Professional Documents
Culture Documents
MDICO CIRUJANO
MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
DE
HIDALGO
PROGRAMA EDUCATIVO DE
LIC. MDICO CIRUJANO
MANUAL DE PRCTICAS DE
GENTICA
2 SEMESTRE
DIRECTORIO:
FIRMA
MANUAL
GENTICA
NDICE
A.- ENCUADRE DEL MANUAL DE PRCTICAS............................................................................3
1.- Introduccin............................................................................................................................ 3
2.- Competencias......................................................................................................................... 4
3.- Programa del Sistema de Prcticas y Actividades Extramuros...............................................7
B.- REGLAMENTO, NORMAS DE SEGURIDAD Y LINEAMIENTOS..............................................8
1.- Reglamento de Laboratorios......................................................................................................8
CAPTULO III................................................................................................................................... 8
2.- Medidas de Seguridad en los Laboratorios, Talleres, Clnicas y Actividades Extramuros.....12
3.- Lineamientos de seguridad para trabajar en laboratorios, clnicas, talleres y actividades
extramuros................................................................................................................................. 13
C.- NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA PRCTICAS DE ESTE MANUAL............17
1.- Cuadro de normas y referencias de seguridad de la prctica..............................................17
2.- Poltica Ambiental.................................................................................................................. 18
2a.- Cuadro de Disposicin de Residuos...............................................................................18
D.- CONTENIDO DE CADA PRCTICA EN PARTICULAR...........................................................20
Identificacin................................................................................................................................ 20
Manejo de Microscopio y Localizacin de Metafases...............................................................20
Sexocromatina........................................................................................................................... 23
Manipulacin de Material Estril en un Simulacro de Cultivo Celular. Cultivo de Linfocitos......26
Elaboracin de Preparaciones Cromosmicas a Partir del Cultivo de Linfocitos.......................31
Tinciones Cromosmicas...........................................................................................................35
El cariotipo Humano................................................................................................................... 39
Anlisis de Bandeo Cromosmico con Uso de TICs..................................................................46
Replicacin, transcripcin, traduccin y mutacin....................................................................50
Estudio Genealgico en Gentica Humana...............................................................................57
Estudio de la Herencia Polignica.............................................................................................66
Gentica de Poblaciones........................................................................................................... 75
Extraccin de DNA..................................................................................................................... 80
Electroforesis de cidos nuclicos.............................................................................................83
1
MANUAL
GENTICA
Anexo 1......................................................................................................................................... 86
LINEAMIENTOS DE ACREDITACIN........................................................................................86
Anexo 2......................................................................................................................................... 87
Gua de Observacin................................................................................................................. 87
Anexo 3......................................................................................................................................... 88
REPORTE DE PRCTICA......................................................................................................... 88
Anexo 4......................................................................................................................................... 90
Rbrica de Reporte de Prctica.................................................................................................90
Anexo 5......................................................................................................................................... 91
CONSENTIMIENTO INFORMADO.............................................................................................91
Anexo 6......................................................................................................................................... 92
CONSENTIMIENTO INFORMADO.............................................................................................92
Anexo 7......................................................................................................................................... 93
CONSENTIMIENTO INFORMADO.............................................................................................93
MANUAL
GENTICA
MANUAL
GENTICA
Comunicacin
Indicadores
1. Asumen una postura crtica para comunicarse de forma oral y escrita en espaol y en un segundo
idioma
3
Formacin
4. Elaboran ensayos en los que construye explicaciones cientficas para la solucin de diversos
1
2
problemas.
6. Identifican y categorizan los contenidos bsicos de la profesin.
7. Elaboran las etapas del proceso de investigacin.
9. Reconocen la diferencia entre problemas sociales y cientficos.
11. Desarrollan las habilidades necesarias para insertarse en los campos profesional y social.
1. Analizan la situacin desde varias perspectivas.
2. Interpretan el problema y explican los aspectos ms significativos del mismo (la esencia del
problema).
3. Poseen altos niveles de pensamiento conceptual y expresan ideas de manera concreta y
fundamentada.
4. Analizan e interpretan la informacin siguiendo un orden lgico.
5. Establecen y organizan de manera autnoma y responsable sus actividades de trabajo.
8. Integran y aplican los mtodos de estudio o investigacin y procedimientos (convencionalismos,
tendencias, secuencias, clasificaciones, criterios, metodologa en tcnicas, mtodos y
procedimientos).
Ciudadana
Liderazgo Colaborativo
Creatividad
Pensamiento
Comunicacin
Crtico
MANUAL
Nivel
GENTICA
Indicadores
1.
2.
3.
3
4.
5.
6.
2.
3.
3
TecnologaUso de la
1.
Especficas:
El Programa Educativo de Lic. Mdico Cirujano sume seis competencias especficas, que
cumplen con tres niveles de dimensin. En la asignatura se desarrollarn 4 de ellas.
1. Competencia de Habilidades Clnicas
2. Competencia de Bases Cientficas de la Medicina:
3. Competencia de Salud Pblica:
5
MANUAL
GENTICA
Nivel
1.
2.
3.
4.
2
5.
6.
7.
2.
1.
2.
1
Indicadores
Fundamenta la prevencin, procedimientos diagnsticos y teraputicos para aplicarlos en la
realizacin de intervenciones en escenarios ulicos.
Identifica las anormalidades en estructura y funcin y respuesta corporal que ocurren en las
enfermedades en escenarios ulicos y reales.
Identifica comportamiento humano normal y anormal en escenarios ulicos.
Identifica el ciclo de vida humano y los efectos de crecimiento, desarrollo y envejecimiento en el
individuo, la familia y la comunidad en escenarios ulicos y reales.
Clasifica los determinantes y factores de riesgo de salud y de enfermedad y la interaccin entre el
hombre y su ambiente fsico y social en comunidades.
