03 - Capítulo 2

Toxicologa Forense, LCF,UNAM
2.4.2. Eliminacin por la bilis-heces fecales. .................................. 31
CAPTULO 2.
TIPOS DE TOXICIDAD
Bibliografa. ........................................................................................ 31
2.1 C LASIFICACIN
DE AGEN TES TXICOS
C ONTENIDO
CAPTULO 2.
TIPOS DE TOXICIDAD ........ 1
2.1 Clasificacin de agentes txicos .................................................... 1

2.2 Tipos de toxicidad .......................................................................... 3
2.3 Etapas de la accin txica .............................................................. 4
2.4 Tipos y caractersticas de la exposicin ......................................... 4
De acuerdo con el enfoque requerido por los especialistas en

toxicologa, los agentes txicos se pueden clasificar de diferentes
maneras. Los criterios ms utilizados son aquellos que consideran la
dosis letal media de las sustancias, al mecanismo de accin y al rgano
diana sobre el cual actan los xenobiticos. La Tabla 1 muestra algunas
formas de clasificar a los agentes txicos [1].
2.4.1. Ruta y sitio de la exposicin .................................................. 5

2.4.2. Duracin y frecuencia de la exposicin ................................. 5
2.5 Toxicocintica ................................................................................ 6
Absorcin ....................................................................................... 13
Distribucin ................................................................................... 19
2.6 Metabolismo y toxicodinmia ..................................................... 20
2.1. La Fase I del metabolismo: Reacciones de transformacin o
funcionalizacin. ............................................................................ 20
2.2. La Fase II del metabolismo. Reacciones de conjugacin. ....... 24
T ABLA 1. C RITERIOS DE CLASIFICACIN DE AGENTES TXICOS . T OMADO DE

H ERNNDEZ -L UIS ET AL . [1].
Por el rgano diana
Por su uso
Por su origen
Hgado
(hepatotxico)
Rin (nefrotxico)
Cerebro
(neurotxico)
Plaguicida
Aditivo de alimentos
Disolvente
Animal
Vegetal
Mineral
Por sus efectos
Por su mecanismo de accin
Por su dosis
letal media
Carcingeno
Teratgeno
Unin a biomolculas
Interferencia con las
interacciones normales
ligando-receptor
Muy txico
Prcticamente
no txico
2.3 La Fase III. Transporte o excrecin .......................................... 26

2.4 Eliminacin. ................................................................................. 30
2.4.1 Eliminacin renal. ................................................................. 30
Para el criterio de la dosis letal media se utiliza un rango de valores que

constituyen los rubros de clasificacin, que se muestran en la siguiente
tabla.
T ABLA 2. C LASIFICACIN DE LOS
XENOBITICOS SEGN LA DOSIS LETAL MEDIA .
Dosis letal media (roedores)
Clasificacin
> 15 000 mg/kg de peso corporal
Prcticamente no txico
5 000 15 000 mg/kg de peso corporal
Ligeramente txico
500 5000 mg/kg de peso corporal
Moderadamente txico
50 500 mg/ kg de peso corporal
Muy txico
5 50 mg/ kg de peso corporal
Extremadamente txico
< 5 mg/kg de peso corporal
Super txico
A continuacin se muestran ejemplos de la dosis letal media de algunos

xenobiticos en una exposicin aguda (Tabla 3)
T ABLA 3. E JEMPLOS DE DL 50 DE ALGUNOS XENOBITICOS
Dioxina
0.001
Estricnina
Es importante mencionar que el valor de DL50 que presente una

sustancia no es una constante, puede variar dependiendo de las
condiciones experimentales en que se determine. Uno de los factores
que influye de forma determinante es la ruta de administracin. Con
excepcin de la ruta de administracin intravenosa (IV), el proceso de
absorcin forma parte de las restantes que se utilizan en trabajos de
investigacin o en el campo clnico. Para conocer la influencia de la
absorcin en la toxicidad de un xenobitico, se comparan sus valores de
DL50 obtenidos por varias rutas de administracin. A continuacin se
muestra un ejemplo con datos de toxicidad en ratones; la va
intravenosa se reporta para establecer la toxicidad sin que intervenga el
proceso de absorcin (Tabla 4)
T ABLA 4. I NFLUENCIA DE LA RUTA DE ADMINISTRACIN EN

DE H ERNNDEZ -L UIS ET AL . [1].
LA TOXICIDAD . TOMADO
Pentobarbital
(DL50 mg/kg)
Isoniacida
(DL50
mg/kg)
Procana
(DL50
mg/kg)
Xenobitico
DL50 (mg/kg de peso)
Ruta de administracin
de:
Etanol
10 000
Oral
280
142
500
Morfina (sulfato)
900
Toxina botulnica
0.00001
Subcutnea
Intramuscular
130
124
160
140
800
630
Nicotina
Intraperitoneal
130
132
230
Fenobarbital sdico
150
Intravenosa
80
153
45
Cloruro de sodio
4000

De los datos mostrados se desprende que el pentobarbital ocasiona el
mismo grado de toxicidad si se administra por la va intramuscular,
subcutnea y la intraperitoneal; en la ruta oral es donde se presenta el
menor riesgo de intoxicacin por esta sustancia. Puede considerarse
que por esta ltima ruta, el proceso de absorcin gastrointestinal
influye decididamente en la toxicidad del pentobarbital. De manera
anloga se podra mencionar a la procana, donde la ruta que presenta
el mayor riesgo de toxicidad es la intraperitoneal. Puede anotarse que
en la isoniacida, el proceso de absorcin no decide el grado de
toxicidad, ya que los valores de las diferentes rutas de administracin,
incluyendo la intravenosa, son parecidas. [1].
Los metales pesados causan toxicidad directa al

tbulo proximal y pueden provocar vasoconstriccin
de los vasos sanguneos que rodean al rin
Complejos inmunes a
penicilinas,
inmunoglobulinas,
sulfonamidas, pueden
depositarse durante la
filtracin en los
glomrulos. La reaccin a
la deposicin puede
causar glomerulonefritis.
Por lo que se refiere a la clasificacin segn los mecanismos de accin

txica, los diferentes aspectos y procesos que comprenden stos sern
descritos en la revisin de los temas de metabolismo y toxodinmica.
Analgsicos tales como aspirina o acetaminofn
pueden causar nefritis intersticial y necrosis
papilar
El tetracloruro de carbono (CCl4 ) y el cloroformo

(CHCl3 ) son biotransformados a intermediarios
reactivos en el tbulo proximal.
El tbulo colector
es relativamente
resistente al dao
Aminoglucsidos son sustancias

policatinicas que daan la
estructura aninica de los
glomrulos.
F IGURA 1. S USTANCIAS QUE EJERCEN EFECTOS TXICOS SOBRE EL RIN
2.2 T IPOS
DE TOXICIDAD
Una clasificacin comn de los compuestos txicos toma en cuenta un

rgano o tejido sobre el que puedan presentar efectos txicos, algunos
de los trminos utilizados son nefrotoxicidad (sobre el rin),
hepatoxicidad (sobre el hgado). Cabe resaltar que un rgano est
compuesto de diferentes clulas especializadas y que el xenobitico
puede ser selectivamente txico a un tipo de clula o estructura en
particular. Un ejemplo de lo anterior se puede apreciar en las figuras 1 y
2 [1].

