UNIVERSIDAD TECNOLOGICA NACIONAL

FACULTAD REGIONAL RESISTENCIA

QUIMICA ANALITICA
Trabajo practico N 4
Absorciometra
Profesores:

Dra. Sarno, Mara del Carmen

Lic. Matewecki, Carlos Ral
Ing. Barrios, Natalia Teresa

Alumnos:

Guevara Castillo Joaquin

Leguia Vania Maria
Moreyra Federico

AO 2015

Laboratorio N 3: Absorciometra

OBJETIVOS

Trazar las curvas espectrales de distintas soluciones, para determinar la longitud de onda
de mayor absorbancia de cada una de ellas.
Seleccionar la longitud de onda de mxima absorbancia de una sustancia pticamente
activa, para obtener la mayor sensibilidad en la determinacin de la concentracin de la
incgnita de cada sustancia, mediante la ley de Lambert Beer.
Determinar la constante de equilibrio de disociacin de un indicador cido-base utilizando
medidas espectrofotomtricas.

Principios tericos:
Todo analito molecular es capaz de absorber ciertas longitudes de onda
caractersticas de radiacin electromagntica, en este proceso la energa de
la radiacin es transferida a la molcula y como consecuencia disminuye la
intensidad de la radiacin. Cuando se produce la absorcin se dice que la
radiacin esta atenuada.
Cuando un haz de luz monocromtico atraviesa una capa de solucin con
espesor b (cm) y una concentracin c (M) de una especie absorbente, la
intensidad de haz disminuye de I o a I debido a la interaccin entre los
fotones de las partculas absorbentes.
La transmitancia T de la solucin se define como la fraccin de radiacin
incidente transmitida por la solucin. Esta comnmente expresada en
porcentaje

T=

I
Io

La absorbancia de una solucin se define por la ecuacin:

A=log ( T )=log

I
Io

De acuerdo a la Ley de Beer la absorbancia, est relacionada linealmente

con la concentracin c y con la longitud de la trayectoria b de la radiacin
en el medio absorbente.

A=a b c

Donde a es una constante de proporcionalidad denominada absortividad.

Puesto que la absortividad debe tener unidades que cancele las unidades de
b y de c, cuando la concentracin se expresa en moles/litro y b en cm se
expresa a la absortividad con el smbolo de . Por lo tanto:

A= b c

Donde tiene unidades de litro/cm.mol

La Ley de Beer solo describe el comportamiento de a absorcin en
soluciones diluidas. A concentracin elevada (mayor a 0,01) la distancia
entre los iones o las molculas de las especies absorbentes disminuye hasta
el punto en que cada partcula afecta la distribucin de cargas de sus
vecinos, lo cual puede alterar la capacidad absorbente de las especies a una
determinada longitud de onda.
Para aplicar el mtodo con fines cuantitativos es necesario que la especie
absorbente verifique la Ley de Beer, lo que se comprueba
experimentalmente.
El espectro de absorcin espectrofotomtrica es una grfica de porcentajes
de transmitancia, absorbancia. Es el logaritmo de absorbancia, o
absortividad molar de un analito en funcin de la longitud de onda o nmero
de onda. A partir del anlisis de este grfico es posible hallar la longitud de
onda a la cual le corresponde el mximo de absorbancia del analito,

pudindose trabajar as con la mayor sensibilidad (cambio de absorbancia

por unidad de concentracin).
La curva de calibracin es un grfico de una seal (en este caso
absorbancia) en funcin de la concentracin de analito. Para esta
experiencia, la curva de calibracin se construye a partir de la lectura de las
absorbancias de las soluciones de concentraciones conocidas. Con esta
curva es posible determinar la concentracin de una solucin problema
mediante la localizacin de la absorbancia de estas en el eje de las
absorbancias y leyendo la concentracin correspondiente en el eje de las
concentraciones.
Determinacin de la concentracin de una muestra de
concentracin desconocida
Reactivos:

Soluciones de cromato de potasio de concentracin conocida

(patrones).
Soluciones de permanganato de potasio de concentracin conocida
(patrones).
Soluciones de permanganato de potasio y cromato de potasio de
concentracin desconocida

Tcnica operatoria:
Se utiliz un espectrofotmetro, para su uso se siguieron los siguientes
pasos:
1. Se carg la cubeta del espectrofotmetro con los distintos patrones,
el blanco y la muestra incgnita. Primero se coloc el blanco (agua
destilada), se selecciona la longitud de onda requerida, se lleva a cero
el equipo y luego se mide a esa longitud de onda la absorbancia de
las distintas soluciones empezando por la ms diluida.
2. Manipular la cubeta del espectrofotmetro por las caras esmeriladas
de la misma.
3. Enjuagar las cubetas con agua destilada antes de colocar cada nueva
sustancia y limpiar las caras no esmeriladas con papel tis, para
evitar errores en la lectura.
4. Seleccionar la longitud de onda deseada (la que me da la mayor
absorbancia) y leer cada 20 nm, partiendo de 400 nm y hasta 700
nm.
5. Construir los espectrogramas de absorbancia de las tres sustancias
utilizando las soluciones de cromato, cloruro y permanganato de
distintas concentraciones.
6. Determinar las concentraciones incgnitas de las soluciones cuyas
concentraciones se desconocen, mediante la curva de calibrado y
analticamente usando la Ley de Lambert-Beer.
Procedimiento:

Prueba en blanco: Antes de la determinacin de la solucin para cada una

de las distintas longitudes de onda se realiza un blanco para calibrar el
equipo, es decir, un blanco por cada longitud de onda considerada.

Llenado de cubetas con agua destilada

Ubicacin las cubetas en el

Espectrofotmetro

Seleccin de la longitud de onda

Determinacin con analito:

Llenado de cubetas con los analitos.
Medicin de absorbancia 0 (Calibracin)

Ubicacin las cubetas en el

Espectrofotmetro

Seleccin de la longitud de onda.

Calibracin

Medicin de la absorbancia a distintas longitudes de onda

Espectro de absorcin. Curva de calibracin

Resultados:
Curvas de Barrido:

KMnO4 15,8* 10-5 M

KMnO4

1/50
6,32*105
M
0,233

KMnO4

1/100
3,16*105
M
0,129

KMnO4
Desc.
0,600

K2CrO4 0,05 M
K2CrO4
5*10-4
1,099

K2CrO4
1,56*10-4
0,275
K2CrO4
desc.
0,451
400

0,209
0,709
425

0,156
0,196
450

0,175
0,091
475

0,216
0,042
500

0,344
0,029
525

0,770/0,750
0,013
550

0,453
0,020
575

0,238
X

600

0,126
0,013
625

0,102
X
650

0,078
0,004
675

0,053
X
700
0,033
0,007

0.8
0.7
0.6
0.5
KMnO4

0.4

K2CrO4

0.3
0.2
0.1
0
375400425450475500525550575600625650675700

Curvas de calibracin:

KMnO4
0.8
0.6

f(x) = 0.05x - 0.03

Absorbancia

0.4

Linear (Absorbancia)

0.2
0
0

10

C (x10-5 M)

12

14

16

18

1.2
1 f(x) = 0.19x + 0.11
0.8
0.6
K2CrO4

0.4

Linear (K2CrO4)

0.2
0
0

C (x10-4 M)

Clculo de la concentracin de la muestra problema:

KMnO4:

Ecuacin de la recta: y=0,0486X- 0,0268

Absorbancia de la muestra problema: 0,600

0,600=0,0486 x 0,026 8
X= 12,89.10-5= 1,29.10-4 M

K2CrO4:
Ecuacin de la recta: y=0,1864X+ 0,1129
Absorbancia de la muestra problema: 0,451

