Tecnologa de ADN Recombinante:

Tcnica para aislar un gen e insertarlo en el ADN de otro organismo. Llamada tambin Ingeniera gentica,
divisin gentica o modificacin gentica.
Introduccin
Durante muchos aos la ingeniera gentica se bas en una visin en que los cromosomas eran cadenas
estticas de ADN y protenas. Se estimaba que los genes se activaban o se desactivaban segn las seales
externas que reciban. Si a un cromosoma se le inyectaba un gen nuevo, ste se transformara usualmente en
una protena. La presencia o la actividad de esta protena influira en la clula, el tejido o el organismo.
En aos recientes, ha quedado en claro que los cromosomas no son tan rgidos como se pens al principio.
Ciertas partes de los cromosomas son muy activas o inactivas dependiendo de la estructura tridimensional y la
modificacin molecular de dichas partes. Algunos de los materiales genticos son an capaces de insertarse en
otro lugar del cromosoma ("transposones" o "elementos mviles").
La actividad de estas protenas no se puede predecir slo basndose en su estructura qumica o en la de sus
componentes, su "secuencia de aminocidos". Es clave como el plegamiento de la protena logra finalmente
su estructura tridimensional. Las protenas Prion son un ejemplo extremo donde el mutante( patgeno) y las
formas normales del Prion tienen una secuencia de aminocidos idnticas, pero parece que tienen estructuras
tridimensionales distintas, las que condicionan un comportamiento diferente.
Muchas caractersticas de las clulas y de los organismos son consecuencia de la compleja interaccin de una
diversidad de genes, protenas (productos de expresin de estos genes) y del medio ambiente de la clula u
organismo. La forma en que los genes son traducidos a las caractersticas es difcilmente entendida. Cuanto
ms sabemos acerca de los genes, menos simple parece su comportamiento.
Los factores mencionados anteriormente, tienen una influencia potencial sobre el proceso de ingeniera
gentica. El lugar de insercin, por ejemplo, influye sobre la cantidad de la protena derivada del gen.
Hay un nmero creciente de investigadores que ponen el acento en los lmites del "pensamiento gentico".
Ellos proponen un enfoque que tome ms en cuenta los "factores epigenticos", tales como, los complejos
sistemas celulares y fisiolgicos o los niveles de organizacin .
En un campo de la ciencia en los cuales muchos de los mecanismos son an un misterio, se necesita gran
cautela. Por eso, los expertos de los consumidores creen que se debe aplicar el principio de la precaucin. Este
principio dice, que si hay alguna incertidumbre en torno a la seguridad de un APIG, es preferible no poner a
las personas en riesgo, en vez de esperar a que se obtengan suficientes evidencias cientficas. En
consecuencia, el APIG en particular no debe quedar disponible para el consumo. Toda excepcin a esta regla
general puede aceptarse slo en circunstancias muy especficas.
Farmacogenmica
En esta lnea de aplicaciones prcticas de los hallazgos genticos, William Evans y Mary Relling, del
Departamento de Ciencias Farmacuticas del Hospital Infantil Saint Jude, en Memphis, Tennessee, han
realizado un trabajo de revisin sobre el diseo de frmacos a medida o especficamente creados para las
caractersticas genticas de cada paciente. Evans y Relling indican que las diferencias genticas entre las
personas pueden provocar respuestas diferentes al mismo medicamento. En algunos casos, la eficacia del
frmaco aumenta o disminuye, y en otros, incluso puede ser txico con determinadas dosis.
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Los autores del trabajo ilustran con un ejemplo cmo la farmacogenmica puede marcar un cambio radical en
el diseo tradicional del frmaco, para desarrollar medicamentos siempre seguros y eficaces. En el caso de la
leucemia linfoblstica aguda, ya se sabe que los polimorfismos genticos en los frmacos que metabolizan
enzimas pueden actuar significativamente sobre la toxicidad y la eficacia de los medicamentos administrados;
tambin se ha establecido que el genotipo de estos linfoblastos constituye una importante variable pronstica,
til para guiar la intensidad del tratamiento.
Asimismo, la susceptibilidad del organismo para los patgenos se observa a travs de ciertos elementos
genmicos, como las citocinas. Colocando todos estos datos moleculares en un chip, se obtendra informacin
para seleccionar la terapia ms apropiada de forma rpida y objetiva.