Txicos que daan las
mucosas superiores
incluyen amoniaco y gases
hidrosolubles.
ETAPA DE EXPOSICIN
RIESGO, FRECUENCIA, DOSIS
Xenobitico disponible
para ingresar al organismo
ETAPA TOXOCINTICA
(FARMACOCINTICA)
El edema pulmonar puede ser causado

por exposiciones severas a fosgno,
cloro, xileno, boro, manganeso, xidos
de nitrgeno, entre otras.
ABSORCIN, DISTRIBUCIN,
BIOTRANSFORMACIN,
EXCRESIN.
Xenobitico disponible
para ejecrcer su accin
ETAPA TOXODINMICA
La inflamacin intersticial que
provoca fibrosis es causada por
asbestos, polvo, berilio, slica,
tungsteno
(FARMACODINMICA)
INTERACCIN DEL AGENTE

TXICO CON SU RECEPTOR
Ampliacin de la
respuesta biolgica.
EFECTOS TXICOS
SIGNOS CLNICOS
El paraquat es liberado por la sangre y

bioactivado por las clulas tipo II
(neumocitos) resultando en fibrosis
pulmonar.
F IGURA 3 E TAPAS DE LA ACCIN TXICA .
F IGURA 2. S USTANCIAS QUE EJERCEN EFECTOS TXICOS SOBRE EL PULMN
2.3 E TAPAS
DE LA ACCIN T XICA
Se han propuesto tres etapas por las que una sustancia tiene que pasar
para que manifieste su accin biolgica. A continuacin se presentan las
etapas de la accin txica.
Aunque la secuencia de este esquema la siguen de manera general la

mayora de los xenobiticos, en ocasiones, sta se puede alterar
dependiendo de la ruta de ingreso de las sustancias al organismo. Es
importante mencionar que las etapas pueden transcurrir
simultneamente y no son independientes entre s.
2.4 T IPOS
Y CARACTERSTIC AS DE LA EXPOSICI N
La exposicin es el conjunto de factores que permiten la penetracin o

absorcin de un xenobitico hacia el interior de un organismo vivo.
Algunos factores que se deben considerar en la etapa de exposicin son

los relacionados con el medio ambiente (por ejemplo el estar en
contacto con el xenobitico en el trabajo), el individuo (por ejemplo su
estado de salud y sus hbitos alimentarios) y el mismo xenobitico
(propiedades fisicoqumicas para que pueda llegar a su rgano diana).
T ABLA 5. D URACIN DE LA EXPOSICIN

Duracin de la exposicin
Tipo de exposicin
< 24 horas
Aguda
< 1 mes
Subaguda
1 3 meses
Subcrnica
> 3 meses
Crnica
Las caractersticas de la exposicin suelen dividirse en dos apartados

generales que son:
2.4.1. Ruta y sitio de la exposicin
Las rutas y sitios de exposicin se refieren a las diferentes vas
fisiolgicas o sitios anatmicos por donde los xenobiticos pueden
ingresar al organismo. Las ms importantes para la toxicologa son:
Gastrointestinal
Pulmonar
Drmica
Parenteral
Para muchos xenobiticos, los efectos seguidos de una simple

exposicin son completamente diferentes a aquellos producidos por
exposiciones repetidas.
Es pertinente sealar que algunas veces las circunstancias en que se

pueda presentar una intoxicacin pueden puntualizar la importancia de
algunas de estas rutas de exposicin, por ejemplo, en el campo
industrial, las rutas de exposicin ms importante son la pulmonar y la
drmica, por otro lado, en la mayora de los envenenamientos
accidentales, la ruta de ingreso mayoritaria de los txicos es la
gastrointestinal. [1].
T ABLA 6. E JEMPLOS DE EFECTOS EN LA EXPOSICIN AGUDA Y CRNICA .

TOMADO DE H ERNNDEZ -L UIS F. ET AL [1].
2.4.2. Duracin y frecuencia de la exposicin
Tetracloruro de
carbono (CCl4)
Duracin de la exposicin
La duracin a que un individuo se exponga a una sustancia
determinada, se ha dividido en varias etapas para el estudio de la
misma y la diferencia de los efectos que se producen.
Xenobitico
Exposicin/ efecto
agudo
Exposicin/ efecto
crnico
Depresin del sistema

nervioso central (SNC)
Metahemoglobinemia
Benceno
Leucemia
Cirrosis heptica
Depresin del SNC

Insuficiencia renal
Existen diferentes escenarios en los tipos de exposicin y efectos que se

pueden presentar. En general, los efectos agudos ocasionados por un

xenobiotico se van a manifestar a dosis mayores con respecto a
aquellas dosis que provocan efectos crnicos. Se pueden presentar
otros escenarios distintos a los tpicos exposicin aguda/efecto agudo y
exposicin crnica/efecto crnico. Una variante sucedera con el
ingreso crnico de un compuesto lipoflico que se acumule en el tejido
graso; cuando ocurriera una movilizacin de las grasas corporales por el
sometimiento a una dieta o una enfermedad degenerativa (diabetes) o
en procesos reproductivos, el compuesto se incorporara al plasma en
alta concentracin para ejercer su efecto agudo. Un escenario adicional
es que un organismo se exponga de una manera aguda a un xenobitico
(ej. etapa embrionaria) y tiempo despus se presenten anormalidades
en su desarrollo. [1].
Frecuencia de exposicin
Dosis nica: Se trata de realizar una sola administracin de un

cierto xenobitico.
Dosis fraccionada: El ingreso de una cantidad determinada de una

sustancia se distribuye en varias administraciones a diferentes
intervalos de tiempo; con esto se puede reducir el efecto txico.
2.5 T OXICOCINTICA
La toxocintica es el estudio del movimiento (traslado) de los xenobiticos
dentro del organismo. El estudio de esta etapa comprende los procesos de
absorcin, metabolismo, distribucin y excrecin de compuestos en los
organismos vivos. La Figura 4 esquematiza en trminos generales la etapa
de la toxocintica.
F IGURA 4. P ROCESOS INVOLUCRADOS EN LA TOXICOCINTICA
Un aspecto importante a considerar una vez que el xenobitico ha

ingresado al organismo, es que tiene que atravesar varias membranas de los
diferentes compartimentos biolgicos que componen el cuerpo para ejercer
su accin en un sitio distante de su ingreso. La figura 5 muestra la
distribucin de lquidos en el cuerpo y la serie de membranas que debera
atravesar un xenobitico para llegar a su rgano diana. [1].
F IGURA 6. M ECANISMOS DE TRANSPORTE PARA
LOS XENOBITICOS
Hay una forma adicional de ingreso de sustancias, primordialmente en

el intestino delgado. Este sistema se ha llamado transporte de
nanopartculas o persorcin (filtracin por poros membranales) y se
presenta cuando las clulas de las vellosidades se desprenden hacia el
lumen, provocando una apertura por donde ingresan macromolculas o
nanopartculas. [1].
F IGURA 5. D IFERENTES MEMBRANAS QUE ATRAVIESA UN XENOBITICO
La forma en que los xenobiticos se trasladan a travs de las diferentes

monocapas celulares se muestra en Figura 6 y pueden ser:
A)
B)
C)
D)
E)
Difusin simple transcelular

Difusin simple paracelular
Transporte activo o difusin facilitada
Endocitosis/ exocitosis
Reflujo
Un hecho importante a considerar es que los procesos de traslado de

xenobiticos se inician a nivel de las membranas celulares. La estructura
de las membranas biolgicas determina su funcin y caractersticas. La
ms importante, desde un punto de vista toxicolgico, es que son
selectivamente permeables. Solamente ciertas sustancias son capaces
de pasar a travs de ellas, dependiendo de las caractersticas
fisicoqumicas que a continuacin se mencionan:
- Liposolubilidad
- Polaridad y carga elctrica de la molcula.
- Tamao de la molcula
- Similitud a sustancias endgenas.

