SUBSECRETARA DE EDUCACIN

MEDIA SUPERIOR

DIRECCIN GENERAL DE EDUCACIN TECNOLOGICA INDUSTRIAL

DIRECCIN TCNICA
SUBDIRECCIN ACADMICA
Centro de Bachillerato Tecnolgico industrial y de servicios No. 2

MANUAL DE PRCTICAS DE LABORATORIO

MODULO IV LABORATORIO CLINICO
REALIZAR PRUEBAS HEMATOLGICAS Y TRANSFUSIONALES
Submdulo 1 Identificar leucemias y realizar tcnicas de valoracin hemosttica
Agosto 2016 Enero 2017
Elabor:
Dr. Francisco Santiago Montero

Vo. Bo.
Ing. Carlos Paz Reyes
Jefe de Servicios docentes T.M

JUSTIFICACION
La tendencia actual del Tcnico Laboratorista Clnico, est enfocada a participar
en el desarrollo cientfico y tecnolgico de nuestro pas en el rea de la salud. La
demanda de estos profesionales tcnicos se ha ido incrementando en virtud de las
necesidades sociales
Esta formacin profesional proporciona los conocimientos, habilidades y destrezas
para el manejo de material, equipo y reactivos empleados en el laboratorio de
anlisis clnicos, con eficiencia y eficacia basndose en las normas oficiales
mexicanas e internacionales como la ISO- 15189:2003 y de competencia laboral
Mediante el anlisis del programa de estudio, cada profesor podr establecer su
planeacin y definir las actividades especficas que estime necesarias para lograr
los resultados de aprendizaje, de acuerdo con su experiencia docente, las
posibilidades de los alumnos y las condiciones del plantel
Los mdulos del componente de formacin profesional atienden sitios de insercin
en los

mercados de trabajo, al tomar como referente de elaboracin los

desempeos laborales de una funcin productiva, registrados en las normas de

Competencia, por lo que contenidos, actividades y recursos didcticos se
expresan en trminos de competencias, reconocidas por el sector productivo
El perfil de egreso describe el repertorio de competencias profesionales que el
alumno demostrar al concluir su formacin y transferir al desempeo de una
funcin productiva
Normas de Competencias CSSA0359.01 Dictamen de muestras citolgicas Nivel
de competencia 2 NOM-166-SSA1-1997 Organizacin y funcionamiento del
laboratorio clnico NOM-005-STPS-1998 Relativa a las condiciones de seguridad e
higiene en los centros de trabajo para el manejo, transporte y almacenamiento de
reactivos qumicos peligrosos. NOM-087-ECOL-2002 Norma oficial mexicana para
la

eliminacin

tratamiento

de

RPBI

ISO-15189:2003

Estandarizacin

internacional para la acreditacin de laboratorios clnicos

Resultado de aprendizaje:
Desarrollar las habilidades y destrezas en la recoleccin y procesamiento de
muestras biolgicas e interpretacin de los resultados para establecer un
diagnstico de acuerdo a la normatividad y actuando con tica

PRACTICAS
PAGINA

Prctica 1Recuento Diferencial de Glbulos Blancos

... 9
Prctica 2 Tincin de Wright
..11
Prctica 3 Mtodo de Duke
..14
Prctica 4 Metodo de Lee White
..16
Prctica 5 Tiempo de Protombina
........................................................18
Prctica 6 Tiempo Parcial de Tromboplastina .
.20
Prctica 7. Retraccion Cuantitativa del Coagulo
..23

