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NTE INEN 1698 (1991) (Spanish): Alimentos

zootcnicos. Determinacin de la acidez de
la grasa e ndice de perxidos

CDU: 636.085:545.2
CIIU: 1110

Norma Tcnica
Ecuatoriana
Obligatoria

AL 06.01-309

ALIMENTOS ZOOTECNICOS. DETERMINACIN DE LA ACIDEZ

DE LA GRASA E INDICE DE PEROXIDOS.

INEN 1 698
1991-05

Instituto Ecuatoriano de Normalizacin, INEN Casilla 17-01-3999 Baquerizo Moreno E8-29 y Almagro Quito-Ecuador Prohibida la reproduccin

1. OBJETO

1.1 Esta norma establece los mtodos de ensayo para la determinacin de la acidez e ndice de
perxido de la grasa contenida en los productos destinados a la alimentacin animal.

2. ALCANCE

2.1 Estos mtodos son aplicables a materias primas, suplementos y productos terminados.

3. DEFINICIONES

3.1 Acidez. Expresin convencional del porcentaje de cidos grasos libres.

3.2 ndice de perxidos. La cantidad de perxidos por kilogramo de grasa, expresada en trminos de
miliequivalentes de oxgeno activo, que oxida el yoduro de potasio bajo condiciones de ensayos
descritos.

4. FUNDAMENTO

4.1 Acidez. Solucin de la materia grasa extrada en benceno etanol o una mezcla de ter etlicoetanol (ver nota 1), seguida por una titulacin de los cidos grasos libres presentes con una solucin
etanlica de hidrxido de potasio. La materia grasa para la determinacin de la acidez deber extraerse
tan pronto como la porcin de ensayo ha sido preparada.
4.2 ndice de perxidos. Las grasas insaturadas que contienen los alimentos pueden oxidarse
formando perxidos. Estos liberan yodo al aadirse yoduro de potasio. El yodo liberado en la
reaccin, se valora con una solucin de tiosulfato de sodio.

___________________________
NOTA 1. Se recomienda purificar la solucin de etanol Con la adicin de 5 a 10 g de hidrxido de potasio por litro de etanol,
hirviendo una hora bajo reflujo y posterior destilacin. Puede emplearse hexano en lugar del ter etlico.

(Contina)
__________________________________________________________________________________
DESCRIPTORES: Alimentos. Alimentos para animales. Camarones. Anlisis qumico. Determinacin de la acidez de la
grasa e ndice de perxidos.

-1-

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NTE INEN 1 698

1991-05

5. DETERMINACION DE LA ACIDEZ DE LA GRASA

5.1 Equipos, utensilios y medios de medicin
-

balanza analtica, sensible al 0,1 mg,

bao de agua con temperatura regulable,

estufa elctrica,

evaporador rotatorio,

equipo extractor soxhlet

desecadora,

pipeta aforada de 10 cm ,

frasco cnico de 200; 250 y 300 cm ,

buretas graduadas de 10 y 25 cm ,

probetas graduadas de 25 y 50 cm ,

matraz de 1 000 cm ,

dedales de extraccin.

5.2 Reactivos
-

Eter de petrleo, con intervalo de ebullicin entre 40 y 60 C u otro solvente orgnico de

extraccin similar y libre de perxidos.

Disolucin de alcohol al 90% v/v.

Disolucin alcohlica de hidrxido de potasio 0,1 N. Se disuelve 5,61 g de hidrxido de potasio

3

con disolucin de alcohol etlico al 90% v/v, se pasa a un matraz aforado de 1 000 cm y se
enrasa con la disolucin de alcohol etlico al 90% v/v. Se valora la normalidad exacta con
disolucin de cido oxlico 0,1 N con biftalato de potasio, empleando fenoltalena como
indicador. Se envasa la disolucin en un frasco, preferiblemente de plstico, tapando bien.
-

Disolucin alcohlica de fenoltalena al 1% v/v, neutralizada,

Disolucin de benceno - etanol (2:1) v/v,

Disolucin de ter etlico - etanol (1:1) v/v,

Sulfato de sodio anhidro.