A continuacin se integran los diferentes mecanismos del traslado de
xenobitico en las monocapas celulares y su comportamiento a nivel de
membranas celulares.
Difusin simple
Esta es la forma ms utilizada por la mayora de los xenobiticos para
transportarse en los organismos vivos. Se presenta en dos variantes:
difusin simple transcelular y difusin simple paracelular. Algunas
propiedades fisicoqumicas y el peso molecular del xenobiotico son las
que determinan que variante de transporte utilizar; aunque algunos
de ellos usan ambas alternativas.
T ABLA 7. F ACTORES QUE INFLUYEN EN LA DIFUSIN SIMPLE
Factor que afecta el transporte
Transcelular
Paracelular
Gradiente de concentracin
Liposolubilidad
Tamao molecular
+
-
pKa
La difusin simple transcelular se presenta cuando el xenobiotico

ingresa a la clula y difunde a travs del citoplasma para
posteriormente salir y continuar su movimiento.
Como se mencion en la tabla anterior, los factores que afectan la
velocidad de este proceso a nivel de la membrana celular son:
a) El gradiente de concentracin del compuesto.
I LUSTRACIN 1. G RADIENTE DE CONCENTRACIN DE UN XENOBITICO . TOMADO DE

H ERNNDEZ -L UIS F. ET AL . [1].
Es importante anotar que el xenobitico ingresa a la membrana,

luego se acumula o disuelve, segn sus propiedades de
liposolubilidad; posteriormente, sale hacia la parte intracelular.
Todo lo anterior siguiendo la direccin de mayor a menor
concentracin.
b) Los parmetros que afectan la facilidad para que la molcula del
xenobitico pueda moverse al interior lipoflico de la membrana
son:
-
Coeficiente de difusin (D): depende primariamente del peso

molecular, conformacin y solubilidad del xenobitico en la
membrana. La magnitud de D refleja la facilidad que tiene un
xenobitico para distribuirse por la membrana. Cuando se
tiene un xenobitico de bajo peso molecular, con pocos
conformeros y de buena liposolubilidad, su valor de D es alto,
lo que indicar que difundir sin ningn problema

-
Coeficiente de particin (P): Expresa el grado de solubilidad en

lpidos de un compuesto. Se define como la relacin de la
concentracin de una sustancia, entre una fase orgnica,
generalmente 1-octanol o cloroformo, y una fase acuosa,
medidos a 25 o 37 C. Es importante para la aplicacin de este
parmetro que la molcula no presente carga elctrica. Se
representa con un parmetro que denota la distribucin de un
xenobitico entre dos fases inmiscibles.
de dicho parmetro aumenta, el % de traslado por las

membranas disminuye.
Estructura
El P se utiliza para representar la facilidad de traslado que un

xenobitico presentara al difundir a travs de una membrana
biolgica de naturaleza lipoidea. En vista de que los valores
numricos que se obtienen experimentalmente se presentan
dificultades en el momento de intentar hacer una
representacin grfica, por lo que se ha optado manejar los
datos en escala logartmica; esta es la razn que en la literatura
aparezca como log P. [1].
Para ilustrar la utilidad del coeficiente de particin, en la tabla
siguiente se comparan el porcentaje de absorcin de
diferentes barbitricos en el colon de ratas con el valor
numrico de este parmetro. [1].
Los valores de comparacin en el log P, hacen referencia a una
serie de xenobiticos, estructuralmente relacionados
(anlogos), como se ejemplific en la tabla anterior, en donde
se equiparan una serie de compuestos que pertenecen a la
familia de los barbitricos. Es necesario sealar que el
aumento infinito del coeficiente de particin, para una serie de
compuestos, no incrementar el porcentaje de absorcin para
aquellos que sean los ms liposolubles; ya que cuando el valor
NH
N
H
Barbitrico
R1
R2
Barbital
Fenobarbital
Ciclobarbital
Pentobarbital
Secobarbital
Etil
Etil
Etil
Etil
Etil
Etil
Fenil
Ciclohexil
1-metilbutil
Secbutil
Log P
(Cloroformo
/agua)
0.7
4.8
13.8
28
50.7
%Traslado
en colon
de rata
12
20
24
30
40
T ABLA 8. R ELACIN DEL TRASLADO DE BARBITRICOS CON SU COEFICIENTE DE

PARTICIN
Los xenobiticos que son muy polares o hidroflicos

frecuentemente presentan propiedades pobres de transporte,
mientras que aquellas muy lipoflicos, alcanzan slo un
gradiente de concentracin pequeo. Para que las diversas
sustancias puedan trasladarse, primero se tienen que
solubilizar en el agua del compartimiento donde se encuentren
presentes. [1].

En la tabla siguiente se muestran algunos valores de log P para
varios xenobiticos y su grado de absorcin en el ser humano.
Xenobitico
log P
Absorcin en humano
Aspirina
Atropina
Cafena
Diacepam
Morfina
Tetraciclina
Teofilina
-1.1
1.8
0.0
2.7
-0.1
-1.4
0.0
Bien absorbido
Bien absorbido
Bien absorbido
Bien absorbido
Absorbido un 60%
Absorcin irregular e incompleta
Bien absorbido
T ABLA 9. L OG P Y ABSORCIN ORAL DE ALGUNOS XENOBITICOS
Disminucin de la polaridad
I LUSTRACIN 2. R ELACIN ENTRE LOFG P Y EL TRASLADO DE UN XENOBITICO
Si este conocimiento de log P de xenobioticos (que acten en

un rgano distante a su sitio de ingreso) se quiere extrapolar a
un mamfero, se dira que aquellas sustancias que presentan
log P pequeos (muy hidroflico, muy polares), se excretarn
con cierta facilidad antes de alcanzar su sitio de accin; por
otro lado, los de mayor valor de log P (muy lipoflicos, menos
polares), se almacenarn en los depsitos lipoflicos del
organismo. Empero, hay un coeficiente de particin "ideal"
(Po), en donde el xenobitico que lo presente, tendr la mayor
probabilidad de alcanzar su sitio de accin. [1].
Dado que muchos xenobiticos son cidos o bases dbiles, se

ha propuesto la inclusin del parmetro de coeficiente de
distribucin (log D). En este se indica, en forma de subndice, el
valor de pH de la fase acuosa a la que se realiz la
determinacin: log DpH. La diferencia entre log P y log D, es que
este ltimo incluye, en la fase acuosa, la porcin ionizada y no
ionizada del cido o base que se est evaluando. [1].
LogDpH =
[fase orgnica (X no ionizado) ]

[fase acuosa (X no ionizado + X ionizado)]
Donde: X: Xenobitico
En este sentido, y a diferencia del log P, el valor numrico del
log D va a cambiar segn sean las caractersticas estructurales
del xenobitico y el valor del pH del medio acuoso donde se
realice la medicin.

