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UNIDAD 1.

INTRODUCCIN A LA BIOLOGA
MOLECULAR:
NATURALEZA Y PROPIEDADES DEL MATERIAL HEREDITARIO

Biotecnologa
ambiental

Biologa Molecular y Gentica

Generalidades






Gen fragmento de ADN que codifica a una protena


Material hereditario cidos nucleicos ADN y ARN
Unidad funcional del ADN y ARN Nucle do
ADN: A y G (purinas); T y C (pirimidinas)
ARN: A y G (purinas); U y C (pirimidinas)

Nuclesidos y Nucletidos

Unidad estructural del DNA:


Azcar: 2-desoxirribosa
5
1

Grupo
fosfato

Base
nitrogenada

Fosfato esterificado en 5
Base nitrogenada en 1

Pentosa
Nuclesido
NUCLETIDO

H = DNA
OH = RNA

Estructura qumica de los nucletidos


Bases nitrogenadas
Purinas: 2 anillos fusionados

Pirimidinas: 1 anillo heterocclico

ARN: timina Uracilo

Caractersticas F-Q de los nucletidos





Carcter dipolar: O y N de las bases (forman puentes de H)


Carcter cido: Por la disociacin en solucin acuosa de los
grupos P. Esto hace que el ADN se encuentre cargado
negativamente a pH fisiolgico. Gracias a esto pueden
formar sales con metales, son cristalizables y son ms solubles
en agua.
Molculas de reserva energtica: Nuclesidos trifosfato son
los precursores de ADN y ARN con liberacin de pirofosfato.
Absorcin de la luz en el ultravioleta:
- El ADN tienen mxima absorcin a 260nm (por el carcter
aromtico) pero interfieren las protenas
- Las protenas tienen mxima absorcin a 280nm pero
interfiere el ADN
- Proporcin 260/280

Caractersticas F-Q de los nucletidos




Aplicacin de la absorcin de la luz en ultravioleta


Absortividad molar:

AMP=15.400 GMP=11.700 UMP=9.900 TMP=9.200 CMP=7.500

A260=

260.b.c C=A260/(260.b)

A260=Absorvancia a 260nm

260=Absortividad molar o coeficiente de extincin molar a 260nm


b=paso optico
c=concentracin molar

Caractersticas F-Q de los nucletidos




Una mezcla de nucletidos obtenida por hidrlisis de


una muestra de ADN posee una absorvancia a 260nm
de 0,547 en una cubeta de 1cm de paso ptico,
suponiendo que la composicin de ese ADN es
equimolar en los 4 desoxiribonucletidos, calcular la
concentracin milimolar de nucletidos en la mezcla.

AMP=15.400 GMP=11.700 UMP=9.900 TMP=9.200 CMP=7.500

Caractersticas F-Q de los nucletidos




Al tratarse de una mezcla equimolar el coeficiente


de extincin sera la media:

=(15400+11700+9200+7500)/4=10950 M-1cm-1


Luego: C=A260/(260.b)
c=0,547/(10950 M-1cm-1.1cm)=4,995.10-5M=
=0,05mM

Estructura del ADN: Estructura 1


Los fosfatos ligan el carbono 3 de la
pentosa de un nucletido con el
carbono 5 de la pentosa del nucletido
siguiente.

CADENA SIMPLE DE ADN ESTRUCTURA 1

Enlaces covalentes
3-5 fosfodiester

Estructura del ADN: Estructura 2


ESTRUCTURA B DEL DNA
o DOBLE HLICE

 Cadena doble
 Helicoidal

CHARGAFF: PROPORCIN DE A T y G C
FRANKLIN y WILKINS: DIFRACCIN DE RAYOS X
DE FIBRAS DE DNA; ESTRUCTURA DEBA SER
HELICOIDAL
WATSON Y CRICK
1953

