar que el hecho de que las flechas estn muy cercanas entre s es independiente al hecho que estn cerca del
centro del objetivo. Resumiendo, se puede decir que exactitud es el grado de veracidad, mientras que precisin es el grado de
reproducibilidad.
Ejemplo. Un reloj analgico, de manecillas, desplaza su minutero slo de minuto en minuto, si bien lo hace en absoluta
sincrona con el horario oficial o real (el objetivo en el tiro al blanco). Un segundo reloj utiliza minutero, segundero e incluso
est dotado de un sistema de medicin de dcimas de segundo, sin embargo observamos que su horario no coincide plenamente con el horario oficial o real (que sigue siendo el objetivo). Por lo tanto, concluiremos que el primer reloj es altamente exacto,
aunque no sea preciso, mientras que el segundo, es altamente preciso, aunque no se muestra exacto.
La Media Aritmtica
En una medicin experimental se obtiene un resultado, al realizar varias corridas cada una dar un valor distinto, Qu valor se
reportar cmo resultado del ensayo? El resultado numrico representativo de una serie de pruebas es la media aritmtica de
los resultados individuales, la cual se encuentra dividiendo la suma de los resultados entre el nmero de determinaciones en
serie y se expresa matemticamente como sigue:
i Xi = X
N
donde:
X representa la media aritmtica.
Xi representa el resultado numrico de la i-sima corrida
N es el nmero total de corridas.
16
El Error Experimental
La exactitud de un resultado se expresa mediante el error experimental que es la diferencia entre el valor real o aceptado (medicin correcta) y el obtenido experimentalmente. El error puede expresarse en por ciento de la medicin correcta o tambin
como un porcentaje de todo el rango de medicin del instrumento utilizado.
E (%) = [dato obtenido dato verdadero o correcto / dato verdadero o correcto] x 100
Otra forma de expresar el error experimental es mediante el error absoluto que es la diferencia entre el valor experimental y el valor verdadero.
Ea = Valor verdadero o correcto Valor experimental
La Desviacin Estndar
La precisin de un resultado se puede expresar mediante la desviacin estndar que es una medida de la dispersin de los
resultados obtenidos experimentalmente.
Ejemplo
Aqu se muestra como calcular la desviacin estndar de un conjunto de datos. Los datos representan la edad de los miembros
de un grupo de nios. { 4, 1, 11, 13, 2, 7 }.
1. Calcular el promedio o media aritmtica
En este caso, N = 6 porque hay seis datos:

X1 = 4X1 = 4
X2 = 1X2 = 1
X3 = 11
X4 = 13
X5 = 2
X6 = 7
17
I = nmero de datos para calcular la desviacin estndar
1 6
x = xi
6 i=1
Sustituyendo N por 6
1
x = (x1 + x 2 + x 3 + x 4 + x 5 + x 6 )
6
1
x = (4 + 1+ 11+ 13 + 2 + 7)
6
x = 6.33 Este es el promedio.
2. Calcular la desviacin estndar
1
xi + x)2
N 1 i=1
1
x i x ) 2 Sustituyendo N - 1 por 5; ( 6 - 1 )
5 i=1
1
x i 6.33) 2 Sustituyendo
5 i=1
1
[(4 6.33) 2 + (1 6.33) 2 + (11 6.33) 2 + (13 6.33) 2 + (2 3.66) 2 + (7 6.33) 2 ]
5
por 6,33
1
[(2.33) 2 + (5.33) 2 + 4.67 2 + 6.67 2 + (4.66) 2 + (0.67 2 )]
5
1
(5.43 + 28.4 + 21.8 + 44.5 + 18.7 + 0.449)
5
119.28
5
23.86
= 23.86 ste es el valor de la desviacin estndar
18
Bibliografa
Direcciones Electrnicas
El Circo de la Ciencia.
http://ciencias.unizar.es/circo/images/chemistry.jpg
Fundacin CIENTEC
http://www.cientec.or.cr/exploraciones/ponenciaspdf/WagnerCastro.pdf
Ministerio de Trabajo y Asuntos Sociales. Espaa.
http://www.mtas.es/insht/ntp/ntp_459.htm
Universidad de Antioqua. Vicerrectora de Docencia
http://docencia.udea.edu.co/cen/tecnicaslabquimico/01intro/intro01.htm
http://www.texca.com/simbolos.htm

TEXCA. Tecnologa de Equipos a Prueba de Explosin.
Libros
Osorio Giarldo Rubn D., 2009. Manual de tcnicas de laboratorio qumico. Medellin, Colombia. Ed. Universidad de Anioquia.
Rubinson, Judith, R., Rubinson Kenneth A. 2000 Qumica Analtica Contempornea. New Jersey, U.S.A. Primera edicin. Prentice hall Hispanoamericana, S.A.
19
Practica 1
Preparacin de disoluciones
Introduccin
En la naturaleza encontramos dos clases de substancias puras, los elementos y los compuestos, las dems son mezclas. Una
mezcla o dispersin consiste en dos o ms substancias puras, separables por medios fsicos, cuyas propiedades dependen de su
composicin y de las propiedades de las substancias que la componen. Las mezclas son de dos tipos: heterogneas y homogneas. Una mezcla heterognea no es completamente uniforme y sus componentes son distinguibles, en ocasiones, a simple vista
(por ejemplo, una mezcla de azcar y arena). Una mezcla homognea por el contrario tiene apariencia uniforme, las disoluciones
son ejemplos de mezclas homogneas.
En una disolucin, las partculas dispersas son invisibles a simple vista, ya que son partculas de dimensiones atmicas con
dimetro menor de 1 nm, no pueden detectarse por mtodos pticos y atraviesan las membranas permeables, tampoco pueden
separarse por filtracin, ni ultracentrifugacin. Las disoluciones no presentan opalescencia porque las partculas disueltas no
dispersan la luz pero s pueden absorberla y tener color. En el cuerpo humano por ejemplo, los nutrientes estn disueltos en
la sangre, la cual los transporta a todas las clulas donde se incorporan a un sinfn de reacciones bioqumicas que en conjunto
conocemos como metabolismo. Otros ejemplos de dispersiones homogneas son las disoluciones salinas fisiolgicas y las de
glucosa, urea y aminocidos contenidos en la sangre.
Al hablar de disoluciones es muy comn usar los trminos soluto y disolvente. El disolvente, tambin conocido como componente continuo o dispersor, es el que se encuentra en mayor cantidad y su estado fsico no cambia cuando se forma la disolucin.
Todos los dems componentes que se disuelven en el disolvente se llaman solutos o bien componentes dispersos o discontinuos. Durante el proceso de disolucin de los solutos se debe suministrar energa para romper las fuerzas que mantienen unidas
las partculas de soluto entre s y separarlas en iones o molculas individuales. En general, la energa que se requiere para romper
los enlaces entre las partculas del soluto es aportada por la que se libera cuando interactan las molculas de soluto y disolvente.
Un aspecto importante de los solutos es su solubilidad, que es la capacidad que tienen para disolverse en otra sustancia y
se mide como la cantidad mxima de soluto que se puede disolver en un volumen definido de disolvente, a una temperatura
y presin determinadas. En el caso de las mezclas gas en gas, la solubilidad es ilimitada, mientras que en el resto de las disoluciones existe un lmite a la cantidad de soluto que se puede disolver en un volumen. La solubilidad se mide como el coeficiente
de solubilidad o simplemente solubilidad. Para los lquidos y slidos, la solubilidad se reporta en gramos de soluto por 100 g de
disolvente (Brady, 2003).
21
Disoluciones acuosas
Los disolventes polares como el agua, tienen dipolos cuyo extremo positivo atrae a los iones negativos del soluto y el extremo
negativo del agua a los iones positivos de soluto, estos enlaces llamados in-dipolo. Individualmente son dbiles pero en grandes
cantidades, como sucede en las disoluciones, aportan suficiente energa para vencer la atraccin electrosttica que mantiene
unidos a los iones en el cristal slido. En la disolucin, cada in est rodeado por muchas molculas de disolvente por lo que se
dice que est solvatado y si el disolvente es agua, entonces se dice que est hidratado.
Por otro lado, para que un disolvente pueda disolver compuestos inicos debe tener tambin una constante dielctrica
elevada, que le permita disminuir la atraccin entre iones de carga opuesta, una vez que se encuentran solvatados. El agua debe
sus relevantes propiedades como disolvente de substancias inicas a su polaridad y su elevada constante dielctrica. Adems, el
agua forma puentes de hidrgeno, lo que le permite disolver tambin compuestos polares, aunque no sean inicos.
Cuando se quiere indicar la cantidad relativa de soluto y disolvente presentes en una disolucin, se usa el trmino de concentracin. Existen dos maneras de expresar la concentracin, en una se indica la cantidad de soluto en relacin con la cantidad
de disolucin y en la otra, la cantidad de soluto con respecto a la cantidad de disolvente. Las formas ms comunes de expresar
la concentracin corresponden al primer tipo y son: molaridad, normalidad, osmolaridad, fraccin molar y por ciento. Entre las
formas ms tiles del segundo tipo estn la molalidad y la osmolalidad
Expresiones de Concentracin en Trminos de la Cantidad de Soluto por Cantidad de Disolucin

Vale la pena recordar aqu que un mol es la cantidad de sustancia que contiene el nmero de Avogadro (NA) de partculas
elementales, tomos, iones o molculas y que NA es igual a 6.022x1023. Un mol de cualquier sustancia es la cantidad en gramos
igual a su peso o masa molecular (PM), as se tiene que un tomo-gramo de hidrgeno es 1 gramo de hidrgeno; un tomogramo de sodio son 23 gramos de sodio; un tomo-gramo de potasio son 39 gramos de potasio; y un tomo - gramo de cloro
son 35.5 gramos de cloro. Ahora bien, los tomos se unen para formar molculas; por ejemplo, el carbono, el oxgeno y el
hidrgeno se unen para formar, entre otras sustancias, glucosa cuya frmula condensada es C6H12O6. La masa molecular de la
glucosa es la suma de las masas de los tomos constituyentes, a saber: el carbono es 12x6, sumado al hidrgeno 1x12, ms el
oxgeno 16x6 lo que resulta en una masa molecular total igual a 180 tomos-gramo o gramos por mol de glucosa; esta masa
puede ser expresada en gramos y, si cuando se habla de tomos se le llamaba tomo-gramo, cuando se refiere a molculas, se
le denomina molcula-gramo o mol.
Molaridad. Se define como el nmero de moles de soluto en un litro de disolucin. Se representa con la letra M y sus
unidades son molL-1. Es importante notar que esta forma de expresar la concentracin indica la cantidad de soluto por cantidad
de disolucin total y no de disolvente, esto quiere decir que si se disuelve en agua 1 mol de glucosa (180 gramos por mol) y se
aade agua suficiente (se afora) hasta completar un litro, se obtiene una disolucin molar (1.0 M) de glucosa. La manera mas
conveniente de calcular la molaridad de una disolucin es utilizando la siguiente ecuacin.
M=
22
gsoluto
PM V
Prctica 1
Donde:
M = es la molaridad (molL-1)
g soluto = es la cantidad de soluto en la disolucin (g)
PM = peso molecular del soluto (gmol-1)
V = volumen de disolucin (L)
Normalidad. Es el nmero de equivalentes qumicos (# eq) de soluto, disueltos en un litro de disolucin. Se representa
con la letra N y sus unidades son eqL-1. El equivalente qumico de una sustancia depende del tipo de reaccin en la que va a
participar dicha sustancia. El peso equivalente qumico se calcula dividiendo el peso molecular entre la valencia del compuesto
en la reaccin considerada, y el equivalente qumico ser la cantidad en gramos igual al peso equivalente de la sustancia.
En reacciones cido - base la valencia ser igual al nmero de protones donados por el cido o aceptados por la base, en
cambio, en reacciones de xido - reduccin ser el nmero de electrones que gana o pierde un tomo o molcula. Un ejemplo
es cuando el cido oxlico H2C2O4, se oxida para producir CO2 segn la reaccin:
En donde el nmero de equivalentes por mol de soluto (n) es igual al nmero de electrones ganados o perdidos, por lo
tanto, el nmero de equivalentes qumicos para una disolucin de acido oxlico (con un peso molecular de 90 g/mol) es:
Peso Equivalente =
90 g mol 1
g
= 45
Eq
2 Eq mol -1 H 2 C 2 O4
En disoluciones de cidos y bases, n es el nmero de H+ que proporciona una unidad frmula de cido o tambin el nmero
de OH- que suministra una unidad frmula de la base. La forma matemtica para calcular la normalidad de una disolucin es:
Donde:
N = es la normalidad (eqL-1)
g soluto = es la cantidad de soluto en la disolucin (g)
V = volumen de disolucin (L)

Las expresiones de molaridad y normalidad estn relacionadas a travs de la valencia y por ello se puede plantear la siguiente
equivalencia:
N = n M
23
Donde:
N = normalidad (eqL-1)
M = molaridad (molL-1)
n = nmero de electrones transferidos por unidad de frmula.
Osmolaridad. Se define como el nmero de osmoles de soluto por litro de disolucin, se representa son el smbolo Os y
tiene unidades de osmolL-1. El osmol es la cantidad de soluto que ejerce una presin osmtica igual a la de un mol de partculas
disueltas, que es de 22.4 atmsferas a 25 C; cuando los solutos no se disocian la osmolaridad (Os) y la molaridad (M) son
iguales, pero en solutos disociables, la osmolaridad depende del grado de disociacin.
Fraccin Molar. Es la fraccin del total de moles de una sustancia en disolucin, que representa el nmero de moles de
un componente particular. Su smbolo es x y se calcula dividiendo el nmero de moles del isimo componente (ni) entre el
nmero total de moles en la disolucin (nT):
n
xi = i
nT
Donde:
xi = fraccin mol del componente i o del soluto i en la disolucin

ni = nmero de moles del componente i o del soluto i en la disolucin (mol)
nT = suma total de moles de los i componentes en la disolucin (mol)
Como se puede ver en la ecuacin, la fraccin molar es un nmero adimensional y la suma de las fracciones molares de
todos los componentes de la disolucin siempre es igual a uno.
Por ciento. Expresa la concentracin como partes de soluto por cada cien partes de disolucin. Para preparar una disolucin
porcentual se considera que las substancias qumicamente puras estn formadas slo por soluto, es decir, estn al 100%. Segn
las unidades en que se expresen las partes de soluto y disolvente la concentracin porcentual pueden tener mltiples formas,
las ms comunes son:
Por ciento peso en peso (% p/p). Tambin llamado peso porcentual, es el nmero de gramos de soluto en 100 g de disolucin y es la forma en que se expresa la pureza de los reactivos qumicos. Se representa como % p/p y la forma de calcularlo es:
%p
g soluto
100
g soluto + g disolvente
%p
g soluto
100
g disolucin
As pues en una disolucin de cloruro de sodio al 5.0% en peso, 5.0 gramos de NaCl se disuelven en 95.0 gramos de agua.
Por ejemplo, los cidos clorhdrico, sulfrico, etc. son envasados de esta manera. As, para al cido clorhdrico (HCl) al 37%
(p /p) en cada 100 gramos de disolucin, 37 gramos son de HCl puro.
Por ciento volumen en volumen (% v/v). Es el nmero de mililitros de soluto en 100 mililitros de disolucin.
Por ciento peso en volumen (% p/v). Es el nmero de gramos de soluto en 100 mililitros de disolucin y es la forma ms
comn de las expresiones porcentuales.
Moles por ciento (moles %). Es el nmero de moles de soluto disueltas en 100 mililitros de disolucin.
24
Prctica 1
Milimoles por ciento (mmoles %). Es el nmero de milimoles de soluto disueltas en 100 mililitros de disolucin. Un milimol
es la milsima parte de un mol.
Miliequivalentes porciento (meq %). Es el nmero de miliequivalentes qumicos de soluto en 100 mililitros de disolucin.
Un miliequivalente qumico es la milsima parte del peso de un eq. Esta forma de expresar la concentracin es muy utilizada en
qumica clnica.
Los por cientos en peso y peso/volumen se relacionan con la densidad (r) de la siguiente manera:
p p
= % (r )
V p
El % p/p puede tambin relacionarse con la molaridad (M) y normalidad (N) mediante las siguientes expresiones:
% p r ( Peso equivalente) 10
p
N=
PM
% p r 10
p

