You are on page 1of 75

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

RED NACIONAL UNIVERSITARIA

UNIDAD ACADMICA DE SANTA CRUZ

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD

BIOQUMICA Y FARMACIA

NOVENO SEMESTRE

SYLLABUS DE LA ASIGNATURA
ANLISIS CLNICO

Elaborado por: M.Sc. Vivian Antezana Rodriguez


Gestin Acadmica I/2013

UDABOL
UNIVERSIDAD DE AQUINO BOLIVIA
Acreditada como PLENA mediante R.M. 288/01

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

VISIN DE LA UNIVERSIDAD
Ser la Universidad lder en calidad educativa.
MISIN DE LA UNIVERSIDAD
Desarrollar la Educacin Superior Universitaria con calidad y
Competitividad al servicio de la sociedad.
Estimado(a) estudiante:
El Syllabus que ponemos en tus manos es el fruto del trabajo intelectual de tus docentes,
quienes han puesto sus mejores empeos en la planificacin de los procesos de enseanza
para brindarte una educacin de la ms alta calidad. Este documento te servir de gua para que
organices mejor tus procesos de aprendizaje y los hagas mucho ms productivos.
Esperamos que sepas apreciarlo y cuidarlo.

Fecha: marzo de 2013


Aprobado por:

SELLO Y FIRMA
JEFATURA DE CARRERA

SYLLABUS
Asignatura:
Cdigo:
Requisito:
Carga Horaria:
Horas Tericas:
Horas Prcticas
Crditos:

ANLISIS CLNICO
LBF 921
BCL 621

240
80
160
28

I. OBJETIVOS GENERALES DE LA ASIGNATURA.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Proporcionar al estudiante las tcnicas y procedimientos necesarios para la atencin de


laboratorio clnico, en el rea de orina y sistema renal.

Identificar e interpretar de los resultados inherentes al anlisis.

Describir con exactitud los principios fundamentales del trabajo de laboratorio, tomando en
cuenta los principios de bioseguridad.

Determinar procedimientos esenciales para casos especiales, dentro de la atencin al paciente.

II. PROGRAMA ANALTICO DE LA ASIGNATURA.


UNIDAD I. ANLISIS CLNICO
TEMA 1. ANLISIS CLNICO. GENERALIDADES
1.1. Las relaciones entre el mdico y el laboratorio
1.2. Solicitud de exmenes de laboratorio
1.3. Concepto de valores normales o de referencia
1.4. Qu espera el paciente con respecto a las pruebas de laboratorio?
1.5. Qu espera el mdico del laboratorio?
1.6. Qu espera el laboratorio del mdico?
1.7. Etapas de intervencin
1.8. Fase Pre-analtica
1.8.1. Factores que intervienen en la fase Pre-analtica
1.8.2. Factores modificables
1.8.3. Factores relacionados con el personal de salud
1.8.4. La solicitud de anlisis
1.9. Fase Analtica
1.10. Fase Post-analtica
1.11. Conceptos bsicos sobre control de calidad
1.11.1. Sensibilidad
1.11.2. Especificidad
1.11.3. Valor predictivo de un resultado positivo
1.11.4. Eficiencia de una prueba
1.12. Programa de garanta de calidad
1.12.1. Control de las muestras
1.12.2. Control de los equipos
1.12.3. Control de los reactivos
1.12.4. Control de las instalaciones
1.12.5. Control de la calidad del agua
1.12.6. Control del proceso
1.13. Recomendaciones para la seleccin de un mtodo
1.14. Realizar el control de calidad
1.14.1. Desviacin estndar
1.14.2. Coeficiente de variacin (CV %)
1.14.3. Linealidad
1.14.4. Grficas
1.14.5. Interpretacin

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

UNIDAD II. ANLISIS DE ORINA


TEMA 2. EXAMEN DE ORINA
2.1. Generalidades - concepto
2.2. Aparato urinario
2.3. Fisiologa
2.4. Causas de enfermedad Glomerular y Tubular
2.5. Formacin de la orina en riones
2.6. Aspectos organolpticas de la orina
2.7. Recoleccin de la muestra y conservacin
2.8. Utilidad de las pruebas de orina. Pruebas de laboratorio importantes
2.8.1. Examen completo de orina
2.8.2. Examen parcial de orina
TEMA 3. EXAMEN FSICO
3.1. Alteraciones referidas a las caractersticas fsicas
3.2. Pruebas fsicas: Alteraciones patolgicas
3.3. Color
3.3.1. Cambios en el color de la orina debido a los frmacos ms comunes
3.4. Aspecto (claridad carcter)
3.4.1. Quiluria
3.4.2. Lipiduria
3.5. Olor
3.6. Volumen
3.6.1. Aumento del volumen de orina
3.6.1.1. Regulacin hormonal de la homeostasis del volumen defectiva
3.6.1.2. Absorcin renal defectiva de sales/agua
3.6.1.3. Diuresis osmtica
3.6.2. Disminucin del volumen de orina
3.6.2.1. Prerrenal, Posrenal
3.6.2.2. Enfermedad renal parenquimatosa
3.7. Peso especfico y osmolalidad
3.7.1. Peso especfico
3.7.1.1. Tiras reactivas
3.7.1.2. Refractmetro
3.7.1.3. Urinmetro
3.7.1.4. Mtodo de cada de gota
3.7.2. Osmolalidad
3.7.2.1. Mtodos
TEMA 4. ANLISIS QUMICO
4.1. Recomendaciones para las tiras reactivas
4.2. pH
4.2.1. Valores de referencia
4.2.2. Significacin clnica de los hallazgos en orina
4.2.3. Alteraciones patolgicas ms frecuentes

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

4.2.4. Caractersticas de orina cida


4.2.5. Caractersticas de orina alcalina
4.2.6. Mtodos
4.2.6.1. Tiras reactivas
4.2.6.2. Peachmetro
4.2.6.3. Acidez titulable de la orina
4.2.7. Interpretacin
4.3. Caractersticas, causas y significacin clnica. Tcnicas de examen
4.4. Proteinuria por produccin excesiva
4.4.1.Cuantificacin de la proteinuria
4.4.1.1. Proteinuria severa (>4g/da)
4.4.1.2. Proteinuria moderada (1,0 g/da a 4,0 g/da)
4.4.1.3. Proteinuria mnima (<1,0 g/da)
4.4.1.4. Categoras cualitativas de la proteinuria
4.4.1.5. Proteinuria de Bence Jones
4.5. Microalbuminuria
4.5.1.Tiras reactivas
4.5.2. Mtodo del cido sulfosaliclico. Cualitativo
4.5.3. Determinacin cuantitativa de protenas y mtodos confirmatorios
4.5.4. Microalbuminuria. Mtodos de determinacin
4.5.5. Mtodos de determinacin de proteinuria Bence Jones
4.6. Glucosa y otros azcares en orina. Glucosuria
4.6.1. Otras causas de glucosuria
4.6.2. Otros azcares en orina
4.6.2.1. Tiras reactivas
4.6.2.2. Pruebas de reduccin del cobre
4.6.2.3. Otras pruebas para azcares
4.7. Cetonas en orina
4.7.1. Cetonuria diabtica
4.7.2. Cetonuria no diabtico
4.7.3. Acidosis lctica
4.7.3.1. Tiras reactivas
4.7.3.2. Tabletas de nitroprusiato
4.7.4. Otras pruebas para cetonas
4.8. Sangre en la orina, hemoglobina, hemosiderina y mioglobina, causas
4.8.1. Hematuria
4.8.2. Hemoglobinuria
4.8.3. Hemosiderina en orina
4.8.4. Mioglobinuria
4.8.5. Tiras reactivas para compuestos hemo (hemoglobina y mioglobina)
4.8.6. Otras pruebas para hemoglobina y mioglobina
4.8.7. Pruebas cuantitativas para mioglobina
4.8.8. Deteccin de hemosiderina en orina
4.9. Bilirrubina en orina
4.9.1. Tiras reactivas
4.9.2. Pruebas de confirmacin para bilirrubina
4.10. Urobilingeno en orina
4.10.1. Tiras reactivas
4.10.2. Otras pruebas de urobilingeno y porfobilingeno
4.10.2.1. Prueba de Ehrlich en tubo

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

4.10.2.2. Prueba de diferenciacin de Watson-Schwartz


4.10.2.3. Prueba de cribado de Hoesch para porfobilingeno
4.11. Pruebas indirectas para infecciones del tracto urinario
4.11.1. Nitritos
4.11.1.1. Tiras reactivas
4.11.2. Estearasa leucocitaria
4.11.2.1. Tiras reactivas
TEMA 5. EXMEN MICROSCPICO. TCNICAS DE EXAMEN
5.1. Examen del sedimento microscpico
5.2.1 Elementos presente
5.2.1. Clulas: Eritrocitos, Leucocitos, Eosinofilos
5.2.2. Clulas epiteliales
5.2.3. Cilindros: caractersticas e importancia: Cilindro hialino, granuloso, graso
cerleos, cristalinos, celulares, eritrocitarios, leucocitarios, pigmentados
5.2.4. Cristales
5.2.4.1. Cristales encontrados en orina cida normal
5.2.4.2. Cristales encontrados en orinas alcalina normal
5.2.4.3. Cristales que se encuentran en orina anormal
5.2.5. Estructuras diversas: bacterias, hongos, espermatozoides, filamentos de
moco, cuerpos grasos
5.2.6. Parsitos: Trichomonas Vaginalis
5.2.7. Contaminantes y artefactos
TEMA 6. EXAMENES ESPECIALES DE ORINA
6.1. Examen citopatolgico de la orina
6.2. Anlisis de orina automatizado
6.3. Tcnicas especiales de ensayo y monitorizacin
6.3.1. Clculos urinarios
6.3.2. Hipercalciuria y piedras de calcio
6.3.3. Hiperoxaluria
6.3.4. Hiperuricuria
6.3.5. Piedras de cistina
6.3.6. Clculos raros
6.4. Pruebas de laboratorio para investigar la formacin de piedras
6.5. Examen radiolgico
6.6. Bsqueda en la orina de enfermedades metablicas hereditarias
6.7. Recuento de Addis
6.8. Prueba de depuracin de creatinina
UNIDAD III. CITOMETRA HEMTICA
TEMA 7. HEMOGRAMA
7.1. Toma de muestra
7.2. Hematocrito (Hto)
7.3. Concentracin de hemoglobina (Hb)
7.4. Velocidad de sedimentacin globular (VSG)

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

7.5. Volumen corpuscular medio (VCM)


7.6. Hemoglobina corpuscular media (HbCM)
7.7. Concentracin de hemoglobina corpuscular media (CHbM)
7.8. Formula leucocitaria
7.9. Recuento de eritrocitos
7.10. Recuento de leucocitos
7.11. Recuento de plaquetas
TEMA 8. PRUEBAS DE COAGULACIN
8.1. Tiempo de coagulacin
8.2. Tiempo de sangra
8.3. Tiempo de protrombina+IRN (TP)
8.4. Tiempo de tromboplastina parcial activada (APPT)
8.5. Fibringeno
8.6. Retraccin del coagulo
UNIDAD IV. QUMICA SANGUNEA
TEMA 9. METABOLITOS
9.1. Glucosa sangunea
9.1.1 Importancia
9.1.2. Variaciones de la glucosa
9.2. Curva de tolerancia de la glucosa
9.3. Glicemia posprandial
9.4. Fructosamina
9.5. Hemoglobina glicosilada
TEMA 10. PRUEBAS FUNCIONALES RENALES
10.1. Urea
10.1.1 Importancia
10.1.2. Variaciones
10.1.3. Pruebas relacionadas a su alteracin
10.2. Creatinina
10.2.1 Importancia
10.2.2. Variaciones
10.2.3. Pruebas relacionadas a su alteracin
10.3. Acido rico
10.3.1. Importancia
10.3.2. Variaciones
10.3.3. Pruebas relacionadas a su alteracin
TEMA 11. PRUEBAS FUNCIONALES RELACIONADAS AL PERFIL LIPIDICO
11.1. Colesterol
11.2.1 Importancia
11.2.2. Variaciones
11.2. Lpidos totales

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

11.1.1 Importancia
11.3. Fracciones de colesterol
11.3.1. HDL
11.3.2. LDL
11.4. Triglicridos
11.2.1 Importancia
11.2.2. Variaciones
TEMA 12. ELECTROLITOS
12.1. Composicin de los lquidos corporales
12.2. Sodio
12.3. Potasio
12.4. Calcio
12.5. Cloruros
12.6. Magnesio
12.7. Fsforo
TEMA 13. PROTENAS
13.1. Importancia y clasificacin
13.2. Variaciones de las protenas
13.2.1. Disproteinemias
13.3. Electroforesis de protenas
13.4. Pruebas relacionadas a su alteracin
13.5. Determinacin de Hierro
13.6. Mtodo e interpretacin
TEMA 14. ENZIMOLOGA CLNICA
14.1. Medida de la actividad Enzimtica
14.2. Mtodos cinticos
14.3. Mtodos de punto final
14.4. Mtodos de puntos mltiples
14.5. Origen y libracin de las enzimas
14.6. Metodologa analtica
14.7. Tcnicas colorimtricas y cinticas
TEMA 15. PRUEBAS FUNCIONALES HEPATICAS
15.1. Generalidades
15.2. Test hepatobiliares
15.2.1. Transaminasas
15.2.1.1. Predominio de ALT
15.2.1.2. Predominio de AST
15.2.2.3. Elevaciones de transaminasas
15.2.2. Fosfatasa alcalina
15.2.3. Gammaglutamiltranspeptidasa
15.2.4. Bilirrubina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

15.2.4.1 Elevacin de bilirrubina conjugada


15.2.4.2. Hiperbilirrubinemia
15.3. Test de funcin heptica
15.3.1. Albmina
15.3.2. Tiempo de protrombina
15.3.3. Marcadores Virales
15.3.3.1. Hepatitis A
15.3.3.2. Hepatitis B
15.3.3.3. Hepatitis C
15.3.3.4. Hepatitis D
15.4. Patologas relacionadas al funcionamiento heptico
15.4.1. Hemocromatosis
15.4.2 Cirrosis biliar
15.4.3. Hepatocarcinoma
TEMA 16. PERFIL CARDIACO
16.1. Infarto agudo de miocardio IAM
16.1.1. Cuadro clnico
16.2. Marcadores bioqumicos cardacos
16.3. Marcadores de dao miocrdico
16.4. Mioglobina
16.5. Creatina Kinasa
16.6. CK-MB
16.7. Troponinas
16.8. Lactato Deshidrogenada LDH
TEMA 17. PRUEBAS FUNCIONALES PANCREATICAS
17.1. Generalidades
17.1.1.Funcin del pncreas
17.1.2. Enzimas pancreticas
17.1.2.1. Amilasa
17.1.2.2. Lipasas
17.1.2.3. Insulina
17.2. Amilasa
17.2.1. Variaciones
17.3. Lipasa
17.3.1. Variaciones
TEMA 18. DETERMINACIN DE GASES SANGUINEOS
18.1. Importancia
18.2. Toma de muestra
18.3. Valores normales
18.4. Regulacin de las bases sanguneas
18.5. Desequilibrios cido-base
18.6. Acidosis metablica y respiratoria
18.7. Alcalosis metablica y respiratoria

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

10

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

TEMA 19. LQUIDOS DE PUNCIN


19.1. Generalidades
19.2. Lquido cefalorraqudeo
19.2.1. Recoleccin de muestra
19.2.2. Aspecto
19.2.3. Recuento celular
19.2.4. Caractersticas normales del LCR
19.2.5. Interpretacin clnica del aumento del nmero de clulas en el LCR
19.2.6. Interpretacin clnica del incremento de las protenas del LCR
19.2.7. Determinaciones bioqumicas en LCR
19.2.8. Marcadores tumorales
19.2.9. Pruebas inmunolgicas
19.2.10. Estudio microbiolgico: Examen microscpico, cultivo
19.3. Lquido sinovial
19.3.1. Recoleccin de muestra
19.3.2. Aspecto
19.3.3. Determinaciones bioqumicas
19.3.4. Estudio microbiolgico
19.4. Liquido peritoneal
19.4.1. Recoleccin de muestra
19.4.2. Aspecto
19.4.3. Determinaciones bioqumicas
19.4.4. Estudio microbiolgico
19.5. Liquido pleural
19.5.1. Recoleccin de muestra
19.5.2. Trasudados
19.5.3. Exudados
19.5.4. Examen macroscpico
19.5.5. Examen microscpico
19.6. Liquido pericrdico
19.6.1. Recoleccin de muestra
19.6.2. Examen macroscpico
19.4.3. Determinaciones bioqumicas
19.4.4. Examen microbiolgico
19.7. Lquido seminal
19.7.1. Espermograma
UNIDAD V: HORMONAS
TEMA 20. GENERALIDADES
20.1. Introduccin
20.2. Generalidades
20.3. Almacenamiento y secrecin de hormonas
20.3.1. Control feedback negativo
20.4. Tiroides:
20.4.1. T3, T4 y TSH
20.5. Hormona de crecimiento
20.5.1. Generalidades

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

11

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

20.5.2. Funciones fisiolgicas


20.5.3. Efectos metablicos
20.5.4. Interpretacin de la prueba
20.5.5. Falsos resultados
20.6. Hormonas sexuales femeninas y masculinas
20.6.1. Estradiol
20.6.2. Testosterona
20.6.3. Gonadotropina corinica humana
20.6.4. Hormonas de la fertilidad
III. ACTIVIDADES A REALIZAR DIRECTAMENTE EN LA COMUNIDAD.
i.