MODELOS MOLECULARES

Estructura del ADN: Estructura 2




Tres reglas de Chargaff: A pesar de que la composicin de


bases vara entre las distintas especies en casi todas se cumplen
ciertas relaciones entre las bases.
- Relacin entre bases:
AT y GC
A/T T/A 1 y C/G G/C 1
- Relacin purinas y pirimidinas:
A+G T+C 50% ; (A+G)/(T+C) 1
- Relacin entre aminobases y oxobases
Si A/T = C/G = 1, tambin (A+C)/(T+G)=1
entonces: A+C = T+G (aminobases = oxobases)

Estructura del ADN: Estructura 2


Conclusiones de Watson y Crick


Dos cadenas de nucletidos helicoidales con giro a la


derecha  Doble Hlice Dextrgira con eje central (Cada
3,4 nm hay un residuo nucleotdico desplazado 36 respecto
al anterior por lo que cada 10 pb se da un giro de 360).

 Cadenas antiparalelas, corren en direcciones opuestas.


 Esqueleto azcar-fosfato-azcar.... al exterior.
 La separacin entre los esqueletos debe ser similar sin
que se vea afectada la naturaleza de las bases.
 Bases nitrogenadas proyectadas al interior.

Estructura del ADN: Estructura 2


Conclusiones de Watson y Crick
Unin de las bases nitrogenadas

G-C
Enlaces por
puente de H

Estabilidad y posibilidad
desnaturalizacin/renatural
izacion

A -T
 Temperatura
 pH
 Agentes desnaturalizantes

Estructura del ADN: Estructura 2




Cambios de pH afectan a la ionizacin de los


grupos funcionales de las bases nitrogenadas (N y
O) por lo que modifican las posibilidades de crear
puentes de hidrogeno.
Temperaturas de 80-90C
rompen los puentes de H

PCR: Tm = [2x(A+T) + 4x(G-C)]-5

Estructura del ADN: Estructura 2




Distintos factores que contribuyen a estabilizar la doble


hlice
- Puentes de hidrgeno entre las bases complementarias
estn presentes en gran cantidad, lo que permite
estabilizar la estructura secundara del ADN.
- Interacciones hidrofbicas entre las bases enfrentadas
de cada hebra.
- Cargas negativas de los grupos fosfatos que se
encuentran en el exterior de la molcula, interaccionan
con el agua, una molcula polar sin carga.

Estructura del ADN: Estructura 2


W-K

Conformaciones del DNA


ADN-A
Sentido de giro de la
Dextrgiro
hlice

30%
>10%
Deshidratacin
Afisiolgica:
poco
frecuente

Fisiolgica:
posible
papel en
regulacin
gnica.
Inestable

ADN-B

ADN-Z

Dextrgiro

Levgiro

Forma y tamao

Ms ancha y
corta

Intermedia

Ms estrecha y larga

Dimetro de la
hlice

2,55 nm

2,37 nm

1,84 nm

Unidad estructural

Par de bases

Par de
bases

Dos pares de bases

Pares de
bases/vuelta

11

10,4

12

Distancia entre
pares de bases

0,23 nm

0,34 nm

0,53 nm (GC) / 0,41 nm


(CG)

Paso de hlice o
vuelta completa

2,53 nm

3,54 nm

4,56 nm

Estructura del ADN superenrollado




El ADN se compacta mediante un enrollamiento de la doble hlice sobre s


misma, para dar lugar a fibras ms cortas y gruesas (ADN superenrollado)
- El ADN con grupos fosfatos cargados negativamente se asocia con
molculas cargadas positivamente para estabilizar su estructura. Estas
molculas pueden ser protenas denominadas histonas de pequeo tamao y
con una alta proporcin de aminocidos bsicos con carga positiva (lisina o
arginina)
- La doble hlice se va enrollando a intervalos regulares alrededor de un
complejo de histonas, dando lugar a los denominados nucleosomas.
- Cada nucleosoma, est formado por un segmento de ADN superenrollado
de unos 200 pares de bases sobre un octmero de histonas. Las histonas son
de cinco tipos: H1, H2A, H2B, H3 y H4. Un nuclesoma est formado por dos
molculas de las histonas H2A, H2B, H3 y H4. La histona H1 se asocia con el
ADN internucleosmico y favorece la aproximacin de nucleosomas
adyacentes.

