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INGENIERA AMBIENTAL
AO Y SEMESTRE ACADMICO:
2016-I
CICLO:
III
DOCENTE:
ALUMNOS:
HUARAZ PER
2016
PRACTICA DE
LABORATORIO
N03
PH Y
AMORTIGUADORES
INTRODUCCIN
Ser conscientes que el tema, pH y amortiguadores, es muy importante para nosotros,
ya que ms adelante lo aplicaremos para analizar diversas muestras, quizs muchas
de ellas, relacionadas con el grado de acidez o basicidad de algn medio contaminado.
En este sentido, nuestra principal finalidad es lograr la comprensin integral de este
tema, y para ello, hemos considerado conveniente organizar nuestro trabajo de la
siguiente manera:
En primer lugar, identificar los principales objetivos de la prctica de laboratorio.
En segundo lugar, conocer qu materiales, equipos o reactivos vamos a utilizar; y
cules son los procedimientos que vamos a llevar a cabo para realizar dicha prctica.
En tercer lugar, har un hincapi sobre las bases tericas, tanto del pH y los
amortiguadores (tampones o buffer), tales como: concepto, caractersticas, funciones,
etc. Luego, como motivo de aplicacin, medir y comparar el pH y la capacidad
amortiguadora de cada sustancia trabajada en laboratorio, y registrar los resultados
en dos tablas respectivamente.
Finalmente,
dar
conocer
mi
discusin
de
resultados,
conclusiones,
Los alumnos
I.
OBJETIVOS:
II.
FUNDAMENTO TEORICO:
El pH
El pH es una medida de acidez o alcalinidad de una disolucin. El pH indica
la concentracin de iones hidrgeno [H+] presentes en determinadas
sustancias.
La sigla significa potencial hidrgeno, potencial de hidrgeno o
potencial de hidrogeniones (pondus Hydrogenii o potentia Hydrogenii;
del latn pondus, n. = peso; potentia, f. = potencia; hydrogenium, n. =
hidrgeno).
Este
trmino
fue
acuado
por
el qumico
son
aquellas
soluciones
cuya
concentracin
de
reacciones metablicas,
TAMPONES FISIOLGICOS
Niveles de pH en el cuerpo humano
Muchas biomolculas no actan a un determinado valor de pH y solo toleran
fluctuaciones mnimas en el pH. Dado el bajo grado de ionizacin del agua
(H2O), cuando aadimos en sta una pequea cantidad de cido o de base,
el pH vara en mucha cantidad, llegando a niveles de pH en los cuales las
biomolculas no podran cumplir sus funciones. Por esta razn los lquidos
fisiolgicos contienen tampones que, a diferencia del agua, mantienen el pH
constante. Los tampones mantienen la cantidad de cidos y de bases en
equilibrio en un determinado pH en el cual la actividad biolgica de las
protenas, hormonas, enzimas, bombas de iones... sea ptima. En humanos,
los valores compatibles con el mantenimiento de funciones vitales son de
pH entre 6,8 y 7,8; siendo el intervalo de 7,35 a 7,45 el de normalidad. En
concreto, podemos decir que cada lquido fisiolgico tiene un nivel
caracterstico normal de pH: - Sangre arterial: pH= 7,4 - Sangre venosa: pH=
7,35 - Lquido intersticial: pH= 7,35 - Lquido intracelular: pH= 6 - 7,4 - Orina:
pH= 4,5 - 8 - HCl gstrico: pH= 0,8
Los tampones son los primeros responsables de mantener estos niveles de
pH constantes aunque en el organismo se produzcan altas cantidades de
cidos debido al metabolismo. As, los tampones son el primer nivel de
defensa contra los cambios de pH. Tambin contribuyen al equilibrio la
lnea
de defensa).
Cuando
hay alteraciones
debidas a
H2CO3
HCO3 - + H+
Tampn fosftico:
H2PO4-
HPO42- + H+
o Orgnicos:
Tampn hemoglobina:
HHbO2
HbO2- / HbH
Hb- + H+
Tampn bicarbonato
Tal y como se ha comentado anteriormente, el tampn bicarbonato est
compuesto por cido carbnico (H2CO3) y bicarbonato (HCO3-) y el valor de
su pKa es de 6,1. Es el tampn ms importante de la sangre (pH=7,4),
representa el 75% de la capacidad buffer total de la sangre. Tambin est
presente en el lquido intersticial. Es un tampn muy eficaz porque la
relacin HCO3-/ H2CO3 es muy alta, lo que supone una alta capacidad para
amortiguar los cidos. Supone una ventaja el hecho que se trata de un
sistema abierto, ya que el CO2 puede ser eliminado en la respiracin muy
rpidamente, los H+ se pueden eliminar por va renal y el HCO3- puede
reemplazarse en la orina. En realidad, este tampn est compuesto por dos
equilibrios, pues el cido carbnico forma CO2, generando una molcula de
H2O.
