Universidad ECCI. Peuela, Ramrez,Uribe.

Informe de Laboratorio N 6

INFORME DE LABORATORIO N 6 (EXTRACCIN DE CIDOS NUCLICOS)

RESUMEN:
Todos los organismos vivientes contienen ADN en el ncleo de
sus clulas. Muchos estudios biomoleculares comienzan con
la extraccin de los cidos nucleicos. Como extraer ADN de un
ser humano o de un ser superior es relativamente difcil y caro.
La extraccin de ADN requiere hacer varias series de etapas
bsicas. En primer lugar tienen que romperse la pared celular
y la membrana plasmtica para poder acceder al ncleo de la
clula. Despus debe romperse igual la membrana nuclear
para dejar libre el ADN. Por ltimo hay que proteger el ADN de
enzimas que puedan disminuirlo y para aislarlo hay que hacer
que se precipite. El ADN es soluble en agua, pero cuando se
encuentra en alcohol se desenrolla y precipita en la interface
entre el alcohol y el agua. Adems de permitirnos ver el ADN,
el alcohol separa el ADN de otros componentes celulares, los
cuales son dejados en la solucin acuosa. La sal evita la unin
de las protenas al ADN.

En la naturaleza existen solo dos tipos de cidos nucleicos:

El ADN
(cido
desoxirribonucleico) y
el ARN
(cido
ribonucleico) y estn presentes en todas las clulas.
Su funcin biolgica no qued plenamente confirmada hasta
que Avery y sus colaboradores demostraron en 1944 que el
ADN era la molcula portadora de la informacin gentica.
Los cidos nucleicos tienen al menos dos funciones: trasmitir
las caractersticas hereditarias de una generacin a la
siguiente y dirigir la sntesis de protenas especficas.

PALABRAS CLAVES: cidos nucleicos, Biuret, nucletidos,

ADN, ARN.
ABSTRACT:
All living organisms contain DNA in the nucleus of cells. Many
biomolecular studies begin with the extraction of nucleic acids.
DNA as a human being or a superior extract is relatively
difficult and expensive.
DNA extraction requires making several series of basic steps.
First they have to break the cell wall and the plasma
membrane to enter the cell nucleus. It must be broken just
after the nuclear membrane to release the DNA. Finally we
must protect DNA from enzymes that can decrease and to
isolate it have to make rush. DNA is water soluble, but when it
is unrolled and alcohol precipitates is the interface between
alcohol and water. In addition to allowing us to see the DNA,
alcohol separates DNA from other cellular components, which
are left in the aqueous solution. The salt prevents binding of
proteins to DNA.

Tanto la molcula de ARN como la molcula de ADN tienen

una estructura de forma helicoidal.
Qumicamente, estos cidos estn formados, como dijimos,
por unidades llamadas nucletidos: cada nucletido a su vez,
est formado por tres tipos de compuestos:
1. Una pentosa o azcar de cinco carbonos: se conocen dos
tipos de pentosas que forman parte de los nucletidos, la
ribosa y la desoxirribosa, esta ltima se diferencia de la
primera por que le falta un oxgeno y de all su nombre. El
ADN slo tiene desoxirribosa y el ARN tiene slo ribosa, y de
la pentosa que llevan se ha derivado su nombre, cido
desoxirribonucleico y cido ribonucleico, respectivamente.

KEY WORDS: Nucleic acids, Biuret, Nucleotides, DNA, RNA.

OBJETIVOS:
1) Lisar clulas vegetales para la extraccin de cidos
nuclicos.
2) Extraccin de cidos nuclicos a partir de levadura.
MARCO TERICO
CIDOS NUCLICOS
Los cidos nucleicos (AN) fueron descubiertos por Freidrich
Miescher en 1869.

