IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS, PROTENAS Y LIPIDOS

EMPLEANDO LA COLORACIN DE REACCIONES QUMICAS Y

MICROSCOPA DE LUZ.

ALMANZA JIMNEZ YESIKA

GUERRA GARCS JUAN
TAJN BAENA MARCELA

DOCENTE: CAROLINA ARANGO RIVAS

UNIVERSIDAD DE CRDOBA
FACULTA DE CIENCIAS BSICAS
PREGRADO EN QUMICA
CURSO DE BIOLOGA GENERAL
MONTERA-CRDOBA
2016
INTRODUCCIN: Qumicamente un carbohidrato es diferente de un lpido y de
una protena. Cada una de estas biomolculas tiene sus propiedades distintivas
que permiten diferenciar a una de otra. Por ejemplo, los carbohidratos tienen
muchos grupos hidroxilo y carbonilo, los lpidos son altamente hidrofbicos y
las protenas tienen en su constitucin enlaces peptdicos que estn ausentes
en las otras clases de biomolculas.(UNAM, 2014)
Todos los organismos vivos poseen carbohidratos, protenas y lpidos. Estas
molculas son frecuentemente llamadas macromolculas. Todas las
macromolculas son polmeros sintetizados a partir de la unin de bloques
estructurales (compuestos orgnicos) ms sencillos, denominados monmeros.
Los polmeros pueden ser degradados en sus monmeros constituyentes
mediante reacciones de hidrolisis.(lvarez, 2006)
Las macromolculas tienen diferentes estructuras y propiedades qumicas. Por
ejemplo, los lpidos(compuestos de cidos grasos) poseen muchos enlaces CH y relativamente poco oxgeno, mientras que las protenas(compuestas de
aminocidos) poseen amino (NH3+) y carboxilo (-COOH). Estas subunidades
caractersticas y grupos qumicos, le confieren diferentes propiedades qumicas
a las macromolculas. Por ejemplo, los monosacridos tales como la glucosa

son polares y solubles en agua, mientras que los lpidos son compuestos no
polares e insolubles en agua (Moreno, 2009) que son los que se estudiaremos
por medio de parmetros fsico como el color, producto de reacciones qumicas
que se llevan a cabo por medio de la dosificacin de reactivos especficos.
La anterior actividad de laboratorio busca la determinacin de forma cualitativa
de protena, carbohidratos y lpidos, basndonos en pruebas y reacciones
qumicas caractersticas que produzcan cambio visible de color y as comparar
con los parmetros estipulados bibliogrficamente, asimismo se pretende
identificar a nivel microscpico lo anteriormente mencionado.
OBJETIVOS:
General:

Identificar mediante reacciones qumicas de coloracin, la presencia de

macromolculas esenciales para los seres vivos; Carbohidratos, Lpidos
y Protenas.

Especficos:

Reconocer reacciones qumicas de coloracin y relacionar la presencia

de carbohidratos, protenas y lpidos con parmetros establecidos
tericamente.
Estudiar los tipos de reacciones y los mecanismos por los cuales se dan
en cada uno de los procesos de determinacin cualitativa.
Clasificar qumicamente los reactivos utilizados para cada identificacin.

METODOLOGA
La actividad de laboratorio fue llevada a cabo por medio del empleo de
sustancias qumicas que reaccionaron con los analtos manifestando
coloracin. A manera general, en cuanto a ejecucin la experiencia fue
relativamente sencilla y a continuacin se describir detallada pero
sucintamente el proceso realizado para cada identificacin.
1. DETERMINACIN CUALITATIVA DE AZCARES.
Inicialmente su dispuso de 7 tubos de ensayos previamente lavados y
secados. Se procedi rotulando los mismos del nmero 1 al nmero 7 y
luego se agreg en estricto orden 2mL de: almidn, glucosa, jugo, leche,
orina, sacarosa y macerado de fruta. Siguiente a esto, a cada tubo se
adiciono 1mL de solucin de Benedict y se llevaron bao de mara por 3
minutos hasta ebullicin. Se observ y se tomaron las correspondientes
anotaciones.
2. DETERMINACIN CUALITATIVA DE PRESENCIA DE ALMIDN

