Metodo de inmersion

Toda la mortalidad larval fue significativamente diferente (P<0.05) cuando se

comparo con el control en todas las concentraciones de A.indica (Tabla1). El
porcentaje de mortalidad disminuyo mientras que el porcentaje de aparicin
incremento con la disminucin en la concentracin. Los valores LC fueron
registrados en 1.07g/100ml, 1.7g/100ml, 3,39g/100ml y 4.9 g/100 ml en
metanol, cloroformo, petrleo ter y extracto de acetato de etilo,
respectivamente. As, de acuerdo a la mortalidad larval, los efectos del extracto
neem en la tercera larva instar de C. bezziana pueden ser ordenados como
Metanol >cloroformo>ter petrleo> acetato de etilo. Todas las larvas que
escaparon de la mortalidad empuparon con normalidad pero ninguna de ellas
emergi a moscas adultas con todas las concentraciones probadas. El
porcentaje de aparicin de moscas adultas fue significante con todas las
concentraciones comparado con el control(P<0.05).
Metodo de aplicacin de pelcula delgada
La mortalidad larval fue casi alta en todas los 4 extractos usando el
tratamiento de la pelcula delgada que el mtodo de inmersin (Tabla 2). Todas
las concentraciones mostraron significativas diferencias al compararlos con el
grupo control en el caso de la mortalidad, pupacion y aparicin de
moscas(P<0.05). Todas las larvas sobrevivientes puparon pero no
eclosionaron completamente a moscas adultas. Los valores LC 50 fueron
registrados con metanol 0.4 mg/cm2, cloroformo 0.6 mg/cm2, acetato de etilo
2.1 mg/cm2 y ter de petrleo 2.5 mg/cm2. Por consiguiente, el efecto de los
extractos en orden fue Metanol>Cloroformo>acetato de etilo> ter de
petrleo.
Discusin
El presente estudio evala la eficacia del extracto crudo de A.indica en el tercer
estado larval de C.bezziana mediante el uso de los mtodos de inmersin y
pelcula delgada. Los resultados mostraron que el extracto de A.indica en todos
los solventes tienen un efecto toxico contra el tercer estado larval de C.
bezziana en ambos mtodos. La eleccin de la tcnica de inmersin esta
basada en el hecho de que la mayora de los veterinarios aplican extracto local
para controlar el parasito externo en animales de ganado. En la otra mano, la
aplicacin de pelculas delgadas fue seleccionada porque la naturaleza del
dao causado por el parasito esta restringido a los alrededores de la herida de
los animales y la porcin puede ser tratada con una pelcula delgada de polvo o
ungento de un extracto en particular. Los componentes activos pueden
penetrar dentro del cuerpo de la larva a travez de ingestin en el caso del
mtodo de inmersin o a travez de la cuticula en el caso de la aplicacin de la
pelcula delgada. Estudios han mostrado que los extractos de planta pueden
penetrar los intestinos de la larva de este modo el dao epitelial al

revestimiento puede matarlos o alterar su comportamiento de alimentacin.