Clasifica los factores genticos, sociales y ambientales que determinan la salud, la enfermedad y
la respuesta al tratamiento en escenarios ulicos y reales.
Identifica al individuo, a la familia y a la comunidad como generadoras de salud y enfermedad
para sus miembros en su mbito de influencia.
Evala las intervenciones nutricionales, bioqumicas, farmacolgicas, quirrgicas, psicolgicas y
sociales y otras relevantes en las enfermedades agudas y crnicas, en la rehabilitacin y en los
cuidados en etapas terminales en su mbito laboral.
3.
Identifica los principios morales y ticos de la profesin en escenarios ulicos, reales y virtuales.
Incorpora valores como la excelencia, el altruismo, la responsabilidad, la compasin, la empata,
la confiabilidad, la honestidad, el compromiso y la integridad en escenarios ulicos, reales y
virtuales.
Asume una actitud de respeto y responsabilidad por si mismo por los dems, por la cultura, por la
naturaleza en su prctica profesional.
MANUAL
GENTICA
UNIDAD
PROGRAMTICA
SESIONES
NOMBRE
MBITO
DE LA
DE
PRCTICA
DESARROLLO
Manejo de microscopio y
localizacin de
metafases.
2y5
Sexocromatina.
Manipulacin de material
estril en un simulacro de
cultivo celular. Cultivo de
linfocitos.
Elaboracin de
preparaciones
cromosmicas a partir del
cultivo de linfocitos.
Tinciones cromosmicas.
1a3
El cariotipo humano.
Anlisis de Bandeo
Cromosmico con uso de
TICs.
Replicacin,
Transcripcin, Traduccin
y Mutacin.
Estudio genealgico en
gentica humana.
Estudio de la herencia
polignica.
1a2
1a2
1a2
10
11
Gentica de poblaciones.
12
Extraccin de DNA.
13
Electroforesis de cidos
nuclicos.
PROGRAMACIN
DE LA
PRCTICA
(SEMANA)
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
7
8
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
10
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
11
12
13
14
15
MANUAL
GENTICA
MANUAL
GENTICA
Artculo 24. Los laboratorios permanecern abiertos en el horario definido por cada
Unidad Acadmica. Cualquier uso fuera del horario de operacin, deber ser autorizado
por el director de la Unidad Acadmica.
Artculo 25. Durante el tiempo de operacin de los laboratorios, solamente tendrn
acceso para su uso, en los horarios previamente establecidos:
I.
El personal adscrito a los mismos.
II.
Los usuarios a quienes se refiere el artculo 18 de este reglamento.
Artculo 27. Tras la adquisicin o prdida de algn equipo o mobiliario de laboratorio, el
Jefe de Laboratorio tiene la obligacin de notificar inmediatamente su alta o baja dentro
del inventario. En caso de prdida, se proceder a levantar un acta informativa y se
seguir el procedimiento legal que corresponda.
Artculo 28. Cada laboratorio deber contar con un archivo general, manuales de
prcticas y de operacin, una bitcora actualizada de servicios prestados, prcticas o
proyectos realizados, otra bitcora por cada equipo que as lo requiera, y una copia del
inventario interno actualizado, que sern resguardados por el Responsable del
Laboratorio.
Artculo 29. Las llaves de las puertas de acceso al laboratorio y de las dems reas
fsicas del mismo, estarn en poder del Responsable, y se contar con un duplicado en la
direccin de la Unidad Acadmica.
Artculo 30. Las mesas de trabajo de cualquier laboratorio, clnica y taller, sern usadas
mientras dure la prctica, por lo que no se podr dejar material en ellas por mayor tiempo
del autorizado. En el caso de tratarse de procesos continuos que no se puedan
interrumpir, se comunicar al Responsable.
Artculo 31. Los espacios fsicos destinados a cubculos u oficinas dentro de los
laboratorios, as como el mobiliario, equipo y materiales para el mismo fin, slo podrn
ser utilizados por el personal adscrito al laboratorio.
Artculo 32. Durante su estancia en los laboratorios, toda persona se abstendr de fumar,
de consumir alimentos, del uso de telfono celular y radiolocalizador. La no observancia
a esta disposicin causar la suspensin del derecho al uso de los laboratorios.
Artculo 33. Los equipos, herramientas, reactivos y materiales del laboratorio, que se
empleen durante una prctica o prestacin de servicios, quedarn bajo la
responsabilidad directa del usuario que los solicit. El solo hecho de hacer el vale
correspondiente no da derecho al usuario a sustraerlo de la Unidad, ni a conservarlo en
uso exclusivo ms del tiempo autorizado; salvo autorizacin especial y por escrito del
director de la Unidad Acadmica.
Artculo 34. Todo material y equipo solicitados debern ser devueltos al Responsable del
Laboratorio, quien tiene la obligacin de revisar que estn completos y en buen estado.
En caso contrario, registrar este hecho en la bitcora del laboratorio, o del equipo
9
MANUAL
GENTICA
MANUAL
GENTICA
MANUAL
GENTICA
MANUAL
II.
III.
GENTICA
IV.
V.
VI.
VII.
VIII.
IX.
X.
13
MANUAL
XI.
XII.
XIII.
XIV.
XV.
XVI.
XVII.
XVIII.
XIX.
XX.
XXI.
GENTICA
MANUAL
XXII.
XXIII.
XXIV.
XXV.
XXVI.
XXVII.
XXVIII.
XXIX.
GENTICA
15
MANUAL
GENTICA
COMO EVITARLO
Envenenamiento por
Ingestin
16
MANUAL
GENTICA
Poltica ambiental
Es compromiso de todos los integrantes de la comunidad universitaria cumplir
la normatividad vigente aplicable en materia ambiental, as como con los
requisitos e iniciativas que la Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo
emita, para mitigar el impacto ambiental generado por las actividades
universitarias y para direccionar a la institucin hacia el desarrollo sostenible
mediante el fomento del equilibrio entre el respeto al medio ambiente y el
desarrollo universitario.
