UNIVERSIDAD NACIONAL AUTNOMA DE MXICO

FACULTAD DE ESTUDIOS SUPERIORES CUAUTITLN

INGENIERA QUMICA
LABORATORIO QUIMICA ANALITICA III

INFORME 1 :
ESPECTROFOTOMETRIA DE UV-VIS DE AZUL DE TIMOL
EQUIPO 1
INTEGRANTES:
Cruz Carrasco Miguel ngel
Luna Delgado Anglica Lizbeth
Gonzlez Escobar Martin
CARRERA: Ingeniera Qumica
GRUPO: 1701- A/B
SEMESTRE: 2017-l
PROFESORA:
Fecha de entrega 23/08/2016

OBJETIVOS GENERAL

Determinar la concentracin de azul de timol en una solucin problema mediante

una curva de calibracin patrn externo por espectrofotometra visible

OBJETIVOS PARTICULARES

er
espectrofotmetro
Conocer
losmanejo
fundamentos,
partes
bsicas
general
y
deel
Conoc

Conocer los fundamentos, partes bsicas y el manejo general del

espectrofotmetro UV-Vis.
Realizar la curva de espectro de absorcin del Azul de timol e identificar
la longitud de onda ptima.
Construir una curva de calibracin y emplearla como mtodo para la
determinacin de la concentracin de una sustancia de inters (azul de
timol).
Relacionar la Ley de Lambert-Beer con la ecuacin de una recta,
comprendiendo que dicha ley afirma que la absorbancia es proporcional
a la concentracin.
Entender la importancia de identificar la longitud de onda de absorcin
para la caracterizacin de sustancias.

entre
espectroscopa.
espectrofotometra
y
importancia
de
identificar
mxima
delaabsorcin
longitud
INTRODUCCION

Como es sabido, las tcnicas espectroscpicas se basan en la interaccin de la radiacin

electromagntica con la materia. A travs de esta interaccin las molculas pueden pasar
de un estado energtico basal a otro estado energtico excitado absorbiendo una
cantidad de energa radiante.
Una de las tcnicas de anlisis qumica ms empleada, en la industria y la investigacin,
son las curvas de calibracin que son grficos que relacionan una propiedad de la
sustancia de inters con la concentracin de la misma.

Para medir la absorbancia se hace uso de la tcnica espectrofotomtrica, que se

refiere al uso de la luz para medir las concentraciones de sustancias qu micas, el
fundamento terico es el siguiente:

Fig. 1
Se hace incidir un haz de luz que pasa por la muestra, la cual absorbe una parte del haz y esta
sale con una menor energa de radiacin, (ver figura 1). La cantidad de haz que es capaz de
absorber la muestra, est relacionada directamente con la concentracin debido a que entre ms
molculas de la sustancia estn presentes en la muestra, mayor energa radiante absorbern.
Ahora bien, un indicio de que las sustancias son capaces de absorber radiacin en el intervalo del
espectro electromagntico visible, es el color, y las sustancias que poseen color deben dicha
cualidad a contener grupos cromforos (que contienen electrones de valencia con energas de
excitacin relativamente bajas).

La espectroscopia UV-Visible (espectros electrnicos), se debe a la transicin de los

electrones ms externos de los tomos de las molculas, desde niveles fundamentales a
niveles ms altos de energa.
En la prctica que se realiz se llev a cabo la construccin de una curva de calibracin
y la propiedad medida fue la absorbancia del azul de timol por medio del
espectrofotmetro UV-VIS (poner nombre). En la fig. 2 se observa la estructura qumica
de la sustancia a estudiar.

Fig 2

En la cual se puede ver que posee electrones, ,

y n (libres), y son
precisamente los que participan en las transiciones de energa y que producen el color en
la molcula.

MATERIAL

Material
Pipeta volumtrica 1 ml

Reactivos y equipos
Espectrofotmetro UV-VIS

1
1
5
2
2

Micro pipeta volumtrica

Vidrio de reloj
Matraz volumtrico 10 ml
Matraz volumtrico 25 ml
propipetas

Azul de timol

PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
Se realizaron los clculos necesarios para preparar una solucin de azul
de timol estndar de concentracin 2.7432 x 10

Se prepararon 5 sistemas de azul de timol a partir de la solucin

estndar aforando en medio cido (HCl=0.1M) para adquirir una
tonalidad rojiza en los intervalos de

5 X 106

2.5 X 105

A partir de la solucin ms concentrada se traz la curva de Espectro de

Absorcin para determinar la longitud de onda ptima.
Una vez obtenido ese dato, se determin la absorbancia y se realiz la
curva de calibracin del analito con los 5 sistemas antes mencionados.
Con la muestra problema se prepar una dilucin de 1/25 y se aforo en
medio cido, se midi el valor de absorbancia y se realiz una
interpolacin con la ecuacin obtenida dela regresin lineal para
determinar la concentracin del sistema problema, as como dela
solucin problema.
RESULTADOS
Tabla No. 1. Resultados para el espectro de absorcin de azul de timol
A