Abdel-Shafy et al (2009) condujo la examinacin histolgica del intestino de
larvas despus de tratarlas con extractos medicinales de plantas salvajes
(Artemisia herba-alba, Artemisia monosperma, Euphoria aegyptiaca y
Francoeuria cripsa) y reporto el dao al revestimiento epitelial en larvas
muertas. El presente estudio resulto en mortalidades en todos los 4 solventes
en el orden de Metanol >Cloroformo>Eter de petrleo> acetato de etilo. El
extracto de metanol mostro la ms alta mortalidad larval (82.66%) y la
mortalidad pupal (92.01%) en las concentraciones ms bajas de
0.2125g/100ml. Resultados similares fueron reporteados en un estudio
evaluando la eficacia del extracto de hoja de neem (A. indica) en la larva de
mosquito de Culex quinquefasciatus , donde el extracto de metanol mostro la
mxima mortalidad larval. La mxima toxicidad del extracto de metanol puede
ser debido a la razn de que el azadirachtin, uno de los componentes activos
insecticidas de A.indica, tiene una mxima solubilidad en metanol. Los varios
componentes como azadirachtin, salanin y nimbin han sido reportados que
poseen activos inhibidores insecticidas,antifeedant(supongo que eso debe
ser antialimentacion) e inhiben el crecimiento de insectos. Esas propiedades
mayores de los componentes de la planta la han hecho adecuada para el
control de insectos peste. En vez de matar la peste, estos componentes
afectan su ciclo de vida. Azadirachtin pertenece a la clase de molculas
organicas llamadas tetranortriterpenoide, los cual es similar en estructura
qumica a una hormona de crecimiento de insecto llamada ecdysone que
regula la pupacion y la muda de los insectos.Ademas de matar altera su
proceso de desarrollo en tal manera que la larva pupada no emerge en
adulta.Asi, las larvas que escapa nde la muerte pupan normalmente pero
ninguna va a emerger en adultas. El extracto de cloroformo mostro la mas
alta mortalidad larval despus del extracto de metanol. Basado en la polaridad
de diferentes solventes usados, la cantidad de compuestos bioactivos disuletos
en ellos tambin vario. Siendo un solvente de menor polaridad que el metanol,
el cloroformo ha sido reportado que disuelve menos porcentaje de los
componentes insecticidas bioactivos de A.indica. El extracto de cloroformo de
A. indica a sido reportado que contiene 15.78% de azadirachtin. La actividad
larvicida del extracto de cloroformo de A.indica contra la larva de mosquito
Aedes aegypti ha sido reportada en un 100% de mortalidad. El acetato de etilo
resulto en menor mortalidad larval que las que se vieron en extracto de
metanol y cloroformo. Resultados similares fueron reportados por Kamaraj et
al. Mientras estudiaba la actividad larvicida de A. indica contra la larva de
Culex gelidus y C. quinquefasciatus donde el extracto de acetato de etilo
mostro un 42% y 92% de mortalidad respectivamente para las dos especies. El
extracto de ter de petrleo mostro la menor mortalidad de todos los 4
extractos. Batabyal et al reporto la toxicidad de los extractos de neem contra
la larva del vector filaria, C.quinquefasciatus, en el cual el extracto de ter de
petrleo mostro los menores valores de toxicidad de todos los extractos con

valores LC50 de 79.17 y 63.17 pp, y valores LC90 de 234.57 y 193.87 pp despus
de 24 y 48 hrs de exposicin.
Un fenmeno nico fue observado durante el mtodo de inmersin en
extractos de cloroformo y metanol. Se observ que la ms alta concentracin
de los extractos resulto en mortalidades mas bajas que en las menores
concentraciones en esos solventes. Resultados similares fueron reportados por
Abdel-Shafty et al. (2009) mientras estudiaba la eficacia de los extractos
medicinales de plantas salvajes en el supervivencia y desarrollo de C.albicepts.
Debe ser gracias al hecho de que la larva fue estimulada para pupar
prontamente en altas concentraciones en orden de evadir el dao letal de los
extractos donde las menores concentraciones probablemente no hayan
estimulado a ellas a formar la pupa inmediatamente y por lo tanto ms
componentes activos fueron absorbidos resultando en altas mortalidades.
Como resultado, larvas tratadas con altas concentraciones pueden producir
mas porcentaje de moscas normales que las que son tratadas con bajas
concentraciones.
Se concluyo que el extracto crudo de A.indica probado en el presente estudio
puede ser til en controlar la miasis producida por las larvas de C.bezziana. El
extracto crudo de la planta puede ser aplicada localmente a las heridas
miaticas en los animales domesticos para evacuar y matar los gusanos
presentes en ellos. Las multiples aplicaciones pueden ser tiles para desarrolar
un efecto prolongado, por lo tanto resultar en una efectiva estrategia de
control. Esta probado que el extracto de neem puede ser una alternativa a los
agentes antimiaticos sintticos que son usados convencionalmente y son
conocidos por contaminar los productos animales como la leche y la carne con
sus residuos. Seria til para los granjeros controlar las infestaciones de
C.bezziana en sus ganados bajo condiciones normales de trabajo y como
tambin no causar problemas de contaminacin de productos de origen animal
con residuos de droga. Mas estudios deberan ser conducidos a validar la
eficacia de los productos hechos a base de A. indica en moscas/mosquitos que
causan miasis.