REGLAMENTO GENERAL DE LABORATORIO

Al ingresar al laboratorio el alumno guardar

adecuadamente sus pertenencias y solo deber estar sobre la mesa su
cuaderno de trabajo, materiales y substancias a ocupar.
El alumno usara el lenguaje tcnico correcto.
El alumno evitar invadir otras reas del laboratorio cuando no le
corresponda.
Durante su permanencia en el laboratorio el alumno portara bata blanca, y
equipo de seguridad.
El alumno y personal evitar el consumo de alimentos o bebidas.
Todo material de desperdicio ser clasificado y depositado en los
recipientes segn la norma vigente.
Siempre que el alumno encuentre algn dao en aparatos, materiales,
muebles o servicio de agua, electricidad, gas etc., deber reportarlo con el
responsable de laboratorio.
El alumno y el personal estarn obligados a usar los dispositivos
individuales y colectivos de seguridad
al realizar un trabajo que
potencialmente represente peligro para su salud.
Cuando el alumno vaya a ejecutar un trabajo que pueda representar un
peligro deber solicitar la supervisin del profesor.
El personal responsable tiene la obligacin de formar la comisin de higiene
y seguridad de cada grupo, misma que durar un semestre como mnimo.
El alumno deber informar a la comisin de seguridad a los profesores (as)
sobre cualquier accidente o afeccin de salud por leve que sea.
La comisin de higiene y seguridad estar integrada por dos alumnos de
cada grupo como mnimo y tendr la funcin en el fomento de la buena
salud y la prevencin de accidentes.
La comisin de higiene y seguridad podr organizar eventos de informacin
de nuevas normas de seguridad.
El alumno procurar en todo momento mantener su rea de trabajo,
dejndola en condiciones de ser utilizada de inmediato al finalizar la sesin.
El alumno evitar jugar, correr, hacer bromas que conduzcan a perder el
tiempo o que provoquen accidentes.
El trabajo de laboratorio deber ser tomado con seriedad y responsabilidad,
manifestndose de esta forma el respeto por los dems y por si mismos.

ANTES DE INICIAR SU PRCTICA:

La asistencia a la prctica es obligatoria.
La tolerancia para entrar al laboratorio ser la que rige el reglamento
escolar.
Acatar las instrucciones indicadas en el Reglamento General de
Laboratorios de los Planteles del Nivel Medio Superior de la DGETI
No dejar abrigos, carpetas u otros objetos sobre las mesas de trabajo.
Cuando ms despejado este el lugar de trabajo mejor se desarrollar el
experimento y menos peligro existir para nosotros y para nuestras cosas.
Es obligatorio llevar bata para evitar manchas y quemaduras. Tambin es
aconsejable traer un trapo de algodn para poder agarrar los recipientes
calientes o limpiarlos y secarlos.
Se deben seguir a todo momento las indicaciones del profesor. No se
comenzara a trabajar hasta haber recibido las instrucciones necesarias.
Consultar las dudas y dificultades.
Es imprescindible leer por lo menos una vez la prctica antes de comenzar.
Comprobar que esta todo el material necesario y en las condiciones
adecuadas de conservacin y limpieza. Comunicar cualquier anomala al
profesor. Cada grupo ser responsable de material asignado.
Por seguridad est terminantemente prohibido fumar dentro del laboratorio,
as como ingerir alimentos y bebidas.

DURANTE EL TRABAJO:

 No debe probarse ninguna sustancia y debe evitarse el contacto con la piel.

En caso de que algn producto corrosivo caiga en la piel, se eliminar con
abundante agua fra.
Extremar los cuidados al trabajar con sustancias inflamables, txicas o
corrosivas.
Comunicar cualquier accidente, quemadura o corte, a tu profesor de
laboratorio.
La manipulacin de productos slidos se har con ayuda de una esptula o
cucharilla y para transvasar lquidos se utilizara una varilla de vidrio en los
casos que sean necesarios.
Nunca viertas el cido sulfrico concentrado al agua, debes hacerlo de
manera inversa pero con cuidado.
Tener cuidado al manejar cidos y bases principalmente concentrados.
Para oler algn producto no debe acercarse la cara al recipiente, si no que
se arrastrar el vaso hacia la nariz pasando la mano por encima de l.
Con el fin de evitar contaminaciones, nunca se devolver al frasco los
restos de productos no utilizados.
El material de vidrio es muy frgil, por lo que se evitara los golpes y
cambios bruscos de temperatura. Se deber anotar en una hoja o cuaderno
el material que se rompa y comunicarlo al profesor de laboratorio.

AL TERMINAR:

El lugar y el material de trabajo debe quedar limpio y ordenado, tambin se

deben apagar y
desenchufar los aparatos.
Lavarse las manos con agua y jabn

contaminaciones.
Entregar para su revisin el reporte de la prctica elaborada.

perfectamente para evitar

Hasta que el profesor no de su autorizacin no se considerara finalizada la

prctica y por lo tanto, no podrs salir de laboratorio.