Cuando el pH disminuye, el bicarbonato toma los protones libres. As, el
equilibrio se desplaza hacia el H2CO3, que a su vez, mediante la reaccin
catalizada por la anhidrasa carbnica (glbulos rojos), cede una molcula
de H2O y se convierte en CO2, el cual se elimina a travs de los pulmones.
Por el contrario, si el pH de la sangre aumenta, se forma HCO3- a partir de
H2CO3, lo que conduce a mayor captacin de CO2. Las concentraciones de
HCO3- y de H+ tambin se pueden controlar por mecanismos fisiolgicos a
nivel renal. El rin puede eliminar protones unindolos a amonacos o
fosfatos y mantiene la concentracin de bicarbonato mediante reabsorcin
o regeneracin del mismo. La suma de las formas sal y cido se llama
reserva alcalina. En condiciones normales, esta suma tiene el valor 25,2
mEq de CO2 por litro. Como a pH sanguneo (pH=7,4), la proporcin entre
la forma sal y cido es de 20, resulta que [HCO 3-] es 24 mEq/L y [CO2] es
1,2 mEq/L. As, es importante tener en cuenta que el cuerpo necesita ms
bicarbonato, y no cido carbnico, porque el metabolismo produce ms
cidos que bases.
Tampn fosfato
El tampn fosfato est compuesto por el hidrgeno fosfato (NaHPO 4-2) y el
dihidrgeno fosfato (NaH2PO4-). Acta en el plasma y el lquido intersticial.
Este tampn tiene un pKa de 6,8, el cual est mucho ms cerca del pH
plasmtico. Esto significara que este tampn tendra que ser ms til que
el anterior, pero no es as ya que se encuentra en concentraciones menores
en sangre y la eliminacin del fosfato es mucho ms lenta, por va renal.
Figura 3: Fosfato
A pH fisiolgico de 7,4, la relacin HPO4-2/ H2PO4- es igual a 4. As, se trata
de un sistema eficaz para amortiguar cidos. Como hemos dicho, a nivel
sanguneo, el tampn bicarbonato resulta ms til que el tampn fosfato, ya
que este ltimo se encuentra en concentraciones bajas. Ahora bien, a nivel
intracelular, el tampn fosfato tiene concentraciones elevadas y es ms
eficiente.
Tampn hemoglobina
La hemoglobina es una protena globular multimrica que dispone de cuatro
puntos de unin a ligandos cuyas propiedades de unin estn reguladas
alostricamente. La funcin principal de la hemoglobina es el transporte de
oxgeno por la sangre. Referente a su estructura, se trata de un
heterotetrmero y consta de dos pares de cadenas polipeptdicas diferentes.
Cada una de las cadenas lleva un hemo como grupo prosttico, donde se
unen las molculas de O2, por lo que una hemoglobina puede unir como
mximo cuatro molculas de O2. La captacin de O2 se ve afectada, entre
otros factores, por los H+ y el CO2. Algunos factores favorecen el estado T,
en el cual la protena no tiene O2 unidos, y otros favorecen el estado R, en
el cual la hemoglobina tiene unidas molculas de O 2. Este fenmeno se
denomina efecto Bohr. Es muy positivo para remarcar la diferencia entre las
distintas afinidades para el O2; la cual es esencial para que cumpla su
funcin de transporte.
Cuando el CO2 forma cido carbnico y protones, los protones estabilizan
el estado T, de descarga de O2. As, en los capilares perifricos, dnde
encontramos CO2, la hemoglobina cede las molculas de O2. En los
capilares de los alvolos pulmonares se invierte este efecto. As, cuando se
unen H+ a la hemoglobina, se produce un efecto en el equilibrio del tampn
III.
IV.
PROCEDIMIENTO Y EXPERIMENTACION:
4.1.
Medicin del pH
Las tiras reactivas del pH, reaccionan por contener diferentes indicadores, los
cuales cambian de color de acuerdo al pH en el que se encuentran. Estas
mediciones se consideran semicuantitativas, debido a que no indican el valor
exacto del pH, la coloracin que presenta la tira se compara con la gama de
colores de referencia que trae consigo el recipiente de las tiras.