Estructura del ADN superenrollado

Funciones del ADN


FUNCIONES DEL DNA: W-K (Revista Nature)
a) Almacn de informacin gentica: DNA es la
plantilla molecular que al copiarse define todos
los caracteres hereditarios o heredados a la
progenie.
b) Autoreplicacin y herencia: el DNA se debe
duplicar para poder transmitir los caracteres
hereditarios a las clulas hijas y, por tanto a la
descendencia.
c) Expresin del mensaje gentico: la informacin
gentica se expresa en forma de protenas, las
cuales realizan funciones en el organismo.

Ejercicios:
Artculos de Watson y Crick

UNIDAD 1.
INTRODUCCIN A LA BIOLOGA
MOLECULAR:
VARIACIONES DE LAS POBLACIONES NATURALES
GENOTPICA, FENOTPICA Y MENDELIANA

Biotecnologa
ambiental

Biologa Molecular y Gentica

Variaciones en las poblaciones




Se deben a variaciones en la secuencia del genoma


(polimorfismo gentico).
Cuando este polimorfismo afecta a regiones codificantes se
denomina polimorfismo gnico.
Pueden tener lugar en clulas germinales por lo que se
transmite a la descendencia y se denominara polimorfismo
hereditario.
Actualmente polimorfismo se define como existencia
simultnea en una poblacin de genomas con distintos alelos
para un locus determinado.
Los alelos son variaciones de la secuencia de ADN presente
en un locus o posicin definida en un cromosoma. Cada locus
en una clula diploide est ocupado por dos alelos, uno de
origen materno y otro de origen paterno (en cromosomas
homlogos).

Variaciones en las poblaciones




ALELO: Cada una de las formas de expresin de un gen. Un gen


puede modificarse mediante mutaciones que dan lugar a la aparicin
de dos o ms formas allicas. La ms abundante se denomina alelo
salvaje y las restantes alelos mutados.
GENOTIPO: Conjunto de genes que contiene un organismo heredado
de sus progenitores.
FENOTIPO: Es la manifestacin externa del genotipo, lo que vemos; es
decir, la suma de los caracteres observables en un individuo.
CARCTER GENTICO O HEREDABLE: Cada una de las caractersticas
de un individuo consecuencia de la actividad de sus genes (protenas
estructurales, enzimticas, etc.)
- Carcter cualitativo: presenta alternativas fciles de observar (ej:
semilla lisa o rugosa) reguladas por un nico gen que presenta varias
formas allicas.
- Carcter cuantitativo: presenta diferentes graduaciones entre dos
valores dos extremos (ej: nmero de guisantes en cada vaina)

Variaciones en las poblaciones


Anlisis gentico en Drosophila
1915: Morgan obtuvo mutantes de las mosca de la fruta

 1r mutante: ojos blancos vs wild type con ojos


rojos
 obtencin de 85 mutantes

 alteraciones espontneas en genes se heredan

Wild type

Las variaciones en las poblaciones son debidas a mutaciones. Las


mutaciones son necesarias para la evolucin y aparicin de nuevas
especies

mutante

Variaciones en las poblaciones


Entrecruzamiento y Recombinacin
Aunque los genes de un mismo cromosoma estan ligados, se vio
que los alelos de un mismo cromosoma no permanecen juntos
obligatoriamente cuando se forman los gmetos