CLASIFICACIN
T IPO DE CONTENEDOR
Slido RPBI
Abatelenguas
Slido RPBI
Guantes
Slido RPBI
Cubrebocas
Slido RPBI
Puntas de micropipeta
Slido RPBI
Agujas
Slido RPBI
Portaobjetos rotos
Cubreobjetos rotos
Pipetas serolgicas rotas
Slido
Slido
Slido
MANUAL
T IPO DE RESIDUOS
CLASIFICACIN
Slido
Cristalera rota
Slido
Lquido
Inflamable
(CR)
Corrosivo
e
no halogenado
Bromuro de etdio
Etanol absoluto
Lquido inflamable
disolvente no halogenado (I)
GENTICA
T IPO DE CONTENEDOR
Caja de cartn identificada con la
leyenda material de cristal roto.
Caja de cartn identificada con la
leyenda material de cristal roto.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado especficamente para ste
residuo.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado para Residuos Txicos no
reactivos.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado para residuos Txicos no
reactivos.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado especficamente para ste
residuos.
Caja de cartn embalada con plstico por
y material absorbente dentro rotulado
especficamente para ste residuos.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado para residuos disolventes
inflamables no halogenados.
18
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
Localizacin de Metafases
1
NO. DE SESIONES:
1. Introduccin.
El microscopio amplia las imgenes para su observacin por el uso de lentes de
aumento lo que permite el anlisis en este caso de preparaciones sanguneas y de
cultivo de linfocitos para que el alumno se familiarice con el uso y cuidados bsicos del
aparato, adems aprenda a enfocar y localizar metafases.
2. Objetivo General.
Recordar el manejo del microscopio, aprender a enfocar y a localizar las metafases
adecuadas, para adquirir las habilidades necesarias que le permitan realizar las prcticas
posteriores.
3. Objetivos Especficos.
Ser capaz de enfocar el microscopio.
CANTIDAD
1 pza.
1 pza.
4 fcos.
CANTIDAD
1 pza.
10cmX15cm. Para
limpieza de lentes de
microscopio sin
rayarlos.
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Tincin con Write o
Laminilla de frotis sanguneo
con Giemsa
Laminilla de linfocitos con
Tincin con Giemsa
cromosomas en metafase
Recipientes plsticos
Goteros para aceite de
con tapa dispensadora
inmersin
alargada.
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
ptico binocular.
Marca Karl Zeiss, con
Microscopio
objetivos de 10X, 40X
y 100X
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por grupo
OBS.
Por equipo
6.
1.
2.
3.
21
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
Sexocromatina.
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
La condensacin que sufre el cromosoma X por inactivacin permite observarlo como
un corpsculo adosado a la membrana nuclear de las clulas de la mujer, como un
punto compacto no refringente que se tie de negro o prpura oscuro cuando la
preparacin de clulas de descamacin se tie con orcena cida el cual es un
colorante especfico para DNA.
Contabilizar el nmero de corpsculos de Barr, en muestras de clulas de descamacin
tanto en individuos, nos permite evaluar posibles algunas anomalas numricas ligadas
al cromosoma X.
3. Objetivo General.
Realizar la prueba rpida de orcena cida para la determinacin de la frecuencia de la
sexocromatina positiva, para determinar alteraciones numricas del cromosoma X en
clulas epiteliales de la mucosa oral.
4. Objetivos Especficos.
Comprender en que consiste el fenmeno de Lyonizacin.
Adquirir la capacidad de identificar el corpsculo de Barr en una muestra de
epitelio bucal.
Determinar la frecuencia de corpsculos de Barr en hombres y mujeres, y en su
caso la existencia de alteraciones numricas del cromosoma X.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
22
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
15cmX2cmX2mm
De madera fina, puntas
Abatelenguas
redondeadas, pulido y libre de
astillas.
Toallas de papel
Interdobladas, para manos
desechables
24cmX21cm
Orcena+ cido actico + cido
Acetorcena
clorhdrico
Tipo B. Para microscopa y
Aceite de inmersin
Hematologa Diferencial Automatizada
Block con 100 hojas 10cmX15cm.
Papel Seda
Para limpieza de lentes de
microscopio sin rayarlos.
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Portaobjetos
Laminillas de vidrio de 27X75mm
Laminillas de vidrio de
Cubreobjetos del no.1
borosilicato de 24mmX50-60mm
Goteros para aceite de
Recipientes plsticos con tapa
inmersin
dispensadora alargada.
Frascos goteros de vidrio Para la orcena cida
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Balanza Digital
Capacidad 1200gX0.001g
ptico binocular. Marca Karl
Microscopio
Zeiss, con objetivos de 10X, 40X
y 100X
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por grupo
OBS.
Por grupo
Por equipo
Cuestionario.
En qu consiste el proceso de Lyonizacion?
Por qu en los hombres la frecuencia de cuerpos de Barr es casi nulo?
Cundo ocurre la inactivacin del crosoma X?
Qu determina cul cromosoma (materno o paterno) se va a inactivar?
8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson &
Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a ed.).
Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Inactivacin del cromosoma X y
gonosomopatas.
24
NO. DE PRCTICA:
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
La esterilizacin implica el uso de agentes qumicos o fsicos para eliminar todos los
microrganismos vivos de un material. La eleccin de uno u otro mtodo para llevar a
cabo la esterilizacin depender de la naturaleza del material que se desea esterilizar,
ya que en trminos generales lo que se desea es destruir los microorganismos, sin
daar el material de laboratorio que los contiene. Ms an, en el caso de los medios de
cultivo celular es importante que el mtodo de esterilizacin no degrade los nutrientes
que contiene.
Los principales mtodos de esterilizacin que se utilizarn en este curso son:
a)
Calor seco.
b)
Calor hmedo.
c)
Filtracin.