SOLUCION
PH OBTENIDO
(H*)
OBSERVAC
T C
ION
Saliva
Orina
Sudor
Leche
Refresco
oscuro
Refresco claro
Jugo de fruta
Yogurt
Tierra de
jardn
Residuo de
construccin
Agua de pizeta
Agua de cao
Agua de rio
Agua de lluvia
Aguas
termales
Lagrimas
6.99
5.58
6.5
2.28
2.83
6.15
Cerca a
neutra
2.5
3
4.21
3.63
22.9
acido
acides
4.27
2.94
Muy poco
De poca
7.8
6.39
Neutra
Muy acida
22.1
Muy acida
21.8
Muy acida
21.7
Bastante
21.8
acida
4.91
6.5
6.91
6.5
5.98
6.5
21.4
acida
Cerca a
21.7
neutra
6.5
6.12
Es bastante
Poco acida
Cerca a
22.2
21.5
neutra
6
6.86
7
6.76
3.81
7
Poco acida
Cerca a
26.7
neutra
7.03
7
Neutra
Cerca de
24
neutra
Agua
carbonatada
8.03
Es poco
bsico
10%
Refresco oscuro
ORINA
REFRESCO CLARO
AGUA DE DESMONTE
YOGURT
TIERRA DE JARDN
SALIVA
LECHE
4.2.
Sistemas amortiguadores
NaOH
HCl
pH
0.01 N 0.01 N Final
Orina
5.45
0.5 ml
-------
Orina
5.45
--------
0.5 ml
5.25
Suero
7.4
0.5 ml
--------
8.5
Suero
7.4
--------
0.5 ml
NaHCO3
8.85
0.5 ml
--------
NaHCO3
8.85
--------
0.5 ml
8.5
Agua destilada
0.5 ml
--------
Agua destilada
--------
0.5 ml
4.3.
El uso del potencimetro depende del modelo; pero en general es necesario tener
los siguientes cuidados:
a) Antes de medir el pH deber mezclarse la solucin por analizar empleando el
agitador magntico. (es recomendable el uso de varillas de vidrio como
agitadores).
b) Los elementos deben enjuagarse con agua destilada antes y despus de
utilizarlos y no se deben tocar con la mano.
PH OBTENIDO
(H*)
Saliva
6.99
Orina
5.58
6.5
Sudor
Leche
Refresco oscuro
Refresco claro
Jugo de fruta
Yogurt
Tierra de jardn
Residuo de
construccin
Agua de pizeta
Agua de cao
Agua de rio
Agua de lluvia
Aguas termales
Lagrimas
Agua carbonatada
10%
7.8
6.39
2.28
2.83
6.15
2.5
3
2.94
4.27
3.63
4.21
4.91
6.5
6.91
6.5
5.98
6.5
6.5
6.12
6
3.81
6.86
7.03
6.76
8.03
OBSERVACION
T C
Neutra
Muy poco acido
22.9
De poca acides
Cerca a neutra
Muy acida
22.1
Muy acida
21.8
Muy acida
21.7
Bastante acida
21.8
Es bastante acida
21.4
Cerca a neutra
Poco acida
Cerca a neutra
21.7
22.2
21.5
Poco acida
Cerca a neutra
26.7
Neutra
Cerca de neutra
Es poco bsico
24
V.
DISCUSION DE RESULTADOS:
El pH de la saliva, y la tierra de jardn (medidos con la tira de pH) coincidieron
casi en 6. Segn los siguientes enlaces:
-http://es.wikipedia.org/wiki/Saliva
El pH salival normal, oscila entre 6,5 y 7.
El pH del refresco claro y oscuro (medidos con la tira de pH) coincidi en 2.5
3 Segn el siguiente enlace: http://nutrafit.com.mx/sabias_que/11_10RAZONES-PARA-NO-CONSUMIR-REFRESCOS, El refresco tiene un pH de
2.5 aproximadamente el mismo que el vinagre, pero el contenido de azcar
oculta la acidez.
VI.
CONCLUSIONES
Al comparar los resultados del pH que arrojan las cintas, stas tienen un
margen de error considerable a diferencia del potencimetro.
El pH fisiolgico debe mantenerse dentro de los intervalos muy estrechos a
fin de mantener la homeostasis.