Adems de beneficiar a la biomedicina, toda esta informacin gentica se podr aplicar a otros campos, como
la medicina veterinaria o el estudio de la evolucionhumana.
El desarrollo de modernos frmacos es un proceso complejo. El primer paso es la identificacin de un objetivo
molecular adecuado para la accin del frmaco. Esto requiere una revisin de las innumerables posibilidades
sugeridas a partir de los resultados de la secuenciacin gnica, por ejemplo, del Proyecto Genoma Humano.
La validacin tiene por objetivo estudiar la relacin entre una secuencia determinada y ciertas enfermedades
especficas. Despus es necesario aclarar cmo se regula la actividad de la secuencia gnica, su importancia
fisiolgica y la interaccin de los productos que codifica. Los avances en genmica (el anlisis sistemtico de
todo un genoma) terminarn permitiendo la identificacin de los principios genticos de la mayor parte de
fenotipos patolgicos y no patolgicos. Tambin redefinirn la comprensin y las definiciones tradicionales
de las enfermedades.
A medida que las herramientas para identificar y comprender las enfermedades se van haciendo ms
sofisticadas y precisas, est claro que tambin se tienen que ofrecer tratamientos ms especficos. Es necesario
desarrollar frmacos que sean lo suficientemente precisos como para incidir en un nico gen de una familia de
genes, de lo contrario, `se crea un martillo piln en vez del lser que sera necesario' .
La farmacogenmica tiene por objeto explorar la respuesta de los pacientes ante los nuevos frmacos y hace
de puente entre el descubrimiento de genes y el desarrollo de frmacos
La farmacogenmica tiene por objeto explorar si los pacientes responden a los nuevos frmacos y cmo.
Pretende hacer de puente entre el descubrimiento de genes y el desarrollo de frmacos y es de aplicacin
inmediata en los estudios clnicos de los frmacos ya existentes. El rpido desarrollo de la informacin y la
tecnologa est estimulando un enorme progreso en este campo. Un resultado importante de la investigacin
en esta rea es el desarrollo de pruebas diagnsticas que ayudan a identificar el frmaco adecuado para un
individuo en particular.
Las ventajas de tales anlisis son obvias: los pacientes evitan exploraciones para encontrar el mtodo de
tratamiento ptimo que suponen riesgo, son dolorosas y suelen ser largas. Un anlisis rpido contribuye a
evitar efectos secundarios perjudiciales. El descubrimiento y anlisis sistemtico de la variedad gentica en la
respuesta a los frmacos tambin debera dar lugar a un desarrollo farmacolgico ms rentable. Dado que el
80% de los compuestos fracasan en los ensayos clnicos y que la industria gasta entre 500 y 700 millones de
dlares para aprobar un nuevo frmaco, podran obtenerse considerables beneficios La prescripcin basada en
un instrumento rpido y preciso de identificacin de enfermedades podra tambin reducir los costes de los
tratamientos. "Con este avance en tecnologa molecular y las implicaciones financieras de los resultados
obtenidos, realizar el genotipo de los pacientes antes de prescribir ciertas terapias farmacolgicas es probable
que se convierta en algo habitual".
El National Institute for Health de Estados Unidos ya ha puesto en marcha un programa de 36 millones de
dlares para detectar polimorfismos de nucletidos nicos, los denominados SNPque se pueden utilizar para
caracterizar la respuesta a los frmacos, la sensibilidad a las enfermedades y para estudiar la gentica de
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poblaciones.
Nuevos enfoques teraputicos
La mayor parte de los frmacos teraputicos sufre un proceso de biotransformacin que tiene lugar, por
ejemplo, en el hgado. De forma tpica, en un proceso que consta de una o dos etapas, las enzimas transforman
las molculas lipfilas del frmaco en un metabolito ms hidrosoluble, que habitualmente representa la forma
activa del frmaco. Estos metabolitos posteriormente se metabolizan y se eliminan del organismo.
La mayor parte de los frmacos son eliminados del organismo por el hgado, donde las enzimas los
transforman en metabolitos que se pueden excretar. Las diferencias en la dotacin gentica pueden introducir
variaciones en estos enzimas y en la forma en la que cada individuo metaboliza el frmaco
Esta ruta idealizada, como depende de la actividad de los biocatalizadores, viene determinada por parmetros
genticos. Pequeas diferencias o mutaciones en la dotacin gentica, los denominados polimorfismos,
pueden producir modificaciones en los enzimas que codifican. Estas modificaciones pueden ser despus las
responsables de la actividad enzimtica alterada; el genotipo determina el fenotipo.