M =
PM
Expresiones de Concentracin en Trminos de la Cantidad de Soluto por Cantidad de Disolvente

Molalidad. Es el nmero de moles de soluto disueltos en 1000 gramos de disolvente. Se representa con la letra m y sus unidades
son molKg-1. La principal ventaja de esta forma de expresar la concentracin es que su valor no cambia con la temperatura, como
sucede con la molaridad, pero como en el trabajo prctico es ms fcil medir volmenes que masas, slo se emplea la molalidad
cuando se sabe que la temperatura va a cambiar durante el proceso a estudiar.
Osmolalidad. Se define como el nmero de osmoles de soluto por kilogramo de disolvente. Como los procesos biolgicos
se llevan a cabo siempre a temperatura prcticamente constante, esta forma de expresar la presin osmtica casi no se usa en
bioqumica (Burns, 2003).
Proceso de dilucin de las disoluciones

Qu pasa cuando ya se tiene una disolucin de cierta concentracin (disolucin madre) y se desea obtener, a partir de sta,
una nueva disolucin con una menor concentracin? A este proceso se le conoce como dilucin, y en su clculo se utiliza la
siguiente ecuacin:
V1C1 = V2C2
Donde:
V1 = Volumen de la disolucin madre que se deber tomar para obtener la nueva disolucin
C1 = Concentracin de la disolucin madre
V2 = Volumen que se desea obtener de la nueva disolucin
C2 = Concentracin que tendr la disolucin nueva
Las concentraciones pueden estar expresadas en trminos de molaridad, normalidad, porcentuales, molales u otras.
25
Disoluciones sobresaturadas, saturadas, concentradas, diluidas y muy diluidas

Tomando como referencia la cantidad de soluto disuelto y su solubilidad las disoluciones pueden ser sobresaturadas, saturadas,
concentradas, diluidas y muy diluidas. Una disolucin sobresaturada contiene una cantidad de soluto mayor de la que el disolvente puede disolver a la temperatura actual; por lo general, este tipo de disoluciones existe en equilibrio con un exceso de soluto, que est fuera de la disolucin en forma de precipitado y con el cual las molculas de soluto se intercambian constantemente.
Una disolucin est saturada cuando contiene la mxima cantidad de soluto que la cantidad presente de disolvente puede
disolver, en las condiciones de presin y temperatura existentes, y por lo tanto es inestable, cualquier disturbio la hace precipitar.
Una disolucin concentrada contiene una cantidad menor de soluto que la necesaria para saturarla a la temperatura en que
se encuentra, pero que se aproxima a ella; en forma prctica, las disoluciones mayores a 1.0 M se consideran concentradas. Las
disoluciones diluidas contienen una pequea fraccin del total de soluto que pueden disolver; en la prctica la concentracin de
una disolucin diluida es menor de 1.0 M pero mayor de 0.01 M. Finalmente, las disoluciones muy diluidas son aquellas cuya
concentracin es menor a 0.01 M (Skoog et al, 2008, Whitten et al, 1992).
Objetivos
El alumno deber ser capaz de realizar los clculos de la concentracin de diversas disoluciones, llevar a cabo su preparacin y
distinguir las diferencias entra las distintas formas de expresar su concentracin.
Materiales y reactivos
Balanza analtica
1 esptula
4 vasos de precipitados de 100 mL
4 matraces volumtricos de 100 mL
3 pipetas graduadas de 10 mL
1 propipeta
1 agitador magntico
1 varilla de vidrio
1 piseta
1 probeta de 100 mL
1 pipeta Pasteur con bulbo
Cloruro de sodio
Sacarosa
Etanol
cido sulfrico
cido clorhdrico
Hidrxido de sodio
Carbonato de sodio
Agua destilada (disolvente)
26
Prctica 1
Procedimiento
Preparacin de 100 mL de disolucin 0.10 M de carbonato de sodio
Pese en un vaso se precipitados de 100 mL, 1.0600 g de carbonato de sodio (Na2CO3). Recuerde registrar el peso mostrado en
la balanza. Aada una porcin de agua para disolver con agitacin completamente la sal. Transfiera la disolucin a un matraz
volumtrico de 100 mL con la ayuda de una varilla de vidrio para no derramarla ni gotear. El vaso se lava dos veces con porciones
de 2.0 mL de agua y dichas porciones se transfieren al matraz volumtrico. Contine lentamente la adicin de agua hasta llegar
al aforo, tape el matraz y agtelo invirtindolo varias veces. Haga los clculos con el fin de rectificar la concentracin.
Preparacin de 100 mL de una disolucin de cloruro de sodio

Pese en una balanza un vaso de precipitados de 100 mL, tare el vaso y adicione con una esptula sal (NaCl), hasta completar
2.0 g. Recuerde registrar el peso mostrado en la balanza. Mida 90.0 mL de agua y adicinelos al vaso que contiene la sal y agite
hasta completa disolucin del slido, transfiera la disolucin a un matraz volumtrico de 100 mL y llvelo a volumen con agua.
Calcule la concentracin de NaCl en molaridad (M) y en % p/p.
Preparacin de 100 mL de una disolucin de etanol

Con una pipeta graduada mida 7.0 mL de etanol al 95% y depostelos en un matraz volumtrico de 100 mL. Adicione agua para
mezclar y posteriormente afore con agua. Determine cual es la concentracin molar (M) y en % v/v.
Preparacin de 100 mL de HCl 0.10 M, a partir de HCl concentrado (37% p/p y densidad de 1.18 g/mL)
Coloque 50.0 mL de agua en un matraz volumtrico de 100 mL. Con ayuda de una propipeta y en una campana de extraccin
de vapores, tome el volumen necesario de cido concentrado para preparar la disolucin requerida. Agregue el cido lentamente
al matraz con agua, deslizndolo gota a gota por las paredes del recipiente. Agite ligeramente la disolucin y lleve hasta el aforo
con agua. Tape el matraz y agtelo nuevamente.
Preparacin de 100 mL de H2SO4 0.20 N, a partir de H2SO4 concentrado (98% p/p y densidad de 1.87 g/mL)
Coloque 50.0 mL de agua en un matraz volumtrico de 100 mL. Con ayuda de una propipeta y en una campana de extraccin
de vapores, tome el volumen necesario de cido concentrado para preparar la disolucin requerida. Agregue el cido lentamente
al matraz con agua, deslizndolo gota a gota por las paredes del recipiente, agite ligeramente la disolucin y lleve hasta el aforo
con agua, tape el matraz y agite nuevamente.
Recuerde: nunca pipetee un cido, y ningn reactivo en general, con la boca y siempre adicione el cido al agua, nunca el
agua al cido! Use su bata cerrada (completamente abotonada) y trabaje en la campana de extraccin cuando se trate de cidos
fuertes.
Preparacin de 100 mL de una disolucin 1.0 N de NaOH

Empleando KOH puro, disee un mtodo para preparar 100 mL de disolucin 1.0 N. Escriba el procedimiento con los clculos a
seguir, disctalos con el profesor y luego proceda a la preparacin de la disolucin.
Reporte de la prctica
Al terminar el desarrollo experimental, deber entregar al profesor el registro de los pesos o volmenes medidos durante la
sesin, ya que efectuar un anlisis del desempeo grupal a travs del clculo del promedio, desviacin estndar y coeficiente
de variacin.
27
En el reporte de resultados deber registrar los clculos efectuados para cada una de las disoluciones preparadas, as como
expresar las concentraciones experimentales en las diferentes formas como son normalidad, molaridad, y porciento en peso y
volumen, tomando como base el volumen adicionado con la pipeta y /o el peso registrado en la balanza.
Cuestionario
1. Cmo preparara 200 mL de una disolucin 2.0 N de NaHCO3?
2. Qu le pasar a la concentracin de una disolucin 1.0 M de HCl si se deja largo tiempo en un recipiente destapado?
3. Qu entiende cuando le piden preparar un litro de una disolucin de NaCl a una concentracin de 20 partes por milln
(ppm)? Qu clculos hara?
4. Qu peso de NaOH se necesita para preparar 500 mL de una disolucin 0.10 M?
5. El frasco de donde se obtuvo el H2SO4 tiene las siguientes especificaciones: peso molecular = 98.08 g/mol, densidad = 1.87
g/mL, % de pureza = 98.0. Reporte la concentracin de H2SO4 en:
a. % Peso
b. % Peso/volumen
c.
Molaridad
d. Normalidad
28
Prctica 1
Bibliografa
Brady James. E. 2003. Qumica Bsica. Principios y Estructura. 2 edicin, Editorial Limusa Wiley, Mxico.
Burns Ralph A. 2003. Fundamentos de Qumica. 4 edicin, Pearson Education, Mxico D. F.
Skoog Douglas Arvid., West Donald M., Holler James F., Crouch Stanley R. 2008. Fundamentos de Qumica Analtica. 8
edicin, Thomson Learning, Mxico.
Whitten Kenneth. L. Gailey Kenneth. D., Davis Raymond. E. 1992. Qumica General. 3 edicin. Editorial Mc Graw Hill Interamericana de Mxico.
Ocampo Glafira Angeles. 1991. Fundamentos de Qumica III, Editorial Publicaciones Cultural Mxico, D. F.
29
Prctica 2
Determinacin gravimtrica de calcio como oxalato de calcio monohidratado
Introduccin
En una determinacin gravimtrica se mide el peso de un compuesto para determinar la cantidad de analito presente en la
muestra (Rubinson & Rubinson, 2000). Los anlisis gravimtricos pueden ser por desprendimiento, precipitacin y electrodeposicin (Flascka et al, 1986). Al primer tipo de anlisis tambin se le conoce como termografa (Rubinson & Rubinson, 2000;
Skoog et al, 2005) y consiste en medir los cambios de masa de la muestra sujeta a un proceso de calentamiento; en este tipo
de anlisis es importante realizar el calentamiento en una atmsfera y velocidad controladas.
En la electrodeposicin (o electrogravimetra), se determinan los iones metlicos presentes en una disolucin depositndolos cuantitativamente en forma de un slido sobre la superficie de un electrodo (Harris, 2001; Flascka et al 1986; Rubinson &
Rubinson, 2000).
En esta prctica realizaremos una precipitacin cuantitativa al formar un compuesto de baja solubilidad (Kps de CaC2O4 = 1.3
x 10-8). El anin oxalato (C2O42-) es una base dbil por lo que el oxalato de calcio es soluble en cido y la precipitacin del Ca2+
deber hacerse en medio alcalino al elevar el pH lentamente por descomposicin trmica de la urea (Harris, 2001).
A fin de que los cristales sean grandes y se puedan filtrar rpidamente se requiere mantener la velocidad de sobresaturacin
baja, condicin que se obtiene al agregar el agente precipitante en forma de disolucin diluida y hacerlo lentamente. Tambin
es importante evitar excesos locales del agente precipitante ya que stos conducen al fenmeno de nucleacin, en lugar del
crecimiento cristalino (Vega et al, 2003, Skoog et al, 2005).
La separacin de un precipitado de su lquido madre requiere de una serie de tcnicas entre las que se incluyen la decantacin y la filtracin. El precipitado debe separarse lo ms completamente posible de la disolucin madre y con un mnimo
de contaminacin, o cuando menos, que los contaminantes se puedan eliminar durante el lavado del precipitado o durante su
calcinacin. El precipitado separado se calcina a una temperatura predeterminada con el objetivo de que se transforme en un
compuesto de estequiometra conocida, de tal forma que el peso de este compuesto pueda relacionarse al de la sustancia que se
determina, por medio de un factor qumico que en este caso se llama factor gravimtrico (Flascka et al, 1986, Skoog et al, 2005).
El factor gravimtrico se determina con la ecuacin:
FG = (masa molar de la sustancia buscada/masa molar de la sustancia pesada) (FE)

En donde:
FG = factor gravimtrico
FE = factor estequiomtrico
El factor estequiomtrico se obtiene calculando el cociente:
FE = x moles de la sustancia buscada/ y moles de la sustancia pesada
En donde x, y son nmeros enteros que se obtienen al balancear la reaccin que tiene lugar durante la formacin del precipitado.
31
Objetivo
El alumno realizar una precipitacin cuantitativa del analito (Ca2+) y mediante la determinacin de la masa del compuesto
formado (oxalato de calcio) obtendr el contenido del analito en la muestra problema.
Balanza analtica
Mufla
Horno de Microondas (opcional)
1 matraz volumtrico de 100 mL
1 pipeta volumtrica de 20 mL
1 pipeta graduada de 5 mL
Pinzas de diseccin
1 propipeta
1 pipeta Pasteur con bulbo
1 probeta de 100 mL
1 crisol de porcelana
1 pinzas para crisol
1 desecador
1 piseta con agua destilada
1 esptula
1 varilla de vidrio
1 vidrio de reloj
1 embudo
1 tripie
1 mechero
1 rejilla de asbesto
1 tringulo de porcelana
Papel filtro Whatman # 41
Hielo
Oxalato de potasio
Acido clorhdrico concentrado
Carbonato de calcio
Rojo de metilo
Urea
32
Prctica 2
Procedimiento
Preparacin de Reactivos y Muestra Problema para un grupo de 10 equipos
a) Disolucin de oxalato de potasio. Pese 10 gramos de oxalato de potasio y disuelva completamente con agua destilada en
un vaso de precipitado y trasvase a un matraz volumtrico de 200 mL y afore.
b) cido clorhdrico 0.10 M. En la campana de extraccin, coloque en un matraz volumtrico de 250 mL, 200 mL de agua
destilada y aada lentamente y resbalando por la pared, 2.1 mL de HCl concentrado. Mezcle y afore con agua destilada hasta
la marca.
c) Rojo de metilo al 0.02%. Pese 0.02 gramos de rojo de metilo y disulvalo en un vaso de precipitado con 60 mL de etanol,
trasvase a un matraz volumtrico de 100 mL y afore con agua destilada. Guardar en frasco mbar.
d) Muestra problema. En la campana de extraccin, prepare 200 mL de una disolucin que contenga entre 3 a 3.6 gramos de
CaCO3 y 3.5 mL de HCl concentrado.
(Disuelva el carbonato en el cido y luego transfiralo al matraz volumtrico con 100 mL de agua. Enjuague varias veces el
vaso de precipitado para no perder muestra y afore hasta la marca).
Puesta del Crisol a Peso Constante (hacerlo un da antes)

Lave y seque un crisol de porcelana de porosidad media a 105 C durante 1-2 h. Colquelo despus en el desecador durante 30
minutos y pselo. Repita este procedimiento hasta que las pesadas sucesivas concuerden dentro de 0.3 mg. Recuerde usar las
pinzas para manejar los crisoles o bien una toalla de papel. Si en el laboratorio se dispone de un horno de microondas, puede
usarlo para secar los crisoles. Un horno domstico de 900 W seca el crisol a peso constante en periodos de calefaccin de 4
minutos y 2 minutos (dejando 15 minutos de enfriamiento despus de cada ciclo). Se requiere comprobar cmo funciona el
horno que se utilice a fin de fijar los tiempos apropiados de calefaccin (Harris, 2001).
Formacin del Precipitado

Mida, empleando una pipeta y propipeta, 20.0 ml de la muestra problema en un vaso de precipitados de 250 mL y adicione 25.0
mL de HCl 0.10 M. Aada 5 gotas de rojo de metilo. Adicione lentamente y con agitacin constante cerca de 20 mL del agente
precipitante (oxalato de potasio). Saque la varilla y lvela cuidando que el agua caiga dentro del vaso de precipitados. Aada
aproximadamente 12 gramos de urea slida y cubra el vaso con el vidrio de reloj. Caliente suavemente (sin hervir) durante 30
minutos hasta que el indicador vire de rojo a amarillo.
Filtracin y Lavado del Precipitado

