You are on page 1of 93

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC.

MDICO CIRUJANO
MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

UNIVERSIDAD AUTNOMA DEL ESTADO

DE

HIDALGO

INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD


REA ACADMICA DE MEDICINA

PROGRAMA EDUCATIVO DE
LIC. MDICO CIRUJANO

MANUAL DE PRCTICAS DE
GENTICA

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

2 SEMESTRE

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

DIRECTORIO:

HUMBERTO A. VERAS GODOY


RECTOR
ADOLFO PONTIGO LOYOLA
SECRETARIO GENERAL
JOS MARA BUSTO VILLARREAL
DIRECTOR DEL INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD
ARTURO FLORES LVAREZ
DIRECTOR GENERAL DE SERVICIOS ACADMICOS
CLARA ZIGA PREZ
DIRECTORA DE LABORATORIOS Y T ALLERES
JORGE CASTELN MELNDEZ
SECRETARIO DEL INSTITUTO DE CIENCIAS DE LA SALUD
LUIS CARLOS ROMERO QUEZADA
JEFE DEL REA ACADMICA DE MDICO CIRUJANO
JORDN ZAMORA
COORDINADOR DEL PROGRAMA EDUCATIVO DE MDICO CIRUJANO

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

FECHA DE APROBACIN DEL MANUAL DE PRCTICAS:

NOMBRE DE QUIENES PARTICIPARON EN LA ELABORACIN:


NOMBRE
M. EN C. IRIS CRISTINA LPEZ SANTILLN

FIRMA

M. EN C. ANA HILDA FIGUEROA GUTIRREZ


DRA. MARA DEL CARMEN ALEJANDRA
HERNNDEZ CERUELOS
VO. BO. DEL PRESIDENTE Y SECRETARIO DE LA ACADEMIA DE MDICO CIRUJANO:
NOMBRE
FIRMA
M. EN C. IRIS CRISTINA LPEZ SANTILLN
PRESIDENTA
M. EN C. ANA HILDA FIGUEROA GUTIRREZ
SECRETARIA
VO. BO. DEL COORDINADOR DEL PROGRAMA EDUCATIVO DE MDICO CIRUJANO:
NOMBRE
FIRMA
M.C.ESP. LUIS CARLOS ROMERO QUEZADA
FECHA DE LA LTIMA REVISIN Y/O ACTUALIZACIN:
AGOSTO-NOVIEMBRE 2014.
REVISADO POR:
DIRECCIN DE LABORATORIOS Y TALLERES

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

NDICE
A.- ENCUADRE DEL MANUAL DE PRCTICAS............................................................................3
1.- Introduccin............................................................................................................................ 3
2.- Competencias......................................................................................................................... 4
3.- Programa del Sistema de Prcticas y Actividades Extramuros...............................................7
B.- REGLAMENTO, NORMAS DE SEGURIDAD Y LINEAMIENTOS..............................................8
1.- Reglamento de Laboratorios......................................................................................................8
CAPTULO III................................................................................................................................... 8
2.- Medidas de Seguridad en los Laboratorios, Talleres, Clnicas y Actividades Extramuros.....12
3.- Lineamientos de seguridad para trabajar en laboratorios, clnicas, talleres y actividades
extramuros................................................................................................................................. 13
C.- NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA PRCTICAS DE ESTE MANUAL............17
1.- Cuadro de normas y referencias de seguridad de la prctica..............................................17
2.- Poltica Ambiental.................................................................................................................. 18
2a.- Cuadro de Disposicin de Residuos...............................................................................18
D.- CONTENIDO DE CADA PRCTICA EN PARTICULAR...........................................................20
Identificacin................................................................................................................................ 20
Manejo de Microscopio y Localizacin de Metafases...............................................................20
Sexocromatina........................................................................................................................... 23
Manipulacin de Material Estril en un Simulacro de Cultivo Celular. Cultivo de Linfocitos......26
Elaboracin de Preparaciones Cromosmicas a Partir del Cultivo de Linfocitos.......................31
Tinciones Cromosmicas...........................................................................................................35
El cariotipo Humano................................................................................................................... 39
Anlisis de Bandeo Cromosmico con Uso de TICs..................................................................46
Replicacin, transcripcin, traduccin y mutacin....................................................................50
Estudio Genealgico en Gentica Humana...............................................................................57
Estudio de la Herencia Polignica.............................................................................................66
Gentica de Poblaciones........................................................................................................... 75
Extraccin de DNA..................................................................................................................... 80
Electroforesis de cidos nuclicos.............................................................................................83
1

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

Anexo 1......................................................................................................................................... 86
LINEAMIENTOS DE ACREDITACIN........................................................................................86
Anexo 2......................................................................................................................................... 87
Gua de Observacin................................................................................................................. 87
Anexo 3......................................................................................................................................... 88
REPORTE DE PRCTICA......................................................................................................... 88
Anexo 4......................................................................................................................................... 90
Rbrica de Reporte de Prctica.................................................................................................90
Anexo 5......................................................................................................................................... 91
CONSENTIMIENTO INFORMADO.............................................................................................91
Anexo 6......................................................................................................................................... 92
CONSENTIMIENTO INFORMADO.............................................................................................92
Anexo 7......................................................................................................................................... 93
CONSENTIMIENTO INFORMADO.............................................................................................93

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

A.- ENCUADRE DEL MANUAL DE PRCTICAS.


1.- Introduccin.
En la ltima dcada, la gentica y de la biologa molecular se han desarrollado
ampliamente, ya que gracias a las herramientas de las nuevas tecnologas, se han
perfeccionado tcnicas sofisticadas que permiten el conocimiento de las diferencias
existentes entre los genes de procariontes y de eucariontes; un mejor entendimiento de
los mecanismos de regulacin gnica y de los procesos responsables de fenmenos
como el crecimiento y la diferenciacin celular, la clonacin de genes humanos en otros
organismos, la embriotoxicidad de los frmacos, la localizacin de oncogenes humanos y
ms ampliamente el total mapeo del genoma humano (Proyecto Genoma Humano). As
mismo, se han descubierto anormalidades estructurales cromosmicas en algunas
entidades que se consideraban mendelianas como por ejemplo el Sndrome de PraderWilli. Se han desarrollado tcnicas como: la hibridizacin por fluorescencia in situ (FISH),
la cual facilita el anlisis citogentica a nivel molecular y la tcnica de reaccin en
cadena de la polimerasa (PCR), que permite la amplificacin de pequesimas
cantidades de ADN para su posterior caracterizacin.
La citogentica es una ciencia hbrida originalmente formada por la citologa y la
gentica. Surgi y se desarroll a fines del siglo XIX, cuando se logr identificar a los
cromosomas. Posteriormente, con la introduccin de las tcnicas de bandeo
cromosmico en 1973, se logr, por primera vez, la identificacin precisa de cada par
cromosmico en el cariotipo humano, lo cual se vio reforzada con el surgimiento de la
microscopia electrnica, la microbiologa y la bioqumica. Aos despus, las tcnicas
citogenticas y bioqumicas se combinaron y abrieron un nuevo horizonte: la gentica de
clulas somticas. Se identificaron defectos enzimticos especficos en clulas que
crecan y se desarrollaban en cultivos de tejidos.
La citogentica humana se define como el estudio microscpico de los cromosomas y la
correlacin que hay entre sus anormalidades y las del paciente; permite establecer
correlaciones entre los eventos mitticos y meiticos con los genticos, determinar el
nmero cromosmico de una especie y conocer el significado de las variaciones, tanto en
nmero, tamao, morfologa, arreglo y nmero de segmentos cromosmicos.
Por lo anterior, el presente manual pretende ofrecer al estudiante una fuente de
informacin accesible y concisa sobre los pasos a seguir para realizar un cultivo de
linfocitos, as como las tcnicas bsicas para el manejo, la elaboracin y el estudio de los
cromosomas, as como de la obtencin y caracterizacin del DNA en la asignatura de
Gentica, ya que dichos procedimientos son la base para la realizacin de muchas otras
3

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

tcnicas ms sofisticadas, abriendo un promisorio panorama para el diagnstico prenatal,


la prevencin y el tratamiento de enfermedades de ndole gentica.
2.- Competencias.
La Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo cuenta con siete competencias
Institucionales denominadas Genricas, que cumplen con tres niveles de dimensin.
Genricas:

Comunicacin

El programa educativo de Mdico Cirujano desarrollar las siete competencias


establecidas por la institucin:
1. Competencia de Comunicacin
2. Competencia de Formacin
3. Competencia de Pensamiento Crtico
4. Competencia de Creatividad
5. Competencia de Liderazgo Colaborativo
6. Competencia de Ciudadana
7. Competencia de uso de Tecnologa
Nivel

Indicadores

1. Asumen una postura crtica para comunicarse de forma oral y escrita en espaol y en un segundo
idioma
3

2. Establecen comunicacin en equipos de trabajo.


3. Se comunican de manera crtica para realizar anlisis, diagnstico, diseo, planeacin, ejecucin
y evaluacin.

Formacin

4. Elaboran ensayos en los que construye explicaciones cientficas para la solucin de diversos
1
2

problemas.
6. Identifican y categorizan los contenidos bsicos de la profesin.
7. Elaboran las etapas del proceso de investigacin.
9. Reconocen la diferencia entre problemas sociales y cientficos.
11. Desarrollan las habilidades necesarias para insertarse en los campos profesional y social.
1. Analizan la situacin desde varias perspectivas.
2. Interpretan el problema y explican los aspectos ms significativos del mismo (la esencia del
problema).
3. Poseen altos niveles de pensamiento conceptual y expresan ideas de manera concreta y
fundamentada.
4. Analizan e interpretan la informacin siguiendo un orden lgico.
5. Establecen y organizan de manera autnoma y responsable sus actividades de trabajo.
8. Integran y aplican los mtodos de estudio o investigacin y procedimientos (convencionalismos,
tendencias, secuencias, clasificaciones, criterios, metodologa en tcnicas, mtodos y
procedimientos).

Ciudadana

Liderazgo Colaborativo

Creatividad

Pensamiento
Comunicacin
Crtico

MANUAL
Nivel

GENTICA

Indicadores
1.
2.
3.

3
4.
5.
6.

Generalizan la solucin de problemas.


Sintetizan las partes, cualidades, las mltiples relaciones, propiedades y componentes de un
problema.
Llegan a conclusiones y a soluciones razonadas, y las somete a prueba confrontndolas con
criterios y estndares relevantes.
Aplican el pensamiento crtico para afrontar las exigencias del entorno (dimensin profesional y
social).
Resuelven problemas complejos.
Valoran lo aprendido y lo que necesita aprender.

1. Solucionan problemas utilizando ideas originales e innovadoras.


2. Disponen de un clima que d seguridad, que elimine la inhibicin y fomente la libre expresin.

6. Asumen riesgos y toma decisiones en el contexto de situaciones nuevas.


8. Intervienen en situaciones menos estructuradas y de creciente complejidad.

1. Declaran el alcance de la idea y proyecto.


2. Definen la secuencia de las actividades de un proyecto, estimando su duracin y las fechas de inicio
y trmino de cada una de ellas.
3. Generan en el equipo de trabajo un estado de nimo de superacin y logro de metas, y detectan las
fortalezas y debilidades de los miembros de su equipo para lograr un alto desempeo.
5. Poseen alto grado de autonoma personal y grupal.
6. Asumen la responsabilidad por el trabajo de otros.
7. Responsabilidad en la organizacin, planificacin del tiempo, toma de decisiones, trabajo en equipo
y motivacin y conduccin hacia metas comunes.
1.

2.
3.

3
TecnologaUso de la

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

Asumen una postura personal a partir de la comparacin de estructuras de creencias, costumbres


y de esquemas de valores.
Presentan un nivel de corresponsabilidad entre acadmico y estudiante para realizar las
actividades propuestas en el programa educativo.
Interviene en situaciones menos estructuradas y de creciente complejidad, donde la toma de
decisiones implica asumir una postura tica.

3. Asumen responsabilidad en el trabajo con otros.

1.

Desarrollan apropiadamente las aplicaciones especficas del aprendizaje, la comunicacin, el


rea disciplinar y la investigacin como herramientas de apoyo.

Especficas:
El Programa Educativo de Lic. Mdico Cirujano sume seis competencias especficas, que
cumplen con tres niveles de dimensin. En la asignatura se desarrollarn 4 de ellas.
1. Competencia de Habilidades Clnicas
2. Competencia de Bases Cientficas de la Medicina:
3. Competencia de Salud Pblica:
5

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

4. Competencia para el Manejo de la Informacin


5. Competencia de Aplicacin de la Normatividad Jurdica y de Salud:
6. Competencia de tica Mdica:
Bases Cientficas de la Medicina

Nivel
1.
2.
3.
4.
2
5.
6.
7.
2.

tica Mdica InformacinManejo de la

1. Utiliza la tecnologa de la informacin para la bsqueda, organizacin, resguardo y aplicacin de


informacin confiable en salud de diferentes bases de datos y fuentes, mediante la medicina
basada en evidencias en escenario ulico y virtual.

1.
2.
1

Indicadores
Fundamenta la prevencin, procedimientos diagnsticos y teraputicos para aplicarlos en la
realizacin de intervenciones en escenarios ulicos.
Identifica las anormalidades en estructura y funcin y respuesta corporal que ocurren en las
enfermedades en escenarios ulicos y reales.
Identifica comportamiento humano normal y anormal en escenarios ulicos.
Identifica el ciclo de vida humano y los efectos de crecimiento, desarrollo y envejecimiento en el
individuo, la familia y la comunidad en escenarios ulicos y reales.
Clasifica los determinantes y factores de riesgo de salud y de enfermedad y la interaccin entre el
hombre y su ambiente fsico y social en comunidades.
Clasifica los factores genticos, sociales y ambientales que determinan la salud, la enfermedad y
la respuesta al tratamiento en escenarios ulicos y reales.
Identifica al individuo, a la familia y a la comunidad como generadoras de salud y enfermedad
para sus miembros en su mbito de influencia.
Evala las intervenciones nutricionales, bioqumicas, farmacolgicas, quirrgicas, psicolgicas y
sociales y otras relevantes en las enfermedades agudas y crnicas, en la rehabilitacin y en los
cuidados en etapas terminales en su mbito laboral.

3.

Identifica los principios morales y ticos de la profesin en escenarios ulicos, reales y virtuales.
Incorpora valores como la excelencia, el altruismo, la responsabilidad, la compasin, la empata,
la confiabilidad, la honestidad, el compromiso y la integridad en escenarios ulicos, reales y
virtuales.
Asume una actitud de respeto y responsabilidad por si mismo por los dems, por la cultura, por la
naturaleza en su prctica profesional.

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

3.- Programa del Sistema de Prcticas y Actividades Extramuros.


NM.
DE
PRCTICA

UNIDAD
PROGRAMTICA

SESIONES

NOMBRE

MBITO

DE LA

DE

PRCTICA

DESARROLLO

Manejo de microscopio y
localizacin de
metafases.

2y5

Sexocromatina.
Manipulacin de material
estril en un simulacro de
cultivo celular. Cultivo de
linfocitos.
Elaboracin de
preparaciones
cromosmicas a partir del
cultivo de linfocitos.

Tinciones cromosmicas.

1a3

El cariotipo humano.
Anlisis de Bandeo
Cromosmico con uso de
TICs.
Replicacin,
Transcripcin, Traduccin
y Mutacin.
Estudio genealgico en
gentica humana.
Estudio de la herencia
polignica.

1a2

1a2

1a2

10

11

Gentica de poblaciones.

12

Extraccin de DNA.

13

Electroforesis de cidos
nuclicos.

PROGRAMACIN
DE LA
PRCTICA

(SEMANA)

Laboratorio
de Gentica

Laboratorio
de Gentica

Laboratorio
de Gentica

Laboratorio
de Gentica

Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica

7
8

Laboratorio
de Gentica

Laboratorio
de Gentica

10

Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica
Laboratorio
de Gentica

11
12
13
14
15

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

B.- REGLAMENTO, NORMAS DE SEGURIDAD Y LINEAMIENTOS.