En un tubo de ensayo se deposit 2 ml de solucin de almidn, se le

agregaron 4 gotas de disolucin de Lugol, y finalmente fue sometido a
calentamiento hasta ebullicin. En otro tubo de ensayo se prepar un
solucin acuosa de macerado de pan aproximadamente de 3 ml, a esta
solucin se le agregaron 4 gotas de Lugol
3. DETERMINACIN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTENAS.
Se tomaron 4 tubos de ensayos debidamente rotulados con los nmeros del
1 al 4, luego se deposit en estricto orden en cada tubo 3mL: yema de
huevo, clara de huevo, solucin de gelatina sin sabor y leche. Posterior a
esto a cada tubo se adicion reactivo de Biuret, o bien sus componentes
individuales como 1mL de CuSO4 + 2mL de NaOH concentrado. Se agit y
se observ el cambio de color.
En un beacker que contena clara de huevo, se le adiciono 10mL de HCl
diluido y se observ la reaccin.
4. IDENTIFICACIN DE LPIDOS.
Se depositaron 5 ml de agua destilada en un tubo de ensayo y se le
adiciono una pisca de sudan. Al tubo anterior de agua destilada con sudan
se le agrego 2 ml de aceite vegetal, seguidamente se dej reposar durante
5 min.
En un tubo de ensayo se deposit una porcin de grasa animal, por el
hecho de estar solida fue sometida a calentamiento hasta que la misma se
derritiera, finalmente se le agregaron unas gotas de sudan y se agito
5. OBSERVACIN MICROSCPICA.
Para observar los grnulos de almidn en el microscopio ptico, se utiliz
una cuchilla de afeitar logrando un raspado muy fino del tubrculo (papa) y
se coloc sobre un portaobjeto, de manera inmediata se le adicion una
gota de Lugol y se cubri con un cubreobjetos, llevndolo finalmente sobre
la platina donde se observaron los grnulos con el objetivo de 40X.
No fue posible hacer un corte del tejido adiposo, as que se tom una
mnima cantidad de grasa slida con un palillo y se esparci sobre un rea
determinada del portaobjeto de manera uniforme, adicionndole una gota
de Sudn IV y colocando cuidadosamente el cubreobjetos sobre ella. As,
se observ en el microscopio ptico la muestra preparada bajo el objetivo
seco dbil (10X), y luego bajo el objetivo seco fuerte (40X).
RESULTADOS Y DISCUCIN
Luego de realizar cada prueba de identificacin se obtuvieron datos netamente
cualitativos, los cuales se reflejaran en el presente tem.

1 IDENTIFICACIN CUALITATIVA DE AZCARES

Los datos obtenidos luego de realizar la identificacin de azcares se exponen
en la siguiente tabla junto a su respectiva comparacin con la tabla de
referencia.
TUBO

PRUEBA DE BENEDICT
COLOR INICIAL COLOR FINAL RESULTADO
1. ALMIDON
Azul claro
Azul
Negativo
2. GLUCOSA
Azul claro
Naranja-rojizo
Mayor 2.0%
3. JUGO DE
Verde plido
Naranja-rojizo
Aprx. 1.5%
GUAYABA
cremoso
4. LECHE
Azul cremoso
Verde plido
Aprx 0.5 %
5. ORINA
Verde marino
Verde-Azul
Ligeros vestigios
claro
de glucosa
6. SACAROSA
Azul claro
Azul claro
Negativo
7. MACERADO DE
Azul claro ms
Mostaza1.5 %
GUAYABA
intenso
amarillo
Tabla 1: Resultados de identificacin de azcares.
Los azcares reductores son aquellos que, como la glucosa, fructosa, lactosa y
maltosa presentan un carbono libre en su estructura y pueden reducir, en
determinadas condiciones, a las sales cpricas. Como bien ocurre en la prueba
de Benedict en la que se emplea una solucin que contiene principalmente
CuSO4 que le atribuye un color azul claro inicialmente. Al enfrentarse este
reactivo con un azcar reductor que posee electrones disponibles para donar,
el cobre acepta estos electrones y se reduce, por lo que se torna marrn
anaranjado. Durante este proceso, el ion cobre azul (II) se reduce a ion cobre
rojo (I). Mientras que el cobre se reduce, el azcar reductor en cuestin dona
sus electrones oxidndose.
Dirigindonos a los casos trabajados en la experiencia, observamos que para
el almidn y la sacarosa arrojaron un resultado negativo, debido a que en su
estructura no tienen grupo aldehdo o un grupo cetnico libre lo que los clasifica
como glcidos de reservas; la sacarosa no es un azcar reductor y tampoco
posee un extremo reductor con electrones libres. Caso contrario para las
dems muestras estudiadas si manifestaron presencia de azucares reductores
lo cual se evidenci por los cambios y grados de coloracin, ejemplo de la
glucosa que mostr una grado mayor al 2% de presencia de azcares
reductores dando color rojo ladrillo. El jugo de guayaba evidenci
aproximadamente 1.5% en presencia de azucares reductores lo que se puede
explicar teniendo en cuenta que este no estaba endulzado previamente, por lo
que esta manifestacin es debida a la fructosa, levemente reductora, de igual
forma sucedi en el macerado de guayaba. Para el caso de la leche se obtuvo
un aproximado de 0.5% en presencia de azucares reductores ya que en la
leche se encuentra la lactosa (glucosa + galactosa). Por ultimo en la orina la