Doble y coloque el papel filtro dentro del embudo. Emplee la varilla como gua a fin que el material caiga dentro del papel filtro.
La filtracin de la disolucin debe hacerse en caliente. Aada al vaso, donde se realiz la precipitacin, cerca de 3 mL de agua
enfriada con hielo y emplee la varilla como gua para pasar todo el slido al papel filtro. Repita este procedimiento hasta que se
haya trasferido todo el precipitado. Finalmente, use dos porciones de 10 mL de agua fra para lavar el vaso cada vez y vierta los
lavados sobre el precipitado.
Secado del Precipitado

Doble y saque el papel filtro teniendo cuidado de que el precipitado quede protegido y no se pierda, y colquelo en el crisol que
ya est a peso constante y djelo en la estufa a 105C de 1 a 2 horas. Posteriormente, coloque el crisol en el desecador durante
30 minutos y pselo. Tambin se puede secar el precipitado en un horno de microondas una vez durante 4 minutos, seguido de
varios periodos de 2 minutos, enfriando durante 15 minutos antes de pesar. El agua de cristalizacin no se pierde.
33
Datos Obtenidos
Peso del crisol vaco
Peso del crisol con el oxalato
Peso del papel filtro
Clculos
Peso de CaC2O4.H2O
Exprese el contenido de calcio en la disolucin problema en trminos de:
a) % peso/volumen
b) Molaridad
34
Prctica 2
Cuestionario
1. Cules son los tipos de precipitados y que caractersticas presentan?
2. Defina los siguientes conceptos en sus propias palabras: disolucin saturada, disolucin sobresaturada, nucleacin, crecimiento cristalino, digestin del precipitado, precipitacin, y Kps.
3. Cuntos tipos de contaminacin existen y como pueden eliminarse?
4. Calcule la Kps para el AgCl sabiendo que la concentracin en el equilibrio para los iones es de 1.34x10-5 M
5. Qu masa de yodato de plata se pude obtener a partir de 0.50 g de yodato de sodio? Suponga que la solubilidad del AgIO3
en agua es despreciable.
6. Una alcuota de 50.0 ml de una disolucin que contiene 0.500g de cloruro de bario se mezcla con 50.0 mL de una disolucin que contiene 0.600 g de yodato de sodio. Suponga que la solubilidad del yodato de bario en agua es despreciable,
calcule: a) La masa que precipita como yodato de bario y b) la masa del compuesto que queda sin reaccionar.
35
Bibliografa
Judith F. Rubinson & Kenneth, A. Rubinson., 2000. Qumica Analtica Contempornea. 1 edicin. Prentice Hall, Mxico.
Flascka, H.A., Barnard, Jr. A. J., Sturrock, P.E., 1986. Qumica Analtica Cuantitativa. Vol II. 6 edicin. C.E.C.S.A., Mxico.
Harris Daniel C., 2001 Anlisis Qumico Cuantitativo. 2 edicin. Editorial Revert, S.A. Mxico.
Skoog Douglas A., West Donald M., Holler F. James, Crouch Stanley R., 2005. Fundamentos de Qumica Analtica. 8a edicin.
International Thomson Editores, Mxico.
Vega Avila Elisa, Verde Calvo Ramn, Prez Cesar Mara del Carmen, 2003 La teora y la prctica en el laboratorio de Qumica
Analtica I. 1 edicin. Universidad Autnoma Metropolitana, Mxico.
36
Prctica 2
Prctica 3
Valoracin de disoluciones cido-base
Introduccin
Las valoraciones son ampliamente utilizadas en qumica analtica para la determinacin de la concentracin de cidos, bases, oxidantes, reductores, iones metlicos, protenas y muchas otras especies. Las valoraciones o titulaciones se basan en una reaccin
entre un analito y un reactivo patrn, conocido como valorante. La reaccin tiene una estequiometra conocida y reproducible.
En una valoracin, se determina el volumen (o masa) del valorante necesario para reaccionar de manera completa con el analito
y se emplea dicho volumen para obtener la cantidad o concentracin del analito (Harris et al., 2001). La valoracin se realiza
agregando lentamente la disolucin patrn desde una bureta a una disolucin del analito hasta que la reaccin entre los dos se
completa.
El punto de equivalencia de una valoracin es un punto terico que se alcanza cuando la cantidad de valorante aadido es
qumicamente equivalente a la cantidad de analito en la muestra. Resulta imposible determinar experimentalmente el punto
de equivalencia de una valoracin, en su lugar se determina un cambio fsico (visual) relacionado con la condicin de equivalencia y a este cambio se le llama punto final de la valoracin. Es muy comn agregar indicadores a la disolucin del analito
para producir un cambio fsico observable (punto final) cerca del punto de equivalencia. Entre los cambios tpicos de los indicadores se tiene la aparicin o desaparicin de un color, un cambio de color, o bien la aparicin o desaparicin de turbidez
(Skoog et al., 2008).
Tipos de valoraciones
Existen distintos tipos de valoraciones, entre stas se encuentran las de neutralizacin, en las que el analito y el valorante experimentan reacciones cido base. Se tienen tambin las valoraciones que implican reacciones de formacin de complejos, estos
mtodos son de particular importancia para la determinacin de diversos cationes. Igualmente, existen valoraciones en las que la
reaccin qumica implica la transferencia de electrones, estos mtodos se denominan valoraciones rdox. En la presente prctica
se abordan nicamente las valoraciones cido base.
Valoraciones con un patrn primario

Un patrn primario es un reactivo de elevada pureza que sirve como material de referencia en valoraciones volumtricas. Dicho
reactivo se emplea para la obtencin de disoluciones patrn de concentracin perfectamente conocida. La exactitud del mtodo
de valoracin depende sobre todo de las propiedades de este compuesto. Dentro de los requisitos ms importantes de un patrn primario se encuentran los siguientes: a) Alto grado de pureza (99.9 %); b) Estabilidad a temperatura ambiente, sin cambiar
su composicin con el secado o con el aumento de temperatura; c) Ausencia de agua de hidratacin, para que la composicin
del slido no cambie con las variaciones de humedad; d) No absorber CO2 de la atmsfera; e) Masa molar razonablemente
grande para minimizar el error relativo al pesar el patrn.
Objetivo
El alumno emplear patrones primarios para la valoracin de disoluciones con propiedades cido base y aprender el uso
adecuado de los correspondientes indicadores.
1 balanza analtica
1 bureta de 50 mL
1 soporte universal
1 pinza para bureta
3 matraces Erlenmeyer de 250 mL
37
3 pipetas volumtricas de 10 mL
1 propipeta
1 probeta de 100 mL
1 parrilla con agitacin magntica
2 frascos con gotero
1 varilla de agitacin
1 barra magntica
2 cpsulas de porcelana
1 desecador
1 pinzas para crisol
1 espatula
1 vidrio de reloj
Anaranjado de metilo al 0.10 % p/v
Fenolftalena al 0.10 % p/v
HCl 0.1M
NaOH 0.1 M
2.5 g de carbonato de sodio (Na2CO3)
5 g de ftalato cido de potasio (FAP, KHC8H4O4).
Procedimiento
Preparacin de Patrones Primarios
Patrn primario de carbonato de sodio (NaCO3)
El carbonato de sodio (Na2CO3) grado analtico se seca previamente durante media hora dentro de una estufa a una temperatura
entre 240 250 C y posteriormente se transfiere al desecador. Pese con precisin 0.5300 g de Na2CO3 y anote en su bitcora la
masa, use 4 cifras significativas. Coloque en un vaso de precipitado 50 mL de agua hervida y disuelva el Na2CO3, una vez disuelto
trasvasar a un matraz volumtrico de 100 mL, y afore con agua destilada previamente hervida.
Patrn primario de ftalato cido de potasio

El ftalato cido de potasio (FAP, KHC8H4O4) grado analtico se seca previamente en la estufa a 125 C durante media hora y
posteriormente se introduce al desecador. Pese con precisin 2.0420 g de este reactivo y anote en la bitcora la masa, use 4 cifras
significativas. Coloque en un vaso de precipitado 50 mL de agua hervida y disuelva el FAP, una vez disuelto trasvasar a un matraz
volumtrico de 100 mL, y afore con agua destilada previamente hervida.
Valoracin de Disoluciones
Valoracin de la disolucin de cido clorhdrico
Utilizando anaranjado de metilo como indicador
Coloque en un vaso de precipitado 50 mL de agua hervida y disuelva el Na2CO3, una vez disuelto trasvasar a un matraza volumtrico de 100 mL, y afore con agua destilada previamente hervida.
38
Prctica 3
Anaranjado de metilo
Na2CO3(ac) + 2HCl(ac)
H2CO3(ac)+ 2 NaCl3 (ac)
Utilizando fenolftalena como indicador

Coloque en un matraz Erlenmeyer de 250 mL una alcuota de 10.0 mL de la disolucin de patrn primario de Na2CO3, 20 mL de
agua destilada y 2 gotas de disolucin de fenolftalena (pKind = 9.3). Titule con la disolucin de HCl, agregue sta lentamente
sobre la disolucin de carbonato y agtela vigorosamente despus de cada adicin. La disolucin carbonato fenolftalena es
de color rosa y cuando llega al punto final de la titulacin vira a incolora. Cuando la disolucin permanece incolora al menos
un minuto, se toma la lectura del consumo de HCl. Repita por triplicado esta titulacin. Para el clculo de la molaridad del HCl,
considere la estequiometra de la reaccin.
Fenolftalena
HCO3- (ac)+ NaCl3 (ac)
Na2CO3(ac) + HCl(ac)
Valoracin de la disolucin de hidrxido de sodio

Coloque en un matraz Erlenmeyer de 250 mL una alcuota de 10.0 mL de la disolucin de patrn primario de FAP, 20 mL de
agua destilada y 2 gotas de disolucin de fenolftalena (pKind = 9.3). Titule con la disolucin de NaOH que se desea valorar, siga el
procedimiento de la valoracin anterior, hasta que aparezca en la disolucin un color rosa persistente con duracin de 1 minuto.
La titulacin se hace por triplicado. Considere la reaccin:
Fenolftalena
HC8 H4O-4(ac) + OH-(ac)
C8H4O2-4(ac)+ H2O
Valoracin de la disolucin de cido clorhdrico
Anote los siguientes datos obtenidos durante la prctica:
Cantidad pesada de Na2CO3
Por ciento de pureza del Na2CO3
Volumen en el que se disolvi el Na2CO3(s)
Volumen de la alcuota de Na2CO3 que se us para titular el HCl
En el apartado, Reporte de la prctica:
Consumo de HCl en mL cuando se utiliz anaranjado de metilo como indicador.
Cosumo de HCl en mL cuando se utiliz fenolftalena como indicador.
39
Con base en esta informacin calcule:

1. La masa del Na2CO3 en la alcuota
2. La molaridad del HCl cuando emplea como indicador anaranjado de metilo
3. La molaridad del HCl cuando emplea como indicador fenolftalena
Valoracin de la disolucin de hidrxido de sodio

Anote los siguientes datos obtenidos durante la prctica:
Cantidad pesada de KHC8H4O4 (FAP)
Por ciento de pureza del KHC8H4O4(s)
Volumen en el que se disolvi el KHC8H4O4(s)
Volumen de la alcuota de KHC8H4O4 que us para valorar la disolucin de NaOH(ac)
Consumo de NaOH en mL
Con base en esta informacin calcule:

1. La masa del KHC8H4O4 en la alcuota
2. La molaridad del NaOH
40
Prctica 3
Cuestionario
1. Qu significa el trmino error de valoracin?
2. Cul es la diferencia entre el punto de equivalencia y el punto final de una valoracin?
3. Una muestra de 0.4512 g de patrn primario Na2CO3 requiri 36.44 mL de una disolucin de H2SO4 para alcanzar el punto
final de la reaccin, el indicador empleado fue fenolfatelena. Escriba la reaccin que se lleva a cabo y calcule la molaridad
del H2SO4.
4. En la titulacin de carbonato de sodio con cido clorhdrico que diferencia tiene utilizar como indicadores anaranjado de
metilo y fenolftalena.
5. Diga por qu se debe emplear fenolftalena y no anaranjado de metilo, en la titulacin del ftalato cido de potasio con
hidrxido de sodio.
41
Bibliografa
Harris D. C., 2001 Anlisis Qumico Cuantitativo. 2 edicin. Editorial Revert, S.A. Mxico.
Skoog Douglas A., West Donald M., Holler F. James, Crouch Stanley R. 2008. Fundamentos de Qumica Analtica. 8 edicin.
Thomson Learning, Mxico.
Vega vila Elisa, Verde Calvo Jos Ramn, Prez Csar Ma. del Carmen. 2003. La teora y la prctica en el laboratorio de
Qumica Analtica I. 1 edicin. Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa, Mxico.
42
Prctica 3
Prctica 4
Disoluciones amortiguadoras
Introduccin
Las disoluciones amortiguadoras son frecuentes en la naturaleza, como es el caso del sistema H2CO3/NaHCO3 que predomina
en el plasma y fluido intersticial (Vega & Konigsberg, 2001). Asimismo, los amortiguadores tienen diversas aplicaciones, como en
los medios empleados en los cultivos bacterianos que requieren de cierto valor de pH para que las bacterias crezcan (Umland
& Bellama, 1999).

Una disolucin amortiguadora, llamada tambin disolucin reguladora, buffer o tampn (Harris, 2001), es aquella que
tiene la capacidad de regular los cambios bruscos de pH debidos a la adicin de cidos o bases fuertes y de resistir los cambios
de pH por efecto de diluciones (Skoog et al, 2001). Una disolucin amortiguadora est formada por un cido dbil y su base
conjugada o bien por un base dbil y su cido conjugado; de manera tal que en la misma disolucin coexisten un componente
que reacciona con los cidos (la base) y otro que reacciona con las bases (el cido) (Cuadro 1).
Cuadro 1. Algunos ejemplos de disoluciones amortiguadoras.
Amortiguador
cido
Base
pKa
[cido] M
[Base] M
pH
[Amorti] M
Acetatos
CH3COOH
CH3COONa
4.74
1.0
1.0
4.74
2.0
Fosfatos
NaH2PO4
Na2HPO4
7.2
0.5
1.0
7.50
1.5
Amoniacal
NH4Cl
NH4OH
9.24
0.15
0.45
9.71
0.60
Carbonatos
NaHCO3
Na2CO3
10.33
.07
0.08
10.38
0.15
Amorti= amortiguador; M= molar
Como podemos observar en el cuadro anterior, la concentracin molar del amortiguador se obtiene al sumar las concentraciones que tienen en la disolucin el cido y la base. Para obtener el valor de pH de una disolucin amortiguadora se emplea la
ecuacin de Henderson-Hasselbach (Rubinson & Rubinson, 2000):
pH = pKa + log ([base] / [cido])
En donde:
pKa = -logKa
El valor de pKa es constante y como se observa en esta ecuacin, se requiere un cambio en la proporcin base/cido de 10
(log 10 = 1) para cambiar el pH en una unidad. Mientras ms grandes sean las concentraciones del par cido-base mayor ser la
capacidad amortiguadora (Harris, 2001). Se define como capacidad amortiguadora el nmero de moles de H3O+ (o de OH) que
se requieren para cambiar en una unidad el pH de un litro de disolucin reguladora (Vega et al, 2003).
Objetivos
Que el alumno conozca los valores de pH que se obtienen al variar la relacin del cido y su base conjugada, as como al diluir
o adicionar una base fuerte a un amortiguador en comparacin con una disolucin de una sal.
1 potencimetro
43
2 pipetas volumtricas de 10 mL
1 bureta
1soporte universal
1 pinzas para bureta
1 propipeta
1 parrilla de agitacin
1 barra magntica
Disoluciones amortiguadoras de pH 7 y 10
100 ml de Na2CO3 1.0 M
100 mL de NaHCO3 1.0 M
100 mL NaOH 0.10 M
Procedimiento
Efecto de la relacin cido/base conjugada sobre el pH
1. Siguiendo las instrucciones del profesor, calibre el potencimetro con los amortiguadores de pH 7 y/o 10, segn el pH a
trabajar.
2. Marque los matraces Erlenmeyer de 125 mL con nmeros progresivos del 1 al 4.
3. Adicione 20 mL de la disolucin de NaHCO3 1.0 M ms 30 mL de Na2CO3 1.0 M en el matraz No.1.
4. Adicione 30 mL de la disolucin de NaHCO3 1.0 M ms 20 mL de Na2CO3 1.0 M en el matraz No.2.
5. Coloque en un vaso de precipitados 25.0 mL de la disolucin contenida en el matraz No.1 y mida el pH.
6. Coloque en un vaso de precipitados 25.0 mL de la disolucin contenida en el matraz No.2 y mida el pH.
Efecto de la dilucin sobre el pH

