UMSNH/ MICROBIOLOGIA / Jessica Hinojosa Chvez

Mycobacterium
Caractersticas generales:

Bacilos aerobios inmviles y no esporulados.

Pared celular rica en lpidos lo que les confiere: resistencia frente a muchos desinfectantes
resistencia a los antibiticos antibacterianos frecuentes, antigenicidad, formacin de
agregados y resistencia a tinciones habituales.
No captan fcilmente los colorantes pero una vez teidas resisten la decoloracin por
cido o alcoholBAAR
Se conocen >125 especies. 100 asociadas a enfermedad en el S.H, las ms comunes son:
M. tuberculosis, M. leprae, complejo M. avium, M. kansasii, M. fortuitum, M. chelonae y M.
abscessus. // Obtienen energa de la oxidacin de muchos compuestos simples de
carbono.
La mayora de las micobacterias crecen lentamente in vitro y se dividen cada 12 a 24 hrs.

Las micobacterias se clasifican en funcin de:

*Mycobacterium leprae no puede ser cultivado in vitro

Su capacidad de acidorresistencia

o
o

La presencia de cidos miclicos

Un elevado contenido (61%-71%) de guanina+citosina (G+C) en su ADN.

Estructura:
+Componentes lipdicos: 60% del peso de la pared celular.
o
o

Membrana plasmtica

(A)

se anclan protenas: *mansido de fosfatidilinositol

*lipoarabinomanano (LAM)(D)
Capa
de
peptidoglucano
(B)
esqueleto
bsico
al
que
se
unen:
*arabinogalactanos(C) (PSC formados por D-arabinosa y D-galactosa) . El residuo terminal
de D-arabinosa se esterifica para dar lugar a *cidos miclicos(F) hidrofbicos a los
que se anclan mol. de glucolpidos de sup. (G) Tambin hay otros lpidos, glucolpidos
y peptidoglucolpidos.
+Protenas transportadoras
y porinas: (E) 15%
Las protenas constituyen antgenos
importantes estimulando la respuesta
inmunitaria celular del paciente frente
a la infeccin. Se usan preparaciones
parcialmente purificadas de estos
derivados
proteicos
(derivados
proteicos purificados o PPD) como
pruebas de reactividad cutnea para
determinar
la
exposicin
a
M.
tuberculosis.
Se
han
empleado
preparaciones similares de otras
micobacterias
como
reactivos
especficos cutneos.
Clasificacin:

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Complejo
tuberculoso:
o M. tuberculosis
o M. bovis
o M. africanum

MTB: Carece de pigmento,

crece de 4-6 semanas,
produce catalasa, niacina,
reduce nitratos, sensible al
calor, sensible a isoniazida,
MOTT: Runyon las clasifico
en base a su capacidad
para
producir
pigmentaciones
en
presencia o ausencia de
luz, y su velocidad de
crecimiento in vitro en
medios de cultivo.

El aislamiento de los
microorganismos de crecimiento lento (p. ej., Mycobacterium tuberculosis, Mycobacterium
avium-intracellulare [complejo Mycobacterium avium], Mycobacterium kansasii) puede
necesitar entre 3 y 8 semanas de incubacin, mientras que las micobacterias que crecen
rpidamente (p. ej., Mycobacterium fortuitum, Mycobacterium chelonae, Mycobacterium
abscessus) necesitan una incubacin de al menos 3 das.

Mycobacterium tuberculosis:

A la tuberculosis a lo largo de la historia se le ha llamado: Consuncin, tisis, mal del rey,

peste blanca o plaga blanca.
Bacilo descrito en 1882 por Koch. Se revela por primera vez el causante de la tuberculosis.
Familia Mycobacteriaceae
Orden Actinomycetales
Miden 0.4x3 m
Patgeno oportunista
La mayor tensin de CO2 intensifica la proliferacin.
La tcnica de Ziehl-Neelsen se emplea para la tincin e identificacin de BAAR.
Tiempo de generacin: 16-20h.

ESTRUCTURA:
o

Lpidos:
A. cidos miclicos El dipptido muramilo (proveniente del peptidoglucano) en
complejo con cidos miclicos puede hacer que se formen granulomas.
B. Fosfolpidos: LAM, inducen la necrosis caseosa.
C. cidos grasos
D. La virulencia de las cepas depende de la formacin de cordones -> factor de
cordones -> trehalosa 6,6-dimicolato -> formado por: peptidoglicano (PG),
arabinogalactano (AG) y micolatos. Su naturaleza qumica favorece la inflamacin
crnica y ocasiona la formacin de granulomas en el pulmn. Inhibicin de la fusin
de los lisosomas con los fagosomas en los macrfagos, fenmeno clave para la
supervivencia de este m.o en las cl.