cual mostr un color final azul-verdoso traduce unos leves vestigios de

azucares los cuales son eliminados naturalmente de nuestro cuerpo. Con lo
que podemos observar a manera general como de acuerdo a la cantidad de
monosacridos presentes en dichas sustancias la coloracin varia, debido a
que, todos los monosacridos y la mayora de los disacridos pueden ser
oxidados, lo cual ocurre al realizar la prueba de Benedict.

Figura 1: Esquema de reaccin para una prueba positiva con el reactivo de

Benedict. (HERREA, C. Qumica de alimentos, manual de laboratorio Pg. 12)
2 DETERMINACIN DE LA PRESENCIA DE ALMIDN
En los tubos que contienes solucin de almidn y macerado de pan al agregar
4 gotas de yodo (lugol) nos dio una coloracin azul negruzco esto se debe a
que en esta reaccin el yodo entra a la estructura helicoidal del almidn, es
decir, que los tomos de yodo se introduce entre las espirales provocando la
absorcin o fijacin de yodo en las molculas del almidn (amilosa), el cambio
de color en el macerado de pan nos indica que hay presencia de almidn.
La reaccin del almidn con el yodo, no es una verdadera reaccin qumica
sino una reaccin fsica que a su vez se forma un compuesto de inclusin que
altera las propiedades fsicas de esta molcula, indicndonos una coloracin
azul negro
Este complejo que se forma es sensible a la temperatura, ya que si se calienta
el tubo, el color desaparece esto se debe a que en las espiras del almidn se
produce una modificacin y el yodo se libera.
Cuando el tubo est en una temperatura baja las espiras se reorganizan y se
vuelve a ver el color azul negro y al unirse dentro de estas cadenas provoca un
efecto de color de los enlaces en el rango del espectro de la luz de tonos
naranjas, que reflejados a nuestros ojos lo percibimos como color azul - negro,
este resultado tambin se debe a la formacin de cadenas de poliyoduro a
partir de la reaccin del almidn con el yodo presente en la solucin de un
reactivo llamado Lugol
3 DETERMINACIN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTENAS.

Los resultados obtenidos luego de la determinacin de protenas se expones

tabulados en la siguiente tabla.

Tubo
1

Muestra
Yema de huevo

Coloracin
Violeta
oscuro
fuerte
2
Clara de huevo
Violeta intenso
3
Gelatina
sin Violeta brillante
sabor
intenso
4
Leche
Violeta
suave
cremoso
Tabla 2: resultados de las prueba de identificacin de protenas.
La presencia de protenas en una muestra se puede determinar mediante la
reaccin del Biuret. El reactivo de Biuret contiene sulfato de Cobre (II) y sosa.
El Cu, en un medio fuertemente alcalino, se une con los enlaces peptdicos
formando un complejo de color violeta cuya intensidad de color depende de la
concentracin de protenas. En otras palabras, la reaccin se basa en la
formacin de un compuesto de color violeta, debido a la formacin de un
complejo de coordinacin entre los iones Cu 2+ y los pares de electrones no
compartidos del nitrgeno que forma parte de los enlaces peptdicos. Da
positiva esta reaccin en todos los compuestos que tengan dos o ms enlaces
peptdicos consecutivos en sus molculas.

Figura 3: Complejo formado en la prueba de Biuret, responsable del color.