5.3 Procedimiento
5.3.1 Preparacin de la porcin de ensayo. Se pesa 20 g o ms de la muestra de ensayo
(dependiendo de la capacidad del dedal de extraccin) que contenga entre 0,5 - 1 g de grasa y
se adiciona sustancia desecante (ortofosfato dibsico de sodio y/o sulfato de sodio anhidro), en
proporcin igual a la mitad de muestra de ensayo; se mezcla y homogeniza usando un mortero.
Pasar la mezcla al dedal de extraccin en forma completa y tapar usando algodn libre de grasa.
Colocar el dedal de extraccin en el extractor soxhlet y extraer la grasa con ter de petrleo o
ter etlico durante 5 - 6 horas.

(Continua)
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Terminada la extraccin etrea, se evapora cuidadosamente el solvente, en un bao de agua o

evaporador rotatorio, o se coloca el baln con la grasa en una estufa entre 50 a 60 C dejndola
abierta unos minutos para expulsar el resto del solvente. Se cierra la estufa y se mantiene durante
30 minutos. Se extrae el baln y se coloca en una desecadora hasta temperatura ambiente; se pesa.
3

5.3.2 Determinacin. Se disuelve la grasa extrada con 15 a 20 cm de la solucin de bencenoetanol o con la solucin ter etlico - etanol. Se aaden 2 3 gotas del indicador de fenolftalena y se
valora con solucin de hidrxido de potasio 0,1 N hasta que el color rosado permanezca ms de 30
segundos.
5.3.3 Ensayo en blanco. Se realiza un ensayo en blanco, siguiendo el mismo procedimiento de
5.3.2, pero sin incluir la porcin de ensayo.
6. DETERMINACION DEL INDICE DE PEROXIDO DE LA GRASA
6 .1 Equipos utensilios y medios de medicin
-

Balanza analtica, sensible al 0,1 mg,

bao de agua con temperatura regulable,

estufa elctrica,

evaporador rotatorio,

extractor soxhlet,

desecadora,

pipeta aforada de 10 cm ,

frasco cnico de 100; 200; 250 y 300 cm ,

frasco cnico con tapa, de 250 y 500 cm ,

esptula,

dedales de extraccin,

embudo con placa filtrante, porosidad No. 1, de 30; 60 o 100 cm ,

embudo separador de 125 y 250 cm .

6.2 Reactivos
-

Eter de petrleo con intervalo de ebullicin entre 40 y 60 Cu otro solvente orgnico de

extraccin similar,

disolucin de tiosulfato de sodio 0,1 N. Se disuelven 25 g de tiosulfato de sodio

pentahidratado y 0,1 g de carbonato de sodio con agua recin hervida y se deja en reposo
durante un da. Se determina su normalidad con solucin de dicromato de potasio 0,1 N como
3

sigue: Se vierte en un frasco cnico con tapa, 100 cm de agua, 15 cm de disolucin de

3

yoduro de potasio al 10%, 10 cm de disolucin de dicromato de potasio 0,1 N y 4 cm de

cido clorhdrico concentrado. Se valora con disolucin de tiosulfato de sodio hasta casi
3

desaparicin del color amarillo. Se aaden 2 o 3 cm de disolucin de almidn y se contina

valorando hasta que desaparezca el color azul.

(Continua)
-3-

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Disolucin de tiosulfato de sodio 0,01 N. Se obtiene por disolucin a partir de la disolucin de

tiosulfato de sodio 0,1 N.

disolucin de dicromato de potasio 0,1 N. Se pesan 4,903 g de dicromato de potasio, previamente

secado en estufa a 105 C, durante 2 3 h. Se disuelven y se transfieren a un matraz aforado de 1

litro enrasndolo con agua.
-

Disolucin de almidn al 1%. Se disuelve 1 g de almidn en 90 cm de agua; se hierve durante

2 min. y se deja enfriar a temperatura ambiente, se transfiere a una probeta con tapa o matraz
3

aforado de 100 cm y se lleva a ese volumen con agua.

-

Disolucin de yoduro de potasio al 10%,

Disolucin de yoduro de potasio al 1 %

Acido clorhdrico concentrado,

Mezcla cido actico -cloroformo (2:1).

Sulfato de sodio anhidro.

6.3 Procedimiento
6.3.1 Preparacin de la porcin de ensayo. Se lleva a un dedal de extraccin una cantidad de
muestra de ensayo que contenga entre 1 y 2 g de grasa. Se tapa el dedal con algodn o
torunda libres de grasa, se coloca en el extractor soxhlet, sometido a extraccin etrea durante 7 a
8 horas, empleando ter de petrleo o ter etlico; y cuidando que el baln o frasco no se queden sin
solvente durante la extraccin.
Al trmino de este perodo se retira el baln y se aade suficiente sulfato de sodio anhdro para
eliminar el agua; se filtra a travs de un embudo con placa filtrante o papel filtro cuantitativo,

recogiendo el filtrado a 105 C, durante 2 horas y tarado.

