Genetica Microbiana

Donde se localiza el ADN y ARN?

Eucariotes

ADN: Ncleo y mitocondria (en

plantas, adems en cloroplastos)
en cromosomas

ARN: ncleo, mitocondria,

retculo endoplsmico,
citoplasma

Procariotes:

ADN: citoplasma (cromosoma y plsmidos)

ARN: citoplasma

Cul es la funcin biolgica de los

cidos nucleicos?
Almacenamiento y transmisin de
la informacin gentica para la
produccin de protenas

Estructurales
Reguladoras

Cada organismo lleva en cada una

de sus clulas al menos una copia
de toda la informacin gentica
que necesita ese organismo, a lo
que se denomina GENOMA.

Dogma Central de la Biologa Molecular

Describe el flujo de la informacin gentica desde el
DNA a travs del RNA y finalmente a las protenas.

Dogma central de la biologa molecular

Almacenamiento y transmisin de informacin gentica
Tres etapas principales en procesamiento de informacin gentica:

1.- Replicacin. Se copia el DNA progenitor en molculas hijas idnticas al DNA molde.
2.- Transcripcin. Se transcribe la informacin gentica del DNA al RNA, para ser llevado
al lugar de sntesis de las protenas (los ribosomas)

3.- Traduccin. Sintesis de protenas de acuerdo a instrucciones transmitidas por RNA

Los VIRUS presentan genomas

muy diferentes y
estrategias de replicacin
diversas.

Composicin de Nucletidos
Los cidos nucleicos son polmeros lineales formados por
unidades repetitivas, llamadas nucletidos, estn
constituidos por:
Una pentosa (la ribosa o la desoxirribosa)
Una base nitrogenada

Purina: A, G
Pirimidina: C, T, U

cido fosfrico

Nucletidos
La unin de las bases a una pentosa constituye un nuclesido.

La unin entre un nuclesido y el cido fosfrico se

llama nucletido

Estructuras de los cidos nucleicos

Estructura primaria
Una cadena de poli-nucletidos posee un sentido o
direccionalidad:

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Una cadena de poli-nucletidos posee individualidad
determinada por la secuencia de sus bases.
La informacin gentica se almacena en la estructura
primaria del ADN.
Un gen no es mas que una secuencia concreta de ADN
que codifica la informacin mediante un lenguaje de 4
bases
Los mononucletidos estn unidos mediante enlaces 3',5' -fosfodister.

Estructura secundaria

Es una estructura en doble hlice.

Permite explicar el
almacenamiento de la
informacin gentica y el
mecanismo de duplicacin del
ADN.

Ambas cadenas son

complementarias y antiparalelas

Estructura terciaria
Plegado de la estructura secundaria.

Almacenaje del ADN en un espacio reducido,

para formar los cromosomas.

En eucariotas, la cantidad de ADN de cada

cromosoma es muy grande, el
empaquetamiento es complejo y compacto

Se necesita la presencia de protenas, como

las histonas y otras protenas de naturaleza
no histnica.

Nmero de cromosomas en diferentes organismos

Organismo

Nmero

Bacteria

Mosca de la fruta

Chcharo

14

Levadura

16

Maz

20

Gato

30

Ratn

40

Humanos

46

Pollos

78

Cerdo

38

Oveja

54

Vaca

60

Caballo

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GENES
Segmentos en una molcula
de ADN que contiene la
informacin requerida para
la sntesis de un producto
biolgico funcional, como
una protena o RNA
Expresin gnica
Proceso mediante el cual
todos los organismos
transforman la
informacin codificada en
los cidos nucleicos en
protenas

Genoma Bacteriano
Doble cadena circular de ADN
Una sola copia 90%
Doble copia de AND circular
Vibrio cholerae
Brucella melitensis
Hapliode

Los 7 tipos de genomas virales

dsDNA

dsDNA incompleto
ssDNA
dsRNA
ss (+) RNA
ss ( - ) RNA

ss (+) RNA con DNA intermediario

Tipos de estructuras en los genomas virales

Lineal
Circular
Segmentados
Incompletos (espacios vacos)
Cadenas sencillas (ss) con sentido +
Cadenas sencillas con sentido Cadenas sencillas, + y (ambisentido)
Dobles cadenas (ds)

LONGITUD DEL GENOMA

Medida en pares de bases (bp)
o pares de kilobases (kbp)
E. coli 4000kpb= 1mm

LOGO

Replicacin
Replicacin: proceso mediante el cual se pasa la
informacin gentica de clula a clula, de
generacin en generacin.