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resultar beneficioso, perjudicial o intrascendente.
El ADN de un organismo podra clasificarse en dos: el que
codifica las protenas y el que no codifica. En muchas
especies de organismos, slo una pequea fraccin del total
de la secuencia del genoma codifica protenas. Por ejemplo,
slo un 3% del genoma humano consiste en secuencias
(conocidas como exones) que codifican protenas. La funcin
del resto no se conoce con certeza hasta el momento, aunque
se sabe que algunas secuencias se unen a ciertas protenas
que tienen un papel importante en el control de los
mecanismos de transcripcin y replicacin. Estas secuencias
se llaman frecuentemente reguladoras, y se estn
desarrollando muchas investigaciones en esta rea ya que
slo se ha identificado una pequea fraccin de ellas. La
presencia de esa gran cantidad de ADN no codificante en
genomas eucariticos y las diferencias en tamao de los
genomas representan an una incgnita que hay que resolver

2. Una base nitrogenada: que son compuestos anillados que

contienen nitrgeno. Se pueden identificar cinco de ellas:
adenina, guanina, citosina, uracilo y timina.

MATERIALES Y EQUIPOS
*Beaker de 100 mL
*Agitador de vidrio
*Embudo de vidrio
*Espatula
*Gradilla
*Pinza para tubo
*Mortero con pistilo
*Pipeta Pasteur
*Probeta de 100 mL
*Tubos de ensayo
*Vidrio de Reloj
*Alcohol etlico
*NaCl
*Jabn lavaloza (lquido)
*Papel filtro
*Limn
*Banano maduro
*Bolsas de t
*Levadura

3. Un radical fosfato: es derivado del cido fosfrico (H3PO4-).

Los distintos tipos de ARN:
El ARN se encuentra, en una clula tpica, en una cantidad 10
veces mayor que el ADN. El azcar presente en el ARN es la
ribosa. Esto indica que en la posicin 2' del anillo del azcar
hay un grupo hidroxilo (OH) libre. Por este motivo, el ARN es
qumicamente inestable, de forma que en una disolucin
acuosa
se
hidroliza
fcilmente.
En las clulas, se encuentran varios tipos de ARN, los cuales
poseen distinta funcin y tamao. Algunos de ellos, son:
ARN mensajero (ARNm): Se sintetiza sobre un molde de ADN
por el proceso de transcripcin. Este ARN pasa al citoplasma y
sirve de pauta para la sntesis de protenas (traduccin).
ARN ribosmico (ARNr): El RNA ribosmico est presente en
los ribosomas, orgnulos intracelulares implicados en la
sntesis de protenas. Su funcin es leer los ARNm y formar la
protena
correspondiente.
ARN de transferencia (ARNt): Son cadenas cortas de una
estructura bsica, que pueden unirse especficamente a
determinados aminocidos.

1.

EXTRACCIN DE CIDOS NUCLICOS A PARTIR DE

BANANO
PROCEDIMIENTO

1) Coloque medio banano maduro en el mortero.

2) Adicione 10 mL de agua destilada y macere por 5 minutos.

El ADN como almacn de informacin

La molcula de ADN es un almacn de informacin que se
trasmite de generacin en generacin, conteniendo toda la
informacin necesaria para construir y sostener el organismo
en el que se encuentra.
Las principales implicadas en este proceso son las protenas.
Estas pueden ser estructurales como las protenas de los
msculos, cartlagos y pelo o bien funcionales como las de la
hemoglobina, o la gran cantidad de enzimas del organismo.
La funcin principal de la herencia es la transmisin del ADN,
una especie de receta para la fabricacin de protenas. En
ocasiones, la modificacin del ADN (mutaciones) provoca un
cambio en el funcionamiento de la protena, que puede

3) En un erlenmeyer coloque el contenido de la bolsa de t.

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4) Pesar un gramo de NaCl y adicionar al erlenmeyer.

8) Filtrar la mezcla hasta obtener 5 mL de la solucin en un
tubo de ensayo.

5) Adicione 5 mL de jabn lavaloza lquido en el erlenmeyer

sin generar espuma.
9) Coloque en un tubo de ensayo 2 mL del filtrado anterior y
agregue 4 mL de alcohol etlico al 95%.

6) Agregue a la solucin anterior 5 g de banano macerado.

10) Dejar reposar la mezcla por 5 minutos.

11) Con la ayuda del agitador de vidrio tome la sustancia

blanquecina formada de ADN.