380
0,146
385
0,15
400
0,146
410
0,143
420
0,135
430
0,122
440
0,114
450
0,107
460
0,097
470
0,096
480
0,106
490
0,124
500
0,155

510
520
530
540
550
560
570
580
590
600

0,203
0,269
0,335
0,387
0,389
0,329
0,232
0,148
0,084
0,045

Longitud de onda vs. Absorbancia

0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
Absorbancia

0.2
0.15
0.1
0.05
0
350

400

450

500

Longitud de onda

Grafica 1. Espectro de absorcin del azul de timol

Anlisis de Resultados
Curva de calibracin a 550 nm

550

600

650

Longitud de onda vs. Absorbancia

0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
Absorbancia

0.2
0.15
0.1
0.05
0
350

400

450

500

550

600

650

Longitud de onda

Con la ayuda de la grfica 1 se obtuvo la longitud de onda ptima, con un valor de 550
nm, con la cual se trabaj en la primera parte del presente experimento.
Una vez conocido el valor de la longitud de onda ptima se procedi a elaborar la curva de
calibracin con ayuda de los 5 sistemas obtenidos previamente de la solucin stock de
concentracin conocida.
Recordando que las concentraciones de los 5 sistemas son:
C sistema 1=2.74 1 06 M
C sistema 2=4.11 1 06 M
C sistema 3=5.48 1 06 M
C sistema 4=6.85 1 06 M
6

C sistema 5=8.22 1 0 M
Enseguida, se hizo la lectura de absorbancia de cada uno de los sistemas, obtenindose los
siguientes datos:
Absorbancia sistema1=.07
Absorbancia sistema2=.15
Absorbancia sistema3 =.31
Absorbancia sistema 4=.395

Absorbancia sistema5 =.42

Concentracin (M)
0,00000274
0,00000411
0,00000548
0,00000685
0,00000824

Absorbancia
0,07
0,15
0,31
0,395
0,42

Despus se graficaron dichos sistemas contra sus respectivas absorbancias, obteniendo la

siguiente curva de calibracin:

Absorbancia vs Concentracin
0.45

f(x) = 68736.45x - 0.11

R = 0.95

0.4
0.35
0.3
0.25

Absorbancia

0.2
0.15
0.1
0.05
0
0

Concentracin

Debido a que el valor del coeficiente de correlacin r fue de

r=0.94 , se consider

ajustar la regresin, suprimiendo los dos valores que se encontraban ms alejados de la

ecuacin de la recta, los cuales corresponden a los sistemas 3 y 4.
Con lo cual se obtuvo una nueva curva de calibracin:

Absorbancia vs Concentracin

Absorbancia

0.45
0.4
0.35
0.3
0.25
0.2
0.15
0.1
0.05
0

f(x) = 64039.38x - 0.11

R = 1

Concentracin

Se procedi a calcular la concentracin de la muestra problema con la curva de

calibracin previamente relizada, interpolando la ecuacin obtenida con la
curva de calibracin corregida correspondiente a 550 nm

y=64039 x.1088
Recordando que la ley de Lambert-Beer establece que hay una relacin entre la
absorbancia monocromtica y la concentracin de un cromforo en solucin:

A= C l

Donde
A = absorbancia
b = longitud del paso ptico (cm)
c = concentracin ( M )
M
1
= coeficiente de absortividad molar ( 1cm ) (sus unidades dependen de C y l )

Considerando la ecuacin de la recta como:

y=mx +b=A= l C=64039 x.1088

Por lo que en el presente informe se consider que:

y= A

m= l=64039
x=C

b=.1088
Ya establecida la manera en que se trataran los datos, se retom el
clculo de la concentracin de la solucin problema. Dicha solucin
problema estaba conformada por una alcuota de 1 ml y posteriormente
fue aforada en 25 ml. De la solucin aforada se tom una pequea parte
a la cual se le midi la absorbancia para luego interpolar con la curva de
calibracin antes obtenida y as continuar con el clculo de la
concentracin de dicha solucin problema.
El valor de absorbancia del sistema problema fue de:

A=0.131

Sustituyendo en la ecuacin de la regresin lineal:

0 .131=64039 x0.1088

Despejando la concentracin:
.131+.1088
=x=3.744 106
64039
Donde x corresponde a la concentracin del sistema problema aforado a
25 ml
Con el objetivo de conocer la concentracin real de la solucin problema
se multiplic por el inverso del factor de dilucin:
Creal =3.744 106

25
=9.361 105 M
1

Para el clculo del coeficiente de absortividad molar se parti de que el valor

de la pendiente de la regresin lineal es igual al producto de coeficiente de
absortividad molar por la longitud de paso ptico (largo de la celda
espectrofotomtrica)

m= l=64039

Entonces se despej el trmino que se deseaba saber y como la longitud de la

celda es 1 cm:

64039
1
1
=64039 M cm
1 cm

El mismo procedimiento fue repetido para la curva de

calibracin a 510 nm
Curva de Calibracion a 510 nm

Concentracin (M)
0,00000274
0,00000411
0,00000548
0,00000685
0,00000824

Absorbancia
0,07
0,15
0,31
0,395
0,42

Se procedi a graficar dichos sistemas contra sus respectivas absorbancias obtenindose la

siguiente curva de calibracin:

Absorbancia vs Concentracin
0.25
0.2

f(x) = 32737.89x - 0.05

R = 0.93

0.15

Absortividad

0.1
0.05
0
0

Concentracion

Una vez obtenida la curva de calibracin se procedi a calcular la

concentracin de la muestra problema interpolando con la ecuacin obtenida
con la curva de calibracin correspondiente a 510 nm

y=32738 x.0543

El valor de absorbancia del sistema problema fue de:

A=.070

Sustituyendo en la ecuacin de la regresin lineal:

.070=32738 x.0543
Despejando la concentracin:
.070+.0543
=3.796 106
32738
Donde x corresponde a la concentracin del sistema problema aforado a
25 ml
Para conocer la concentracin real de la solucin problema se multiplic
por el inverso del factor de dilucin:
Creal =3.796 106

25
=9.492105
1

Clculo del coeficiente de absortividad a 510 nm

m= l=32738
Entonces se despej el trmino que se deseaba saber y como la longitud de la
celda es 1 cm:

32738
=32738 M 1 cm1
1 cm

=510 nm
Concentraci
n sistema
problema
Molarid pp
ad
m
6
3.796 101.7
71

Concentra
cin
solucin
problema
M
pp
m
5
44.
9.49 10
28

=550 nm

M 1 cm1
32738

Concentra
cin
sistema
problema
M
pp
m
1.76
3.744 10
47

Concentraci
n solucin
problema

M 1 cm1

ppm

5
43.6
9.361 10
84

64039

Como se puede apreciar, en ambos clculos a las distintas longitudes de

onda (550 y 510 nm) se pueden tratar las absorbancias del azul de timol
y hacer uso de ellas para determinar la concentracin de la solucin
problema en la curva de calibracin establecida, sin embargo, el clculo
correcto es a la longitud de onda optima la cual es de 550 nm debido a
que esta longitud de onda es posible obtener un mayor ndice de
absorbancia respecto a las dems longitudes de onda del espectro de
azul de timol. Por lo que se puede concluir que el valor correcto de la
concentracin del sistema problema es de:
Y la concentracin dela solucin problema es de
que la concentracin de la solucin problema es:

3.744 106 M , mientras

Creal 9.361 105 M

Adems cabe mencionar que dicha longitud de onda optima (550 nm)
es vlida solo para el medio en el que se trabaj, el cual era cido
clorhdrico
AQUI VA TU PARTE MARTIN

AZUL DE TIMOL

CONCLUSIONES
BIBLIOGRAFIA
Memoria de clculo

CALCULOS
Azul de timol en medio acido (HCl 0.1M).
PM: 466.6 g/mol
25 ml
Masa obtenida: 0.032 mg

Solucin Stock

32 g
466.6 gmol = 0.06858 mol.
0.06858mol .
3
=2.7432 x 10
25 ml

Sistema 1
10L-----0.01 ml
3

C1= 2.7432 x 10

V1= 0.01 ml
V2= 10 ml
C1V1=C2V2
C2=

(2.7432 x 103 M )(0.01 ml)

10 ml

2.7432 x 10

Sistema 2
15L-----0.015 ml
3

C1= 2.7432 x 10

V1= 0.015 ml
V2= 10 ml
C1V1=C2V2
3

C2=

(2.7432 x 10 M )(0.015 ml)

10 ml

Sistema 3
20L-----0.020 ml
3

C1= 2.7432 x 10

4.1148 x 10

V1= 0.020 ml
V2= 10 ml
C1V1=C2V2
3

C2=

(2.7432 x 10 M )(0.020 ml)

10 ml

5.4864 x 10

Sistema 4
25L-----0.025 ml
3

C1= 2.7432 x 10

V1= 0.025 ml
V2= 10 ml
C1V1=C2V2
C2=

(2.7432 x 103 M )(0.025 ml)

10 ml

6.858 x 10

Sistema 5
30L-----0.030 ml
3

C1= 2.7432 x 10

V1= 0.030 ml
V2= 10 ml
C1V1=C2V2
3

C2=

(2.7432 x 10 M )(0.030 ml)

10 ml

8.2296 x 10

Clculos para pasar de Molaridad a ppm

A 510 nm

C sistema problema=3.796 106

C solucin problema 9.49 105

||

mol 466.6 g 1000 mg

=1.771 ppm
L 1 mol
g

||

mol 466.6 g 1000 mg

=44.28 ppm
L 1 mol
g

A 550 nm

||

||

C sistema problema=3.744 106

mol 466.6 g 1000 mg

=1.747 ppm
L 1 mol
g

C solucin problema =9.361 105

mol 466.6 g 1000 mg

=43.68 ppm
L 1mol
g

BIBLIOGRAFIA

Harris D. C., Anlisis Qumico Cuantitativo. Grupo Editorial

Iberoamrica;.Mxico. 1992
Fundamentos de Qumica Analtica. Skoog, West, Holler y Crouch. Ed.
Thomson. 8 Edicin.