Se han descrito tres fenotipos diferentes de respuesta a los frmacos .
Metabolizadores extensivos, que representan la poblacin `normal'.
Metabolizadores lentos, que muestran poca o nula capacidad de metabolizacin de un frmaco.
Metabolizadores ultraextensivos, que metabolizan un frmaco mucho ms deprisa que la poblacin
`normal'.
Tanto los metabolizadores lentos como los ultraextensivos muestran concentraciones plasmticas anormales
del frmaco y sus metabolitos. Los que no son capaces de metabolizarlos pueden acumular dosis elevadas, que
pueden ser txicas. Los metabolizadores ultraextensivos no suelen mostrar respuesta clnica en absoluto
debido a su tendencia a eliminar los frmacos del organismo antes de que puedan hacer efecto.
Los anlisis bioqumicos permiten examinar el fenotipo del paciente. Pero estas pruebas, que determinan la
tasa de metabolizacin de un frmaco, son complicadas y a menudo no se puede excluir el riesgo de
reacciones adversas al frmaco. Las condiciones externas, como las interacciones medicamentosas o el
proceso general de la enfermedad, pueden influir y distorsionar la prueba.
Los anlisis genticos no tratan de detectar los sntomas de una alteracin gentica. Pretenden detectar la
propia alteracin gentica para, a partir de ella, poder extrapolar conclusiones sobre el fenotipo
Los anlisis genticos pueden evitar este problema. No pretenden detectar los sntomas producidos por una
alteracin gentica, sino detectar la propia alteracin gentica. En un proceso posterior, esta informacin se
puede utilizar para extraer conclusiones sobre el fenotipo.
Un nuevo camino para la medicina personalizada
Por ahora, el estudio del genotipo slo se realiza en investigacin. No obstante, muchas empresas estn
desarrollando anlisis genticos con fines farmacolgicos. En su revisin de las implicaciones clnicas de
frmacos basadas en diferencias genticas, David Prows de la Universidad de Cincinnati estima que el estudio
del genotipo se va a convertir en una herramienta aceptada en los prximos cinco aos.
La posibilidad de estudiar el genotipo de los pacientes para estimar el riesgo de reacciones adversas a los
frmacos podra preparar el terreno para un modelo de asistencia sanitaria ms centrado en el paciente. Los
mtodos y ensayos desarrollados por la farmacogenmica harn posible la identificacin de grupos de
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pacientes que reaccionarn positivamente a los frmacos prescritos. Se identificarn frmacosdiana segn las
enfermedades y se utilizarn para "desarrollar frmacos extremadamente eficaces y ampliamente tolerados,
que se puedan prescribir a una poblacin lo ms amplia posible. Los nuevos productos farmacuticos se
podran comercializar junto con el equipo para realizar la correspondiente prueba diagnstica, de forma que
sea posible la prescripcin selectiva del frmaco".
.
La denominada `medicina personalizada' supondr el desarrollo de frmacos mucho ms a la medida, que
irn acompaados del equipo para realizar el anlisis gentico con el fin de permitir la prescripcin selectiva
Junto con los nuevos avances en anlisis de protenas, en los que ser posible analizar miles de muestras de
forma simultnea, se pueden prever nuevos enfoques integrados en cuanto a diagnstico. Las nuevas
tecnologas de fabricacin y los avances en la automatizacin servirn de apoyo a mejoras en el diagnstico.
Las tecnologas de miniaturizacin y microfabricacin harn que este nuevo tipo de biosensor sea adecuado
para la automatizacin o incluso para su implantacin en el organismo humano. Esta ltima posibilidad
permitir la vigilancia en lnea de los pacientes de alto riesgo. Con el fin de detectar las pequesimas
diferencias en el genoma humano, responsables de enfermedades o de la variabilidad en la respuesta a los
frmacos, pronto habr microchips en el mercado, los denominados chips SNP. Definitivamente "marcarn el
comienzo de una medicina personalizada".
