Duplicacin del ADN

Cuando una clula se divide en dos clulas iguales, el ADN tiene que replicarse.
La replicacin es el proceso de copia de una molcula de ADN, que resulta en dos molculas de ADN
exactamente iguales.
En la replicacin, cada una de las cadenas de la doble hlice sirve de molde para sintetizar la cadena
complementaria. Es comn denominar el proceso replicacin semiconservativa, porque cada molcula de ADN
resultante posee una cadena antigua y una nueva.
Este proceso se realiza en tres etapas:
- iniciacin
- elongacin
- terminacin
1. Iniciacin
Consiste en formar una burbuja de replicacin, cuyos extremos son dos horquillas:
a) Protenas iniciadoras localizan el sitio denominado origen de replicacin, una secuencia abundante en bases
A y T, y se unen a l.
En procariontes hay solamente un origen de replicacin en el cromosoma circular.
En eucariontes hay muchos orgenes de replicacin a lo largo de cromosomas lineales.
b) Enzimas helicasas separan las cadenas de ADN y avanzan en ambos sentidos por la doble hlice, rompiendo
los puentes de hidrgeno que mantienen unidas a ambas cadenas.
c) Enzimas topoisomerasas se unen a las cadenas sencillas, y mediante corte y reenlace relajan el enrollamiento
adicional producido por la separacin de las cadenas.
d) Protenas de unin a cadena sencilla previenen la reformacin de una doble hlice, y permiten el acceso del
aparato de sntesis.
e) La enzima primasa sintetiza una cadena corta de ARN, denominada cebador, que proporciona un extremo 3'OH sobre el cual puede iniciar la sntesis de ADN.
2. Elongacin
En cada burbuja de replicacin, holoenzimas ADN polimerasas sintetizan las cadenas complementarias:
a) Holoenzimas ADN polimerasas sintetizan las cadenas complementarias de ambas cadenas separadas, y
avanzan bidireccionalmente por ambas horquillas de replicacin, agrandando la burbuja. Pero la sntesis de
ADN ocurre nicamente en la direccin 5' --> 3'.
b) En una cadena de la burbuja, la sntesis es continua y se le denomina cadena adelantada; pero en la otra, la
sntesis es discontinua por fragmentos de Okazaki y se le denomina cadena atrasada.
c) Los cebadores son reemplazados por ADN.
Las holoenzimas ADN polimerasas de eucariontes son mucho ms complejas que las de procariontes. No slo
sintetizan el ADN, tambin revisan nucletido por nucletido la complementariedad exacta de las bases, reparan
las bases mal apareadas y sustituyen los cebadores por ADN.

d) La enzima ADN ligasa une progresivamente los fragmentos de Okazaki.

3. Terminacin de sntesis
En procariontes, la terminacin ocurre cuando la burbuja de replicacin ha recorrido todo el cromosoma
circular.
En eucariontes, la terminacin ocurre cuando las burbujas de replicacin se encuentran y llegan a los extremos
del cromosoma lineal, o cuando el proceso se detiene por una protena de terminacin.
Se dieron muchas hiptesis sobre como
se duplicaba el ADN hasta que Watson y
Crick
propusieron
la
hiptesis
semiconservativa
(posteriormente
demostrada por Meselson Y Stahl en
1957), segn la cual, las nuevas
molculas de ADN formadas a partir de
otra antigua, tienen una hebra antigua y
otra nueva.

MECANISMO DE DUPLICACIN DEL ADN EN PROCARIONTES

Hay que recordar que el ADN es cerrado y
circular y ocurre en tres etapas:
1 etapa: desenrrollamiento y apertura de
la doble hlice en el punto ori-c.
Intervienen un grupo de enzimas y
protenas, cuyo conjunto se denomina
replisoma.
Primero: intervienen las helicasas
que facilitan en desenrrollamiento
Segundo: actan las girasas y
topoisomerasas que eliminan la
tensin generada por la torsin en
el desenrrollamiento.
Tercero: actan las protenas
SSBP que se unen a las hebras
molde para que no vuelva a
enrollarse.

2 etapa: sntesis de dos nuevas hebras de ADN.

Actan las ADN polimerasas para sintetizar las nuevas hebras en sentido 5-3, ya que la lectura se hace
en el sentido 3-5.
Intervienen las ADN polimerasa I y III, que se encargan de la replicacin y correccin de errores. La
que lleva la mayor parte del trabajo es la ADN polimerasa III
Actu la ADN polimerasa II, corrigiendo daos causados por agentes fsicos.
La cadena 3-5 es leda por la ADN polimerasa III sin ningn tipo de problemas ( cadena conductora). En
cambio, la cadena 5-3 no puede ser leda directamente, esto se soluciona leyendo pequeos fragmentos (
fragmentos de Okazaki ) que crecen en el sentido 5-3, los cuales se unirn mas tarde. Esta es la hebra
retardada, llamada de esta forma porque su sntesis es ms lenta.
La ADN polimerasa III es incapaz de iniciar la sntesis por s sola, para esto necesita un cebador (ARN) que es
sintetizado por una ARN polimerasa (=primasa). Este cebador es eliminado posteriormente.

3 etapa: correccin de errores.

La enzima principal es la ADN polimerasa III, que corrige todos los errores cometidos en la replicacin o
duplicacin. Intervienen otros enzimas como:
Endonucleasas que cortan el segmento errneo.
ADN polimerasas I que rellenan correctamente el hueco.
ADN ligasas que unen los extremos corregidos

Duplicacin del ADN en eucariotas

Es similar a la de los procariontes, es decir,
semiconservativa y bidireccional. Existe una hebra
conductora y una hebra retardada con fragmentos de
Okazaki. Se inicia en la burbujas de replicacin
(puede haber unas 100 a la vez).
Intervienen enzimas similares a los que actan en las
clulas procariontes y otros enzimas que han de
duplicar las histonas que forman parte de los
nucleosomas. Los nucleosomas viejos permanecen en
la hebra conductora.

Bibliografia.:
Gregory S, et al. (2006). The DNA sequence and biological annotation of human chromosome 1. Nature 441
(7091): 315-21.
Alberts, Bruce; Alexander Johnson, Julian Lewis, Martin Raff, Keith Roberts, and Peter Walters (2002).
Molecular Biology of the Cell; Fourth Edition. New York and London: Garland Science.
Wilkins M.H.F., A.R. Stokes A.R. & Wilson, H.R. (1953). Molecular Structure of Deoxypentose Nucleic
Acids. Nature 171: 738-740.