Aparacin inesperada de rasgos genticos

Entrecruzamiento o recombinacin gentica


en meiosis

Variaciones en las poblaciones




De la parte codificante del genoma humano (unos 100000 genes)


solo una cuarta parte (unos 25000 genes) son polimrficos
(polimorfismo gnico)
- Variaciones sin efecto fenotpico (el ms comn):
No se altera la secuencia proteica (mutacin silenciosa).
La variacin ocurre en una regin de la
protena que no es esencial para su funcin
(mutaciones conservadoras)
- Variaciones con alteracin del fenotipo: La variacin en la
secuencia modifica a la protena afectando a su funcionalidad
Modificacin beneficiosa Evolucin
Modificacin perjudicial Polimorfismo patolgico o
deletreo

Variaciones en las poblaciones




En funcin de la gravedad en los efectos fenotpicos:


- Variaciones fenotpicas que no influyen en la
susceptibilidad a enfermedades (Altura, Color del pelo,
Grupo sanguneo).
- Variaciones fenotpicas que influyen de forma leve en
la susceptibilidad a enfermedades (rasgos morfolgicos
complejos)
- Variaciones fenotpicas que desempean un papel
importante en la aparicin de enfermedades
(hemoglobinas anormales)
Enfermedad gentica

Variaciones Mendelianas
Nacimiento de la Gentica: Gregor Mendel (1860)
Estudi:

- Material: plantas de guisantes


- Objetivos:
- cruzar plantas de guisante con diferentes caractersticas hereditarias
- determinar el patrn de transmisin
- Por qu el guisante? Diversidad de caractersticas

Variaciones Mendelianas
Nacimiento de la Gentica: Gregor Mendel (1860)
Conclusiones:
1. Caractersticas de plantas gobernadas por factores de herencia
(genes)
2. Cada clula contiene dos copias de cada gen (alelos) procedente de
cada progenitor. Un alelo domina (dominante) sobre el otro alelo
(recesivo)
3. Cada clula reproductiva (gmeto) tiene un solo alelo.

LEYES DE MENDEL:
1 Ley de la Uniformidad
2 Ley de la Segregacin Independiente
3 Ley de la Permutacin Independiente

Variaciones Mendelianas
1: LEY DE LA UNIFORMIDAD
Establece que si se cruzan dos razas puras para un determinado carcter, los
descendientes de la primera generacin son todos iguales entre s (igual
fenotipo e igual genotipo) e iguales (en fenotipo) a uno de los progenitores.

Variaciones Mendelianas
1: LEY DE LA UNIFORMIDAD
Tambin es vlida en el caso de la herencia intermedia

Variaciones Mendelianas
2: LEY DE LA SEGREGACIN INDEPENDIENTE
Establece que los caracteres recesivos, al cruzar dos razas puras, quedan ocultos en la primera
generacin, reaparecen en la segunda en proporcin de uno a tres respecto a los caracteres
dominantes. Los individuos de la segunda generacin que resultan de los hbridos de la primera
generacin son diferentes fenotpicamente unos de otros; esta variacin se explica por la
segregacin de los alelos responsables de estos caracteres, que en un primer momento se
encuentran juntos en el hbrido y que luego se separan entre los distintos gametos.

Variaciones Mendelianas
2: LEY DE LA SEGREGACIN INDEPENDIENTE

Los porcentajes son diferentes en el


caso de la herencia intermedia,
pero el fundamento de la 2 ley de
mendel de segregacin de los
alelos es tambin vlido

Variaciones Mendelianas
3: LEY DE LA PERMUTACIN/DISTRIBUCIN INDEPENDIENTE O
INDEPENDENCIA DE CARCTERES
Establece que los caracteres son independientes
unos de otros y se combinan al azar.
En la transmisin de dos o ms caracteres, cada
par de alelos que controla un carcter se
transmite de manera independiente de cualquier
otro par de alelos que controlen otro carcter en
la segunda generacin, combinndose de todos
los modos posibles.

Mendel no se interes en saber


dnde estn localizadas esos factores
de herencia ni cmo eran.

