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se ve, la absorbancia y la transmitancia son dos aspectos del mismo fenmeno. La absorbancia, a
una determinada longitud de onda lambda, se define como:
Donde I es la intensidad de la luz que pasa por la muestra (luz transmitida) y I0 es la intensidad de
la luz incidente.
La medida de la absorbancia de una solucin es usada con mucha frecuencia en laboratorio
clnico, para determinar la concentracin de analitos tales como colesterol, glucosa, creatinina y
triglicridos en sangre. Cada uno de estos analitos se hace reaccionar qumicamente con
determinados compuestos, a fin de obtener una solucin coloreada. A mayor intensidad de color,
mayor ser la absorbancia de la solucin en una determinada longitud de onda. La absorbancia es
entonces directamente proporcional a la concentracin del analito en sangre.
Para medir esta absorbancia, se hace incidir un haz de luz con determinada intensidad y longitud
de onda, sobre la solucin, y se mide la luz transmitida al otro lado de la cubeta que contiene dicha
solucin. Estas tcnicas estn comprendidas en el rea de la espectrofotometra.
La transmitancia se define como la cantidad de energa que atraviesa un cuerpo en determinada
cantidad de tiempo.
Existen varios tipos de transmitancia, dependiendo de qu tipo de energa consideremos.
La transmitancia ptica se refiere a la cantidad de luz que atraviesa un cuerpo, en una determinada
longitud de onda. Cuando un haz de luz incide sobre un cuerpo traslcido, una parte de esa luz es
absorbida por el mismo, y otra fraccin de ese haz de luz atraversar el cuerpo, segn su
transmitancia. El valor de la transmitancia ptica de un objeto se puede determinar segn la
siguiente expresin:
I es la cantidad de luz transmitida por la muestra e I0 es la cantidad total de luz incidente. Muchas
veces encontraremos la transmitancia expresada en porcentaje, segn la frmula:
Una disolucin 100 M de un determinado cromforo tuvo una transmitancia a 525 nm de 0.5
cuando se midi en una celda 1.5 cm de longitud. Calcular: a) la absorbancia de la disolucin; b) la
absorptividad molar del cromforo
a) A = -log T = - log 0.5 = 0.301
b) A = C .e. L Reordenando la ecuacin obtendremos:
e. = A/(C x L) = 0.301 /(10-4 M x 1.5 cm) = 2 x 103 M-1 cm-1
5- Cmo se realiza una curva de concentracin de una sustancia o patrn, y como se
calcula el factor de la curva de concentracin
Para hallar las concentraciones de cada grupo se utiliz la siguiente ecuacin
V 1. C 1=V 2. C 2
C2 =
V 1 C 1
V2
Hallando la concentracin y con la absorbancia que se nos da lo colocamos en una tabla y luego
graficamos
Factor de curva=
Fc=
[]/ A
n
anticuerpos, urea, gases en disolucin y sustancias inorgnicas como sodio, potasio, cloruro de
calcio, carbonato y bicarbonato.
Entre estas protenas estn: fibringeno (para la coagulacin), globulinas (regulan el contenido del
agua en la clula, forman anticuerpos contra enfermedades infecciosas), albminas (ejercen
presin osmtica para distribuir el agua entre el plasma y los lquidos del cuerpo) y lipoprotenas
(amortiguan los cambios de pH de la sangre y de las clulas y hacen que la sangre sea ms
viscosa que el agua). Otras protenas plasmticas importantes actan como transportadores hasta
los tejidos de nutrientes esenciales como el cobre, el hierro, otros metales y diversas hormonas.
Los componentes del plasma se forman en el hgado (albmina y fibringeno), las glndulas
endocrinas (hormonas), y otros en el intestino.
Cuando se coagula la sangre y se consumen los factores de la coagulacin, la fraccin fluida que
queda se denomina suero sanguneo.
8- Diga la subclasificacin de los leucocitos o glbulos blancos
Segn las caractersticas microscpicas de su citoplasma (tintoriales) y su ncleo (morfologa), se
dividen en:
Basfilos: presentes en sangre entre 0,1 y 1,5 clulas por mm, (0,2-1,2 % de los
leucocitos). Presentan una tincin basfila, lo que los define. Segregan sustancias como
laheparina, de propiedades anticoagulantes, y la histamina que contribuyen con el proceso
de la inflamacin. Poseen un ncleo a menudo cubierto por grnulos de secrecin.
Neutrfilos, presentes en sangre entre 2.500 y 7.500 clulas por mm. Son los ms
numerosos, ocupando entre un 55 % y un 70 % de los leucocitos. Se tien plidamente, de ah
su nombre. Se encargan de fagocitar sustancias extraas (bacterias, agentes externos, etc.)
que entran en el organismo. En situaciones de infeccin o inflamacin su nmero aumenta en
la sangre. Su ncleo caracterstico posee de 3 a 5 lbulos separados por finas hebras
de cromatina, por lo cual antes se los denominaba "polimorfonucleares" o simplemente
"polinucleares", denominacin errnea.
Linfocitos: valor normal entre 1.300 y 4000 por mm (24 % a 32 % del total de glbulos
blancos). Su nmero aumenta sobre todo en infecciones virales, aunque tambin
enenfermedades neoplsicas (cncer) y pueden disminuir en inmunodeficiencias. Los
linfocitos son los efectores especficos del sistema inmunitario, ejerciendo la inmunidad
adquirida celular y humoral. Hay dos tipos de linfocitos, los linfocitos B y los linfocitos T.