1.- Reglamento de Laboratorios.
CAPTULO III
De los usuarios
Artculo 18. Se consideran corno usuarios de los laboratorios:
I.
Los alumnos de la Universidad que, conforme a los planes y programas de
estudio de los diferentes niveles educativos, requieran de este apoyo.
II.
El personal acadmico de la Universidad que requiera apoyo de los
laboratorios.
III.
Los estudiantes o pasantes que se encuentren realizando tesis o prcticas
profesionales, prestatarios de servicio social o colaborando en actividades
acadmicas.
IV. Los profesores visitantes que requieran de la utilizacin o Servicios de los
laboratorios de acuerdo a convenios establecidos.
V. Las personas que, por causa acadmica justificada, autorice el Director de
la Unidad Acadmica.
Artculo 19. Los usuarios alumnos de la Universidad debern acreditar esta calidad as
como el derecho a cursar la asignatura con la que se relaciona la prctica y/ proyecto a
realizar, de acuerdo a los programas educativos vigentes.
Artculo 20. Tratndose de prcticas de asignatura de los planes y programas de estudio
vigentes en que deba asistir el grupo, ste quedar a cargo del profesor titular del mismo,
quien lo controlar y asesorar. En caso de que el profesor no asista, la prctica no
podr realizarse.
Artculo 21. Los usuarios acadmicos de la Universidad debern acreditar esta calidad
ante el Responsable de Laboratorios, as como tener aprobados los proyectos de
investigacin.
Artculo 22. Los usuarios estudiantes a que se refiere la fraccin III del artculo 18 de este
reglamento podrn hacer uso del laboratorio, clnica o taller de que se trate, con la
acreditacin respectiva y cuando cuenten con la asesora del director de tesis o del
investigador responsable del proyecto en el que participan, previo registro ante el Jefe de
Laboratorios, del protocolo de investigacin aprobado y con el visto bueno del Director de
la Unidad Acadmica.
Artculo 23. Los profesores visitantes nacionales o extranjeros debern acreditar su
pertenencia a la institucin que representan, as como los programas y convenios con los
que se relaciona la actividad por realizar y tener aprobados los proyectos de
investigacin.
CAPTULO IV
De la operacin y uso
8

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

Artculo 24. Los laboratorios permanecern abiertos en el horario definido por cada
Unidad Acadmica. Cualquier uso fuera del horario de operacin, deber ser autorizado
por el director de la Unidad Acadmica.
Artculo 25. Durante el tiempo de operacin de los laboratorios, solamente tendrn
acceso para su uso, en los horarios previamente establecidos:
I.
El personal adscrito a los mismos.
II.
Los usuarios a quienes se refiere el artculo 18 de este reglamento.
Artculo 27. Tras la adquisicin o prdida de algn equipo o mobiliario de laboratorio, el
Jefe de Laboratorio tiene la obligacin de notificar inmediatamente su alta o baja dentro
del inventario. En caso de prdida, se proceder a levantar un acta informativa y se
seguir el procedimiento legal que corresponda.
Artculo 28. Cada laboratorio deber contar con un archivo general, manuales de
prcticas y de operacin, una bitcora actualizada de servicios prestados, prcticas o
proyectos realizados, otra bitcora por cada equipo que as lo requiera, y una copia del
inventario interno actualizado, que sern resguardados por el Responsable del
Laboratorio.
Artculo 29. Las llaves de las puertas de acceso al laboratorio y de las dems reas
fsicas del mismo, estarn en poder del Responsable, y se contar con un duplicado en la
direccin de la Unidad Acadmica.
Artculo 30. Las mesas de trabajo de cualquier laboratorio, clnica y taller, sern usadas
mientras dure la prctica, por lo que no se podr dejar material en ellas por mayor tiempo
del autorizado. En el caso de tratarse de procesos continuos que no se puedan
interrumpir, se comunicar al Responsable.
Artculo 31. Los espacios fsicos destinados a cubculos u oficinas dentro de los
laboratorios, as como el mobiliario, equipo y materiales para el mismo fin, slo podrn
ser utilizados por el personal adscrito al laboratorio.
Artculo 32. Durante su estancia en los laboratorios, toda persona se abstendr de fumar,
de consumir alimentos, del uso de telfono celular y radiolocalizador. La no observancia
a esta disposicin causar la suspensin del derecho al uso de los laboratorios.
Artculo 33. Los equipos, herramientas, reactivos y materiales del laboratorio, que se
empleen durante una prctica o prestacin de servicios, quedarn bajo la
responsabilidad directa del usuario que los solicit. El solo hecho de hacer el vale
correspondiente no da derecho al usuario a sustraerlo de la Unidad, ni a conservarlo en
uso exclusivo ms del tiempo autorizado; salvo autorizacin especial y por escrito del
director de la Unidad Acadmica.
Artculo 34. Todo material y equipo solicitados debern ser devueltos al Responsable del
Laboratorio, quien tiene la obligacin de revisar que estn completos y en buen estado.
En caso contrario, registrar este hecho en la bitcora del laboratorio, o del equipo
9

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

especfico, notificando inmediatamente al Jefe de Laboratorios, quien har un convenio


con el o los alumnos para fincar la responsabilidad y acordar la modalidad de la
reparacin de la prdida o dao, lo cual ser informado a la direccin de la Unidad
Acadmica.
Artculo 35. Toda prdida o dao al equipo o del material causados por el usuario sern
repuestos o reparados por l mismo, en especie o pagos, a travs de depsito bancario o
directo en la Coordinacin de Administracin y Finanzas, en un lapso no mayor de quince
das hbiles, contados a partir de la fecha del incidente. De no cumplir lo anterior, se le
suspender el permiso para utilizar los laboratorios, clnicas o talleres y se sujetar a lo
dispuesto por la legislacin universitaria.
Artculo 36. La persona que haga mal uso del equipo, materiales o instalaciones, o que
presente un comportamiento indisciplinado, ser amonestada o se le suspender
temporal o definitivamente el permiso de uso de los laboratorios, clnica o taller, segn la
gravedad o frecuencia con que dicha accin se realice, y de acuerdo a lo establecido en
el reglamento interno de la Unidad Acadmica correspondiente.
Artculo 37. Es obligacin del Responsable del Laboratorio, supervisar el cumplimiento de
las reglas de seguridad, contar con carteles, cuadros u otros sealamientos. Ser su
responsabilidad revisar y actualizarlos peridicamente.
Artculo 38. Todo usuario alumno que no utilice o que haga mal uso de los materiales de
proteccin diseados para trabajar en el rea o que ponga en peligro a otros usuarios a
travs de su comportamiento inadecuado, se har acreedor a las siguientes sanciones:
I.
Ser amonestado verbalmente. De no corregir de inmediato su actitud, le
ser suspendida la autorizacin para seguir trabajando ese da.
II.
En caso de reincidir, ser suspendido por el resto del semestre.
Artculo 39. El director de la Unidad Acadmica aplicar las sanciones referidas en el
artculo 38, segn la gravedad de la falta.
Artculo 40. Respecto a los usuarios acadmicos de la Universidad y a los profesores
visitantes que infrinjan las normas de seguridad y disposiciones de este reglamento, la
Direccin de la Unidad Acadmica comunicar a la Secretara General las faltas
cometidas para que, en su caso, se apliquen las sanciones que procedan.
Artculo 41. Ningn equipo, accesorio, material, reactivo o mobiliario podr ser sustrado
de los laboratorios, sin la autorizacin de la direccin de la Unidad Acadmica, debiendo
el Jefe de laboratorios, vigilar y registrar, de acuerdo a los procedimientos establecidos
por la Direccin de Recursos Materiales cualquier mudanza autorizada, fuera o dentro de
la unidad acadmica.
Artculo 43. El manejo de reactivos y materiales dentro de los laboratorios deber
sujetarse a las normas nacionales e internacionales que en materia de seguridad e
higiene estn establecidas.
10

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

Artculo 44. Toda informacin tcnica perteneciente a los equipos y accesorios de un


Laboratorio es parte integral del mismo, y deber estar disponible para su consulta en el
lugar al que pertenecen.
Artculo 45. Cada equipo mayor deber contar con una bitcora de operacin propia, la
cual ser un libro de pasta dura, con hojas foliadas y resistentes, y se ubicar
permanentemente junto al equipo correspondiente; cada vez que sea utilizado un equipo,
el usuario deber registrar en ella:
I.
Nombre y firma;
II.
Fecha;
III.
Proyecto, prctica o servicio al que corresponde el uso;
IV.
Hora de inicio del uso del equipo;
V.
Hora de terminacin del uso del equipo;
VI.
Nmero de muestras y material usados;
VII. Unidad acadmica o dependencia externa de adscripcin; y
VIII. Observaciones generales.
CAPTULO V
De los servicios
Artculo 47. Se consideran servicios prestados por los laboratorios: a toda actividad en
apoyo a la docencia e investigacin, as como asesora, capacitacin, anlisis,
fabricacin y preparacin de muestras, evaluacin tcnica de procedimientos
experimentales, de control, medicin o calibracin que se prestan a la comunidad
universitaria o a los sectores externos a la misma.
Artculo 48. Los servicios de los laboratorios sern de dos tipos: internos y externos.
Articulo 49. Los servicios internos sern gratuitos, y son aquellos servicios prestados a
usuarios internos que tengan por objeto cumplir con alguna de las funciones sustantivas
de la Universidad, siempre y cuando no represente un gasto no autorizado previamente.
Artculo 50. Tratndose de los servicios a los usuarios a que se refiere la fraccin III del
artculo 18 del presente reglamento, los laboratorios, clnicas y talleres, les
proporcionarn aquellos que son de carcter general; en tanto que el costo de reactivos
o materiales especficos relacionados con las tesis de titulacin, los cubrir la
Universidad, siempre y cuando se tenga la autorizacin previa del presupuesto
respectivo.
2.- Medidas de Seguridad en los Laboratorios, Talleres, Clnicas y Actividades
Extramuros.
Cuando se trabaja en un Laboratorio o Taller, siempre existe el peligro potencial de sufrir
un accidente durante el manejo de las sustancias, materiales y/o maquinaria que se
utilizan, EL LABORATORIO O TALLER ES UN LUGAR PARA TRABAJAR CON
11

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

SERIEDAD, TODOS DEBEMOS TOMAR CONCIENCIA DE LA IMPORTANCIA DE


CONDUCIRNOS CON SEGURIDAD. RECUERDA QUE:
Materiales y maquinaria + Descuido= ACCIDENTE!
Por lo que debers considerar las siguientes recomendaciones:
1.-Es obligatorio el uso de bata de algodn y lentes de seguridad.
2.-Tu lugar de trabajo siempre debe estar LIMPIO y ORDENADO.
3.-Siempre se debe trabajar en un lugar bien ventilado y con iluminacin suficiente.
4.-Todo el material que vayas a emplear debe estar perfectamente limpio, y en buenas
condiciones tanto al principio como al final del experimento, con el propsito de evitar
incidentes durante la prctica
5.-Si tu cabello es largo, deber estar recogido para evitar accidentes, especialmente
cuando se trabaja con mechero y/o maquinaria, asimismo los zapatos deben ser
cmodos y no tener descubiertos los pies
6.-NO se debe COMER ni FUMAR EN EL LABORATORIO y/o TALLER
7.-QUEDA PROHIBIDA LA VISITA DE PERSONAS AJENAS A LAS SESIONES DE
LABORATORIO y/o TALLER
8.- Deber leer cuidadosamente su prctica, antes de cada sesin de laboratorio/o Taller,
as aprovechars mejor tu tiempo y evitars errores
9.-Para cada prctica deber revisar cuidadosamente las medidas de seguridad
especficas, sobre el manejo DE LOS MATERIALES Y LA MAQUINARIA A UTILIZAR, as
como la toxicidad de los reactivos a utilizar
10.-Cuando trabaje con DISOLVENTES ORGNICOS, deber tener cuidado de hacerlo
en lugares ventilados y nunca cerca de la flama, ya que stos son voltiles e inflamables.
11.-En caso de cualquier quemadura con cido, base o fuego, deber poner la parte
afectada durante quince minutos aproximadamente bajo el chorro de agua fra,
neutralizar y acudir a la enfermera si lo considera necesario
12.-Deber envasar los residuos de la prctica en los recipientes respectivos y tener
cuidado de NO MEZCLARLOS!
13.-En caso de que ocurra alguna intoxicacin deber informar al mdico los datos que
se tengan del reactivo causante de la intoxicacin.
14.- En caso de ocurrir algn accidente por mnimo que sea, deber comunicrselo al
profesor y al laboratorista auxiliar
15.-Cuando trabaje en el taller, siempre deber ser en presencia del asesor o del
laboratorista auxiliar pero con el Vo. Bo. del asesor.
3.- Lineamientos de seguridad para trabajar en laboratorios, clnicas, talleres
y actividades extramuros.
I.
Todos los usuarios debern respetar la Normatividad Universitaria vigente.
12

MANUAL
II.

III.

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

Los usuarios slo podrn trabajar y permanecer en el laboratorio y/ taller, bajo la


supervisin directa del catedrtico, de acuerdo al Artculo 20 del Reglamento de
Laboratorios. En ningn caso el auxiliar o responsable de laboratorio, podr suplir
al catedrtico investigador en su funcin.
Para asistir a sesiones de laboratorio, clnica taller, es requisito indispensable
que los usuarios se presenten con manual de prcticas, gua de trabajo y/ de
investigacin, con los materiales especficos por adquisicin personal, necesarios
para el trabajo a realizar en los laboratorios y/ taller y portar adecuadamente su
equipo de seguridad segn aplique, a indicacin del catedrtico:
Laboratorios, clnica y/ taller: Bata reglamentaria de color blanco, de manga
de tela de algodn, filipina o bien uniforme que corresponda ,
PERSONALIZADA y como lo haya indicado el catedrtico; pelo recogido, sin
adornos, uas cortas y sin portar alhajas. Asimismo deber portar, zapato y/ bota
antiderrapantes. Si el catedrtico considera alguna otra, favor de indicarla
previamente a los alumnos para que estn en posibilidad de cumplirla
estrictamente.
En todo momento deber conducirse en el laboratorio, clnica y/ taller, con
respeto y responsabilidad hacia el catedrtico y a sus compaeros, tomando en
cuenta que la seguridad y preservacin de ste espacio depende de todos y cada
uno de los usuarios.
El laboratorio, clnica y/o taller NO proporcionar manuales de prcticas a los
usuarios, ya que stos sern suministrados por el catedrtico de la materia
correspondiente.
La entrada al laboratorio, clnica y/ taller ser a la hora exacta de acuerdo a lo
Programado.
El usuario solicitar el equipo, utensilios, herramienta, material y reactivos
descritos correctamente, de acuerdo a las especificaciones del manual de
prcticas, mediante el vale de prstamo debidamente requisitado. Formato DLA009, y su identificacin oficial de la U.A.E.H.
El usuario deber revisar el mobiliario, equipo, herramienta y material que se les
proporcione, verificando que est limpio, ordenado, completo y funcionando, ste
quedar a responsabilidad del usuario(s), durante el tiempo que dure la prctica y
despus de su uso, y deber ser entregado en las mismas condiciones en las que
fue proporcionado.
El usuario que solicite y reciba el material, herramienta y/ equipo deber ser
quien a la vez, haga la entrega del mismo, al final de la prctica.
Si el usuario no conoce el funcionamiento del equipo o mquina alguna, puede
provocar que sta sea averiada o bien provocar algn accidente al tratar de
utilizarla, para evitar lo anterior, por favor solicite asesora a su catedrtico!.
larga,

IV.

V.

VI.
VII.

VIII.

IX.
X.

13

MANUAL
XI.
XII.

XIII.

XIV.

XV.

XVI.

XVII.

XVIII.
XIX.
XX.

XXI.

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

Al devolver el mobiliario, equipo y material, el usuario deber solicitar el vale de


laboratorio Formato DLA-009 y su identificacin oficial de la U.A.E.H.
Cuando el material quede bajo la responsabilidad del usuario, el vale de
laboratorio Formato DLA-009 y su identificacin oficial de la U.A.E.H., ser
retenido por el auxiliar o responsable hasta la devolucin del material.
El usuario de laboratorio, clnica o taller, debe conocer la ubicacin y el uso de
los extintores, las puertas de emergencia, y la circulacin correcta del lugar as
como las rutas de evacuacin, para que de emergencia, proceda correctamente.
Todo frasco, bolsa, caja o contenedor, debern ser etiquetados. Por lo tanto
cualquier sustancia con recipiente no etiquetado ser desechada, conforme a lo
que indica el Manual de Procedimientos. Departamento Control del Medio
Ambiente DLA-MO-7.2-01.6.
En caso de prdida, ruptura o desperfecto del equipo o material de laboratorio, el
usuario solicitar al auxiliar el vale de adeudo Formato DLA-010 y anotar en ste
el nombre y nmero de cuenta de todos los integrantes del equipo y ser
respaldado con la identificacin oficial de la U.A.E.H., debidamente requisitada en
este vale. El adeudo se repondr en un plazo no mayor a 15 das hbiles. En este
procedimiento se retendr nicamente el vale de adeudo.
Si el material adeudado no es repuesto en el plazo fijado, el o los usuarios
responsables, no podrn continuar con la realizacin de las prcticas
correspondientes. Control de adeudo Formato DLA-011.
En caso de no cumplir con la reposicin del material en el plazo establecido, el
usuario(s), sern dados de alta, en la aplicacin del Sistema Institucional de
Control de Adeudos en Laboratorios, Clnicas y Talleres, implementado en la
Direccin de Laboratorios y Talleres de la U.A.E.H.
La acreditacin de cada una de las prcticas que se realicen, estar sujeta a la
evaluacin que aplique el catedrtico.
El usuario que realice prctica de recuperacin deber cumplir con todo lo
estipulado en el presente.
Los usuarios que por indisciplina o negligencia pongan en peligro su integridad, la
de sus compaeros, la del mobiliario, material, utensilios o la de las instalaciones,
sern sujetos a la sancin correspondiente prevista en el Reglamento de
Laboratorios Artculo 36 y 38.
Por la naturaleza de los materiales, reactivos y/ equipo, que existen en el
laboratorio, clnica y/o taller debes mantenerte alerta y sin distracciones y adems
NO corras, NO ingieras alimentos, NO se permite el uso de equipos de sonido
personales y NO SE PERMITEN VISITAS DURANTE TU ESTANCIA EN
LABORATORIO, CLNICA O TALLER ALGUNO.
14

MANUAL
XXII.
XXIII.
XXIV.

