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Tema 12
ELISA indirecto
ELISA directo
Electroforesis
Transferencia a papel
protenas
se separan
segn su
tamao
aadir Ac primarios
aadir conjugado Acenzima
aadir sustrato
de la enzima
tejido fijado o congelado
INMUNOMIGRACIN
Utiliza Ac marcados con metales pesados: selenio (color azul) y oro (color rosa). La
muestra (saliva, orina, sangre, etc.) fluye a travs de una tira porosa reaccionando con
el Ac marcado, al que solubiliza y con el cual forma inmunocomplejos, y despus con
un Ac frente al antgeno inmovilizado, que captura los inmunocomplejos y reacciona con
el sustrato dando color. Es el mtodo empleado en muchos de los kits rpidos de
diagnstico, como por ej. la deteccin de Ag del virus de la leucemia felina:
PREGUNTAS:
1- Dado que el Ag-1 y el Ag-2 pueden dar lugar a complejos inmunes estables, Qu
tcnica inmunolgica basada en una reaccin primaria Ag-Ac elegiras para distinguir la
unin del Ac a cada uno de estos Ags de distinto tamao?
2- Enumera cinco razones por las que la tcnica de ELISA es la ms utilizada en el
diagnstico clnico
3- La formacin de Ac frente a los cidos nucleicos de las clulas es caracterstico del
Lupus eritematoso sistmico. Qu tcnica podras utilizar para el diagnstico de esta
enfermedad autoinmune?
4- Al realizar una prueba de ELISA de sndwich se aaden por este orden: solucin de
antgenos, suero bovino problema y Ac-anti Ig bovina marcado con fluorescena. Al
aadir el sustrato no se desarrolla color. Explica qu ha sucedido.