Los procesos de esterilizacin permiten la eliminacin de grmenes saprofitos y
patgenos de distintas superficies, en este caso la prctica pretende adiestrar a los
alumnos a que trabajen con material estril utilizando un mechero o lmpara de alcohol
(calor seco) que brinda un rea estril de 10 cm a la redonda dentro de la cual se debe
manipular el material de cristalera y los medios de cultivo previamente esterilizados,
en caso de que la manipulacin sea correcta los cultivos obtenidos permanecern
transparentes sin cambio aparente en el medio, en caso de contaminacin por
bacterias este presentara turbidez.
3. Objetivo General.
Comprender la importancia del
Detergente
1 pza.
1 pza.
Autoclave
Por Grupo
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por Grupo
Por Grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
ESPECIFICACIONES
OBS.
Por
Class IIA/B3
grupo
Por
Capacidad 1200gX0.001g
grupo
Clnica
de
acero Por
inoxidable,
con
una grupo
capacidad mnima de 90L.
De vapor, acero inoxidable, Por
de uso manual.
grupo
1.
2.
3.
4.
13. Cuestionario.
Realizar un cuadro comparativo donde se indique la diferencia de las tcnicas
utilizadas.
Cul es la diferencia entre el calor hmedo y el calor seco como mtodos de
esterilizacin?
Qu componentes tiene el caldo nutritivo?
Cules son los rangos de viraje del pH del rojo de fenol como indicador?
14. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
15. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Mtodos de esterilizacin.
1. Identificacin.
Elaboracin de Preparaciones Cromosmicas
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
NO. DE SESIONES:
29
1pza.
1.5 lt
100 ml
400 ml
OBS.
Por
equipo.
Indeleble, tipo lapicero, punta
Marcador
Aportado
mediana.
por el
alumno.
Mediano para limpieza de
Por
Escobilln
material
equipo
Por
Agua destilada
Comercial. Marca Hycell.
grupo
Por
Cloruro de potasio
Solucin al 0.075M
grupo
Por
Solucin Fijadora de Carnoy Metanol : cido actico 3:1
grupo
b) Materiales/Utensilios.
30
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Plstica, econmica, para
pipetas de vidrio y plstico.
Monomando, rueda giratoria
para aspirar y botn de
liberacin rpida.
1pza.
Propipeta manual
automtica
2 tubos
2 pzas.
Pipetas serolgicas
10 ml, de vidrio
4 pzas.
Pipetas Pasteur
10 pzas.
15 ml, de plstico y
desechables
2 pzas.
Piceta
250 500 ml
2 pzas.
Probeta
100 ml
1 pza.
Probeta
500 ml
1 pza.
Bulbo de plstico
12 pzas.
Portaobjetos
De vidrio
2 pzas.
Matraz aforado
100 ml
1 pza.
Hoja de papel
2 pzas.
CANTIDAD
1 pza.
4 pza.
Vasos de precipitado
100 ml
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Refrigerada, rotor y camisas
Centrfuga
para tubos de 15ml y 50 ml, Vel
max. 4,000 rpm.
Agitador vrtex
1 pza.
Potencimetro
1 pza.
Microscopio
OBS.
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
grupo
Por
equipo
Por
grupo
Por
grupo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
OBS.
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Por
31
1 pza.
Balanza analtica
1 pza.
Balanza Digital
equipo
Por
grupo
Por
grupo
Cuestionario.
Cul es la funcin de la solucin fijadora de Carnoy?
Cul es la funcin del KCl y porque permite lisar las clulas?
Por qu se seleccion esa velocidad y tiempo de centrifugacin en los lavados
realizados?
32
1. Identificacin.
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
Tinciones Cromosmicas.
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
Las tcnicas de tincin en la citogentica se utilizan como un apoyo para realizar la
identificacin de cromosomas dentro del cariotipo humano, permitiendo separarlos por
grupo y por par, asimismo nos permiten distinguir las distintas partes de dichos
cromosomas. Estas tcnicas de tincin tienen utilidad en la clnica, dentro de las que
se incluye el diagnstico de enfermedades que tienen origen en las cromosomopatas.
3. Objetivo General.
Realizar la tincin con Giemsa y para bandas G, utilizadas en el diagnstico
33
CANTIDAD
12 pzas.
4 fcos.
20 pzas.
2 pzas.
4 pzas.
2 pzas.
OBS.
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Bicarbonato de sodio
Por
Q.P.
grupo
Solucin salina
Por
Fisiolgica comercial
grupo
Agua desionizada
Por
Comercial. Mca. Hicell.
grupo
EDTA disdica
Por
Q.P.
grupo
Aceite de inmersin
Tipo B para microscopa
Por
y
hetatologa
diferencial grupo
automatizada
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Por
Laminillas
Obtenidas en la sesin anterior.
equipo
Goteros de aceite de
Recipientes plsticos con tapa Por
inmersin
dispensadora alargada
grupo
Verticales para 10 portaobjetos, Por
Vaso coplin
50 ml, con tapa rosca.
grupo
Por
Vaso de Precipitado
500 ml, de vidrio.
grupo
Por
Pinza con punta de goma
De 15-20cm de largo
grupo
Por
Piceta
250 500 ml
grupo
c) Equipos/Instrumentos.
34
DESCRIPCIN
1 pza.
Microscopio
1 pza.
Balanza analtica
1 pza.
Balanza Digital
ESPECIFICACIONES
ptico binocular. Marca Karl
Zeiss, con objetivos de 10X, 40X
y 100X
Capacidad 120G X 0,1MG. De
calibracin interna.
Capacidad 1200gX0.001g
OBS.
Por
equipo
Por
grupo
Por
grupo
36
1. Identificacin.
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
El cariotipo Humano.