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Protenas: Responsables de las caractersticas antignicas de la bacteria, junto con los
glicolpidos.
Polisacridos: Inducen el tipo de hipersensibilidad inmediata. Protegen a la bacteria de lisis
por el complemento. *PG-> molcula estructural. *Polmeros de arabinosa

o
o

3) Membrana
plasmtica: Los
derivados de los
fosfolpidos se
carac. por estar
altamente
glicosilados dando
lugar a mol. como el
*LAM
2) Pared celular:
Elevado contenido
en lpidos->
carcter hidrofbico.
Barrera constituida
por: *cidos
miclicos
(de 7090C)
*arabinogalactano
*peptidoglucano

1) Cpsula (capa
externa): Sirve de
proteccin contra
agentes externos,
se compone de:
*cido miclico y
*glicolpidos

EPIDEMIOLOGA:

Universal; 1/3 de la poblacin mundial infectada por este microorganismo. Solo una
pequea proporcin de los infectados enfermar de tuberculosis, aprx. 10-15%.
OMS-> 2 causa mundial de mortalidad, despus del SIDA, causada por un agente
infeccioso.
Predomina en condiciones de hacinamiento y bajas condiciones socioeconmicas.
Hay 8,8 millones de casos cada ao y 2 millones de muertes.
La enfermedad es ms frecuente en el sudeste asitico, frica, subsahariana y el este de
Europa.
Poblacin con mayor riesgo de padecer la enfermedad: pacientes inmunodeprimidos
(princ. los infectados por VIH), desnutricin, alcohlicos, fumadores (se calcula que ms
del 20% de los casos de tuberculosis son atribuibles al hbito de fumar) y adictos a
drogas, vagabundos y aquellos expuestos a individuos infectados. Hay tambin cierta
influencia de la edad, el riesgo alto se observa en la lactancia y en la senectud.

PATOGENIA E HISTOPATOLOGA:
DEFINICIN DE TUBERCULOSIS: Enfermedad pulmonar crnica causada por
bacterias del complejo MTB. Esta enfermedad suele asentar en los pulmones, pero en
33% de los casos afecta a otros rganos.

En el 95% de los casos la va de transmisin es area: gotitas de flgge o expectoraciones;

al ser inhalados pueden depositarse en los alvolos y una vez ah el sistema inmunitario
del hospedador reacciona, posteriormente las micobacterias comienzan a multiplicarse en
el int. de los macrfagos (unos macrfagos si destruyen al m.o y otros son destruidos por

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l). Tambin puede transmitirse por ingestin de alimentos contaminados, por contacto
directo: ocupacional y congnito (poco conocido).
Periodo de incubacin: Desde el momento de la infeccin hasta que aparece la lesin
primaria o una reaccin tuberculinica significativa es de 4 a 12 semanas aprx.
El foco pulmonar inicial se encuentra en los campos pulmonares medios o inferiores,
donde los bacilos tuberculosos se pueden multiplicar libremente. Se activa la inmunidad
celular del anfitrin, y cesa la replicacin de las micobacterias en la mayora de los
pacientes entre 3 y 6 semanas despus de la exposicin al microorganismo.
Del 5 al 15% desarrolla la enfermedad.

1-2

meses despus de la exposicin->

pulmones ->lesiones patgenas
la infeccin que pueden ser de dos

de
tipos:
o Tipo exudativo: Consiste en reaccin inflamatoria aguda. Suele desaparecer si la
carga antignica es pequea, pero cuando la concentracin bacteriana es elevada,
la respuesta inmunitaria celular da lugar a necrosis tisular o finalmente
transformarse en l. productiva. Esta lesin totalmente desarrollada es un
granuloma crnico compuesto de zona central (con gdes. cel. gigantes multinucleadas
que contienen bacilos tuberculosos), zona media (cl. epiteloides) y zona perifrica (de
fibroblastos, linfocitos y monocitos).

*Esta lesin en el pulmn se asemeja al cuadro de neumona bacteriana.

Tipo productivo: Se forma un tubrculo caseoso porque en el granuloma surge
tejido fibroso perifrico y su zona central presenta necrosis caseosa. El tubrculo
puede romperse y vaciar su contenido (secrecin caseum) en un bronquio y
formar una cavidad que ms adelante cura por fibrosis o calcificacin.

La gnesis, desarrollo, curacin o evolucin de las lesiones dependen principalmente

del nmero de micobacterias en el inculo y su multiplicacin ulterior, y el tipo de
hospedador. (Factores del anfitrin implicados en este proceso: toxicidad de las
citocinas, la activacin local de la cascada del complemento, la isquemia y la
exposicin a enzimas hidrolticas generadas por los macrfagos y a productos
intermedios reactivos del oxgeno)

Propagacin del m.o en el hospedador: En la infec. primaria (primoinfeccin) los

bacilos tuberculosos se propagan desde el sitio inicial por medio de vasos linfticos a
ganglios linfticos que posteriormente llegan a corriente sangunea para transportarlos a
todos los rganos (distrib. miliar). La invasin a corriente sangunea tambin puede ser
por un tubrculo caseificado que erosionan una vena.

HN

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Sitios
intracelulares
de
proliferacin: En el int. de
monocitos, cl. RE y cl. gigantes.
Esta loc. intracelular es la que
dificulta la quimioterapia facilitando
la persistencia microbiana.

PRIMOINFECCIN
REACTIVACIN:

Cuando hay contacto por primera

vez (tuberculosis primaria) se
observan los signos:
o Surge
lesin
exudativa
aguda
que
se
propaga
rpidamente
a
vasos
y
ganglios linfticos. Complejo
de Simon.
o El ganglio linftico experimenta caseificacin masiva y comnmente termina
calcificado (lesin o complejo de Ghon).
o La prueba con tuberculina adquiere carcter positivo.
Hay una hipersensibilidad inducida por la primera
infeccin y por tanto posteriormente se presenta la
tuberculosis por reactivacin o tuberculosis
secundaria caracterizada por lesines crnicas en
tejido, formacin de tubrculos, caseificacin y fibrosis.
Ataque mnimo de ganglios linfticos. Casi siempre
comienza en el vrtice del pulmn donde la tensin de
oxgeno alcanza su mximo.