Variaciones Mendelianas: Pedigrees




Anlisis de pedigree es una


forma de anlisis gentico en
donde el genetista hace un
diagrama que muestra a un
individuo con una
caracterstica estudiada y
todos sus familiares
conocidos.
El pedigree indica la
presencia o ausencia de esta
caracterstica y si es
aplicable la variacin de
expresin de la misma.

Variaciones Mendelianas: Pedigrees

Las generaciones se suelen


identificar con nmeros romanos (I,
II, III, IV, V,)

Dentro de cada generacin se


identifican los individuos con
nmeros arbigos (1, 2, 3, 4, 5)

Variaciones Mendelianas
Patrones de herencia






Autosmico dominante
Autosmico recesivo
Ligado a X dominante
Ligado a X recesivo
Ligado a Y (holndrico)

II

Problemas
Si una planta homocigtica de tallo alto se cruza con una
homocigtica de tallo enano, sabiendo que el tallo alto es
dominante sobre el tallo enano, Cmo sern los genotipos
y fenotipos de la F1 y de la F2?

Problemas
El pelo rizado en los perros domina sobre el pelo liso. Una
pareja de pelo rizado tuvo un cachorro de pelo tambin
rizado y del que se quiere saber si es heterocigtico. Con
qu tipo de hembras tendr que cruzarse? Raznese dicho
cruzamiento.

Problemas
Una mariposa de alas grises se cruza con una de alas
negras y se obtiene un descendencia formada por 116
mariposas de alas negras y 115 mariposas de alas grises.
Si la mariposa de alas grises se cruza con una de alas
blancas se obtienen 93 mariposas de alas blancas y 94
mariposas de alas grises. Razona ambos cruzamientos
indicando cmo son los genotipos de las mariposas que se
cruzan y de la descendencia.

Problemas
Un ratn A de pelo blanco se cruza con uno de pelo negro
y toda la descendencia obtenida es de pelo blanco. Otro
ratn B tambin de pelo blanco se cruza tambin con uno
de pelo negro y se obtiene una descendencia formada por
5 ratones de pelo blanco y 5 de pelo negro. Cul de los
ratones A o B ser homocigtico y cul heterocigtico?
Razona la respuesta.

Problemas
Se cruzan tomates rojos hbridos y de tamao normal
homocigticos con la variedad amarilla enana. Qu
proporcin de los tomates rojos que salen en la F2 sern
enanos? (Los alelos dominantes son color rojo y tamao
normal).

Problemas
La siguiente genealoga corresponde a cobayas. El negro
corresponde a pelo rizado y el blanco a pelo liso. El
cuadrado significa macho y el crculo significa hembra.

Determina qu carcter es dominante y cul recesivo.


Determina si es un carcter ligado al sexo.

Problemas
El alelo recesivo r de un gen es la causa principal del color rojo del cabello en la especie
humana. El cabello oscuro se debe al alelo dominante R. En el pedigr mostrado a
continuacin asuma, a menos de que haya evidencia de lo contrario, que los individuos
que se casan con los miembros de esta familia no son portadores del alelo r. Calcule la
probabilidad de que un hijo de estos matrimonios tenga el pelo rojo:
a) III-3 x III-9. b) III-4 x III-10. c) IV-1 x IV-2. d) IV-1 x IV-3.
Los smbolos negros representan cabello rojo; los smbolos blancos, cabello oscuro.

Problemas
En el siguiente pedigr se presenta la transmisin de dos caracteres en una sola familia.
El carcter 1 se indica sombreando la mitad superior del smbolo y el carcter 2 se
indica sombreando la mitad inferior. Utilizando smbolos alfabticos para los genes
implicados (por ejemplo A/a para el carcter 1 y B/b para el carcter 2) responder a
las siguientes preguntas:
a) Qu tipo de herencia se halla implicado en cada uno de los caracteres?
b) Determinar hasta donde sea posible los genotipos de todos los individuos de la
genealoga
c) Qu genotipos y fenotipos y qu proporciones se esperaran en el apareamiento
entre los individuos IV-3 y IV-5?

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