NO. DE SESIONES:
2a3
2. Introduccin.
El cariotipo es el ordenamiento de los 46 cromosomas de un individuo y viene definido
por la morfologa de los cromosomas en la metafase mittica, de donde se distinguen
dos cromtides hermanas y se tiene el mayor grado de condensacin.
En la especie humana la dotacin cromosmica es de 2n = 46: 22 pares de autosomas
y un par de cromosomas sexuales.
La clasificacin se realiza acomodando los cromosomas por tamao decreciente,
posicin centromrica (constriccin primaria) y constricciones secundarias. Los grupos
van del A al G, clasificables a partir de una tincin regular, en donde los cromosomas
se agrupan nicamente por la morfologa. Si se tiene una tcnica de tincin con bandas
tambin se puede hacer la clasificacin por par de acuerdo al patrn en cdigo de
barras especfico para cada uno.
Los gonosomas o cromosomas sexuales se clasifican aparte preferentemente con una
tincin con bandas, debiendo indicar el sexo del individuo XX para la mujer y XY para
el varn, precediendo al nmero total de cromosomas observables. Si se carece de
esta tincin, el cromosoma X por su forma submetacntrica y tamao se clasifica
dentro del grupo C y el Y por su tamao pequeo y su forma acrocntrica en el grupo
G.
De esta forma el cariotipo humano queda constituido de la siguiente manera:
37
Tamao
B
C
Caractersticas de los
cromosomas
por
posicin centromrica
1, 2 y 3
Pares 1 y 3 metacntricos,
Par 2 submetacntrico
4y5
Submetacntricos.
6, 7, 8, 9, 10, 11, Submetacntricos
12 y X
13, 14 y 15
16, 17 y 18
19 y 20
21, 22 y Y
Acrocntricos con
constricciones
secundarias notorias
(satlites)
Par 16 metacntrico
Pares 17 y 18
submetacntricos
Metacntricos
Acrocntricos con
constricciones
secundarias notorias
(satlites)
Pequeos
Los ms pequeos
cuanto a su forma.
Pequeos.
en
Causa
Trisoma del cromosoma 21
Trisoma del par 13
Trisoma del par 18
Polisoma gonosmica por cromosoma(s) X extra(s) en
varones XXY, XXXY, XXXXY
Trisoma gonosmica por
cromosoma Y extra en
38
Turner
varones
Monosoma del cromosoma X
1 pza.
Cariotipo impreso
1 pza.
sobre blanco
Para carta.
alfileres
Punta redonda
hoja de unicel
25X25 cms
46 pzas.
1 pza.
CANTIDAD
1 pza.
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
ptico binocular. Marca
Microscopio
Karl Zeiss, con objetivos
de 10X, 40X y 100X
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
OBS.
Por equipo
El cariotipo humano
42
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
NO. DE SESIONES:
1a2
2. Introduccin. .
Los analizadores de imgenes son un parte aguas en el campo de la microscopa, si
bien no sustituyen al experto en el rea, permiten examinar de manera ms detallada la
topografa celular facilitando el diagnstico de diversas patologas, realizar anlisis
citolgicos o bien como en este caso, determinar alteraciones a nivel cromosmico.
Siguiendo el patrn del bandeo G, el analizador determina en escala de grises las
bandas claras y obscuras que nos indican las zonas eucromticas y heterocromticas
de los cromosomas, leyndolas como si fueran un cdigo de barras y asignndoles
una posicin con base en este patrn en el cariograma de manera automtica.
El analizador de imgenes consiste de un microscopio de luz, una cmara de video
para capturar las imgenes a analizar y un software especial que permite manipular la
imagen para eliminar los artefactos que pudieran interferir con la lectura, incrementar
el contraste entre las bandas y separar aquellos cromosomas que hayan quedado
encimados a partir de la imagen original.
En el armado automtico del cariograma permite girar los cromosomas y moverlos a su
posicin correcta, en caso de que el observante detecte algn error en el acomodo de
los cromosomas; cabe destacar que el aparato no es infalible y que el criterio del
citogenetista es el que finalmente decide el acomodo final de los cromosomas, por lo
cual es deseable que se tenga experiencia previa en el anlisis cromosmico.
Finalmente el analizador permite imprimir el diagnstico del paciente en el cual se
debe incluir, el nombre, la edad, el sexo, la frmula cromosmica y las observaciones
relacionadas con el diagnstico.
43
3. Objetivo General.
Realizar el anlisis de cariotipo de manera automatizada.
4. Objetivos Especficos.
Conocer el uso de un analizador de imgenes
Comprender los fundamentos bsicos usados por el software Ikaros para la
clasificacin cromosmica por grupo y par.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Paquete con 100 hojas blancas
1paquete
Hojas Blancas
tamao carta
1pza.
Para impresora HP 96
1 pza.
Para impresora HP 97
1 Block
20 ml
CANTIDAD
1
1
CANTIDAD
OBS.
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Block
con
100
hojas
10cmX15cm. Para limpieza de
Por
Papel seda
lentes de microscopio sin
grupo
rayarlos.
Aceite de inmersin
Tipo B para microscopa
Por
y
hematologa
diferencial grupo
automatizada
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Laminilla de linfocitos con
Por
cromosomas en metafase
Con tincin de bandas G
grupo
masculino
Laminilla de linfocitos con
Por
cromosomas en metafase
Con tincin de bandas G
grupo
femenino
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Impresora
HP
Video-proyector
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
44
7. Cuestionario.
1. Qu ventajas tiene el uso del analizador de imgenes para cariotipo?
2. Qu comandos del programa te permiten realizar las acciones que el
sistema no pudo realizar solo?
3. Cul de las acciones que realiza el programa IKAROS, para el anlisis de
cariotipo les sorprendi ms?
4. Para otras pruebas de laboratorio aplicadas a su formacin sirven los
45
46
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
traduccin y mutacin
8
NO. DE SESIONES:
1a2
2. Introduccin.
El flujo de la informacin gentica se da de forma general en las clulas en sentido
DNA RNA pptido y se conoce como Dogma Central de la Biologa Molecular.
