1. Introduccin.

La cromatografa es un mtodo fsico de separacin basado en la distribucin de

los componentes de una mezcla entre dos fases inmiscibles, una fija o
estacionaria y otra mvil. En cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que
fluye a travs de una columna que contiene a la fase fija.
La fase mvil puede ser un solvente puro o una mezcla de solventes. Cuando se
trata de una mezcla, puede programarse la bomba para que tome solventes de
diferentes botellas en una proporcin determinada y realice la mezcla en una
cmara de mezclado. Dependiendo de la forma en que se usa el solvente tenemos
dos mtodos:
Mtodo Socrtico: Cuando, durante toda la separacin, se utiliza siempre el
mismo solvente, se denomina isocrtica, sin embargo es normal realizar un
gradiente de composicin del solvente a lo largo de la cromatografa para mejorar
la eficiencia y acortar la duracin del proceso. Estos gradientes de solvente
tambin son realizados en forma automtica por las bombas.
Mtodo de Gradiente de Elucin: Es un trmino que se utiliza para describir
el proceso mediante el cual se cambia la composicin de la fase mvil. Pueden
efectuarse de dos maneras:

2. Objetivos
Conocer el procedimiento de eleccin de solvente en CCd para una
muestra especifica.
3. Fundamento
La eleccin del eluyente depende del componente que se va a separar y del
material en que la separacin se lleva a cabo. Un mtodo que se emplea para la
seleccin del eluyente es una cromatografa en capa fina con distintos disolventes
y unas muestras patrn.

Principales eluyentes en orden creciente de polaridad:

1

ter de petrleo

Piridina

ter dietlico

Etanol

Ciclohxano

10 Cloroformo

Acetato de etilo

Tetracloruro de carbono

Diclorometano

cido actico

11 Benceno
12 Metanol
13 Agua

Tambin para la eleccin del eluyente tenemos que tener en cuenta varios factores
que influyen en el momento escoger uno as tenemos:
Precio.
Pureza.
No utilizar mezclas de eluyentes a menos que se conozcan las
proporciones de los disolventes que conformen la mezcla (reproducibilidad).
No utilizar compuestos muy voltiles.
Evitar que contengan trazas de metales (catalizadores).
La eleccin del eluyente se realiza de forma emprica. Hay que estudiar la
polaridad del componente y probar con eluyentes cada vez menos polares.
Al aplicar en primer lugar eluyentes poco polares, podemos seguir utilizando la
misma placa para aplicar otros eluyentes ms polares, hasta dar con el ms
apropiado.

Otra tcnica para realizar la eleccin del eluyente consiste en sembrar

varias muestras distanciadas suficientemente, y aplicar con un tubo capilar
distintos eluyentes sobre el centro de cada muestra. Esto permite desarrollar cada
eluyente radialmente por capilaridad, de forma que se aprecie el eluyente con el
cual la separacin se realiza de una manera ms eficaz.
En la eleccin del solvente tenemos que tener en cuenta cul de las sustancias
nos permiten con ms facilidad la localizacin de las diferentes sustancias que se
encuentran en la muestra analizada sustancias
Si los compuestos separados no son coloreados es necesario revelar la posicin
de dichos compuestos, para ello existen dos tipos de mtodos los mtodos
qumicos y los Mtodos fsicos.
a) Mtodos qumicos Consisten en realizar una reaccin qumica entre un
reactivo revelador y los componentes separados, para ello se pulveriza la
placa con los reactivos reveladores.
Generalmente se utiliza como reactivo revelador yodo, el cual forma complejos
coloreados con los componentes orgnicos (con tonos amarillo-marrn), pero las
manchas desaparecen con el tiempo con lo que es conveniente sealar las
manchas aparecidas.
Otro reactivo revelador bastante utilizado es el cido sulfrico, que reacciona con
los componentes orgnicos produciendo manchas negras luego de ser
carbonizadas. Tambin es utilizado el permanganato potsico, que deja unas
manchas de color amarillo. El tamao de las manchas no est relacionado con la
cantidad de componente separado.
Adems de estos reveladores generales, existen otros especficos:
2,4 - dinitrofenilhidracina (para aldehdos y acetonas). Verde de bromocresol (para
cidos carboxlicos). Paradimetil aminobenzaldehido (para aminas). Ninhidrina
(para aminocidos).
b) Mtodos fsicos. El ms comn consiste en aadir al absorbente un
indicador fluorescente. De tal forma que al colocar la placa bajo una

lmpara ultravioleta, y dependiendo del indicador y de la longitud de onda,

aparecen manchas fluorescentes en las zonas en las que hay
componentes, o en otros casos aparece toda la placa fluorescente excepto
donde hay componentes.
Algunos compuestos poseen cierta fluorescencia (aunque no es normal) con lo
que pueden ser detectados directamente en una lmpara de ultravioleta.