Nota: Emplear agua con un pH=7
1. Con Na2CO3
En un vaso de precipitados de 100 mL, coloque 25.0 mL de Na2CO3 1.0 M y mida el pH, transfiera al matraz No.3 y afore usando
agua destilada. Nuevamente mida el pH de esta disolucin.
2. Con amortiguador
En el matraz No. 4, coloque 25.0 mL del amortiguador contenido en el matraz 1 y agregue 25.0 mL de agua destilada. Mezcle y
tome una alcuota de 25.0 mL y mida el pH de este amortiguador.
Determinacin de la capacidad amortiguadora

1. En un vaso de precipitados de 100 mL, coloque una alcuota de la disolucin amortiguadora del matraz 2, coloque la barra
magntica y ponga sobre la parrilla de agitacin el vaso conteniendo el amortiguador con la barra magntica y el electrodo
del potencimetro (Fig. 1). En la bureta, coloque el NaOH 0.1 M y adicinelo gradualmente y con agitacin continua al vaso
hasta que el pH de la disolucin amortiguadora cambie en una unidad.
2. Coloque en un vaso de precipitados de 100 mL una alcuota de 20 mL de Na2CO3 1.0 M. Mida el valor de pH y adicione
NaOH 0.10 M hasta que el pH de la sal cambie en una unidad.
44
Prctica 4
Figura 1. Acomodo de la bureta y del electrodo del potencimetro en el vaso de precipitados conteniendo la disolucin
amortiguadora y la barra magntica.
Anote los datos que se indican.
Efecto de la relacin cido/base conjugada sobre el pH

1. pH del amortiguador contenido en el matraz No.1.
2. pH del amortiguador contenido en el matraz No.2.
Efecto de la dilucin sobre el pH

1. pH de la disolucin de Na2CO3 1.0 M
2. pH de la disolucin diluida de Na2CO3 (matraz No.3)
3. pH de la disolucin diluida del amortiguador (matraz No.4)
Determinacin de la capacidad amortiguadora

1. El volumen de NaOH para cambiar en una unidad el pH de:
La disolucin amortiguadora
La disolucin de Na2CO3
Con base en los datos experimentales, calcule:
1. Cul de las disoluciones amortiguadoras tiene un pH menor que el pKa?
2. En cul de las dos disoluciones cambi el valor de pH por efecto de la dilucin?
3. Cuntos moles de NaOH se requieren para cambiar en una unidad el pH de un litro de la disolucin amortiguadora?
4.
Cuntos moles de NaOH se requieren para cambiar en una unidad el pH de un litro de la disolucin de Na2CO3 ?
5. Determine la capacidad amortiguadora para ambas disoluciones con la siguiente frmula: B=dB/dpH, donde dB=moles de
base agregada; dpH=cambio de valores de pH
45
Cuestionario
1. Cul es la concentracin, en trminos de molaridad, del amortiguador formado con 20.0 mL de la disolucin de NaHCO3
1.0 M y 30.0 mL de Na2CO3 1.0 M? Cul es la concentracin de este amortiguador, cuando se le adicionan 50.0 mL de
agua destilada?
2. Cul es el pH terico que obtendra al mezclar 15.0 mL de Na2CO3 0.15 M con 75.0 mL de NaHCO3 0.30 M?
3. Qu efecto observara en el pH si la disolucin amortiguadora de NaHCO3 - Na2CO3 0.1 M se hubiera diluido?
4. Calcule el pH que se obtiene al mezclar 50.0 mL de NaHCO3 0.10 M con 25.0 mL de NaOH 0.10 M?
5. Calcule el pH que obtiene al mezclar 50.0 mL de NaHCO3 0.10 M con 25.0 mL de HCl 0.10 M?
46
Prctica 4
Bibliografa
Harris Daniel C. 2001. Anlisis qumico cuantitativo. 2 edicin. Editorial Revert, S.A. Mxico.
Rubinson J.F., Rubinson K.A. 2000. Qumica Analtica Contempornea. 1 ed. Prentice Hall, Mxico.
Umland J.B., Bellama J.M. Qumica General. 2000. 3a edicin. International Thomson Editores, S.A. de C.V.
Vega Avila Elisa, Konigsberg Fainstein Mina. 2001. La importancia biolgica de los sistemas amortiguadores. Contactos 42:
23-27.
Vega Avila Elisa, Verde Calvo Ramn y Prez Csar Mara del Carmen. 2003. La teora y la prctica en el laboratorio de qumica
analtica I, 1 ed. Universidad Autnoma Metropolitana. Mxico.
47
Prctica 5
Aplicaciones de las titulaciones de neutralizacin cido - base
Introduccin
La valoracin o titulacin es un mtodo comn de anlisis qumico cuantitativo en el laboratorio, que se utiliza para determinar
la concentracin desconocida de un analito en una disolucin. Se requiere de un reactivo llamado valorante, disolucin estndar
o patrn de concentracin conocida, la cual se hace reaccionar con el analito de la disolucin cuya concentracin se desconoce
(Harris, 2001). La reaccin que ocurre entre el valorante y el analito es una reaccin de neutralizacin cuando los compuestos
qumicos involucrados son un cido y una base.
Las titulaciones de neutralizacin se utilizan para determinar gran variedad de especies inorgnicas, orgnicas y biolgicas
que posean propiedades cidas o bsicas. Igualmente importantes son las numerosas aplicaciones en las que un analito se
transforma, con un tratamiento adecuado, en un cido o base, y posteriormente se titula con un patrn cido o base fuerte
(Skoog y col. 2008). El objetivo de toda valoracin es el adicionar la sustancia patrn en una cantidad tal que sea qumicamente
equivalente con la sustancia que reacciona, condicin que se consigue en el punto de equivalencia. El punto de equivalencia
es un concepto terico, lo que en realidad se observa es el punto final de la titulacin el cual corresponde al volumen necesario
de valorante para completar la neutralizacin. El punto final frecuentemente es detectado mediante el uso de un indicador de
pH. En una titulacin o valoracin cido-base simple, puede usarse un indicador como la fenolftalena, que es incolora en medio
cido y de color rosa cuando el pH es igual o mayor a 8.2. Otro ejemplo es el anaranjado de metilo, de color rojo en medio cido
y amarillo en soluciones bsicas.
Existen dos tipos principales de titulacin, la titulacin directa y la titulacin por retroceso. En la titulacin directa el valorante
cido o bsico reacciona directamente con el analito (bsico o cido) mientras que en la titulacin por retroceso en vez de valorar
el analito original se aade un exceso conocido de reactivo estndar a la disolucin, y luego se valora el exceso. Este mtodo es
til si el punto final de la valoracin por retroceso es ms fcil de identificar que el punto final de la valoracin normal (Harris,
2001). Se usa tambin si la reaccin entre el analito y la sustancia titulante es muy lenta.
Objetivo
El alumno aplicar los conocimientos tericos adquiridos acerca de la teora de neutralizacin cido-base a la determinacin de
acidez en productos comerciales como vinagre y cido acetilsaliclico en tabletas de aspirina.
Balanza analtica
1 esptula
1 bureta de 50 mL
1 pinza para bureta
1 pipeta Pasteur
1 embudo de vidrio
1 probeta de 100 mL
1 propipeta
1 varilla de agitacin
1 soporte universal
1 parrilla con agitacin magntica
49
1 barra magntica
1 pinzas de diseccin
1 mortero con pistilo
1 picnmetro de 20 mL
Gasa
Disolucin valorada de NaOH 0.1 M
Disolucin valorada de HCl 0.1M
Disolucin de fenolftalena al 0.1% p/v
Vinagre comercial (5% acido actico)
Tabletas de aspirina
Procedimiento
Determinacin de acidez de vinagre comercial
1. Mida 50 mL de vinagre comercial, pselos, colquelos en un matraz volumtrico de 500 mL y dilyalos con agua destilada
hasta la marca del aforo. Tape el matraz y agite cuidadosamente para homogeneizar la disolucin.
2. Mida una alcuota de 25 mL de la disolucin anterior con una pipeta volumtrica y depostela en un matraz Erlenmeyer de
250 mL, adicione 3 4 gotas de indicador de fenolftalena.
3. Llene la bureta con la disolucin valorada de NaOH 0.1 M, cuidando que no se formen burbujas de aire.
4. Titule la disolucin problema de vinagre, adicionando lentamente el hidrxido de sodio hasta que la disolucin vire de
incoloro a rosa. Anote el volumen de NaOH gastado para alcanzar la neutralizacin. Repetir la titulacin por triplicado.
5. A partir del volumen anterior y del valor de la densidad del vinagre y el factor de dilucin, calcule mediante la Ecuacin 1
el porcentaje de cido actico en el vinagre comercial, teniendo en cuenta que la reaccin que tiene lugar es la siguiente:
%AA=(V)(N)(meq)100/alcuota
(Ec.1)
Donde :
v= volumen gastado del NaOH
N= Normalidad del NaOH
meq= miliequivalentes del c. Actico
alcuota= volumen de la muestra en ml
Determinacin de la densidad del vinagre comercial

Proceda a determinar la densidad aparente de la disolucin de vinagre comercial como se indica en los siguientes pasos:
1. Pese el picnmetro vacio y seco (P1).
2. Llene el picnmetro con la disolucin de vinagre comercial (5%) hasta el aforo (20mL).
3. Pese nuevamente el picnmetro lleno con la disolucin de vinagre comercial. Anote el peso (P2).
4. Pese el picnmetro lleno con agua. Anote el peso (Pa)
5. Determine la densidad de la disolucin de vinagre empleando la siguiente Ecuacin 2.
vinagre
vinagre (Ec.2)
50
Prctica 5
Donde:
= densidad del picnmetro vaco
= densidad del vinagre
= densidad del agua
Cuantificacin de cido acetilsaliclico en tabletas de aspirina

El cido acetilsaliclico (AAS) es un compuesto poco soluble en agua, razn por la cual se disuelve en una disolucin de NaOH
de concentracin y volumen conocido. El exceso de NaOH que no reacciona con el cido acetilsaliclico se retrotitula con la
disolucin de HCl 0.1 M.
1. Pese en una balanza analtica, de manera individual 4 tabletas de aspirina y anote la masa de cada pastilla. Determine el
peso promedio de las tabletas
2. Pulverice las pastillas en el mortero. Pese 0.3000g del polvo obtenido y colquelo en un matraz Erlenmeyer de 250 mL.
3. Adicione 75.0 mL de disolucin valorada de NaOH 0.1 M (necesaria+exceso).
4. Caliente la disolucin en la parrilla y mantngala en ebullicin durante 10 minutos (tome las precauciones necesarias para
evitar proyecciones de la disolucin en ebullicin).
5. Transcurrido el tiempo, enfre la disolucin (es posible que la solucin contenga slidos insolubles).
6. Agregue 50.0 mL de agua destilada y 3 gotas de fenolftalena.
7. Retrotitule la muestra con disolucin valorada de HCl 0.1 M hasta el vire de color rosa a incoloro. Repetir por triplicado.
8. A partir del volumen anterior, utilice la Ecuacin 3 para calcular la concentracin de AAS expresada en mg AAS/tableta,
teniendo en cuenta las siguientes reacciones:
(Ec.3)
Acidez del vinagre comercial
1. Calcule la densidad aparente del vinagre comercial.
2. Calcule la concentracin en porcentaje peso/peso del cido actico en la muestra de vinagre.
3. Compare sus resultados con los reportados en la literatura.
Contenido de cido acetilsaliclico en las tabletas de aspirina

1. Calcule la concentracin de cido acetilsaliclico en mg AAS/tableta.
2. Compare sus resultados con la informacin declarada en la etiqueta del frasco del medicamento.
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Cuestionario
1. Defina los siguientes trminos: neutralizacin, punto final, punto de equivalencia, titulacin directa y retrotitulacin.
2. 1.00 g de una disolucin que contiene HNO3 (PF = 63.0) y H2SO4 (PF = 98.0) se neutraliza con una disolucin de NaOH 0.10
M utilizando fenolftalena como indicador, gastndose 40.0 mL del valorante. Otra porcin de disolucin de igual peso se
trata adecuadamente para reducir el HNO3 a NH3, se destila este ltimo y se recoge en 50 mL de HCl 0.10 M, cuyo exceso
consume 45.0 mL de NaOH 0.1 M. Cul es el porcentaje de cada cido en la muestra?
3. El contenido de formaldehdo de un preparado de plaguicida se determina pesando 0.3124 g de la muestra lquida en un

matraz que contiene 50 mL de NaOH 0.0996 M y perxido de hidrgeno al 3 % v/v. Al calentar, todo el formaldehdo se
transforma en formiato sdico. Despus de enfriar, el exceso de NaOH se valora con 23.3 mL de HCI 0.0525 M. Calcule el
porcentaje en peso de formaldehdo (HCHO PF = 30.0) en la muestra.
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Prctica 5
Bibliografa
Harris Daniel C. 2001. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2 edicin. Editorial Revert, S.A. Mxico.
Skoog Douglas A., West Donald M., Holler James F., Crouch S.R. 2008. Fundamentos de Qumica Analtica. 8 edicin. Thomson Learning, Mxico.
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Prctica 6
Determinacin de hierro (II) en vitaminas comerciales por xido-reduccin
Introduccin
Dentro del grupo de los minerales, el hierro es un elemento imprescindible para el organismo humano. Sin el hierro necesario,
nuestro cuerpo se vuelve lento debido a que una de sus funciones ms importantes es oxidar la glucosa para convertirla en
energa; el hierro interviene, por lo tanto, en el buen funcionamiento de la respiracin. Adems se combina con protenas para
formar la hemoglobina y as poder transportar el oxgeno a los tejidos; tambin sirve para activar el grupo de vitaminas B, y para
estimular la inmunidad y la resistencia fsica. El hgado, el bazo y los huesos acumulan la mayor parte de este mineral.
La deficiencia del hierro est muy difundida tanto en pases pobres como ricos debido a que slo una pequea parte del
hierro ingerido pasa a la corriente sangunea. La carencia se manifiesta en la anemia cuyas caractersticas son la fatiga, palidez
de la piel y mucosas, palpitaciones con taquicardia, piel seca y cabellos quebradizos, disminucin de las defensas y trastornos
gastrointestinales. Tambin los estados de desnimo crnico estn relacionados muy a menudo con niveles bajos de hierro.
Una de las formas de cuantificar el hierro, es por medios volumtricos, haciendo uso de agentes oxidantes fuertes como
lo son el dicromato de potasio y el permanganato de potasio. En soluciones de cido sulfrico el producto de reduccin del
permanganato es el in manganeso (II).