Primasa
Menos de 1 error por cada
108 bases

REPLICACION
Replicn bacteriano, posea
toda la informacin gentica
necesaria para replicarse

Unin de la DNA polimerasa al Ori

Replicacin semi conservativa

Sistema de clasificacin de Baltimore

Existe una VII clase, los hepadnavirus (dsDNA parcialmente circular)

REPLICACION VIRAL (RNA)

TRASFERENCIA-MUTACIONES
Debido a la naturaleza haploide del genoma
bacteriano limita la plasticidad genmica. Sin
embargo existe un amplio acervo gentico que
contribuye con su notable diversidad gentica:

Mecanismos de intercambio gentico

Trasposones
Elementos (IS)

Mecanismos
Recombinacin y Trasferencia gnica

Transformacin

Transduccin

Conjugacin

Recombinacin

RECOMBINACIN GENTICA
Es el proceso por el que los elementos
genticos contenidos en dos genomas
separados se juntan en una unidad.
Trae como consecuencia un cambio.

Se transfieren genes completos, grupos de

genes o cromosomas completos.

Formas de Recombinacin
Transformacin: el DNA libre se incorpora a
una clula.
Transduccin: La transferencia del DNA
donador esta mediada por un virus.
Conjugacin: la transferencia de DNA implica
contacto clula clula y la presencia de un
plasmido y de una estructura llamada pili.

TRANSFORMACIN
Este descubrimiento fue uno de los hechos mas
relevantes, pues condujo a experimentos que
probaron que el DNA es el material gentico.
Fred Grifth (1920).
Trabajos con Streptococcus pneumoniae.

No todas las bacterias tienen esta capacidad,

sino clulas competentes que son capaces de
tomar una molcula de DNA y lo integran a
su cromosoma.
Intervienen: protenas especiales que estan
implicadas en el trasporte e incorporacin del
DNA.

Transformacin
Definicin: Transferencia de
incorporacin ADN exgeno
Factores que influyen:

genes

Tamao, concentracin y estado del ADN

Estado de Competencia del receptor (Bacillus,
Haemophilus, Neisseria, Streptococcus)

por

Transformacin
Pasos:
- Adsorcin del ADN
- Penetracin
- Recombinacin

Caractersticas transformadas:
Antgenos
- Capacidad fermentacin
- Resistencia antimicrobianos
-

Transformacin: Etapas
1.

Unin del DNA: protena asociada a la

membrana: autolisina y nucleasas.
2. Incorporacin del DNA:
Primero se fija reversiblemente, luego se
vuelve irreversible.
3. Integracin del DNA: protena de unin, en
el cromosoma protena RecA

Cuando una clula es capaz de tomar una

molcula o un fragmento de DNA y
transformarse se denomina clula
competente.
Solo algunas cepas poseen esta
caracterstica, parece ser una propiedad
hereditaria.

Experimento de Griffith
Neumococo vivo
capsulado. (S)
Neumococo muerto
por calor

Neumococo vivo
rugoso (R) no
capsulado
Neumococo (R)
vivo +
Neumococo muerto

Ratn muerto
Se aslan cepas lisas
Ratn vivo.

Ratn vivo.
Ratn muerto: se aslan
cepas S

Experimento de Griffith

TRANSDUCCIN
BACTERIOFAGOS

CJW1
Mycobacterium sp.

T4
Escherichia coli

LP65
Lactobacillus sp.

Brssow H., y cols. Cell, 2002

Prof. Adj. Bqca. Myriam A. Garca

TRANSDUCCIN

El DNA se transfiere de una clula a otra por

medio de un virus: bacterifago.

El mecanismo de transduccin fue descubierto por

Zinder y Lederberg (1952).
Estudiando la recombinacin gentica entre
diferentes cepas de Salmonella typhimurium.

Infeccin bacteriana por Fagos

1. Adsorcin

2. Unin Irreversible
3. Contraccin del collar

4. Inyeccin del ADN

Bacterifagos: Ciclos ltico y

lisognico

Transduccin
Cuando un fago infecta a una bacteria, capta
fragmentos del genoma de la clula
hospedadora.
Al infectar a otra bacteria el fago transductor
puede transferir sus propios genes y tambin
los de la clula hospedadora de la cual
procede.