4. Materiales y mtodos.
4.1. Materiales
Cromatofolios de silicagel, cmara cromatografca, viales, extracto
4.2.

de malva, aspersores capilares.

Reactivos.
Solventes: cloroformo, metanol, ciclohexano, acetona, ter etlico,

ter de petrleo, etc.

5. Procedimiento experimental.
1. Para la realizacin de la prctica de eleccin de un sistema ptimo
de cromatografa CCD en primer lugar se procedi a pesar un poco
de extracto de malva que se logr obtener ya con anterioridad por el
mtodo de maceracin en alcohol en una concentracin de 85 %,
este extracto fue disuelto en un vaso de precipitado pequeo.
2. Seguido se en un cromofolio de 5x5 cm. Pasamos a aplicar 5
pequeos puntos de muestra (malva) disuelta en distintos lugares
de este cromatofolio, manteniendo una distancia de 1.5 cm ms o
menos.
3. Pasamos a aplicar cada una de las diferentes solventes con los que
contamos (acetato de etilo, tolueno, metanol, diclorometano,
cloroformo) en cada uno de los puntos del de la muestra disuelta en
el cromatofolio.
4. Observamos en cul de los diferentes puntos del cromatofolio con
puntos de muestra ha tenido una mejor separacin de sus
componentes as a simple vista. Del cual en este caso en la muestra
de malva observamos que las muestra con tolueno y metanol han
tenido una mejor separacin de los componentes.

5. De la muestra ya elegida a continuacin pasamos a preparar

muestras con diferentes concentraciones as tenemos:

Metanol

Tolueno

1 (0.5 ml )

4 (2 ml)

2 (1 ml)

3 (1.5 ml)

3 (1.5 ml)

2 (1 ml)

4 (2 ml)

1 (0.5 ml)

6. Luego con estas concentraciones de metanol y tolueno pasamos

nuevamente a aplicar unas pequeas gotas de disolventes en cada
uno de los puntos de muestra disuelta puestos ya anteriormente en
la placa cromatofolica.
7. Observamos que la muestra en concentraciones de 3 en 2 de
metanol y tolueno respectivamente tuvieron una mayor separacin
de los componentes de la muestra con respecto a los otras
concentraciones.
8. Con esta muestra de concentracin de 3 en 2 pasamos a preparar
otra solucin de unos 30 ml ms o menos para la posterior cmara
cromatogrfica.
9. En una cinta de cilicagel ponemos un pequeo punto de muestra en
la parte inferior de la cinta con ayuda de un capilar.
10. Ponemos la cinta de cilicagel en la cmara cromatogrfica con la
solucin de tolueno y metanol en concentracin de 3 en 2
respectivamente en unos 30 ml ms o menos. Y esperamos a que el
solvente haga el recorrido.
6. Resultados
Los resultados obtenidos en la prctica en cuanto a la eleccin de la mejor
solucin para cromatografa CCD. Obtuvimos que el tolueno y metanol son
los que ms separaron los diferentes componentes de la muestras (malva)
disuelta.
En cuanto a la mejor concentracin de la mescal de tolueno y metanol
obtuvimos que la concentracin 3 en 2 de metanol y tolueno

respectivamente fue la mejor con respecto a las otras que se mencion

anteriormente.
7. Conclusiones
Se logr conocer el procedimiento para la eleccin de un sistema

ptimo en CCD
Tambin se logr ver que la solucin de de metanol y tolueno en la
concentracin de 3 en 2 respectivamente es la mas adecuada para
la muestra de malva.

8. Anexos.
9. Bibliografa.
http://rua.ua.es/dspace/bitstream/10045/8248/4/T4cromatliquid.pdf
http://www.quiminet.com/articulos/seleccion-y-uso-de-solventes-encromatografia-hplc-14775.htm
https://es.wikipedia.org/wiki/Cromatograf%C3%ADa_en_capa_fina
Gua de prctica a cargo del docente del curso.