MnO4- + 8 H+ + 5e-
Mn2+ + 4H2O
E= 1.507v
Las disoluciones acuosas de permanganato no son totalmente estables debido a que el in permanganato tiene tendencia
a reaccionar con el agua:

4MnO4- + 16H+ + 12e-
6H2O
4MnO2 + 8H2O
3O2 + 12H+ + 12e-
E= 1.7V
E = -1.23 V
4MnO4- + 4H+
4MnO2 + 2H2O + 3O2
Con base en los potenciales estndar de reduccin (E) de esta reaccin se puede ver que el equilibrio debe estar desplazado
a la derecha, incluso en soluciones neutras; sin embargo, la pequea velocidad de reaccin de este sistema es la responsable
de que las soluciones de permanganato tengan estabilidad suficiente para ser usadas con fines analticos (Skoog et al. 2008).
Las disoluciones de hierro (II) pueden ser fcilmente cuantificadas por mtodos de xido reduccin, por ejemplo, es factible
su titulacin con una disolucin estandarizada de permanganato de potasio en medio cido.
55
Volumetra
2
4
1
Figura 1. Materiales y reactivos bsicos utilizados en las titulaciones volumtricas. 1. Soporte universal; 2. Pinzas para bureta; 3. Bureta con el
reactivo titulante o valorante; 4. Matraz Erlenmeyer conteniendo al analito cuya concentracin se desea conocer.
La volumetra se utiliza para anlisis cuantitativos. La base del mtodo es determinar el volumen del reactivo titulante (3) que reacciona estequiomtricamente con una sustancia dada que contiene al analito (4). El tipo de reaccin entre el titulante y el analito
determina el nombre de la valoracin, bien sea cido-base, de complejos, de precipitacin, o en este caso de xido reduccin.
Un volumen conocido de uno de los reactivos (analito, 4) se deposita en un matraz Erlenmeyer y el otro en una bureta
(valorante, 3) y se va adicionando el valorante al analito en el Erlenmeyer. Cuando se llega al punto en que se termina la reaccin, el valorante y el valorado (analito) han reaccionado estequiomtricamente, momento en que se alcanza el punto de
equivalencia. Conociendo el volumen del valorante (3) y la estequiometria de la reaccin, se calcula la cantidad de sustancia que
se ha valorado (analito, 4). Para poder determinar el punto de equivalencia se utiliza alguna propiedad del sistema que cambie
drsticamente en las proximidades del punto de equivalencia (Harris, 2001) y como normalmente no suceden cambios visuales
en la reaccin, se utiliza un indicador, sustancia que se aade en una concentracin muy pequea y experimenta cambios de
color alrededor del punto de equivalencia. El punto de la valoracin en que se produce el cambio de color se llama punto final.
Normalmente el punto de equivalencia y el final no son iguales y esta diferencia es precisamente el llamado error sistemtico de
la valoracin. Tambin se puede utilizar un mtodo instrumental para determinar el punto de equivalencia.
Las volumetras deben cumplir los siguientes requisitos:
1. La estequiometria de la reaccin entre el analito y el valorante debe ser fija y perfectamente conocida para, de esta manera
realizar correctamente los clculos.
2. La reaccin debe ser rpida.
3. La reaccin debe ser cuantitativa y comprobarse que se completa en un 99.9 %.
4. Para determinar el punto de equivalencia se debe disponer de un mtodo adecuado pues el error sistemtico de la valoracin debe ser pequeo.
56
Prctica 6
Valoracin del Permanganato de Potasio (KMnO4) con una Disolucin Estndar de Oxalato de Sodio (Na2C204)
El KMn04 no es patrn primario (las caractersticas de los patrones primarios ya fueron mencionadas en la prctica No. 3) pues
aunque puede obtenerse puro, sus disoluciones se descomponen parcialmente dando Mn02 y debe ser valorado utilizando un
patrn primario como el Na2C204. La reaccin que tiene lugar es (Vega et al, 2003):
2MnO-4 + 5C2O=4 + 16H+
2Mn2+ + 10CO2 + 4H2O
Como se mencion, el H2S04 proporciona el medio cido necesario para la reaccin. En esta valoracin no es necesario utilizar
un indicador para detectar el punto final ya que el mismo KMn04 acta como tal pues en la forma oxidada es de color violeta
e incoloro en la reducida. Las disoluciones de KMn04 se deben guardar en frascos de color mbar o topacio para evitar su descomposicin por la luz.
Objetivo
El alumno aplicar sus conocimientos de xido reduccin en la determinacin de hierro (II) en una vitamina, complemento
vitamnico comercial o en una muestra problema.
1 vidrio de reloj
1 esptula
1 vaso de precipitados de 100 mL
1 vaso de precipitados de 250 mL
1 agitador de vidrio
1 bureta de 25 50 mL
1 soporte universal
1 pinzas para bureta
1 probeta de 50 mL
KMnO4
H2SO4
FeSO4
Na2C2O4
Procedimiento
1. Realice los clculos y prepare 100 mL de disolucin 0.1 N de KMNO4 en cido sulfrico al 5% (p/v).
2. Realice los clculos y prepare 100 mL de disolucin 0.1 N de Na2C2O4 y utilcelo como estndar primario para conocer la
concentracin de la disolucin de permanganato.
3. Investigue cuales son las condiciones adecuadas de pH y temperatura, para que la reaccin se lleve a cabo.
4. Efecte la titulacin de estandarizacin del permanganato de potasio.
5. Solicite al profesor una muestra problema de hierro (II) y titlela para conocer su concentracin.
57
Preparacin de la Muestra Problema

Se puede utilizar una solucin de sulfato ferroso o un complemento vitamnico comercial.
Sulfato ferroso
Utilice una solucin de sulfato ferroso 0.1 N. Para prepararla pese en balanza analtica 1.5184 g de FeSO4, disulvalos en 50 mL
de cido sulfrico al 5% (p/v) y afrelos a 100 mL.
Producto comercial
Adquiera cualquier jarabe o pastilla que contenga el hierro en su estado de oxidacin (II), tome en cuenta que puede contener
otros compuestos que reaccionen con la solucin de permanganato de potasio. Como ejemplo, se puede trabajar con el complemento vitamnico Vitavern flico, que contiene 497 mg de sulfato ferroso heptahidratado por cada 100 mL del jarabe (vase
la formulacin ms adelante). Titule alcuotas de 10 mL de este jarabe con solucin 0.01 N de permanganato de potasio.
1. Con el volumen de KMnO4 gastado en la titulacin con el estndar de oxalato de sodio, calcule la verdadera concentracin
de la disolucin de permanganato de potasio.
2. Con el volumen de KMnO4 gastado en la titulacin de la muestra problema de Fe (II), calcule la concentracin de la disolucin de permanganato en N, M y los % p/p (si la muestra fue una pastilla), el % p/v (si la muestra fue un jarabe o disolucin
problema).
58
Prctica 6
Cuestionario
1. Qu es un patrn primario? Cules son sus caractersticas?
2. Por qu no se puede utilizar KMn04 como patrn primario?
3 Por qu se adiciona cido sulfrico al valorar con KMn04? Se debe utilizar preferentemente, por qu?
4. Escriba las semirreacciones y balancee por el mtodo del in electrn la reaccin de la valoracin en medio cido del Fe2+
con MnO4-.
5.- Calcule el % p/v de hierro (II) en una muestra problema de 50 mL, la cual fue aforada a 100 mL en un matraz volumtrico,
de esta disolucin se tomaron 25 mL y se titularon con una disolucin de permanganato de potasio 0.098 N, gastndose
34.5 mL.

R: 1.51 g Fe2+/100 mL.
59
Bibliografa
Harris Daniel, 2001 Anlisis Qumico Cuantitativo. 2 edicin. Revert. Mxico.
Vega vila Elisa, Verde Calvo Jos Ramn, Prez Csar Mara del Carmen. 2003. La teora y la prctica en el laboratorio de
Qumica Analtica I. 1 edicin. Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa, Mxico.
60
Prctica 6
VITAVERN FLICO
Jarabe
Polvo
CALCIO
COBRE
FLICO, CIDO
HIERRO
VITAMINA B, COMPLEJO DE
VITAMINA B3
VITAMINA C
FORMA FARMACUTICA Y FORMULACIN
Cada 100 mL de JARABE contienen:
Sulfato ferroso heptahidratado.............. 497.82 mg
equivalente a .............................................. 99.99 mg
de hierro elemental
Sulfato de cobre.......................................... 52.37 mg
equivalente a .............................................. 3.33 mg
de cobre elemental
Excipiente, c.b.p. 100 mL.
Cada sobre con 2 g de POLVO (para disolver en el frasco contiene):
cido flico .............................................. .2.933 mg
Niacinamida .............................................. 300 mg
Pantotenato de calcio................................. 50 mg
equivalente a .............................................. 4.205 mg
de calcio
Clorhidrato de tiamina
(vitamina B1) .............................................. 50 mg
equivalente a .............................................. 39.480 mg
de tiamina base
Riboflavina (vitamina B2).......................... 20 mg
Clorhidrato de piridoxina
(vitamina B6) .............................................. 25 mg
equivalente a .............................................. 20.560 mg
de piridoxina
Cianocobalamina
(vitamina B12)............................................. 0.070 mg
cido ascrbico (vitamina C)................... 660 mg
Excipiente, c.b.p. 2 g.
HORMONA, S.A. DE C.V., LABORATORIOS
61
Prctica 7
Cromatografa en columna
Introduccin
Las tcnicas cromatogrficas se emplean para separar los componentes individuales de una mezcla, adems pueden ser utilizadas para identificar un compuesto comparando su comportamiento cromatogrfico con el de sustancias conocidas (empleadas
como patrn). Son tcnicas analticas y cuantitativas que han alcanzado un alto grado de desarrollo en los laboratorios de
qumica y bioqumica. En sus diversas aplicaciones, la cromatografa sirve para separar compuestos qumicos diferentes a partir
de mezclas multicomponentes, las cuales pueden contener varios centenares de sustancias diferentes; por ejemplo, es capaz de
identificar y separar los 350 compuestos que dan su sabor y bouquet caractersticos al caf.
La tcnica se basa en la interaccin de una determinada muestra (soluto) con dos fases, una de ellas, habitualmente llamada
fase estacionaria, puede ser un lquido o un slido. La fase estacionaria puede retrasar la salida de las muestras, por las interacciones que pueden presentarse entre ambas. Por otra parte una fuerza contraria (de arrastre) es la determinada por la fase mvil.
Cuando la fase mvil y la fase estacionaria son lquidas (cromatografa de reparto), la muestra puede encontrarse en equilibrio
entre ambas fases, siendo la relacin del soluto en ambas fases constante, y se le denomina coeficiente de reparto. Si en una
mezcla, cada componente tiene un coeficiente de reparto diferente, la separacin ser buena. Naturalmente, dicho coeficiente
depende de la naturaleza de las fases, as como de las condiciones de la cromatografa.
Una de las tcnicas cromatogrficas ms sencillas es la de adsorcin en columna. Una columna de cromatografa es un tubo
de vidrio relleno con un slido poroso de propiedades adsorbentes constituido por pequeas partculas, siendo el gel de slice
y la almina los slidos ms usados. Este relleno es lo que se conoce en cromatografa como la fase estacionaria. A travs de la
columna se har pasar un flujo de un disolvente o mezcla de disolventes en diferentes proporciones denominada eluyente o fase
mvil. La fase mvil emigra por la fase estacionaria debido, sobre todo, a la gravedad y en su movimiento, arrastra ms o menos a
los componentes de una mezcla en funcin de sus cargas, adsorbiendo o no a las muestras para separarlas. El disolvente tambin
puede pasar a travs de la columna por aplicacin de presin. La eleccin del disolvente es crucial para una buena separacin.
La mezcla de compuestos a separar se disuelve en una pequea cantidad de disolvente y se coloca sobre el adsorbente, en
la parte superior de la columna, quedando adsorbida por l. A continuacin se pasa un flujo de eluyente a travs de la columna
y as los compuestos constituyentes de la mezcla son arrastrados por el eluyente a su paso, hacindoles avanzar a lo largo de la
columna. Sin embargo, no todos los compuestos avanzan a la misma velocidad, y esta es precisamente la clave de la cromatografa; algunos compuestos se ven ms fuertemente retenidos por el adsorbente (fase estacionaria) y por lo tanto avanzarn ms
despacio, por el contrario, otros apenas son retenidos y avanzarn a mayor velocidad. En general se dice que la separacin en la
cromatografa se basa en la afinidad diferencial de los distintos compuestos por la fase mvil y la fase estacionaria.
Objetivo
Mediante la aplicacin de cromatografa en columna, el alumno conocer y analizar la separacin de colorantes. Asimismo, el
alumno podr saber como se controla y determina el proceso de separacin de mezclas de substancias.
63
Espectrofotmetro Genesys o Biomate con dos celdas de medida para la regin del visible
1 columna cromatogrfica de 15 cm, con tubo de ltex y pinza de regulacin de goteo (el tubo ltex y las pinzas pueden obtenerse de los equipos de venoclisis para sueros).
Tubos de ensayo de de 10x100 mm con tapn de rosca
1 gradilla para tubos de ensayo
Algodn
Almina o slica para cromatografa en columna (60 - 200 Mallas)
Mezcla de n- butanol, etanol y amoniaco 2N (60: 20: 20 por volumen), (segunda opcin)
Mezcla de n- butanol, cido actico glacial y agua (60: 15: 25 por volumen), (primera opcin)
Disolucin de una mezcla de tinta negra, azul y marrn en etanol, conteniendo aproximadamente 0.05 g/l de cada tinta. No
deber usarse la tinta en forma de gel.
Prec auciones. La inhalacin de altas concentraciones de polvo de almina puede originar irritacin de los ojos y tracto
respiratorio superior. Las mezclas indicadas de los disolventes irritan los ojos, la piel y el tracto respiratorio por lo que deben
manejarse en la campana.
Procedimiento
Preparacin de la columna
Coloque en la base de la columna una pequea cantidad de algodn verificando que haya flujo en la columna.
Adicione almina o slica poco a poco, con ligeros golpes a la columna, no golpear la columna con almina porque se sobreempaca y disminuye drsticamente el flujo, ste es un paso importante para una buena separacin. Cuando obtenga un depsito
homogneo de fase estacionaria de una altura entre 10 y 12 cm, adicione 15 mL de butanol, manteniendo abierta la columna por
su extremo inferior y evitando que el nivel de butanol descienda por debajo del nivel superior de la almina o la silica.
Separacin de los componentes de la muestra

