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INTEGRANTES:
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CICLO
2015 - A
Bellavista - Callao
AMINOACIDOS Y PROTEINAS
I.
INTRODUCCN
ms abundantes
de
agentes
originndose
productos
coloreados.
Estas
reacciones
y cualitativa de las
protenas.
Todos los aminocidos que presentan al menos un grupo amino y uno carboxilo
libre, reaccionan con las diferentes pruebas de caracterizacin.
Las protenas son sustancias qumicas orgnicas de alto peso molecular, constituida
por muchos aminocidos, que juegan un papel muy importante en la estructura y
dinmica de la materia viva. Solamente 20 aminocidos diferentes se encuentran
formando parte de las protenas; sin embargo, no todas las protenas contienen los
20 aminocidos. En esta prctica vamos a realizar reacciones cualitativas de
coloracin, que nos permitirn detectar, la presencia de grupos qumicos en
aminocidos y protenas.
II.
OBJETIVOS
Conocer las reacciones de reconocimiento de los aminocidos y protenas.
Confirmar la presencia de ciertos aminocidos en la albumina con las
reacciones de identificacin (xantoproteica y la de milln); adems identificar
compuestos que tengan dos o ms enlaces peptdicos mediante la prueba de
biuret.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
III.
MARCO TEORICO
Aminocido
Un aminocido es una molcula orgnica con un grupo
amino (-NH2) y un grupo carboxilo (-COOH). Los
aminocidos ms frecuentes y de mayor inters son
aquellos que forman parte de las protenas. Dos
aminocidos se combinan en una reaccin de
condensacin entre el grupo amino de uno y el
carboxilo del otro, liberndose una molcula de agua y
formando un enlace amida que se denomina enlace
peptdico; estos dos "residuos" de aminocido forman
un dispptico. Si se une un tercer aminocido se forma
un tripptido y as, sucesivamente, hasta formar un polipptido. Esta reaccin tiene
lugar de manera natural dentro de las clulas, en los ribosomas.
Todos los aminocidos componentes de las protenas son L-alfa-aminocidos. Esto
significa que el grupo amino est unido al carbono contiguo al grupo carboxilo
(carbono alfa) o, dicho de otro modo, que tanto el carboxilo como el amino estn
unidos al mismo carbono; adems, a este carbono alfa se unen un hidrgeno y una
cadena (habitualmente denominada cadena lateral o radical R) de estructura
variable, que determina la identidad y las propiedades de cada uno de los
diferentes aminocidos. Existen cientos de radicales por lo que se conocen cientos
de aminocidos diferentes, pero solo 22 (los dos ltimos fueron descubiertos en el
ao 2002) forman parte de las protenas y tienen codones especficos en el cdigo
gentico.
La unin de varios aminocidos da lugar a cadenas llamadas pptidos o
polipptidos, que se denominan protenas cuando la cadena polipeptdica supera
una cierta longitud (entre 50 y 100 residuos aminocidos, dependiendo de los
autores) o la masa molecular total supera las 5000 uma y, especialmente, cuando
tienen una estructura tridimensional estable definida.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Clasificacin
Existen muchas formas de clasificar los aminocidos; las tres que se presentan a
continuacin son las ms comunes.
Segn las propiedades de su cadena
Los aminocidos se clasifican habitualmente segn las propiedades de su cadena
lateral:
Neutros polares, polares o hidrfilos: serina (Ser, S), treonina (Thr, T), cistena
(Cys, C), glutamina (Gln, Q), asparagina (Asn, N),
tirosina (Tyr, Y).
Neutros
no
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Con carga negativa o cidos: cido asprtico (Asp, D) y cido glutmico (Glu,
E).
Con carga positiva o bsicos: lisina (Lys, K), arginina (Arg, R) e histidina (His,
H).
Aromticos: fenilalanina (Phe, F), tirosina (Tyr, Y), triptfano (Trp, W) y prolina
(Pro, P) (ya incluidos en los grupos neutros polares y neutros no polares).