XXV.

XXVI.

XXVII.

XXVIII.

XXIX.

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

El usuario que incurra en alguna falta acadmica ser sancionado de acuerdo a la


Normatividad Universitaria vigente.
Queda estrictamente prohibido realizar cualquier tipo de actividad ajena al
desarrollo de las tareas propias del laboratorio, clnica y/o taller.
Todo usuario deber entrar y salir por los accesos autorizados, en orden y
cuidando su integridad y la de sus compaeros. (Manual de Higiene, Seguridad y
Ecologa, Capitulo 1).
Los usuarios deben reportar cualquier anomala o maltrato por parte del
catedrtico y del personal de laboratorio, al jefe de los mismos o en su caso a la
Direccin de la escuela.
Al concluir la prctica, deben dejar limpia el rea de trabajo, as como el mobiliario,
material y equipos utilizados. NO TIRES PAPELES Y/O BASURA A LAS TARJAS,
MESAS Y EN EQUIPOS.
Al concluir la licenciatura, maestra o doctorado y realice su trmite de titulacin el
usuario solicitar su constancia de no adeudo de material, herramienta y/o
equipo de laboratorios, clnicas y talleres, para obtenerla har una donacin en
especie (material que se usa en los, clnicas, laboratorios y talleres) de acuerdo al
Formato DLA-043, la cantidad de la donacin ser entre tres y cuatro salarios
mnimos vigente en el estado de Hidalgo para ello es necesario entregar la nota y
escribir en el formato el material donado, posteriormente el documento que se
extienda se entregar a la Direccin de Laboratorios y Talleres donde se elabora y
entrega la constancia de no adeudo.
Las situaciones no previstas en este lineamiento sern resueltos por la Direccin
correspondiente y la Direccin de Laboratorios de acuerdo a la legislacin
universitaria aplicable.
En los laboratorios, clnicas y/o talleres se toma en cuenta la regla de cortesa la
cual marca que por ningn motivo o circunstancia las personas que se encuentren
dentro de las instalaciones del laboratorio, clnica y/o taller debern de nombrarse
con apodos, malas palabras o faltarse al respeto de cualquier connotacin sexual,
racial o social. En caso contrario la Direccin correspondiente y la Direccin de
Laboratorios aplicarn lo conducente de acuerdo a la legislacin universitaria
aplicable.

15

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

C.- NORMAS DE SEGURIDAD ESPECFICAS DE LA PRCTICAS DE ESTE MANUAL


1.- Cuadro de normas y referencias de seguridad de la prctica.
Para el llenado, consulte el Manual de Higiene, Seguridad y Ecologa
T IPO DE RIESGO

COMO EVITARLO

COMO PROCEDER EN CASO DE UN


ACCIDENTE

Envenenamiento por
Ingestin

Pipetear las sustancias Con base en el Manual de


nicamente con propipeta. Higiene,
Seguridad
y
Ecologa y la sustancia
especfica ingerida.
Envenenamiento por
Utilizar Guantes cuando
Lavar con abundante agua y
Absorcin por la piel
sea indicado en la
remitir a servicio mdico.
prctica
Quemadura por
Utilizar Guantes cuando Lavar con abundante agua y
Sustancias qumicas
sea indicado en la prctica remitir a servicio mdico.
Quemadura
Trabajar a la distancia Lavar con abundante agua y
Fuego directo
indicada por el catedrtico remitir a servicio mdico.
y evitar derrames de
alcohol
Heridas con
No recoger la cristalera Lavar con abundante agua y
Material roto u
rota directamente con las remitir a servicio mdico.
Objetos punzantes
manos y depositarlas en
los
contenedores
exclusivos para tal fin
Incendios por
Conectar y desconectar Seguir la ruta de evacuacin
descargas elctricas, o el equipo que requiere sealada y dar aviso a las
bien sistemas
electricidad
para
su autoridades.
elctricos conectados funcionamiento,
Utilizar el extintor adecuado.
y sin previa revisin,
tomndolo
firmemente
tanto de la instalacin de la clavija
como del equipo
conectado.

16

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

GENTICA

2.- Poltica Ambiental

Poltica ambiental
Es compromiso de todos los integrantes de la comunidad universitaria cumplir
la normatividad vigente aplicable en materia ambiental, as como con los
requisitos e iniciativas que la Universidad Autnoma del Estado de Hidalgo
emita, para mitigar el impacto ambiental generado por las actividades
universitarias y para direccionar a la institucin hacia el desarrollo sostenible
mediante el fomento del equilibrio entre el respeto al medio ambiente y el
desarrollo universitario.

2a.- Cuadro de Disposicin de Residuos.


Manual de Procedimientos del Departamento de Control del Medio Ambiente. Plan de
Manejo de los Residuos C R E T I (Corrosivos, Reactivos, Explosivos, Txicos e
Inflamables) y el Manual de Procedimientos del Departamento de Control del Medio
Ambiente. Plan de Manejo de los Residuos R P B I (Residuos Peligrosos Biolgicos e
Infecciosos).
T IPO DE RESIDUOS

CLASIFICACIN

T IPO DE CONTENEDOR

Sangre embebida en Algodn


o en torundas.

Slido RPBI

Bolsa de polietileno color Rojo.

Abatelenguas

Slido RPBI

Bolsa de polietileno color Rojo.

Guantes

Slido RPBI

Bolsa de polietileno color Rojo.

Cubrebocas

Slido RPBI

Bolsa de polietileno color Rojo.

Puntas de micropipeta

Slido RPBI

Bolsa de polietileno color Rojo.

Agujas

Slido RPBI

Portaobjetos rotos
Cubreobjetos rotos
Pipetas serolgicas rotas

Slido
Slido
Slido

Recipientes rgidos de polipropileno color


Rojo.
Recipientes rgidos de polipropileno color
Rojo.
Recipientes rgidos de polipropileno color
Rojo.
Caja de cartn identificada con la
leyenda material de cristal roto.
17

MANUAL

LICENCIATURA EN MDICO CIRUJANO


DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE

T IPO DE RESIDUOS

CLASIFICACIN

Pipetas Pasteur rotas

Slido

Cristalera rota

Slido

Solucin Fijadora de Carnoy

Lquido
Inflamable
(CR)

Corrosivo
e
no halogenado

Solucin saturada de EDTA

Lquido Txico (T)

Tris borato EDTA

Liquido Txico (T)


Irritante ocular y cutneo

Bromuro de etdio

Lquido Toxico agudo (Th)

Geles teidos con bromuro de


etdio

Slido Txico agudo (Th)

Etanol absoluto

Lquido inflamable
disolvente no halogenado (I)

GENTICA

T IPO DE CONTENEDOR
Caja de cartn identificada con la
leyenda material de cristal roto.
Caja de cartn identificada con la
leyenda material de cristal roto.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado especficamente para ste
residuo.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado para Residuos Txicos no
reactivos.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado para residuos Txicos no
reactivos.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado especficamente para ste
residuos.
Caja de cartn embalada con plstico por
y material absorbente dentro rotulado
especficamente para ste residuos.
Recipiente hermtico con tapa rosca,
rotulado para residuos disolventes
inflamables no halogenados.

18

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
D.- CONTENIDO DE CADA PRCTICA EN PARTICULAR.
Identificacin.
Manejo de Microscopio y

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Localizacin de Metafases
1

NO. DE SESIONES:

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

1. Introduccin.
El microscopio amplia las imgenes para su observacin por el uso de lentes de
aumento lo que permite el anlisis en este caso de preparaciones sanguneas y de
cultivo de linfocitos para que el alumno se familiarice con el uso y cuidados bsicos del
aparato, adems aprenda a enfocar y localizar metafases.
2. Objetivo General.
Recordar el manejo del microscopio, aprender a enfocar y a localizar las metafases
adecuadas, para adquirir las habilidades necesarias que le permitan realizar las prcticas
posteriores.
3. Objetivos Especficos.
Ser capaz de enfocar el microscopio.

Identificar metafases de buena calidad para realizar un anlisis cromosmico.

Aplicar los cuidados bsicos del microscopio.

4. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos


a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Tipo B. Para
microscopa y
20 ml
Aceite de inmersin
Hematologa
Por grupo
Diferencial Automatizada
1 Block
Papel Seda
Block con 100 hojas
Por grupo
19

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

CANTIDAD
1 pza.
1 pza.
4 fcos.
CANTIDAD
1 pza.

10cmX15cm. Para
limpieza de lentes de
microscopio sin
rayarlos.
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Tincin con Write o
Laminilla de frotis sanguneo
con Giemsa
Laminilla de linfocitos con
Tincin con Giemsa
cromosomas en metafase
Recipientes plsticos
Goteros para aceite de
con tapa dispensadora
inmersin
alargada.
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
ptico binocular.
Marca Karl Zeiss, con
Microscopio
objetivos de 10X, 40X
y 100X

OBS.
Por equipo
Por equipo
Por grupo
OBS.
Por equipo

6.
1.
2.
3.

Desarrollo de la Actividad Prctica.


Enfocar la laminilla de frotis sanguneo con el objetivo de 10 X.
Cambiar el objetivo a 100 X, adicionando una gota de aceite de inmersin.
Dibujar el campo observado con los objetivos de 10X y 100X para el Frotis
sanguneo.
4. Enfocar la laminilla de linfocitos y ubicar una metafase en 10X.
5. Cambiar al objetivo de 100 X.
6. Dibujar el campo observado con los objetivos de 10X y 100X para la laminilla de
linfocitos con metafases.
7. Cuestionario.
1. Menciona las diferencias entre los objetivos secos y hmedos.
2. Cul es la funcin del aceite de inmersin? Fundamenta tu respuesta.
3. Para qu sirven y resalta las diferencias que hay entre los tornillos:
a)macromtrico, b)micromtrico y c)superior e inferior de la platina?
4. Cules son las diferentes maneras por las que se puede regular el nivel de luz en
el microscopio?
5. Menciona los cuidados bsicos de uso y limpieza del microscopio y los objetivos.
8. Bibliografa.
20

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson &
Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a ed.).
Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico los Temas: Funcionamiento del microscopio.

21

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Sexocromatina.

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

2. Introduccin.
La condensacin que sufre el cromosoma X por inactivacin permite observarlo como
un corpsculo adosado a la membrana nuclear de las clulas de la mujer, como un
punto compacto no refringente que se tie de negro o prpura oscuro cuando la
preparacin de clulas de descamacin se tie con orcena cida el cual es un
colorante especfico para DNA.
Contabilizar el nmero de corpsculos de Barr, en muestras de clulas de descamacin
tanto en individuos, nos permite evaluar posibles algunas anomalas numricas ligadas
al cromosoma X.
3. Objetivo General.
Realizar la prueba rpida de orcena cida para la determinacin de la frecuencia de la
sexocromatina positiva, para determinar alteraciones numricas del cromosoma X en
clulas epiteliales de la mucosa oral.
4. Objetivos Especficos.
Comprender en que consiste el fenmeno de Lyonizacin.
Adquirir la capacidad de identificar el corpsculo de Barr en una muestra de
epitelio bucal.
Determinar la frecuencia de corpsculos de Barr en hombres y mujeres, y en su
caso la existencia de alteraciones numricas del cromosoma X.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
22

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
CANTIDAD
2 pzas.
2 pzas.
50 ml
20 ml
1 Block
CANTIDAD
2 pzas.
2 pzas.
4 pzas.
4 fcos.
CANTIDAD
1 pza.
1 pza.

DESCRIPCIN

ESPECIFICACIONES
15cmX2cmX2mm
De madera fina, puntas
Abatelenguas
redondeadas, pulido y libre de
astillas.
Toallas de papel
Interdobladas, para manos
desechables
24cmX21cm
Orcena+ cido actico + cido
Acetorcena
clorhdrico
Tipo B. Para microscopa y
Aceite de inmersin
Hematologa Diferencial Automatizada
Block con 100 hojas 10cmX15cm.
Papel Seda
Para limpieza de lentes de
microscopio sin rayarlos.
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Portaobjetos
Laminillas de vidrio de 27X75mm
Laminillas de vidrio de
Cubreobjetos del no.1
borosilicato de 24mmX50-60mm
Goteros para aceite de
Recipientes plsticos con tapa
inmersin
dispensadora alargada.
Frascos goteros de vidrio Para la orcena cida
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Balanza Digital
Capacidad 1200gX0.001g
ptico binocular. Marca Karl
Microscopio
Zeiss, con objetivos de 10X, 40X
y 100X

OBS.
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por grupo
OBS.
Por grupo
Por equipo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


1.
Realizar un raspado de la cara interna del carrillo del sujeto de estudio (quien
debe llenar el consentimiento informado del Anexo 5 de este manual
previamente).
2. Extender la muestra en un portaobjetos y dejar secar al aire.
3. Adicionar 3 gotas de acetorcena y extender el colorante colocando el
cubreobjetos evitando la formacin de burbujas.
4. Envolver la preparacin en papel secante.
5. Presionar la laminilla para retirar el exceso de colorante y expandir las clulas.
6. Colocar la preparacin en el microscopio y enfocar con el objetivo de 10 X.
7. Cambiar al objetivo de 100X y cuantificar en 100 clulas de epitelio oral el
porcentaje de ellas que presentan el corpsculo de Barr el cual se observa
23

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
como un objeto redondo y oscuro, adosado a la membrana nuclear, que no
refringe.
8. Realizar la cuantificacin en una muestra de hombre y en una de mujer.
9. Concentrar los datos del conteo de corpsculos de Barr en la siguiente tabla:
VARN
MUJER
Con corpsculo
Sin corpsculo
Total
Porcentaje
7.
1.
2.
3.
4.

Cuestionario.
En qu consiste el proceso de Lyonizacion?
Por qu en los hombres la frecuencia de cuerpos de Barr es casi nulo?
Cundo ocurre la inactivacin del crosoma X?
Qu determina cul cromosoma (materno o paterno) se va a inactivar?

8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson &
Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a ed.).
Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Inactivacin del cromosoma X y
gonosomopatas.

24

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.
Manipulacin de Material Estril en un
NOMBRE DE LA PRCTICA:

Simulacro de Cultivo Celular. Cultivo de


Linfocitos.

NO. DE PRCTICA:

NO. DE SESIONES:

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

2. Introduccin.
La esterilizacin implica el uso de agentes qumicos o fsicos para eliminar todos los
microrganismos vivos de un material. La eleccin de uno u otro mtodo para llevar a
cabo la esterilizacin depender de la naturaleza del material que se desea esterilizar,
ya que en trminos generales lo que se desea es destruir los microorganismos, sin
daar el material de laboratorio que los contiene. Ms an, en el caso de los medios de
cultivo celular es importante que el mtodo de esterilizacin no degrade los nutrientes
que contiene.
Los principales mtodos de esterilizacin que se utilizarn en este curso son:
a)
Calor seco.
b)
Calor hmedo.
c)
Filtracin.
Los procesos de esterilizacin permiten la eliminacin de grmenes saprofitos y
patgenos de distintas superficies, en este caso la prctica pretende adiestrar a los
alumnos a que trabajen con material estril utilizando un mechero o lmpara de alcohol
(calor seco) que brinda un rea estril de 10 cm a la redonda dentro de la cual se debe
manipular el material de cristalera y los medios de cultivo previamente esterilizados,
en caso de que la manipulacin sea correcta los cultivos obtenidos permanecern
transparentes sin cambio aparente en el medio, en caso de contaminacin por
bacterias este presentara turbidez.
3. Objetivo General.
Comprender la importancia del

manejo de material estril y adquirir la habilidad


25

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
necesaria para el manejo de cultivos celulares, as como aprender todos los pasos
para realizar un cultivo de linfocitos.
4. Objetivos Especficos.
Adquirir las habilidades manuales en la manipulacin del material estril a travs
de un simulacro de cultivo celular.
Entender los fundamentos del cultivo celular.
Realizar un cultivo de linfocitos para la posterior elaboracin de preparaciones
histolgicas.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
1 lt
Alcohol
al 70% para desinfectar
Por Grupo
100 ml
Medio Caldo nutritivo
Preparado y esterilizado
Por equipo
Diluido en caldo nutritivo
10 ml
Rojo de fenol
Por equipo
y esterilizado
Solucin inyectable
0.1 ml
Heparina
Por Grupo
1000UI/ml (Sigma)
4 lts
Agua Desionizada
Comercial. Marca Hycell
Por Grupo
1pza.
Cinta testigo para esterilizacin Para uso en autoclave
Por Grupo
Lienzo de 50cm de largo,
1 lienzo
Franela
Por equipo
preferentemente blanca.
100 gr
Algodn
Plisado
Por equipo
Para trabajo de limpieza,
de abrasividad media,
1 pza.
Fibra verde multiusos
para materiales como
Por equipo
plstico, cermicas,
peltre y aluminio.
1 rollo
Papel aluminio
15mX30cm
Por Grupo
Por
equipo.
Indeleble, tipo lapicero,
1 pza.
Marcador
Aportado
punta mediana.
por el
alumno.
Por
1 pza.
Cubrebocas
Desechables
persona
Por
1 par
Guantes de ltex
Desechables
persona
3 pzas.
Jeringas
10 ml, 21GX32mm
Por Grupo
3 pzas.
Jeringa para insulina
Volumen muerto
Por Grupo
5 pzas.
Filtros milipore
Desechables
Por Grupo
26

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1 bolsa
CANTIDAD
3 pzas.
2 pzas.
2 pzas.
2 pzas.
10 pzas.
10 pzas.
1 pza.
1 pza.
1 pza.
1 pza.
1 pza.
CANTIDAD
1 pza.
1 pza.