Abra la llave hasta que el nivel del butanol est aproximadamente a un mm de la superficie de la fase estacionaria. Adicione
suavemente 0.2 mL de la muestra problema, evitando remover la fase estacionaria, abra la llave y deje gotear hasta que el nivel
de la muestra llegue al adsorbente. A continuacin proceda a elur (separar) adicionando la fase mvil a un flujo de 2 mL por
minuto. Para ello, se deja que gotee la fase mvil por la parte inferior de la columna y se va recogiendo en tubos de ensayo en
fracciones del mismo color, los que previamente se han marcado para saber hasta donde llega un mL (tome un tubo y adicinele
1 mL de agua y con un marcador seale el borde del menisco).
Una vez eluda totalmente la tinta, mida la absorbancia de cada fraccin colectada en un intervalo de 450 a 665 nm, empleando la fase mvil como blanco.
64
Prctica 7
1. Fotografe o dibuje la columna cromatogrfica en uno de los momentos de la elucin de la tinta (emplear lpices de colores
para indicar la posiciones de las dos bandas cromatogrficas).
2. Graficar los espectros de absorcin para cada color resaltando los mximos de absorbancia de cada fraccin colectada,
complete el siguiente cuadro.
Cuadro 1. Absorbancia de las fracciones colectadas durante la separacin de una mezcla de tintas por cromatografa en columna.
Absorbancia
( = 450 a 665 nm)
Volumen de los
eluatos o fracciones
(mL)
3. Incluya en el reporte sus observaciones.
65
Cuestionario
1. Si una mezcla de antraceno y naftaleno se separa por cromatografa en columna sobre almina, cul de los dos hidrocarburos eluir primero y cul al ltimo? Cul sera el ms polar?
2. Se piensa que un colorante desconocido puede ser azul de metileno, cmo se podra comprobar esta suposicin usando
un procedimiento basado en una tcnica cromatogrfica?
3. Qu debe hacerse para encontrar el eluyente adecuado para separar una mezcla por cromatografa en columna?
66
Prctica7
Bibliografa
Abbot David y Andrew Roberts S. 1973. Introduccin a la Cromatografa. 3a edicin. Coleccin Exedra. Editorial Alhambra,
Madrid, Espaa.
Browning, D. R. 1971. Cromatografa-Toray-Masson. 1a edicin, Barcelona, Espaa.
Waksmundzka-Hajnos Monika, Joseph Sherma, Teresa Kowalska. 2008. Thin Layer Chromatography in Phytochemistry. Chromatographic Sciences Series. Jack Cazes (ed). Vol. 99. CRC Press, Boca Raton, Fla, USA.
Jork H, Wimmer H. 1986. TLC Report. A Collection of Quantitative Papers. GIT Verlag. Germany.
Skoog Douglas, West Donald, Holler James, Crouch Ray. 2008. Fundamentos de Qumica Analtica. 8 edicin. Thomson
Learning, Mxico.
Rubinson A. K., Rubinson F. J. 2001. Anlisis Instrumental. 1 edicin. Prentice- Hall, Espaa.
Harris Daniel C. 2003. Anlisis Qumico Cuantitativo. 3a edicin. Editorial Revert. Espaa.
67
Prctica 8
Cromatografa en capa fina
Introduccin
La Cromatografa en Capa Fina (CCF) es uno de los mtodos ms verstiles de anlisis cromatogrfico para la separacin e identificacin de sustancias qumicas, la cual se basa en el principio de reparto entre dos fases. En general, una cromatografa se realiza
permitiendo que las molculas de la mezcla que se desea separar (muestra) interaccionen con un medio o matriz de soporte que
se denomina fase estacionaria; un segundo medio (fase mvil) que es inmiscible con la fase estacionaria se hace fluir a travs de
sta para separar o elur a las molculas de la muestra. Debido a que estas molculas presentan diferente coeficiente de reparto,
la fase mvil separar los distintos componentes con diferente eficiencia, de modo que aquellos que sean ms afines a la fase
mvil sern eludos ms rpido que aquellos que sean preferentemente solubles en la fase estacionaria.
En la cromatografa de capa fina un adsorbente se deposita en forma de una capa delgada sobre una placa de vidrio, aluminio u otros materiales por la que ascienden, arrastradas por un disolvente (eluyente), una o ms sustancias que se pretenden
separar. El disolvente asciende entonces por capilaridad a lo largo de la placa arrastrando los compuestos a diferentes velocidades, segn el grado de adsorcin de stos a la fase estacionaria de la placa y su afinidad por el eluyente, producindose as su
separacin en forma de manchas (Abbot y Andrews, 1970). Generalmente, la fase estacionaria es un componente polar y la fase
mvil es menos polar, de manera que los componentes que se desplazan con mayor velocidad son los menos polares (Bauer y
col., 1991). Dentro de los adsorbentes o fases estacionarias ms comunes para CCF se encuentran: el gel de slice, el cual se usa
en el 80 % de las separaciones; el xido de aluminio o almina, disponible comercialmente en las formas cida, neutra o bsica;
la celulosa, la hay nativa y microcristalina; y las poliamidas.
Es importante tomar en cuenta algunas consideraciones para la seleccin de la fase estacionaria como su polaridad, el
tamao de partcula, la homogeneidad y su pureza. Mientras que los eluyentes ms comunes para CCF son el acetato de etilo,
cloroformo, hexano, acetona, etanol, metanol e isopropanol, entre otros (vila, 2001). La seleccin adecuada de ambas fases permitir la separacin de aquellos compuestos presentes en la muestra. Los compuestos orgnicos pueden presentar la siguiente
polaridad en orden creciente: hidrocarburos < olefinas < fluor < cloro < nitro < aldehdo < ster < alcohol < cetonas < aminas
< cidos < amidas.
Cuando los compuestos que se separan en una CCF son manchas coloridas es fcil observar cunto se desplazaron durante
su separacin, pero cuando son incoloras se debe hacer uso de reveladores como: luz UV cuando las substancias a separar
o algn compuesto que se ha mezclado con la fase estacionaria absorben luz en el UV, generalmente se usan longitudes de
onda entre 254 y 366 nm; vapores de yodo, el cual se combina reversiblemente con los compuestos orgnicos que entonces
aparecen de color caf; reveladores ms especficos como la ninhidrina para los aminocidos, cuyas manchas pasan de incoloras
a prpura; y como ltimo recurso una disolucin de agua-cido sulfrico 1:1, la cual se roca dentro de un compartimiento protegido, bajo la campana de extraccin de gases y despus se calienta intensamente en mechero o parrilla hasta carbonizar los
compuestos que aparecen entonces como manchas de color negro.
La manera como se identifican los componentes separados de la mezcla por cromatografa en capa fina es por su valor de
Rf (referencia frontal) que se calcula con la siguiente expresin (Clement, 2002):
Rf =
Distancia (cm) que recorre cada compuesto separado desde el punto de aplicacin (a)
Distancia (cm) que recorre el disolvente hasta el frente del eluyente (b)
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Figura 1. Cromatografa en capa fina. Se muestran el sitio de aplicacin de la muestra y las distancias recorridas por un compuesto
separado (a) y el eluyente (b).
El Rf es adimensional, siempre inferior a 1 y depende de las condiciones en las cuales se corre la muestra, por ejemplo depende
del tipo de adsorbente, del eluyente, de las caractersticas de la placa, temperatura, etc. (Abbot y Andrews, 1970; Skoog y col.,
2008).
La cromatografa en capa fina es un mtodo de separacin sencillo, rpido y efectivo para el anlisis tanto cualitativo como
cuantitativo, que va de la mano con la cromatografa en columna y con el que se obtienen resultados reproducibles, caractersticas que lo convierten en un mtodo excelente para fines analticos.
Objetivo
El alumno ser capaz de separar e identificar los compuestos presentes en una mezcla de analgsicos comerciales por cromatografa en capa fina.
Cmara de luz UV
Cromatofolios
6 portaobjetos
3 capilares
1 varilla de vidrio
4 vasos de precipitado de 100 mL
1 caja Koplin
1 pinza de diseccin
1 piseta con acetona
1 piseta con etanol
1 gradilla
1 propipeta
1 esptula
1 frasco de boca ancha mbar
4 tubos de rosca pequeos
Papel aluminio
70
Prctica 8
1 mortero con pistilo

Gel de slice 60 HF254 para CCF
Cafiaspirina
Aspirina
Sacidol o bioelectro
Cafena
Para manejar en campana de extraccin:

Acetato de etilo
Hexano
Cloroformo
Yodo
Metanol
Procedimiento
Preparacin de soluciones patrn
Se toma 1 pastilla de cada analgsico y se tritura por separado en mortero (excepto la cafena que es polvo). Se toma 4 tubos
de ensayo con tapn de rosca y se etiquetan de tal manera que cada tubo contendr 20 mg de un polvo. Posteriormente se les
adicionan 3 mL de acetato de etilo a cada tubo y se agita vigorosamente hasta disolucin parcial de las muestras.
Preparacin de cromatoplacas o cromatofolios

Preferentemente se trabajar con los cromatofolios o cromatoplacas que ya vienen preparados, si no se cuenta con ellos ser
preciso prepararlos. Para esto, en un recipiente mbar se prepara una suspensin de gel de slice al 35% en acetato de etilo, esta
mezcla se agita vigorosamente; posteriormente, se introducen dos portaobjetos juntos (los cuales deben estar perfectamente
limpios y secos), sujetndolos por un extremo, para que la gel de slice cubra toda la superficie libre, entonces se sacan, se dejan
secar al aire, se separan con cuidado y se retira el exceso de gel de slice de los lados de los portaobjetos. En este momento
puede activarse el agente adsorbente calentando las cromatoplacas o cromatofolios durante 30 min a 110 C para eliminar as el
agua. Es conveniente dejarlos secar inicialmente al aire para evitar los agrietamientos que se produciran por efecto del cambio
de temperatura.
Aplicacin de la muestra
Una vez activados las cromatoplacas o cromatofolios se procede a la aplicacin de la(s) muestra(s). En este caso se utilizan
capilares que previamente fueron estirados en la flama de un mechero con el fin de conseguir dimetros menores que permitan la aplicacin de muestras pequeas, de lo contario, si se aplican muestras grandes se producirn colas que evitarn una
buena separacin. Con el capilar se toma un pequeo volumen de la muestra problema (1-5 L) y se aplica una gota sobre la
cromatoplaca (o cromatofolio) a 0.5 cm aproximadamente del borde inferior de la placa. Si trabaja con cromatofolios trace esta
marca con un lpiz fino y aplique de la misma manera (evitando llevarse la fase estacionaria). Ser necesario tocar suavemente
el punto de aplicacin (2 3 veces), esperando el tiempo suficiente para que seque despus de cada aplicacin. Se debe evitar
rayar la capa adsorbente con el capilar porque puede haber prdida de resolucin o desplazamiento deficiente del disolvente.
Experimento 1
Se desea conocer el tamao de las manchas que se separan cuando se aplican en el cromatofolio diferentes cantidades de un
patrn de cido acetilsaliclico o cafena parcialmente disuelto en acetato de etilo. Para ello se harn tres aplicaciones de la disolucin del patrn en un solo cromatofolio, aplicando primero una gota, en la segunda aplicacin dos gotas y por ltimo tres gotas.
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Introduzca el cromatofolio en una cmara de elucin (caja Koplin) a la que previamente se le adicionaron aproximadamente
2 mL de acetato de etilo y tpela (en caso de emplear vaso del precipitado, tpelo con papel aluminio teniendo cuidado de
no mover el cromatofolio). Cuando el frente del eluyente est casi en el borde de la parte superior del cromatofolio destape la
cmara, retrelo con cuidado y marque el frente del eluyente con un lpiz de punta fina. Djelo secar al aire libre. Para visualizar
las manchas, primero revele con la lmpara de luz UV de onda corta y larga, marcando el contorno de las manchas con el mismo
lpiz y luego introduzca el cromatofolio en una cmara con cristales de yodo (en cmara de koplin adicionar un poco de yodo y
tapar) por 5 min aproximadamente en campana de extraccin. Cuando se lleve a cabo el revelado con yodo es recomendable
trabajar con guantes.
Experimento 2
Se desea comparar el corrimiento de dos compuestos con diferente polaridad en diferentes eluyentes. Para esto se preparan 3
cromatoplacas o cromatofolios y se aplican en cada una de ellas las soluciones patrn de cido acetilsaliclico y cafena. Se eluye
la primera con hexano, la segunda con acetato de etilo y la tercera con metanol. Para cada caso, se sigue el procedimiento de
elucin y revelado indicado en el experimento anterior. Anote los resultados obtenidos en cada cromatofolio.
Experimento 3
Se desea identificar el principio activo de analgsicos comerciales como cafiaspirina y sacidol o bioelectro, comparndolos con
las muestras patrn de cafena y cido acetilsaliclico. Las disoluciones de los analgsicos estarn marcadas como problema 1 y
problema 2 (muestras proporcionados por el profesor) sin que usted sepa cul corresponde a qu analgsico. Prepare 2 cromatoplacas (o cromatofolios) iguales, aplicando las muestras como se indica en la Fig. 2.
Figura 2. Aplicacin de las muestras para identificar los principios activos de dos analgsicos comerciales.
Una vez aplicadas las muestras, eluya un cromatafolio o cromatoplaca en metanol y el otro en acetato de etilo. Para cada caso se
sigue el procedimiento de elucin y revelado indicado en el experimento 1. Anote los resultados obtenidos en cada uno de ellos.
72
Prctica 8
Experimento 1
1. Cul es la relacin entre el tamao de las manchas con la cantidad aplicada del patrn en cada caso?
2. Cul es el Rf en cada caso?
Experimento 2
1. Cul es el eluyente adecuado para cada uno de los patrones aplicados y por qu?
2. Cul de los dos compuestos es el ms polar y por qu?
3. Cul es el Rf en cada caso?
Experimento 3
1. Cul eluyente permiti una mejor separacin? Con base en su respuesta conteste lo siguiente:
2. Cul es el Rf de la cafena y cul el del cido acetilsaliclico?
3. A qu analgsico corresponde el problema 1 y por qu?
4. A qu analgsico corresponde el problema 2 y por qu?
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Cuestionario
1. Qu factores influyen en una separacin por cromatografa en capa fina?
2. Cul es la finalidad de activar los agentes adsorbentes?
3. Menciona las caractersticas a tomar en cuenta del adsorbente, soluto y disolvente para una separacin por CCF.
4. En el experimento 3, cul de los dos eluyentes permiti mayor separacin de la mezcla?, a qu se debe esto?
74
Prctica 8
Bibliografa
Abbott David y Andrews Robert. 1970. Introduccin a la Cromatografa. 3a edicin. Alhambra, Madrid, Espaa.
Bauer Karin, Gros Leo y Sauer Werner. 1991. Thin Layer Chromatography: An Introduction. Hthig Verlag, Germany.
vila Zrraga Jos Gustavo. 2001. Qumica Orgnica. Experimentos con un enfoque ecolgico. Direccin General de Publicaciones y Fomento Editorial. UNAM, Mxico.
Clement Bernard. 2002. Organic Chemistry Laboratory Manual. Texas A&M University. USA. pp 143-146.
Skoog Douglas, West Donald, Holler James, y Crouch Ray. 2008. Fundamentos de Qumica Analtica. 8 edicin. Thomson
Learning, Mxico.
75
Prctica 9
Cromatografa en papel. Separacin de mezclas de indicadores de pH
Introduccin
La cromatografa agrupa a un conjunto de diversos mtodos de separacin, que permiten adems identificar y cuantificar compuestos afines en mezclas complejas. La caracterstica que comparten estos mtodos es que la muestra a separar se disuelve
en una fase mvil (que puede ser un gas, un lquido o un fluido supercrtico) que pasa a travs de una fase estacionaria inmiscible, fija en una columna o una superficie slida. Ambas fases se eligen de manera tal que los componentes de la muestra se
distribuyan de manera diferente entre las dos fases, por lo que los ms afines a la fase estacionaria se movern ms lentamente
(Skoog et al, 2008).
En la cromatografa en papel, la fase mvil se mueve sobre las tiras de papel filtro. Esta tcnica se puede realizar de manera
ascendente o descendente, unidimensional o bidimensional. En caso de que los componentes de la mezcla no sean coloridos,
se les puede hacer visibles mediante el empleo de luz ultravioleta o mediante el uso de reveladores qumicos (Smith y Feinberg,
1979).
El ltimo punto alcanzado por la fase mvil en su avance se denomina frente del disolvente y se puede usar como referencia
para expresar la distancia relativa recorrida por cada sustancia en un cromatograma. El smbolo que se emplea para designar
dicha distancia relativa es Rf y se obtiene al dividir la distancia recorrida por el compuesto desde el origen entre la distancia que
migr el disolvente.
Objetivos
El alumno separar los componentes de una mezcla, observar el corrimiento cromatogrfico de un compuesto puro y en mezcla, y reafirmar el concepto de migracin relativa de una sustancia.
Papel para cromatografa Whatman No.1
1 frasco de boca ancha de 15 cm de alto y 7 cm de dimetro
1 cuter
1 regla
1 lpiz
1 probeta 10 mL
1 caja de Koplin
3 capilares
1 propipeta
Rojo congo
Rojo de fenol
Azul de bromofenol
n-butanol
cido actico glacial
Agua
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Procedimiento
1. Prepare las muestras de indicadores en una concentracin de 1.0 % p/v (se sugiere preparar 10 ml para todo el grupo).
Emplee como disolvente NaOH 0.010 M.
2. Prepare 10.0 mL de la fase mvil (6.0 mL de n-butanol:1.5 mL de cido actico glacial: 2.5 mL de agua). Coloque en el fondo
del frasco 4.0 mL de la fase mvil.
3. Aplique calor en el centro de un capilar hasta que est al rojo vivo y estrelo. Corte el capilar as como las puntas para
obtener dos pipetas pequeas con las que aplicar las muestras.
4. Corte una tira de papel filtro, de 5.0 cm de ancho y 10.0 cm de alto. Marque, con un lpiz, una lnea a 0.5 cm del inicio
del papel y distribuya los cuatro puntos donde se aplicarn las muestras de forma equidistante (a 0.5 cm de separacin
aproximadamente), de manera tal que se tendrn 4 orgenes.
5. Aplique en cada uno de los tres primeros orgenes, una gota pequea de diferente indicador. En el cuarto origen, coloque
la mezcla de los tres indicadores.
6. Coloque la tira de papel, con los indicadores, en el frasco que contiene la fase mvil, cercirese de que la fase mvil no est
por encima del sitio donde se encuentran las muestras.
Figura 1. Cromatografa en papel. Se muestra el procedimiento para realizar este tipo de cromatografa.
7. Cierre el frasco y deje que corra la muestra hasta que la fase mvil este a un cm de distancia de la parte final del papel.
8. Retire la tira de papel del frasco y seale con lpiz el frente del disolvente.
9. Mida la distancia entre el origen y el frente del disolvente.
10. Mida la distancia entre el origen y el centro de cada mancha coloreada.
Con base a la informacin obtenida del cromatograma:
1. Calcule los valores de Rf para cada uno de los componentes. Exprese los resultados con dos cifras decimales.
2. Compare los Rf de los tres indicadores obtenidos cuando corren individualmente con los determinados cuando estn en
una mezcla.
3. Cul de los compuestos presentes fue ms afn con la fase mvil?
4. Cmo esperara los valores de Rf de los componentes si la fase mvil tuviera una mayor proporcin de acido actico?
78
Prctica 9
Cuestionario
1. Se desea separar una muestra que contiene varios aminocidos. Qu agente revelador empleara para conocer la posicin
de los componentes?
2. Qu sistema de disolvente empleara para separar por cromatografa en papel una muestra de esteroides? Cul sera la
fase estacionaria adecuada? Cmo podra conocer el tipo de esteroides que tiene la muestra problema?
79
Bibliografa