Laboratorio Mltiple
Prctica no.1
NOMBRE DE LA PRCTICA: RECUENTO DIFERENCIAL DE
BLANCOS

GLBULOS

COMPETENCIA:
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
Objetivo especfico
8

Utilizando la cmara de Neubauer el alumno efectuara un recuento total de

Leucocitos.
Antecedentes.
En el recuento de Leucocitos totales no existe distincin entre los 5 tipos de
clulas normales.
MATERIAL:
Cmara de Neubaue
Pipeta de glbulos blancos
Microscopio
Tubo de ensaye
Equipo Vacutainer

Reactivos
Sangre con anticoagulante
Lquido de Turk

TECNICA.
1- Se toma la sangre con la pipeta para leucocitos hasta la marca de 0.5
2- Limpia el exterior de la pipeta y agregar liquido de Turk hasta la marca 11
3- Agitar durante 3 minutos
4- Tirar las 3 primeras gotas
5- Llenar la cmara de Neubauer igual que para eritrocitos
6- Con el objetivo de 10X observar la distribucin de los leucocitos y si esta
bien se enfoca con 40X
7- Se cuentan las clulas en cada uno de los cuatro cuadrantes de las
esquinas
8- Se efectan los clculos correspondientes
9- Se efecta el reporte correspondiente
VALORES NORMALES
ADULTOS
5000 A 10000 /mm
FORMULA Y CALCULOS
V= volumen de recuento = (0.1mm) (1mm) (1mm) (4)
V= 0.4 mm
Si llamamos B al nmero de clulas contadas en ese volumen tenemos
B clulas-------------------------0.4mm
X
------------------------- 1mm
x=

( B celulas ) (1 mm 3)
(20=dilucion)
(0.4 mm)

Laboratorio Mltiple
Prctica no.2
NOMBRE DE LA PRCTICA: FORMULA DIFERENCIAL TINCIN DE WRIGHT
COMPETENCIA:
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
Relaciona los niveles de organizacin qumica,
biolgica, fsica y ecolgica de los sistemas vivos.
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
10

OBJETIVO ESPECFICO
El alumno preparara frotis sanguneos e identificara en ellos los diferentes tipos
de leucocitos
ANTECEDENTES
El porcentaje de la distribucin de los distintos tipos de leucocitos e el examen
cualitativo se realizara en una extensin de sangre teida.
El colorante de Wright es el ms difundido
Los leucocitos normalmente presentes en la sangre perifrica son los, Linfocitos ,
Monocitos, Neutrfilos, Eosinofilos y Basfilos.

MATERIAL

REACTIVOS

Porta Objetos

Sangre fresca

Microscopio

Agua destilada

Tubo de ensaye

Colorante de Wright

Jeringa

Aceite de inmersin

Pipeta Pasteur
Pipeta de Leucocitos
TECNICA.
1- Se lavan perfectamente 2 portaobjetos con agua y jabn y se secan muy
bien
2- En el primero de los portaobjetos se coloca una gota de sangre a 1 o 2 cm.
del borde.
3- Con ayuda de otro portaobjetos se extiende la sangre de la siguiente
manera: Formando un ngulo de 30 se retrocede el segundo portaobjetos
11

hasta que toque la gota de sangre e inmediatamente se extiende con un

solo movimiento rpido y uniforma.
4- Secar el frotis al aire
5- Cubrir el frotis con el colorante de Wright por 2 minutos
6- Sin quitar el colorante , aadir agua destilada y dejar reposar por otros 3
minutos
7- Lavar con agua hasta que no salga colorante
8- Secar
9- Observar con el objetivo de inmersin , se toma como base los extremos de
la extensin y se va recorriendo en grecas para observar los diferentes
campos
10-Se cuenta un total de 100 leucocitos, obtenindose as directamente el
porcentaje de cada una de ellas.

VALORES NORMALES
NEUTROFILOS
LINFOCITOS
BANDAS
MONOCITOS
EOSINOFILOS
BASOFILOS

60 AL 70 %
21 AL 35 %
3 AL 5 %
4 AL 8 %
2 AL 4 %
0 AL 1 %

:
.

12

Laboratorio Mltiple
Prctica no.3
NOMBRE DE LA PRCTICA: TIEMPO DE COAGULACIN METODO DE DUKE
COMPETENCIA:.
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
Relaciona los niveles de organizacin qumica,
biolgica, fsica y ecolgica de los sistemas vivos.
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
OBJETIVO.
El alumno determinara el tiempo de sangrado en un paciente
FUNDAMENTO.
La lesin de una pared vascular produce vasoconstriccin , refleja inmediata y
temporal aglutinacin de las plaquetas en el sitio de la lesin.
Las plaquetas liberan serotoninas , adems de las plaquetas se libera
tromboplastina que desencadena el proceso que termina en la coagulacin de la
sangre.
MATERIAL:
Lanceta estril
Disco de papel filtro
Cronometro
Torundas alcoholadas
TECNICA

