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138
Suplemento
Supplement
Marzo-Abril
March-April
2002
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SIMPOSIO
edigraphic.com
*Jefe del Laboratorio de Hemato-Oncologa. Instituto Nacional de Pediatra. Insurgentes Sur 3700-C. Col. Insurgentes Cuicuilco. Mxico, DF.
CP. 04530. E-mail: ltrg1027@yahoo.com
S-165
Biologa molecular
En los pasados 20 aos se ha producido un gran
progreso en la tecnologa de la biologa molecular (BM).
Primero fue posible obtener informacin indirecta acerca de la estructura y funcin de los genes por hibridacin de DNA/DNA y DNA/RNA para el conocimiento de
la estructura y cantidad del DNA o RNA por medio de
sondas moleculares. El siguiente avance fue la habilidad de fraccionar DNA en partes de tamao predecible
con enzimas de restriccin bacterianas, esto produjo la
invencin de la tcnica que ahora tiene un papel central
en el desarrollo reciente de la gentica molecular humana, llamada Southern Blot. Este mtodo permite
estudiar la organizacin de los genes directamente y
proporciona la definicin de un nmero de diferentes
formas de patologa molecular. Una vez que fue posible
fraccionar el DNA se insertaron las piezas en vectores
capaces de dividirse dentro de las bacterias
generndose los archivos de DNA humano creciendo
en cultivos bacterianos. Ms tarde fue posible secuenciar
los genes inducindolos a sintetizar productos en
microorganismos. En el momento que estuvo disponible el mapeo del genoma humano sigui la identificacin de regiones de DNA altamente pleomrficas, siendo posible investigar cualquier gen de una enfermedad
donde la causa era totalmente desconocida, facilitando
el descubrimiento de genes de muchas enfermedades
importantes. Considerables logros se han alcanzado
en el entendimiento de la patologa de las enfermedades a nivel molecular y esto ha tenido un particular
impacto en Hematologa, permitiendo avanzar en el
conocimiento de la funcin de los genes y mecanismos
de la enfermedad a casi todas sus reas.
La BM se ha aplicado en el estudio de la leucemia
aguda (LA). Las LAs constituyen una pequea parte de
todas las enfermedades malignas humanas, el nmero
de genes identificados a travs de traslocasiones
cromosmicas es mayor que aquellos identificados en
otros tipos de cncer. Las tcnicas de citogentica han
sido mejoradas con el uso de molculas de DNA marcados con diversos fluorocromos y la posibilidad de que
cualquier fragmento individual de DNA pueda ser revelado en clulas en metafase e interfase por hibridacin
in situ por fluorescencia. Esas nuevas tcnicas son
particularmente aplicables a la investigacin de
cariotipos complejos. El anlisis de bandas G ha sido el
eje en la identificacin de anormalidades recurrentes
en enfermedades malignas y ha permitido la identificacin de los genes involucrados en muchas enfermedades. La introduccin de las tcnicas de hibridacin in
situ (FISH) ha sido de gran utilidad para complementar
mayor precisin en la caracterizacin de anormalidades citogenticas. Por medio de la hibridacin genmica
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Citometra de flujo
La citometra de flujo en un mtodo de anlisis de clulas
aisladas de correlacin multiparamtrica rpido y dinmico. Los avances en la tecnologa de hibridomas,
biotecnologa e inmunobiologa asociada con los de
qumica de fluorocromos y sistemas computacionales
han contribuido al menos en la evolucin de tres fases de
la citometra clnica. La primera fue el inmunofenotipo de
leucemias y linfomas, segundo fue la necesidad de
conteo del marcador de superficie celular CD4 en respuesta a la infeccin por el virus de la inmunodeficiencia
humana (VIH) y tercero la cuantificacin de clulas
CD34 y evaluacin de la respuesta inmune seguida de
trasplante alognico. Ms adelante ha tenido importancia la deteccin de antgenos especficos de clulas T,
clulas dendrticas as como clulas metastsicas circulantes, anlisis de ciclo celular, identificacin de molculas intracelulares entre otros. Por tanto, es necesaria la
actualizacin relacionada con esta metodologa incluyendo apropiada caracterizacin de Ags de citoplasma
y superficie de la clula, ptimo mapeo electrnico y
adecuados reactivos y procesos, con el fin de ampliar su
utilidad en el estudio de las enfermedades hematolgicas.
Por otra parte es necesario conocer sus limitaciones con
el objeto de mejorar la interpretacin de los resultados.
En relacin a la pregunta acerca de la identificacin
de un grupo de pacientes peditricos de LAL de bajo
riesgo, la importancia de la misma radica en que aunque
diferentes regmenes de tratamiento pueden producir
ndices de curacin equivalentes y efectos txicos agudos similares, la frecuencia, el tipo y la gravedad de las
secuelas a largo plazo pueden ser bastante diferentes.
El reconocimiento de los efectos nocivos a largo plazo de
las modalidades teraputicas en LAL, debe resultar
necesariamente en modificaciones en las terapias establecidas. Estas modificaciones son un proceso dinmico
y demuestran la preocupacin de los mdicos y sus
equipos de trabajo en mejorar la calidad de vida de los
sobrevivientes del cncer en la infancia. Los progresos
de la biotecnologa como el inmunofenotipo, ndice de
DNA, la deteccin de genes de fusin, en conjunto con
las caractersticas demogrficas clnicas y hematolgicas
de los pacientes, han facilitado la deteccin de pacientes
de bajo riesgo y contribuirn sin duda al diseo de
Gac Md Mx Vol.138 Suplemento No. 1, 2002
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Referencias
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edigraphic.com
* Laboratorio Central, Instituto Nacional de Ciencias Mdicas y Nutricin Salvador Zubirn (INCMNSZ).
S-167
S-168
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2.
3.
*Laboratorio de Hematologa. Instituto Nacional de Ciencias Mdicas y Nutricin Salvador Zubirn (INCMNSZ)
S-169
S-170
2.
edigraphic.com
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S-171
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9.
*Servicio de Gentica, Hospital General de Mxico y Facultad de Medicina, UNAM. Dr. Balmis #148, Col. Doctores, Mxico D.F.
C.P.06726. Email: aranat@telmex.net.mx
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Referencias
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