CUADRO

CLNICO:

Sntomas:
Fatiga,
debilidad,
adelgazamiento, fiebre y diaforesis princ.
nocturna.
La afeccin de los pulmones origina tos
crnica, primero tos seca irritativa y
posteriormente tos con expectoracin y
hemoptisis, que surgen comnmente en
lesiones avanzadas.
Tuberculosis
extrapulmonar.Tuberculosis
miliar:
Diseminacin
por
corriente
sangunea, en donde hay lesines en muchos rganos ocasionando distintas patologas y
complicaciones en algunos casos:
o Tuberculosis pleural: Las lesiones de la pleura son frec. en la tuberculosis primaria y
se deben a la penetracin de algunos bacilos tuberculosos al espacio pleural.
o Tuberculosis genitourinaria: Causando pielonefritis. Representa alrededor del 15% de
todos los casos de TBC extrapulmonar, puede afectar a cualquier tramo del aparato
genitourinario y suele deberse a la siembra hematgena que sigue a la infec.
primaria.

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Tuberculosis osteoarticular: Causando artritis u osteomilelitis.
Meningitis tuberculosa: Se debe a una diseminacin hematgena del BAAR. Se ha
descrito en 10-30% de pacientes del adulto con tuberculosis.
o Tuberculosis digestiva: Causando enteritis principalmente.
o Peritonitis tuberculosa: Aparece despus de una siembra directa de bacilos
tuberculosos procedentes de los rganos intraabdominales o de ganglios linfticos
rotos, bien a causa de siembre hematgena.
o Pericarditis
*** La meningitis o afeccin de las vas urinarias surgen a veces sin que se
manifiesten otros signos de tuberculosis.
DIAGNSTICO:
Imagenolgico:
o Radiolgico: Signos radiolgicos -> complejo
primario de Ghon se ve como una pequea zona
radiopaca, calcificacin de ganglios linfticos
radiopacos. Los ndulos de Simon son formaciones
nodulares apicales bilaterales y simtricas que
aparecen en periodos inmediatos a la primoinfeccin.
Hay presencia tambin de infiltrados de tipo nuboso
o moteado de estructura nodular, estas lesines
persisten durante unos meses y con frec. dejan como
residuo un pequeo gpo. de ndulos calcificados.
Enfermedad cavitaria, puede ser bilateral. La
cavitacin tpica es una zona radiolcida en el centro
con una pared radiopaca, localizada sobre todo en los
vrtices pulmonares (mayor PO2). Dependiendo de la
cavidad esta puede cicatrizarse y desaparecer, pero
cuando esta se fibrosa se puede prod. desviacin de
las estructuras vecinas y en otros casos se convierte en una bulla enfisematosa
pudiendo romperse y originar neumotrax. Pude observarse adems la presencia de
un tuberculoma, que se trata de un ndulo solitario, nico o mltiple, redondo u
oval, de 3-6cm de dimetro. La tuberculosis fibrocaseosa es la tisis comn del
adulto, afecta comnmente a los campos superiores, siempre es unilateral y su img.
no es uniforme ni homognea. La constituyen lesines inflamatorias + necrosis
+ cavernas. Su distrib. es lobulillar y su diseminacin siempre es broncgena. Las
cavernas tienen paredes gruesas y bien delimitadas.
o
o

TAC: Mayor sensibilidad que la Rx de trax. Ndulos de 2 a 3mm.

Mtodos diagnsticos de laboratorio:

o Muestras: Comprenden esputo recin expectorado, solucin de lavado gstrico,
orina, lquido pleural, LCR, liquido sinovial, material de biopsia, sangre u otros
productos sospechosos.
Algunas muestras, como las de esputo, se tratan inicialmente con reactivos
descontaminantes (p. ej., hidrxido de sodio al 2%) con el fin de eliminar los
microorganismos que pueden dar lugar a resultados confusos. Las micobacterias
pueden tolerar tratamientos alcalinos de corta duracin que destruyen las bacterias
de crecimiento rpido y permiten el aislamiento selectivo de las micobacterias. En
la expectoracin se solicitarn 3 muestras que pueden obtenerse mediante la
inhalacin de nebulaciones con solucin salina hipertnica lo cual facilita el
despegue de las secreciones bronquiales.
*Se tienen 3 tcnicas de coloracin para BAAR:

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Ziehl-Neelsen (coloracin en caliente): carbolfucsina, alcohol-cido y azul
de metileno.
Tcnica de Kinyoun (coloracin en fro): carbolfucsina, alcohol-cido y azul
de metileno.
Tcnica de fluorocromo auramina: auramina fenlica, alcohol-cido y
permanganato de potasio.(ms sensible)
Baciloscopa: Consiste en observar cierto nmero de campos microscpicos para
determinar el nmero de BAAR. Se estudia el esputo o exudado, otras muestras
como orina o material de lavado gstrico no se recomiendan por la probable
presencia de micobacterias saprfitas que alteraran los resultados.
A quines solicitar baciloscopas?
Personas consultantes como sintomticos
respiratorios.
Contactos de enfermos, que llenen en
criterio de sintomticos respiratorios.
Cultivo: Se debe incluir un medio no selectivo y
uno selectivo. Los selectivos contienen antibiticos
para evitar la proliferacin excesiva de bacterias y
hongos contaminantes. Se pueden utilizar:
Medio de agar semisinttico: Middlebrook
7H10 y 7H11, contienen sales definidas,
vitaminas, cofactores, cido oleico, albmina, catalasa y glicerol. Estos
medios se utilizan para observar la morfologa de las colonias, para evalular
la susceptibilidad, y si se les agrega antibiticos y verde de malaquita, sirven
como medios selectivos. Permiten la proliferacin de grandes inculos.
Medios de huevo espesado: Agar Lwenstein-Jensen, contienen sales
definidas, glicerol y sustancias orgnicas complejas como los huevos, harina
de papa, etc. Se incluye el verde de malaquita para
inhibir la proliferacin de otras bacterias. Hay
proliferacin en un plazo de 3 a 6 semanas. Si se les adicionan antibiticos,
actan como selectivos.
+Ambos agares se inoculan a 35-37C en CO 2 al 5-10%
incluso durante 8 sem.
Caldos (como medios): Middlebrook 7H9 y 7H12, permiten la proliferacin de
inculos pequeos. Si se agregan esteres
hidrosolubles de cidos grasos, humedecen la
superficie y permiten la proliferacin dispersa en el medio lquido. En estos es
ms rpida la multiplicacin de los m.o. por lo tanto es el ms sensible.
Si los cultivos son negativos, pero la tincin para BAAR positiva o si se sospecha la
presencia de MOTT de proliferacin lenta, habr que incubar un conjunto de medios
inoculados a t menor, 24-33C y los dos conjuntos sern incubados durante 12
semanas
Sondas moleculares de cidos nucleicos: Constituyen un mtodo rpido,
sensible y especfico para identificar micobacterias. En tcnicas de hibridacin se
utilizan sondas de DNA que son especficas para las secuencias de rRNA del m.o a
identificar. Los resultados se pueden obtener incluso en un da. Se dispone de varias
sondas para la confirmacin de cultivos del complejo MTB, M. avium, M.
intracelulares y M. Gordonae. Debido a la posible existencia de un nmero reducido
de bacterias en la muestra, varias empresas han puesto a punto algunas tcnicas de
amplificacin, por ejemplo:
PCR: Deteccin de DNA. La reaccin en cadena polimerasa es una tcnica
promisoria para la deteccin rpida y directa de M. tuberculosis, su
especificidad es del 99% y su sensibilidad global es del 55-90%.

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Reaccin en cadena de la ligasa
Amplificacin mediada por transcripcin
Amplificacin de desplazamiento de hebra
Instrumentos automatizados o semiautomatizados: El periodo de recuperacin
de micobacterias a partir de esputo y otros materiales, incluidos los cultivos de
sangre, ha sido acortado a 2 o 3 semanas. El instrumento BACTER 460 se puede
utilizar para una prueba rpida a las drogas antituberculosas de primera lnea.
Aplicaciones de cromatografa de gas-liquido:
HPLC: Para definir la especie de micobacterias se ha aplicado la
cromatografa liquida de gran rendimiento (high-performance liquid
chromatography). Se basa en la creacin de perfiles de cidos miclicos, que
varan de una especie a otra.
GLC: Se determinan los cidos miclicos y constituyentes de los
cidos grasos de la pared celular; cromatografa liquida de alta
presin.
Pruebas bioqumicas: Son ms definitivas para la identificacin de micobacterias,
aunque los resultados se dan en un plazo superior a 3 semanas.
ACUMULACIN DE NIACINA: To d a s l a s m i c o b a c t e r i a s n o t i e n e n l a
c a p a c i d a d d e a c u m u l a r l a n i a c n a , s i n e m b a rg o M . t u b e rc u l o s i s ,
M . s i mi a e y o c a s i o n a l m e n t e c e p a s d e M .
africanum, M. bovis, M. marinum y M.
chelonae si tienen las enzimas para convertir
la niacina a ribonucleotido de niacina. La
aparicin de un color amarillo en el medio
i n c u b a d o c o n l a t i r a d e n i a c i n a a b o rd o , i n d i c a
la acumulacin de niacina, dando positiva la
prueba.
REDUCCIN DE NITRATOS A NITRITOS: M y c o b a c t e r i u m t u b e rc u l o s i s
e s u n g r a n p ro d u c t o r d e n i t ro rre d u c t a s a , e n z i m a q u e c a t a l i z a l a
conversin
de
nitratos
a
nitritos.La
c o l o r a c i n ro s a - ro j o e n e l a g re g a d o d e
c i d o s u l f a n l i c o y N - n a fti l e ti l e n d i a m i n a a
u n ex t r a c t o d e c o l o n i a s a i s l a d a s d e u n
m e d i o d e c u l ti v o a fi rm a l a p o s i t i v i d a d d e l a
p r u e b a . Ta m b i n e s u t i l i z a d a p a r a l a
i d e n ti fi c a c i n d e M . ka n s a s i i y M . s z u l g a i .

HIDRLISIS DEL TWEEN 80: Tw e e n 8 0 e s e l n o m b re

c o m e rc i a l d e l d e t e rg e n t e ( d e ri v a d o p ol i e ti l e n a d o d e l m o n o o l e a t o d e
sorbitano) que se utiliza para la
i d e n ti fi c a c i n d e m i c o b a c r t e r i a s q u e
s o n c a p a c e s d e p ro d u c i r u n a e n z i m a
l i p a s a q u e h i d ro l i z a e l Tw e e n 8 0 e n
c i d o o l e i c o y s o r b i t o l p o l i ox i e ti l a d o.
E l d e s a rro l l o d e c o l o r ro j o e s e l
re s u l t a d o p o s i t i v o , y a q u e i n d i c a l a
capacidad
de
la
bacteria
para
h i d ro l i z a r
el
Tw e e n
80.
* Para
caracterstica

positiva

para

su

Mycobacterium kansasii el Tween 80 es una

identificacin. *Mycobacterium tuberculosis es

vairiablemente positiva a esta prueba.