En la experiencia se evidenci un resultado positivo para los tubos que
contenan yema, clara, leche y gelatina sin sabor dando coloraron violetapurpura. Ahora bien, basndonos en la intensidad del color dado en cada
muestra se puede inferir que la yema de huevo (globulina) es la que ms alto

contenido de protena posee, seguidamente la clara de huevo (albmina), la

leche (casena) y la gelatina sin sabor. Por lo que el reactivo de Biuret se
encontr reaccionando formando complejos con las protenas anteriormente
mencionadas.

Figura 4: reaccin de la Albmina de la clara de huevo con Biuret.

La casena es una protena conjugada de la leche del tipo fosfoprotena que se
separa de la leche por acidificacin y forma una masa blanca. Las
fosfoprotenas son un grupo de protenas que estn qumicamente unidas a
una sustancia que contiene cido fosfrico. En la casena la mayora de los
grupos fosfato estn unidos por los grupos hidroxilo de los aminocidos serina
y treonina. La casena en la leche se encuentra en forma de sal clcica
(caseinto clcico). La casena representa cerca del 77% al 82% de las
protenas presentes en la leche y el 2,7% en composicin de la leche lquida.

Figura 5: Reaccin de la Casena de la leche con Biuret.

COAGULACIN DE PROTENAS DE LA CLARA DE HUEVO CON HCl.
Al agregar cido clorhdrico diluido a la clara de huevo, despus de un tiempo
se pudo notar que la solucin pas de ser clara, a tornarse blancuzcaamarillenta, debido a la coagulacin de la protena presente en la clara de
huevo. Dado que en la disolucin de protenas se produce cambios de pH por
la adicin del cido clorhdrico, la solubilidad de las protenas se ven reducida
hasta el punto de producirse su precipitacin. Esto se debe a que los enlaces
que mantienen la conformacin globular se rompen y la protena adopta la
conformacin filamentosa. De este modo, la capa de molculas de agua no
recubre completamente a las molculas proteicas, las cuales tienden a unirse
entre s dando lugar a grandes partculas que precipitan. Las protenas que se
hallan en ese estado no pueden llevar a cabo la actividad para la que fueron
diseadas, en resumen, no son funcionales. Esta variacin de la conformacin
de las protenas se denomina desnaturalizacin.

4 IDENTIFICACIN DE LPIDOS.
Se observ la formacin de dos fases luego de adicionar Sudan al agua. Esto
se debe a que el Sudan III pertenece al grupo de colorantes indiferentes, que
son aquellos que no tienen afinidad por estructuras cidas o bsicas y son
insolubles en el agua.
Al agregar aceite vegetal se observ dos fases, una en la parte superior teida
de color rojo y otra en la parte inferior transparente, por lo observado se puede
decir que el sudan solo es soluble en grasas.
Esto se debe a la baja solubilidad de los lpidos por su estructura qumica
fundamentalmente hidrocarbonada, el cual contiene cantidades de enlaces C-H
y C-C de naturaleza covalente y su momento dipolar es mnimo. As, el agua al
ser una molcula muy polar, con gran facilidad para formar puentes de
hidrgeno, no es capaz de interaccionar con estas molculas y siendo est
ms densa, quedar en el fondo y el aceite arriba. Por otro lado, el color rojo en
la parte superior, se da porque los lpidos se colorean con este reactivo debido
a su baja polaridad y gracias a las interacciones intermoleculares de tipo
puente H y de London (cadena hidrocarbonada) entre los lpidos y dicho
reactivo.
Para la grasa animal se observ una coloracin naranja.
Los colorantes para grasas son ms solubles en las propias grasas que en el
medio en el que van disueltos. As, al baar la grasa con la solucin del
colorante, ste tiende a disolverse en la grasa que se va cargando del
colorante. Por regla general estos colorantes siempre van en solucin
alcohlica o bien en una mezcla de alcohol/acetona o alcohol/agua.
5 MICROSCOPA
Cmo se observa en la figura 5.1 bajo el objetivo seco dbil, hay una
abundancia de puntos cono de coloracin morado-oscuro debido al Lugol. Este
se adiciona con el propsito de tinturar los grnulos de almidn presentes en la
papa, logrando una mejor visibilidad de cada grnulo. Los puntos conos o
grnulos mencionados son conocidos como amiloplastos un tipo de
leocoplastos. Estn presentes en el tubrculo en estudio, debido a su funcin
especfica: almacenar el almidn como reserva.
La grasa animal observada es el resultado de la fusin del tejido adiposo, la
cual es muy rica en cidos grasos insaturados. Este tejido se encuentra
formado por clulas denominadas adipositos.
En la figura 5.2 se visualiza una poblacin de adipositos de un color oscuro en
consecuencia de la adiccin de sudan IV mediante el objetivo seco dbil (10X).
Mientras que con el objetivo seco fuerte (40X), se evidenci en el campo visual
los espacios intercelulares sin teir debido a la ausencia de grasas, que a su