Detergente

Roma, 500 gr.


b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
10 ml, previamente
Pipetas serolgicas
esterilizadas.
5 ml, previamente
Pipetas serolgicas
esterilizadas.
Pipetas Pasteur
De vidrio, previamente
esterilizadas.
Frascos viales esterilizables con
15 ml, previamente
tapn de rosca
esterilizadas.
Botellas para medio
esterilizables con tapa fenlica
25 ml
y sellos de tefln
Tubos para centrfuga de punta
15 ml
V
Matraces erlenmeyer con tapn
50 ml, previamente
de rosca
esterilizadas.
Gradilla
Para tubos de ensaye de
15 ml
Bulbos para pipeta Pasteur
De goma
Propipeta
Mechero o lmpara de alcohol
De cristal con tapa
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
Campana para cultivo celular
Balanza digital
Incubadora

1 pza.
1 pza.

Autoclave

Por Grupo
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por Grupo
Por Grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo

ESPECIFICACIONES

OBS.
Por
Class IIA/B3
grupo
Por
Capacidad 1200gX0.001g
grupo
Clnica
de
acero Por
inoxidable,
con
una grupo
capacidad mnima de 90L.
De vapor, acero inoxidable, Por
de uso manual.
grupo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


A)
Simulacro de Cultivo Celular
1. Lavar la mesa con agua y detergente y limpiar con la franela.
2. Colocarse cubre bocas y guantes.
3. Desinfectar con etanol al 70% y algn otro desinfectante qumico y secar con el
algodn.
27

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
4. Encender el mechero.
5. Aflojar los tapones del matraz y los frascos de cultivo.
6. Por pareja tomar 8 ml de caldo nutritivo de matraz con la pipeta ajustada a la
propipeta en condiciones de esterilidad, manejando todo a menos de 5 cm del
mechero, sembrar 2 tubos.
7. Depositar el liquido en el frasco de cultivo teniendo cuidado de no chorrear las
paredes cuidando de mantener las condiciones de esterilidad.
8. Adicionar a cada frasco 10 gotas del caldo con rojo de fenol, tomndolo en
condiciones de esterilidad del tubo con la pipeta Pasteur.
9. Agitar hasta que el colorante se mezcle con el medio e incubar por 24h, revisar los
frascos. Volver a incubar otras 24 horas ms.
10. Describir las caractersticas presentadas en los frascos a los diferentes tiempos
Tubo
0 horas
24 horas
48 horas
1
2
11. Transcurridos los tiempos de incubacin, determinar la contaminacin
microbiolgica en los frascos de cultivo por turbidez en el medio o cambio de
coloracin.
12. A cada tubo se debe aadir Hipoclorito de Sodio 4-7% durante 30 minutos y
verter al drenaje.
B)
Cultivo de Linfocitos. Obtencin de la muestra y siembra de linfocitos
1. El alumno que haya aceptado participar en este estudio deber haber firmado
previamente la Carta de Consentimiento informado (Anexo 6), al cual, se le
Limpiar la zona de puncin (antebrazo) con agua y jabn y desinfectarse
con, por lo menos, tres torundas humedecidas con alcohol.
2. Dentro de la campana de cultivo, ligar el antebrazo y realizar la puncin.
3. Obtener de 1.5 a 2 ml de sangre venosa por medio de una jeringa previamente
heparinizada. Este es el nico anticoagulante que puede usarse.
4. Una vez obtenida la sangre mezclar muy bien rotando la jeringa. No olvidar que
toda la operacin debe hacerse dentro de la zona estril donde se est
trabajando.
5. Servir 8 ml de medio de cultivo en cada uno de los frascos para cultivo.
6. Adicionar 0.06 ml de fitohemaglutinina para obtener una concentracin final de
la misma de 5 mg/ml en las botellas de cultivo estriles.
7. Adicionar 8 gotas de sangre heparinizada y agitar.
8. Incubar 70 horas a 37 C, agitando cada 24 hrs.
9. Transcurrido este periodo adicionar 5 gotas de colchicina e incubar por 2 horas
28

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
ms a 37C. (Este apartado tiene continuidad con la prctica No. 2).
10. Describir las caractersticas presentadas en los frascos a los diferentes
tiempos.

1.
2.
3.
4.

13. Cuestionario.
Realizar un cuadro comparativo donde se indique la diferencia de las tcnicas
utilizadas.
Cul es la diferencia entre el calor hmedo y el calor seco como mtodos de
esterilizacin?
Qu componentes tiene el caldo nutritivo?
Cules son los rangos de viraje del pH del rojo de fenol como indicador?

14. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
15. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Mtodos de esterilizacin.

1. Identificacin.
Elaboracin de Preparaciones Cromosmicas

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

a Partir del Cultivo de Linfocitos


4

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

29

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
2. Introduccin.
Las preparaciones cromosmicas se obtienen a partir de un cultivo de linfocitos el cual
consiste en adicionar sangre completa a un medio de cultivo rico en nutrientes al cual
se le adiciona un agente mitgeno para estimular la divisin celular de los linfocitos
(fitohemaglutinina), a las 71 h de cultivo esta divisin celular se detiene mediante la
adicin de colchicina la cual es un alcaloide que impide la polimerizacin del huso
acromtico interrumpiendo la mitosis en metafase, permitiendo de esta manera
observar a los cromosomas en sta etapa despus de realizar el proceso de cosecha,
el cual consiste en lisar a las clulas blancas y rojas mediante un tratamiento
hipotnico con cloruro de potasio, deshidratarlas y desnaturalizarlas con solucin
fijadora de Carnoy (metanol: cido actico 3:1) con el fin de que se adhieran a los
portaobjetos para su posterior tincin con Giemsa.
3. Objetivo General.
Aprender a elaborar preparaciones cromosmicas a partir de la cosecha de los
linfocitos de un cultivo previo, con el fin de obtener el material de anlisis que le
conducir a la elaboracin de un cariotipo.
4. Objetivos Especficos.
Adquirir la habilidad en el manejo del material del laboratorio.

Realizar la cosecha de linfocitos a partir de un cultivo previo.


Obtener preparaciones cromosmicas.

5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.


a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
1 pza.

1pza.
1.5 lt
100 ml
400 ml

OBS.
Por
equipo.
Indeleble, tipo lapicero, punta
Marcador
Aportado
mediana.
por el
alumno.
Mediano para limpieza de
Por
Escobilln
material
equipo
Por
Agua destilada
Comercial. Marca Hycell.
grupo
Por
Cloruro de potasio
Solucin al 0.075M
grupo
Por
Solucin Fijadora de Carnoy Metanol : cido actico 3:1
grupo
b) Materiales/Utensilios.
30

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
CANTIDAD

DESCRIPCIN

ESPECIFICACIONES
Plstica, econmica, para
pipetas de vidrio y plstico.
Monomando, rueda giratoria
para aspirar y botn de
liberacin rpida.

1pza.

Propipeta manual
automtica

2 tubos

De cultivo con clulas


cultivadas y fijadas de la
prctica anterior

Tubos por mesa

2 pzas.

Pipetas serolgicas

10 ml, de vidrio

4 pzas.

Pipetas Pasteur

De vidrio, largas (23cm)

10 pzas.

Tubos para centrfuga de


punta V

15 ml, de plstico y
desechables

2 pzas.

Piceta

250 500 ml

2 pzas.

Probeta

100 ml

1 pza.

Probeta

500 ml

1 pza.

Bulbo de plstico

para pipeta pasteur

12 pzas.

Portaobjetos

De vidrio

2 pzas.

Matraz aforado

100 ml

1 pza.

Hoja de papel

tamao carta, puede ser


reciclada

2 pzas.
CANTIDAD
1 pza.
4 pza.

Vasos de precipitado

100 ml

c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Refrigerada, rotor y camisas
Centrfuga
para tubos de 15ml y 50 ml, Vel
max. 4,000 rpm.
Agitador vrtex

1 pza.

Potencimetro

1 pza.

Microscopio

Vel. 3,000 rpm


Rango de pH -2.00-16.00 y
399.9 mV; 2000 mV.
Temperatura de -20 a +120 C.
Calibracin automtica
ptico binocular. Marca Karl

OBS.
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
grupo
Por
equipo
Por
grupo
Por
grupo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
Por
equipo
OBS.
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Por
31

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

1 pza.

Balanza analtica

1 pza.

Balanza Digital

Zeiss, objetivos: 10, 40 y 100X


Capacidad 120G X 0,1MG. De
calibracin interna.
Capacidad 1200gX0.001g

equipo
Por
grupo
Por
grupo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


Cosecha de linfocitos
1. Depositar el cultivo en un tubo cnico y centrifugar 10 minutos a 2000 rpm.
2. Eliminar el sobrenadante con una pipeta serolgica evitando tocar el botn
celular y dejando 0.5 ml de lquido.
3. Resuspender con una pipeta Pasteur el botn celular.
4. Adicionar 8 ml de solucin de KCl 0.075M previamente calentada a 37 con
agitacin en vrtex.
5. Incubar 45 minutos a 37 C.
6. Centrifugar y retirar el sobrenadante, que deber ser colocado en un recipente
independiente al cual se deber aadir Hipoclorito de Sodio 4-7% durante 30
minutos y verter al drenaje.
7. Resuspender el botn celular restante y adicionar por goteo 8 ml de solucin
fijadora de Carnoy.
8. Repetir la fijacin en dos ocasiones ms.
9. Retirar el sobrenadante de la tercera fijacin y resuspender el botn
10. Tomar unas gotas de las clulas de la prctica anterior y depositar en un
portaobjetos limpio dejndolas caer desde al menos 1.5m de altura.
11. Dejar que se evapore el solvente por al menos 24 horas
12. Observar al microscopio una de las laminillas obtenidas, enfocando a 40X con
ayuda del profesor y la auxiliar de laboratorio.
13. Realizar una tabla en donde se represente el equilibrio de peso de los tubos
para centrifugar.
14. Realizar un dibujo y/o tomar una foto del botn celular obtenido en la cosecha
de linfocitos y describirlo.
15. Realizar un dibujo y/o tomar una foto del campo observado a 40X de una de las
laminillas montadas localizando la metafase y describirla.
7.
1.
2.
3.

Cuestionario.
Cul es la funcin de la solucin fijadora de Carnoy?
Cul es la funcin del KCl y porque permite lisar las clulas?
Por qu se seleccion esa velocidad y tiempo de centrifugacin en los lavados
realizados?
32

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
4. De qu otros tejidos se pueden obtener preparaciones cromosmicas?
8. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Cultivo celular.

1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Tinciones Cromosmicas.

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

2. Introduccin.
Las tcnicas de tincin en la citogentica se utilizan como un apoyo para realizar la
identificacin de cromosomas dentro del cariotipo humano, permitiendo separarlos por
grupo y por par, asimismo nos permiten distinguir las distintas partes de dichos
cromosomas. Estas tcnicas de tincin tienen utilidad en la clnica, dentro de las que
se incluye el diagnstico de enfermedades que tienen origen en las cromosomopatas.
3. Objetivo General.
Realizar la tincin con Giemsa y para bandas G, utilizadas en el diagnstico
33

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
citogentico para la identificacin de cromosomas.
4. Objetivos Especficos.
Realiza la tincin con Giemsa.
Realizar la tincin para bandas G para el anlisis cromosmico.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
250 gr
Fosfato de sodio dibsico
Q.P.
anhidro
250 gr
Fosfato de potasio
Q.P.
monobsico
100 ml
Giemsa liquida
Kariomax en Solucin Gurr. Mca.
Gibco.
100 gr
Tripsina porcina
Potencia 1:250
10 gr
1 lt
5 lts
50 gr
20 ml

CANTIDAD
12 pzas.
4 fcos.
20 pzas.
2 pzas.
4 pzas.
2 pzas.

OBS.
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
Bicarbonato de sodio
Por
Q.P.
grupo
Solucin salina
Por
Fisiolgica comercial
grupo
Agua desionizada
Por
Comercial. Mca. Hicell.
grupo
EDTA disdica
Por
Q.P.
grupo
Aceite de inmersin
Tipo B para microscopa
Por
y
hetatologa
diferencial grupo
automatizada
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Por
Laminillas
Obtenidas en la sesin anterior.
equipo
Goteros de aceite de
Recipientes plsticos con tapa Por
inmersin
dispensadora alargada
grupo
Verticales para 10 portaobjetos, Por
Vaso coplin
50 ml, con tapa rosca.
grupo
Por
Vaso de Precipitado
500 ml, de vidrio.
grupo
Por
Pinza con punta de goma
De 15-20cm de largo
grupo
Por
Piceta
250 500 ml
grupo
c) Equipos/Instrumentos.
34

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
CANTIDAD

DESCRIPCIN

1 pza.

Microscopio

1 pza.

Balanza analtica

1 pza.

Balanza Digital

ESPECIFICACIONES
ptico binocular. Marca Karl
Zeiss, con objetivos de 10X, 40X
y 100X
Capacidad 120G X 0,1MG. De
calibracin interna.
Capacidad 1200gX0.001g

OBS.
Por
equipo
Por
grupo
Por
grupo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


Tinciones cromosmicas
a) Tcnica de Tincin directa con Giemsa
1. Introducir la preparacin cromosmica en solucin salina fisiolgica (SSF) por
dos minutos.
2. Teir 15 minutos en Giemsa al 4% pH de 6.8.
3. Lavar al chorro del agua y dejar secar al aire.
4. Las laminillas quedan listas para su observacin.
b) Tcnica de bandeo G
5. Introducir la preparacin cromosmica en solucin salina fisiolgica (SSF) por
dos minutos.
6. Introducir la laminilla en una solucin de tripsina (20 mg/50 ml de SSF)
amortiguada a pH= 8 de 15 a 20 segundos agitando, a 37C el tiempo vara
entre personas, por lo cual hay que corroborar la tincin al final del proceso.
7. Neutralizar la accin de la tripsina introduciendo la preparacin en una solucin
saturada de EDTA sal disdica por 20 segundo con agitacin.
8. Lavar en buffer de fosfatos pH= 6.8 por 20 segundos y repetir el lavado.
9. Teir 15 minutos en Giemsa al 4% pH de 6.8.
10. Lavar al chorro del agua y dejar secar al aire.
11. Las laminillas quedan listas para su observacin, los cromosomas presentan
bandas claras y obscuras en donde cada par cromosmico tiene un patrn
especfico.
7. Cuestionario.
1. Realizar un esquema de los trenes de tincin utilizados y Describir que sucede
en cada vaso coplin que los conforman.
2. Qu tipo estructuras celulares tie el colorante de Giemsa?
3. Por qu se tiene que poner el colorante en una solucin taponada?
4. Qu otros colorantes se tienen para tincin del material gentico?
5. Cul es el fundamento de la tcnica de bandeo G?
35

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
6. Qu parte del cromosoma tie especficamente el bandeo C?
8. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de practica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico los Temas: Funcionamiento del microscopio y
Tcnicas de tincin cromosmica.

36

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

El cariotipo Humano.

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

2a3

2. Introduccin.
El cariotipo es el ordenamiento de los 46 cromosomas de un individuo y viene definido
por la morfologa de los cromosomas en la metafase mittica, de donde se distinguen
dos cromtides hermanas y se tiene el mayor grado de condensacin.
En la especie humana la dotacin cromosmica es de 2n = 46: 22 pares de autosomas
y un par de cromosomas sexuales.
La clasificacin se realiza acomodando los cromosomas por tamao decreciente,
posicin centromrica (constriccin primaria) y constricciones secundarias. Los grupos
van del A al G, clasificables a partir de una tincin regular, en donde los cromosomas
se agrupan nicamente por la morfologa. Si se tiene una tcnica de tincin con bandas
tambin se puede hacer la clasificacin por par de acuerdo al patrn en cdigo de
barras especfico para cada uno.
Los gonosomas o cromosomas sexuales se clasifican aparte preferentemente con una
tincin con bandas, debiendo indicar el sexo del individuo XX para la mujer y XY para
el varn, precediendo al nmero total de cromosomas observables. Si se carece de
esta tincin, el cromosoma X por su forma submetacntrica y tamao se clasifica
dentro del grupo C y el Y por su tamao pequeo y su forma acrocntrica en el grupo
G.
De esta forma el cariotipo humano queda constituido de la siguiente manera:
37

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Grupo Pares
cromosmicos

Tamao

Son los ms grandes del


cariotipo
Grandes
Medianos, descendiendo de
tamao siendo el mayor el
par 12 y el ms pequeo del
grupo el par 6.
El cromosoma X tiene un
tamao similar al par 7
Medianos, son los ms
grandes, en cuanto a su
forma.