-
Tamao molecular: Si la liposolubilidad se mantiene constante

y el tamao molecular (radio cilndrico) se incrementa,
entonces habr una menor facilidad para atravesar las
membranas biolgicas debido a la resistencia por friccin o
impedimento estrico que presenten las membranas. Las
molculas de menor tamao pasan por filtracin. El tamao no
debe ser mayor a 4 x 10-4 m.
Grado de ionizacin: muchas de las sustancias que presentan
actividad biolgica son cidos o bases dbiles, por lo que el
grado de ionizacin que presenten a diferentes valores de pH
va a cambiar de acuerdo a su valor de pKa.
pH < pKa
pKa
pH > pKa
O
O
R
OH
cido
NH 3 +
NH2
base
I LUSTRACIN 4. E L P K A Y LOG P DE LA CAFENA .
I LUSTRACIN 3. R EACCIONES CIDO - BASE
Es el valor del pKa quien nos da una relacin del grado o fuerza de
disociacin de un cido o base. La siguiente ilustracin muestra la
relacin entre el pKa de diferentes sustancias con el pH del medio. Es
importante notar que los cidos y las bases se comportan de diferente
manera.
Para encontrar valores de pKa para xenobiticos en general puede
consultar el Merck Index (https://www.rsc.org/merck-index). En
particular para frmacos: las farmacopeas o el Drug bank
(www.drugbank.ca).
La Tabla x. muestra el porcentaje de la forma inica y no inica del

fenobarbital, calculado con la ecuacin de Henderson-Hasselbach y el
de la sustancia pKa = 7.44.
pH
No ionizado (%)
Ionizado (%)
2.0
100
4.0
99.96
0.04
6.0
96.17
3.83
7.0
71.53
28.47
8.0
20.07
79.93
10.0
0.25
99.75
12.0
0.00
100
T ABLA 10. D ISOCIACIN DEL FENOBARBITAL A DIFERENTES VALORES DE P H.

La relacin entre el pKa y pH va a jugar un papel importante debido a
que al cambiar los valores del segundo se altera la relacin inica y no
inica del xenobitico. De manera general, se acepta que la forma no
ionizada (ms lipoflica) de un cido o una base es la que atraviesa la
membrana, y no la forma inica de la misma. Aunque esta ltima es
ms hidrosoluble, el incremento en el coeficiente de particin al pasar
de la forma inica a la forma no inica, generalmente excede en varios
rdenes de magnitud a la prdida de solubilidad que se pudiese
presentar por la misma conversin. [1].
Un ejemplo de las relaciones anteriores, lo constituye el diclofenaco y
su distribucin en dos compartimentos biolgicos con valores de pH
diferentes. [1].
Difusin facilitada
Esta forma de transporte prcticamente no es utilizado por los
xenobiticos. Los parmetros importantes a considerar son:
Requiere de un acarreador
Necesita de un gradiente de concentracin
No implica un gasto de energa
Es un proceso saturable.
Transporte activo
Los aspectos relevantes a considerar en este tipo de transporte son:
Requiere de un acarreador
No necesita de un gradiente de concentracin
Requiere de un gasto de energa
Es saturable
En general, para que un xenobitico pueda utilizar este transporte

debe presentar una similitud estructural con alguna de las sustancias
que se encuentran de manera natural en el organismo. Ejemplo:
O
NH
NH
N
H
N
H
uracilo
5-
fluorouracilo
I LUSTRACIN 5. R ELACIN DE LA CONCENTRACIN DEL DICLOFENACO EN

COMPARTIMENTOS A P H DIFERENTES . T OMADO DE H ERNNDEZ -L UIS F. ET AL . [1].
I LUSTRACIN 6. E STRUCTURAS SEMILARES
DEL URACILO Y EL
5- FLUOROURACILO

Por otro lado, existen algunos compuestos que utilizan transportadores
especiales para atravesar las membranas intestinales. Algunos de los
ejemplos se presentan en la siguiente Tabla.
Xenobiticos
Transporador
cido saliclico, cido valprico,
Monocarboxilato de pptidos
antibiticos beta-lactmicos,
(PEPT)
Absorcin
La absorcin es el proceso de transferencia de un xenobitico desde su
sitio de ingreso al organismo hasta su llegada a la circulacin sangunea.
Los sitios de ingreso ms importantes para los xenobiticos son:
a) Tracto gastrointestinal
b) Tracto respiratorio
c) Piel
inhibidores de acetilcolinesterasa
Fe (II), Cd(II)
Transportadores de iones
divalentes
T ABLA 11. E JEMPLOS DE XENOBITICOS Y SUS TRANSPORTADORES . T OMADO DE

H ERNNDEZ -L UIS , F. ET AL [1].
Tracto gastrointestinal
Es importante marcar que el trmino absorcin gastrointestinal de
xenobiticos implica la determinacin de la concentracin de la
sustancia en plasma despus de su ingreso por la ruta oral.
El transporte activo juega un papel importante en la excrecin de

sustancias txicas por el rin. En este rgano se han identificado 2
tipos de este transporte, uno para compuestos cidos y otro para
compuestos bsicos. Por lo que respecta al hgado, se han reportado
3 diferentes tipos de transporte activo, uno para cidos, uno para
bases y uno para compuestos neutros.
Endocitosis/Exocitosis
Invaginacin que provoca una clula hacia una partcula slida
(fagocitsis) o pequeas porciones de lquido (pinocitsis). Este
sistema es importante para la trasportacin de macromolculas y
liposomas.
I LUSTRACIN 7. R UTAS QUE SIGUE EL XENOBITICO EN EL TRACTO

GASTROINTESTINAL . T OMADO DE H ERNNDEZ -L UIS , F. ET AL [1].