Smith I., Feinberg, J.G. 1979. Cromatografa sobre papel y capa fina. Electroforesis. Exedra 128. Alhambra.
Espaa.
Skoog Douglas, West Donald, Holler James, Crouch Ray. 2008. Fundamentos de Qumica Analtica. 8
edicin. Thomson Learning, Mxico.
Touchstone Joseph C., 1992, Practice of thin leyer chromatography. Tercera edicin Ed. John Wiley&Sons
Inc. United States of America.
80
Prctica 9
Prctica 10
Cuantificacin de hierro por espectrofotometra en el visible
Introduccin
Las tcnicas espectroscpicas o espectrofotomtricas se basan en la utilizacin de energa luminosa de cierta longitud de onda
para identificar y cuantificar analitos de una muestra. Es comn clasificar estas tcnicas atendiendo a la regin del espectro electromagntico que utilizan, y as por ejemplo se tiene la espectroscopa de rayos X (usa longitudes de onda que van de 100 pm a
10 nm), la espectroscopa en el ultravioleta (de 180 a 380 nm), espectroscopa en el visible (de 380 a 780 nm) y espectroscopa
de infrarrojo (de 0.78 a 50 m) (Harris, 2001). Las radiaciones ultravioleta y visible (UV-Visible) se usan ampliamente con fines
analticos y ambas pueden ser medidas con los espectrofotmetros comunes.
Cuando un analito en disolucin capaz de absorber luz se coloca en la celda de un espectrofotmetro y se le hace incidir
luz de cierta longitud de onda (monocromtica o de un solo color), parte de la luz incidente es absorbida por el analito y otra
parte atraviesa y llega al fototubo del equipo que la detecta y mide (Verde y col., 1999). Estas propiedades se conocen como
absorbancia y transmitancia y se definen como se indica a continuacin.
REFLEXIN
REFRACCIN
LUZ EMERGENTE
LUZ INCIDENTE
Po
P
LUZ
DISPERSA
b
CELDA O DEPSITO
TRANSPARENTE
Figura 1. Fenmenos de absorbancia y transmitancia. Parte de la luz monocromtica que incide en la celda es absorbida por el
analito en disolucin y otra parte es transmitida.
Si Po es la energa radiante incidente y P la energa radiante transmitida, la transmitancia, definida como la fraccin de la energa
radiante que pasa a travs de la muestra (disolucin conteniendo al analito), se expresa como:
T = P/Po, o bien T % = (P/Po)100
Mientras que la absorbancia, definida como la fraccin de la energa radiante que es absorbida por la muestra y que est relacionada logartmicamente con la transmitancia, se expresa como:
A = -log T = log (Po /P)
La ley de Lambert y Beer, indica cuantitativamente como la absorbancia depende de la concentracin de las molculas absorbentes y de la longitud del trayecto, paso ptico o recorrido de la luz en la celda. Cuanto mayor sea la concentracin de las
81
molculas absorbentes mayor ser la absorbancia pues habr ms molculas por unidad de volumen absorbiendo, e igualmente
entre mayor sea la longitud del paso ptico, mayor ser la absorbancia pues existirn ms molculas en el trayecto recorrido
por la luz (Skoog y col., 2008). La ley de Lambert y Beer dice por lo tanto, que la absorbancia es directamente proporcional a la
concentracin de la especie absorbente (c) y a la longitud del paso ptico (b) y se expresa como:
A = bc
En donde:
= constante de proporcionalidad llamada absortividad molar en M-1cm-1
b = longitud de paso ptico en cm
c = concentracin de la especie absorbente en M
Ntese que A es adimensional.
La ley de Lambert y Beer slo se cumple con radiacin monocromtica y en disoluciones diludas (10-2-10-6 M) debido a que
en disoluciones concentradas las molculas de soluto interaccionan entre s y cambian sus propiedades, entre ellas, la absortividad (Harris, 2001). Bajo estas condiciones, un gran nmero de compuestos siguen la ley de Beer, pero algunos no muestran
una relacin lineal entre absorbancia y concentracin. Para saber el intervalo de concentraciones en el que un compuesto sigue
una relacin lineal con la absorbancia (ley de Lambert y Beer), se elabora una curva de calibracin midiendo las absorbancias de
disoluciones del analito de concentraciones conocidas.
Las mediciones espectrofotomtricas son ms confiables con valores de absorbancia en el intervalo de 0.187 a 0.824, o bien,
con valores de transmitancia entre 15 y 65%, debido a que si la absorbancia es muy grande y pasa muy poca luz a travs de
la muestra es difcil medir esta energa radiante, y si por el contrario pasa demasiada luz (absorbancia muy pequea), es difcil
apreciar la diferencia entre la muestra y el blanco o referencia (disolucin que lleva todos los reactivos menos el analito) (Harris,
2001).
En el anlisis espectrofotomtrico, normalmente se escoge la longitud de onda de mxima absorbancia del analito ( Max)
debido, entre otras razones, a que la sensibilidad del anlisis es mxima a esta , es decir, se consigue la mxima respuesta
para una concentracin dada de analito. La Max se obtiene mediante un espectro de absorcin que es una grfica que muestra
como vara la absorbancia (A) o la absortividad molar () al variar la longitud de onda y se obtiene efectuando mediciones de
absorbancia del analito en un intervalo amplio de longitudes de onda, por ejemplo de 380 a 780 nm en la regin del visible.
Espectro de absorcin
0.8
_ _ _ _ Conc. 1
Absorbancia
0.7
Conc. 2
0.6
Conc. 3
0.5
Conc. 4
0.4
Conc. 5
0.3
Conc. 6
0.2
Conc. 7
0.1
0.0
200
250
300
350
400
Longitud de onda (nm)
Figura 2. Espectros de absorcin (barrido) en la regin de 180 a 400 nm de un analito en disolucin a diferentes concentraciones,
en donde 1 corresponde a la disolucin de mayor y 7 a la de menor concentracin. Note como la absorbancia es proporcional a la
concentracin.
82
Prctica 10
Las celdas o depsitos transparentes que contienen la muestra (analito en disolucin) o el blanco pueden ser de cuarzo,
vidrio ptico o plstico y generalmente tienen 1 cm de longitud de paso ptico. Las de cuarzo se usan para medidas espectrofotomtricas en el UV-Visible, las de vidrio ptico, como absorben radiacin ultravioleta, slo son apropiadas para mediciones
en la regin del visible, y las de plstico slo se utilizan para disoluciones acuosas y las hay para mediciones en el visible, y
recientemente, en el ultravioleta.
Objetivo
El alumno determinar el espectro de absorcin y elaborar la curva patrn de un analito y usar esta informacin para cuantificar una muestra problema del mismo analito.
Balanza analtica
Espectrofotmetro Genesys o Biomate
2 celdas de acrlico o de vidrio ptico
Papel seda
12 tubos de ensayo con tapones de rosca
1 gradilla para tubos de ensayo
1 esptula
1 propipeta
1 agitador de vidrio
Disolucin de cido clorhdrico (HCl) 0.05 M, 500 mL
Disolucin de cloruro frrico (FeCl3) 1 X 10-4 M en HCl 0.05 M, 500 mL
Tiocianato de amonio (NH4SCN) 0.5 M, 50 mL
Disolucin problema de cloruro frrico. Concentracin aproximada: 5 x 10-5 M
Procedimiento
Preparacin de Disoluciones
Prepare las disoluciones de cido clorhdrico (HCl) 0.05 M (en campana de extraccin), cloruro frrico (FeCl3) 1 X 10-4 M y
tiocianato de amonio (NH4SCN) 0.5 M. Antes de proceder a su preparacin verifique con su profesor los clculos y forma de
preparacin.
Determinacin del Espectro de Absorcin del Complejo Tiocianato de Hierro (III)

Coloque en un tubo de ensayo 5 mL de la disolucin de cloruro frrico, 0.3 mL de la disolucin de tiocianato de amonio, 4.7 mL
de agua destilada, tape y agite por inversin. Transfiera a una celda y lea la absorbancia en el modo barrido de 400 a 550 nm a
intervalos de 5 nm. Ajuste la absorbancia con un blanco preparado con 0.3 mL de la disolucin de tiocianato de amonio y 9.7
mL de agua destilada.
83
Elaboracin de la Curva de Calibracin del Complejo Tiocianato de Hierro (III)

Prepare la siguiente serie de tubos:
Tubo
Disolucin de FeCl3 1
X 10-4 M (mL)
Disolucin de NH4SCN 0.5

M (mL)
Agua destilada (mL)
0.3
8.7
0.3
7.7
0.3
6.7
0.3
4.7
0.3
2.7
0.3
0.7
0.3
9.7
Mezcle por inversin y lea inmediatamente la absorbancia a la longitud de onda de mxima absorbancia (Max) encontrada en
su espectro de absorcin. Ajuste la absorbancia con el blanco (tubo 7).
Determinacin de la Concentracin de Fe3+ en la Disolucin Problema

Coloque en un tubo de ensayo 5 mL de la disolucin problema de cloruro frrico, 0.3 mL de la disolucin de tiocianato de
amonio, 4.7 mL de agua destilada, tape y agite por inversin. Transfiera a una celda y lea la absorbancia a la longitud de onda de
mxima absorbancia (Max) encontrada en su espectro de absorcin. Ajuste la absorbancia con el blanco preparado con 0.3 mL
de la disolucin de tiocianato de amonio y 9.7 mL de agua destilada.
Determinacin del Espectro de Absorcin del Complejo Tiocianato de Fierro (III)
Con los resultados construya una grfica de absorbancia contra longitud de onda y determine la longitud de onda de mxima
absorbancia para el complejo rojo de tiocianato de fierro (III). Muestre a su profesor la longitud de onda seleccionada antes de
continuar con la elaboracin de la curva de calibracin y la cuantificacin de hierro en su muestra problema.
Elaboracin de la Curva de Calibracin del Complejo Tiocianato de Fierro (III)

Construya una grfica de absorbancia contra concentracin molar de Fe3+. Compruebe en que intervalo hay linearidad y por
lo tanto, la ley de Beer se cumple. Obtenga la ecuacin de la recta y el coeficiente de correlacin (R2) para ver que tan bien se
ajustan sus datos a la lnea recta.
Determinacin de la concentracin de Fe3+ en la Disolucin Problema

Obtenga la media de sus tres determinaciones de absorbancia y la desviacin estndar. Con la ecuacin de la recta obtenida en
el punto anterior, encuentre la concentracin de FeCl3 de su muestra problema. Solicite a su profesor la concentracin real de su
muestra problema y reporte la exactitud y la precisin de su determinacin.
84
Prctica 10
Cuestionario
1. El cloruro frrico no absorbe en la regin del visible, qu pasa cuando se le combina con el tiocianato de amonio? Por qu
se desarroll un color rojo? Cmo se llama a los reactivos como el tiocianato de amonio que al combinarse con el analito
generan un color que puede absorber en la regin del visible?
2. Qu factores se deben tomar en cuenta para la determinacin espectrofotomtrica de iones inorgnicos por formacin de
complejos?
3. Cul es la diferencia entre absortividad (a) y absortividad molar ()?
4. Qu cuidados se deben tener con las celdas del espectrofotmetro?
Notas: Se sugiere al profesor contar con un frasco para la colecta de los desechos de los reactivos.

Se sugiere al profesor ensear a los alumnos el uso de la aplicacin curva estndar en el espectrofotmetro Biomate 3 o
Gnesys 5.
85
Bibliografa
Harris Daniel C., 2001. Anlisis Qumico Cuantitativo. 2 edicin. Editorial Revert, S.A. Mxico.
Verde Calvo Jos Ramn, Escamilla Hurtado Ma. de Lourdes, Reyes Dorantes Alberto y Malpica Snchez Frida. Manual de
Prcticas de Qumica Analtica II. 1 edicin. Universidad Autnoma Metropolitana-Iztapalapa, Mxico.
86
Prctica 10
Apndice 1
Uso adecuado de instrumentos y materiales de laboratorio
Para un uso adecuado de los diferentes instrumentos y materiales de trabajo con que cuenta un laboratorio de docencia, se
debe saber en qu tipo de anlisis se les puede emplear, cules son sus limitaciones de medicin, sus condiciones ptimas de
operacin y los cuidados que se les debe brindar.
Balanzas
Su propsito es medir el peso de un material o pesar cierta cantidad de una sustancia, las hay de varios tipos pero dos son los
ms comunes en el laboratorio de docencia.
Balanza granataria
Tiene una sensibilidad de 0,1 g por lo que no tiene capacidad para medir miligramos, est diseada para pesar desde dcimas
de gramo hasta algunos kilogramos. Cuidados: se le debe mantener limpia, no derramar slidos ni lquidos sobre el rea de
pesado (plato) y dejarla en ceros despus de su uso.
Balanza analtica
Este tipo de balanza cuenta con una sensibilidad de 0,01 g hasta 0,0001 g. Pasos a seguir para un manejo adecuado:
Antes de pesar, ajuste la burbuja (se puede encontrar en la parte trasera, lateral o frontal) haciendo girar los tornillos de las
patas de soporte.
Elimine con una brocha pequea todos los residuos slidos que se hayan acumulado debajo del plato.
No la mueva del lugar donde se encuentra pues la puede desequilibrar.
Si as lo requiere, puede tarar el recipiente donde pesar el reactivo antes de tomar su peso definitivo.
Mantenga las puertas laterales y la frontal de la balanza cerradas al tomar la ltima lectura, ya que el sistema de pesado es
muy sensible a las corrientes de aire.
No se recarga a los lados de la balanza pues es muy sensible al movimiento.
Balanza analtica
Balanza granataria
Figura 1. Tipos de balanzas. La analtica tiene mayor sensibilidad que la granataria.
87
Material de Vidrio
El vidrio es un material durable, transparente y resistente, el que se emplea en la fabricacin de material de laboratorio es adems
resistente a cidos y otras sustancias corrosivas, as como a cambios bruscos de temperatura. Las dos marcas que dominan el
mercado son Pyrex y Kimax.
Matraz volumtrico
Pipeta volumtrica
Figura 2. Material volumtrico de vidrio.
No volumtrico
Estos materiales de vidrio no miden volmenes exactos por lo que se utilizan slo para contener lquidos. Una excepcin son las
pipetas graduadas que poseen una buena exactitud para trabajo analtico cuantitativo.
Matraz Kitazato
Matraz Erlenmeyer
Figura 3. Material no volumtrico de vidrio.
Instrumentos de Medicin
Dentro de esta categora se encuentran las pipetas graduadas y las probetas para la medicin de volmenes de lquidos, el picnmetro para medir la densidad de un slido o de un lquido y el termmetro para la medicin de temperaturas.
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Pipeta graduada
Picnmetro
Apndice 1
Probeta
Termmetro
Figura 4. Algunos instrumentos de medicin.
Desecador
Los desecadores tienen paredes gruesas de vidrio, forma cilndrica y una tapa esmerilada que se ajusta hermticamente para evitar que penetre la humedad del medio ambiente. En su parte interior tienen una placa o plato con orificios que vara en nmero
y tamao, estos platos pueden ser de diferentes materiales como porcelana o nucerite (combinacin de cermica y metal). Se
utilizan para mantener temporalmente sustancias exentas de humedad.
Figura 5. Desecador para proteger reactivos qumicos de la humedad del medio ambiente.
Otros Materiales
La Fig. 6 ilustra una campana de extraccin y diferentes materiales de uso comn en el laboratorio.
Tela de asbesto
Tripi
Soporte universal
Pinzas para crisol
Pinzas para bureta
89
Campana para manejo

de sustancias txicas
y corrosivas

Embudo de filtracin
Tubos de ensayo
Parrilla
Mortero
Escobilln
Piseta
Mechero Bunsen
Propipeta
Figura 6. Campana de extraccin y diferentes materiales de uso comn en los laboratorios de qumica analtica.
90
Apndice 1
Apndice 2
Instrucciones de operacin del potencimetro conductronic pH 120
Usos y Partes que lo Componen
El potencimetro Conductronic Modelo pH 120 es un instrumento que se usa para efectuar mediciones de pH, determinaciones
de iones especficos, titulaciones de xido reduccin, establece el punto final Kart Fischer y lleva a cabo otras titulaciones con
electrodos polarizados. El equipo tiene un panel que proporciona lecturas de dos dgitos y la compensacin de temperatura es
automtica de 0 a 100 C. Su alta impedancia de entrada (1012W) permite su uso con todos los electrodos actualmente disponibles, incluyendo los diseados para iones especficos. La Figura 1 muestra las controles e indicadores que lo componen y en el
apartado siguiente se indica la funcin de cada una.
Figura 1. Partes del potencimetro Conductronic Modelo 120.
Controles e Indicadores
1. Panel de control. Estas teclas permiten la seleccin de las diferentes funciones como son pH, mV, mVrel. y C. Si se va a
medir la temperatura se requiere el sensor de temperatura.
2. Control de pendiente (Slope). Compensa la desviacin del valor terico de la pendiente del electrodo. Funciona nicamente en el modo de pH.
3. Control de Calibracin (Calibrate). Permite calibrar el instrumento en las funciones de pH y mVrel.
4. Panel de Lectura. Indica el valor del pH medido por el electrodo, tambin proporciona datos de temperatura y mV.
Calibracin del Instrumento y Mediciones de pH