vez estaban rodeados de capsulas teidas, ya que slo hay presencias de

lpidos en el medio intracelular, concretamente en el citoplasma.
La necesidad de anexar a la muestra una gota de sudan IV es la misma que en
la microscopia de los grnulos de almidn, dicho colorante permite visualizar la
presencia de lpidos fcilmente por medio del microscopio ptico.
COMPLEMENTO DE RESULTADOS.
1 Qu reactivos emple para identificar?
a) Almidones
b) Azucares reductores
c) Protenas
d) Lpidos
Para identificar las macromolculas mencionadas en el tem, se emple: Lugol,
reactivo de Benedict, reactivo de Biuret y Sudn, respectivamente.
2 Qu es un azcar reductor? Cite ejemplos de azcares reductores y no
reductores.
Es un trmino qumico para un azcar que acta como un agente reductor y
puede donar electrones a otra molcula. Especficamente, un azcar reductor
es un tipo de carbohidrato o azcar natural que contiene un grupo aldehdo o
cetona libre. Es decir, un monosacrido (glucosa, fructosa y galactosa).
Algunos disacridos, como la sacarosas, son azucares no reductores, lo que
significa que no pueden donar electrones a otras molculas. La sacarosa es
componente de dos azucares reductores (glucosa y fructosa), y no contiene
grupo carbonilo libre.
3 Cules son los componentes del reactivo de Benedict? Qu reaccin
produce cuando se calienta el tubo de ensayo que contiene el reactivo de
Benedict y glucosa? Cul es la naturaleza del precipitado de color rojo
ladrillo que se forma en la anterior reaccin?
El reactivo de Benedict est constituido por una disolucin de sulfato de cobre
(II), citrato de sodio y carbonato de sodio. Cuando se calent el tubo que
contena la glucosa el Cu2+ que tiene color azul pasa a Cu +, que precipita de la
solucin alcalina como Cu2O de color rojo-naranja. El fundamento de esta
reaccin radica en que en un medio alcalino, el ion cprico (otorgado por el
sulfato cprico) es capaz de reducirse por efecto del grupo Aldehdo del
azcar (CHO) a su forma de Cu +. Este nuevo ion se observa como un
precipitado rojo ladrillo correspondiente al xido cuproso (Cu 2O).
4 a qu se debe la desaparicin del color azul violceo de la solucin de
almidn cuando se calienta hasta ebullicin? Por qu aparece
nuevamente el color cuando la anterior solucin se enfra?
Al suministrar calor las uniones por las cuales est constituido el Almidn
(Amilosa y Amilopectina) se rompen parcialmente dando como resultado la
decoloracin del Lugol que es le reactivo empleado para la identificacin.

Cuando se enfra nuevamente se produce un reagrupamiento de estas

uniones debido a la baja de temperatura volviendo lentamente en color
violceo.
5 De acuerdo con la coloracin obtenida en la identificacin de protenas
Cul de las muestras estudiadas tiene mayor concentracin de
protenas? Explique.
Para esta determinacin, la intensidad de color es proporcional a la cantidad
de protena presente, en este orden de ideas, la yema de huevo es la muestra
con mayor contenido de protena, seguida de la clara, la leche y por ltimo la
gelatina.
CONCLUSIONES.
Teniendo en cuenta los resultados obtenidos y conjuntamente sus
interpretaciones, se puede inferir que los carbohidratos, lpidos y protenas son
macromolculas que ligadas juegan un papel muy importante en el ser
humano, aunque lo dicho anteriormente no se ve tan reflejado al momento de
realizar la experiencia ya que se pudo notar que su presencia es determinada
de forma distinta para cada una, esto, teniendo en cuenta su naturaleza y
basada en ella se interpret reacciones con reactivos especficos donde nos
basamos principalmente en los cambios de colores que cada una manifest.
PREGUNTAS COMPLEMENTARIAS
1. Las plantas habitualmente almacenan reservas energticas en
forma de polisacridos, mientras que en la mayora de los
animales los lpidos son la principal de almacenamiento de
energa. Por qu es ventajoso para los animales tener su reserva
de energa almacenada como lpidos y no como polisacridos?
Los lpidos, tales como las grasas, contienen aproximadamente 2,5 veces ms
energa por gramo que los polisacridos. Los animales tienen altos
requerimientos energticos (a causa de sus vidas activas) y el volumen y el
peso agregado a sus cuerpos por los materiales acumulados puede afectar su
movilidad. Por lo tanto, es ventajoso para los animales almacenar la energa
en formas ms concentradas como los lpidos.
2. De qu manera las diferencias de estructuras de grasas neutras y
fosfolpidos determinan sus funciones en las clulas?
Las diferencias entre estructuras de grasas neutras y fosfolpidos es que no
permite que la membrana celular se disuelva en soluciones acuosas. Les
confiere estabilidad, resistencia y es lo que las hace semipermeables.