Los amortiguadores son agentes que se resisten al cambio brusco del pH de
una sustancia.
El agua no tiene sistemas amortiguadores.
El bicarbonato posee sistemas amortiguadores.
El pH puede alterarse con la temperatura.
Para que una sustancia se comporte como buen amortiguador, todo cido
debe funcionar con su base conjugada.
El pH de la orina depende de la alimentacin de cada persona.
El yogurt es ms cido que la leche.
VII.
CUESTIONARIO
8
Saliva
Orina de varon
Orina de mujer
Leche
Gaseosa oscura
gaseosa clara
Jugo de fruta
Yogurt
Tierra de jardin
Desmonte
Agua de rio
Agua de cao
Compuestos
ph obtenido
phmetro
3.
De acuerdo con los resultados obtenidos en los sistemas amortiguadores,
explique en que consiste el sistema amortiguador presente en cada una de
las muestras.
Orina:
Los riones controlan el equilibrio cido-bsico excretando orina cida o
bsica. La excrecin de orina cida reduce la cantidad de cido en el lquido
extracelular, mientras que la excrecin de una orina bsica elimina bases de
este lquido extracelular. Ah los riones regulan la concentracin de H + en
el lquido extracelular mediante 3 mecanismos que son secrecin de H,
reabsorcin
de
los
bicarbonatos
filtrados,
produccin
de
nuevos
bicarbonatos.
Suero:
El suero fisiolgico es una disolucin acuosa de sustancias compatibles con
los organismos vivos debido a sus caractersticas definidas de osmoticidad,
pH y fuerza inica. Est compuesto de agua, electrolitos y, a veces, distintas
sustancias, como por ejemplo la glucosa, fuente de carbono y energa para
el organismo, y ayuda a la regulacin del pH de la sangre y ciertos rganos.
Agua destilada:
El agua como ya sabemos es neutra es decir presenta un pH de 7 luego
cuando se le agrego la base, se obtuvo un cambio muy notable ya que
aumento a 13 al agregarle acido al agua destilada en cambio disminuyo el
pH a 6 demostrando la poca o nula capacidad amortiguadora del agua
dependiendo del aumento de H+ el pH disminuir y si aumentan los OHaumentara el pH.
4. Qu es el buffering?
Rpta.
El buffering es la capacidad de resistencia a los cambios de pH.
Buffering
Buffering
5. Qu es el punto isoelctrico?
Rpta.
El punto isoelctrico es el pH al que una sustancia anftera (sustancia que
puede reaccionar como cido o como base) tiene carga neta cero. El
concepto es particularmente interesante en los aminocidos y tambin en las
protenas. A este valor de pH la solubilidad de la sustancia es casi nula.
Para calcularlo se deben utilizar los pKa. (Los pKa a considerar para esta
ecuacin, en una tabla de pH, son los que contienen a la especie qumica
con
carga
igual
cero,
cuando
tienen
ms
de
un
pKa).
Las molculas complejas, tales como las protenas, se combinan con los
iones hidrgeno y con otros iones presentes en la disolucin, dando lugar a
la carga neta de la molcula. A la concentracin de iones hidrgeno, o al pH,
para el cual la concentracin del ion hbrido de una protena es mxima y el
movimiento neto de las molculas de soluto en un campo elctrico es
prcticamente nulo, se le denomina punto isoelctrico. Los aminocidos
pueden existir como sal interna, llamada zwitterin. Esto ocurre porque el
protn del grupo carboxilo es abstrado por el grupo amino NH 2 que est en
posicin alfa y quedando este como grupo amonio NH3.
Ejemplo:
pH isoelctrico de la tirosina.
El pH isoelctrico de la tirosina se calcula de la siguiente forma:
- Se escriben los equilibrios cido base empezando por la forma protonada. El
grupo cido es el primero en perder el protn, despus lo pierde el amino y
por ltimo el alcohol, que es el menos cido de los tres.
- Buscamos la forma neutra, aquella que tiene igual nmero de cargas
positivas y negativas, y nos fijamos en los valores de pKa de los equilibrios
que la forman y la descomponen, pKa1 y pKa2.
- El pI se calcula como media de estos dos pKas.
pI = (2.2 + 9.1)/2 = 5.7Como puede observarse el grupo hidroxilo no afecta
al clculo del pH isoelctrico.
VIII.
BIBLIOGRAFIA
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BIOQUIMICA ILUSTRADA 17da Ed. [Libro]. Consultado
el 11/02/14.
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