B
C

Caractersticas de los
cromosomas
por
posicin centromrica
1, 2 y 3
Pares 1 y 3 metacntricos,
Par 2 submetacntrico
4y5
Submetacntricos.
6, 7, 8, 9, 10, 11, Submetacntricos
12 y X

13, 14 y 15

16, 17 y 18

19 y 20

21, 22 y Y

Acrocntricos con
constricciones
secundarias notorias
(satlites)
Par 16 metacntrico
Pares 17 y 18
submetacntricos
Metacntricos
Acrocntricos con
constricciones
secundarias notorias
(satlites)

Pequeos

Los ms pequeos
cuanto a su forma.
Pequeos.

en

Las cromosomopatas pueden incluir alteraciones en el nmero (aneuploidias) y la


estructura cromosmica (aneusomias) ambas diagnosticables mediante el estudio
clnico del cariotipo.
Algunas aberraciones cromosmicas pueden ocasionar ciertas patologas, como son:
Sndrome
Down
Patau
Edwards
Klinefelter
Superhombre o chico YY

Causa
Trisoma del cromosoma 21
Trisoma del par 13
Trisoma del par 18
Polisoma gonosmica por cromosoma(s) X extra(s) en
varones XXY, XXXY, XXXXY
Trisoma gonosmica por
cromosoma Y extra en
38

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

Turner

varones
Monosoma del cromosoma X

Si bien las aneusomias pueden ocurrir en cualquiera de los 46 cromosomas, estas se


dividen en intracromosmicas en donde el cambio solo se lleva a cabo en un
cromosoma como deleciones, inserciones, inversiones, isocromosomas y anillos, y las
intercromosmicas que incluyen el intercambio de material gentico entre dos
cromosomas de distinto par, las cuales pueden ser, simples, recprocas, de fusin
centromrica conocidas tambin como Robertsonianas.
El estudio del cariotipo tiene tambin su aplicacin en el diagnstico prenatal, en
parejas con problemas de fertilidad y para el diagnstico de algunas neoplasias.
3. Objetivo General. .
Aprender a clasificar a los cromosomas por grupo, distinguindolos por su forma y
tamao, para obtener anlisis de cariotipo.
4. Objetivos Especficos. .
Ser capaz de realizar un anlisis de cariotipo por clasificacin en grupos.
Determinar las diferencias morfolgicas entre los cromosomas.
Determinar el sexo cromosmico del individuo con base en la elaboracin del
cariotipo.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Block con 100 hojas
10cmX15cm.
Para
1 Block
Papel seda
Por grupo
limpieza de lentes de
microscopio sin rayarlos.
20 ml
Aceite de inmersin
Tipo B para microscopa
Por grupo
y hetatologa diferencial
automatizada
b) Materiales/Utensilios.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Laminilla de linfocitos
1 pza.
con cromosomas en
Tincin con Giemsa
Por equipo
metafase.
Recipientes plsticos con
Goteros de Aceite de
4 pzas.
tapa
dispensadora
Por grupo
inmersin
alargada
39

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

1 pza.

Cariotipo impreso

Bandeado, con o sin


aberracin cromosmica.

1 pza.

sobre blanco

Para carta.

alfileres

Punta redonda

hoja de unicel

25X25 cms

46 pzas.
1 pza.
CANTIDAD
1 pza.

c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
ptico binocular. Marca
Microscopio
Karl Zeiss, con objetivos
de 10X, 40X y 100X

Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
Por equipo y
proporcionado por
los alumnos.
OBS.
Por equipo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


Instrucciones Generales Metodologa A:
1. Enfocar la laminilla de linfocitos y ubicar una metafase en 10X.
2. Cambiar al objetivo de 100 X y dibujar el campo.
Siguiendo estas instrucciones, proceder en cada una de las sesiones de la siguiente
manera:
Grupos A y B:
1. Contar los cromosomas y apuntar el nmero.
2. Buscar los 6 cromosomas del grupo A. Son los mayores. Los pares 1 y 3 son
metacntricos (el 1 mayor que el 3) y el 2 submetacntrico.
3. Buscar los 4 cromosomas del grupo B que son los submetacntricos de mayor
tamao.
4. Presentar el dibujo de la metafase localizada, con la identificacin de los
cromosomas de los grupos A y B.
5. Indicar el sexo al que corresponde el cariotipo.
Grupos G y D:
1. Contar los cromosomas y apuntar el nmero.
2. Buscar y colocar los cromosomas ms pequeos y acrocntricos que
corresponden al grupo G y, cuando est presente, al cromosoma Y que ser el
ms largo de los anteriores. En total sern 5 si es XY o 4 si es XX.
40

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
3. Buscar otros 6 cromosomas acrocntricos pero ms grandes que los
anteriores y que constituyen el grupo D.
4. Presentar el dibujo de la metafase localizada, con la identificacin de los
cromosomas de los grupos D y G, incluyendo al Y si est presente.
5. Indicar el sexo al que corresponde el cariotipo.
Grupos C, E y F:
1. Contar los cromosomas y apuntar el nmero.
2. Buscar los 4 cromosomas metacntricos ms pequeos. Colocarlos en el grupo
F.
3. Buscar los cromosomas del grupo E que son 6, algo mayores que los F. Dos de
las parejas, la 17 y 18, son submetacntricos y la 16 metacntricos.
4. Buscar los 14 cromosomas del grupo C. Encontraremos ms de 14 cromosomas,
ya que el cromosoma X es idntico a los que constituyen el par 12. Para
diferenciarlo hay que recurrir al estudio de las bandas lo mismo que, en general,
para numerar las parejas dentro de cada grupo.
5. Presentar el dibujo de la metafase localizada, con la identificacin de los
cromosomas de los grupos C, E y F.
6. Indicar el sexo al que corresponde el cariotipo.
Instrucciones Generales Metodologa B:
1. Previo a la prctica, cada equipo debe imprimir un cariotipo bandeado.
2. Recortar individualmente cada uno de los cromosomas evitando dejar el
nmero que lo identifica, dejando un pequeo marco de papel, ejemplo:

3. Colocar los todos cromosomas recortados (cuidando no perderlos) dentro de


un sobre blanco sin marcas y se entregar al profesor.
4. Se sortear un cariotipo a cada equipo.
5. Sobre el unicel y con ayuda de los alfileres para sostener se proceder a
organizar los cromosomas por nmero y por grupo, para obtener el cariotipo.
NOTA: En el caso de que haya ms de 46 cromosomas, buscar a qu grupo
pertenece el sobrante, colocarlo all y sealar el sndrome a que da lugar esta
anomala. En caso de que el nmero de cromosomas sea inferior a 46 sealar el
41

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
cromosoma que falta as como el sndrome a que da lugar esta anomala.
Si el nmero de cromosomas es de 46, estudiar cada cromosoma para comprobar si
hay algn tipo de alteracin estructural (deleciones, translocaciones...).
Por ltimo, hay que hacer el diagnstico del cariotipo obtenido. Si el diagnstico no
es correcto, vuelve a observar el cariograma detenidamente y realizar el anlisis
nuevamente.
7. Cuestionario.
1.- Qu caractersticas permiten diferenciar, en general, unos cromosomas de otros?
2.- Qu clulas del organismo llevan el cariotipo diploide completo?
3.- Qu mecanismos cromosmicos producen anomalas del cariotipo humano?
4.- Se manifiestan siempre las alteraciones cromosmicas en el fenotipo del individuo
que las transmite? Explica tu respuesta.
8. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico los Temas:

El cariotipo humano

Patologas relacionadas con cromosomas del grupo A y B.

Patologas relacionadas con cromosomas acrocntricos.

Patologas relacionadas con cromosomas del grupo E, F y C.

42

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.
Anlisis de Bandeo Cromosmico

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

con Uso de TICs


7

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

1a2

2. Introduccin. .
Los analizadores de imgenes son un parte aguas en el campo de la microscopa, si
bien no sustituyen al experto en el rea, permiten examinar de manera ms detallada la
topografa celular facilitando el diagnstico de diversas patologas, realizar anlisis
citolgicos o bien como en este caso, determinar alteraciones a nivel cromosmico.
Siguiendo el patrn del bandeo G, el analizador determina en escala de grises las
bandas claras y obscuras que nos indican las zonas eucromticas y heterocromticas
de los cromosomas, leyndolas como si fueran un cdigo de barras y asignndoles
una posicin con base en este patrn en el cariograma de manera automtica.
El analizador de imgenes consiste de un microscopio de luz, una cmara de video
para capturar las imgenes a analizar y un software especial que permite manipular la
imagen para eliminar los artefactos que pudieran interferir con la lectura, incrementar
el contraste entre las bandas y separar aquellos cromosomas que hayan quedado
encimados a partir de la imagen original.
En el armado automtico del cariograma permite girar los cromosomas y moverlos a su
posicin correcta, en caso de que el observante detecte algn error en el acomodo de
los cromosomas; cabe destacar que el aparato no es infalible y que el criterio del
citogenetista es el que finalmente decide el acomodo final de los cromosomas, por lo
cual es deseable que se tenga experiencia previa en el anlisis cromosmico.
Finalmente el analizador permite imprimir el diagnstico del paciente en el cual se
debe incluir, el nombre, la edad, el sexo, la frmula cromosmica y las observaciones
relacionadas con el diagnstico.
43

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

3. Objetivo General.
Realizar el anlisis de cariotipo de manera automatizada.
4. Objetivos Especficos.
Conocer el uso de un analizador de imgenes
Comprender los fundamentos bsicos usados por el software Ikaros para la
clasificacin cromosmica por grupo y par.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Paquete con 100 hojas blancas
1paquete
Hojas Blancas
tamao carta
1pza.

Cartucho de tinta negra

Para impresora HP 96

1 pza.

Cartucho de tinta color

Para impresora HP 97

1 Block
20 ml

CANTIDAD
1
1
CANTIDAD

OBS.
Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo

Block
con
100
hojas
10cmX15cm. Para limpieza de
Por
Papel seda
lentes de microscopio sin
grupo
rayarlos.
Aceite de inmersin
Tipo B para microscopa
Por
y
hematologa
diferencial grupo
automatizada
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Laminilla de linfocitos con
Por
cromosomas en metafase
Con tincin de bandas G
grupo
masculino
Laminilla de linfocitos con
Por
cromosomas en metafase
Con tincin de bandas G
grupo
femenino
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.

Marca Karl Zeiss acoplado a


Microscopio
con
computadora y con el programa
analizador de imgenes
IKAROS 2.0

Impresora

HP

Video-proyector

Compatible con el analizador de


imgenes

Por
grupo
Por
grupo
Por
grupo
44

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


NOTA: la prctica es de carcter demostrativo; el aparato ser manipulado
principalmente por el profesor responsable del grupo de acuerdo al protocolo del
equipo.
1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.

Encender el microscopio y el analizador de imgenes.


Enfocar una metafase en 10X y pasarla al objetivo de inmersin 100X.
Capturar dando click derecho con el ratn de la computadora.
Con apoyo de la herramienta Umbral de Objeto, mejorar la calidad de la
imagen.
Delimitar el rea a analizar con la herramienta Mask Met dando clicks
izquierdos y terminar con click derecho para eliminar las posibles interferencias.
Seleccionar con el Mouse la opcin Separar, el aparato automticamente
separa los objetos que detecta como posibles cromosomas.
Dando click izquierdo y terminando con derecho, se separan los cromosomas
que se encuentren juntos.
Corregir con la herramienta Solapar, en la vista previa, los cromosomas que se
encuentren encimados.
Se eliminan los artefactos de la imagen con la herramienta Eliminar y
seleccionando el objeto con apoyo del mouse.
Una vez que se detecten 46 cromosomas, seleccionar el recuadro del
cariograma.
Presionar la letra A para el acomodo automtico de los cromosomas.
Corregir los errores del aparato colocando de manera manual los cromosomas
en el lugar correcto.
Con la herramienta Girar acomodar todos los cromosomas con el centrmero
en la posicin correcta.
Capturar los datos indicando el nombre, edad, sexo y frmula cromosmica.
Imprimir la foto de la metafase y el cariograma obtenido.

7. Cuestionario.
1. Qu ventajas tiene el uso del analizador de imgenes para cariotipo?
2. Qu comandos del programa te permiten realizar las acciones que el
sistema no pudo realizar solo?
3. Cul de las acciones que realiza el programa IKAROS, para el anlisis de
cariotipo les sorprendi ms?
4. Para otras pruebas de laboratorio aplicadas a su formacin sirven los
45

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
analizadores de imgenes?
8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Analizadores de imgenes.

46

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.
Replicacin, transcripcin,

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

traduccin y mutacin
8

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

1a2

2. Introduccin.
El flujo de la informacin gentica se da de forma general en las clulas en sentido
DNA RNA pptido y se conoce como Dogma Central de la Biologa Molecular.
La molcula de DNA es la encargada de transmitir la informacin de generacin en
generacin.
El proceso de sntesis de una nueva copia del DNA se realiza usando ambas hlices
de la cadena como molde. Este paso se conoce como replicacin y se lleva a cabo
antes de cada divisin celular. La replicacin de concreta es de forma
semiconservativa, es decir, para la doble hlice se formar una cadena complementaria
nueva, mientras que la otra ser obtenida de la cadena original, sirviendo a su vez
como molde. La sntesis se da en el sentido 35, est dada por la enzima DNA
polimerasa, que va uniendo desoxinucletidos a travs de enlaces fsfodister. La
complementariedad de la cadena doble se mantiene mediante uniones tipo puente de
hidrgeno.
La informacin contenida en el DNA est codificada en la secuencia lineal de sus
bases nitrogenadas. Esta informacin debe ser transferida a un RNA durante el
proceso de transcripcin, para que pueda ser decodificada. Se realiza por una enzima
RNA polimerasa usando de molde a slo una de las hebras del DNA, en los segmentos
donde estn localizados los genes transcripcionalmente activos. Los productos pueden
ser transcritos primarios, que sern madurados para convertirse en mensajeros a
travs del splicing out, u otros RNAs funcionales como tales.
Los mecanismos de replicacin y de transcripcin son susceptibles a errores, es decir,
47

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
cambios a nivel molecular en el orden lineal de las bases nitrogenadas. Los cambios
son permanentes y transmisibles a travs de mecanismos de herencia cromosmica.
La sntesis de pptidos y protenas ocurre en los ribosomas, organelos
citoplasmticos formados por RNA y protenas. A partir de la secuencia lineal de un
RNA mensajero se obtiene la informacin que es decodificada por los ribosomas,
para que se constituya una secuencia lineal de aminocidos, ordenada de acuerdo a
los codones codificados por cada triplete de bases nitrogenadas.
En el proceso de traduccin intervienen: un RNA mensajero, que es el encargado de
llevar la informacin codificada a travs de secuencias de tripletes de nucletidos
llamados codones, y que determinan el orden de aminocidos que van a formar al
pptido resultante; el ribosoma, formado por dos componentes estructurales de RNA
ribosomal y protenas, es encargado de ensamblar al pptido segn la informacin
decodificada en el mensaje, basado en el cdigo gentico y RNAs de transferencia,
que son las molculas que transportan aminocidos libres en el citoplasma hacia los
ribosomas y que contienen una secuencia anticodn que debe ser complementaria al
codn; cuando hay complementariedad de estas dos secuencias, los aminocidos
sern unidos a travs de enlaces peptdicos para producir una cadena de secuencia
especfica. Una vez concluida la traduccin, el RNA mensajero puede ser reutilizado
mientras que los ribosomas y los RNA de transferencia se pueden acoplar a un nuevo
sistema de sntesis peptdica.
Las alteraciones que se producen en el DNA generalmente son corregidas a travs
de mecanismos de reparacin, sin embargo, se pueden presentar mutaciones, que
son cambios permanentes en la informacin gentica y, por lo tanto, heredables. Hay
dos vas que conducen a la mutacin:
Dao en la secuencia del DNA, incorporndose una base nitrogenada
errnea.
Incorporacin incorrecta de bases durante la replicacin o reparacin.
Los tipos de mutacin que incluyen a un solo nucletido son bsicamente tres:
- sustitucin; transicin (cambio purina/purina pirimidina/pirimidina)
transversin (purina/pirimidina viceversa).
- delecin; prdida de una base nitrogenada.
- insercin; adicin de una base nitrogenada.
Las dos ltimas producen un cambio en el marco de lectura modificando as el proceso
de traduccin, al modificar la secuencia con base en tripletes.
48

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

3. Objetivo General.
Comprender cmo se lleva a cabo el procesamiento de la informacin gentica a partir
de una cadena de DNA, desde la obtencin de una nueva copia durante su replicacin,
la obtencin de un RNA mensajero, la sntesis de un pptido y distinga los diferentes
tipos de mutacin gentica.

4. Objetivos Especficos. .
Realizar la simulacin del proceso de replicacin sobre una secuencia gnica
real.
Realizar la simulacin del proceso de transcripcin para obtener la secuencia de
un RNAm
Determinar en la secuencia del RNAm, los codones de inicio, trmino y la
secuencia del polipptido de la secuencia gnica real, utilizando el cdigo
gentico.
Realizar los diferentes tipos de mutacin gentica, por sustitucin, delecin y
adicin e identificar sus consecuencias en el producto polipeptdico.

5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.


a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
No aplica
b) Materiales/Utensilios.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Secuencia de un gen
Obtenida del
1 juego
Por equipo
GeneBank, e impresa.
Hoja de unicel
Por equipo.
Proporcionado por el
1 pza.
de 50X100 cm
alumno.
Solo para
procedimiento 1
Hoja de Alfileres
Por equipo.
Proporcionado por el
Con aproximadamente
1 pza.
alumno.
250-500 pzas
Solo para
procedimiento 1
Por equipo.
Blancas o
Proporcionado por el
cuadriculadas
10 hojas
alumno.
Tamao carta o bond
Hojas de Papel
Las hojas pueden ser
segn indicacin
recicladas
Lpiz
De madera o
Por alumno.
1 pza.
portaminas
Proporcionado por el
49

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

Goma
1 pza.