Tipo de asignatura
Asignatura de Especialidad

ii.

Resumen de los resultados del diagnstico realizado para la deteccin de los


problemas a resolver en la comunidad.
La deteccin de valores elevados de urea y creatinina en suero de pacientes diabticos, es el
estigma principal que evidencia una disfuncin renal severa. Al ser estos dos productos
bioqumicos impropios del torrente sanguneo, su tolerancia en el mismo es de una mnima
cantidad la cual ha sido catalogada como valor normal. El hallar valores elevados en el suero
de un paciente diabtico, sera de gran ayuda al mdico para encaminarlo hacia el diagnostico
precoz de IR, promoviendo cierto nivel de prevencin y alerta que podran influir en una
mejora del estilo de vida del paciente. La presencia de urea o de creatinina elevada en suero
ocurre solamente cuando el rin ha perdido ms de 50% de su capacidad funcional.
(abcdelasalud.com, 2010)
La Insuficiencia Renal (IR) es una enfermedad crnica que constituye un verdadero agravante
del estado de salud del ya convaleciente paciente diabtico de nuestro pas. Por una parte La
Diabetes es una enfermedad endcrina no transmisible que causa niveles altos de glucosa
(azcar) en la sangre. Y que ha adquirido importancia por su morbilidad y mortalidad, al igual
que por los efectos incapacitantes que afectan la calidad de vida de quienes la padecen.

iii.
Nombre del proyecto al que tributa la asignatura.
Determinacin de valores de rea y creatinina, como diagnstico de insuficiencia renal en
pacientes diabticos que acuden al laboratorio de Anlisis Clnico de la UDABOL, en el periodo
de mayo a junio del 2013
iv.
Contribucin de la asignatura al proyecto.
De acuerdo al contenido programtico de la carrera y la vinculacin de la asignatura con todas
las reas, la relacin entre estas dos determinaciones de anlisis permitir al estudiante hacer
una evaluacin y anlisis del estudio a realizar poniendo en prctica sus conocimientos
acumulados en las diferentes asignaturas y los adquiridos en la materia de anlisis clnico.

v.

Actividades a realizar durante el semestre para la implementacin del proyecto.

Trabajo a realizar por los

Localidad,

U N I V E R S I D A D

DE

Incidencia social

A Q U I N O

12

DE

B O L I V I A

Fecha.

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

aula o
laboratorio
Aula

estudiantes
Organizacin de
actividades del proyecto

Socializacin de los alcances del


proyecto con los estudiantes.

08 al 13 de
abril

Estudiantes preparados en la etapa


pre-analtica, analtica y postanaltica de la determinacin de
glucosa, urea y creatinina en
pacientes diabticos
Socializacin de los resultados
obtenidos y de la importancia de la
determinacin de estos anlisis y
contar con material de orientacin
en salud.

02 de mayo
al 29 de
junio

En
diferentes
centros de
salud de
Santa Cruz

Concienciacin sobre la necesidad


de conocer medidas que ayuden en
la mejor calidad de vida en
pacientes diabeticosl.

15 al 19 de
julio

Aula

Estudiantes mejor preparados en la


realizacin y presentacin de
informes.

15 al 19 de
julio

Toma de muestras,
procesamiento y
obtencin de los
resultados

Laboratorio
de la
universidad

Anlisis de los resultados


obtenidos y
Elaboracin de material
educativo: Determinacin
de valores de rea y
creatinina, como
diagnstico de
insuficiencia renal en
pacientes diabticos
Realizacin de una
Campaa de educacin
en salud a cerca de la
Determinacin de valores
de rea y creatinina,
como diagnstico de
insuficiencia renal en
pacientes diabticos
Elaboracin del trabajo
final con los datos
obtenidos

Aula

24 al 29 de
junio

IV. EVALUACIN DE LA ASIGNATURA.

PROCESUAL O FORMATIVA.
Se evaluarn como actividades procesuales: la participacin en clases prcticas y tericas,
exposiciones, repasos cortos, trabajos grupales, interpretacin de anlisis, pruebas funcionales
y cuadro biolgico de patologas, adems de los trabajos de brigada realizados en las reas
seleccionadas. Independientemente de la cantidad de actividades realizada por cada
estudiante, se tomarn como evaluacin procesual calificndola entre 0 y 50 puntos,
equivaliendo al 50% de la nota de la asignatura.

ACTIVIDAD
EVALUATIVA
Preguntas orales y

PARMETROS
Conocimiento del tema

U N I V E R S I D A D

DE

PONDERACI
N
5 puntos

A Q U I N O

13

DE

FECHA
En todas las clases

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

escritas
Participacin en clases

Participacin en aula

Interpretacin de
anlisis, pruebas
funcionales y cuadro
biolgico
Prcticas de laboratorio

Defensa y
Presentacin

5 puntos

5, 11, 15, 17 semana


evaluacin y defensa de
casos clnicos

Presentacin de GIP`s
Exactitud de los
conocimientos y
Destreza en la prctica

10 puntos

5, 11 y 17 semana se
realizarn evaluaciones
prcticas y escritas de
aplicacin
de
conocimientos de las
pruebas de laboratorio
en
las
diferentes
patologas

Pre - internado

30 puntos
TOTAL

50 puntos

DE RESULTADOS DE LOS PROCESOS DE APRENDIZAJE O SUMATIVA (examen


parcial o final)
Se realizarn 2 evaluaciones parciales con contenido terico y prctico sobre 50 puntos cada
una. El examen final consistir en un examen escrito con un valor del 30% y un examen con
tribunal con un valor de 20% de la nota dando el total del 50 %.
V. BIBLIOGRAFA
BIBLIOGRAFA BSICA
Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica
COD 616.075 8 B18 c.4
BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
C. Fernndez y D. Mazziotta. 2005. Gestin de la Calidad en el Laboratorio Clnico. Editorial
Panamericana.
G. Ruiz Reyes. 2005. Fundamentos de Interpretacin Clnica de los Exmenes de
Laboratorio. Editorial Panamericana.
G. Ruiz Reyes. 2010. Fundamentos de Interpretacin Clnica de los Exmenes de
Laboratorio, 2 Edicin, Editorial Panamericana.
Garca-Conde J. y Col. 2003. Hematologa. 1 Edicin. Madrid Espaa.
Graff. Anlisis de orina. Atlas de orina. Editorial Panamericana.
Human. Diagnostica en todo el mundo. Tcnicas de laboratorio.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lluis V. Joan, Lluis A. Joseph. 2001. Manual de Tcnicas de Laboratorio en Hematologa. 2
Edicin. Barcelona Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

14

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Pagana. Guas de pruebas diagnstico y laboratorio. Editorial Elsevier. 2008.


Susan King S. y Marjorie Schaub D. 2008. Anlisis de orina y de los lquidos corporales, 5ta.
Edicin, Editorial mdica Panamericana.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina.
VI. PLAN CALENDARIO
SEMANA

ACTIVIDADES ACADMICAS

OBSERVACIONES

1ra.

Avance de materia

UNIDAD I Tema 1

2da.

Avance de materia

UNIDAD I Tema 1

Preguntas orales y escritas

3ra.

Avance de materia

UNIDAD II Tema 2

Preguntas orales y escritas

4ta.

Avance de materia

UNIDAD II Tema 3

5ta.

Avance de materia

Actividades de Brigadas

6ta.

Avance de materia

UNIDAD II Tema 4

Preguntas orales y escritas


Preguntas orales y escritas, GIPs
1ra. incursin
Primera Evaluacin

7ma.

Avance de materia

UNIDAD II Tema 4 y 5

Primera Evaluacin

8va.

Avance de materia

Actividades de Brigadas

Preguntas orales y escritas, 2da. Incursin

9na.

Avance de materia

UNIDAD II Tema 6

Preguntas orales y escritas

10ma. Avance de materia

UNIDAD III Tema 7 y 8

11va. Avance de materia

Actividades de Brigadas

12va. Avance de materia

UNIDAD IV Tema 9, 10 y 11

Preguntas orales y escritas


Preguntas orales y escritas,, GIP`s
3ra. incursin
Segunda Evaluacin

13va. Avance de materia

UNIDAD IV Tema 12, 13 y 14

14va. Avance de materia

UNIDAD IV Tema 15 y 16

15va. Avance de materia

UNIDAD IV Tema 17 y 18

Preguntas orales y escritas GIP`s

16va. Avance de materia

Actividades de Brigadas

17va. Avance de materia

UNIDAD IV y V Tema 19 y 20

4ta. incursin
Preguntas orales y escritas,
GIP`s

Avance de materia
Evaluacin final
Avance de materia
Evaluacin final

18va.
19va.
20va.

Segunda Evaluacin
Preguntas orales y escritas,

Preguntas orales y escritas


Presentacin del proyecto
Informe final
Presentacin de notas a Direccin Acadmica

Examen de segunda instancia

VII. WORK PAPERS y GIP

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

15

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 1
UNIDAD I: Tema 2
TTULO: Orinas
FECHA DE ENTREGA: 4ta semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 5ta semana de clases
La orina se forma a partir del ultrafiltrado del plasma que tiene lugar en el glomrulo. Este ultrafiltrado
se modifica a lo largo de la nefrona mediante procesos de reabsorcin de agua solutos y secrecin de
electrolitos. La orina as generada se expele a travs de las vas urinarias contribuyendo a la
eliminacin de productos del metabolismo nitrogenado y al equilibrio del medio interno, por tanto el
examen de orina no solo diagnostica enfermedades del aparato urogenital.
CUESTIONARIO DEL WORK PAPER

1. Explique la importancia de un anlisis general de orina


2. Cmo se forma la orina?
3. Describa:
importancia de realizar el examen fsico de la orina
importancia de realizar el examen microscpico de la orina
4. Describa brevemente las pruebas funcionales renales
5. Explique la importancia diagnstica de la Depuracin de Creatinina
6. En la Depuracin de la Creatinina qu se debe hacer si la diuresis es de 2 horas?
7. Calcular la Depuracin de Creatinina, con la siguiente informacin:
Volumen de orina en 24 hrs: 950 ml; Creatinina en suero: 2,2 mg/dl; Creatinina en orina: 195 mg/dl
8. Qu importancia tiene el examen de orina en el diagnstico de insuficiencia renal?
9. Describa como se realiza el Control de Calidad para el examen general de orina
Interno (CCI)
Externo (CCE)
10. Paciente ambulatorio de sexo femenino con sntomas de infeccin urinaria, trae consigo una
muestra de orina. Los resultados del anlisis habitual realizado en esta muestra son:
Color: Amarillo
Protena: Negativo
Microscpico:
Aspecto: Turbio
Glucosa: Negativo
Clulas: Epiteliales escamosas moderada cantidad
Densidad: 1.015
Cetonas: Negativo
Eritrocitos: 1-3 /campo
pH: 9
Sangre: Escasa cantidad Leucocitos: 8-10 /campo
Bilirrubina: Negativo
Gran cantidad de bacterias
Urobilingeno: Normal
Nitrito: Negativo
Leucocitos: ++
a) Qu discrepancias existen entre los resultados de las pruebas bioqumicas y los del examen
microscpico?
b) Mencione una razn para las diferencias

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

16

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

c) Identifique un resultado qumico en el anlisis de orina que confirme la razn de las


discrepancias
d) Qu debe realizar el laboratorio para obtener resultados exactos para esta paciente?
11. Embarazada de 25 aos de edad llega al consultorio externo con sntomas de dolor lumbar,
polaquiuria y disuria. Su embarazo ha sido normal hasta este momento. Se le da un recipiente
estril y se le pide que recolecte una muestra limpia del chorro medio. Los resultados del anlisis
de orina de rutina son los siguientes:
Color: Amarillo
Protena: Trazas
Microscpico:
Aspecto: Turbio
Glucosa: Negativo
Clulas: Epiteliales escamosas moderada cantidad
Densidad: 1.015
Cetonas: Negativo
Eritrocitos: 6-10 /campo
pH: 8
Sangre: Escasa cantidad Leucocitos: 40-50 /campo
Bilirrubina: Negativo
Gran cantidad de bacterias
Urobilingeno: Normal
Nitrito: Positivo
Leucocitos: ++
a) Cul es el diagnostico mas probable de esta paciente?
b) Cul es la correlacin entre el color y la densidad?
c) Cul es el significado de las pruebas de sangre y de protenas?
d) Qu otra poblacin presenta un riego alto de desarrollar esta enfermedad?
e) Qu trastorno puede desarrollarse si no se trata esta enfermedad?
12. Buscar la interpretacin de anlisis, pruebas funcionales y cuadro biolgico de:
Sndrome nefrtico (nefritis)
Nefritis aguda (glomerulonefritis)
Rin poliqustico
Tuberculosis renal
Cncer renal
Pielonefritis
Litiasis renal
Rechazo del trasplante renal