13

1- Limpie con una torunda alcoholada el lbulo de la oreja y espere a que se

evapore el exceso de alcohol.
2- Con la lanceta estril desechable, se practica en el borde inferior del lbulo
de la oreja una puncin de 3 mm de profundidad y se pone en marcha el
cronometro.
3- A intervalos de medio minuto, se aplica cuidadosamente sobre la gota de
sangre el disco de papel filtro. Tener mucho cuidado en no tocar la piel
4- Se toma como punto final en el momento en el cual el papel filtro ya no
absorbe sangre.
VALORES NORMALES
De 1 a 6 minutos

14

Laboratorio Mltiple
Prctica no.4
NOMBRE DE LA PRCTICA: TIEMPO DE COAGULACIN , MTODO DE LEE
WHITE
COMPETENCIA
.
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
Relaciona los niveles de organizacin qumica,
biolgica, fsica y ecolgica de los sistemas vivos.
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
OBJETIVO.
Que el alumno determine el tiempo de coagulacin en una muestra
FUNDAMENTO.
Esta prueba suministra un ndice aproximado de la eficacia global del mecanismo
intrnseco de la coagulacin .
Se encuentran tiempos prolongados en la Hemofilia y en la deficiencia del factor IX
durante un proceso hemorrgico.
MATERIAL:
Jeringa
Dos tubos de 13 X 100
Cronometro
Bao Maria s 37 C
TECNICA.
1- Se extrae sangre venosa con una jeringa estril, utilizando una

aguja del

nmero 20, la puncin debe de ser perfecta.

15

2- Se pone en marcha el cronometro en cuanto la sangre penetre en la

jeringa, en este momento se inicia la coagulacin sangunea
3- Se deposita en un tubo de 13X 100 perfectamente limpio, aproximadamente
un mililitro de sangre y se coloca en el bao Mara a 37C .
4- Tres minutos despus y reduciendo al mximo el tiempo en que el tubo se
encuentra fuera del agua se le inclina cada 30 segundos.
5- El tiempo de coagulacin se toma en el momento que se extrae la sangre
hasta que resulte posible invertir los tubos sin que se derrame su contenido.
VALORES NORMALES
De 4 a 8 minutos
De 8 a 10 minutos defecto de coagulacin
Mas de 10 minutos anormalidad manifiesta.

Laboratorio Multiple
Prctica no.5
16

NOMBRE DE LA PRCTICA: TIEMPO DE PROTROMBINA

COMPETENCIA:
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
Relaciona los niveles de organizacin qumica,
biolgica, fsica y ecolgica de los sistemas vivos.
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
OBJETIVO.
El alumno determinara el tiempo de protrombina de una muestra
FUNDAMENTO.
Existe en la sangre una sustancia producida por el hgado que es la protrombina
que circula en forma inactiva por una enzima llamada tromboplastina , en
presencia de calcio ionizado la convierte en una sustancia insoluble que es la
fibrina cuya fibras constituyen el armazn del coagulo.
.
MATERIAL:

REACTIVOS

Equipo vacutainer

Oxalato de sodio anhdrido 0.1 N

Tubo de 10X100 con anticoagulante

Cloruro de calcio .02 N

Tubos de ensaye de 10 X 100

Patrn de plasma normal

Pipeta de 1 ml en 0.1 ml
Cronometro
Gradilla

TECNICA

17

1- Extraer sangre con el equipo vacutainer y tubo con anticoagulante

23456-

(2.5ml.)
Centrifugar a 2500 rpm durante 5 minutos
En un tubo de 10X100 pipetear 0.1 ml de suspensin de tromboplastina
Agregar o.1 ml de plasma problema a incubar a 37C por 1 minuto
Agregar 0.1 ml de cloruro de calcio .02 N previamente calentado a 37 C
En el momento de aadir el cloruro de calcio se marca el tiempo en el

cronometro
7- Agitar el tubo dentro del agua durante 2 a 3 segundos y dejar reposar
hasta los 10 segundos
8- Examinar los tubos hasta que desaparezca el coagulo compacto , lo que
marca el punto final del tiempo de protrombina
INTERPRETACION
El tiempo de protrombina estar acelerado cuando existe una deficiencia de
protrombina , factor V, VII y X

una combinacin de estas deficiencias

agregndose a estos factores la patologa de policitemia vera.