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PRUEBA DE LA CATALASA A 68 GRADOS
CENTGRADOS:
La
mayora
de
las
m i c o b a c t e r i a s s o n c a p a c e s d e p ro d u c i r
l a e n z i m a c a t a l a s a p e ro n o t o d a s
pueden
p ro d u c i r l a
en
condiciones
de
t
elevada
a
68C durante 20
m i n u t o s ( c a t a l a s a te rm o e s t a b l e ) . L a l e c t u r a
d e l a p r u e b a e s re a l i z a d a e n t u b o s d e
L w e n s t e i n - J e n s e n u b i c a d o s e n p o s i c i n
v e r t i c a l p a r a q u e l a s u p e r fi c i e p l a n a d e l
medio sea inoculada e incubada durante 14
d a s a n t e s d e a g re g a r l e e l p e rx i d o d e h i d r g e n o. S i e n e l t u b o s e
levanta una columna de efervescencia o de burbujas de unos 4 mm
d e d i m e t ro , l a p r u e b a e s c o n s i d e r a d a c o m o p o s i t i v a . S i s e q u i e re
e v i t a r e l ti e m p o d e 1 4 d a s d e i n c u b a c i n a 6 8 g r a d o s c e n t g r a d o s
p a r a re v i s a r l a p r u e b a d e l a c a t a l a s a d e s p u s d e l c u l t i v o p r i m a r i o ,
s e p u e d e u t i l i z a r u n me d i o d e M i d d l e b ro o k 7H 1 0 o 7H 1 1 ( c o m o
c u l t i v o p r i m a r i o ) , a g re g a n d o u n a s g o t a s d e p e rx i d o e n l a
s u p e r fi c i e d e l a s c o l o n i a s y o b s e r v a r r p i d a m e n t e e l re s u l t a d o d e l a
prueba *M. tuberculosis es negativa a esta prueba.
PRUEBA DE LA UREASA: Ve r i fi c a s i l a mi c o b a c t e r i a e s
c a p a z o n o d e p ro d u c i r l a e n z i m a u re a s a , e n z i m a
h i d ro l i z a l a u re a , y p o r c o n s i g u i e n t e s e f o rm a
a m o n a c o y C O 2 . E l a m o n i a c o re a c c i o n a e n s o l u c i n ,
f o rm a n d o c a r b o n a t o d e a m o n i o , o c a s i o n a n d o a s
u n a a l c a l i n i z a c i n d e l m e d i o c o m o re s u l t a d o d e l
aumento del pH de la solucin. Esta prueba puede
s e r re a l i z a d a i n o c u l a n d o a l m i c ro o rg a n i s m o e n a g u a d e s t i l a d a l a c u a l
c o n t e n g a u n c o n c e n t r a d o s o b re l a b a s e d e u re a . S i o c u rre u n c a m b i o d e
c o l o r a ro s a e n l a s o l u c i n , l a p r u e b a e s u re a s a
( + ) , s i n o o c u rre c a m b i o d e c o l o r , l a p r u e b a e s
u re a s a ( - ) * M . t u b e r c u l o s i s e s p o s i t i v a a e s t a p r u e b a .
PIRAZINAMIDASA: L a
pirazinamidasa
es
una
e n z i m a p ro d u c i d a p o r c i e r t a s m i c o b a c t e r i a s , l a
c u a l d e a m i n a l a p i r a z i n a m i d a p a r a f o rm a r
c i d o p i r a z i n o i c o , t a l c o m p u e s t o p ro d u c e u n a
b a n d a o a n i l l o e n e l m e d i o. U t i l i z a n d o u n c a l d o
c o n b a s e d e D u b o s , p re v i a m e n te s e m b r a d o s
c o n u n s u b c u l t i v o d e l a m u e s t r a p ro b l e m a ,
e s t e s e c o l o c a a i n c u b a r d u r a n t e 4 d a s a p rox i m a d a m e n t e . D e s p u s d e l a
i n c u b a c i n , a l a g re g a r s u l f a t o d e a m o n i o f e rro s o e n e l m e d i o , s o b re s a l e
u n a n i l l o d e c o l o r ro j o - ro s a d o , e s t a e s l a i n d i c a c i n d e q u e l a
micobacteria es capas de desaminar la pirazinamida. *M. tuberculosis es
positiva a esta prueba.

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INCORPORACIN DE HIERRO: A l g u n a s m i c o b a c t e r i a s c o m o M . f o r t u i t u m , t i e n e n
l a c a p a c i d a d d e i n c o r p o r a r s a l e s d e h i e rro s o l u b l e s d e s d e e l m e d i o d e
c u l t i v o , a l a g re g a r l e u n a s o l u c i n a c u o s a a l 2 0 % d e c i t r a t o d e a m o n i o
f rr i c o s e p ro d u c e u n a s p e c t o m a rr n e n l a c o l o n i a , l o c u a l i n d i c a q u e l a
p r u e b a e s p o s i t i v a . * M y c o b a c t e r i u m t u b e rc u l o s i s e s n e g a t i v o a e s t a
prueba.