Segn su obtencin
A los aminocidos que deben ser captados como parte de los alimentos se los
llama esenciales; la carencia de estos aminocidos en la dieta limita el desarrollo
del organismo, ya que no es posible reponer las clulas de los tejidos que mueren o
crear tejidos nuevos, en el caso del crecimiento. Para el ser humano, los
aminocidos esenciales son:
Valina (Val, V)
Leucina (Leu, L)
Treonina (Thr, T)
Lisina (Lys, K)
Triptfano (Trp, W)
Histidina (His, H)
Fenilalanina (Phe, F)
Isoleucina (Ile, I)
Arginina (Arg, R)
Metionina (Met, M)
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Alanina (Ala, A)
Prolina (Pro, P)
Glicina (Gly, G)
Serina (Ser, S)
Cistena (Cys, C) **
Asparagina (Asn, N)
Glutamina (Gln, Q)
Tirosina (Tyr, Y) **
AMINOACIDOS Y PROTEINAS
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
NOMENCLATURA
Propiedades Fsicas
Los aminocidos tienen un punto de fusin alto que sobrepasa los 2000 C y algunos
los 3000 C. Aunque a temperaturas por encima se descomponen, siendo muy difcil
separarlos por destilacin fraccionada.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Los aminocidos manifiestan muchas de las reacciones caractersticas de los cidos
carboxlicos y de las aminas alifticas, tambin se ha demostrado que el grupo
amino participa en diversas reacciones importantes en la determinacin cualitativa
y cuantitativa de los aminocidos.
DESCARBOXILACIN
Formacin de Amidas.
Los aminocidos forman amidas al reaccionar sus steres con el amonio o con
aminas.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
En el segundo caso se formar una amida. Este es el tipo de enlace que une a los
aminocidos entre s para formar los pptidos y protenas.
FORMACIN DE SALES.
Los aminocidos forman sales debido a las reacciones tanto del grupo carboxilo
como del grupo amino, cuando se les adicionan bases o cidos respectivamente.
Pptidos
Los pptidos son polmeros de aminocidos de menor masa que las protenas.
Cuando contienen menos de diez aminocidos se denominan oligopptidos, y los
que tienen ms de diez, polipptidos.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Estructura
Clasificacin
Los pptidos se clasifican de acuerdo a la cantidad de aminocidos que lo forman
en:
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Importancia.
Los pptidos tienen gran significacin como constituyentes de las protenas, son
compuestos orgnicos que se encuentran en la mayora de los tejidos vivos, con
mltiples funciones biolgicas.
Protenas
El trmino protena se introdujo por Mulder (1839) como la derivacin de la palabra
griega Protelos (que significa primero).
Las protenas como los pptidos son sustancias formadas por la unin de muchos
aminocidos. Son sustancias nitrogenadas que se encuentran en el protoplasma de
todas las clulas animales y vegetales. Su composicin vara de acuerdo a su
origen, aproximadamente contiene carbono de 46 a 55%; hidrgeno de 6 a 9%,
oxgeno de 12 a 30%; nitrgeno de 10 a 32%; azufre de 0,2 a 0,3%
Tambin
pueden
tener
otros
elementos
nucleoprotenas, hierro la Hemoglobina, etc.
por
ejemplo
fsforo
las
Las masas moleculares de las protenas son muy altas y presentan valores que
median entre 1500 y 20 000 000 para las diferentes protenas.
Las protenas son de naturaleza coloidal, con puntos de fusin caractersticos,
aunque algunas se han obtenido en forma cristalina. Todas son pticamente activas
(levgiros).
Estructura
Las protenas son una familia muy heterognea debido a la alta masa molecular que
presentan las molculas proteicas y estn constituidas por una cantidad
determinada de diversos aminocidos.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Estructura Primaria
Llamada tambin nivel de organizacin primario se caracteriza por el ordenamiento
en que se encuentran los aminocidos en la cadena peptdica, organizada por la
repeticin de las molculas de aminocidos.
Solo un grupo de tomos integra la cadena peptdica, por ejemplo el nitrgeno
amdico, el carbono alfa y el carbono carbonlico. El resto de las molculas de los
aminocidos se proyectan hacia fuera de la cadena y constituyen los grupos R.