Se evapora el solvente en bao de agua o en un evaporador rotatorio y posteriormente se lleva el

baln o frasco cnico a una estufa con temperatura entre 50 y 60 C, dejndola abierta por unos
minutos para expulsarla el resto del solvente. Se cierra la estufa y se mantiene por 30 minutos.
Despus se pasa a una desecadora hasta temperatura ambiente y se pesa en balanza analtica.
En muestras de aceites comestibles se pesan exactamente de 1 a 2 g de la muestra de
ensayo en un frasco cnico.
3

6.3.2 Determinacin. Se disuelve la grasa (porcin de ensayo) con 20 cm de la mezcla cido

actico - cloroformo y se aaden, aproximadamente, 2 g de yoduro de potasio pulverizado.
Se coloca en el bao de agua hasta que el cloroformo comience a hervir y se enfra bajo chorro
de agua corriente.
3

Se aaden, lentamente, 25 cm de disolucin de yoduro de potasio al 1%. Si la grasa es clara, se

valora directamente, con disolucin de tiosulfato de sodio 0,01 N, usando almidn como indicador.
Si la grasa es oscura, que impidiera ver el cambio de color en el punto final de la reaccin, se
realiza la separacin de sta, empleando un embudo separador y se valora la fase acuosa.
(Continua)
-4-

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6.3.3 Ensayo en blanco. Se realiza un ensayo en blanco, siguiendo el procedimiento indicado en

6.3.2 pero sin incluir la porcin de ensayo.

7. CALCULOS

7.1 Acidez. La acidez de la grasa en porcentaje se calcula por la siguiente frmula:

A=

M ( V - Vo) x N
1 000 (m - m1 )

x 100 =

M ( V - Vo) x N
10 (m - m 1 )

En donde:
A

= Acidez de la grasa en porcentaje en masa,

= masa molecular del cido para expresar el resultado:

cido lurico 200
cido palmtico 256
cido oleico 282

= volumen de la solucin alcohlica de hidrxido de potasio consumido en la valoracin de la

porcin en ensayo (cm);

Vo = volumen de la solucin alcohlica de hidrxido de potasio consumido en el ensayo en blanco

3

(cm );
m

= masa del baln ms, la grasa (g),

m1 = masa del baln vaco (g);

N

= normalidad de la solucin alcohlica de hidrxido de potasio.

7.2 ndice de perxidos. El ndice de perxido, expresado en miliequivalentes de oxgeno por

kilogramo de grasa, se calcula por la siguiente frmula:

Indice de perxido =

(V1 Vo) x N
m

x 1 000 [meq/kg]

En donde:
V1

= volumen de la disolucin de tiosulfato de sodio 0,01 N consumido em la valoracin de la

3

porcin de ensayo (cm )

Vo

= volumen de la disolucin de tiosulfato de sodio 0,01 N consumido en la valoracin del

3

ensayo en blanco (cm )

N

= normalidad de la disolucin de tiosulfato de sodio usada,

= masa de grasa (g).

7.2.1 El ndice de perxidos pueden expresarse en milimoles por kilogramo o en microgramos de

oxgeno activo por gramo (ver Anexo A).
(Continua)
-5-

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8. INFORME DE RESULTADOS

8.1 Como resultado final, debe indicarse la media aritmtica de las determinaciones realizadas por
duplicado.
8.2 En el reporte del ensayo deber indicarse el mtodo empleado y el resultado obtenido. Deber,
adems, mencionarse cualquier condicin de operacin no especificada en esta norma o
considerada como opcional, as como cualquier detalle o incidencia que pudo influenciar en el
resultado.
8.3 La diferencia entre los resultados de la acidez de la grasa de dos terminaciones llevadas a cabo
simultneamente, o en rpida sucesin por el mismo analista en la misma muestra, no debe
exceder de 0,5%, en caso contrario, debe repetirse la determinacin.
Para el caso del ndice de perxidos, la diferencia entre los resultados de dos determinaciones
llevadas a cabo simultneamente, o en rpida sucesin por el mismo analista en la misma muestra,
no debe exceder de las siguientes cantidades (ver Tabla 1), caso contrario, debe repetir la
determinacin:
TABLA 1.

