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PRACTICA 8
EXTRACCIN ADN
PROGRAMA DE ENFERMERIA
CURSO INTEGRADO DE PROCESOS BIOLOGICOS
INTRODUCCIN
En esta prctica se va a realizar la extraccin de cido desoxirribonucleico (ADN)
La extraccin y purificacin de cidos nucleicos constituye la primera etapa de la
mayora de los estudios de biologa molecular y de todas las tcnicas de
recombinacin de ADN. En este caso vamos a realizar la extraccin de ADN. Los
mtodos de extraccin permiten obtener cidos nucleicos purificados a partir de
diversas fuentes para despus realizar anlisis especficos. La calidad y la pureza
de los cidos nucleicos son dos de los elementos ms importantes. Si se desea
obtener cidos nucleicos muy purificados, que no contengan contaminantes
inhibidores, es preciso aplicar mtodos de extraccin adecuados. Con objeto de
evitar los falsos negativos
OBJETIVO
Extraer el material gentico (ADN) de diferentes tipos de tejidos.
MARCO TEORICO
El cido desoxirribonucleico, frecuentemente abreviado como ADN es un tipo de
cido nucleico, una macromolcula que forma parte de todas las clulas. Contiene
la informacin gentica usada en el desarrollo y el funcionamiento de los
Propiedades en disolucin
Reactividad
Hidrlisis qumica de cidos nucleicos
Hidrlisis acida
Hidrlisis alcalina
Absorcin en el ultravioleta
MATERIALES
Materiales entregados en la practica
2 tubos de ensayo
2 vasos de precipitado
1 varilla de vidrio
1 pipeta
Alcohol isopropilico
Pipeteador
METODOLOGA
Preparacin del Tampn Salino
Se toma un vaso precipitado de 250 ml, se hace una mezcla y se mantiene en la nevera:
Preparacin de la Muestra
En el vaso de la licuadora, triturar los trozos del tejido vegetal con un poco
de agua; accionar 4 veces las cuchillas a impulsos de 15 segundos. As se
rompern muchas clulas y quedaran expuestas a la accin del detergente.
Agregar a la mezcla obtenida, la preparacin del tampn frio y accionar
nuevamente la licuadora durante 1 minuto.
En un vaso precipitado de 250 ml, tomar la mezcla y filtrar utilizando la
coladera, para obtener el lquido sobrenadante
Al filtrado obtenido se le aade 30 ml de detergente lquido con la pipeta de
10 ml (3 veces) lo mezclamos con la varilla de vidrio evitando ocasionar
emulsin (espuma). Dejndolo reposar de 15 a 20 minutos