Prueba cutnea: PPD

o El derivado proteico purificado se obtiene por fraccionamiento qumico de
la
tuberculina antigua.
o Dosificacin: Intradrmica: Inicialmente se inyectar 0,1 ml de la dilucin
que contenga menor concentracin (ej, 1 UT 2 UT/0,1
ml de solucin). La lectura se efectuar a las 48-72
horas, si la lectura al tercer da fuera negativa, se
practicar una segunda prueba a los 4 das, aplicando 0,1
ml
de dilucin que contenga mayor concentracin (ej, 5 UT
10 UT/0,1 ml de solucin).
o Interpretacin del test tuberculnico: La lectura del test se efectuar a las 48-72 h de
la inyeccin, para ello se medir el dimetro de la induracin, no el del eritema, y se
expresar en milmetros. Se considera positiva una induracin igual o superior a 5
mm. En los vacunados con BCG, donde la interpretacin de la prueba es ms
compleja, se considera positiva la induracin superior a 14 mm. Una reaccin
positiva indica una sensibilidad a la tuberculina, como resultado de una infeccin
(pasada o presente) por Micobacterias.

TRATAMIENTO:

Se utilizan regmenes en combinacin de frmacos donde se obtienen ndices de cura

>95%
Frmacos principales: *isoniazida y *rifampicina, *pirazinamida, *etambutol y
estreptomicina. *Dotbal por 6-8 semanas. Posteriormente se dan 4 a 6 meses con
isoniazida y rifampicina. A los 2 meses ya no contagia y a los 6 meses ya est limpio. Se
deben estrictamente tomar durante todo ese tiempo ya que si no se desarrollarn cepas
resistentes a los antibiticos.
Para ver si curo totalmente, cada mes se hace bsqueda del bacilo.
Frmacos de 2 lnea: kanamicina, capreomicina, etionamida, cicloserina y ciprofloxacina.
o Son ms txicos, menos eficaces o ambas
o Se recurre a ellos cuando
Hay ineficacia teraputica
Resistencia a mltiples frmacos (se hace antibiograma para elegir el mejor)
Resistencia isoniazida -> Deleciones o mutaciones en el gen catalasa- peroxidasa (KatG)

UMSNH/ MICROBIOLOGIA / Jessica Hinojosa Chvez

Se han identificado a nivel global cepas extraordinariamente resistentes a frmacos

(XDR, extensively drug resistant) -> pronstico clnico malo -> existe la posibilidad de que
64% de ellos fallezcan durante el tratamiento.

PREVENCIN:

Cubrirse la boca al toser, la nariz al estornudar.

Dx. Inmediato
Control y Tx apropiado del px tuberculoso.
Vigilancia cuidadosa de sus contactos por medio de reacciones de tuberculina, Rx y terapias
apropiadas.
Farmacoterapia de personas tuberculinopositivas asintomticas disminuyendo enormemente
la reactivacin de la infeccin.
Vacunacin con BCG= Bacilo Calmante Guerin, cepa atenuada de M. bovis, 1921 se elabor
la vacuna. Protege a R.N hasta los 14 aos al 80%. No se aconseja en pases desarrollados.
Es innocua y rara vez causa complicaciones graves. Una sola aplicacin va I.D. Debe
aplicarse a todos los R.N con un peso >2.500gr, si pesa menos, se pospone la aplicacin.
La erradicacin de la tuberculosis en ganado bovino y la pasteurizacin de la leche
disminuyen enormemente el nmero de infeccines por M. bovis.

Mycobacterium leprae:

Hansen 1873: Descubre el BAAR en Noruega donde la lepra era endmica.

No se ha podido cultivar en medios bacteriolgicos inertes
8 de largo x 0.2 a 0.5 micras de ancho, alargado y curvo en uno de
sus extremos.
Tiene un glucolpido especfico: Glucolpido fenlico (2% de su peso)
Secreta Glea que es una sustancia pegajosa y es responsable de la
agregacin de los bacilos en globias.
Presenta el cido miclico caracterstico del gnero Mycobacterium
responsable de la propiedad AAR y presenta el cido lepromnico
caracterstico de la especie.
Tiempo de generacin: 11-15 das (hasta 20 das).
Se desarrolla en los sitios fros del organismo
Periodo de incubacin comnmente va de 2-10 aos. Los sntomas pueden tardar hasta
20 aos en aparecer.
Reservorio: Hombre y el armadillo
En 1960 Shepard lo inocul en la almohadilla plantar del ratn blanco.
En1971 Kircheimer y Storrs lo cultivarn en el armadillo
Transmisin-> Por contacto piel-piel, pero princ. por descarga nasal (hay 1x106-8 m.o por ml.)
Requiere de un contacto prolongado. (ej. Cuando se exponen nios de corta edad por
lapsos duraderos a personas que expulsan los bacilos de la enfermedad).
Produce la lepra, proceso de tipo crnico que ataca principalmente a la piel, los nervios
perifricos, la mucosa de las vas respiratorias superiores y los ojos

EPIDEMIOLOGIA:

Desde 1985, la prevalencia global de la lepra se ha reducido en casi el 90%. La

enfermedad era endmica en 122 pases ese ao.

