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Cancer
Diario (2014) 4,
E211; doi:
10.1038
bcj.2014.30
Pisa, Italia
1, 6, G Amabile 2, 3, 6, A Di Ruscio 2, 3,
P Quaranta
4, Tenen DG 2, 5
2.
3.
4.
y M Pistello
4
Retrovirus Centro y en la Seccin de Virologa del Departamento de Investigacin Traslacional de la
Universidad de Pisa, Pisa, Italia
5.
ABSTRACT
Reprogramming somatic cells into induced pluripotent stem (iPS) cells is
nowadays approaching effectiveness and clinical grade. Potential uses of this
technology include predictive toxicology, drug screening, pathogenetic studies
and transplantation. Here, we review the basis of current iPS cell technology
and potential applications in hematology, ranging from disease modeling of
congenital and acquired hemopathies to hematopoietic stem and other blood
cell transplantation.
Celulas madres pluripotentes inducidas
La reprogramacin de clulas somticas en clulas madre pluripotenciales
inducidas (iPS) est logrando actualmente eficacia y grado clnico. Los usos
potenciales de esta tecnologa incluyen la toxicologa predictiva, la deteccin de
drogas, los estudios patognicos y su trasplante. En este artculo examinamos
la base de la tecnologa de clulas iPS actual y aplicaciones potenciales en
hematologa, que van desde el modelado de la enfermedad de hemopatas
c-Myc
(OKSM). En
2007,
los
equipos
de
Yamanaka y
adeno-asociados
genmicos denominados
cuyos
'puerto
virus
parental
seguro', hacia
integran
vectores
en
virales
sitios
no
la
la
anergia
de
clulas
T en en
vitro- generada
alorreactivas
modelos de
24
Las talasemias
Los -talasemias son uno de los trastornos hereditarios ms comunes en todo
el mundo. Son causadas por ms de 200 tipos diferentes de cualquiera de las
mutaciones puntuales o deleciones de nucletidos en el gen de -globina, lo
que resulta en una reduccin de la sntesis anormal o ninguna de las cadenas
de -globina. Los pacientes afectados por beta talasemia tienen anemia severa
y una vida til ms corta. La terapia gnica para la -talasemia es
particularmente difcil dado tanto el requisito para la produccin masiva de
hemoglobina en un linaje de manera especfica y la falta de ventaja selectiva
para las HSC corregidas.
Una cuestin relevante para hemoglobinopatas es si la persistencia de la
hemoglobina fetal o embrionario-fetal puede ocurrir in vivo despus del
trasplante con HSC derivadas de clulas iPS humanas. HSC derivadas de
clulas iPS LV-transfectadas fueron comparados con sus homlogos somticas
isognicas
naturales
LV-transfectadas. En
particular,
los
ratones
31
Zou et
al. demostraron una correccin de genes de sitio especfico del silencio HBB en
clulas iPS de pacientes especficos humanos.
derivados
de
BM,
el
cordn
umbilical y
movilizado o
no
mobilizados sangre perifrica se han utilizado con xito como una fuente para
la generacin de clulas iPS. Por otro lado, las clulas iPS obtenidas a partir de
Hasta la fecha, hay por lo menos tres formas eficientes para diferenciar las
HSC a partir de clulas iPS. (1) Coculture con OP9 clulas, una lnea de
clulas madre mesenquimales murino establecidos a partir de B6C3F1 recin
nacido osteopetrtico ratn no calvaria produccin de factor estimulante de
colonias de macrfagos funcional. Coculture de las clulas OP9 con clulas
ES de ratn ha sido utilizado para desarrollar un sistema de induccin de la
diferenciacin preferencial de clulas pluripotentes en clulas hematopoyticas
distintas de los monocitos. Aunque el uso de estroma de ratn proporciona una
barrera para la traduccin clnica, esta barrera podra superarse si se produce
un banco de clulas maestro. (2) Transduccin de clulas iPS con Lhx2, un
factor de transcripcin LIM-homeobox. (3) disociacin de teratoma-generado
por ratones inmunodeficientes. Nuestro grupo demostr recientemente que las
clulas iPS humanas se diferencian dentro de los teratomas generando
mieloide funcional y clulas linfoides. Del mismo modo, las HSC puede ser
aislado de parnquima teratoma y reconstituir un sistema inmune humano
cuando se trasplantan en NOD.Cg-Prkdc (scid) IL2RG (tm1Wjl) / SZJ
inmunocomprometido (GSN) ratones. Suzuki et al. inform que por clulas iPS
humana, HSCs derivados migran de teratomas en el murino BM y su inyeccin
uso
de
este sistema
in
vivo
de
generacin,
los
ratones
(2)
simultneamente.