Los factores que afectan la absorcin gastrointestinal de una sustancia
son:
Velocidad de disolucin y tiempo de desintegracin de la

forma farmacutica (segn sea el caso)
El pH de la porcin gastrointestinal y el valor de pKa que
presente el xenobitico
Vaciamiento gstrico
rea de absorcin
Transporte a travs de las clulas (Liposolubilidad y tamao de
partcula del xenobitico),
Inestabilidad qumica y metabolismo del xenobitico a nivel de
membrana intestinal y/o por la presencia de microflora.
de absorcin preferencial de la mayor parte de los nutrientes y

xenobiticos.
Glndulas salivales
Parotida
Submandibular
Sublingual
Faringe
Lengua
Cavidad oral
Esfago
pH =6.8
Pncreas
Hgado
Vescula biliar
Estmago pH = 1-3
Conducto pancretico
Duodeno
pH = 5-6.5
Conducto biliar
pH de la porcin gastrointestinal
Los valores de pH a lo largo del tracto gastrointestinal presentan
variaciones, lo que afecta el comportamiento de los xenobiticos que
poseen propiedades de cidos dbiles o bases dbiles. Tomando en
cuenta solo las propiedades cido-base y asumiendo que la absorcin
se dar por difusin simple, solo la forma no inica ser capaz de
atravesar las membranas, y por tanto, se espera que los compuestos
cidos se absorban en el estmago, y los compuestos bsicos en el
intestino delgado. Sin embargo, es necesario puntualizar, que las
diferentes sustancias tanto bsicas como cidas, se van a absorber
tambin a nivel de intestino delgado, ya que la mayora de los
xenobiticos son cidos o bases dbiles y el valor de pH de esta regin
anatmica (5-8 dependiendo de la zona) es adecuado para su absorcin
por difusin simple. Adems, independientemente del valor del pH que
aqu se manifieste, el intestino delgado presenta las condiciones
ptimas de rea de absorcin y vascularizacin que permiten sea el sitio
Clon transverso
Coln ascendente
Coln Descendente
ilen
pH = 5.5-8
pH =7-8
Ciego
Apndice
Recto
Ano
I LUSTRACIN 8. R EGIONES Y VALORES DEL PH DEL TRACT GASTROINTESTINAL
Vaciamiento gstrico
Determina el paso de alimentos del estmago hacia la parte superior
del intestino delgado. Este proceso puede acelerarse o retardarse segn
ciertas circunstancias. Para los xenobiticos que tienen velocidades de
disolucin muy lenta, un vaciamiento gstrico retardado favorecer su
proceso de absorcin; ya que tendrn ms tiempo para que una
cantidad mayor de esta sustancia se logre solubilizar; por otro lado,

aquellos compuestos con velocidades de disolucin altas, su absorcin
se ver favorecida con un vaciamiento gstrico acelerado, porque les
ayudara a ingresar al intestino delgado rpidamente para absorberse
en mayor proporcin.
Promueven el vaciamiento gstrico
Retardan el vaciamiento
gstrico
Soluciones amortiguadoras
Alimentos grasosos y viscosos
alcalinas
Estados de depresin
Estados de ansiedad
lceras
Hambre
Hipotiroidismo
Hipertiroidismo
Alimentos calientes
Alimentos fros
T ABLA 12. F ACTORES QUE PROMUEVEN O RETARDAN EL VACIAMIENTO GSTRICO .

T OMADO DE H ERNNDEZ -L UIS , F., ET AL [1].
rea de contacto
El intestino delgado presenta mayor rea de ingreso debido a la
presencia de las vellosidades y microvellosidades de la mucosa
intestinal como se puede apreciar en las ilustraciones siguientes.
I LUSTRACIN 9. C APA SEROSA Y MUSCULAR DEL INTESTINO DELGADO
Las diferentes sustancias que alcanzan el intestino delgado ingresan a

travs de las vellosidades intestinales que presentan un rea mayor
para que se realice este proceso. El intestino tiene un excelente
suplemento de flujo sanguneo, lo cual asegura que el xenobitico
absorbido se remueva rpidamente, logrando de esta forma mantener
el gradiente de concentracin.
A pesar de que el tiempo de residencia del contenido gastrointestinal es

mayor en el colon, el rea de contacto del duodeno y yeyuno es la que
determina la mayor cantidad de permeacin del xenobitico. [1].
Inestabilidad qumica y metabolismo a nivel de membrana intestinal

y/o por la presencia de microflora
I LUSTRACIN 10. P ORCIONES DEL INTESTINO DELGADO Y SU LONGITUD RESPECTIVA
La descomposicin de los xenobiticos es un factor importante en la

absorcin gastrointestinal. Los compuestos lbiles en el medio cido se
hidrolizan en el estmago con un valor de pH de 1. Pptidos como la
insulina, oxitocina, vasopresina, son destruidos por las enzimas
proteolticas digestivas. En la membrana intestinal tambin se
presentan enzimas que pueden transformar a los compuestos que
presenten grupos funcionales susceptibles. Adems de la
descomposicin por enzimas del organismo humano, algunos
compuestos pueden ser transformados por las enzimas secretadas por
los microorganismos que viven como comensales en el intestino grueso.
En algunos casos los compuestos logran transformarse en entidades
con mayor actividad biolgica. [1].
La siguiente tabla resumen las caractersticas de tracto gastrointestinal:
longitud, rea, pH, tiempo de residencia y presencia de
microorganismos.
I LUSTRACIN 11. C ORTE DEL YEYUNO Y EL INCREMENTO DEL REA DE

CONTACTO
Regin
Longitud
(m)
rea
(m2)
pH
Residencia
Microorganismos
Esfago
0.3
0.02
6.8
> 30 s
Estmago
0.2
0.2
13
15h
<102
Duodeno
0.3
0.02
5 6.5
> 5 min
<102
Yeyuno
100
6.9
12h
<102
leon
100
7-8
23h
<107
Colon
1.5
5.5 8
15 48 h
<1011
T ABLA 13. C ARACTERSTICAS DE LAS REGIONES DE TRACTO GASTROINTESTINAL
Tracto respiratorio
Los pulmones presentan una gran rea de absorcin, alrededor de 50 a
100 m2 en el hombre; presentan una excelente irrigacin sangunea y la
barrera entre el aire en los alvolos y la corriente sangunea es tan
delgada como el grosor de dos capas de clulas.Debido a esta
circunstancia anatmica de los alvolos, la absorcin desde el pulmn
es muy rpida y eficiente.
I LUSTRACIN 12. E STRUCTURACIN DEL SISTEMA

RESPIRATORIO . TOMADO DE H ERNNDEZ -L UIS , F., ET
AL [1].

Tamao de la partcula slida y lquida
Segn sea el tamao de partcula se irn reteniendo en la porcin del
sistema respiratorio.
I LUSTRACIN 13. R EGIONES DEL SISTEMA
RESPIRATORIO
Regin nasofaringe: Partculas de 5 m de dimetro o mayores

Regin traqueobronquial: Partculas de 2 a 5 m de dimetro
Regin alveolar: Partculas menores o iguales a 1 m.
Despus que las partculas han sido depositadas en la regin alveolar,

pueden pasar al torrente sanguneo. Si estas partculas no son
fcilmente solubles, entonces son fagocitadas y transferidas
directamente al sistema linftico donde pueden permanecer
almacenadas por un periodo considerable de tiempo. El ingreso de las
partculas puede ser controlable por la solubilidad y caractersticas de
transferencia de la propia membrana.
Gases y vapores
El grado de absorcin depende de la solubilidad del compuesto
gaseoso. Compuestos muy solubles pueden ser absorbidos por un solo
movimiento de respiracin. Para tales compuestos un incremento del
flujo sanguneo no afecta su velocidad de absorcin; la nica forma de
incrementarla es aumentar la ventilacin pulmonar. Para gases que son
poco solubles en la sangre, presentan una capacidad limitada de
absorcin. El torrente sanguneo se satura rpidamente y la nica forma
de incrementar su paso a travs de las membranas, es incrementando
el flujo sanguneo.
Piel
La piel est constantemente expuesta a sustancias extraas tales como
gases, disolventes, soluciones, por lo que la absorcin de las mismas es
potencialmente importante. Sin embargo, aunque la piel presenta una
gran superficie de exposicin, su estructura es tal que presenta una
barrera. Esto se debe a que la capa ms externa se forma por clulas
muertas o clulas empaquetadas con queratina, con escaso riego
sanguneo. Los txicos atraviesan por difusin pasiva presentando
propiedades de liposolubilidad. La abrasin de la piel puede
incrementar la absorcin porque se daa el estrato corneo. Un
incremento en el grado de hidratacin favorece la absorcin.
Es importante mencionar que la piel es el rgano metabolizante ms
grande y ms accesible, expresa muchos citocromos P450 (al menos 13
CYP2) que tienen funciones crticas en el metabolismo de substratos
endgenos y exgenos. La mayora de estos genes se expresan en la
epidermis o queratinocitos. Este hecho se relaciona directamente con
algunas sustancias txicas que pueden ser metabolizadas en la piel.