Las tecnologas de miniaturizacin y microfabricacin permitirn la comercializacin de nuevos tipos de
biosensores para vigilar a los pacientes de riesgo y comprender el papel de las pequesimas diferencias en
el genoma humano
Se estima que cada ao se gastan en Estados Unidos entre 1.600 y 4.200 millones de dlares en el tratamiento
adicional de las reacciones adversas, y que en 1994 pueden haber sido la causa de unas 100.000 muertes. Los
anlisis genticos podran ayudar al mdico a evitar algunos de estos riesgos y as el tratamiento de los
pacientes sera ms efectivo. Los anlisis de este tipo tambin garantizaran a los pacientes una mayor
informacin para ayudarles a tomar decisiones que afectan a su salud. Tales tecnologas y procedimientos
evitarn las medidas de ensayo y error a largo plazo y pueden reducir enormemente los costes y los riesgos.
Antes de administrar un nuevo frmaco se podra reconocer al paciente, e incluso durante el tratamiento. Esto
podra, por tanto, fortalecer el papel de la atencin primaria, dado que un diagnstico ms preciso puede
reducir la necesidad de consultar a los especialistas.
En Estados Unidos, estos modelos de atencin sanitaria dirigida se han previsto para el ao 2008 e incluyen:
perfil gentico y farmacogenmico, para identificar personas con riesgo de padecer enfermedades
graves a causa de su predisposicin gentica
diagnstico, como complemento y apoyo a los anlisis genticos
tarjetas inteligentes para almacenar la informacin sobre el paciente
aplicaciones de las bases de datos a la investigacin, el desarrollo y la atencin sanitaria
asesoramiento en gentica clnica
protocolos eficientes de gestin de las enfermedades destinados a la terapia profilctica, la
modificacin de los hbitos de vida y la vigilancia.
Aunque este modelo parece estar bastante hecho a la medida del mercado sanitario de Estados Unidos,
algunos aspectos podran aplicarse tambin a los sistemas sanitarios europeos. La biotecnologa, la
microtecnologa, la nanotecnologa y las tecnologas de la informacin impulsarn nuevos avances en el
diagnstico y el tratamiento de las enfermedades.
Sin embargo, a pesar de las prometedoras tendencias beneficiosas que se prevn en el rea de la
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farmacogenmica y la capacidad de personalizar tratamientos y frmacos, han surgido algunas cuestiones que
preocupan. Unas terapias y unos frmacos demasiado dirigidos pueden hacer que la medicina y la farmacia se
alejen de su objetivo, que es encontrar tratamientos para tanta gente como sea posible: la farmacogenmica no
se debera utilizar para seleccionar a la gente que es `genticamente correcta' para las medicinas que los
laboratorios farmacuticos quieren vender .
La farmacogenmica no se debera utilizar para seleccionar a la gente que es `genticamente correcta' para
las medicinas que los laboratorios farmacuticos quieren vender
Esta tendencia sera preocupante. Sera una fuente de nuevas enfermedades "raras", y posiblemente dara
origen a la "discriminacin teraputica" de los pacientes con enfermedades y genotipos caros de tratar.
Otros expertos, no obstante, piensan que estos temores son infundados. Sostienen que tanto el genoma como
las enfermedades de los seres humanos son lo bastante polimrficos como para que esos procesos tengan
pocas posibilidades de producirse. El desarrollo de productos nicho para estos mercados podra ser un
mercado interesante para las PYME, dado un marco legal adecuado que respetara la propiedad intelectual.
En Estados Unidos, la presin ejercida por los pacientes dio origen en 1983 a la Ley sobre Frmacos
Hurfanos, para estimular su desarrollo, ya que la industria, por razones econmicas, no puede desarrollar
estos frmacos sin incentivos. En 1999, el Parlamento Europeo aprob, en primera lectura, el Reglamento
Europeo sobre productos medicinales hurfanos, que puede entrar en vigor a mediados del ao 2000 en los
estados miembros de la UE. Dada la importancia atribuida a las enfermedades raras, se obtendr un elevado
nmero de frmacos hurfanos, pero adems, tambin se podr entender mejor el origen gentico de muchas
enfermedades ms frecuentes
.