4 pzas.

2 pzas.

200 aprox.

Blanca
lapiceros o lpices de
colores

Diferentes entre s

Tablas del cdigo


gentico

Impresas

Bases nitrogenadas
representadas en papel
de colores, como se
indica en la tabla.

El tamao de cada base


se sugiere de 1 cm2, y
debern estar
recortadas.

alumno.
Por equipo Solo para
procedimiento 2
Proporcionado por el
alumno.
Por equipo. Solo para
procedimiento 2
Proporcionado por el
alumno.
Por equipo.
Proporcionado por el
alumno.
Por equipo. Solo para
procedimiento 1
Proporcionado por el
alumno.

DNA
RNA
A (verde)
a (verde)
T (rojo)
u (rojo)
C (azl)
c (azl)
G (blanco)
g (blanco)
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES

Adenina
Timina
Citosina
Guanina
CANTIDAD

OBS.

No aplica
6. Desarrollo de la Actividad Prctica.
PROCEDIMIENTO (1)
1. Se proporcionar a cada equipo la secuencia de un gen en particular.
2. Las secuencias a trabajar son de DNA
3. Realizar la bsqueda del codn de inicio considerando que se encuentra en la
hebra complementaria al DNA (cadena molde)
4. En una hoja de unicel y a partir del triplete de inicio, integrar la secuencia
complementaria de DNA (replicacin), acomodando linealmente las letras
correspondientes, a manera de tripletes de bases. Fijar las letras con alfileres y
separar los tripletes entre s por un pequeo espacio
5. Completar el proceso segn el tamao indicado del transcrito
6. Sobre el mismo unicel realizar la transcripcin utilizando las bases de RNA,
acomodando esta secuencia de forma paralela a la cadena de DNA
7. Transcribir a papel la secuencia de RNA obtenida, asegurndose que no haya
tripletes de paro a lo largo de la cadena. La secuencia obtenida representa el
50

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
RNA mensajero del gen.
Nota: en caso de encontrar una secuencia sin sentido en medio de la hebra de RNA,
realizar la bsqueda de un nuevo triplete de inicio y repetir el procedimiento.
8. De acuerdo a la clasificacin de las mutaciones, elaborar una mutacin de cada
tipo sealado en la secuencia del pptido:
- sin sentido (rengln 1) color azul.
- silenciosa (rengln 2) color verde.
- transicin (rengln 3) color amarillo.
- transversin (rengln 4) color rojo.
- delecin (rengln 5) color morado.
- insercin(rengln 6) color naranja.

Ejemplo:

Sentido:
S
Antisentido:
AS
RNAm:
Rm
Codn de inicio
Pptido:
P
ORIGIN
S
1 ACGGGCTGGG TCTATGGTCG CTCCGCGGGC CGCTCCGCCG GCTGGTGCTT TTTTATCAGG
AS

TGCCCGACCC AGATACCAGC GAGGCGCCCG GCGAGGAGGA CGACCACGAA AAAATAGTCC

Rm

ACGGGCUGGG UCUAUGGUCG CUCCGCGGGC CGCUCCGCCG GCUGGUGCUU UUUUAUCAGG

61 GCAAGCTGTG TTCCATGGCA GGGAACTTTT GGCAGAGCTC CCACTATTTG CAATGGATTT

AS
CGTTCGACAC AAGGTACCGT CCCTTGAAAA CCGTCTCGAG GGTGATAAAC GTTACCTAAA
Rm
GCAAGCUGUGUUCCAUG/GCA/GGG/AAC/UUU/UGG/CAG/AGC/UCC/CAC/UAU/UUG/CAA/UGG/AUU/U
P
Met/ala/gly/asn/phe/trp/gln/ser/ser/his/tyr/leu/gln/trp/ile
Mutacin (Insercin)
S
1 ACGGGCTGGG TCTATGGTCG CTCCGCGGGC CGCTCCGCCG GCTGGTGCTT TTTTATCAGG
AS
Rm
S

TGCCCGACCC AGATACCAGC GAGGCGCCCG GCGAGGAGGA CGACCACGAA AAAATAGTCC


ACGGGCUGGG UCUAUGGUCG CUCCGCGGGC CGCUCCGCCG GCUGGUGCUU UUUUAUCAGG
61 GCAAGCTGTG TTCCATGGCA GGGAAACTTTT GGCAGAGCTC CCACTATTTG CAATGGATTT

AS
CGTTCGACAC AAGGTACCGT CCCTTTGAAAA CCGTCTCGAG GGTGATAAAC GTTACCTAAA
Rm
GCAAGCUGUGUUCCAUG/GCA/GGG/AAA/CUU/UUG/GCA/GAG/CUC/CCA/CUA/UUU/GCA/AUG/GAU/UU
P
Met/ala/gly/lys/pro/leu/ala/glu/leu/pro/leu/phe/ala/met/asp

9. Presentar la secuencia del pptido obtenido y realizar la comparacin con el


tamao propuesto.
10. Resaltar el cambio (mutacin) que realizaste en la secuencia en los renglones
indicados con color en la secuencia del DNA, el RNAm resultante y los cambios
en la secuencia del polipptido.
51

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
11. Inferir las consecuencias resultantes de cada una de las mutaciones presentadas,
de acuerdo al gen trabajado por el equipo.
PROCEDIMIENTO (2)
1.
Se proporcionar a cada equipo la secuencia de un gen en particular.
2. Las secuencias a trabajar son de DNA.
3. Hacer en papel la cadena complementaria de DNA (replicacin).
4. Transcribir la secuencia a RNA mensajero.
5. En el transcrito buscar el codn de inicio, acomodando el RNA en tripletes a
partir de ese punto.
6. Completar el proceso segn el tamao indicado del transcrito.
7. Presentar en papel la secuencia del gen, junto con la cadena complementaria
de DNA (replicacin), en tripletes de bases.
8. Presentar en papel la secuencia transcrita del gen (RNA).
9. Presentar numerando la secuencia cada 10 bases.
10.Presentar el unicel con la secuencia molde de DNA del gen trabajado
(replicacin), y la secuencia de RNA correspondiente (transcripcin), de forma
paralela y a manera de tripletes.
12. Presentar en papel la secuencia de RNA obtenida.
13. Realizar la traduccin del RNA mensajero utilizando el cdigo gentico, y
ordenando la secuencia del pptido de diez en diez. La secuencia obtenida
representa el RNA mensajero del gen.
Nota: en caso de encontrar una secuencia sin sentido en medio de la hebra de RNA,
realizar la bsqueda de un nuevo triplete de inicio y repetir el procedimiento.
14. Continuar con el paso No. 8 del Procedimiento 1
7. Cuestionario.
1.
Qu funcin llevan a cabo las siguientes enzimas?
a)
Topoisomerasas
b)
Girasas
c)
Primasa
d)
DNA polimerasa
e)
Ligasa
2.
En qu sentido se llevan a cabo la lectura y la sntesis de los cidos
nucleicos?
3.
Qu cadena se lee para el proceso de transcripcin?
4.
Qu tipos de RNA intervienen en el proceso de traduccin?
5.
Cuales son los codones de inicio y trmino?
6.
Qu tipo de mutgenos producen:
52

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
a) Rupturas del material gentico
b) Mutaciones de cambio de marco de lectura
c) Formacin de dmeros de timina
8. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Lewin, B., Krebs, J. E., & Golds, E. S. (2014). Lewin's Genes XI (11 ed.). Burlingtong,
MA, USA: Ed.Jones & Bartlett Publishers.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Gob, U., Information, N. C., Medicine, N. L., & Healt, N. I. (s.f.). National Center of
Biotechnology Information. Obtenido de www.ncbi.nlm.nih.gov
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema:
Replicacin del material gentico
Transcripcin y Maduracin del RNA.
Sntesis de protenas.
Cdigo gentico.
Mutacin gentica y su clasificacin.

53

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Estudio Genealgico en Gentica Humana

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

1a2

2. Introduccin.
El hombre presenta ciertas caractersticas especiales que lo califican como un material
difcil para el estudio gentico. De hecho, estas caractersticas son:
1. Hay una gran diversidad gentica de individuos, y tambin la estructura
gentica de las poblaciones humanas vara continuamente debido a las
migraciones, la mezcla de razas, etc.
2. Por motivos ticos y morales no se practican cruzamientos experimentales,
de los que por otra parte no se obtendra gran informacin, ya que:
a) de cada parto suele nacer un solo individuo.
b) las gestaciones son largas.
c) entre una generacin y la siguiente transcurre mucho tiempo
d) el tamao de las familias es pequeo
En cambio, otros organismos que se utilizan frecuentemente en la investigacin
gentica presentan caractersticas mucho ms ventajosas. Por ejemplo en los ratones,
ocurre una generacin cada dos meses y los descendientes de cada pareja pueden
contarse por decenas. En Drosophila, la generacin dura 20 das y se cuentan los
descendientes por centenares.
As, en estos organismos y otros de caractersticas similares, los cruzamientos
experimentales constituyen uno de los mejores mtodos para el conocimiento de los
caracteres hereditarios.
Por lo tanto, la gentica humana tiene que recurrir para su desarrollo a mtodos
indirectos tales como el uso de pedigres o rboles genealgicos, anlisis de
54

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
poblaciones, etc.
A pesar de todas estas dificultades, desde principios de siglo y mediante el uso de
tcnicas genealgicas, se ha ido acumulando el conocimiento de nuevos caracteres
determinados genticamente y de los genes que los controlan, hasta llegar a varios
millares. Posteriormente, las tcnicas citogenticas y moleculares han permitido
identificar nuevos genes y determinar su localizacin cromosmica.
3. Objetivo General.
Aprender a confeccionar y esquematizar rboles genealgicos, y determinar el
genotipo de los individuos que lo componen, y el modo de herencia involucrado en la
transmisin gentica de algunos caracteres sencillos y de fcil observacin, mediante
el uso de informacin recabada por los alumnos.
4. Objetivos Especficos.
Elaborar y analizar un pedigree a partir de datos reales

Determinar a travs de la observacin de la genealoga en el pedigree el modo


de herencia para cada una de las caractersticas fenotpicas estudiadas en la
prctica.
Asignar un genotipo a cada uno de los integrantes del rbol genealgico de
manera congruente con el modo de herencia determinado para cada
caracterstica en congruencia con su fenotipo.

5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.


a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
No aplica
b) Materiales/Utensilios.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Hojas de colecta de datos de
Debidamente llenadas
Las
fenotipos
con los datos de los
Individual
necesarias
familiares de al menos
3 generaciones.
Por alumno.
8 pzas.
Hojas Blancas
Tamao carta.
Proporcionadas
por el alumno.
Por equipo
2 pzas.
Lpiz, lapiceros y/o lpices
De colores.
Proporcionado
55

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

1 pza.

Goma

Blanca

1 pza.

Sacapuntas

De plstico o metal.

por el alumno.
Por equipo
Proporcionado
por el alumno.
Por equipo
Proporcionado
por el alumno.

c) Equipos/Instrumentos.
CANTIDAD
1

DESCRIPCIN
Calculadora

ESPECIFICACIONES
Simple

OBS.
Por equipo y
proporcionado
por el alumno

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


La prctica en s consiste, en primer lugar, en el reconocimiento de las variaciones
fenotpicas para cada uno de los caracteres monognicos que se describen a
continuacin, de donde el alumno deducir su genotipo en cada caso. Los datos se
tomarn en una hoja como la que se indica al final de esta prctica. Se usar una hoja
de datos para cada persona.
AVISO DE RECOPILACIN DE DATOS
Es necesario previamente que cada alumno recoja datos de una serie de caracteres en
al menos tres generaciones de los miembros de su familia, tratando de verificar la
presencia de los caracteres en el mayor nmero de parientes posible. Si no se puede
contactar con varios miembros de su familia, pueden recoger los de alguna otra familia
allegada. Se enumeran a continuacin dichos caracteres para la recopilacin de datos:
Descripcin de los caracteres:
a) Disposicin del lbulo de la oreja. Lbulo separado de la mejilla o pegado
lateralmente a la mejilla.
b) Lnea frontal del pelo. Puede ser continua o tener un saliente frontal en el centro
denominado "pico de viuda". En las personas calvas no se pueden contabilizar.

c) Capacidad de enrollar la lengua. Ser o no capaces de enrollar la lengua en forma


de U fuera de la boca.
56

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

d) Pigmentacin del iris. Ojos azules frente a ojos ms oscuros, sean stos verdes o
marrones. Lo que se compara es la ausencia total o no de pigmentacin en la
superficie del ojo. En ausencia de sta, se observa la lmina interna azul del iris, y
los ojos sern totalmente azules. La presencia de pigmento en las capas
superiores del iris enmascara en mayor o menor grado el color azul del fondo.
Otros genes determinan el color exacto y su intensidad para ojos verdes,
marrones, etc., pero en esto no nos fijaremos.

e) Hiperextensibilidad del dedo pulgar. Capacidad o incapacidad de doblar hacia


atrs la ltima falange del pulgar en un ngulo de casi 90 respecto a la anterior
("dedo del autoestopista"). Esta capacidad puede manifestarse slo en una de las
manos, y la expresividad del rasgo es variable.
f) Dedo meique doblado. El meique puede estar recto, o bien con la ltima falange
doblada hacia el dedo anular. Se colocan ambas manos relajadas sobre una mesa
y se observa si los dedos estn paralelos o si los meiques se doblan hacia
dentro.

g) Direccin del Remolino. El remolino formado en el cuero cabelludo puede tener


direccin dextrgira (sentido de las manecillas del reloj) o levgiro (al contrario de
las manecillas del reloj).
h) Hoyuelos faciales. Presencia o ausencia de hoyuelos en las mejillas.
Es responsabilidad del alumno tener los datos recopilados cuando llegue a
prctica.
Una vez realizada la observacin, proceder de la siguiente manera:
1. Tomar los datos del fenotipo propio como caso ndice.
2. Anotar todos los fenotipos en el lugar correspondiente de la hoja de datos.
3. Tomar los datos de tantos parientes (padres, hermanos, abuelos, tos) como sea
posible.
4. Anotar los datos de cada persona en una hoja de datos diferente.
5. Confeccionar el rbol genealgico indicando el fenotipo de cada persona para, al
57

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
menos, dos de los caracteres analizados.
6. Determinar si es posible el tipo de herencia de los caracteres analizados.
7. En base al tipo de herencia, nombrar los alelos adjudicados a cada carcter en la
hoja de datos, usando una letra distinta para cada carcter, en
maysculas/minsculas para dominante/recesivo.
8. Indicar cuando sea posible los genotipos de todos los miembros para cada carcter.
ELABORACIN DE RBOLES GENEALGICOS
Como ejemplo de rbol genealgico se seguir un esquema como el que se indica a
continuacin:

En la genealoga se indica el orden de las generaciones con nmero romano. La


primera generacin (I) corresponde a la primera persona de la que se posean datos,
por ejemplo la de los abuelos del alumno; la segunda (II) correspondera a la de los
padres y tos, y la tercera (III), a la generacin del alumno.
Los varones se representan con cuadrados, las mujeres con crculos, y por rombos los
individuos de los que no se conocen los datos (II.9). Las parejas se unen por una lnea
horizontal. Los descendientes se disponen bajo una lnea horizontal desde la que parte
una lnea vertical por individuo, excepto en el caso de mellizos (III.4 y 5) o gemelos
fraternos (II.4 y 5), que se indican por lneas convergentes (ver figura). Los individuos
que muestran el fenotipo en estudio se indican rellenando el smbolo.
a. Con los datos recopilados seleccionar al integrante del equipo cuya familia tenga
mayor prevalencia del caracter seleccionado y proceder a dibujar la genealoga de
acuerdo a la nomenclatura presentada en la parte del procedimiento, deben
58

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
entregar un rbol genealgico por cada caracterstica.
b. Una vez dibujada la genealoga, analizarla para determinar el modo de herencia
involucrado en la herencia de cada rasgo fenotpico, es decir si es dominante o
recesivo, indicar el genotipo de los miembros de la familia y calcular las
frecuencias genotpicas y fenotpicas para determinar la probabilidad para que se
presente la caracterstica en el caso ndice.
Ejemplo:
Caracterstica dominante: Cabello lacio
Caracterstica recesiva: Cabello rizado
Modo de herencia:
Autosmico recesivo

Calculo de probabilidad del caso ndice:


Cruza: Rr x Rr

Gametos

RR

Rr

Rr

rr

75% cabello lacio

Frecuencia Genotpica
1 RR: 2 Rr : 1 rr

Frecuencia fenotpica
25 % cabello rizado.