Transduccin
Puede ocurrir de 2 formas:
1. Transduccin generalizada:
Cualquier porcin del genoma bacteriano
pasa a formar parte del genoma de la
partcula vrica.

Transduccin generalizada

Transduccin
2.

Transduccion especializada:
El DNA de una regin especifica del
cromosoma del hospedador se integra
directamente en el genoma del virus.
No todos los fagos pueden transducir, ni
todas las bacterias son transducibles.

Transduccin especializada

CONJUGACIN

Implica el contacto clula clula.

El material gentico transferido puede ser un
plsmido, o una porcin del cromosoma.
Una clula donadora trasmite la informacin
gentica a otra clula, la receptora.
La clula donadora posee el pili o pelo sexual.

conjugacin
La capacidad de la clulas para actuar como
donantes se debe a la presencia de factor f o
factor de fertilidad.
Las clulas que carecen de factor f, son
receptoras.

Diferencia entre plsmido y transposn

Los transposones son INCAPACES de

reproducirse en forma autnoma y de existir
con independencia del cromosoma

Plsmidos
Elemento gentico extracromosmico capaz de
replicarse de forma autnoma

Existen varios tipos de plsmidos

En E. coli, se han aislado mas de 300

EPISOMAS

Un episoma es un plsmido capaz de existir

integrado o no integrado en el cromosoma
bacteriano.
Pueden replicarse en forma autnoma pero
tambin pueden integrarse al cromosoma
bacteriano y duplicarse junto con el resto de los
genes cromosmicos.
Un mismo elemento gentico puede existir como
plsmido en una bacteria y como episoma en otra.

E coli, posee un plsmido conjugativo

llamado Factor F:
- Capacidad para sintetizar pili.
- Movilizacin del DNA para su transferencia.
- Alteracin de receptores de la superficie de la
clula.

Conjugacin en Gramnegativos

REARREGLOS INTERNOS DEL

ADN
Recombinacin gentica:
es el intercambio fsico de genes entre elementos
genticos.
Consecuencia: ????

Recombinacin
Implica la ruptura fsica y posterior unin de hebras de ADN de
forma tal que intercambian el contenido de ADN resultando en dos
nuevas hebras

Mecanismo importante para incorporacin de ADN exgeno

Sitio especfica:
se da en sitios especficos de las molculas de ADN
involucradas, no requiere de zonas de homologa

Homloga:
slo ocurre en zonas con alta homologa
permite reparar cromosomas daados durante la replicacin

(mantenimiento de informacin)

Elementos Genticos Transponibles

Definicin: Segmentos de ADN capaces de
mudarse de una localizacin a otra
Propiedades
Movimiento al azar
No poseen autorreplicacin
Transposicin mediante recombinacin especfica
Transposasa
La transposicin es una especie de recombinacin que no se
basa en una homologa de secuencia ni en la presencia de RecA,
sino una secuencia especial en uno de los DNA y una protena
especfica (transposasa)

LO BUENO!!!!
Terapia gnica

Produccin de
insulina humana
recombinante en
bacterias E. coli.

Transcripcin
En el genoma existen fracciones
de ADN capaz de transcribirse
para permitir la expresin de su
informacin y dirigir la sntesis de
ARN y protenas.
El
segmento
que
puede
transcribirse se denomina GEN.

 La ARN polimerasa se desplaza a lo largo de una molcula de

ADN, abriendo la doble cadena y elaborando un transcrito de
ARN mediante la adicin de un ribonucletido cada vez. La
enzima copia la secuencia oligonucleotdica de tan slo una de
las dos cadenas de ADN. Tras el paso de la enzima, el ADN
vuelve a enrollarse.

Traduccin
La conversin de la informacin:
ADN aa utiliza como
intermediarias molculas
especiales de ARN.

A partir del ADN se transcriben

copias complementarias de los
genes que se van a expresar en
forma de molculas de ARN
mensajero (ARNm).
Maquinaria de sntesis: tRNA,
enzimas y ribosomas.

Codn
Triplete de nucletidos que codifica para un
aminocido especfico

Sntesis de protenas

1. Replicacin
2. Transcripcin
3. Traduccin