Como el enlace peptdico es un enlace covalente, toda la estructura de la cadena la
forma un esqueleto covalente, lo cual explica la estabilidad y resistencia de esta
estructura.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Estructura secundaria.
Se conoce tambin por nivel de organizacin
secundaria
y
est
dado
por
nivel
de
ordenamiento que presenta la cadena peptdica a lo largo del eje, producido por
la interaccin de grupos carbonilo y amdico por interacciones por puentes de
hidrgeno.
Se ha determinado que las interacciones por puentes de hidrgeno que se
establecen cuando este elemento se encuentran entre dos elementos ligeros y ms
electronegativos. Se consideran enlaces relativamente dbiles, aproximadamente
de 9,3 a 19 kJ/mole. Gran nmero de estas interacciones pueden integrarse a
expensas de los grupos amdicos y cabonlios posibilitando la formacin de
estructuras con gran estabilidad.
Las estructuras que se pueden formar se reducen a unos pocos tipos, ya que
existen diversos factores que condicionan o limitan las posibilidades existentes.
El conocimiento de esto se inici debido a los trabajos de Linus Pauling y Robert
Corey al utilizar la tcnica de difraccin de rayos x con amidas sustituidas y
pequeos pptidos. Estos logran medir las distancias y ngulo del enlace peptdico.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Los siguientes requisitos, postulados inicialmente por Pauling y Corey han sido
demostrados experimentalmente.
Estos planos solo pueden girar en cierta medida unos con relacin a otros en
sus puntos de unin constituidos por los carbonos alfa (()
Las interacciones por puentes de hidrgeno pueden lograrse entre varias cadenas
peptdicas que corran paralelas unas con otras.
Estas cadenas pueden correr en el mismo sentido o en sentidos opuestos dando
lugar a ordenamientos paralelos o antiparalelos. En esta estructura las cadenas
peptdicas adoptan una forma plegada donde los sucesivos planos que contienen
las cadenas peptdicas formarn ngulos entre s al nivel del carbono alfa (??, que
adopta una estructura en Zig Zag que Pauling nombr hoja plegada o
conformacin beta (().
Estructura terciaria
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Estructura cuaternaria
IV.
MATERIALES Y REACTIVOS
Tubos de ensayo.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Pipetas Graduadas de 5 ml y de 10 ml
Pinzas de Madera
Solucin de ninhidrina
Solucin de Hidrxido de Sodio (NaOH)
Solucin de Sulfato de Cobre Cu(SO 4)
Acido Ntrico (HNO3) Concentrado.
Hidrxido de Amonio (NH4OH) concentrado o Amoniaco ( NH3)
Reactivo de Milln (solucin de Mercurio en cido ntrico Concentrado)
Soluciones al 1% de Albmina de Huevo.
V.
PROCEDIMIENTO EXPERIMENTAL
PRUEBA DE BIURET
En un tubo de ensayo se agreg 2 ml de albumina (esta sustancia contiene casi
todos los aminocidos conocidos) y 3 ml de NaOH al 10%; luego agregamos gota a
gota la solucin de CuSO4 al 5%
Reaccin que se presenta
Reaccin general:
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
PRUEBA XANTOPROTEICA
En un tubo de ensayo colocar 3 ml de una solucin de albumina;
luego agregar 1 ml de HNO 3 (cc), luego se somete al calor suave;
luego de esto se le agrega cuando ya est frio se le agrega
hidrxido de amonio.
Reaccin que se presenta
Reaccin general:
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Observaciones:
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Observacin:
Con CuSO4
Cu() +
SO4Observaciones:
Observamos el precipitado
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
OBSERVACION:
PRUEBA DE COAGULACION
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
VI.
CUESTIONARIO
PREGUNTA 1
Indique las estructuras de las protenas de la albumina
-
Estructura primaria:
La estructura primaria es la secuencia de aa. De la protena. Nos indica qu
aas. Componen la cadena polipeptdica y el orden en que dichos aas. Se
encuentran. La funcin de una protena depende de su secuencia y de la
forma que sta adopte.
