Cromatografa de lquidos HPLC

Principios de la tcnica
En la cromatografa lquida, la fase mvil es un lquido que fluye a travs de una
columna que contiene a la fase fija. La separacin cromatografa en HPLC es el
resultado de las interacciones especficas entre las molculas de la muestra en ambas
fases, mvil y estacionaria
A diferencia de la cromatografa de gases, la cromatografa de lquidos de alto
rendimiento (HPLC, de high-performance liquid chromatography) no est limitada por la
volatilidad o la estabilidad trmica de la muestra.
La HPLC es capaz de separar macromolculas y especies inicas, productos naturales
lbiles, materiales polimricos y una gran variedad de otros grupos polifuncionales de
alto peso molecular. Con una fase mvil lquida interactiva, otro parmetro se encuentra
disponible para la selectividad, en adicin a una fase estacionaria activa.
La HPLC ofrece una mayor variedad de fases estacionarias, lo que permite una mayor
gama de estas interacciones selectivas y ms posibilidades para la separacin.
HPLC preparativa
Es la tcnica escogida para aislamiento y purificacin de productos de valor en las
industrias qumicas y farmacuticas as como en la biotecnologa y la bioqumica. La
cromatografa preparativa comprende un amplio rango de aplicaciones, desde el
aislamiento de 1g de muestra para identificacin espectroscpica hasta el aislamiento
de un compuesto puro de una mezcla de 100 g.

Aplicaciones
Campos de Aplicacin de HPLC
Frmacos: Antibiticos, sedantes esteroides, analgsicos
Bioqumica: Aminocidos, protenas, carbohidratos, lpidos
Productos de alimentacin: Edulcorantes artificiales, antioxidantes, aflatoxinas,
aditivos

Productos de la industria qumica: Aromticos condensados, tensoactivos,

propulsores, colorantes

Contaminantes: fenoles, Pesticidas, herbicidas, PCB

Qumica forense: Drogas, venenos, alcohol en sangre, narcticos

Medicina clnica: cidos biliares, metabolitos de drogas, extractos de orina,

estrgenos.
Algunas aplicaciones importantes de la HPLC preparativa

Separacin y purificacin de metabolitos

Separacin y purificacin de los metabolitos de las drogas procedentes de

muestras de orina

Purificacin y separacin de enantimeros

Purificacin de compuestos naturales

Purificacin y caracterizacin de enzimas y protenas

Funcionamiento del servicio

Las muestras deben ir acompaadas de la hoja de solicitud de servicios generada en esta
pgina web una vez realizado el registro en la misma. El ususario debe rellenar todos los
campos de la solicitud de servicios que conozca, con el fin de obtener el mejor
resultado posible.

Que es un indicador de pH?

Un indicador de pH es una sustancia que permite medir el pH de un medio. Habitualmente, se
utilizan como indicador de las sustancias qumicas que cambian su color al cambiar el pH de
la disolucin. El cambio de color se debe a un cambio estructural inducido por la protonacin o
desprotonacin de la especie. Los indicadores cido-base tienen un intervalo de viraje de una
unidad arriba y otra abajo de pH, en la que cambian la disolucin en la que se encuentran de
un color a otro, o de una disolucin incolora, a una coloreada.
Los ms conocidos son el naranja de metilo, que vira en el intervalo de pH 3,1 - 4,4, de color
rojo a naranja, y la fenolftalena, que vira desde un pH 8 hasta un pH 10, transformando
disoluciones incoloras en disoluciones con colores rosados / violetas.

Acercate a nosotros con gusto te ayudaremos.

Naranja de Metilo
Que es el Naranja de Metilo?
Naranja de metilo es un colorante azoderivado, con cambio de color de rojo a naranja-amarillo
entre pH 3,1 y 4,4. El nombre del compuesto qumico del indicador es sal sdica de cido
sulfnico de 4-Dimetilaminoazobenceno.
La frmula molecular de esta sal sdica es C 14H14N3NaO3S y su peso molecular es de 327,34
g/mol.
En la actualidad se registran muchas aplicaciones desde preparaciones farmacuticas,
colorante de teido al 5%, y determinante de la alcalinidad del fango en procedimientos
petroleros. Tambin se aplica en citologa en conjunto con la solucin de Fuschin.
Tambin es llamado heliantina.
Se usa en una concentracin de 1 gota al 0.1% por cada 10 ml de disolucin.

ROJO DE METILO
CUAL ES LA FUNCIN ROJO DE METILO?
El rojo de metilo es un indicador de pH. (Frmula: C15H15N3O2). Acta entre pH 4,2 y 6,3
variando desde rojo (pH 4,2) a amarillo (pH 6,3). Por lo tanto, permite determinar la formacin
de cidos que se producen durante la fermentacin de un carbohidrato. El rojo de metilo se
prepara con 0,1 g de este reactivo en 1500 ml de metanol. Una reaccin positiva (ms o
menos) indica que el microorganismo realiza una fermentacin acidolctica de la glucosa por la
va cido-mixta.