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

17

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 2
UNIDAD IV: Tema 9 y 11
TTULO: Diabetes y Perfil lipdico
FECHA DE ENTREGA: 10ma semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 11va semana de clases
La glucosa es un azcar simple formado por seis tomos de carbono. Su metabolismo oxidativo
proporciona la mayor parte de la energa utilizada por el organismo, por lo que existe distintos
mecanismos de control homeostticos para mantener unas concentraciones constantes que oscilan
entre 70 y 110 mg/dl en ayunas.
Para su medicin antiguamente se utilizaban sistemas de deteccin de glucosa en sangre total que
hoy en da han sido sustituidos por mtodos enzimticos ms exactos que realizan la determinacin
de glucosa en suero.
El uso de glucmetros porttiles es un avance en el autocontrol de los valores de glucosa en
diabticos, pero existen discrepancias con los valores de laboratorio por la diferencia en el tipo de
muestra.
Un perfil lipdico es un grupo de pruebas solicitadas generalmente de forma conjunta para determinar
el riesgo de enfermedad cardiaca coronaria. Las pruebas que conforman este perfil han mostrado ser
buenos indicadores de la posibilidad de presentar un ataque cardiaco o apopleja provocados por
obstruccin de los vasos sanguneos (endurecimiento de las arterias). El perfil lipdico incluye el
colesterol total, el HDL-colesterol (denominado a menudo colesterol bueno), el LDL-colesterol
(denominado a menudo colesterol malo) y los triglicridos. Algunas veces, el informe incluir valores
adicionales calculados como la relacin HDL/colesterol o clculos basados en los resultados del perfil
lipdico, edad, sexo y otros factores de riesgo. El perfil lipdico se utiliza como gua para decidir como
debe ser tratada una persona en situacin de riesgo. Sus resultados son considerados conjuntamente
con otros factores de riesgo conocidos de la enfermedad cardiaca para proporcionar un plan de
tratamiento y seguimiento.
CUESTIONARIO DEL WORK PAPER
1. Cul la importancia de la determinacin de la glucosa en sangre?
2. Describa brevemente a las hormonas que regulan la glucosa en sangre?
3. Qu pruebas de laboratorio ayudan a diagnosticar y controlar la diabetes, explique cada una de
ellas?
4. Describa en un cuadro los tipos de diabetes, sus diferencias y su importancia
5. Mencione la clasificacin en perodos de la diabetes, segn la OMS
6. Qu es el umbral renal? y mencione su valor de referencia
7. Qu es la hemoglobina glicosilada? interprete un resultado
8. Qu es la fructosamina y cul es la importancia para su determinacin?
9. Interprete los valores de referencia de la glicemia postprandial

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

18

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

10. Qu es el test de OSullivan?


11. Buscar la interpretacin de anlisis, pruebas funcionales y cuadro biolgico de:
- Diabetes inspida
- Pancreatitis aguda
- Pancreatitis crnica
- Carcinoma de pncreas
12. Buscar la interpretacin de anlisis, pruebas funcionales y cuadro biolgico de:
Aterosclerosis (arteriosclerosis)
Dislipidemia
Colelitiasis

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

19

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 3
UNIDAD IV: Tema 15
TTULO: Funcin heptica
FECHA DE ENTREGA: 14va semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 15va semana de clases
Las pruebas de funcin heptica son una serie de test que pueden alterarse en las distintas
enfermedades hepatobiliares. Algunas de ellas no son especficas y pueden alterarse tambin en
otras situaciones patolgicas distintas de las enfermedades hepticas; adems, debe tenerse
enguanta que los rangos de normalidad de estas pruebas corresponden a los valores que tienen el
95% de las personas sanas.
CUESTIONARIO DEL WORK PAPER
1.
2.
3.
4.
5.

6.
8.
9.
10.
-

Qu importancia tiene el anlisis de un perfil heptico?


Qu patologas pueden alterar un perfil heptico?
Describa en un cuadro como se transmiten las diferentes hepatitis
En la hepatitis viral Cul es la bilirrubina que aumenta?
Defina
Ictericia
Ictericia neonatal
Kernicterus
Mencione el diagnstico diferencial de las ictericias
7. Explique por qu a la prueba del Tiempo de Protrombina (TP), se la considera dentro de las
pruebas de funcin heptica?
Describa el metabolismo de las bilirrubinas
Qu tipo de bilirrubina se elimina por la orina?
Buscar la interpretacin de anlisis, pruebas funcionales y cuadro biolgico de:
Hepatitis alcohlica aguda
Hepatitis aguda (ictericia parenquimatosa o hepatocelular)
Hepatitis crnica
Hepatitis autoinmune
Enfermedad de Gilbert (hiperbilirrubinemia constitucional)
Ictericia obstructiva
Cirrosis heptica
Hemocromatosis (cirrosis pigmentaria)
Enfermedad de Wilson o degeneracin hepatocelular
Cirrosis biliar primaria
Cirrosis biliar o colestsica segundaria
Hematoma primario (carcinoma heptico)

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

20

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Cncer heptico secundario (metstasis hepticas)

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


WORK PAPER # 4
UNIDAD V: Tema 20
TTULO: Hormonas
FECHA DE ENTREGA: 16va semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 17va semana de clases
Las funciones del cuerpo estn reguladas por dos sistemas principales de control: 1) el nervioso y 2)
hormonal, o sistema endocrino. En general, el sistema hormonal se realcita principalmente con la
diversas funciones metablicas de la economa y controla la intensidad de funciones qumicas en las
clulas. Rigen el transporte de substancias a travs de las membranas celulares y otros aspectos del
metabolismo de las clulas, como crecimiento y secrecin. Algunos efectos hormonales se producen
en segundo, otros requieren varios das para iniciarse y luego duran semanas, meses incluso aos
Las hormonas presentan ciertas peculiaridades en si secrecin, transporte, mecanismos de accin,
metabolismo, vida media y eliminacin, haciendo necesario tomar medias al momento de hacer un
estudio hormonal, para alcanzar as el grado mximo de fiabilidad diagnostica.
CUESTIONARIO DEL WORK PAPER
1.
2.
3.
4.

Realiza un cuadro de clasificacin de las hormonas


Qu hormonas comprende un perfil tiroideo?
Cules son y qu importancia tienen las hormonas de fertilidad?
Buscar la interpretacin de anlisis, pruebas funcionales y cuadro biolgico de:
Sndrome de Schwartz Bartter o SIADH (Hiperfuncin o secrecin inadecuada antidiurtica)
Acromegalia
Hipertiroidismo (Enfermedad de Graves Basedow)
Mixedema (hipotiroidismo)
Hipotiroidismo congnito
Cncer de tiroides
Hipoparatoroidismo (Tetnia, Insuficiencia paratoroidea)
Sndrome climatrico (Menopausia)

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

21

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIP # 1
UNIDAD I: Tema 1
TTULO: Bioseguridad en laboratorio
FECHA DE ENTREGA: 1ra semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 2da semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
En el sentido etimolgico Bioseguridad significa seguridad de vida lo cual evoca el concepto de
proteccin de vida y que en gran parte puede lograrse evitando accidentes, deber estar diseado en
el marco de una estrategia de disminucin de riesgos. El inadecuado manejo de los desechos
hospitalarios puede causar diversos tipos de daos entre los que estn: heridas pinchazos,
sensibilizacin a medicamentos, infecciones, intoxicaciones, alergias, cncer, etc.
II. PRCTICA
OBJETIVO
-

Aplicar las normas bsicas sobre las medidas de bioseguridad a cumplir en el interior del
laboratorio.
Promover por parte de los estudiantes las medidas de bioseguridad en los laboratorios de la
carrera.
Concienciar a los estudiantes sobre la importancia de las medidas de bioseguridad.
MATERIALES.
-

Video sobre bioseguridad de los diferentes niveles


Video sobre lavado de manos
Video de aislamiento hospitalario
Multimedia
Pizarra
Marcadores acrlicos de colores

PROCEDIMIENTO.
-

Ver ambos videos en el lapso de durante 40 minutos


Realizar mesa redonda
Presentacin sobre los puntos ms importantes de la bioseguridad en el laboratorio

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

22

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

RESULTADOS.
CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
1. Indique la clasificacin de los agentes biolgicos por grupo de riesgo mencionando
ejemplos
2. Cules son los niveles de bioseguridad para los laboratorios?
3. Describa brevemente la clasificacin de las Cabinas de Seguridad Biolgica CSB segn el
tipo de nivel y el grado de proteccin
4. Describa la cadena de infeccin
5. Mencione los factores que intervienen en un accidente ocupacional
6. Cul es la importancia del lavado de manos?
7. Mencione razones por las que el personal de salud no se lava las manos
8. Mencione las precauciones estndar en el laboratorio
9. Calcular la cantidad de Hipoclorito de sodio y agua necesarios para preparar una solucin
al 0,1 % de Hipoclorito de sodio de volumen final de 500 ml
10. Qu cantidad de Hipoclorito de sodio al 5 % se necesita para preparar 3 Lt de una
solucin al 1 %
11. Esquematice el programa de inmunizacin del personal de salud
12. Describa el procedimiento en caso de ocurrir un derrame en el laboratorio
13. Del reglamento para la aplicacin de la Norma de Bioseguridad para establecimientos de Salud
NB 63001-63006 (Lineamientos de gestin, Hospitales, Laboratorios, Consultorios Odontolgicos
y Veterinarios), describa los Objetivos y resumen de la 63001 a la 63004
14. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE del lavado de manos
BIBLIOGRAFA.
-

Norma de Bioseguridad para establecimientos de Salud NB 63001-63006


Organizacin Mundial de la Salud (OMS). Manual de Bioseguridad. 2005.
Reglamento municipal. Reglamento de residuos slidos de establecimientos de salud.
2005.
Swisscontact. Manual para el manejo de residuos slidos en establecimientos de
salud. 2003.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

23

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIP # 2
UNIDAD II: Tema 2
TTULO: Orinas
FECHA DE ENTREGA: 2da semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 3ra semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
La orina se forma a partir del ultrafiltrado del plasma que tiene lugar en el glomrulo. Este ultrafiltrado
se modifica a lo largo de la neurona mediante procesos de reabsorcin del agua, solutos y secrecin
de electrolitos. La orina as generada se expele a travs de las vas urinarias, contribuyendo a la
eliminacin de productos del metabolismo nitrogenado y al equilibrio del medio interno. Por tanto
cualquier variacin en su estado fsico qumico o microscpico puede deberse a alguna alteracin,
siendo este anlisis de gran importancia al momento del diagnstico del paciente. Se deben recibir
los envases de orinas siempre limpios, lo ideal es que el frasco para la muestra sea entregado por el
laboratorio el que deber cumplir con todas las condiciones de esterilidad
II. PRCTICA
OBJETIVO
Analizar dos orinas patolgicas y otra normal en base a exmenes qumicos fsico.
-

MATERIALES.
Tubos cnicos
Gradilla para tubos
Marcador para vidrio
Tiras reactivas para orina
PROCEDIMIENTO.
- La muestra deber estar correctamente identificada y codificada de acuerdo a los registros de
laboratorio, no olvidar el tipo de servicio al que pertenece el paciente.
- La muestra debe ser agitada completamente en el frasco antes de iniciar el examen fsico.
- Identificar tubos cnicos de centrfuga y colocar aproximadamente 10 - 12 ml.
- Realizar el examen fsico de la orina, anotar las caractersticas

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

24

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- Para el examen qumico, sumergir rpidamente una tira reactiva, cuidando de no dejarla mucho
tiempo en la orina
- Escurrir la tira en las paredes del tubo, tener cuidado de que toda la tira se impregne con la
muestra
- Realizar la lectura de cada unos de los tacos reactivos, anotando rpidamente uno por uno de lo
observado y comparando con el examen fsico realizado
RESULTADOS.
EXAMEN DE ORINA
Paciente...
Reg
Sexo
Edad..
Medico.............................................................
Fecha.

PRUEBAS DE LABORATORIO

RESULTADOS

EXAMEN FISICO
Volumen
Color
Olor
Aspecto
Densidad
pH

.
.
..
..
..
..

EXAMEN QUMICO
Protenas
Glucosa
Cetonas
Hemoglobina
S. Biliares
Pigmentos Biliares
Urobilingeno
Nitritos

.
.

.
.
.
.

RESULTADOS
CONCLUSIONES
EVALUACIN.
1. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de la toma de muestra para el examen de orina
2. Describa el procedimiento para la recoleccin de muestra de orina para prueba de drogas
3. En cul de las siguientes situaciones el bioqumico del laboratorio solicita una nueva muestra de
orina? Coincidencias y discrepancias con las decisiones:
a) Muestra de color verde-amarillo con resultados negativos para las pruebas de glucosa y
bilirrubina
b) Muestra de color amarillo oscuro que produce gran cantidad de espuma blanca
c) Orina turbia con olor intenso a amoniaco
d) Muestra brumosa con densidad mayor de 1.035, determinada por un refractmetro

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

25

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
- Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
- Graff. Anlisis de orina. Atlas de orina. Editorial Panamericana.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
- Susan King S. y Marjorie Schaub D. 2008. Anlisis de orina y de los lquidos corporales, 5ta.
Edicin, Editorial mdica Panamericana.

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIP # 3
UNIDAD II: Tema 5
TTULO: Orinas microscopia
FECHA DE ENTREGA: 4ta semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 5ta semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
El examen microscpico de la orina junto con el mtodo de anlisis qumico de tiras permite la
deteccin de enfermedades renales y del tracto urinario. Por medio del microscopio se pueden
detectar los elementos celulares y no celulares de la orina que no sufren reacciones qumicas
caractersticas. La microscopia tambin sirve como prueba confirmatoria en algunas circunstancias
(p.ej. eritrocitos, leucocitos y bacterias)
Clasificacin:
Elementos no organizados:
- Orinas cidas: Cristales de cido rico, uratos amorfos, oxalatos de calcio, leucina, tirosina, uratos
de amonio, cristales de sulfas
- Orinas alcalinas: cristales de calcio, fosfatos triples de amonio y magnesio, fosfato de calcio y
fosfatos amorfos
- Orinas Neutras: Cristales de orina cida y alcalina
Elementos organizados:
- Clulas epiteliales: planas redondas, piriformes, etc.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

26

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- Leucocitos, piocitos, eritrocitos, cilindros: hialino, granuloso, creo, leucocitario, eritrocitario,


epitelial, etc.
- Estructuras diversas: Corpsculos de grasa, espermatozoides, fibras vegetales, parsitos
intestinales, almidn, tricomonas
OBJETIVO.
Identificar y analizar orinas patolgicas y normales en base a exmenes qumicos fsicos y
microscpicos
MATERIALES.
-

Tubos cnicos
Gradilla para tubos
Marcador para vidrio
Tiras reactivas para orina
Cubreobjetos
Portaobjetos
Microscopio
Centrfuga
PROCEDIMIENTO.
- La muestra deber estar correctamente identificada y codificada de acuerdo a los registros de
laboratorio, no olvidar el tipo de servicio al que pertenece el paciente.
- La muestra debe ser agitada completamente en el frasco antes de iniciar el examen fsico.
- Identificar tubos cnicos de centrfuga y colocar aproximadamente 10 - 12 ml.
- Realizar el examen fsico de la orina, anotar las caractersticas
- Realizar el examen qumico de la orina, anotar las caractersticas
- Llevar los tubos a centrifugar a 1500 - 2000 rpm por 5 minutos
- Colocar una gota del sedimento de orina sobre el portaobjetos y colocar el cubreobjetos, realizar la
visin lo ms rpido posible para evitar que se seque el sedimento
- Observar el sedimento con el objetivo de 10X inicialmente para buscar cilindros y luego realizar el
recuento de elementos con 40X (En caso de observar partculas de talco agregarles unas gotas de
lugol y estas se manifestaran de azul)
RESULTADOS.

EXAMEN DE ORINA

Paciente...
Reg
Sexo
Edad..
Medico.............................................................
Fecha.