3. Consulte que otros reactivos se pueden utilizar para identificar

carbohidratos y protenas.
Identificacin de carbohidratos
Reaccin del cido mcico (se utiliza cido ntrico HNO3)
Este ensayo permite la identificacin de la galactosa o de los azcares que la
contienen. El cido ntrico oxida tanto al grupo aldehdo como al alcohlico
primario de cualquier azcar para originar cidos dicarboxlicos que han
recibido el nombre general de cidos sacricos. El cido mcico o galactrico
es el menos soluble en agua acidificada de todos los cidos sacricos.
Reaccin de molisch (se utiliza reactivo de Molisch (-naftol al 5% en etanol)
y cido sulfrico H2SO4).
Este ensayo permite detectar la presencia de hidratos de carbono en una
muestra; se basa en la accin hidrolizante y deshidratante que ejerce el cido
sulfrico sobre estos compuestos. Como se sabe, los cidos concentrados
originan una deshidratacin de los azcares para rendir furfurales, que son
derivados aldehdicos del furano. Los furfurales se condensan con los fenoles
para dar productos coloreados caractersticos, empleados frecuentemente en el
anlisis colorimtrico.
Reaccin de fehling (. La solucin I est formada por SO4Cu* 5H2O al 7% en
agua y la solucin II por tartrato sdico-potsico al 35% en NaOH al 10% en
agua. ).
Este ensayo pone de manifiesto la presencia de azucares reductores (aldosas:
glucosa, ribosa, eritrosa, etc.). Se trata de una reaccin redox en la que el
grupo aldehdo (reductor) de los azcares es oxidado a grupo cido por el
Cu2+ que se reduce a Cu+. Tanto los monosacridos como los disacridos
reductores reaccionan con el Cu2+ dando un precipitado rojo de xido cuproso.
La reaccin tiene lugar en medio bsico por lo que es necesario introducir en la
reaccin tartrato sdico-potsico para evitar la precipitacin del hidrxido
cprico. La prueba de Fehling no es especfica; otras sustancias que dan
reaccin positiva son los fenoles, aminofenoles, benzona, cido rico, catecol,
cido frmico, hidrazobenceno, fenilhidrazina, pirogalol y resorcinol.
Reaccin de barfoed (2.5 ml de cido actico al 38% en agua a 100 ml de
acetato cprico al 6.6% en agua)
Este ensayo se emplea para diferenciar a los monos de los disacridos. Estos
ltimos reaccionan ms lentamente con el acetato cprico, debido
probablemente al tamao molecular, aunque tambin pueden estar implicados
otros factores tales como una interaccin ms compleja con los dos anillos
monosacridos.