Despus de la expansin de HSC en una dosis adecuada y, si procede, ex
vivo o in vivo de seleccin para clulas modificadas, se proceder a un
encontrar
donantes
despus
de
cada
sucesiva
episodio
de
aloinmunizacin.
Hasta ahora sustitutos alternativos de la sangre tales como transportadores de
oxgeno sintticos han resultado infructuosos. Los glbulos rojos derivados de
clulas iPS adolecen de dos limitaciones importantes: la vida media corta y la
necesidad de repetirse, y las transfusiones de vida larga. Sin embargo, los
glbulos rojos derivados de clulas iPS tienen el potencial de aliviar la escasez
y producir glbulos rojos O Rh negativos "donantes universales" libres de
patgenos. Las limitaciones principales para la traduccin de los glbulos rojos
derivados de IPSC en clnica son: (1) la enucleacin ineficiente, (2) dificultad de
llegar a la forma adulta (3) el nmero posiblemente insuperable de glbulos
rojos necesarios para generar una unidad.
Las plaquetas autlogas derivadas de clulas iPS tienen potencial para aliviar
la escasez de suministros debido a la alta demanda y la vida til limitada.
Produccin de plaquetas O (donante universal) libre de patgenos concentra
con ttulos de isoaglutininas insignificantes sera el objetivo ideal. Las plaquetas
derivadas de clulas iPS se han generado y sern pronto probado en ensayos
Suponiendo que las clulas iPS alognicos se utilizar, una vez que un clon de
TAP o 2 m con deficiencia de clulas iPS humanas se establece, una
biblioteca de prefabricados de clones que expresan los distintos tipos de HLA
de clase I pueden ser generados por la introduccin de varios genes HLA de
clase
Linfocitos NK
La esperanza de vida natural para las clulas NK en el cuerpo humano es ~ 2
semanas. Slo unas lneas de clulas NK-como permanentes humanos estn
disponibles para la investigacin, sobre todo deriva de la leucemia o el linfoma
de clulas NK pacientes, y por lo tanto carecen de las caractersticas
importantes de las clulas normales NK. Adems, varias de estas lneas de
clulas NK- como infectados latentemente con el virus de Epstein-Barr (EBV), y
la contribucin de los efectores virales a la proliferacin celular y la
supervivencia an no se ha estudiado.
Linfocitos NK son capaces de matar clulas con falta de auto (es decir, la
expresin de HLA de clase I). Las clulas NK se han generado a partir de
clulas iPS y tienen el potencial de aplicacin tanto en la terapia del cncer y
las enfermedades infecciosas. interleucina-2 se utiliza generalmente para
expandir citotxicos efector clulas T o NK in vitro y in vivo, y tambin
promueve la expansin de clulas T reguladoras que expresan el receptor cadena de interleucina-2 CD25. Como las clulas T reguladoras son capaces
de suprimir directamente las respuestas tanto clulas T y NK, el efecto
teraputico
de
las
clulas
efectoras
es
limitado. Adems,
no
est
Linfocitos B
A pesar de los problemas iniciales, algunos informes se centran en la
generacin de clulas iPS a partir de clulas B se han publicado. En paralelo,
se ha demostrado que las clulas iPS experimentan diferenciacin linfoide
iPS
inmunomodulador funciones.
muestran
Identificacin
conservado
y
utilizacin
regenerativo y
de
las
MSC
CONCLUSIONES
El advenimiento de la tecnologa de clulas iPS produjo un hito importante en
hematologa. La disponibilidad de clulas madre pluripotentes especficas del
paciente, sin duda, va a mejorar la modelizacin de enfermedades, desarrollo
de frmacos y allanar el camino para la terapia celular autloga para muchas
enfermedades monognicas y adquiridas. Muchas empresas de biotecnologa
se centran en la actualidad en las clulas iPS con el fin de generar nuevas
molculas
teraputicas
eficaces. En
la
actualidad,
las
empresas
de