INDICE DE PEROXIDO
MILIEQUIVALENTES /kg

REPETIBILIDAD

menos de 1
1a6
6 a 10
mayor a 12

0,1
0,2
0,5
1

8.4 El reporte del ensayo debe incluir toda la informacin necesaria para la completa identificacin
de la muestra

(Continua)
-6-

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ANEXO A
A.1 Factores de conversin. Para expresar el ndice de perxido en milimoles de oxgeno activo
por kilogramos de grasa o en microgramos de oxgeno activo por gramo de grasa, multiplicar el
resultado obtenido en 7.2 por el factor de conversin indicados en la Tabla 2.

TABLA 2

FORMA DE EXPRESION

FACTOR DE CONVERSION

Mil equivalentes /kg

milimoles /kg
microgramos /g

1
0,5
8

(Continua)
-7-

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APENDICE Z
Z.1 DOCUMENTOS NORMATIVOS A CONSULTAR

Esta norma no requiere de otras para su aplicacin.

Z.2 BASES DE ESTUDIO

Norma Cubana NC 74-27 Ganadera. Alimentacin animal. Determinacin del ndice de perxido de
la gr as a. Habana, 1985.
Norma Cubana NC 74-29 Ganadera. Alimentacin animal. Determinacin del ndice de acidez de la
grasa Habana, 1985.
Norma Internacional ISO 3960 (First edition) Animal and vegetable oils and fats. Determination of
peroxide value. International Organization for Standardization. Ginebra, 1977.
Norma Ecuatoriana INEN 38 Grasas y aceites comestibles. Determinacin de la acidez. Instituto
Ecuatoriano de Normalizacin. Quito, 1973.

-8-

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INFORMACIN COMPLEMENTARIA
Documento:
NTE INEN 1698

TITULO: ALIMENTOS ZOOTECNICOS. DETERMINACIN Cdigo:

DE LA ACIDEZ DE LA GRASA E INDICE DE PEROXIDOS
AL 06.01-309

ORIGINAL:
Fecha de iniciacin del estudio:

REVISIN:
Fecha de aprobacin anterior por Consejo Directivo
Oficializacin con el Carcter de
por Acuerdo No.
de
publicado en el Registro Oficial No.
de
Fecha de iniciacin del estudio:

Fechas de consulta pblica: de

Subcomit Tcnico: ALIMENTOS ZOOTECNICOS

Fecha de iniciacin: 1989-09-26
Integrantes del Subcomit Tcnico:

Fecha de aprobacin: 1990-02-22

NOMBRES:

INSTITUCIN REPRESENTADA:

Dra. Nelly Camba (Presidente)

Sr. Romeo Almeida
Ing. Stefan Valarezo
Ing. Luis Caqui
Tec. Alba Ulloa
Ing. Ruth Martnez

INSTITUTO NAICONAL DE PESCA

AGROINDUSTRIAL BALANFARINA S.A
BALANCEADOS NUTRIL S.A.
VIGOR S.A.
ABA S.A.
UNIVERSIDAD TECNICA PARTICULAR DE
LOJA
ESCUELA POLITECNICA DEL LITORAL
BALANCEADOS VIGOR S.A.
CAMARA DE PRODUCTORES DEL CAMARON
MOLINOS CHAMPION
PROPELLETS S.A.
BANACA
ALIMENTSA
NUTIL S.A.
INEN

Ing. Andres Pedrazzoli

Dra. Pola Reza
Ing. Rodolfo Barniol
Dra. dolores Carriel
Ing. Eduardo Iturralde
Tec. Graciela Baquerizo
Tec. Amparo de Zuiga
Dra. Esther Morales
Ing. Alberto Espinosa (Secre. Tecnico)

Otros trmites: 4 Esta norma sin ningn cambio en su contenido fue DESREGULARIZADA, pasando de
OBLIGATORIA a VOLUNTARIA, segn Resolucin de Consejo Directivo de 1998-01-08 y oficializada
mediante Acuerdo Ministerial No. 235 de 1998-05-04 publicado en el Registro Oficial No. 321 del 1998-05-20
El Consejo Directivo del INEN aprob este proyecto de norma en sesin de 1989-04-19
Oficializada como: OBLIGATORIA
Registro Oficial No. 198 del 1989-05-25

Por Acuerdo Ministerial No. 194 del

1989-05-10