 Ensayo de bial: El reactivo de Bial contiene orcinol en cido clorhdrico, el cual

forma complejos de coloracin slo con las pentosas.
Identificacin de protenas
La ninhidrina
La ninhidrina es un poderoso agente y reactivo comn para visualizar las
bandas de separacin de aminocidos por cromatografa o electroforesis,
tambin es utilizada con fines cuantitativos para la determinacin de
aminocidos.
Reacciona con todos los aminocidos alfa cuyo pH se encuentra entre 4 y 8,
dando una coloracin que vara de azul a violeta intenso. Este producto
colorido (llamado prpura de Ruhemann) se estabiliza por resonancia, la
coloracin producida por la ninhidrina es independiente de la coloracin original
del aminocido
Esta prueba es positiva tanto para protenas como para aminocidos. en
aquellos casos donde no da positiva la prueba de biuret y da positiva la de
ninhidrina, indica que no hay protenas, pero si hay aminocidos libres.
La reaccin xantoproteica
Los aminocidos, que contienen un ncleo aromtico forman nitroderivados de
color amarillo cuando se calientan con cido ntrico concentrado. Las sales de
estos derivados son de color naranja intenso en medio alcalino. Si una vez
realizada la prueba se neutraliza con un lcali, se torna color amarillo oscuro.
La fenilalanina, la tirosina y en cierto grado el Triptfano, as como todas las
protenas que los contienen, dan positiva la prueba.
Segn las guas qumicas es una reaccin cualitativa, ms no cuantitativa. Por
ende determina la presencia o no de protenas. Para cuantificar se usa otra
reaccin, como la de Biuret, y se hace un anlisis espectro fotomtrico.
Reaccin para el triptfano
Este aminocido se condensa fcilmente con varios aldehdos en presencia de
cidos fuertes para dar compuestos coloreados. En la reaccin se utiliza el
reactivo de Ehrlich (p-dimetilaminobenzaldehdo al 10% en HCL concentrado.)
que reacciona con un buen nmero de compuestos orgnicos tales como
ndoles, aminas aromticas y compuestos ureicos para dar complejos
coloreados.
Reacciones para cistena y cistina
Cuando los aminocidos y las protenas que contienen grupos tilicos se
calientan en medio fuertemente alcalinos, el azufre presente reacciona para

formar sulfuros. Este sulfuro puede detectarse por la formacin de un

precipitado negro de sulfuro de plomo por adicin de acetato de plomo. Los
grupos tioles tambin reaccionan con el nitroprusiato de sodio en presencia de
un exceso de amonaco para dar un complejo de color rojo.
Prueba para arginina
El aminocido Arginina contiene un grupo guanidino en la cadena lateral, este
grupo reacciona con el reactivo de Sakaguchi (a-naftol/agua de Bromo) en
medio alcalino para dar un compuesto de color rojo.
ANEXOS
IDENTIFICACIN DE AZCARES

Muestras con reactivo de Benedict.

Muestras con Benedict, despus de

calentamiento

DETERMINACIN DE PRESENCIA DE ALMIDN

Almidn ms Lugol

Macerado de pan ms Lugol

DETERMINACIN CUALITATIVA DE LA PRESENCIA DE PROTENAS

Muestras sin reactivo de Biuret

Muestras ms Biuret

Clara de huevo ms cido clorhdrico.

IDENTIFICACIN DE LPIDOS

Sudn en agua

Sudn+Agua+Aceite vegetal

Grasa animal ms Sudn

REFERENCIAS:
1. UNAM, 2014 Identificacin de Carbohidratos, Protenas y Lpidos;
Actividad de Laboratorio PDF [en lnea] recuperado de:
http://portalacademico.cch.unam.mx/materiales/prof/matdidac/sitpro/exp/
quim/quim2/quimicaII/Actividad_de_laboratorio.pdf
2. LVAREZ, U; GONZLEZ, I; ANAYA, L Manual de Actividades
Experimentales para el alumno, 2006 Ciudad Universitaria, Mxico DF
Pg 109-115.
3. MORENO, A Practicas de reconocimiento de glcidos, lpidos y
protenas, 2009 documento [en lnea] recuperado de: http://www.csicsif.es/andalucia/modules/mod_ense/revista/pdf/Numero_21/ALMUDEN
A_MORENO_2.pdf
4. HERRERA, C; BOLAOS, N; LUTZ, G. Qumica de alimentos, manual
de laboratorio. Editorial de la universidad de costa rica Pg. 12
5. Ratser (s.f.). Definicin de azcares reductores. Tomado de
http://www.ratser.com/la-definicion-de-azucares-reductores/

6. Ordoez, R. (2013).Generalidades de los lpidos. Recuperado de

http://es.slideshare.net/richardordonez940/bioquimica-generalidades-delos-lipidos
7. Santacruz, P. (2014). Reconocimiento de carbohidratos. Recuperado de
http://www.academia.edu/6891511/PRACTICA_DE_LABORATORIO_No
_1_carbohidratos
8. Velzquez, M. and ordorica, M. (n.d.). Estructura de lpidos. 1st ed.
Recuperado
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http://www.bioquimica.dogsleep.net/Teoria/archivos/Unidad71.pdf
[Accessed 6 Oct. 2016].