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Cisgenes.

- es las modificaciones genticas de una planta receptora con un crossable


naturales gen - -Planta sexualmente compatibles . Esta generacin incluye sus intrones
y est flanqueado por su promotor nativo y terminador en la orientacin normal de los
sentidos. Plantas Cisgenic albergan uno o ms cisgenes pero no contienen ningn
transgenes

Transgenesis.- es una modificacin gentica Con uno o ms genes de cualquier


organismo no las plantas o de una planta de donantes que su sexualmente
incompatibles con la planta receptora . Esto incluye secuencias de genes de cualquier
origen en la orientacin antisentido . cualquier combinacin artificial de una secuencia
codificante y la secuencia reguladora tal como un promotor de otro gen o un gen
sinttico .

El material gentico sobre el que se trabaja puede provenir de clulas animales, vegetales o
de un microorganismo; una vez extrado, se asla el gen o genes de inters, se manipulan o
no y posteriormente se insertan en el mismo ser vivo del que se extrajo o en otro diferente.
Los seres vivos que llevan transplantado uno o ms genes en su ADN se llaman transgnicos.
Para la obtencin de estos individuos se siguen los siguientes pasos:

Se extraen de una clula determinada fragmentos de ADN donde estn insertados


los genes que se necesitan.
En un experimento convencional de clonado molecular, el ADN que se desea clonar se
obtiene del organismo objeto del trabajo
El primer paso en la clonacin de un gen consiste en aislar el ADN del organismo que
contiene el ADN deseado

Mediante el uso de enzimas se asla el gen entre los fragmentos de ADN.


Luego se lo trata con enzimas en un tubo de ensayo para producir fragmentos ms pequeos
de ADN
El ADN aislado se purifica y se fragmenta con una enzima de restriccin. Una enzima de
restriccin produce cortes escalonados en secuencias especificas del ADN generando
fragmentos y terminaciones cohesivas
Cada fragmento tiene una secuencia de una sola cadena de nucletidos en su terminacin
que es capaz de hibridar con ADN que se ha fragmentado con la misma enzima de restriccin.

Se inserta el gen en un vector(virus o liposoma).


Posteriormente estos fragmentos son combinados con el vector ADN para generar las
molculas de ADN a recombinar.
A contiuacion los fragmentos de ADN se incorporan a plasmidos bacterianos

El plsmido utilizado para la clonacin tiene un solo sitio de restriccin y cuando lo rompe la
enzima de restriccin genera las mismas terminaciones cohesivas que se encuentran en os
fragmentos del ADN que esta siendo clomando.
Los extremos cohesivos del plasmido y los fragmentos de ADN se alinean y se usa la enzima
ligaasa de ADn para formar uniones covalentes

Se produce la infeccin del vector sobre la clula que se quiere transformar y se


inserta, por mecanismos propios de la clula, el gen en su material gentico.
El ADN a recombinar es luego introducido en un organismo receptor (generalmente una cepa
fcil de cultivar producto de laboratorio, benigna, de la bacteria E. coli bacteria).
El siguiente paso consiste en incorporar los plasmidos al receptor bacteriano

La clula transgnica, al expresar su cdigo gentico, sintetiza el producto


codificado por el nuevo gen.
De esta forma se generara una poblacin de organismos en los cuales el ADN a recombinar
es copiado junto con el ADN del receptor.
Ahora si las clulas y se pueden desarrollar en un medio solido y las que contienen el gen
clonado deseado se puede aislar
La insercin de estos genes en el nuevo material gentico del individuo husped no siempre
se produce con xito. Cuando se detecta un individuo resultante que es trasgnico hay que
hacer el mayor nmero de copias exactas para asegurar persistencia del gen que se ha
inscrito. De este proceso se encarga la clonacin, que es una tcnica que se utiliza para poder
generar copias de seres vivos iguales genticamente.

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