PRUEBAS DE LABORATORIO

RESULTADOS

EXAMEN FISICO
EXAMEN QUMICO

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

27

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

EXAMEN MICROSCOPICO
Clulas redondas
Clulas poligonales
Leucocitos
Eritrocitos
Cilindros: Hialinos
Cilindros: granulosos
Cristales: Uratos amorfos
Cristales: Acido rico
Cristales: Oxalato de Clcio
Cristales: Fosfato Triple
Cristales: Fosfato Amorfo
Otros cristales

....................................................
....................................................
.....................................x campo
.....................................x campo
...................................................
....................................................
....................................................
....................................................
....................................................
....................................................
....................................................
....................................................

OBSERVACIONES
.............................................................................................................................................................
Cristales frecuentes hallados en orinas cidas

cido rico

Sulfato de Calcio

Oxalato de calcio

Cistina

Partculas de urato amorfo

Uratos de sodio

c. hiprico

Leucina

Colesterol

Tirosina

Cristales frecuentes hallados en orinas alcalinas

Fosfato triple

Carbonato de Calcio

U N I V E R S I D A D

Partculas de fosfato amorfo de amonio

Biurato de amonio

DE

A Q U I N O

28
Fosfato de Calcio

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
1. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE del examen de orina
2. Como bioqumico de laboratorio, una de sus tareas es revisar los resultados de la seccin de
anlisis de orina. Determine por qu le preocuparan los siguientes resultados o por qu no le
importaran:
a) La presencia de cristales creos y protena negativa en orina de una nia de 6 meses
b) El aumento del nmero de clulas epiteliales de transicin en una muestra obtenida despus de
una cistoscopia
c) Cristales de tirosina en una muestra con resultado negativo en la prueba de bilirrubina
d) Cristales de cistina en una muestra de un paciente con gota
e) Cristales de colesterol en orina con densidad mayor de 1.040
f) Trichomonas vaginalis en una muestra de orina de un hombre
g) Cristales de uratos amorfos y de carbonato de calcio en una muestra con pH 6
3. Hombre de 40 aos de edad desarrolla graves dolores de espalda y abdominales despus de la
cena. El dolor disminuye durante la noche pero se repite en la maana y visita a su mdico de
familia. Los resultados de un recuento completo de sangre y de la amilasa son normales. Los
resultados de los anlisis de orina son los siguientes:
Color: Amarillo
Protena: Trazas
Microscpico:
Aspecto: Turbio
Glucosa: Negativo
Clulas: Epiteliales escamosas escasa cantidad
Densidad: 1.030
Cetonas: Negativo
Eritrocitos: 15-20 /campo (aparecen crenados)
pH: 5
Sangre: Moderada
Leucocitos: 0-2 /campo
Bilirrubina: Negativo
Urobilingeno: Normal
Nitrito: Positivo
Leucocitos: Negativo
a) Qu trastorno podran representar estos resultados de los anlisis de orina y los sntomas
del paciente?
b) Cules seran las causas de la presencia de eritrocitos crenados?
c) Existe una correlacin entre el color y la densidad de orina y los sntomas del paciente?
d) Sobre la base de la sustancia principal que causa esta enfermedad, Qu tipo de cristales
podran estar presentes?
e) Qu cambios en el estilo de vida se le recomiendan al paciente para evitar futuras
apariciones?
BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

29

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
- Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
- Graff. Anlisis de orina. Atlas de orina. Editorial Panamericana.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
- Susan King S. y Marjorie Schaub D. 2008. Anlisis de orina y de los lquidos corporales, 5ta.
Edicin, Editorial mdica Panamericana.

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 4
UNIDAD III: Tema 7
TTULO: Hemograma manual
FECHA DE ENTREGA: 5ta semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 6ta semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
La interpretacin correcta de la citometra hemtica (medicin de las clulas de la sangre) supone el
anlisis detallado de cada uno de los datos que informa, los cuales pueden dividirse en tres grupos:
datos de la serie roja, de la serie blanca y de la serie tromboctica.
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar hematocrito, hemoglobina, VSG, recuento de glbulos blancos y clculos de ndices
hematimtricos de muestras normales y patolgicas de sangre
MATERIALES.

- Tubos capilares
- Microcentrfuga
- Plastilina
Lector de Microhematocrito
- Pipetas de 5 ml
- Micropipetas de 20 ul
- Espectrofotmetro
- Reactivo de para la determinacin de la Hb (mtodo de la cianometahemoglobina)
- Tubos de ensayo

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

30

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- Gradillas
- Pipetas de Westergren
- Gradillas para pipetas de Westergren
Reloj
Succionador o propipeta
Lquido de Turk
Cmara de Neubauer
Guantes

PROCEDIMIENTO.
Hematocrito
La determinacin del hematocrito debe realizarse por duplicado.
- Homogenizar correctamente el tubo con la muestra, invirtiendo este suavemente mnimo de 8 a 10
veces
- Llenar el capilar por el extremo sin la marca hasta tres cuartas partes de la capacidad del tubo
(aproximadamente 5 cm.), con sangre total
- Limpiar el exceso de sangre de las paredes del tubo capilar y sellar el extremo de el llenado con
plastilina
- Colocar el tubo capilar lleno en los huecos radiales de la centrfuga con el extremo sellado hacia
fuera, lejos del centro
- Asegurar la parte superior de la centrfuga, para evitar que los capilares se quiebren
- Centrifugar durante 5 minutos de 10.000 a 15.000 rpm.
- Terminada la centrifugacin, comprobar que no se haya producido salida de sangre del capilar y
extraerlo de la centrfuga
- Observar en el capilar, las 3 separaciones
- Colocar el tubo con el extremo sellado en la parte inferior del lector de hematocrito
- Hacer coincidir la lnea inicial de la columna de glbulos rojos con el principio del lector (0)
- Medir la longitud de la columna de eritrocitos hasta la lnea de separacin plasma/eritrocitos
- Fijar el nmero de la escala el cual, ser el valor en % de Hematocrito
Hemoglobina
Homogenizar correctamente el tubo con la muestra, invirtiendo este suavemente mnimo de 8 a 10
veces.
- En dos tubos debidamente identificados, como estndar (S) y desconocido (D) colocar:
-

S
2,5 ml
10 ul

Diluyente
Muestra (sangre entera)
Estndar
-

D
2,5 ml
10 ul
-

Mezclar por agitacin suave y esperar 3 minutos para que se produzca la hemlisis total y se
complete la transformacin de toda la hemoglobina en cianometahemoglobina
Leer la absorbancia del D y S a 540 nm o fotocolormetro con filtro verde (520 550), llevando el
aparato a cero con reactivo
Hemoglobina (g/dl) = D x Factor

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

31

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Factor = estndar (g/dl)


S
VSG
-

Homogenizar correctamente el tubo con la muestra, invirtiendo este suavemente mnimo de 8 a 10


veces
- Llenar la pipeta de Westergren mediante una propipeta o cualquier otro sistema de succin mecnica
hasta que la sangre alcance el enrase o marca de 0 mm
- Limpiar el exceso de sangre de las paredes de la pipeta
- Colocar la pipeta en el soporte procurando que quede estrictamente en posicin vertical
- Se debe vigilar algunos factores capaces de modificar la VSG, tales como temperatura, vibraciones o
la incidencia directa a la luz
- La pipeta debe permanecer en dicha posicin durante un tiempo exacto de 60 minutos
- Transcurrido este tiempo, se lee la distancia desde la seal 0 hasta el punto mas alto de la columna
de eritrocitos
- El valor de esta distancia, expresado en milmetros, corresponde al de la VSG durante la primera hora
(mm/hora)
Recuento de glbulos blancos
Realizar una dilucin: 1/20
1. Preparar la dilucin con un volumen final de 1 ml (1000 ul)
2. 950 ul del reactivo de dilucin (liquido de Turk) y 50 ul de sangre anticoagulada
3. Mezclar suavemente hasta la homogenizacin completa, dejando actuar por 5 minutos
Llenado de la Cmara cuentaglobulos
1. La cmara debe estar limpia y seca
2. Colocar el cubreobjeto sobre los prismas laterales
3. Proceder al llenado por la parte superior del retculo con una micropipeta de volumen
regular
4. Se debe evitar los revalses por los surcos laterales y transversales
5. Una vez llena, se debe dejar reposar por lo menos 2 a 3 minutos para que se asienten los
elementos formes
Recuento
1. Utilizando un microscopio, observar con objetivo x40 y bajando ligeramente el
condensador
2. Contar los leucocitos que se depositan sobre 4 cuadrados grandes de las esquinas de cualquiera
de los retculos
3. Cada cuadrado grande incluye un volumen de 1/10 mm3
4. La suma total de los leucocitos contados, el factor de dilucin, y el volumen de cada cuadrado
deber utilizarse para efectuar los clculos
Factor = 10 x 20

= 50

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

32

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

4
10 = volumen de cada cuadrado
20 = Factor de dilucin
4

= Cuadrados grandes contados

ndices hematimtricos
VCM (femtolitros; fl)

MCH (Picogramos; pg) =

MCHC (%)

Hematocrito (HCT)
Conteo de eritrocitos (RBC)

x 10

Hemoglobina (HGB)
Conteo de eritrocitos (RBC)
Hemoglobina (HGB)
Hematocrito (HCT)

x 10

x 100

RESULTADOS.
CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
1. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de Hematocrito y responder lo siguiente:
-Describa los factores naturales o fisiolgicos que determinan la diferencia de los valores de
referencia de un hematocrito
2. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de Hemoglobina y responder lo siguiente:
-Describa las formas y lugares en los que se encuentra la hemoglobina en nuestro organismo
-Por qu se prefiere la valoracin de la hemoglobina en vez del hematocrito en e proceso de
evaluacin de una anemia?
3. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de VSG y responder lo siguiente:
- Explique cules son las limitantes de la valoracin de la VSG?

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

33

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

4. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de Recuento de glbulos blancos


5. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de ndices hematimtricos
BIBLIOGRAFA.
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Garca-Conde J. y Col. 2003. Hematologa. 1 Edicin. Madrid Espaa.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lluis V. Joan, Lluis A. Joseph. 2001. Manual de Tcnicas de Laboratorio en Hematologa. 2
Edicin. Barcelona Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 5
UNIDAD III: Tema 7
TTULO: Formula leucocitaria, recuento de reticulocitos
FECHA DE ENTREGA: 6ta semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 7ma semana de clases
I.

FUNDAMENTACIN TERICA
La interpretacin correcta de la citometra hemtica (medicin de las clulas de la sangre) supone el
anlisis detallado de cada uno de los datos que informa, los cuales pueden dividirse en tres grupos:
datos de la serie roja, de la serie blanca y de la serie tromboctica.
II. PRCTICA
OBJETIVO

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

34

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Realizar el recuento de la formula leucocitaria, reticulocitos, recuento de plaquetas de muestras


normales y patolgicas de sangre
MATERIALES.
Pipetas de 5 ml y 10 ml
Tubos de hemlisis
Gradillas para tubos
Guantes
Reloj o cronmetro
Marcador para vidrio
May Grunwald Giemsa
Micropipetas de 20 ul y 1000 ul
Cmara de Neubauer
Caja petri
Algodn
Papel absorbente
Reactivo de Rees (reactivo de dilucin)
PROCEDIMIENTO.
Formula leucocitaria
Tincin May Grunwald Giemsa
A partir de una extensin de sangre preparada lo ms inmediatamente posible, se procede a realizar
la coloracin
1. Colocar el portaobjetos en una bandeja de tincin, con el frotis o extensin hacia arriba
2. Cubrir la totalidad del portaobjetos con solucin May Grunwald, durante 2 minutos
3. Retirar el colorante y lavar la extensin, cubriendo el portaobjeto con agua destilada 1 minuto,
vaciar todo el lquido
4. Cubrir la totalidad de la extensin con solucin Giemsa diluido, durante 10 minutos
5. Lavar la extensin con abundante agua de grifo
6. Secar la extensin al aire, una vez seca, esta lista para su observacin mediante el microscopio

Tincin Panptico rpido


Solucin n 1: Solucin alcohlica de triarilmetano.
Solucin n 2: Solucin tamponada de xanteno
Solucin n 3: Solucin tamponada de tiamina.
A partir de una extensin de sangre preparada lo ms inmediatamente posible, se procede a realizar
la coloracin
1.
En tres cubetas de Wertheim o similares se disponen los colorantes solucin n1,
n2 y n3
2.
Colocamos los frotis en el cestillos para porta objetos y lo sumergimos en la
cubeta con la solucin n 1 durante 1 segundo. Repetimos la inmersin cuatro veces (en total 5
segundos).
3.
Sumergimos a continuacin otras cinco veces, cada una de un segundo de
duracin, en la cubeta con la solucin n2. Dejamos escurrir.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

35

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

4.

Finalmente, sumergimos otras cinco veces de un segundo cada una en la cubeta


con la solucin n3.
5.
Lavamos con agua destilada y dejamos secar, una vez seca, esta lista para su
observacin mediante el microscopio
Mtodo Visual o Manual
1. Una buena extensin presentar tres reas de diferente grosor y con distribucin distinta de
leucocitos. Zona excesivamente gruesa (Origen), Zona excesivamente fina (cola) y Zona ideal
(cuerpo).
2. Debe iniciarse con una primera observacin mediante un objetivo de poco aumento (10X),
apreciando la calidad de la tincin, explorando el rea de cmputo, los bordes laterales y extremos
donde los monocitos, neutrfilos y grandes clulas anormales tienden a situarse.
3. Luego con un objetivo de mayor aumento (100X) hacer un recorrido sobre la zona elegida
(Cuerpo), procurando realizar el conteo de 100 clulas distribuidas entre la zona central (50%) y en
las zona perifrica o bordes (50%), evitando contar dos veces las mismas clulas
4. A medida que se cuenta cada leucocito, se clasifica, utilizando de manera practica un tabulador
electrnico o mecnico
5. Normalmente la formula visual se valora en tantos por cien (%) y se realiza en base a la
observacin microscpica de 100 leucocitos
6. Tambin se debe informar la morfologa o alguna variacin de la misma, de eritrocitos, leucocitos y
plaquetas

Recuento de plaquetas
Realizar una dilucin: 1/100
1. En un tubo de plstico colocar:
2. 990 ul del reactivo de dilucin (reactivo de Rees), previamente filtrado y 10 ul de sangre
anticoagulada
3. Mezclar suavemente hasta la homogenizacin completa, dejando actuar por 5 minutos
Llenado de la Cmara cuentaglobulos
1. La cmara debe estar limpia y seca
2. Colocar el cubreobjeto sobre los prismas laterales
3. Proceder al llenado por la parte superior del retculo con una micropipeta de volumen regular
4. Se debe evitar los revalses por los surcos laterales y transversales
5. Una vez llena, se debe dejar reposar en una caja petri con algodn o papel absorbente embebido
en agua (cmara hmeda), 20 minutos
Recuento
1. Utilizando un microscopio, observar con objetivo 40X y bajando ligeramente el condensador y
moviendo el micromtrico
2. Contar las plaquetas que se depositan sobre 16 cuadritos medianos que existen en unos de los 4
cuadrantes de recuento de glbulos blancos

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

36

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

3. La suma de plaquetas estn presentes en un volumen de 0,1 mm 3 (1mm2 x 0,1mm), este numero
para que tenga valor de 1mm3, debe ser multiplicado por 10 y por 100 que corresponde al factor
de dilucin
4. Finalmente este resultado multiplicar por 106, para expresarlo en 1 litro (L) segn el SI de
unidades (plaquetas/ul)
Recuento de reticulocitos
-