Estructura secundaria:
La estructura secundaria es la disposicin de la secuencia de aminocidos en
el espacio. Los aas., a medida que van siendo enlazados durante la sntesis
de protenas y gracias a la capacidad de giro de sus enlaces, adquieren una
disposicin espacial estable, la estructura secundaria.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Estructura terciaria:
La estructura terciaria informa sobre la disposicin de la estructura
secundaria de un polipptido al plegarse sobre s misma originando una
conformacin globular.
En definitiva, es la estructura primaria la que determina cul ser la
secundaria y por tanto la terciaria.
Esta conformacin globular facilita la solubilidad en agua y as realizar
funciones de transporte, enzimticas, hormonales, etc.
PREGUNTA2
Explique las diferencias entre las estructuras primarias y secundarias o terciarias de una protena.
La organizacin de una protena viene definida por cuatro niveles estructurales
denominados: estructura primaria, estructura secundaria, estructura terciaria y estructura
cuaternaria. Cada una de estas estructuras informa de la disposicin de la anterior en el espacio.
Estructura primaria
La estructura primaria
es la secuencia de
aminocidos de la
protena. Nos indica
qu aminocidos
componen la cadena
polipeptdica y el
orden en que dichos
aminocidos se
encuentran. La
funcin de una
protena depende de
su secuencia y de la
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
Estructura secundaria
La estructura secundaria es la disposicin de la secuencia de aminocidos en el espacio. Los
aminocidos, a medida que van siendo enlazados durante la sntesis de protenas y gracias a la
capacidad de giro de sus enlaces, adquieren una disposicin espacial estable, la estructura
secundaria.
Existen dos tipos de estructura secundaria:
1.- La a(alfa)-hlice
Esta estructura se forma al enrollarse helicoidalmente
sobre s misma la estructura primaria.
Se debe a la formacin de enlaces de hidrgeno entre el
-C=O de un aminocido y el -NH- del cuarto
aminocido que le sigue.
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
2.- La conformacin beta
En esta disposicin los
aminocidos no forman una
hlice sino una cadena en forma
de zigzag, denominada
disposicin en lmina plegada.
Presentan esta estructura
secundaria la queratina de la seda
o fibrona.
Estructura terciaria
Esta conformacin
globular se mantiene
estable gracias a la
existencia de enlaces
entre los radicales
R de los
aminocidos.
Aparecen varios tipos
de enlaces:
1.- el puente
disulfuro entre los
radicales de
aminocidos que
tienen azufre.
2.- los puentes de
hidrgeno.
3.- los puentes
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
elctricos.
4.las interacciones
hidrfobas.
PREGUNTA 3
Explique las diferencias entre aminocidos esenciales y no esenciales e
No esenciales
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
PREGUNTA 4
Indique como se realiza la coagulacin de la albumina
Ahora conociendo sobre la COAGULACIN DE PROTENAS :Las protenas debido
al gran tamao de sus molculas forman con el agua soluciones coloidales. Estas
soluciones pueden precipitar con formacin de cogulos al ser calentadas a
temperaturas
superiores
a
los
70C.
o
al
ser tratadas
con
solucionessalinas,cidos,alcohol,etc.La coagulacin de protenas es un proceso irrev
ersible y se debe a su desnaturalizacin por los agentes indicados, que al actuar
sobre la protena la desordenan por la destruccin de su estructura terciaria y
cuaternaria.
Reconocer la presencia de protena mediante la coagulacin
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AMINOACIDOS Y PROTEINAS
etc.
por medio de agentes qumicos como alcohol, sal, acetona, HNO 3(cc), NaOH(cc) ,
VII.
CONCLUSIONES:
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VIII.
IX.
AMINOACIDOS Y PROTEINAS
RECOMENDACIONES
Cuando se trabajen con cidos, usarlo en la campana extractora, y si se van
a usar pipetas nunca hacerlo con la boca sino utilizar una propipeta, adems
para el caso del uso en las reacciones se usa de manera moderada ya que un
exceso podra causar que se tengan otros productos de los que se esperaban.
BIBLIOGRAFIA
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