Distribucin
Despus de que los compuestos han sido absorbidos, pasan al torrente
sanguneo. La parte del sistema vascular en la cual el compuesto se
encuentra depender del sitio de absorcin. La absorcin por la piel
implicar, en primera instancia, a la sangre perifrica; por otro lado, si
la absorcin fue por va pulmonar, entonces el compuesto estar en la
corriente sangunea mayor. Para la mayora de compuestos absorbidos
por va oral, la vena porta ser la responsable de acarrearlos hacia el
hgado y de all al torrente sanguneo.
Una vez que los xenobiticos se encuentran en el torrente sanguneo,
se distribuirn por todo el cuerpo y sern diluidos por la sangre.
I LUSTRACIN 14. R UTAS DE DISTRIBUCIN DE XENOBITICOS . TOMADO DE

H ERNNDEZ -L UIS , F. ET AL [1].
Los factores que influyen el proceso de distribucin de xenobiticos

son:
Propiedades fisicoqumicas del xenobitico
Gradiente de concentracin del xenobitico entre los
diferentes compartimentos del organismo
Riego sanguneo que reciben los diferentes rganos y tejidos
Unin del xenobitico a protenas sistmicas.
Unin a protenas
Un indicador importante acerca de los procesos de distribucin con
implicaciones toxicolgicas es la interaccin de xenobiticos con las
protenas plasmticas y algunas macromolculas en otros rganos y
tejidos. Las evaluaciones realizadas en los laboratorios para
xenobiticos en plasma, se basan en la cuantificacin, tanto del
xenobitico libre como el enlazado. La unin de xenobiticos a los
componentes del plasma involucra primeramente a la albmina, 1glicoprotena, u otras lipoprotenas. Aproximadamente 6.5% de la
sangre es protena, de los cuales el 50% es albmina. Los compuestos
cidos se unen preferencialmente a la albmina. Las sustancias bsicas
se unen primariamente a la 1-glicoprotena.Los compuestos en el
plasma generalmente se presentan en equilibrio entre la forma
enlazada y la forma libre.
I LUSTRACIN 15. I NTEGRACIN DE XENOBITICOS CON PROTENAS . TOMADO DE

H ERNNDEZ -L UIS , ET AL [1].
El xenobitico unido a protena por su gran tamao est limitado a

atravesar las membranas biolgicas, por lo que su distribucin en los
tejidos desde la sangre se ver reducida.
Uno de los aspectos a considerar en el campo de la toxicologa es el que
se presenta cuando ciertos compuestos llegan a desplazar a otras
sustancias que se encuentran unidas a protenas. Este desplazamiento
puede ocasionar:
Aumento de la eficacia teraputica del frmaco desplazado
Incremento de la toxicidad del xenobitico desplazado
Redistribucin en varias partes del cuerpo del xenobitico
desplazado
Potenciacin de la actividad biolgica del xenobitico
desplazado
fracciones solubles del citoplasma, son los sitios donde principalmente

se llevan a cabo estas reacciones.
El metabolismo de los xenobiticos ocurre en tres fases metablicas:
Fase I, de funcionalizacin; Fase II, de conjugacin; Fase III, de
transporte o excrecin.
2.1. La Fase I del metabolismo: Reacciones de transformacin o

funcionalizacin.
La importancia de la Fase I radica en lograr la biotransformacin de los
grupos funcionales susceptibles a sufrir reacciones de oxidacin,
reduccin o hidrlisis para convertirlos en molculas de mayor
polaridad. Estas transformaciones incrementan la hidrofilia de los
compuestos y en consecuencia facilita su excrecin corporal.
Los procesos de metabolismo y eliminacin se revisarn ms adelante.
2.6 M ETABOLISMO
Y TOXICOD INMIA
Cualquier compuesto que ingresa a nuestro organismo tiene que

eliminarse o de lo contrario se concentrar hasta alcanzar niveles
txicos. Debido a que una sustancia polar es ms fcil de eliminar,
existen enzimas capaces de biotransformar a los xenobiticos
incrementando su polaridad y, de esta forma, favorecen su eliminacin
a travs de los procesos biliares y renales. En el humano, el hgado es el
rgano en donde principalmente se realiza la biotransformacin, ya que
contiene del 50 al 90% de las enzimas de biotransformacin en
comparacin con otros rganos del cuerpo. En el hgado y otros
rganos o tejidos, el retculo endoplsmico liso, el citosol y las
2.1.1. Reacciones de oxidacin.

La oxidacin es probablemente la reaccin ms comn en el
metabolismo de xenobiticos. Muchos compuestos se oxidan por un
grupo de enzimas no especfico denominado sistema mono-oxigenasas
de funcin mixta, el cual se encuentra principalmente en los
microsomas hepticos1.
Los microsomas son unas vesculas pequeas y cerradas, de unos 100 nanometros de
dimetro, que resultan de la fragmentacin del retculo endoplasmtico, cuando la clula

o los tejidos se homogenizan.

a) Sistema mono-oxigenasas de funcin mixta (enzimas microsomales,
oxidasas de funcin mixta, citocromo P 450).
Las mono-oxigenasas son un grupo de enzimas que se han encontrado

en una variedad de rganos y tejidos corporales de humanos y
animales. Las oxidasas de funcin mixta en mamferos estn localizadas
en el retculo endoplsmico y en las membranas mitocondriales.
Muestran una gran capacidad para catalizar la formacin de productos
oxidades de una gran variedad de diversos sustratos, para lo cual el
sistema requiere de la coenzima nicotinamida adenina dinucletido
fosfato (NADPH) y oxgeno molecular. Uno de los aspectos importantes
que hay que resaltar es que para iniciar la biotransformacin se
requiere que el sustrato interaccione con el citocromo. Por lo que los
diversos compuestos necesitan ser liposolubles para lograr alcanzar al
sistema enzimtico, deben presentar grupos funcionales suceptibles a
oxidarse y un tamao molecular mayor a 150D.
La nomenclatura ms reciente para estas enzimas utiliza la raz CYP,

seguida de un nmero que denota la familia, el cual a su vez es seguido
por una letra mayscula, para denotar a la subfamilia. Por ltimo, un
nmero para indicar la forma correspondiente. En otra clasificacin
simplemente se utilizan las siglas P 450, seguidas por un nmero
romano para denotar la familia correspondiente.
Uno de los aspectos importantes a resaltar es la capacidad que algunos
xenobiticos tienen para inducir la actividad de los diversos citocromos
P 450. La induccin de la actividad enzimtica tiene consecuencias
sobre el metabolismo de los propios inductores o sobre otros
xenobiticos al que el organismo ha sido expuesto, esto afecta de

forma importante a la variacin de la respuesta txica a un
xenobitico.
Tabla 2.1. Familias y subfamilias de citocromos P450 Tomado de