Este mtodo usa como colorante el azul de metileno nuevo: 1 g cada 100 ml de solucin citratada
(1 vol de citrato de sodio 30 g/L y 4 vol de ClNa 9 g/L)
- Mediante una pipeta Pasteur se aaden a un tubo de hemlisis tres gotas de solucin colorante y
tres gotas de sangre total bien homogeneizada. En caso de valores muy bajos de hematocrito
debe colocarse doble cantidad de sangre total que de solucin colorante
- La suspensin sangre/colorante se agita suavemente e incubar por 15 minutos en bao Mara a
37 C, transcurrido este tiempo, mezclar bien el contenido del tubo, tomar una pequea gota de la
suspensin y se extiende sobre un portaobjetos (realizar 2 extendidos en lamina), una vez seca
identificar con lpiz.
- Agregar una gota de aceite de inmersin, colocar el extendido sobre la platina del microscopio y
enfocar en bajo poder (10X) para localizar el rea donde los glbulos rojos que no estn
superpuestos. Pasar al objetivo de 100X cuidadosamente e iniciar el conteo. Las clulas rojas
toman una coloracin griscea verdosa. El RNA presente en los reticulocitos se colorea de azul
intenso.
- Contar todas las clulas rojas presentes en el campo seleccionado y luego enumere los
reticulocitos existentes, localizar un segundo campo y continuar hasta que todos los reticulocitos
existentes en 1000 clulas rojas hayan sido contadas.
- Se cuentan aproximadamente 1.000 hemates y se saca el promedio de Reticulocitos.
- Es necesario realizar el recuento sobre un mnimo de 500 eritrocitos. El recuento se efecta
contando en donde los eritrocitos estn distribuidos homogneamente. Se cuentan tantos
campos como sean necesarios para alcanzar la cifra de eritrocitos requerida, siendo 100-125 el
nmero optimo de hemates por campo de los cuales distinguimos cuales son Reticulocitos para
luego expresar el resultado como porcentaje, siendo el 100 % el nmero total de hemates
contado. Este valor ser vlido si se trata de una concentracin normal de eritrocitos en sangre
total.
- En casos en que el hematocrito sea bajo se debe corregir el nmero total de Reticulocitos. Por
ello, cuando disminuye el nmero de eritrocitos como suele suceder en la anemia, el valor
porcentual debe corregirse segn el hematocrito empleando la siguiente frmula:
Reticulocitos corregidos = % de Reticulocitos observados X

Hto del paciente


45 (Hto ideal)

Clculo
500 clulas observadas
-----------> 100 %
N Reticulocitos observados -----------> X
X = % (Valor de Reticulocito)
RESULTADOS.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

37

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
1. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de Formula leucocitaria y responder lo
siguiente:
- Cules son las desventajas de realizar un frotis mal realizado?
- Existe diferencia en la lectura realizada entre un frotis sanguneo con sangre + anticoagulante
con el sangre entera?
2. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de Recuento de plaquetas
3. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de Recuento de reticulocitos
BIBLIOGRAFA.
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Garca-Conde J. y Col. 2003. Hematologa. 1 Edicin. Madrid Espaa.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lluis V. Joan, Lluis A. Joseph. 2001. Manual de Tcnicas de Laboratorio en Hematologa. 2
Edicin. Barcelona Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 6
UNIDAD IV: Tema 9
TTULO: Determinacin de Glucosa Sangunea
FECHA DE ENTREGA: 7ma semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 8va semana de clases

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

38

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

I. FUNDAMENTACIN TERICA
La patologa ms comn relacionada con el metabolismo de los hidratos de carbono es la diabetes
mellitus. El diagnostico precoz y el control de los pacientes diabticos, tiene por objeto evitar la
cetoacidosis y las complicaciones de los sntomas resultantes de la hiperglicemia, mediante el
tratamiento adecuado. Dado que existen mltiples factores de hiper o hipo glicemia, debe
considerarse en cada caso la condicin fisiolgica y/o patologa presentes en el paciente en cuestin.
Fundamento del mtodo: El esquema de reaccin es el siguiente:
GOD
Glucosa + O2 + H2O
______________ ACIDO GLUCORONICO + H2O2

2H2O2

POD
+ 4- AF + FENOL _________________ QUINONA COLOREADA + 4H2O

II. PRCTICA
OBJETIVO
Determinacin de glucosa en sangre en muestra normal y patolgica
MATERIALES.
-

Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados


Tubos de ensayo
Gradillas
Guantes
Bao de agua a 37 C
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Frasco de vidrio color caramelo
Espectrofotmetro
Reactivo de trabajo
De acuerdo al volumen de trabajo colocar en una probeta 500 partes de agua destilada, 50 partes de
reactivo 4-AF, 50 partes de reactivo fenol y llevar a 1000 partes con agua destilada. Agregar 3 partes
de GOD/POD previamente homogeneizadas. Mezclar por inversin, sin agitar. Rotular y fechar.
Pueden prepararse distintas cantidades respetando las proporciones antedichas. Es importante
adems respetar el orden de agregado de los reactivos y asegurar una perfecta homogenizacin de
los mismos, a fin de que el reactivo Fenol no deteriore el reactivo de trabajo.
Precauciones: Los reactivos son para uso in vitro, el fenol es txico e irritante.
PROCEDIMIENTO
En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco) S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
B

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

39

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Standard
Muestra
Reactivo de Trabajo

2.5 ml

25 ul
2.5 ml

25 ul
2.5 ml

Incubar 10 minutos en bao de agua a 37C. Luego leer en espectrofotmetro a 505 nm en


fotocolormetro con filtro verde (490-530 nm) llevando el aparato a cero con el blanco
Estabilidad de la mezcla de reaccin final: El color de reaccin final es estable 1 hora, por lo que la
absorbancia debe ser leda dentro de este tiempo
Calculo de los resultados
Glucosa g/l = D x F

donde F = 1,00 g/l


S

Valores de referencia
Suero o plasma: 70 - 110 mg/dl
Linealidad: La reaccin lineal hasta 4,5 g/l. Para valores superiores, diluir la solucin coloreada
final con el reactivo de trabajo y repetir la lectura multiplicando el resultado final por 2
CONCLUSIONES
EVALUACIN
1. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de glicemia
2. Cul es la funcin que cumple la glucosa en nuestro organismo?
3. Defina:
- Gluclisis
- Gluconeognesis
4. En qu consiste la Curva de Tolerancia a la Glucosa?
5. Describa lo que es la diabetes y cuantos tipos de diabetes existen?
6. Qu importancia tiene la linealidad en esta prueba de diagnostico?

BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
- Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
- Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
- Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
- Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

40

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El


Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 7
UNIDAD IV: Tema 10
TTULO: Determinacin de Urea
FECHA DE ENTREGA: 8va semana de clases
U N I V E R S I D A D DE A Q U I N O DE B
PERODO DE EVALUACIN: 9na semana
41 de clases

O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

I. FUNDAMENTACIN TERICA
La urea constituye la fraccin de nitrgeno no proteico ms importante en la mayora de los lquidos
biolgicos. En el hombre es el principal producto final del metabolismo proteico. Se produce en el
hgado y es excretada por la orina a travs de los riones. Una elevacin de la concentracin srica
de urea, se interpreta generalmente como una posible disfuncin renal. Sin embargo, no debe dejarse
de lado el hecho de que los valores sricos de urea se encuentran ntimamente relacionados con la
dieta y el metabolismo proteico, por lo que cualquier alteracin en estas variables se traducir en un
cambio de la concentracin de urea en suero.
Fundamento del mtodo: La ureasa descompone especficamente a la urea produciendo dixido de
carbono y amonaco; ste reacciona con fenol e hipoclorito en medio alcalino produciendo azul de
indofenol que se determina colorimtricamente.
II. PRCTICA
OBJETIVO
Determinacin de urea en suero normal y patolgico
MATERIALES.
- Espectrofotmetro
- Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados
- Bao de agua a 37 C
- Reloj o cronmetro
- Tubos de ensayo
- Gradillas
- Marcador para vidrio
- Guantes
REACTIVOS
Reactivo 1: disolver el contenido del frasco con agua destilada de acuerdo con las indicaciones del
rtulo. Mezclar por inversin hasta disolucin completa. Fechar.
Reactivo 2: diluir el contenido del frasco con agua destilada de acuerdo con las indicaciones del rtulo
y mezclar por inversin. Colocar fecha de preparacin.
Standard: listo para usar.
Precauciones: Los reactivos son para uso in vitro. El fenol es txico e irritante.
PROCEDIMIENTO.
Uremia: En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido)
colocar una o dos gotas de agua y agregar:

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

42

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Standard
Suero o plasma
Ureasa

B
----1 gota

S
20 ul
--1 gota

D
--20 ul
1 gota

Mezclar por agitacin suave e incubar 5 minutos a 37C. Luego agregar:


Reactivo 1
Reactivo 2

B
1 ml
1 ml

S
1 ml
1 ml

D
1 ml
1 ml

Mezclar por agitacin suave e incubar 5 minutos a 37C. Luego agregar:

Agua destilada

B
10ml

S
10ml

D
10ml

Mezclar por inversin y retirar del bao. Despus de 10 minutos leer en fotocolormetro con filtro
verde (510-550 nm) o en espectrofotmetro a 540 nm, llevando a cero con el Blanco.
Urea en orina: Se sigue la misma tcnica que para sangre utilizando orina diluida con agua o solucin
fisiolgica. Como el contenido de urea est relacionado con la densidad, es conveniente diluir segn
el siguiente esquema:
Densidad hasta 1,015................................. diluir 1/10
Densidad de 1,016 a 1,025......................... diluir 1/20
Densidad mayor de 1,025........................... diluir 1/40
Como la orina contiene cantidades variables de amonaco debe efectuarse un Blanco de orina (BD).
Este Blanco se ejecuta igual que el Blanco de Reactivo (B), con la diferencia que, luego de agregar el
Reactivo 1 y antes del 2, se agregan 20 ul de la dilucin de orina. Llevar el aparato a cero con el
Blanco de Reactivos (B) y leer el Standard (S), el Blanco de orina (BD) y el Desconocido (D).
Estabilidad de la mezcla de reaccin final: El color de la reaccin final es estable 12 horas, por lo que
la absorbancia debe ser leda en ese lapso.
Clculo de los resultados:
SUERO O PLASMA

Urea (g/l) = D x factor

factor = 0,60 g/l


S

BUN (g/l) = D x factor

factor = 0,28 g/l


S
ORINA
Urea (g/l) = (D-BD) x 0,60 x dilucin
S
Valores de referencia:
Suero o plasma: Sobre un total de 1700 individuos de ambos sexos, con edades comprendidas entre
los 20 y 45 aos, concurrentes al consultorio externo de un servicio hospitalario en la zona de Rosario
(Argentina) sin patologa renal manifiesta (con control de diuresis y densidad urinaria), el 95% de los
valores de uremia en suero estuvo comprendido entre 0,20 g/l y 0,45 g/l.
Orina: Normalmente, la eliminacin de urea est sujeta a grandes variaciones dependientes de la
dieta. Por trmino medio, y con una dieta mixta corriente, se excretan unos 30 g en 24 horas, con
oscilaciones comprendidas entre 20 g y 40 g.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

43

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Limitaciones del procedimiento: Evitar contaminaciones con amonaco provenientes del ambiente
(humo de cigarrillo, vapores amoniacales).
Rango dinmico: cuando el resultado obtenido sobrepasa los 1,5 g/l de urea, debe diluirse la solucin
final 1/3 empleando como diluyente Blanco de Reactivos y efectuando la lectura luego de 10 minutos
de efectuada la dilucin. El resultado obtenido debe multiplicarse por la dilucin efectuada.
CONCLUSIONES
EVALUACIN
1.
2.
3.
4.

Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de la determinacin de urea


Cul es la funcin que cumple la urea en nuestro organismo?
Qu relacin tiene la urea con la creatinina srica?
En qu situaciones patolgicas se observa modificada las concentraciones de urea
sricas?
5. Qu relacin existe entre la urea srica y la eliminada por orina?
BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

44

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 8


UNIDAD IV: Tema 10
TTULO: Determinacin de Creatinina
FECHA DE ENTREGA: 9na semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 10ma semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
Compuesto sumamente difusible, se elimina del organismo casi exclusivamente por filtracin renal.
Su determinacin en suero, as como el clearence de creatinina endgena constituyen parmetros
importantes para el diagnostico de diversas afecciones renales. Sin embargo, debido a los problemas
prcticos inherentes a la determinacin del clearence, la determinacin de creatinina srica es ms
utilizada como ndice de funcionalismo renal.
Fundamento del mtodo: La creatinina reacciona con el picrato alcalino (reaccin de Jaffe)
produciendo un cromgeno rojo. La velocidad de esta reaccin, bajo condiciones controladas, es una
medida de la concentracin de creatinina de la muestra puesto que se comporta como una reaccin
cintica de primer orden para la creatinina. Por otra parte se ha demostrado que los cromgenos nocreatinina que interfieren la mayor parte de las tcnicas convencionales, reaccionan dentro de los 30
segundos de iniciada la reaccin. De manera que entre los 30 segundos y los 5 minutos posteriores
al inicio de la reaccin, el incremento de color se debe exclusivamente a la creatinina.
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar la cuantificacin de creatinina en un paciente normal y uno con insuficiencia renal
MATERIALES.
-

Espectrofotmetro o fotocolormetro
Tubos de khan y de fotocolormetro
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Guantes
REACTIVOS.