VALORES NORMALES
De 9 a 14 segundos

Laboratorio Multiple
Prctica no.6
NOMBRE DE LA PRCTICA: TIEMPO PARCIAL DE TROMOPLASTINA
COMPETENCIA:
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
18

Relaciona los niveles de organizacin qumica,

biolgica, fsica y ecolgica de los sistemas vivos.
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
OBJETIVO.
El alumno determinara el tiempo de Tromboplastina en el plasma de una muestra
FUNDAMENTO.
El plasma hemoltico se coagula tan rpidamente como lo hace normalmente si se
recalcifica en presencia de una tromboplastina histica potente, Langdell y
Brinkhous demostraron en 1953 que ciertas tromboplastinas carecen de

la

capacidad para compensar los defectos plasmticos de la Hemofilia, estas

tromboplastinas se denominan tromboplastinas parciales y cuando se emplean
las pruebas de coagulacin de una fase , el procedimiento se le denomina tiempo
parcial de tromboplastina.

MATERIAL

REACTIVOS

4 tubos de ensaye

Solucin de cloruro de calcio .02 N

2 pipetas de 1 ml. En 0.1ml

Solucion de citrato de sodio al 3.8%

Cronometro
Gradilla
Centrifuga
19

Bao Maria

PROCEDIMIENTO
1- Tubos con anticoagulante para trombina con 2.25 ml de sangre
2- Mesclar y centrifugar a 1500 rpm por 5 minutos
3- Decantar el plasma a otro tubo y conservarlo hasta el momento de la
4567-

prueba
Poner 0.1 ml de tromboplastina parcial reconstituida en uno de los tubos
Aadir 0.1 ml de plasma en estudio y mezclar el contenido.
Incubar a 37C por 3 minutos ( tomar el tiempo exacto con cronometro
Aadir 0.1 ml de la solucin de cloruro de calcio 0.02 N precalentado, con

una pipeta de 0.2 ml. Simultneamente medir el tiempo con el cronometro.

8- Mesclar el contenido del tubo
9- Retire el tubo del bao mara, a los 5 segundos aproximadamente inclnelo
con suavidad de un lado a otro.
10-Observe la aparicin de un gel y detenga el cronometro al momento de la
aparicin del mismo
11- Se repite el procedimiento de manera que se obtengan por lo menos dos
registros

para

cada

muestra

problema,

la

media

de

las

dos

determinaciones es el tiempo parcial de tromboplastina parcial de la

muestra.
TIEMPO NORMAL
60 A 70 Segundos

20

Laboratorio Multiple
Prctica no.7
NOMBRE DE LA PRCTICA: RETRACCION CUALITATIVA DEL COAGULO
COMPETENCIA:
Aplica normas de seguridad en el manejo de sustancias, instrumentos y equipo en
la realizacin de actividades de su vida cotidiana
Relaciona los niveles de organizacin qumica,
biolgica, fsica y ecolgica de los sistemas vivos.
Registrar y revisar informacin para
asegurar que sea correcta
OBJETIVO.
El alumno determinara el tiempo de retraccin cualitativa del coagulo en el plasma
de una muestra
FUNDAMENTO
Cuando se permite coagular la sangre total y se observa durante cierto tiempo se
ver que el coagulo disminuir de tamao y que saldr un suero transparente ,
este fenmeno se denomina retraccin del coagulo y es una de las funciones de
las plaquetas , siendo este fenmeno esencial en la formacin de un firme tapon
hemosttico.

21

MATERIAL
Vacutainer
Tubo de 10x 100 sin anticoagulante
Bao mara a 37C
Soporte de alambre
PROCEDIMIENTO
1- Extraer sangre en un frasco sin anticoagulante
2- Colocar a bao mara sin anticoagulante durante una hora
3- Checar cada 15 minutos la formacin del coagulo

22

Bibliografa
Robins Patologa Mdica interamericana Mxico 2009
Koleman diagnostico clnico panamericana Mxico 2011
croker j. burnett d. la ciencia del diagnstico de laboratorio 2 edicin Mxico 2007
Guyton hall tratado de fisiologa 12 edicin mc. graw hill 2009
Hipolito v nio silvia arich
panamericana edicin 2000

garanta de la calidad en el laboratorio clnico,

Lucas l.r bioetica para todos ed. trillas 2004

Componente de Formacin Profesional del Bachillerato Tecnolgico 2007
Programa de Estudios de la Carrera de Tcnico de Laboratorio clnico 2012
Prcticas de Laboratorio Clnico IMSS

23

Aprobado por la Academia Local de Laboratorista Clnico

QFB. JESUS ORTIZ MARTINEZ

MVZ L. KARINA MARTINEZ ORTIZ

Presidente de la Academia local de Laboratorista Clnico

DR. MAXIMO GAYTAN CRUZ

Vo. Bo.
ING. CARLOS PAZ REYES
ING. JACOB GONZLEZ CRUZ

Jefesde Servs. Docentes T.M y T.V.

24