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1990, la OMS lanz una campaa para eliminar la lepra como problema de salud
pblica meta a lograrse en el ao 2000, objetivo logrado para el 2002 en trminos de
prevalencia mundial.
La lepra es una entidad infrecuente en EE.UU., donde se registraron 96 casos en 2002. Sin
embargo cabe destacar que la lepra es endmica en los armadillos de Texas y de
Louisiana, produciendo una enfermedad parecida a la forma muy infecciosa de lepra
lepromatosa en el ser humano.
Segn la OMS, en el 2012 se registr una prevalencia mundial de la lepra de 189 018
casos, mientras que el nmero de casos nuevos notificados en el mundo ese mismo ao
fue de 232 857.
Las estadsticas mundiales revelan que 220 810 (95%) de los nuevos casos de lepra se
notificaron en 16 pases, y que solo el 5% restante proceda del resto del mundo. Focos de
gran endemicidad en: Angola, Bangladesh, Brasil, China, Etiopa, Filipinas, India, Indonesia,
Madagascar, Mozambique, Myanmar, Nepal, Nigeria, Repblica Democrtica del Congo,
Repblica Unida de Tanzania, Sri Lanka, Sudn y Sudn del Sur.

CUADRO CLNICO:

Clasificacin de la lepra de Ridley y Jopling:

o Lepra tuberculoide
Lepra parcial tuberculoide
Lepra indeterminada: Las lesiones cutneas suelen ser mculas o placas
hiperpigmentadas o hipopigmentadas. Los pacientes pueden notar que estas
lesiones son anestsicas o parestsicas.
Lepra parcial lepromatosa
o Lepra lepromatosa

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Lepra
tuberculide (paucibacilar)Evolucin
(paucibacilar)Evolucin benigna
Lepra tuberculide
benigna y
y no
no
progresiva.
Afecta
la
piel,
hay
escasas
placas
eritematosas
progresiva. Afecta la piel, hay escasas placas eritematosas o
o
hipopigmentadas
centros planos
hipopigmentadas con
con centros
planos y
y bordes
bordes elevados
elevados y
y bien
bien
definidos;
definidos; afectacin
afectacin de
de los
los nervios
nervios perifricos
perifricos con
con prdida
prdida
completa
de
la
sensibilidad;
hipertrofia
de
los
nervios.
completa de la sensibilidad; hipertrofia de los nervios. No
No se
se
contagia.
Hay
inmunidad
celular:
Infiltracin
de
linfocitos
contagia. Hay inmunidad celular: Infiltracin de linfocitos
alrededor
de un
centro de
alrededor de
un centro
de clulas
clulas epiteliales;
epiteliales; presencia
presencia de
de clulas
clulas
de
de Langhans;
Langhans; se
se ven
ven pocos
pocos o
o ningn
ningn BAAR.
BAAR. Reactividad
Reactividad a
a la
la
lepromina.
lepromina.

Lepra lepromatosa
Lepra
lepromatosa (multibacilar)
(multibacilar) :Muchas
:Muchas mculas,
mculas, ppulas
ppulas y
y
nodulos
gran destruccin
tejidos (p.
nodulos eritematosos;
eritematosos; gran
destruccin de
de los
los tejidos
(p. ej.,
ej.,
cartlago
cartlago nasal,
nasal, resorcin
resorcin de
de huesos,
huesos, orejas);
orejas); afectacin
afectacin nerviosa
nerviosa
difusa
con
prdida
sensitiva
parcheada;
los
nervios
difusa con prdida sensitiva parcheada; los nervios no
no presentan
presentan
hipertrofia.
Predominio de
espumosos, pocos
hipertrofia. Predominio
de macrofagos
macrofagos espumosos,
pocos
linfocitos;
no
hay
clulas
de
Langhans;
numerosos
linfocitos; no hay clulas de Langhans; numerosos BAAR
BAAR en
en las
las
lesiones
cutneas
y
de
los
rganos
internos
.
Hay
una
lesiones cutneas y de los rganos internos . Hay una
hipergamaglobulinemia.
hipergamaglobulinemia. Ausencia
Ausencia de
de reactividad
reactividad de
de la
la lepromina.
lepromina.
Hay
tambin en
Hay lesin
lesin tambin
en los
los aros
aros super
super ciliares
ciliares condicionando
condicionando partes
partes
de
alopecia en
en la
la ceja.
ceja.
de alopecia

Las orejas se hacen pequeas al

igual que la nariz, por la destruccin
del cartlago y afectacin de la
mucosa->Facies leonina Puede
afectar cualquier rgano siendo una
lepra progresiva y mortal.

Inmunidad cel. disminuida

Clnica-> Manchas-> Hipocrmicas, Anestsicas, Alostsicas y Anhidroticas
Las manifestaciones clnicas de la lepra dependen de la reaccin inmunitaria del paciente
frente a las bacterias.
A veces surgen manifestaciones generales como anemia y linfadenopata.
Frecuentemente hay afeccin de ojos y en ocasiones surge amiloidosis.

DIAGNSTICO:
Estudios de laboratorio
o La biopsia de piel, frotis nasal, o ambas se usan para evaluar BAAR con tincin de
Fite o Ziehl-Neelsen. Las biopsias deben ser de un buen espesor drmico y tomadas
del borde de la lesin que parezca ms activa.
o Pruebas serolgicas se pueden utilizar para detectar glicolpido fenlico-1
(especfico para M. leprae) y lipoarabinomanano (habitualmente se observan en
micobacterias).