- Reactivo 1: acido pcrico 41.4 mmol/l


- Reactivo 2: buffer glicina /NaOH 1 mol/l, pH final 12.4
- Standard: solucin de creatinina 20 mg/l
PROCEDIMIENTO.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

45

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Equilibrar el reactivo de trabajo a la temperatura de reaccin (25 C). Antes de agregar la muestra,
llevar el aparato a cero con agua destilada. En dos cubetas espectrofotomtricas marcadas S
(Standard) y D (Desconocido), colocar:

Reactivo de trabajo
Standard
Muestra

S
1,2 ml
0,2 ml
--

D
1,2 ml
-0,2 ml

Mezclar inmediatamente, iniciando al mismo tiempo el cronmetro y proseguir la incubacin. A los 30


segundos exactos medir la absorbancia (S1 y D1) y continuar la incubacin. Medir nuevamente la
absorbancia (S2 y D2) a los 5 minutos (4 minutos 30 segundos despus de la primera lectura).
Longitud de onda 500 nm
Tcnica para orina: realizar una dilucin 1:50 de la misma en agua desionizada.
Calculo de los resultados
Creatinina en suero (mg/dl)= (D2 D1) x F
f=

20 mg/l
S2 S1

Creatinina en orina (g/24hrs) = D2 D1 x V


S2 S1
Siendo:
V= volumen de la diuresis expresado en litros/24hrs
La formula surge de:
Creatinina en orina (g/24hrs) = D2 D1 x 0,020 g/l x 50 x V
S2 S1
Donde:
0.0.20 g/l = concentracin del Standard
50= factor de dilucin
Depuracin de creatinina endogena (D.C.E):
D.C.E ml/min= Creatinina en orina (g/24hrs) X 694 ml/min.
Creatinina en suero (mg/l)
Donde:
694 ml/min. g24hrs = 1000 mg x 1000 ml = 1.000.000 ml
mg/l
1 mg x 1440 min.
1440 min.
Valores de referencia
Suero: Hombres: 0.7 a 1,3 mg/dl
Mujeres: 0,6 1,1 mg/dl
Orina: Hombre: 14 - 26 mg/Kg/24 hs

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

46

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Mujer : 11 20 mg/Kg/24 hs
D.C.E: Hombre: 94 140 ml/min/1,73 m2
Mujer : 72 110 ml/min/1,73 m2
CONCLUSIONES
EVALUACIN
1. Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de la determinacin de creatinina
2. En qu situaciones patolgicas se incrementa la concentracin de creatinina
srica?
3. En qu consiste la depuracin de creatinina?
4. Cul la importancia de la creatinina en sangre en relacin a la funcin renal?
5. Qu otras pruebas de laboratorio se asocian a una creatinina alterada en sangre?
BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

47

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUIA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 9
UNIDAD IV: Tema 10
TTULO: Determinacin del cido rico
FECHA DE ENTREGA: 10ma semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 11ra semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
El cido rico es el producto de desecho final del catabolismo de los cidos nucleicos y las purinas en
humanos. El cido rico deriva de tres fuentes 1) catabolismo de nucleoprotenas ingeridas, 2)
catabolismo de nucleoprotenas endgenas y 3) transformacin directa de nucletidos purnicos
endgenos. La formacin de cido rico ocurre solo en tejido que contiene la enzima xantinaoxidasa.
La mayora del cido rico del organismo es sintetizado en el hgado y en la mucosa intestinal. Al
alrededor de dos tercios del urato es excretado por el rin, y el tercio restante es eliminado por va
intestinal. Un adulto medio, con una dieta baja en protenas, excreta aproximadamente de 275 mg a
600 mg de acido rico en 24 horas.
Fundamento del mtodo:
UOD

cido rico + 2 H2O + O2

alantona + H2O2 + CO2

2H2O2 + 4-AF + clorofenol

4-(p-benzoquinona monoimino) fenazona + 4 H2O

II. PRCTICA
OBJETIVO
Determinar cido rico en suero normal y patolgico
MATERIALES.
-

Espectrofotmetro o fotocolormetro
Tubos de ensayo y de fotocolormetro
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Guantes

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

48

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

REACTIVOS.
- Reactivo: Uricasa, peroxidasa, clorofenol, 4 aminofenazona y fosfatos para ls siguientes
reacciones finales
UOD mayor o igual a 26 U/l
4-AF: 6 mM
POD mayor o igual a 200 U/l
pH: 7,3 0,1
Clorofenol: 2,4 mM
fosfatos: 25 mM
- Standard: solucin de cido rico 100 mg/l
PROCEDIMIENTO.
En tres tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas marcados B (Blanco), S (Standard),
D (Desconocido), colocar:
Standard
Muestra
Reactivo de trabajo

B
----2.5 ml

S
50 ul
--2.5 ml

D
--50 ul
2.5 ml

Mezclar suavemente e incubar 15 minutos en bao de agua a 37 C o 30 minutos a temperatura


ambiente (18 25 C)
Retirar, enfriar y leer en espectrofotmetro a 505 nm o en fotocolormetro con filtro verde (490 530
nm), llevando el aparto a cero con el Blanco
Estabilidad de la mezcla de reaccin final: El color de reaccin final es estable 45 minutos, por lo que
la absorbancia puede ser leda dentro de este lapso
Clculo de los resultados
cido rico mg/dl = D x f

Donde

f =

100 mg/l
S

Valores de referencia
Hombres: 25 60 mg/l
Mujeres: 20 50 mg/l
RESULTADOS.
CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de la determinacin de cido rico
BIBLIOGRAFA.
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

49

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs #10
UNIDAD IV: Tema 11
TTULO: Determinacin del Colesterol y Triglicridos
FECHA DE ENTREGA: 11 ra semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 12da semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
Colesterol
La determinacin de colesterol en forma aislada tiene utilidad diagnostica limitada. Se ha visto que el
colesterol es uno de los factores contribuyentes a la formacin de ateromas dado que las
complicaciones arteriosclerticas prevalecen en individuos hipercolesterolmicos.
Estudios epidemiolgicos demuestran que el riesgo de contraer enfermedad cardiaca coronaria para
individuos de mas de 40 aos con colesterolemia menor a 2.10 g/l es 3 veces menor que entre
individuos con mas de 2.30 g/l y 6 veces menor que entre individuos con mas de 2.60 g/l.
Fundamento del mtodo: El esquema de reaccin es el siguiente:
steres de colesterol lipasa colesterol + cidos grasos
Colesterol +O2

CHOD

colesten 3 ona +H2 O2

H2 O2 + 4-AF + fenol

POD

quinona coloreada + H2O

Triglicridos

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

50

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Los triglicridos son lpidos absorbidos en la dieta y tambin producidos en forma endgena a partir
de los carbohidratos. Su medicin es importante en el diagnstico y manejo de las dislipidemias.
Estas enfermedades pueden tener origen gentico o ser secundarias a otras tales como nefrosis,
diabetes mellitus y disfunciones endcrinas. El aumento de triglicridos se ha identificado como un
factor de riesgo en enfermedades aterosclerticas.
Fundamentos del mtodo: El esquema de reaccin es el siguiente:
Triglicridos lipoprotein lipasa> glicerol + cidos grasos
Glicerol + ATP glicerol kinasa> glicerol-1-P + ADP
glicerol-1-fosfato + O2 GPO > H2O2 + dihidroxiacetonafosfato
2 H2O2 + 4-AF + clorofenol POD> quinonimina roja
II. PRCTICA
OBJETIVOS
Determinar la concentracin de colesterol en un paciente normal y uno patolgico
- Determinar la concentracin de triglicridos en un paciente normal y uno patolgico
MATERIAL
-

Espectrofotmetro o fotocolormetro
Micropipetas, pipetas y material volumtrico adecuados
Frasco de vidrio color caramelo
Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas
Bao de agua a 37C
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Guantes
REACTIVOS.
Colesterol
Standard: Solucin de colesterol 2 g/l
Enzimas: Suspensin conteniendo lipasa fungal 300 U/ml, colesterol
peroxidasa (POD) 20 U/ml.
Reactivo 4 AF: solucin de 4- aminofenazona 25 mmol/l.
Reactivo Fenol: solucin de fenol 55 mmol/l.

oxidasa (CHOD) 3U/ml y

Triglicridos
Reactivo de trabajo:
- 10 x 20 ml: agregar 20 ml de Buffer a un vial de Enzimas. Mezclar hasta disolucin completa.
Homogeneizar y fechar.
- 4 x 50 ml: reconstituir el contenido de un vial de Enzimas

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

51

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- El Reactivo de Trabajo puede presentar una coloracin rosada que no afecta su funcionamiento.
Lecturas del Blanco superiores a 0,160 D.O. o lecturas del Standard anormalmente bajas, son
indicios de deterioro del Reactivo. En tal caso, desechar.

PROCEDIMIENTO.
Colesterol
En tres tubos de fotocolorimetro o cubetas espectrofotomtricas marcadas B (Blanco), S (Standard) y
D (Desconocido), colocar:
Standard
Muestra
Reactivo de trabajo

B
----2 ml

S
20 ul
--2 ml

D
--20 ul
2 ml

Clculos de los resultados


Colesterol g/l = D x f

donde f= 2.00 g/l


S

Valores de referencia
Hombres: 1.72 a 2.48 g/l
Mujeres: 1.75 a 2.40 g/l

n=63
n=68

Edad: 35-a 62 aos


Edad: 30- a 60 aos

Triglicridos
Homogeneizar la muestra antes de usar, especialmente frente a sueros lechosos. En tres tubos de
fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas marcadas B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido)
colocar:
B
S
D
Standard
10 ul
Muestra
10 ul
Reactivo de Trabajo
1 ml
1 ml
1 ml
Mezclar, incubar 5 minutos a 37C o 20 minutos a temperatura ambiente (18-25C). Enfriar y leer en
espectrofotmetro a 505 nm o en fotocolormetro con filtro verde (490-530 nm) llevando el aparato a
cero con agua destilada.
Estabilidad de la mezcla de reaccin final. El color de reaccin final es estable 60 minutos, por lo que
la absorbancia debe ser leda dentro de este lapso.
Clculo de los resultados: Corregir las lecturas con el Blanco de reactivos y usar las lecturas
corregidas para los clculos.
TG g/l = D x factor

factor = 2 g/l
S

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

52

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Valores de referencia
Deseable: < 1,50 g/l
Moderadamente elevado a elevado: 1,50 - 1,99 g/l
Elevado: 2,00 - 4,99 g/l
Muy elevado: > 5,00 g/l
No obstante, se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios intervalos o valores de
referencia.
Linealidad: la reaccin es lineal hasta 10 g/l de triglicridos. Para valores superiores, repetir la
determinacin con muestra diluida 1:2 con solucin fisiolgica. Multiplicar el resultado obtenido por la
dilucin efectuada.
CONCLUSIONES
EVALUACIN
1. Realizar el Procedimiento operativo estandarizado POE de la determinacin de colesterol y
responder lo siguiente:
- Cules son las funciones que cumple el colesterol en nuestro organismo?
- Describa el metabolismo del Colesterol
- Defina lo que es dislipidemia, cul es su efecto en nuestro organismo?
- En qu patologas se elevan los niveles de colesterol?
2.
Realizar el Procedimiento operativo estndar POE de la determinacin de
triglicridos y responder lo siguiente:
- Qu relacin tienen los lpidos con las enfermedades cardiovasculares?
- Cul es funcin que cumplen los triglicridos en nuestro organismo?
- En qu situaciones patolgicas se observa modificada las concentraciones de
triglicrido srico?
- La elevacin de Triglicridos con qu otras pruebas de laboratorio est relacionada?
BIBLIOGRAFA.
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

53

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 11
UNIDAD IV: Tema 11
TTULO: Determinacin de HDL y LDL colesterol
FECHA DE ENTREGA: 12da semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 13ra semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
HDL colesterol: El desarrollo de los estudios epidemiolgicos sobre los ECC y la arterioesclerosis, ha
llevado a la identificacin de diversos factores que por promover el desarrollo de las mismas, han sido
denominados factores de riesgo. Entre ellos figuran la hipertensin, obesidad, inactividad fsica,
dislipidemias, etc. Analizando con el mismo criterio los valores de HDL colesterol, se determin que
es un factor de riesgo negativo por lo que su correlacin con las ECC es inversa, su importancia es
pronstica.
LDL colesterol: El exceso del LDL colesterol debe ser considerado como factor de riesgo para el
desarrollo de enfermedad cardiaca coronaria, considerando que el efecto protector de las HDL solo
parece tener relevancia dentro del rango de concentraciones del colesterol circulante.
Fundamento del mtodo: Las lipoprotenas de alta densidad HDL se separan precipitando
selectivamente las lipoprotenas de baja y muy baja densidad (LDL y VLDL) mediante el agregado de
sulfato de dextrn de pm 500000 en presencia de iones de Mg++. En el sobrenadante separado por
centrifugacin, quedan las HDL y se realiza la determinacin del colesterol ligado a las mismas,
empleando el sistema enzimtico colesterol oxidasa/peroxidasa con colorimetra segn Trinder (fenol
4-aminofenazona).
Las lipoprotenas de baja densidad (LDL) se separan del suero precipitndolas selectivamente
mediante agregado de polmeros de alto peso molecular. Luego de centrifugar, en el sobrenadante
quedan las dems lipoprotenas (HDL y VLDL) el colesterol ligado a las mismas se determina
empleando el sistema enzimtico colesterol oxidasa/peroxidasa con colorimetra segn trinder

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

54

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

(fenol/4-AF). Por diferencia entre el colesterol total y el determinado en el sobrenadante se obtiene el


colesterol unido a las LDL
II. PRCTICA
OBJETIVO
-

Realizar la determinacin del HDL colesterol en suero


Realizar la determinacin del LDL colesterol en suero
MATERIALES.

Espectrofotmetro o fotocolormetro
Micropipetas, pipetas y material volumtrico adecuados
Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas
Gradilla
Bao de agua a 37C
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Guantes
REACTIVOS.
HDL
Reactivo precipitante: solucin de cido fosfotngstico 0,44 mmol/l y cloruro de magnesio 20 mmol/l
LDL
Reactivo precipitante: solucin 10 g/l de Sulfato de polivinilo disuelto en polietilenglicol (pm 600) al 25
% pH 6,7
PROCEDIMIENTO.
HDL
En tubo de Kahn medir 200 ul de muestra y agregar 500 ul de reactivo precipitante
Homogeneizar agitando (sin invertir) durante 20 segundos y dejar 10 minutos en reposo a temperatura
ambiente. Centrifugar 15 minutos a 3000 rpm o 2 minutos a 12000 rpm. Usar el sobrenadante lmpido
con muestra.
En tres tubos de fotocolormetro marcados B, S y D, colocar:
Sobrenadante
Standard
Reactivo de trabajo

B
----2 ml

S
--20 ul
2 ml

D
200 ul
--2 ml

Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C si se usa el reactivo de trabajo de Colestat enzimtico AA/lquida


o 15 minutos a 37 C cuando se usa el de Colestat enzimtico. Retirar del bao y enfriar. Leer a 505
nm en espectrofotmetro o en colormetro con filtro verde (490 530 nm), llevando a cero con el
Blanco
Estabilidad de la reaccin final: El color de reaccin final es estable 2 horas por lo que la absorbancia
debe ser leda dentro de ese lapso

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

55

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Clculos de los resultados


HDL Colesterol (g/l) = D x f

f= 0,762
S

0,762 = 2 g/l x VFE x VRE x VS


VM
VRS
VE
Donde:
VFE = volumen final de extracto = 0,7 ml
VM = volumen de muestra procesada = 0,2 ml
VRE = volumen de reaccin con extracto = 2,2 ml
VRS = volumen de reaccin con Standard = 2,02 ml
VS = volumen de Standard en la reaccin = 0,020 ml
VE = volumen de extracto en la reaccin = 0,2 ml
Si se emplean volmenes de reactivo diferentes de 2 ml el factor 0,762 vara y debe ser calculado
nuevamente, reemplazado en la frmula VRE y VRS
Valores de referencia
El panel de expertos del Nacional Colesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes valores
de HDL colesterol:
0,40 0,60 g/l
LDL
En un tubo de Kahn colocar 200 ul de muestra y 100 ul de reactivo precipitante, homogeneizar
agitando (sin invertir) durante 20 segundos y dejar 15 minutos enun bao de agua a 20 25 C.
Centrifugar 15 minutos a 3000 rpm. Separar inmediatamente el sobrenadante. Usar el sobrenadante
como muestra para el ensayo colorimtrico.
En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:
B
----2 ml

Sobrenadante
Standard
Reactivo de trabajo

S
--20 ul
2 ml

D
100 ul
--2 ml

Mezclar e incubar 5 minutos a 37 C si se usa el reactivo de trabajo de Colestat enzimtico AA/lquida


o 15 minutos a 37 C cuando se usa el de Colestat enzimtico. Retirar del bao y enfriar. Leer a 505
nm en espectrofotmetro o en colormetro con filtro verde (490 530 nm), llevando a cero con el
Blanco
Clculos de los resultados
LDL Colesterol (g/l) = Colesterol total (*) - (D x f)

Dx f

f= 0,624
S

(*) valor obtenido con colestat enzimatico o colestat enzimtico AA/lquida


El valor 0,624 surge de:
0,624 = 2 g/l x VFE x VRE x
VM
VRS
Donde:

VS
VE

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

56

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

VFE = volumen final de extracto = 0,3 ml


VM = volumen de muestra procesada = 0,2 ml
VRE = volumen de reaccin con extracto = 2,1 ml
VRS = volumen de reaccin con Standard = 2,02 ml
VS = volumen de Standard en la reaccin = 0,020 ml
VE = volumen de extracto en la reaccin = 0,1 ml
Si se emplean volmenes diferentes el factor 0,624 vara y debe ser calculado nuevamente
Valores de referencia
El panel de expertos del Nacional Colesterol Education Program (NCEP) provee los siguientes valores
de LDL colesterol en relacin al riesgo de contraer enfermedad cardiaca coronaria (ECC):
- Riesgo bajo o nulo (sujetos normales): valores de LDL colesterol menores de 1,29 g/l
- Riesgo moderado a elevado (individuos con probabilidad de contraer (ECC): valores entre 1,30
y 1,89 g/l
- Riesgo muy elevado (individuos sospechosos de padecer ECC): valores de LDL colesterol
1,90 g/l
RESULTADOS.
CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
1. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de HDL
2. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de LDL
BIBLIOGRAFA.
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

57

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 12
UNIDAD IV: Tema 12
TTULO: Determinacin de Calcio en suero
FECHA DE ENTREGA: 14ta semana de clases
PERIODO DE EVALUACIN: 15ta semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
El calcio es esencial en la mayora de las reacciones de la coagulacin sangunea y en la regulacin
de la excitabilidad de las fibras musculares. Su concentracin en suero esta regulada por la accin de
factores tales como niveles de parathormona, vitamina D y fsforo, observndose de fluctuaciones
fisiolgicas debidas a edad, sexo, embarazo, actividad fsica, cambios estacionales (por accin de la
luz solar). La hipercalcemia esta relacionada con distintas patologas: hiperparatiroidismo, neoplasias
seas, intoxicaciones con vitamina D. La hipocalcemia se asocia con desordenes tales como
hipoparatiroidismos, deficiencia de vitamina D, mala absorcin.
Fundamento del mtodo:El calcio reacciona con la cresolftaleina complexona (cfx) a pH 11, dando un
complejo de adicin color magenta que se mide fotocolorimetricamente a 570nm.
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar la determinacin de calcio en suero

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

58

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

MATERIALES.
-

Espectrofotmetro o fotocolormetro
Micropipetas, pipetas y material volumtrico adecuados
Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas
Gradilla
Bao de agua a 37C
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Guantes
REACTIVOS.
Reactivo Cfx: solucin de cresolftalein complexona 3,7mmol/l
Buffer: solucin de amnometil propanol (AMP) 0,2mol/l en metanol 35% V/V para pH final 11
Standard: solucin de calcio 10mg/dl
PROCEDIMIENTO.
Se aconseja trabajar directamente en tubos de fotocolormetro de manera de poder determinar un
Blanco interno para cada ensayo, condicin indispensable para controlar las trazas de calcio que
pudiera haber escapado al proceso de lavado de material.
En dos tubos de fotocolormetro marcados S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
Reactivo Cfx
Buffer

S
50 ul
3.5 ml

D
50 ul
3.5 ml

Mezclar con la varilla provista y leer la absorbancia de ambos tubos (blancos internos: BS Y BD) en
espectrofotmetro a 570 nm en fotocolormetro con filtro rojo (560 590 nm) llevando el aparador a
cero con agua destilada. Luego agregar:
Standard
Muestra

S
20 ul
---

D
---20 ul

Mezclar inmediatamente, luego de 10 minutos, volver a leer (S y D).


Calculo de los resultados
Corregir las lecturas restando los Blancos internos correspondientes:
S- BS= S
D- BD= D
1) Calcio serico (mg/dl)= Dx F

F= 10 mg/dl
S

Valores de referencia
Suero. 8.5-10.5 mg/dl

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

59

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

CONCLUSIONES
EVALUACIN
1.
2.
3.
4.
5.
6.

Realizar el procedimiento operativo estndar POE de Calcio


Cul es la funcin del calcio en nuestro organismo?
Qu es la osteosporosis? y mencione sus causas
Qu cuidados se debe tener al realizar la determinacin tcnica de calcio srico?
En qu patologas el calcio se eleva?
Qu es la osteoporosis, cul su relacin en referencia al calcio?

BIBLIOGRAFA.
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
- Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
- Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
- Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
- Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
- V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
- Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
- WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 13
UNIDAD IV: Tema 13
TTULO: Determinacin de protenas totales y albmina
FECHA DE ENTREGA: 15ta semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 16ta semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

60

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Las protenas son compuestos orgnicos macromoleculares, ampliamente distribuidos en el


organismo y esenciales para la vida. Actan como elementos estructurales y de transporte y aparecen
bajo la forma de enzimas, hormonas, anticuerpos, factores de coagulacin, etc. La protena ms
abundante en plasma es la albmina. Una de sus funciones ms importantes es la de permitir el
transporte de cidos grasos, hormonas esteroides, bilirrubina, catecolaminas, que en forma libre son
insolubles en medio acuoso. La concentracin de albmina en plasma influye notablemente en el
mantenimiento de la presin coloidosmtica, lo que estara relacionado con su relativamente bajo
peso molecular y su gran carga neta. En condiciones patolgicas como prdidas renales,
desnutricin, infecciones prolongadas, etc., suelen presentarse hipoproteinemias, mientras que en
otras como mieloma mltiple, endocarditis bacteriana y hemoconcentraciones de diversos orgenes,
se observan hiperproteinemias. En general, ambas situaciones se ven acompaadas tambin por
hipoalbuminemias. Los aumentos anormales de albmina son ocasionales y se relacionan casi
siempre con deshidratacin que produce el consecuente aumento en el contenido proteico del
plasma.
Fundamento del mtodo
Determinacin de protenas totales:
Los enlaces peptdico de las protenas reaccionan con el in cprico, en medio alcalino, para dar un
complejo color violeta con mximo de absorcin a 540 nm, cuya intensidad es proporcional a la
concentracin de protenas totales en la muestra.
Determinacin de albmina:
La albmina reacciona especficamente -sin separacin previa-con la forma aninica de la 3,3', 5,5'tetrabromo cresolsulfon fenoftalena (BCF), en presencia de un exceso de colorante, en medio
tamponado a pH 3,8. El aumento de absorbancia a 625 nm respecto del Blanco de reactivo, es
proporcional a la cantidad de albmina presente en la muestra.
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar la determinacin de los niveles de protena y albmina srica
MATERIALES.
- Espectrofotmetro o fotocolormetro
- Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados
- Tubos de fotocolormetro o cubetas espectrofotomtricas
- Bao de agua a 37 C (para Protenas Totales)
- Reloj o cronometro
- Tubos de Khan
- Marcador para vidrio
- Guantes
REACTIVOS.
Reactivo EDTA/Cu: complejo EDTA/Cu 13 mmol/l en NaOH 875 mmol/l y alquilaril politer (AAP)
Reactivo BCF: solucin de 3,3', 5,5'-tetrabromo cresolsulfon fenoftalena (en polioxietiln lauril ter)
Suero Patrn: solucin de albmina y globulinas en estado
Prot. 2

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

61

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

PROCEDIMIENTO
Protenas totales:
En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:
Agua destilada
Suero Patrn
Muestra
Reactivo EDTA/Cu

B
50 ul
----3,5 ml

S
--50 ul
--3,5 ml

D
----50 ul
3,5 ml

Mezclar con varilla. Incubar 15 minutos a 37 C. Leer en espectrofotmetro a 540 nm o en


fotocolormetro con filtro verde (520-560 nm) llevando a cero con el Blanco de Reactivo.
Estabilidad de la mezcla de reaccin final: El color de la reaccin es estable durante 12 horas por lo
que la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso.
Albmina:
En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido), colocar:
Suero Patrn
Muestra
Reactivo BCF

B
----3,5 ml

S
10 ul
--3,5 ml

D
--10 ul
3,5 ml

Mezclar con varilla. Mantener los tubos entre 15 y 28 C durante 10 minutos. Leer en
espectrofotmetro a 625 nm o en fotocolormetro con filtro rojo (620-650 nm) llevando a cero con el
Blanco de reactivo
Estabilidad de la mezcla de reaccin final: El color es estable 20 minutos por lo que la absorbancia
debe ser leda dentro de ese lapso
Clculo de los resultados
Empleando el Suero Patrn tal como se indica en PROCEDIMIENTO, los clculos se realizan como
sigue:
Protenas Totales (g/dl) = D x f
f =S
Albmina (g/dl) = D x f
f =S
Globulinas = P.T. (g/dl) - Alb. (g/dl)
Relacin A/G = Albmina (g/dl)/Globulinas
Valores de referencia
Protenas totales: 6,1 a 7,9 g/dl
Albmina: 3,5 a 4,8 g/dl
Relacin A/G: 1,2 a 2,2
Se recomienda que cada laboratorio establezca sus propios valores de referencia.
Linealidad: la reaccin es lineal hasta 12 g/dl para Protenas Totales y hasta 6 g/dl para Albmina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

62

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

CONCLUSIONES
EVALUACIN
1. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de Protenas totales y responder lo siguiente:
- Cul es funcin que cumplen las protenas sricas en nuestro organismo?
- Cul es funcin que cumplen las albminas en nuestro organismo?
- En qu situaciones patolgicas se observa modificada las concentraciones de protenas
sricas?
- Mencione las protenas ms importantes presentes en suero?
- Qu otras pruebas se puede asociar una elevacin de protenas y en qu patologas?
2. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de Albmina
BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
- Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
- Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
- Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
- Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
- V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
- Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
- WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 14
UNIDAD IV: Tema 15
TTULO: Determinacin de Bilirrubinas
FECHA DE ENTREGA: 16ta semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 17ma semana de clases

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

63

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

I. FUNDAMENTACIN TERICA
La Bilirrubina es un compuesto de degradacin de la hemoglobina, es captada por el hgado para su
conjugacin y excrecin en la bilis. Las alteraciones hepatocelulares u obstrucciones biliares pueden
provocar hiperbilirrubinemias. La eritroblastosis fetal o anemia hemoltica del recin nacido es una
patologa provocada por incompatibilidad materno-fetal en la que se produce una destruccin
excesiva de glbulos rojos. Esto resulta en un severo aumento de la bilirrubina srica con el
consecuente riesgo de difusin del pigmento al sistema nervioso central, por lo que la determinacin
de la bilirrubina en estos nios recin nacidos resulta sumamente importante.
Fundamento del mtodo: La bilirrubina reacciona especficamente con el cido sulfanlico diazotado
produciendo un pigmento color rojo-violcea (azo-bilirrubina) que se mide a 530 nm.
Si bien la bilirrubina conjugada (directa) reacciona directamente con el diazorreactivo, la bilirrubina no
conjugada (indirecta) requiere la presencia de un desarrollador acuoso que posibilite su reaccin. De
forma tal que, para que reaccione la bilirrubina total (conjugada y no conjugada) presente en la
muestra, debe agregarse benzoato de cafena al medio de reaccin.
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar determinacin de las bilirrubinas en una muestra de suero normal y una ictrica
MATERIAL
-

Espectrofotmetro o fotocolormetro
Micropipetas y pipetas capaces de medir los volmenes indicados
Reloj o cronometro
Gradillas
Tubos de Khan
Marcados para vidrio
Guantes
REACTIVOS.
Desarrollador: solucin acuosa de benzoato de cafena 0.13 mol/l, tamponada y estabilizada.
Nitritos de Sodio: solucin de nitrito de sodio 0.07mmol/l y cido clorhdrico 0.17mol/l.
PROCEDIMIENTO
1. Tcnica para el suero:
En tres tubos fotocolormetro marcados B (Blanco), D (Directa) y T (Total) Colocar:
Muestra (suero)
Agua destilada
Desarrollador
Reactivo Sulfanlico
Diazorreactivo

B
200 ul
2.5 ml
--200 ul
---

D
200 ul
2.5 ml
----200 ul

T
200 ul
--2.5 ml
--200 ul

Mezclar de inmediato cada tubo por inversin. Luego de 5 minutos, leer en espectrofotmetro a 530
nm o en fotocolormetro con filtro verde (520-550 nm), llevando el aparato a cero con agua destilada.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

64

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Las lecturas pueden efectuarse entre 4 y 15 minutos, excepto para la bilirrubina directa que debe
leerse a los 5 minutos exactos. Si se lee antes, habr valoracin previa de los resultados por reaccin
incompleta. Si se lee despus, habr nueva valoracin porque comienza a reaccionar la bilirrubina
libre.
Sueros Ictricos: debe emplearse la tcnica descrita pero con menores cantidades de muestra, de
acuerdo a la severidad de la ictericia. De tal forma, en caso de ictericia moderada se usaran 50 ul de
suero mientras que frente a una ictericia intensa se requiere solo 20 ul multiplicar los resultados
obtenidos por 3.79 y 9.38 respectivamente.
Clculo de los resultados
Bilirrubina total (mg/l)= (T-B) * F
Bilirrubina directa (mg/l)= (D-B) * F
Bilirrubina libre= Bilirrubina total- Bilirrubina directa
El factor colorimtrico (F) debe calcularse con el Estndar de Bilirrubina.
Valores de referencia
Bilirrubina en suero o plasma
ADULTOS:

Directa: hasta 2 mg/l


Total : hasta 10 mg/l
RECIN NACIDOS:
Nacidos a termino
Sangre de cordn
25 mg/l
Hasta las 24 hrs
60 mg/l
Hasta las 48 hrs.
75 mg/l
Del 3 al 5 da
120 mg/l

Prematuros
.................
80 mg/l
120 mg/l
240 mg/l

Despus del nacimiento los valores comienzan a disminuir para alcanzar el nivel promedio del adulto
al mes de nacimiento. En los prematuros, los niveles de bilirrubina tardan mas en alcanzar la
normalidad, dependiendo del grado de inmadurez heptica.
CONCLUSIONES
EVALUACIN
2.
3.
4.
5.
6.
7.

1. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de Bilirrubina


Describa las funciones que cumple las bilirrubinas en nuestro organismo
En qu ocasiones se presenta la llamada ictericia neonatal?
En que otras patologas se encuentra aumentada la concentracin de bilirrubina?
Describa de que manera afecta la concentracin de bilirrubinas en una hepatitis viral
A qu otro tipo de muestra se puede realizar Bilirrubina?
Qu cuidados se debe tener con la muestra para procesar Bilirrubina?
BIBLIOGRAFA

- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial


Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

65

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRACTICA - GIPs # 15
UNIDAD IV: Tema 15
TTULO: Determinacin de la GOT y GPT
FECHA DE ENTREGA: 17ma semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 18va semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
GOT: Mtodo UV optimizado para la determinacin de aspartato aminotransferrasa en suero o
plasma, expresando el resultado en U/L. La AST es una enzima bilocular (citoplasmtica y
mitocondrial) ampliamente difundida. Se encuentra en mayor concentracin en hgado y corazn.
Cualquier alteracin de estos tejidos produce un aumento en los niveles de AST circulante.
La determinacin de AST adquiere importancia diagnostica cuando sus valores se comparan con los
de otras enzimas de similar origen tisular.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

66

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

GPT: Mtodo UV para la determinacin de alanino aminotransferrasa en suero o plasma, expresando


el resultado en U/L. Una destruccin o cambio de permeabilidad de las membranas celulares
provoca la liberacin de ALT a la circulacin sangunea. Los mayores aumentos de actividad ALT en
suero, se producen como consecuencia de alteraciones hepticas, por lo cual deben analizarse
conjuntamente otras enzimas de similar origen tisular, para evaluar el grado de la lesin a nivel
heptico.
Fundamento del mtodo
GOT
Basado en el siguiente esquema reaccionante:
GOT
L-aspartato + -oxoglutarato ------------------------> glutamato + oxalacetato
GPT
Basado en el siguiente esquema reaccionante:
GPT
L-alanina + -oxoglutarato ------------------------> glutamato + piruvato
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar la determinacin de GOT en suero normal e ictrico
Realizar la determinacin de GPT en suero normal e ictrico

MATERIALES.
-

- Micro pipetas de 200 ul, 100 ul


Pipetas de 2 ml, 1 ml
Tubos de fotocolormetro
Gradillas
Reloj o cronmetro
Marcador para vidrio
REACTIVOS.
Transaminasas GOT 200 provee:
Sustrato GOT: solucin con 100 mM de L-aspartato y 2 mM de -cetoglutarato en buffer fosfatos 100
mM, pH 7,4
Transaminasas GPT 200 provee:
Sustrato GPT: solucin con 200 mM de dl-alanina y 2 mM de -cetoglutarato en buffer fosfatos 100
mM, pH 7,4
Ambos equipos proveen:
Reactivo 2,4-DNFH: solucin conteniendo 1 mmol de 2,4-dinitrofenilhidracina en cido clorhdrico 1
mol/l
Diluyente para enzimas concentrado: solucin de hidrxido de sodio 4 mol/l
Standard: solucin de piruvato de sodio 2 mmol/l. Para efectuar la curva de calibracin
PROCEDIMIENTO.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

67

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

En dos tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco) y D (Desconocido), Colocar:


B
D
Sustrato (GOT o GPT)
0,5 ml
0,5 ml
Colocar en bao de agua a 37 C 0,5 C unos minutos
Suero
--100 ul
Agua destilada
100 ul
--Mezclar por agitacin suave e incubar exactamente 30 minutos y agregar:
Reactivo 2,4-DNFH
0,5 ml
0,5 ml
Mezclar, dejar 10 minutos a 37 C, luego agregar:
Diluyente para enzimas
5 ml
5 ml
Mezclar por inversin y retirar del bao. Despus de 2 minutos leer en fotocolormetro con filtro verde
(500 550 nm), en espectrofotmetro a 505 nm o Hg 546, llevando el aparato a cero D.O con agua
destilada
Estabilidad de la reaccin final: El color de la reaccin es estable durante 30 minutos por lo que la
absorbancia debe ser leda dentro de este lapso.
Clculo de los resultados
Empleando tablas de conversin
Empleando curva de calibracin
Valores de referencia
Se consideran valores de transaminasas (GOT y GPT) hasta 12 U/l. Si bien se han hallado individuos
normales con valores hasta 18 U/l, los niveles de transaminasas que se encuentren entre 12 y 18 U/l
deben considerarse sospechosos.
RESULTADOS.
CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
Realizar el procedimiento operativo estndar POE de GOT
Realizar el procedimiento operativo estndar POE de GPT
BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

68

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina.

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIPs # 16
UNIDAD IV: Tema 17
TTULO: Determinacin de Fosfatasa y Amilasa srica
FECHA DE ENTREGA: 18va semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 19na semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA
Fosfatasa alcalina: es una enzima ampliamente distribuida en el organismo. En el adulto proviene en
parte del hgado (fraccin termoestable) y en la parte del hueso, sistema reticuloendotelial y vascular
(fraccin termolbil), dando lugar a distintas isoenzimas. La actividad srica de fosfatasa alcalina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

69

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

sea, en condiciones normales, alcanza su mayor actividad srica de fosfatasa alcalina ose, en
condiciones normales, alcanza su mayor actividad en los nios en edad de crecimiento debido a que
esta isoenzima se localiza en los osteoblastos.
Entre las patologas que afectan la actividad srica de fosfatasa alcalina, se pueden citar: carcinomas
metastsicos en hgado y en hueso, colestasis biliar, fenmenos osteoblsticos, trastornos de mala
absorcin acompaados de lesiones ulcerosas, e incluso lesiones en vas de reparacin tales como
infarto agudo de miocardio, infarto pulmonar o renal.
Amilasa: producida en el pncreas excrino y en la glndulas salivales, escinde de los enlaces ax 1-4
glucosdicos de los polisacridos (almidn y glucgeno). Se encuentra elevada en el suero de
pacientes con pancreatitis aguda, alcanzando los valores mas elevadas entre las 24 y 30 horas
posteriores al ataque las 24 horas y 48 horas siguientes.
Tambin se ve aumentando ene este caso la excrecin urinaria de la enzima, persistiendo la
hiperamilasuria 3 a 5 das, luego de que la actividad srica ha alcanzado los niveles normales. Las
parotiditis bacterianas y paperas se asocian tambin con elevaciones en los niveles de amilasa
srica.
Fundamento del mtodo:
La fosfatasa alcalina: del suero hidroliza el sustrato de fenilfosfato de sodio en medio alcalino a pH
9.8 liberando fenol. Este ltimo reacciona con el diazo reactivo de Gomori y el color desarrollado,
medido a 490nm, es directamente proporcional a la actividad enzimtica.
Amilasa: el sustrato, almidn tamponado, se incuba con la muestra, producindose la hidrlisis
enzimtica. Esta de detiene por el agregado de reactivo del yodo, que al mismo tiempo produce color
con el remanente de almidn no hidrolizado. La disminucin de color respecto de un sustrato color.
(Sin muestra) es la medida de la actividad enzimtica, que se expresa en Unidades Amilolticas.
II. PRCTICA
OBJETIVOS
-

Determinar los niveles sricos de fosfatasa alcalina en una muestra normal y una patolgica
Determinar los niveles sricos de amilasa en una muestra normal y una patolgica

MATERIALES.
-

Espectrofotmetro o fotocolorimetro.
Micropipetas y pipetas para medir los volmenes indicados.
Tubos de ensayo y de fotocolorimetro
Bao de agua a 37 C
Reloj o cronometro
Marcador para vidrio
Guantes

REACTIVOS
Fosfatas alcalina
- Sustrato: Comprimidos contenido cada uno 21.6 umol de fenilfosfato de sodio en buffer carbonato
de pH 9.8

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

70

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- Reactivo diazo: comprimidos contenidos cada uno 4.5 mg de naftalen 1.5 disulfonato de la sal
de diazonio del 5- nitro 2 aminoasinol
Amilasa
- Sustrato 1: solucin de almidn 500 mg/l, tamponada a pH 7 con buffer fosfatos 0.1 mol/l en CINa
0.15 MOL/L
- Reactivo de yodo 2: solucin 0.01 eq/l de yodo. En cido clorhdrico 0.02 mol/l
PROCEDIMIENTO.
Fosfatasa alcalina:
En tres tubos de fotocolormetro marcados B (Blanco), S (Standard) y D (Desconocido) colocar:
B

Sustrato
0.5 ml
Preincubar en bao de agua a 37
Suero
-Standard
-Mezclar, incubar exactamente 10
agregar:
Reactivo de color
2.5 ml

0.5 ml
0.5 ml
C unos minutos
-50 ul
50 ul
-minutos (cronmetro) y
2.5 ml

2.5 ml

Mezclar de inmediato cada tubo. Retirar los tubos del bao y leer es espectrofotmetro a 520 nm o en
fotocolormetro con filtro verde, llevando el aparato a cero de absorbancia con agua destilada.
Amilasa:
En dos tubos de fotocolormetro marcados C (Control) y D (Desconocido) colocar:
C
D
1 ml
1 ml
37C y agregar:
-----20 ul
exactos, agregar:
1 ml
1ml
tubos del bao y agregar:
8 ml
8 ml

SUSTRATO 1
Dejar unos minutos en bao de agua a
MUESTRA
Incubar a 37C .A los 7 minutos y medio
REACTIVO
DE
IODO
2
Mezclar por agitacin suave, retirar los
AGUA
DESTILADA

Mezclar por inversin. Leer en fotocolormetro con filtro rojo o en espectrofotmetro alrededor de 640
nm, llevando a cero el aparato con agua destilada.
Estabilidad de la mezcla de reaccin final: El color de la reaccin es estable durante 1 hora por lo que
la absorbancia debe ser leda dentro de ese lapso. Si la temperatura ambiente es superior a 25 C, la
lectura deber efectuarse dentro de los 20 minutos.
Clculo de los resultados
Fosfatasa alcalina UI/l = factor x (D-B)
factor= 200 UI/l
S-B
Amilasa
Amilasa (UA/dl) = C - D X 1000

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

71

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

C
Unidades: Una unidad Amiloltica (UA) es la cantidad de enzima contenida en 10 ml de muestra, que
puede hidrolizar 10mg de almidn en 30 minutos, en las condiciones de la reaccin. En esta tcnica
se incuban 20ul de muestra con 0.5mg de almidn contenidos en 1ml se Sustrato 1 durante 7minutos
y medio, lo que equivale a incubar 100ml de suero con 10.000mg de almidn durante 30minutos.
Para obtener las unidades de actividad amilasica, la fraccin de almidn digerido se multiplica por
1000.
Valores de referencia
Fosfatasa alcalina:
Adultos: 68 240 UI/l
Nios: 100 400 UI/l
Amilasa:
CONDICIN CLNICA
SUERO (UA/dl)
Normal
120
Pancreatitis aguda
300 a 12.000
Pancreatitis crnica
hasta 200
Parotiditis
200-350
Parotiditis c/complicacin
mas de350
Procesos
abdominales
normal
agudos (sin pancreatitis)

ORINA (UA/hora)
260
mas de 900
mas de 300
350-750
mas de750
normal

CONCLUSIONES
EVALUACIN
1. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de la determinacin de Fosfatasa Alcalina y
responder lo siguiente:
- Porqu en los nios los valores de fosfatasa alcalina son mas elevados que en los adultos?
- Cul es el valor diagnstico de la fosfatasa alcalina?
- Qu otras pruebas de laboratorio contribuyen al diagnostico del dao heptico?
2. Realizar el procedimiento operativo estndar POE de la determinacin de Amilasa y responder
lo siguiente:
- Cul es el comportamiento de la amilasa en una pancreatitis?
- Qu otras pruebas qumicas se relacionan con un aumento de amilasa?
- En un ataque de pancreatitis hasta qu tiempo se puede tomar la muestra para que tengan
valor los resultados?
- Cmo influye la pancreatitis en el metabolismo de la glucosa?
- Sobre qu enlaces glucosdicos acta la amilasa?
BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

72

DE

B O L I V I A

edicin.

Editorial

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

PROGRAMA DE CONTROL DE CALIDAD


GUA DE INVESTIGACIN PRCTICA - GIPs # 17
UNIDAD V: Tema 19
TTULO: Lquido cefalorraqudeo
FECHA DE ENTREGA: 19na semana de clases
PERODO DE EVALUACIN: 20ra semana de clases
I. FUNDAMENTACIN TERICA

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

73

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

El lquido cefalorraqudeo (LC) se forma por una filtracin del plasma en lo plexos coroideos de
cerebro. Este evento no es de simple filtracin, sino que requiere la secrecin activa por parte de las
clulas de los plexos coroideos. El LC normal es completamente transparente. Con una densidad
entre 1003 -1008 normalmente el contenido en protenas es bajo 20 45 mg/100ml Con una relacin
albmina/globulina de 3:1 patolgicamente hay un caracterstico aumento de las protenas,
especialmente de la globulina. En las meningitis: el contenido de protenas puede elevarse a 125 mg
o a ms de 1 g/100ml.
Diversos padecimientos cerebrales muestran elevaciones de protenas por encima de los normal, que
fluctan entre 20 y 30 mg/100ml. La prueba de globulina de Pandy y la prueba de oro coloidal de
lange son pruebas diagnosticas que se basan en las alteraciones de las protenas del lquido
cefalorraqudeo.
El azcar en LC es un poco menor que en la sangre 50 85 mg/100ml se encuentra elevado en la
encefalitis. En la sfilis del sistema nerviosa central, en los abscesos y en los tumores. Est
disminuido en las meningitis purulentas.
Normalmente la concentracin de cloruros es de 700 750 mg/100ml o de 120 130 mEq/litro. Por lo
general se encuentran disminuidos en las meningitis y no muestran alteraciones en la sfilis, en las
encefalitis, en la poliomielitis y en otras enfermedades del sistema nervioso central. Los cloruros son
especialmente bajos en las meningitis tuberculosas. La concentracin de calcio en el LC humano
normal es de 2043 +/- 0.005 mEq/ litro, la del magnesio es de 2.40 +/- 0.14 mEq/l. Como se ve, el
contenido en calcio del LC es considerablemente menor que el del suero, mientras que el contenido
en magnesio es ligeramente mayor, Se ha encontrado que la relacin entre calcio y el magnesio es
de 1.01+/- 0.06
II. PRCTICA
OBJETIVO
Realizar los exmenes fsico, qumico, citolgico y bacteriolgico.
MATERIALES.
-

Frasco con tapa


Tira reactiva
Tubos de ensayo
Pipetas
Gradillas
Bao Maria
Probeta
Espectrofotmetro
Micropipeta
Cmara de Neubauer
Centrfuga
Tubos de hemlisis

REACTIVOS.
-

Reactivo para glucosa


Reactivo para protenas

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

74

DE

B O L I V I A

FACULTAD DE CIENCIAS DE LA SALUD


CARRERA DE BIOQUMICA Y FARMACIA

cido actico
Agua destilada
Liquido de Turk
Giemsa
Alcohol
Reactivo para tincin de Gram
Reactivo para tincin de Ziehl Neelsen

PROCEDIMIENTO.
Se entregar un formato al estudiante
RESULTADOS.
CONCLUSIONES.
EVALUACIN.
Qu caractersticas fsicas son importantes en la muestra?
En caso de accidente traumtico que es lo que esperamos encontrar?
Una alteracin de un LC con qu patologas se puede asociar?
Cmo se presenta un LC normal?
Realizar el Procedimiento operativo estndar POE para Liquido cefalorraqudeo

1.
2.
3.
4.
5.

BIBLIOGRAFA
- Angel, M. Angel, M. Interpretacin Clnica del Laboratorio. Quinta edicin. Editorial
Panamericana. Argentina. 2000. Signatura topogrfica COD 616.075 8 M47 c.2
- Balcells Alfonso La clnica y el laboratorio Ed. Masson. Espaa 2001. Signatura topogrfica COD
616.075 8 B18 c.4
-

BIBLIOGRAFA COMPLEMENTARIA
Chernecky Berger.1999. Pruebas de Laboratorio y Procedimientos Diagnsticos, 2 Edicin,
MexicoDF.
Ergurta Collao, J. Tcnicas de Laboratorio Clnico. Tercera edicin. Editorial Urquizo. La Paz
Bolivia. 1986.
Jhon B. Henry. 2005. El laboratorio en el Diagnostico Clnico, 1 Edicin Madrid Espaa.
Lynch, M. Mtodos de Laboratorio. Segunda edicin. Editorial Interamericana. Mxico. 1988.
Susan King S. y Marjorie Schaub D. 2008. Anlisis de orina y de los lquidos corporales, 5ta.
Edicin, Editorial mdica Panamericana.
V. Fattorusso y O. Ritter. 2001. Vademcum clnico del diagnstico al tratamiento. Editorial El
Ateneo.
Wallach Jacques. 2007. Interpretacin clnica de pruebas diagnsticas. 8va. Edicin. USA.
WIENER. Tcnicas de Laboratorio. Buenos Aires Argentina

U N I V E R S I D A D

DE

A Q U I N O

75

DE

B O L I V I A

You might also like