Hernndez-Luis, F., et al. [1].
P450
CYP1
CYP2
No.
de
subfamilias
1
8
No.
de
formas
2
57
CYP3
10
CYP4
CYP7
CYP11
CYP17
CYP19
CYP21
CYP27
2
1
2
1
1
1
1
10
1
3
1
1
1
1
Reacciones
Metabolismo de xenobiticos
Metabolismo de xenobiticos y
esteroides
Metabolismo de xenobiticos y
esteroides
Hidroxilacin y -1 de cidos grasos
Hidroxilacin 7 en el colesterol
Hidroxilacin 11 en esteroides
Hidroxilacin 17 en esteroides
Aromatasa
Hidroxilacin en C-21 en esteroides
Hidroxilacin en C-27 en colesterol
Tabla 2.2 Familias de citocromo p-450 y su induccin

Familia
CYP 1
CYP2
(P 450 II)
Nombre trivial
A1 P448
P 450c (ratas)
A1 P 448
A1 P 450a (ratas)
B1 P 450b (ratas)
B2 P 450e (ratas)
CI-10
D1, D2
Actividad
Activa
mutgenos
carcingenos
Detoxificacin
de Xenobiticos
Activa
Agente inductor
TCDD*,
3-metilcolantreno,
benzopireno
Safrol (aceite de canela, nuez
moscada)
3-metilcolantreno,
fenobarbital
fenobarbital, DDT, dieldrin

CYP 3
(P 450III)
E P 450j
A1 P 450p (ratas)
nitrosaminas
destoxifica
xenobiticos.
Etanol benceno
Clotrimazol, Pregnenolona
A1 P 452
proliferacin
peroxisomal
Clofibrato,
ftalato
di-(2-etilhexil)
*TCDD = 2,3,7,8-tetraclorodibenzo-p-dioxina
Existen otras enzimas que pueden oxidar xenobiticos, ejemplos de

ellas son la prostaglandin H sintetasa, la alcohol deshidrogenasa, la
aldehdo deshidrogenas, la xantina oxidasa, la monoamina oxidasa y las
aromatasas.
Esquema 2.1. Reacciones de Fase I del metabolismo
2.2. Reacciones de reduccin.

Los grupos carbonilos, azo y nitro son objetos de reduccin, resultando
en la formacin de grupos hidroxilos y aminos ms polares. Hay varias
reductasas en el hgado, las cuales dependen de NADH o NADPH, que
catalizan tales reacciones.

Tabla 2.3 Reacciones de reduccin presentes en la Fase I
Reaccin
Sustrato
Producto
Enzima
Reduccin del grupo azo

Reduccin del grupo nitro
Reduccin de aldehdos
-N=NR-NO2
R-CHO
-NH2 + -NH2
R-NH2
R-CH2OH
Azo-reductasa
Nitro-reductasa
Aldehdoreductasa
Compuestos azo, tales como el prontosil y la sulfasalazina, son

convertidos a aminas aromticas por azo-reductasas, una enzima
NADPH dependiente, presente en los microsomas. Hay evidencias de la
participacin del citocromo P 450 en la reduccin de algunos
compuestos. Los compuestos nitrados, por ejemplo el cloramfenicol, el
nitrobenceno, son reducidos a aminas aromticas primarias, por una
nitro-reductasa, presumiblemente a travs de una nitrosamina e
hidroxilamina como intermediarios.
2.3 Reacciones de hidrlisis.

Las hidrolasas constituye en grupo de enzimas generalmente de baja
especificidad, capaces de hidrolizar steres, amidas, lactonas, steres
de fosfatos y sulfatos, disacridos, glicosidos, peptidos. El grupo ster es
el ms lbil a sufrir tales reacciones. Recientemente, se ha mostrado
que hay mltiples isoenzimas de las esterasas hepticas, algunas de las
cuales han sido caracterizadas. La hidrlisis de varios steres por la
albmina del suero ha sido tambin reportada.
Clasificacin de las esterasas:
Arilesterasa: hidrolizan steres aromticos
Carboxilestrasas: hidrolizan steres en general
Colinesterasas: hidrolizan steres en cuya porcin alqulica

presenten colina.
Acetilesterasas: hidrolizan steres cuya porcin acilo es un

acetilo.
Tabla 2.4 Reacciones de hidrlisis presentes en la Fase I.

Reaccin
Hidrlisis
steres
de
Hidrlisis de amidas
Sustrato
Producto
Enzimas
R-COO-R
R-COOH + R-OH
Esterasas
R-CONH-R
R-COOH + R-NH2
amidasa
2.4. Consecuencias del metabolismo de la Fase I en la actividad de

algunos frmacos.
Tabla 2.5 Efectos por el metabolismo de xenobiticos

Efecto
Xenobitico
Reaccin
efectuada
Desactivacin
Co-activacin*
Activacin
Incremento de la toxicidad
barbitricos
diacepam
Hidrato de cloral
metanol
Oxidacin
Oxidacin
Reduccin
Oxidacin
*tanto el matabolito como el frmaco presentan la misma actividad biolgica.

2.2. La Fase II del metabolismo. Reacciones de conjugacin.
Las enzimas que participan en la Fase II generalmente catalizan la
adicin de pequeas molculas polares a los metabolitos o frmacos
para hacerlos ms polares. A estas enzimas se les denomina
transferasas, ya que adicionan una sustancia endgena a un
xenobitico o un metabolito del mismo. Las reacciones ms comunes
son:
*glucuronidacin,
*sulfatacin,
*conjugacin con glutatin (conjugados con cido mercaptrico)
*metilacin,
*acetilacin,
*conjugacin con aminocidos.
Esquema 2.2
electroflicos.
Reacciones
para
metabolitos
nucleoflicos
Tabla 2.6 Reacciones principales de la Fase II del metabolismo

En general los compuestos qumicos son convertidos por la Fase I en
una variedad de metabolitos nucleoflicos o electroflicos. La interaccin
de los electrfilos ms reactivos con macromolculas celulares de
importancia biolgica, juega uno de los papeles ms importantes en los
aspectos de la toxicidad de xenobiticos. Adicionalmente, en algunas
ocasiones, los metabolitos nucleoflicos ms estables y abundantes,
pueden ser convertidos a intermediarios reactivos de naturaleza
electroflica.
Conjugado
Coenzima
Enzima
Grupos
conjugados
glucuronido
UDP-glucuroniltransferasa (UGT)
-OH,-COOH,
NH2, -NR2, -SH
Sulfotransferasa
-OH, -NH2
Glutatin
cido
uridin-5difosfo--Dglucurnico (UDPG)
3-fosfoadenosin-5fosfosulfato (PAPS)
glutatin (GSH)
glicina
Acil o aroil activados
Ar-X,
epxido,
carbocatin.
-COOH
Acetilo
metilo
Acetil coenzima A
S-adenosilmetionina
(SAM)
Glutatin
Stransferasa
Glicina
Naciltransferasa
acetiltransferasa
Metiltransferasas
Sulfato
-OH,-NH2
-OH,-NH2,-SH,N(heterociclos)