59

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

Hoja de colecta de Datos No. ___


Parentesco:
Lbulo de la oreja
Dedo autoestopista
separado
ausente
unido
presente
Pico de viuda
Direccin del remolino
presente
dextrgiro
ausente
levogiro
Lengua en U
Dedo meique
capaz
curvado
incapaz
recto
Pigmentacin del iris
Hoyuelos faciales
azul
presente
Otro color
ausente

Hoja de colecta de Datos No.___


Parentesco:
Lbulo de la oreja
Dedo autoestopista
separado
ausente
unido
presente
Pico de viuda
Direccin del remolino
presente
dextrgiro
ausente
levogiro
Lengua en U
Dedo meique
capaz
curvado
incapaz
recto
Pigmentacin del iris
Hoyuelos faciales
azul
presente
otro color
ausente

Hoja de colecta de Datos No. ___


Parentesco:
Lbulo de la oreja
Dedo autoestopista
separado
ausente
unido
presente
Pico de viuda
Direccin del remolino
presente
dextrgiro
ausente
levogiro
Lengua en U
Dedo meique
capaz
curvado
incapaz
recto
Pigmentacin del iris
Hoyuelos faciales
azul
presente
Otro color
ausente

Hoja de colecta de Datos No.___


Parentesco:
Lbulo de la oreja
Dedo autoestopista
separado
ausente
unido
presente
Pico de viuda
Direccin del remolino
presente
dextrgiro
ausente
levogiro
Lengua en U
Dedo meique
capaz
curvado
incapaz
recto
Pigmentacin del iris
Hoyuelos faciales
azul
presente
otro color
ausente

Hoja de colecta de Datos No. ___


Parentesco:
Lbulo de la oreja
Dedo autoestopista
separado
ausente
unido
presente
Pico de viuda
Direccin del remolino
presente
dextrgiro
ausente
levogiro
Lengua en U
Dedo meique
capaz
curvado
incapaz
recto
Pigmentacin del iris
Hoyuelos faciales
azul
presente
Otro color
ausente

Hoja de colecta de Datos No.___


Parentesco:
Lbulo de la oreja
Dedo autoestopista
separado
ausente
unido
presente
Pico de viuda
Direccin del remolino
presente
dextrgiro
ausente
levogiro
Lengua en U
Dedo meique
capaz
curvado
incapaz
recto
Pigmentacin del iris
Hoyuelos faciales
azul
presente
otro color
ausente

60

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

7. Cuestionario.
1. Cmo se estandariz la nomenclatura para el desarrollo de las genealogas?
2. Menciona 4 caractersticas y 4 patologas de la herencia autosmico dominante
3. Menciona 4 caractersticas y 4 patologas de la herencia autosmico recesiva
8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de prctica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Herencia monognica.

61

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Estudio de la Herencia Polignica

10

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

2. Introduccin.
La herencia polignica no se puede analizar empleando pedigres ni estudiando los
cromosomas a travs del cariotipo (de no ser que se estudie una aberracin
cromosmica en concreto). Un rasgo polignico es el fenotipo resultante de la accin
de dos o ms genes. Estos tienen unas caractersticas comunes:
1. los rasgos se cuantifican midindose,
2. los rasgos son controlados por 2 ms genes resultando en un efecto
aditivo,
3. los rasgos son controlados por efecto de alelos mltiples,
4. los fenotipos de los rasgos polignicos y multifactoriales varan de
expresin por efecto de los factores ambientales.
Existen numerosos ejemplos de este tipo de herencia por ejemplo la estatura, el peso,
la inteligencia, el color de la piel, la presin arterial, etc.
Demostrar y estudiar la herencia de los rasgos polignicos no es fcil, pues requiere
de realizar estudios estadsticos en poblaciones normales para determinar el (los)
Umbrales, dentro de los cuales se encontrarn los individuos afectados.
En 1890, Francis Galton sugiri que las huellas dactilares seran una buena manera
de identificacin para humanos. Un ejemplo de su utilidad es el estudio de la huella
del recin nacido para el diagnstico precoz de anormalidades cromosmicas.
La herencia de las huellas dactilares, al igual que los dems caracteres de herencia
62

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
polignica, tambin se ve influida por factores ambientales aunque, debido a la
precocidad y rapidez del desarrollo de stas, el fenotipo no cambiar tras el
nacimiento. Las huellas dactilares se pueden detectar a partir de la 6 semana de
desarrollo fetal, llegando a su mayor desarrollo hacia la semana 12-13.
Posteriormente regresarn hasta adquirir la morfologa final que ya no se ver
alterada durante el restante desarrollo prenatal y postnatal.
Estudio de las huellas dactilares: recuento de las lneas
El objetivo de este estudio ser el estudio del total de las lneas de la huella (en
ingls: total ridge count o TRC). Holt en 1968 determin que para varones la media
es de 145 y para mujeres de 126.
Las lneas se han de contar desde el trirradio al centro de la huella (ver la lnea
blanca de las imgenes de las huellas de arriba), es decir, las huellas que presentan
el patrn del arco tienen un recuento de cero (no hay trirradio). En los espirales el
recuento ha de efectuarse desde cada trirradio al centro de la huella. Una vez
contadas todas las lneas de todas las huella por persona se sumarn para obtener el
TRC. A continuacin se examinar cmo el TRC apoya el modelo de herencia
polignica.
Caractersticas de algunos sndromes comunes:
- Trisoma 21: dedos con lazos cubitales generalmente, lazos radiales en dedos 4 y 5.
- Trisoma 18: lneas poco desarrolladas, gran frecuencia de arcos (media de 7-8 con
al menos un arco). En los pulgares sin arcos, con lazos radiales, recuentos TRC
bajos.
- Sndrome de Turner (45,X): alto recuento TRC sin aumento de espirales.
Relacin entre la media de TRC y el nmero de cromosomas X e Y
45, X
165
47, XYY
103
46, XY
145
48, XXYY
88
46, XX
126
48, XYYY
83
47, XXY
114
49, XXXXX
17
3. Objetivo General.
Comprender las caractersticas de la herencia polignica, basndose en observaciones
de estatura, peso, clculo del IMC, la morfologa y recuento de las lneas dactilares.
4. Objetivos Especficos.
63

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Determinar a travs de la aplicacin de pruebas estadsticas y elaboracin de
histogramas, los parmetros de distribucin normal de las caractersticas polignicas
estudiadas.
Diferenciar entre las herencias polignica y monognica.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
d) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
4
Frasco de tinta para sellos
Color negro o morado
Por grupo
e) Materiales/Utensilios.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Formato de recogida de las
Aportado por
1
1 copia por alumno
huellas dactilares.
el alumno
Cojines de tinta para huellas
12
Fingerprint
Por grupo
dactilares
Por equipo.
1
Calculadora
Cientfica
Aportado por
el alumno
REACTIVOS/INSUMOS
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
1
Bscula clnica con tallmetro Con tallmetro integrado
Por grupo
1
Estereomicroscopio
Marca Karl Zeiss
Por equipo
6. Desarrollo de la Actividad Prctica.
A.- Recuento de las lneas de las huellas dactilares:
1. Tomar las huellas dactilares de todos los alumnos del grupo en el formato anexo.
2. Clasificar el tipo de huella de acuerdo al patrn de las lneas. Los patrones de los
dibujos de las huellas se pueden clasificar en tres grupos principalmente:

64

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
En las huellas donde aparecen lazos, las lneas aparecen en tres direcciones,
encontrndose en un punto intermedio (trirradio). En el centro del punto de encuentro
se forma un tringulo. stos pueden ser radiales o cubitales, dependiendo de hacia
dnde estn inclinados. El patrn espiral presenta dos trirradios. Las frecuencias de
los patrones en la poblacin son de 5.0% para el arco, 5.4% para el lazo radial,
63.5% para el lazo cubital, y 26.1% para el espiral.
3. Realizar el recuento parcial de las lneas de cada huella, con apoyo del
estereomicroscopio.
4. Realizar el conteo total de cada mano.
5. Llevar a cabo el recuento total de ambas manos.
6. Recopilar los datos en la tabla para todo el grupo.
7. Hacer el anlisis de frecuencias para los TRC del grupo.
B.- Estaturas, peso e ndice de Masa Corporal (IMC) :
1. Medir la estatura y el peso de todos los miembros del grupo.
2. Calcular el IMC
3. Realizar el anlisis de frecuencias para los datos de estatura, peso y del IMC.
4. Graficar en histogramas y por separado para ambos datos obtenidos.
5. Separa los datos por sexo, realizar el anlisis de frecuencias y graficar los
resultados.
a) Grafique sus resultados por rangos de estatura, comenzando con 1.30m y
terminando en 2 m, y en peso desde 40 kg hasta 110 kg, y con las frecuencias
obtenidas, el IMC.

65

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

b)

Determine si la estatura, el peso y el IMC sigue una distribucin normal.

66

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

Datos individuales
pulgar derecho
(I)

ndice derecho
(II)

corazn derecho
(III)

anular derecho
(VI)

meique
derecho(V)

pulgar izquierdo
(I)

ndice izquierdo
(II)

corazn izdo
(III)

anular izdo (IV)

meique izdo
(V)

Mano derecha
pulgar

ndice

corazn

anular

meique

patrn
obtenido:
recuento
parcial:
recuento total mano derecha=
Mano izquierda
pulgar
patrn
obtenido:
recuento
parcial:

ndice

corazn

anular

meique

recuento total mano izquierda=


Recuento total de dos manos:
TRC= ___________

Tabla para recopilacin de datos del grupo de prcticas


Estudiante
sexo
Nmero de dedos con:
67

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

V/M

TRC

Lazos
radiales cubitales

espirales

arcos

1.
2.
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
% del total:
media del TRC:
media TRC mujeres:
media TRC varones:
Datos de Estatura y Peso
Alumno

Sexo
(v/m)

Estatura (m)

Peso
(kg)

IMC=
Peso/estatura 2

1.
2.
68

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
3.
4.
5.
6.
7.
8.
9.
10.
11.
12.
13.
14.
15.
16.
17.
18.
19.
20.
21.
22.
23.
24.
25.
26.
27.
28.
29.
30.
31.
32.
33.
Promedio de estatura del grupo
Desviacin estndar
Promedio estatura de varones
Desviacin estndar
Promedio estatura de mujeres
Desviacin estndar

1.
2.
3.

4.

7. Cuestionario.
Cul es la media TRC para el grupo?
Existen diferencias en las TRC medias para los varones y mujeres?
Cul puede ser la causa de esta diferencia? Fundamenten su respuesta.
Comparen las TRC de cada uno de los miembros del equipo con la media total y
69

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
con la de su sexo.
5. Comparen la media total con la de cada sexo para los datos de estatura, peso e
IMC.
6. Resuman y razonen los resultados obtenidos en los histogramas para las dos
caractersticas graficadas (huellas, estatura, peso e IMC).
7. De haber recogido datos de una poblacin mucho mayor creen que los grficos
presentaran otro aspecto? Fundamenten su respuesta.
8. Bibliografa.
Lpez Santilln, I. C., & Figueroa Gutirrez, A. H. (1 de Junio de 2014). Estudio de la
Herencia Polignica. (U. A. E. Hidalgo, Ed.) Obtenido de
http://www.uaeh.edu.mx/scige/boletin/icsa/n4/p1.html
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson &
Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw Hill
Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a ed.).
Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de practica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Herencia polignica o multifactorial.

70

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Gentica de Poblaciones

11

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

2. Introduccin.
G.H. Hardy y W. Weinberg definieron los principios bsicos de la herencia polignica y
demostraron que en poblaciones en equilibrio las frecuencias (p y q) de los diferentes
alelos de un gen, permanecen constantes generacin tras generacin, siempre y cuando
no se produzcan fenmenos de mutacin, seleccin, deriva gentica, migracin o deriva
meitica. En el caso de dos alelos (A y a) si p es igual a la frecuencia del alelo A, y q la
frecuencia del a; entonces:
p+q=1
O lo que es lo mismo en porcentajes: el % A + el % a = 100%
En poblaciones donde la fecundacin ocurre de forma aleatoria, las frecuencias para los
distintos fenotipos sern:
Espermatozoide
p (A)
q (a)
vulo
p (A)
p2 (AA)
pq (Aa)
q (a)
qp (aA)
q2 (aa)
Es decir, que la distribucin de los genotipos de la generacin ser:
p2 + q2 + 2pq = 1

3. Objetivo General.
Calcular las frecuencias allicas, genotpicas y de los fenotipos estudiados en la
prctica Estudio Genealgico en Gentica Humana.
71

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

4. Objetivos Especficos.
Calcular las frecuencias allicas, fenotpicas y genotpicas en una poblacin a
partir de datos reales.
Determinar si la poblacin analizada cumple con los postulados de la Ley de
Hardy-Weimberg.
5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.
a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
No aplica
b) Materiales/Utensilios.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Datos y resultados obtenidos en
8 hojas
la prctica Estudio genealgico
De la prctica No. 9
Individual
en gentica humana.
Tamao carta,
10
Hojas blancas.
blancas o
Por equipo
cuadriculadas.
c) Equipos/Instrumentos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
Por equipo y
1
Calculadora
Cientfica
proporcionado
por el alumno
6. Desarrollo de la Actividad Prctica.
1. Hacer el conteo de la presencia o ausencia de cada caracterstica de manera
individual.
2. Reunir los datos de anteriores de los equipos de cada mesa de laboratorio, en
las tablas anexas.
3. Calcular las frecuencias de los alelos A (p) y a (q) empleando la Ley de HardyWeinberg.
4. Calcular las frecuencias genotpicas p 2 (AA), q2 (aa) y 2pq (Aa) empleando la Ley
de Hardy-Weinberg.

Tablas de datos
Mesa ____ Equipos:
Alumno 1
Alumno 2
72

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Alumno 3
Alumno 4
Alumno 5
Alumno 6
Alumno 7
Alumno 8
Alumno 9
Alumno 10
Alumno 11
Alumno 12
Fenotipo: Lbulo de la oreja
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Total
11

12

11

12

Separado
Unido

Total
Fenotipo: Pico de viuda
Alumno

Nmero de familiares del Alumno


4
5
6
7
8
9
10

Total

presente
ausente

Total
Fenotipo: Lengua en U
Alumno

Nmero de familiares del Alumno


4
5
6
7
8
9
10

Total
11

12

capaz
incapaz

Total
Fenotipo: Pigmentacin del iris
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Total
11

12

azul
Otro color

Total

73

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Fenotipo: Dedo autoestopista
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Total
11

12

presente
ausente

Total
Fenotipo: Direccin del Remolino
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8 9
10

Total
11

12

Dextrgiro
levgiro

Total
Fenotipo: Dedo meique
Alumno

Nmero de familiares del Alumno


4
5
6
7
8
9
10

Total
11

12

curvado
recto

Total
Fenotipo: Hoyuelos faciales
Nmero de familiares del Alumno
Alumno
1
2
3
4
5
6
7
8
9
10

Total
11

12

Presentes
ausentes

Total
7. Cuestionario.
1. Expliquen cul es el significado de la frecuencia allica y la frecuencia
genotpica en una enfermedad monognica.
2. Expliquen la aplicacin prctica del clculo de frecuencias siguiendo la Ley de
Hardy-Weinberg
8. Bibliografa.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
74

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Strachan, T., & Read, A. P. (2006). Gentica Humana (3a ed.). D.F., Mxico: Mc Graw
Hill Interamericana Editores.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de practica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Gentica de poblaciones.

75

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

NO. DE PRCTICA:

Extraccin de DNA

12

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

NO. DE SESIONES:

2. Introduccin.
La extraccin de DNA se puede realizar a partir de cualquier tipo de clula nucleada,
en este caso de la lnea blanca sangunea, el procedimiento consiste en lisar a las
clulas eliminando tanto membrana celular como la nuclear mediante la accin de
detergentes como el tritn y el SDS, y extraer mediante solventes orgnicos aquellos
componentes celulares como protenas y lpidos de manera que el material gentico
obtenido este puro y listo para utilizarse en los procedimientos estndar de biologa
molecular.

3. Objetivo General.
Obtener DNA a partir de una muestra sangunea.
4. Objetivos Especficos.
Adquirir la habilidad en el uso del material de laboratorio en tcnicas de biologa
molecular.
Comprender la funcin de cada uno de los reactivos utilizados en la extraccin
de DNA y las bases que permiten llevar a cabo este proceso.

5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.


a) Reactivos/Insumos.
76

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
CANTIDAD
4 pares
2 pzas.
20 pzas.
20 pzas.
1 pza.
2 ml
5 ml
2 ml
2 ml
2 ml
2 lts
5 ml
5 ml
1ml
1 lt
CANTIDAD
3 pzas.
1 pza.
2 pzas.
1 jgo.
1 pza.
1 pza.
CANTIDAD
1 pza.
1 pza.
1 pza.
1 pza.
1 pza.

1.
2.
3.
4.
5.

DESCRIPCIN
Pares de guantes
Jeringas
Puntas para micropipeta
Puntas para micropipeta
Paquete de parafilm
Solucin de EDTA
Solucin TTS

ESPECIFICACIONES

OBS.