La molcula de DNA es la encargada de transmitir la informacin de generacin en
generacin.
El proceso de sntesis de una nueva copia del DNA se realiza usando ambas hlices
de la cadena como molde. Este paso se conoce como replicacin y se lleva a cabo
antes de cada divisin celular. La replicacin de concreta es de forma
semiconservativa, es decir, para la doble hlice se formar una cadena complementaria
nueva, mientras que la otra ser obtenida de la cadena original, sirviendo a su vez
como molde. La sntesis se da en el sentido 35, est dada por la enzima DNA
polimerasa, que va uniendo desoxinucletidos a travs de enlaces fsfodister. La
complementariedad de la cadena doble se mantiene mediante uniones tipo puente de
hidrgeno.
La informacin contenida en el DNA est codificada en la secuencia lineal de sus
bases nitrogenadas. Esta informacin debe ser transferida a un RNA durante el
proceso de transcripcin, para que pueda ser decodificada. Se realiza por una enzima
RNA polimerasa usando de molde a slo una de las hebras del DNA, en los segmentos
donde estn localizados los genes transcripcionalmente activos. Los productos pueden
ser transcritos primarios, que sern madurados para convertirse en mensajeros a
travs del splicing out, u otros RNAs funcionales como tales.
Los mecanismos de replicacin y de transcripcin son susceptibles a errores, es decir,
47
3. Objetivo General.
Comprender cmo se lleva a cabo el procesamiento de la informacin gentica a partir
de una cadena de DNA, desde la obtencin de una nueva copia durante su replicacin,
la obtencin de un RNA mensajero, la sntesis de un pptido y distinga los diferentes
tipos de mutacin gentica.
4. Objetivos Especficos. .
Realizar la simulacin del proceso de replicacin sobre una secuencia gnica
real.
Realizar la simulacin del proceso de transcripcin para obtener la secuencia de
un RNAm
Determinar en la secuencia del RNAm, los codones de inicio, trmino y la
secuencia del polipptido de la secuencia gnica real, utilizando el cdigo
gentico.
Realizar los diferentes tipos de mutacin gentica, por sustitucin, delecin y
adicin e identificar sus consecuencias en el producto polipeptdico.
Goma
1 pza.
4 pzas.
2 pzas.
200 aprox.
Blanca
lapiceros o lpices de
colores
Diferentes entre s
Impresas
Bases nitrogenadas
representadas en papel
de colores, como se
indica en la tabla.
alumno.
Por equipo Solo para
procedimiento 2
Proporcionado por el
alumno.
Por equipo. Solo para
procedimiento 2
Proporcionado por el
alumno.
Por equipo.
Proporcionado por el
alumno.
Por equipo. Solo para
procedimiento 1
Proporcionado por el
alumno.
DNA
RNA
A (verde)
a (verde)
T (rojo)
u (rojo)
C (azl)
c (azl)
G (blanco)
g (blanco)
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Adenina
Timina
Citosina
Guanina
CANTIDAD
OBS.
No aplica
6. Desarrollo de la Actividad Prctica.
PROCEDIMIENTO (1)
1. Se proporcionar a cada equipo la secuencia de un gen en particular.
2. Las secuencias a trabajar son de DNA
3. Realizar la bsqueda del codn de inicio considerando que se encuentra en la
hebra complementaria al DNA (cadena molde)
4. En una hoja de unicel y a partir del triplete de inicio, integrar la secuencia
complementaria de DNA (replicacin), acomodando linealmente las letras
correspondientes, a manera de tripletes de bases. Fijar las letras con alfileres y
separar los tripletes entre s por un pequeo espacio
5. Completar el proceso segn el tamao indicado del transcrito
6. Sobre el mismo unicel realizar la transcripcin utilizando las bases de RNA,
acomodando esta secuencia de forma paralela a la cadena de DNA
7. Transcribir a papel la secuencia de RNA obtenida, asegurndose que no haya
tripletes de paro a lo largo de la cadena. La secuencia obtenida representa el
50
Ejemplo:
Sentido:
S
Antisentido:
AS
RNAm:
Rm
Codn de inicio
Pptido:
P
ORIGIN
S
1 ACGGGCTGGG TCTATGGTCG CTCCGCGGGC CGCTCCGCCG GCTGGTGCTT TTTTATCAGG
AS
Rm
AS
CGTTCGACAC AAGGTACCGT CCCTTGAAAA CCGTCTCGAG GGTGATAAAC GTTACCTAAA
Rm
GCAAGCUGUGUUCCAUG/GCA/GGG/AAC/UUU/UGG/CAG/AGC/UCC/CAC/UAU/UUG/CAA/UGG/AUU/U
P
Met/ala/gly/asn/phe/trp/gln/ser/ser/his/tyr/leu/gln/trp/ile
Mutacin (Insercin)
S
1 ACGGGCTGGG TCTATGGTCG CTCCGCGGGC CGCTCCGCCG GCTGGTGCTT TTTTATCAGG
AS
Rm
S
AS
CGTTCGACAC AAGGTACCGT CCCTTTGAAAA CCGTCTCGAG GGTGATAAAC GTTACCTAAA
Rm
GCAAGCUGUGUUCCAUG/GCA/GGG/AAA/CUU/UUG/GCA/GAG/CUC/CCA/CUA/UUU/GCA/AUG/GAU/UU
P
Met/ala/gly/lys/pro/leu/ala/glu/leu/pro/leu/phe/ala/met/asp
53
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
NO. DE SESIONES:
1a2
2. Introduccin.
El hombre presenta ciertas caractersticas especiales que lo califican como un material
difcil para el estudio gentico. De hecho, estas caractersticas son:
1. Hay una gran diversidad gentica de individuos, y tambin la estructura
gentica de las poblaciones humanas vara continuamente debido a las
migraciones, la mezcla de razas, etc.