La informacin producida por los anlisis farmacogenmicos, aunque sea potencialmente valiosa para el
tratamiento mdico, tambin se puede utilizar fuera de contexto para fines contrarios a los intereses de los
pacientes
La capacidad para detectar diagnsticamente el perfil gentico y la predisposicin de las personas a ciertas
enfermedades producidas por contaminantes medioambientales o relacionados con el puesto de trabajo, por
ejemplo, hace surgir la cuestin de la confidencialidad de estos datos y de la posible obligacin de revelarlos a
las compaas de seguros de vida o a terceros. Los dos ejemplos siguientes muestran que la comunicacin
incluso de una informacin inicialmente inocua puede a la larga tener consecuencias de gran alcance:
Se sabe que algunas personas son "acetiladores lentos". Los acetiladores lentos sufren reacciones
adversas ante ciertos anestsicos utilizados en ciruga. Estas reacciones adversas pueden ser graves o
incluso mortales. Para los pacientes y los mdicos, un anlisis gentico que determine el riesgo de
reaccin adversa es, por tanto, muy til y puede salvar la vida. Pero al mismo tiempo, las compaas
de seguros tambin pueden estar interesadas en los resultados del anlisis. Se sabe que las mujeres
"acetiladoras lentas" en ciertas circunstancias tienen mayor riesgo de padecer cncer de mama .
El estudio del genotipo del gen "apoE" muestra otro ejemplo de este tipo de implicaciones cruzadas.
El gen "apoE" codifica una protena implicada en el metabolismo del colesterol. La ingesta de
colesterol y su correcto metabolismo estn directamente relacionados con el riesgo de sufrir
enfermedades cardiovasculares. Por tanto, estudiar los genotipos "apoE" tiene una importancia
diagnstica para su deteccin, sobre todo en la evaluacin del riesgo de enfermedad arterial coronaria.
Sin embargo, tambin existen algunas pruebas de que los portadores de cierto tipo de alelo "apoE"
tienen un mayor riesgo de padecer la enfermedad de Alzheimer.

Epigentica
La genmica comparativa es una de las subespecialidades que han surgido en torno a la gentica; otra, an
menos conocida, es la epigentica, a la que Alan Wolffe, del Laboratorio de Embriologa Molecular del
Instituto Nacional de Desarrollo Humano, en Bethesda, ha dedicado un artculo en este informe de Science. El
principal objeto de estudio de esta rama se centra en los cambios de la expresin gentica que acaecen sin que
aparezca una transformacin en la secuencia de ADN; as, si el gen no aparece, es lo que se denomina gen
silencioso.
Los mecanismos epigenticos sirven a las plantas y animales para proteger sus clulas de la invasin de los
parsitos: por ejemplo, los virus no pueden infectar las clulas porque no logran copiar su propio ADN dentro
del genoma celular. El estudio de estos genes silenciosos ayudar a entender mejor las funciones de muchos
de los genes que se acaban de identificar.
Qu pasar con toda esta informacin sobre los genomas? Las declaraciones de Francis Collins, director del
Proyecto Genoma Humano, sobre el libre acceso de la secuenciacin completa, pretendan eliminar
desconfianzas, pero ms eficaz resulta el esfuerzo en el que acaba de embarcarse el Instituto Nacional del
Proyecto Genoma Humano, para recopilar los genes que ya se conocen en una coleccin gentica mamfera,
que han anunciado que pronto saldr publicada.
ACTUALIDAD Y FUTURO DE ADN RECOMBINANTE.
Esta tcnica para aislar un gen e insertarlo en el ADN de otro organismo es la base de la ingeniera
gentica. En los ltimos aos el desarrollo de la gentica avanz a pasos agigantados , muchos investigadores
se dedicaros al estudio del genoma huma (PROYECTO GENOMA ) este avance se inicio primero con
manipuleo de vegetales , ahora se utilizara en : prevencin de enfermedades hereditarias , utilizacin para la
fabricacin de frmacos adecuados, preservar ADN de animales en peligro de extincin etc. Un problema para
es avance es la no autorizacin de algunos pases para la investigacin , la oposicin de la religin Catlica (
no jugar a ser Dios ) pero a pesar de esto los estudios continuaran y auque parezca utpico talvez se cree
personas con determinados rasgos como por Ej. Hbiles solo para en deporte , coeficiente intelectual alto , un
padre podr elegir con que facultades quiera que sea su hijo , pero como se menciono esto es en un futuro.