Monocitos: Conteo normal entre 150 y 900 clulas por mm (2 % a 8 % del total de
glbulos blancos). Esta cifra se eleva casi siempre por infecciones originadas por virus o
parsitos. Tambin en algunos tumores o leucemias. Son clulas con ncleo definido y con
forma de rin. En los tejidos se diferencian hacia macrfagos o histiocitos.
11- Como se extrae suero y plasma de una misma muestra de sangre (procedimiento)
1-Extraer aproximadamente 5 ml sangre de la vena del brazo por medio de la jeringa, quitar la
aguja y colocar la mitad de la sangre extrada cuidadosamente en el tubo de colecta de sangre de
tapa roja y la otra mitad en el tubo de tapa color violeta que contiene 50 microlitros (L) de EDTA,
homogenizar.
2- Homogenizar cuidadosamente el tubo con anticoagulante.
3- Dejar el tubo sin anticoagulante en reposo esperar formarse el coagulo despus
4- Centrifugar los tubos por 5 minutos, separar el suero y el plasma respectivamente en tubos de
ensayos por separado, anotar las observaciones
12- Qu diferencia hay entre suero y plasma
El plasma sanguneo contiene este fibringeno. Bsicamente, cuando se separan el suero y
plasma de la sangre, el plasma an conserva el fibringeno que ayuda a la coagulacin, mientras
que el suero es la parte de la sangre que queda despus de quitar este fibringeno.
Qu queda de la sangre una vez que se han quitado los glbulos rojos, glbulos blancos y
factores de coagulacin? El suero sanguneo es principalmente agua que se disuelve con
protenas, hormonas, minerales y dixido de carbono. Es una fuente muy importante de electrolitos.
El plasma es un lquido amarillento y claro que es parte de la sangre. Tambin se encuentra en las
linfas o en fluidos intramusculares. Esta es la parte de la sangre que contiene fibrina y otros
factores de coagulacin. El plasma hace el 55% del volumen total de sangre. El principal
componente del plasma sanguneo es el agua
El suero es la parte lquida de la sangre despus de la coagulacin. Contienen 6-8% de las
protenas que forman la sangre. Estn ms o menos, igualmente divididas entre la albmina y las
globulinas de suero. Cuando la sangre es extrada y dejada a coagular, el cogulo se reduce
despus de algn tiempo. El suero se exprime fuera una vez que este cogulo se reduce. Las
protenas en el suero normalmente estn separadas por un proceso llamado electroforesis.
13- Definicin, estructura y funcin de la hemoglobina
La hemoglobina es una hemoprotena de la sangre, de masa molecular de 64.000 g/mol (64 kDa),
de color rojo caracterstico, que transporta el oxgeno desde los rganos respiratorios hasta los
tejidos, el dixido de carbono desde los tejidos hasta los pulmones que lo eliminan y tambin
participa en la regulacin de pH de la sangre, en vertebrados y algunos invertebrados.
La hemoglobina es una protena de estructura cuaternaria, que consta de cuatro subunidades. Esta
protena forma parte de la familia de las hemoprotenas, ya que posee un grupo hemo. Tiene como
funcion transporte de gases respiratorios. Cuando se encuentra con el oxgeno forma un
compuesto qumico llamado oxihemoglobina que lleva al oxigeno hasta los tejidos, .Ahi en los
tejidos se vuelca a la cangre otro gas el dixido de carbono, que en parte se combina con la
hemoglobina y forma carbohemoglobina, cuando este compuesto llega a los pulmones, se
desdobla, el dixido de carbono se expulsa y vuelve a formarse oxihemoglobina
Estructura
La forman cuatro cadenas polipeptdicas (globinas) a cada una de las cuales se une un grupo
hemo, cuyo tomo de hierro es capaz de unir de forma reversible una molcula de oxgeno. El
grupo hemo est formado por:
Unin del succinil-CoA (formado en ciclo de Krebs o ciclo del cido ctrico) al aminocido
glicina formando un grupo pirrol.
Cuatro grupos pirrol se unen formando la protoporfirina IX.
La protoporfirina IX se une a un ion ferroso (Fe2+) formando el grupo hemo.
Clasificacin de la hemoglobina
Se reconocen cinco clases de hemoglobina normales, que son las que tienen los individuos sanos,
y numerosas variantes anormales asociadas a la presencia de alteraciones genticas. Tales
defectos congnitos conducen a la sntesis de hemoglobinas con defectos en la estructura de sus
cadenas polipeptdicas o en su conformacin tridimensional, que redundan en fallas funcionales.
Las hemoglobinas normales son las siguientes:
-Embrionales:
Gower 1 (22)
Gower 2 (22)
Hemoglobina F (22)
-De adultos:
Edad
Hb g/dl
Promedio 2
DE
Hb/dl
RN
17 2
< 15
2m-3m
11 15
< 9,5
Prematuro
92
< 7,0
5 m - 2 aos
12,5 1,5
< 11,0
Preescolar
12,5 1,5
< 11,0
Escolar 5 - 9 13 1,5
aos
< 11,5
< 12,0
Escolar 9 -12
aos
13,5 1,5
< 12,5