0,451=0, 1864 x +0, 1129

X= 1,814.10-4 M

Determinacin espectrofotomtrica del pKa de un indicador cidobase

Principios tericos:
Es posible obtener el pKa de un indicador cido-base determinando la
magnitud de la relacin logartmica que aparece en la ecuacin: pKa= pH
log [In-] / [HIn], para un pH dado, en el que ambas se encuentran en
equilibrio.
Si tanto In- como HIn obedecen a la ley de Lambert-Beer, sus
concentraciones pueden determinarse espectrofotomtricamente, mtodo
que posee la ventaja de no perturbar el equilibrio.
Para ellos se determinan los espectros de absorcin, como mnimo, de tres
soluciones, que contengan la misma concentracin total del indicador a
diferentes pH:

1)- Solucin cuyo pH es tal que el indicador se encuentra totalmente en su

forma disociada In-. La denominamos solucin del indicador a pH alcalino.
2)- Solucin en la que el indicador se encuentra totalmente en su forma no
disociada (HIn). Es la solucin de pH intermedio del indicador a pH cido.
3)-Solucin de pH intermedio del indicador en el que ambas formas se
encuentran presentes en la cantidad apreciable.
Los tres espectros se cortan en un punto llamado punto isosbstico o
isoabsortivo. Es el punto en el cual las absortividades molares In - y HIn se
igualan; y esto es caracterstico de un sistema que contiene dos cromferos
interconvertibles. La existencia de un punto isoabsortivo es la evidencia de
que existe un equilibrio qumico entre dos especies. Se selecciona una
longitud de onda e, a la los espectros de la forma cida y bsica estn lo
ms
alejados posible, y se determinan las absorbancias de las tres
soluciones. En la solucin de pH intermedio, el trmino logartmico de la
ecuacin anterior puede determinarse en funcin de las absorbancias.
Resulta:
pKa = pH log (Absica Aintermedia) / ( Aintermedia Acida)
Procedimiento: Se utiliz el mismo procedimiento para obtener las
absorbancias de las soluciones del indicador a diferentes pH que para la
determinacin de la concentracin, el espectrofotmetro.
Resultados:
Longitud onda
400
425
450
475
500
525
550
575
600
625
650
675
700

Acida
0,157
0,216
0,221
0,162
0,097
0,043
0,017
0,003
0,002
0,004
0
0,002
0,003

Basica
0,128
0,082
0,044
0,042
0,069
0,119
0,210
0,334
0,484
0,524
0,268
0,066
0,011

Intermedio
0,122
0,106
0,090
0,086
0,082
0,079
0,120
0,180
0,261
0,270
0,138
0,039
0,006

0.6
0.5
0.4
Acida

0.3

Basica
Intermedio

0.2
0.1
0
375400425450475500525550575600625650675700

Punto Isosbstico: 507nm

e: 617nm
Absorbancia para pH acido: 0,0037
Absorbancia para pH Intermedio (4,75): 0,280
Absorbancia para pH Bsico: 0,539

pKa=pH interlog
4,75log

Abasico A Inter
A Inter A Acido

0,5390, 28 0
=4,778
0,2800, 0037

pKa terico: 4,8

Errores:
Error Absoluto:

E A = pK T pK P=4,84,778=0,022

Error Relativo: E R=
Error porcentual:

E A 0,022
=
=0,046
pK T
4,8

E R 100= 0,46%
Conclusin:

El presente trabajo fue de utilidad para comprender el principio de

funcionamiento de un espectrofotmetro y su rango de aplicaciones en la
qumica analtica. De este modo pudimos calcular la concentracin de dos
muestras de concentracin desconocida, as como tambin determinar el
pKa de un indicador acido-base. La tcnica utilizada es muy eficiente debido

a que no influye en el equilibrio del sistema y el error obtenido es muy

pequeo, este puede deberse debido a que algunos valores utilizados se
obtienen grficamente.