7) Mezclar por 5 minutos sin producir espuma

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El reactivo de Biuret se pretende utilizar para la determinacin
o identificacion de protenas, pptidos que presenten enlaces
pepiticos(2 o mas) en una muestra .
El agua no tiene ningunos de los factores que detecta este tipo
de pruebas por eso el tubo de ensayo con la reaccin
Negativa no va a tornar ningn color.
En el otro tubo podemos observar un tono de color verde, La
intensidad de coloracin violeta es directamente proporcional a
la cantidad de protenas (enlaces peptdicos) es decir, que hay
una reaccin negativa pese al cambio de color del mismo.
2.

12) Tome una porcin de esta sustancia en un tubo de ensayo

y adicione 1 mL de Biuret.

EXTRACCIN DE CIDOS NUCLICOS A PARTIR DE

SALIVA.

Se colocaron 10 ml de agua en la boca de uno de los

estudiantes , realizando un enjuague en las mejillas , esto se
hizo 3 veces y a la tercera vez se recogio el liquido del
enjuague en un breaker
Posteriormente se e adicionaron naCl y jabon liquido y etanol
frio.

13) En otro tubo de ensayo coloque 1 mL de agua destilada y

adicione 1 mL de Biuret. Conserve el control negativo para la
prueba 2.

14) Agitar, dejar reposar 10 minutos y anotar los resultados.

RESULTADO

RESULTADO
Luego se dejo reposar
esto durante unos 7 minutos
arpoximadamente y se nota como se separan los compusto y
se comienzan a formar canillas o filamentos de ADN.

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Mezclar, filtrar y conservar la levadura. Repetir el filtrado y
conservar nuevamente la pulpa.

En un beaker coloque 50 mL de agua fra adicionar 1 g de

NaCl, 120 mL de etanol y 5 mL de jabn lavaloza lquido.

Luego se tomaron 5ml de esta sustancia y se introducioren en

un tubo de Ensayo , donde se le aplico buret y se hizo una
comparacion con El control negativo de buriet.
3.

EXTRACCIN DE CIDOS NUCLICOS A PARTIR DE

LEVADURA

Mezclar 5 g de levadura con 50 mL de agua destilada, 1 g de

NaCl y 2 mL de zumo de limn.

Agregar la pulpa y mezclar por 10 minutos. Adicionar

nuevamente 1 g de NaCl y agitar 5 minutos ms

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RESULTADO
[1] En Lnea: cidos Nucleicos
Disponible en http://porquebiotecnologia.com.ar

Considerando que la levadura contienen una elevada porcion

acido nucleicos
nos proponemos aislar parcialmente e
identificarlos .

[2] En Lnea: Composicin qumica y estructura de los cidos

nucleicos.
Disponible en http://www.ecured.cu/acido_nucleico.

CONCLUSIONES
[3] Otero, M.A.; Cabello, A.J.; Vasallo, M.C.;Garca, L.; Lpez,
J.C. Tecnologa para la utilizacin integral de la levadura
en la industria alimenticia. Archivos Latinoamericanos de
Nutricin (ALAN) 50 (4) ISSN 0004-0622 SciElo. 200.

* Los cidos nucleicos son las biomolculas portadoras de la

informacin gentica. Tienen una estructura polimrica, lineal,
cuyos monmeros son los nucletidos.
* Los cidos nucleicos resultan de la polimerizacin de
monmeros complejos denominados nucletidos. Un
nucletido est formado por la unin de un grupo fosfato al
carbono 5 de una pentosa. A su vez la pentosa lleva unida al
carbono 1 una base nitrogenada.

[4] Wagner, J.R.; Otero, M.A. Protenas y aminocidos de

levaduras en: (M.A. Otero-Rambla, J.R. Wagner, I. Guerrero
Legarreta, eds) Las levaduras y sus productos derivados como
ingredientes en la industria de alimentos. Universidad
Nacional de Quilmes (Argentina) p. 163-180; Serie Nuevos
Enfoques en Ciencia y Tecnologa ISBN 978-987-558-156-2,
2008.

REFERENCIAS