2. Por motivos ticos y morales no se practican cruzamientos experimentales,
de los que por otra parte no se obtendra gran informacin, ya que:
a) de cada parto suele nacer un solo individuo.
b) las gestaciones son largas.
c) entre una generacin y la siguiente transcurre mucho tiempo
d) el tamao de las familias es pequeo
En cambio, otros organismos que se utilizan frecuentemente en la investigacin
gentica presentan caractersticas mucho ms ventajosas. Por ejemplo en los ratones,
ocurre una generacin cada dos meses y los descendientes de cada pareja pueden
contarse por decenas. En Drosophila, la generacin dura 20 das y se cuentan los
descendientes por centenares.
As, en estos organismos y otros de caractersticas similares, los cruzamientos
experimentales constituyen uno de los mejores mtodos para el conocimiento de los
caracteres hereditarios.
Por lo tanto, la gentica humana tiene que recurrir para su desarrollo a mtodos
indirectos tales como el uso de pedigres o rboles genealgicos, anlisis de
54
1 pza.
Goma
Blanca
1 pza.
Sacapuntas
De plstico o metal.
por el alumno.
Por equipo
Proporcionado
por el alumno.
Por equipo
Proporcionado
por el alumno.
c) Equipos/Instrumentos.
CANTIDAD
1
DESCRIPCIN
Calculadora
ESPECIFICACIONES
Simple
OBS.
Por equipo y
proporcionado
por el alumno
d) Pigmentacin del iris. Ojos azules frente a ojos ms oscuros, sean stos verdes o
marrones. Lo que se compara es la ausencia total o no de pigmentacin en la
superficie del ojo. En ausencia de sta, se observa la lmina interna azul del iris, y
los ojos sern totalmente azules. La presencia de pigmento en las capas
superiores del iris enmascara en mayor o menor grado el color azul del fondo.
Otros genes determinan el color exacto y su intensidad para ojos verdes,
marrones, etc., pero en esto no nos fijaremos.
Gametos
RR
Rr
Rr
rr
Frecuencia Genotpica
1 RR: 2 Rr : 1 rr
Frecuencia fenotpica
25 % cabello rizado.
59
60
7. Cuestionario.
1. Cmo se estandariz la nomenclatura para el desarrollo de las genealogas?
2. Menciona 4 caractersticas y 4 patologas de la herencia autosmico dominante
3. Menciona 4 caractersticas y 4 patologas de la herencia autosmico recesiva
8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Herencia monognica.
61
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
10
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
La herencia polignica no se puede analizar empleando pedigres ni estudiando los
cromosomas a travs del cariotipo (de no ser que se estudie una aberracin
cromosmica en concreto). Un rasgo polignico es el fenotipo resultante de la accin
de dos o ms genes. Estos tienen unas caractersticas comunes:
1. los rasgos se cuantifican midindose,
2. los rasgos son controlados por 2 ms genes resultando en un efecto
aditivo,
3. los rasgos son controlados por efecto de alelos mltiples,
4. los fenotipos de los rasgos polignicos y multifactoriales varan de
expresin por efecto de los factores ambientales.
Existen numerosos ejemplos de este tipo de herencia por ejemplo la estatura, el peso,
la inteligencia, el color de la piel, la presin arterial, etc.
Demostrar y estudiar la herencia de los rasgos polignicos no es fcil, pues requiere
de realizar estudios estadsticos en poblaciones normales para determinar el (los)
Umbrales, dentro de los cuales se encontrarn los individuos afectados.
En 1890, Francis Galton sugiri que las huellas dactilares seran una buena manera
de identificacin para humanos. Un ejemplo de su utilidad es el estudio de la huella
del recin nacido para el diagnstico precoz de anormalidades cromosmicas.
La herencia de las huellas dactilares, al igual que los dems caracteres de herencia
62
64
65
b)
66
Datos individuales
pulgar derecho
(I)
ndice derecho
(II)
corazn derecho
(III)
anular derecho
(VI)
meique
derecho(V)
pulgar izquierdo
(I)
ndice izquierdo
(II)
corazn izdo
(III)
meique izdo
(V)
Mano derecha
pulgar
ndice
corazn
anular
meique
patrn
obtenido:
recuento
parcial:
recuento total mano derecha=
Mano izquierda
pulgar
patrn
obtenido:
recuento
parcial:
ndice
corazn
anular
meique
V/M
TRC
Lazos
radiales cubitales
espirales
arcos
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
% del total:
media del TRC:
media TRC mujeres:
media TRC varones:
Datos de Estatura y Peso
Alumno
Sexo
(v/m)
Estatura (m)
Peso
(kg)
IMC=
Peso/estatura 2
1.
2.
68
1.
2.
3.
4.
7. Cuestionario.
Cul es la media TRC para el grupo?
Existen diferencias en las TRC medias para los varones y mujeres?
Cul puede ser la causa de esta diferencia? Fundamenten su respuesta.
Comparen las TRC de cada uno de los miembros del equipo con la media total y
69
70
1. Identificacin.
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
Gentica de Poblaciones
11
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
G.H. Hardy y W. Weinberg definieron los principios bsicos de la herencia polignica y
demostraron que en poblaciones en equilibrio las frecuencias (p y q) de los diferentes
alelos de un gen, permanecen constantes generacin tras generacin, siempre y cuando
no se produzcan fenmenos de mutacin, seleccin, deriva gentica, migracin o deriva
meitica. En el caso de dos alelos (A y a) si p es igual a la frecuencia del alelo A, y q la
frecuencia del a; entonces:
p+q=1
O lo que es lo mismo en porcentajes: el % A + el % a = 100%
En poblaciones donde la fecundacin ocurre de forma aleatoria, las frecuencias para los
distintos fenotipos sern:
Espermatozoide
p (A)
q (a)
vulo
p (A)
p2 (AA)
pq (Aa)
q (a)
qp (aA)
q2 (aa)
Es decir, que la distribucin de los genotipos de la generacin ser:
p2 + q2 + 2pq = 1
3. Objetivo General.
Calcular las frecuencias allicas, genotpicas y de los fenotipos estudiados en la
prctica Estudio Genealgico en Gentica Humana.
