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Figura 1. Duplicacin semiconservativa del ADN: experimento de Meselson y Stahl. A. El ADN pesado tiene las bases
de ambas hebras con 15N (istopo pesado) y el ADN liviano
con 14N (istopo liviano). El ADN con 15N se puede separar
del ADN con 14N por ultracentrifugacin, porque el ADN pesado ocupa una posicin inferior respecto al liviano. B. Si se
parte de bacterias con ADN pesado, y se las crece en un medio con 14N las hebras hijas sern livianas. Cada hebra hija se
asocia con la hebra madre y el ADN es semipesado: la duplicacin es semiconservativa. La otra posibilidad, que se asocien las dos hebras hijas y las dos hebras madres, no ocurre.
En cada burbuja hay dos horquillas de duplicacin: la sntesis de ADN se da en dos direcciones. En la figura 2 se representa la formacin
de la burbuja de duplicacin en un cromosoma
procariota y se indican las horquillas de duplicacin.
A partir de un oriC se replica una unidad funcional que se denomina replicn. En bacterias,
que tienen un solo oriC, todo el genoma es un
replicn. En el genoma humano se estiman entre 10.000 y 100.000 oriC, por lo que habra
hasta 100.000 replicones.
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actan las Topoisomerasas, enzimas que hidrolizan una o ambas hebras de ADN permitiendo el giro de la molcula y la eliminacin
del superenrrollamiento (Fig. 2).
Figura 2. Origen de duplicacin en un cromosoma procariota. En el origen de duplicacin se forma la burbuja de duplicacin y se generan dos horquillas, una para cada lado: la
sntesis de ADN avanza en sentidos opuestos.
Figura 3. Duplicacin del ADN. A. Cebador. El ARN cebador se sintetiza por adicin de NTP por accin de la Primasa. Al extremo OH 3 libre del cebador se unen los dNTP por accin de la ADN pol. B. Sntesis del ADN. La Helicasa
rompe los puentes de hidrgeno entre las bases, las SSB estabilizan las hebras simples y la Topoisomerasa hidroliza el
ADN y permite eliminar el superenrollamiento. El crecimiento de la hebra continua (superior) acompaa el sentido
de apertura de las hebras. La hebra discontinua (inferior), crece en sentido opuesto y en fragmentos (fragmentos de
Okasaki). La Primasa sintetiza al cebador, al que se adicionan dNTPs por accin de la ADN pol III. El cebador es remplazado por ADN por accin de la ADN pol I. La Ligasa une los fragmentos de ADN de la hebra discontinua.
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+ Observe que la Primasa polimeriza NTP a partir de un ADN molde, sin necesidad de cebador.
+ Observe que:
El ADN se sintetiza por accin de las ADN pol,
que catalizan la condensacin de dNTP (dATP,
dCTP, dGTP y dTTP) y la ARN pol que cataliza la condensacin de NTP (ATP, CTP, GTP y
UTP) para formar el cebador.
Debido a la complementariedad de bases,
las molculas de ADN hijas son iguales a la
madre, de manera que la informacin gentica es la misma: esto constituye la base de
la herencia.
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Figura 5. Actividad correctora de la ADN pol. A. La flecha indica el sentido de avance de la polimerasa. B. Cuando ocurre
un error, la subunidad de la ADN pol con actividad exonucleasa 3 a 5 hidroliza varios nuclotidos hacia atrs (5).
+ Observe que la capacidad de las ADN pol de corregir errores durante la duplicacin asegura que las
hebras de ADN duplicado sean iguales a las madres.