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Sondas moleculares detectan el 40-50% de casos perdidos en la evaluacin
histolgica previa. Desde que las sondas requieren una cantidad mnima de
material gentico (es decir, 104 copias de ADN), pueden fallar a la hora de
identificar la lepra paucibacilar.
Pruebas inmunolgicas:
o Prueba de lepromina cutnea (no disponible en los USA): Aunque no es diagnstica
de la exposicin o infeccin con M. leprae, esta prueba evala la capacidad del
paciente para montar una respuesta granulomatosa en contra de una inyeccin en
la piel de M leprae muertos. Los pacientes con lepra tuberculoide o suelen tener una
respuesta positiva (> 5 mm). Los pacientes con lepra lepromatosa no suelen tener
respuesta.
o Fenlicos glicolpido-1: Esta es una prueba serolgica especfica basada en la
deteccin de anticuerpos contra el glicolpido fenlico-1(especfico de M.
leprae). Este proceso arroja una sensibilidad del 95% para la deteccin de la lepra
lepromatosa, pero slo el 30% de la lepra tuberculoide.
o PCR: Sondas de genes con M. leprae de secuencias especficas utilizada para
identificar la micobacteria en muestras de biopsia de la piel y las manchas nasal, y
la sangre y las secciones de tejido.
o

TRATAMIENTO:
Dapsonas: el primer tratamiento efectivo descubierto para la lepra), pero resistente a los
antibiticos desarrollados posteriormente. Normalmente se necesita una combinacin de
dapsona, rifampicina y clofazimina (tratamiento recomendado por la OMS).
Otros frmacos activos contra M. leprae comprenden minociclina, claritromicina y algunas
fluoroquinolonas.
Lepra tuberculoide: Tx por 16-18 meses -> Posteriormente c/2 meses se hace exudado
nasal en busca del BAAR, cuando menos dos pruebas deben de dar negativo.
Lepra lepromatosa: Tx por 2 a 3 aos -> Posteriormente c/6 meses se hace exudado nasal
o en linfa se busca al BAAR, cuando menos dos pruebas deben de dar negativo.

Complejo de Mycobacterium avium:

MAC (Mycobacterium avium complex) o MAI (Mycobacterium avium intracellulare)

Proliferan a 41C y generan colonias no pigmentadas, blandas y lisas.
Aparecen en cualquier sitio del entorno agua, tierra, alimentos y animales, incluidos
pjaros.
MAC pocas veces causa enfermedad en individuos inmunocompetentes, sin embargo la
MAC diseminada en USA constituye uno de los ms comunes oportunistas bacterianos
en px. con SIDA.
La exposicin ambiental culmina en la colonizacin de vas respiratorias o
gastrointestinales.
Cuadro clnico Cuadro inicial: fiebre, sudores nocturnos, dolor abdominal, diarrea y
adelgazamiento. Invasin a los tejidos Bacteriemia transitoria Bacteriemia
persistente Infiltracin extensa a tejidos Disfuncin de rganos (cualquiera)//
Pulmones Ndulos, infiltrados difusos, cavidades y lesines endobronquiales.
Otras manifestaciones Pericarditis, abscesos en partes blandas, lesines cutneas,
ataque a ganglios linfticos, infeccin de huesos y lesiones del SNC.
Dx Cultivo del m.o de la sangre o tejidos
Tx Claritromicina o Azitromicina + Etambutol / Tx de por vida Disminuye el
nmero de m.o MAC en la sangre y mejora los sntomas clnicos.

Mycobacterium kansasii:

UMSNH/ MICROBIOLOGIA / Jessica Hinojosa Chvez

Fotocromgeno Medios complejos 37C

Puede producir ataque pulmonar y sistmico idntico al de la tuberculosis, en especial
en individuos con resp. inmunitaria deficiente.
Sensible a la rifampicina + Etambutol + Isoniazida
La transmisibilidad es pequea o no existe

Mycobacterium scrofulaceum:

Escotocromgeno que aparece ocasionalmente en el agua y como saprfito en adultos

con alguna neumopata crnica.
Causa linfadenitis cervical crnica en nios y, en raras ocasiones, otras enfermedades
granulomatosas.
Tx Extirpacin quirrgica de los ganglios infectados
Frecuentemente son resistentes a los antifmicos.

Mycobacterium marinum y Mycobacterium ulcerans:

Aparecen en el agua, proliferan mejor a bajas temperaturas 31C
Pueden infectar peces y producen lesiones superficiales en

la piel lceras o

granulomas de piscinas en personas.

Tx Extirpacin qx. o tetraciclinas, rifampicina y etambutol

Complejo de Mycobacterium fortuitum:

Son saprfitos presentes en la tierra y agua, que proliferan rpidamente de 3 a 6

das, en cultivo y no forman pigmentos.
En raras ocasiones producen enfermedad superficial y sistmica en humanos.
Suelen ser resistentes a antimicrobianos, pero pueden funcionar Doxiciclina,
amikacina, cefoxitina, eritromicina o rifampicina.

Mycobacterium chelonae-abscessus:

Las dos especies son capaces de originar infecciones en la piel, partes blandas y
huesos despus de traumatismo u operaciones, infecciones que se diseminan en px
inmunodeficientes.
M. abscessus px con enf. de vas respiratorias en el sureste de USA, a menudo a
mujeres blancas, no fumadoras y ancianas. Igualmente los pacientes con fibrosis
qustica. Tx. claritromicina, amikacina y cefoxitina. (aunque es muy
farmacorresistente)
M. chelonae Sensible a: tobramicina, claritromicina, linezolida e imipenem.