(Este procedimiento tambin se puede emplear para los potencimetros Conductronic Modelos pH 10 y pH 20).
91
Calibracin a un punto
(Cuando el valor de pH de la solucin problema est en el intervalo de 3.0 unidades, respecto al pH 7.0 de la solucin patrn)
1. Asegrese que el electrodo este bien conectado en la parte trasera del equipo y conecte el equipo a la corriente elctrica.
2. Seleccione la tecla pH en el panel de control.
3. Lave el electrodo con agua destilada y squelo con un papel absorbente suave tocando solamente el bulbo.
4. Fije la perilla Slope en 100% en la escala.
5. Introduzca el electrodo y el sensor de temperatura en la solucin patrn de pH 7.0 y permita que la lectura se estabilice
(aproximadamente 30 seg).
6. Ajuste la perilla de calibracin Calibrate, hasta que el medidor indique el valor pH 7.0 de la solucin patrn.
7. Retire el electrodo y enjuguelo con agua destilada, pero no seque el electrodo.
8. Introduzca el electrodo en la solucin a medir y lea el valor de pH en el panel de lectura. Despus de cada medicin, retire
el electrodo y enjuguelo con agua destilada.
Calibracin a dos puntos

(Cuando el valor de pH de la solucin problema no est en el intervalo de 3.0 unidades, respecto al pH 7.0 de la solucin
patrn).
1. Siga las indicaciones de calibracin a un punto hasta el paso nmero 6.
2. Retire el electrodo, enjuguelo con agua destilada. Sumerja el electrodo en la segunda solucin patrn de pH 4.0 pH 10.0
(utilice la primera si el pH de su muestra problema es cido o la segunda si es bsico).
3. Ajuste la perilla de control de pendiente Slope, hasta que el medidor indique el valor de pH de la segunda solucin patrn.
4. Retire el electrodo, enjuguelo con agua destilada y proceda a efectuar las mediciones de la solucin problema. No olvide
limpiar el electrodo con agua despus de cada medicin.
Limpieza y cuidados del electrodo de pH

El electrodo se debe humectar y almacenar con una disolucin de cloruro de potasio para evitar que se seque el diafragma.
La membrana y el diafragma del electrodo pueden contaminarse, produciendo errores en la medicin, para evitar este problema la membrana de vidrio debe limpiarse:
- Con un papel hmedo.
- En caso de contaminacin con productos orgnicos puede usarse un disolvente como la acetona; tambin se puede
emplear una solucin de cido clorhdrico 1:1 y dejar sumergido el electrodo por un da para evitar la formacin de
precipitado y sales en su interior.
- Para eliminar la presencia de protenas contaminantes se puede utilizar una solucin de pepsina o de cido sulfocrmico
0.10 N.
- Cuando se mide el pH de muestras de grasas o aceites, los residuos se pueden eliminar lavando el electrodo con detergente y agua abundante.
92
Apndice 2
Problemas y Precauciones
Si el instrumento no funciona, revise que el cable de corriente est bien conectado a la toma de corriente y que el cable del
electrodo este firmemente conectado a la parte trasera del equipo.
Verifique que las soluciones patrn estn completamente transparentes y que no contengan partculas extraas. La solucin
patrn de pH 7.0 debe ser incolora, la de pH 4.0 roja y la de pH 10.0 azul. Cambie las soluciones patrn, en caso de que la
perilla Calibrate o la perilla Slope, lleguen al tope midiendo estas soluciones.
Las soluciones de baja conductividad, tales como el agua destilada y desionizada, responden ms lentamente, dando la
apariencia de lecturas errticas.
Si el instrumento no responde, verifique que el electrodo no est daado, de estarlo sustityalo por otro y hgalo saber al
profesor y al laboratorista. Si el electrodo no est daado, sumrjalo en agua tibia por una hora para destapar la referencia
y que los cristales de KCl fluyan adecuadamente. Si el instrumento sigue sin responder correctamente despus de haber
verificado los puntos anteriores, informe a su profesor y a la Coordinacin de Laboratorios para su reparacin o sustitucin.
93
Apndice 3
Instrucciones de operacin del espectrofotmetro biomate tm 3 thermo spectronic
Usos y partes que lo componen
El espectrofotmetro UV-Visible es un equipo de uso fcil y las determinaciones que en l se realizan son de tipo cuantitativo,
con aplicaciones en diferentes campos como:
Industria de alimentos, qumica, farmacutica y en el tratamiento de aguas residuales, en donde se le utiliza en los anlisis
rutinarios de control de calidad.
Laboratorios de investigacin para el anlisis de diversos compuestos de inters.
Enseanza, en el desarrollo de prcticas acadmicas en los laboratorios de docencia.
El espectrofotmetro Biomate tm 3 Thermo Spectronic (Fig. 1) ofrece:
Un sistema ptico nico que aumenta la precisin y exactitud.
Calibracin automtica de la longitud de onda.
Programacin para la determinacin de curvas estndar, cinticas qumicas y bioqumicas, anlisis a mltiples longitudes de
onda y diversas formas de expresar los resultados (por ejemplo, diferencia de absorbancias).
Compuerta para el
portaceldas
Panel
de lectura
Teclado del
espectrofotmetro
Figura 1. Espectrofotmetro UV-visible BioMate 3.
Controles e indicadores
Panel de lectura. Muestra las lecturas de absorbancia, transmitancia y la concentracin de los compuestos en las soluciones
contenidas en la celda. Asimismo, indica la programacin que se est haciendo del equipo.
Teclados. Ajusta y establece cambios en los parmetros de medicin, a travs de los teclados numrico, de programacin
y de funciones (Fig. 2). El teclado numrico ajusta los cambios en la longitud de onda y tiempo de la determinacin, y los de
programacin y funciones incluyen las teclas esc, clear, enter,
y , test, utility, print que permiten que el espectrofotmetro funcione como una microcomputadora.
95
Panel de lectura
Teclas de funcin
Teclas numrica y de
programacin y numricas
Figura 2. Teclado y panel de lectura del espectrofotmetro.
Conexin y Calibracin Automtica del Equipo

1. Coloque el espectrofotmetro en la mesa de trabajo, en un lugar seguro donde no haya riesgos de derrame de reactivos y
evite moverlo durante las determinaciones.
2. Conecte el cable que se le proporciona, primero al equipo por el panel trasero usando la entrada hembra (Fig. 3) y despus
al tomacorriente. Efecte este proceso en la secuencia indicada, no invierta los pasos pues el equipo puede sufrir una
descarga.
96
Apndice 3
Entrada hembra para

el cable de corriente
Botn de encendido
Figura 3. Vista trasera del equipo. Se observa el panel de conexin y el botn de encendido.
3. Abra la compuerta del portacelda (Fig. 4) y asegrese de que no existe ninguna muestra, cierre la compuerta y presione el
botn de encendido. El equipo empezar por darle la bienvenida con el logotipo de la marca, despus calibrar los filtros y
ajustar la lmpara automticamente (escuchar un sonido). Durante el proceso no abra la compuerta del portacelda y no
presione ninguna tecla, slo espere.
Compuerta del
portacelda
Portacelda
Lente receptor
(interior)
Figura 4. Vista superior del equipo con la compuerta abierta, se observa el portacelda
97
Mdulo de Medicin Bsica de Absorbancia, Transmitancia y Concentracin

1. Una vez calibrado el equipo, el panel mostrar lo siguiente:
MENU
SMART START BIOMATE
FECHA Y HORA
FECHAS DE
PROGRAMAS
PROGRAMAS
RUTINAS
RUTINAS
Anlisis
Almacenados
2. Presione la tecla ESC del panel de programacin una o dos veces hasta que escuche un sonido. El panel de lectura
cambiar, mostrando lo siguiente:
MENU
SMART START BIOMATE
FECHA Y HORA
Ensayo cidos nucleicos

Ensayo de Protena
Crecimiento Celular
Calcular oligos
Iniciar Smart
General Test
Anlisis
A lmacenados
3. En el panel de funciones pulse la tecla GENERAL TEST y posteriormente ATC bsica. El panel de lectura mostrar lo siguiente:
98
Apndice 3
GENERAL-TEST
FECHA Y HORA
ABSORBANCIA
0.000 A
Medir Blanco
General Test
Ajustar nm
4. Ajuste la longitud de onda, presionando primero la tecla Ajustar nm y despus las teclas numricas necesarias y por ltimo
oprima ENTER.
5. Con la tecla de cambiar modo, puede alternar la determinacin de absorbancia, transmitancia o concentracin.
6. Prepare la solucin blanco o de referencia, colquela en la celda y sta a su vez en el portaceldas (la celda se debe orientar
con el lado transparente frente a la persona que opera el espectrofotmetro, el ancho de la celda es de 1.0 cm). Ajuste la
absorbancia a cero oprimiendo la tecla medir blanco.
7. Retire la celda y cambie la solucin de referencia por la muestra problema. Tome la lectura de la absorbancia que se muestra
en el panel. Es recomendable, ajustar nuevamente con el blanco antes de tomar la lectura de otra muestra.
8. Cuando termine de efectuar todas las determinaciones, no se olvide de retirar la celda. Presione la tecla ESC tres veces
para terminar.
9. Para apagar el equipo, presione el botn de apagado (el mismo de encendido pero en la segunda posicin, Fig. 3) y desconecte el cable del tomacorriente y del equipo. Evite desconectar el cable antes de presionar el botn de apagado, ya que se
puede daar la lmpara de Xenon y/o el fusible del aparato. No guarde el cable en el interior del equipo (en el portaceldas).
Mdulo de Mltiples Lecturas a Diferentes Longitudes de Onda

Este mdulo permite obtener medidas de absorbancias a diferentes longitudes de onda. El equipo puede operar desde 190
hasta 1100 nm, con intervalos mnimos de 10 nm y mximos de 100 nm en cada determinacin. Cuando trabaje entre 800 y 1100
nm, encienda el equipo al menos media hora antes de iniciar las lecturas.
99
1. Siga los pasos indicados en la seccin Conexin y Calibracin Automtica del Equipo.
2. Una vez calibrado el equipo, el panel mostrar lo siguiente:
MENU
SMART START BIOMATE
FECHA Y HORA
FECHAS DE
PROGRAMAS
PROGRAMAS
RUTINAS
RUTINAS
Anlisis
Almacenados
3. Presione la tecla ESC del panel de programacin una o dos veces hasta que escuche un sonido. El panel de lectura cambiar, mostrando lo siguiente:
MENU
SMART START BIOMATE
Ensayo cidos nucleicos

Ensayo de Protena
Crecimiento Celular
Calcular oligos
Iniciar
Smart
100
General
Test
Anlisis
A lmacenados
Apndice 3
FECHA Y HORA
4. En el panel de funciones pulse la tecla GENERAL TEST. El panel de lectura mostrar lo siguiente:
TIPOS DE ANALISIS
FECHA Y HORA
A-%T-C AVANZADA CURVA ESTNDAR

RELACION DE ABSORBANCIAS DIFERENCIA
DE ABSORBANCIAS CINTICA BARRIDO DE
EXPLORACION NETA A 3 PUNTOS MULTIPLES
LONGITUDES DE ONDA VALID. DE FUNCIONAMIENTO
Iniciar
Smart
General
Test
Anlisis
Almacenados
Ensayos
Biomate
5. Con la tecla
del teclado de programacin, baje el cursor y seleccione la opcin Mltiples longitudes de onda y oprimir
la tecla ENTER. El panel cambiar y mostrar lo siguiente:
MULTIPLES LONGITUDES DE ONDA
FECHA Y HORA
----------NOMBRE DE ANALISIS
ABSORBANCIA
MODO DE MEDICION
# ID (0=OFF)
Ajuste
nm
Almacenar
analisis
Anlisis
almacenados
6. Presione la tecla Ajuste nm del panel de funciones. Oprima la opcin Agregar nm y combinando las teclas numricas y la
tecla ENTER, ingrese las longitudes de onda deseadas, las que aparecern en la pantalla. Si requiere borrar alguna de estas
longitudes, oprima Borrar nm.
101

nm
FECHA Y HORA
ABS
1. 190
2. 200
3. 210
Agregar
nm
Anlisis
Almacenados
Correr
muestra
7. Una vez ingresadas las longitudes de onda a las que efectuarn las determinaciones, elija la opcin Correr muestra, la
pantalla cambiar y mostrar los siguiente:
nm
FECHA Y HORA
ABS
Medir
Blanco
Medir
Muestra
8. Prepare la solucin blanco o de referencia, colquela en la celda e introduzca sta en el portaceldas (la celda se debe orientar
con el lado transparente frente a la persona que opera el espectrofotmetro). Ajuste a cero la absorbancia para cada longitud
de onda, oprimiendo la opcin medir blanco. Se activar despus de unos segundos la opcin medir muestra. Retire
la celda y cambie la solucin de referencia por la muestra problema. Oprima el botn medir muestra y registre la lectura
de la absorbancia que se muestre en el panel.
9. Anote las lecturas y cuando termine de efectuar todas las determinaciones, retire la celda. Presione la tecla ESC cuatro veces
para terminar.
10. Para apagar el equipo, presione el botn de apagado (el mismo de encendido pero en la segunda posicin, Fig. 3) y desconecte el cable del tomacorriente y del equipo. Evite desconectar el cable antes de presionar el botn de apagado, ya que se
puede daar la lmpara de Xenon y/o el fusible del aparato. No guarde el cable en el interior del equipo (en el portaceldas).
102
Apndice 3

Se termin de imprimir en septiembre de 2013,
con un tiraje de 200 ejemplares, ms sobrantes para reposicin.
Av. San Rafael Atlixco No.186, Col. Vicentina

C.P. 09340, Del. Iztapalapa, Mxico D.F.
Tel.: (01) 58044600

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