No estriles
10 ml
azules
amarillas
Rollo
al 5%
(TRIS 10mM Tritn 1% Sacarosa 300 mM)
5 mM.
al 10 %,
Saturada
Comercial Hycell
Temperado a -20C

Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por equipo
Por equipo

Solucin de Cloruro de sodio


Solucin de SDS
Solucin de Cloruro de sodio
Agua desionizada
Etanol absoluto
Solucin de Cloroformo (23:1)
Alcohol isoamlico
Solucin Buffer Tris-EDTA
pH=7.5
Agua inyectable
Comercial
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Tubos Eppendorf
1.5ml
Vaso de precipitado
50 o 100 ml
Tubos de ensayo
Cristal, capacidad 15 ml
Juego de 2 Micropipetas
10-100l y 200-1000l
Caja portapuntas esterilizables Para puntas amarillas
Caja portapuntas esterilizables Para puntas azules
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Ultramicrocentrfuga
Refrigerada
Vortex
Congelador
(-20C)
Incubadora
(37C)
Balanza Analtica

Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
OBS.
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
OBS.
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


Obtener sangre venosa y depositarla en un tubo con 100 l EDTA al 5%.
Depositar 1ml de la muestra en un tubo Eppendorf, aadir 600 l de solucin TTS.
Mezclar y centrifugar 2 minutos a 16,000 rpm, decantar sin sacudir el tubo.
Repetir el lavado con TTS hasta obtener un botn de clulas blancas o que se vea
rosado (mximo de 4 lavados).
Resuspender el botn con 570 l de la solucin de cloruro de sodio.
77

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
6. Adicionar 30 l de la solucin de SDS mezclar por 5 minutos.
7. Adicionar 200 l de cloruro de sodio saturado y agitar en el vrtex por 3 min.
8. Centrifugar el tubo por 15 min a 16,000 rpm.
9. Transferir el sobrenadante a un tubo Eppendorf limpio, agregar un volumen igual
de la solucin cloroformo:isoamlico, mezclar y centrifugar 1 min a 16,000 rpm.
10. Recuperar la fase acuosa (superior) y transferir a un tubo de ensaye limpio.
11. Agregar 2ml de etanol absoluto -20 y precipitar por toda la noche.
12. Recuperar el DNA con la punta de una micropipeta y colocar en un Eppendorff.
13. Lavar con 1 ml etanol al 70% y dejar secar a 37 hasta deshidratar el DNA.
14. Resuspender con 200l de Tris-EDTA, sellar el tubo con parafilm y almacenar
15. Dibujar o tomar una fotografa del DNA obtenido.
7. Cuestionario.
1. En que solventes es soluble e insoluble el DNA
2. Cules son las funciones de las siguientes soluciones utilizadas en la prctica?
a) SDS
b) Cloroformo : isoamlico
c)Etanol
8. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Lewin, B., Krebs, J. E., & Golds, E. S. (2014). Lewin's Genes XI (11 ed.). Burlingtong,
MA, USA: Ed.Jones & Bartlett Publishers.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de practica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Tcnicas de extraccin de cidos
nuclicos.

1. Identificacin.

NOMBRE DE LA PRCTICA:

Electroforesis de cidos nuclicos


78

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

NO. DE PRCTICA:

13

NO. DE SESIONES:

NO. DE INTEGRANTES MXIMO POR EQUIPO:

2. Introduccin.
La electroforesis es la tcnica ms utilizada en biologa molecular para la separacin
de molculas orgnicas en funcin de su peso molecular, carga elctrica, punto
isoelctrico, cuando se aplica una corriente elctrica a la muestra a separar que esta
embebida en un material poroso como agarosa o poliacrilamida en una cmara que
contiene una solucin conductora, logrado una separacin diferencial.
3. Objetivo General.
Conocer la tcnica ms utilizada en biologa molecular.
4. Objetivos Especficos.
Comprender los fundamentos de la electroforesis.

Realizar la digestin enzimtica del DNA.

Aplicar la tcnica en la separacin del DNA en fragmentos.

5. Reactivos/Insumos, Materiales/Utensilios y Equipos/Instrumentos.


a) Reactivos/Insumos.
CANTIDAD
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
OBS.
1m
Parafilm
De Rollo
Por grupo
40 par
Guantes
No estriles
Por grupo
20 pzas
Puntas para micropipeta
azules
Por equipo
20 pzas
Puntas para micropipeta
amarillas
Por equipo
20 pzas
Puntas para micropipeta
blancas
Por equipo
5 gr
Agarosa
Grado Biologa Molecular
Por grupo
2.5 lts
Solucin Buffer TAE (TrisGrado Biologa Molecular
Por grupo
Acetato-EDTA)
1 ml
Buffer de carga (Bromuro de
etidio 2l/ Azul de bromofenol
Por grupo
0.25%/Xilencianol
0.25%/ Grado Biologa Molecular
Ficoll
ipac 400 15%/ en
agua)
5 lts
Agua desionizada
Comercial Hycell
Por grupo
79

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
1 kit
1 kit
CANTIDAD
2 juegos
2 pza
1 pza
1 pza
1 pza
2 caja
2 caja
2 caja
8 pzas
CANTIDAD
1 equipo
1 equipo
1 equipo
1 equipo
1 equipo

Enzima de restriccin
BamIII
Enzima de restriccin
EcoRI
b) Materiales/Utensilios.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
De 3 Micropipetas
1-10l, 10-100l y
200-1000l
Charolas para geles
25X25cm
Matraz Erlenmeyer
250 ml
Pala para geles
De silicn
Regla
De plstico
Caja portapuntas
para puntas amarillas
Caja portapuntas
para puntas azules
Caja portapuntas
para puntas blancas
Lentes para proteccin
a luz UV
c) Equipos/Instrumentos.
DESCRIPCIN
ESPECIFICACIONES
Cmara de electroforesis
Con todos sus accesorios
Fuente de poder
Con 4 conectores
Transiluminador
Microondas
Convencional
Thermoblock
Para 12 tubos eppendorf

Por grupo
Por grupo
OBS.
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por equipo
Por equipo
Por equipo
Por grupo
OBS.
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo
Por grupo

6. Desarrollo de la Actividad Prctica.


1. Realizar la digestin de las muestras del DNA obtenido siguiendo las indicaciones
del Kit para la enzima de restriccin que se les proporcione.
2. Preparar 100 ml de agarosa al 0.6% en solucin buffer tris-Acetato-EDTA (TAE),
fundindola y esperando a que enfre a 40 para servir en el porta gel de la cmara,
clavando el peine para marcar los posos del gel.
3. Una vez gelificado retirar el peine y acomodar dentro del tanque de manera que los
posos estn del lado negativo (negro) y el frente de corrimiento hacia el polo positivo
(rojo).
4. Aadir el buffer TBE hasta cubrir el gel por arriba de 1 mm.
5. Mezclar en un papel parafilm la muestra de DNA digerido, tomando 2 l e igual
volumen de buffer de carga.
6. Servir directamente en el poso del gel.
7. Conectar la cmara a la fuente de poder y ajustar a 100V, 30 mA.
8. Correr la electroforesis hasta que el colorante haya recorrido de la longitud del
gel.
9. Transferir el gel a una tina y adicionar agua para enjuagar.
10. Colocar el gel en el transiluminador con luz ultravioleta para observar la separacin
80

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
del material gentico.
11. Dibujar el patrn de bandas obtenido o tomar una fotografa del gel teido.
7. Cuestionario.
1. Porque es necesario la solucin buffer para el corrimiento electrofortico?
2. Cul es el principio de la migracin del DNA?
3. Por qu se observan diferentes bandas en las muestras de DNA a lo largo del gel?
8. Bibliografa.
Herrez, . (2012). Texto Ilustrado e Interactivo de Biologia Molecular e Ingeniera
Gentica (2a ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
Lewin, B., Krebs, J. E., & Golds, E. S. (2014). Lewin's Genes XI (11 ed.). Burlingtong,
MA, USA: Ed.Jones & Bartlett Publishers.
Nussbaum, R. S., McInnes, R. R., & Willard, H. F. (2007). Genetica Medica, Thomson
& Thomson (7a ed.). Barcelona, Barcelona, Espaa: Elsevier- Masson.
Solari, A. (2007). Gentica Humana (3a. ed.). Buenos Aires, Argentina: Mdica
Panamericana.
Turnpenny, P. D., & Ellard, S. (2009). Elementos de Gentica Mdica. EMERY (13a
ed.). Barcelona, Espaa: Elsevier.
9. Formato y especificacin del reporte de prctica.
La elaboracin del reporte de practica deber seguir el formato y especificaciones del
Anexo 3.
Deber desarrollar en su Marco Terico el Tema: Electroforesis y su aplicacin en la
biologa molecular.

81

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA

Anexo 1.
LINEAMIENTOS DE ACREDITACIN

Es necesario el 80% de asistencia para acreditar el laboratorio y 7 de promedio final .


La calificacin obtenida en el laboratorio equivale al 15% de la calificacin total del curso.
El laboratorio de Gentica se evala promediando los siguientes parmetros:
Un reporte por cada prctica realizada, que deber entregarse en la siguiente
sesin de laboratorio y tendr un valor del 70%.
Trabajo individual y en equipo dentro del laboratorio, y tendr un valor del 30%, y
que ser evaluado con la lista de cotejo del Anexo 2.

82

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Anexo 2.
Gua de Observacin

83

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Anexo 3.
REPORTE DE PRCTICA
Los reportes se entregaran por equipo segn las indicaciones de su profesor, por los
siguientes medios:
b) En una libreta destinada para ello, o
c) A travs de la plataforma institucional BlackBoard (una vez que el curso est
disponible) o por el medio electrnico que el(la) profesor(a) les indique.
Todos los reportes deben incluir portada y el contenido llevar el siguiente orden.
1. MARCO TERICO
Mximo cinco cuartillas relacionadas con el tema indicado en la prctica. La introduccin
no puede contener informacin cortada y pegada directamente de internet o del manual,
es responsabilidad del alumno el capturar y resumir lo encontrado en la bsqueda
bibliogrfica, en caso de que se detecte la presencia de ligas o evidencias de plagio de
informacin la prctica tendr una calificacin reprobatoria y promediable.
2. OBJETIVOS
Lo que el alumno pretende obtener de la prctica experimental.
3. MATERIAL Y METODOS
Describir lo que viene en el manual con las adecuaciones hechas para cada prctica.
4. RESULTADOS
Las observaciones realizadas durante la sesin de laboratorio, los datos cuantificables,
presentados como dibujo, tabla, grfica, porcentaje, etc. La forma de la presentacin de
los resultados est especificada en cada prctica.
5. ANLISIS DE RESULTADOS
Debe incluir la explicacin de los datos obtenidos, la comparacin con la literatura
relacionada, los pro y contra de la tcnica empleada, los pormenores durante el
desarrollo experimental.
6. CONCLUSIONES
84

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
De manera concisa y en base a los objetivos, sacar una conclusin del tema
desarrollado, explicando las ventajas que tiene en su formacin la adquisicin del
conocimiento y las habilidades adquiridas durante en la realizacin de la prctica.
7. CUESTIONARIO
Responder de manera concisa y clara las preguntas que se piden.
8. BIBLIOGRAFA
Citada de acuerdo al sistema Oxford, Vancouver o APA.
Nota: Cuando el reporte sea un producto electrnico o impreso y el profesor(a) detecte
que en este se incluye informacin copiada y pegada o se detecte plagio de alguna
pgina de internet o documento electrnico, a consideracin del profesor(a) se
descontarn los puntos que considere pertinentes, para ese reporte.

85

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Anexo 4.
Rbrica de Reporte de Prctica

86

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Anexo 5.
CONSENTIMIENTO INFORMADO
Sede donde se realizar el estudio: Instituto de Ciencias de la Salud. Laboratorio de Gentica.
Nombre del alumno: ________________________________________________
Sexo:__________ No. de Cuenta: _____________ Edad: _________
A usted se le est invitando a participar en este estudio con fines educativos. Antes de decidir si
participa o no, debe conocer y comprender cada uno de los siguientes apartados. Este proceso
se conoce como Consentimiento Informado. Sintase con absoluta libertad para preguntar
sobre cualquier aspecto que le ayude a aclarar sus dudas al respecto. Si usted desea participar,
entonces se le pedir que firme esta forma de consentimiento.
OBJETIVO DEL ESTUDIO
El estudio tiene un objetivo educativo prctico, que es: conocer la metodologa empleada para
elaboracin de laminillas de linfocitos con metafases y los procedimientos de tincin y anlisis
cromosmico, para realizar el cariotipo correspondiente.
PROCEDIMIENTOS DEL ESTUDIO
En caso de aceptar participar en el estudio, se le tomar una muestra de sangre venosa del
antebrazo, utilizando material desechable estril y ser realizada por personal capacitado. La
toma de la muestra podra causarle un poco de dolor y provocarle un hematoma en la zona, o un
ligero edema, que son reacciones normales a la toma de la misma.
ACLARACIONES
Su decisin de participar en el estudio es completamente voluntaria y no habr ninguna
consecuencia desfavorable para usted, en caso de no aceptar la invitacin, o en caso de
retirarse en el momento que lo desee. No recibir pago por su participacin.
La informacin obtenida en este estudio, con fines educativos, sin afn de lucro.
CARTA DE CONSENTIMIENTO INFORMADO
Yo, _____________________________________________________ he ledo y comprendido la
informacin anterior y mis preguntas han sido respondidas de manera satisfactoria. He sido
informado y entiendo que los datos obtenidos en el estudio pueden ser publicados o difundidos
con fines educativos. Convengo en participar en este estudio.
_____________________________________
Firma del participante

_____________________________
Testigo Nombre y Firma

_____________________
Fecha

_____________________________
Testigo Nombre y Firma

87

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Anexo 6
CONSENTIMIENTO INFORMADO
Sede donde se realizar el estudio: Instituto de Ciencias de la Salud. Laboratorio de Gentica.
Nombre del alumno: ________________________________________________
Sexo:__________ No. de Cuenta: _____________ Edad: _________
A usted se le est invitando a participar en este estudio con fines educativos. Antes de decidir si
participa o no, debe conocer y comprender cada uno de los siguientes apartados. Este proceso
se conoce como Consentimiento Informado. Sintase con absoluta libertad para preguntar
sobre cualquier aspecto que le ayude a aclarar sus dudas al respecto. Si usted desea participar,
entonces se le pedir que firme esta forma de consentimiento.
OBJETIVO DEL ESTUDIO
El estudio tiene un objetivo educativo prctico, que es: conocer la metodologa empleada para el
anlisis de la Sexocromatina.
PROCEDIMIENTOS DEL ESTUDIO
En caso de aceptar participar en el estudio, se le tomar una muestra de carrillo. La toma de la
muestra no le provocar dolor ni reaccin adversa.
ACLARACIONES
Su decisin de participar en el estudio es completamente voluntaria y no habr ninguna
consecuencia desfavorable para usted, en caso de no aceptar la invitacin, o en caso de
retirarse en el momento que lo desee. No recibir pago por su participacin.
La informacin obtenida en este estudio, con fines educativos, sin afn de lucro.
CARTA DE CONSENTIMIENTO INFORMADO
Yo, _____________________________________________________ he ledo y comprendido la
informacin anterior y mis preguntas han sido respondidas de manera satisfactoria. He sido
informado y entiendo que los datos obtenidos en el estudio pueden ser publicados o difundidos
con fines educativos. Convengo en participar en este estudio.
_____________________________________
Firma del participante

_____________________________
Testigo Nombre y Firma

_____________________
Fecha

_____________________________
Testigo Nombre y Firma

88

PROGRAMA EDUCATIVO DE LIC. MDICO CIRUJANO


MANUAL DE PRCTICAS DE LA ASIGNATURA DE GENTICA
Anexo 7.
CONSENTIMIENTO INFORMADO
Sede donde se realizar el estudio: Instituto de Ciencias de la Salud. Laboratorio de Gentica.
Nombre del alumno: ________________________________________________
Sexo:__________ No. de Cuenta: _____________ Edad: _________
A usted se le est invitando a participar en este estudio con fines educativos. Antes de decidir si
participa o no, debe conocer y comprender cada uno de los siguientes apartados. Este proceso
se conoce como Consentimiento Informado. Sintase con absoluta libertad para preguntar
sobre cualquier aspecto que le ayude a aclarar sus dudas al respecto. Si usted desea participar,
entonces se le pedir que firme esta forma de consentimiento.
OBJETIVO DEL ESTUDIO
El estudio tiene un objetivo educativo prctico, que es: conocer la metodologa empleada para la
extraccin de DNA de una muestra sangunea.
PROCEDIMIENTOS DEL ESTUDIO
En caso de aceptar participar en el estudio, se le tomar una muestra de sangre venosa del
antebrazo, utilizando material desechable estril y ser realizada por personal capacitado. La
toma de la muestra podra causarle un poco de dolor y provocarle un hematoma en la zona, o un
ligero edema, que son reacciones normales a la toma de la misma.
ACLARACIONES
Su decisin de participar en el estudio es completamente voluntaria y no habr ninguna
consecuencia desfavorable para usted, en caso de no aceptar la invitacin, o en caso de
retirarse en el momento que lo desee. No recibir pago por su participacin.
La informacin obtenida en este estudio, con fines educativos, sin afn de lucro.
CARTA DE CONSENTIMIENTO INFORMADO
Yo, _____________________________________________________ he ledo y comprendido la
informacin anterior y mis preguntas han sido respondidas de manera satisfactoria. He sido
informado y entiendo que los datos obtenidos en el estudio pueden ser publicados o difundidos
con fines educativos. Convengo en participar en este estudio.
_____________________________________
Firma del participante

_____________________________
Testigo Nombre y Firma

_____________________
Fecha

_____________________________
Testigo Nombre y Firma

89

You might also like