71
4. Objetivos Especficos.
Calcular las frecuencias allicas, fenotpicas y genotpicas en una poblacin a
partir de datos reales.
Determinar si la poblacin analizada cumple con los postulados de la Ley de
Hardy-Weimberg.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
No aplica
b) Materiales/Utensilios.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Datos y resultados obtenidos en
8 hojas
la prctica Estudio genealgico
De la prctica No. 9
Individual
en gentica humana.
Tamao carta,
10
Hojas blancas.
blancas o
Por equipo
cuadriculadas.
c) Equipos/Instrumentos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Por equipo y
1
Calculadora
Cientfica
proporcionado
por el alumno
6. Desarrollo de la Actividad Prctica.
1. Hacer el conteo de la presencia o ausencia de cada caracterstica de manera
individual.
2. Reunir los datos de anteriores de los equipos de cada mesa de laboratorio, en
las tablas anexas.
3. Calcular las frecuencias de los alelos A (p) y a (q) empleando la Ley de HardyWeinberg.
4. Calcular las frecuencias genotpicas p 2 (AA), q2 (aa) y 2pq (Aa) empleando la Ley
de Hardy-Weinberg.
Tablas de datos
Mesa ____ Equipos:
Alumno 1
Alumno 2
72
Total
11
12
11
12
Separado
Unido
Total
Fenotipo: Pico de viuda
Alumno
Total
presente
ausente
Total
Fenotipo: Lengua en U
Alumno
Total
11
12
capaz
incapaz
Total
Fenotipo: Pigmentacin del iris
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Total
11
12
azul
Otro color
Total
73
Total
11
12
presente
ausente
Total
Fenotipo: Direccin del Remolino
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8 9
10
Total
11
12
Dextrgiro
levgiro
Total
Fenotipo: Dedo meique
Alumno
Total
11
12
curvado
recto
Total
Fenotipo: Hoyuelos faciales
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10
Total
11
12
Presentes
ausentes
Total
7. Cuestionario.
1. Expliquen cul es el significado de la frecuencia allica y la frecuencia
genotpica en una enfermedad monognica.
2. Expliquen la aplicacin prctica del clculo de frecuencias siguiendo la Ley de
Hardy-Weinberg
8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
74
75
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
Extraccin de DNA
12
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
La extraccin de DNA se puede realizar a partir de cualquier tipo de clula nucleada,
en este caso de la lnea blanca sangunea, el procedimiento consiste en lisar a las
clulas eliminando tanto membrana celular como la nuclear mediante la accin de
detergentes como el tritn y el SDS, y extraer mediante solventes orgnicos aquellos
componentes celulares como protenas y lpidos de manera que el material gentico
obtenido este puro y listo para utilizarse en los procedimientos estndar de biologa
molecular.
3. Objetivo General.
Obtener DNA a partir de una muestra sangunea.
4. Objetivos Especficos.
Adquirir la habilidad en el uso del material de laboratorio en tcnicas de biologa
molecular.
Comprender la funcin de cada uno de los reactivos utilizados en la extraccin
de DNA y las bases que permiten llevar a cabo este proceso.
1.
2.
3.
4.
5.
DESCRIPCIN
Pares de guantes
Jeringas
Puntas para micropipeta
Puntas para micropipeta
Paquete de parafilm
Solucin de EDTA
Solucin TTS
ESPECIFICACIONES
OBS.
No estriles
10 ml
azules
amarillas
Rollo
al 5%
(TRIS 10mM Tritn 1% Sacarosa 300 mM)
5 mM.
al 10 %,
Saturada
Comercial Hycell
Temperado a -20C
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
OBS.
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
1. Identificacin.
NOMBRE DE LA PRCTICA:
NO. DE PRCTICA:
13
NO. DE SESIONES:
2. Introduccin.
La electroforesis es la tcnica ms utilizada en biologa molecular para la separacin
de molculas orgnicas en funcin de su peso molecular, carga elctrica, punto
isoelctrico, cuando se aplica una corriente elctrica a la muestra a separar que esta
embebida en un material poroso como agarosa o poliacrilamida en una cmara que
contiene una solucin conductora, logrado una separacin diferencial.
3. Objetivo General.
Conocer la tcnica ms utilizada en biologa molecular.
4. Objetivos Especficos.
Comprender los fundamentos de la electroforesis.
Enzima de restriccin
BamIII
Enzima de restriccin
EcoRI
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
De 3 Micropipetas
1-10l, 10-100l y
200-1000l
Charolas para geles
25X25cm
Matraz Erlenmeyer
250 ml
Pala para geles
De silicn
Regla
De plstico
Caja portapuntas
para puntas amarillas
Caja portapuntas
para puntas azules
Caja portapuntas
para puntas blancas
Lentes para proteccin
a luz UV
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Cmara de electroforesis
Con todos sus accesorios
Fuente de poder
Con 4 conectores
Transiluminador
Microondas
Convencional
Thermoblock
Para 12 tubos eppendorf
Por grupo
Por grupo
OBS.
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
OBS.
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
81
Anexo 1.
LINEAMIENTOS DE ACREDITACIN
82
83
85
86
_____________________________
Testigo Nombre y Firma
_____________________
Fecha
_____________________________
Testigo Nombre y Firma
87
_____________________________
Testigo Nombre y Firma
_____________________
Fecha
_____________________________
Testigo Nombre y Firma
88
_____________________________
Testigo Nombre y Firma
_____________________
Fecha
_____________________________
Testigo Nombre y Firma
89