Muchos organismos, incluyendo los seres humanos, pueden realizar
reacciones de conjugacin en determinados sitios de rganos y clulas.
En las ratas y en los seres humanos, la mayor cantidad de reacciones de
Fase II, ocurren en el hgado, aunque todos los rganos, incluyendo a la
piel, pueden metabolizar con alguna extensin. En la clula, los
sistemas de conjugacin estn concentrados en las membranas, el
citosol, las mitocondrias, los lisosomas y el retculo endoplsmico.
Tabla 2.7 Reacciones de Fase II en diversos tejidos y rganos.
Tejido
Adrenal
Vejiga
Clulas sanguneas
Cerebro
Intestino
rin
Hgado
Pulmn
Placenta
Piel
bazo
Timo
1: glucuronidacin; 2: metilacin; 3: conjugacin con glutatin; 4: acetilacin; 5:

Conjugacin con aminocidos; 6: steres de sulfatos.
2.2.1 Reacciones de glucuronidacin.

Estas reacciones involucran la transferencia de un grupo glucuronilo
activado desde el cido uridn-5-difosfo--D-glucurnico (UDP-GA)
hacia un grupo funcional en el xenobitico para formar O-, S-, N-, o Cglucuronidacin. La enzima que cataliza esta reaccin se le denomina
uridn difosfato glucuronosiltransferasa.
En virtud de que grupos funcionales con oxgeno, azufre, nitrgeno y
carbono son susceptibles a formar glucurnidos, muchos xenobiticos,
tales como alcoholes, fenoles, cidos carboxlicos, hidroxilaminas,
aminas aromticas y tioles, as como compuestos endgenos, tales
como la bilirrubina y esteroides, son substratos para la UDPglucuronosiltransferasa (UGT).

Esquema 2.3 Reaccin de conjugacin con ac. UDP-glucurnico del fenol
2.2.2. Conjugacin con Glutatin (Conjugados con cido

mercaptrico).
En la conjugacin de los xenobiticos, especialmente de carcter
electroflico, con glutatin es importante tomar en cuenta la ubicacin
de las diferentes etapas del proceso.
los procesos enzimticos (al menos siete isoenzimas de la glutatin-Stransferasa) y no enzimticos para que ocurra la conjugacin se llevan a
cabo en el citosol.
La remocin del grupo glutamilo del conjugado por la glutamiltransferasa, la hidrlisis para remover la glicina por medio de
dipeptidasas y la N-acetilacin del conjugado con cistena por la
acetilcoenzima A, para producir el tioter, son procesos que se llevan a
cabo por enzimas unidas a membranas.
A diferencia de la mayora de las reacciones de Fase II, esta conjugacin

requiere de xenobiticos metablicamente activados, en lugar de cosustratos activos. Los tipos de metabolitos que se pueden conjugar con
el glutatin incluyen N-hidroxi-compuestos, uretanos, sulfonamidas,
aminas aromticas, tiofenos, triazinas, teres difenilos, compuestos
halogenados, nitro-compuestos, compuestos con dobles enlaces y
sulfatos.
2.3 La Fase III. Transporte o excrecin

En general, el metabolismo de xenobiticos se refiere a las Fases I y II,
en donde, la Fase I involucra la oxidacin de compuestos y la Fase II a la
conjugacin de los productos generados en la Fase I con glucurnido y
glutatin, entre otros. Sin embargo, hace poco se reconoci a la Fase III
como la ltima fase del metabolismo de xenobiticos, la cual se refiere
al transporte o excrecin de los productos originados en la Fase II, a
travs de la membrana celular para su posterior eliminacin.
Los transportadores de la Fase III se expresan en varios tejidos como:
hgado, intestino, rin y cerebro; en donde actan como una barrera
en contra de la entrada de xenobiticos.
Esquema 2.4. Conjugacin del naftaleno con el glutatin y formacin

del derivado del ac. Mercaptrico.
La importancia fisiolgica de la Fase III radica en que en algunas

ocasiones las reacciones de conjugacin con glutatin pueden dar lugar
a la activacin txica de los compuestos en lugar de facilitar su
excrecin de la clula. En estos casos, este sistema sirve de proteccin,
ya que disminuye la concentracin intracelular de estos compuestos
txicos.

Entre los transportadores involucrados en la Fase III se encuentran la
glicoprotena P, las protenas asociadas a la resistencia a frmacos y el
polipptido transportador de aniones orgnicos [1, 2]. Tanto P-gp,
MRPs como OATPs se expresan en la membrana de los enterocitos
intestinales, los cuales excretan xenobiticos al lumen intestinal [2].
Esquema 2.6. Metabolismo de Fase I (oxidacin), Fase II (conjugacin) y Fase

III (eliminacin) de la Aflatoxina B1 en el hgado.
Esquema 2.5. Papel de los transportadores en la entrada y salida de

compuestos de la clula. OATP-polipptido transportador de aniones
orgnicos, MRP-protenas asociadas a la resistencia a frmacos y P-gpglicoprotena P.
2.3.1 Glicoprotena P
La glicoprotena-p (P-gp) es uno de los primeros transportadores ABC
(ATP binding cassette) identificados y estudiados, el cual necesita de la
hidrlisis del ATP para llevar a cabo el transporte [2, 3]. La P-gp es una
glicoprotena de membrana de 107 kDa que regula la salida de ciertos
compuestos de las clulas [4].
Esta protena se expresa en bajas cantidades en la mayora de los
tejidos, pero se encuentra en mayor cantidad en el colon, intestino
delgado, conductos pancreticos, conductos biliares, rin y en las
glndulas adrenales [5, 6]. Tambin se ha encontrado que se expresa en
la barrera hematoenceflica, en donde protege al cerebro de la entrada
de compuestos txicos que pudieran llegar a l a travs de la circulacin
sangunea [7]. En el epitelio intestinal, las P-gp se encargan de la

entrada de xenobiticos de la sangre a la luz intestinal y previene que
estos compuestos regresen a la circulacin sangunea.
2.3.2 Protenas asociadas a la resistencia a frmacos (MRP,

multidrug-resistance-associated protein)
Los transportadores MRP reciben este nombre debido a que son los
posibles responsables de la resistencia al tratamiento con diferentes
frmacos, lo que puede contribuir a la disminucin en la efectividad de
algunos tratamientos como el de la quimioterapia contra el cncer.
Pertenecen a la familia de transportadores ABC (ATP-binding cassettes).
Llevan a cabo el transporte, dependiente de la hidrlisis de ATP [2, 3],
de los productos de las reacciones de conjugacin con glutatin,
glucurnido y sulfato, fuera de las clulas. Estos transportadores son de
gran importancia debido a que las reacciones de conjugacin con
glutatin son un mecanismo de defensa clave en la desintoxicacin de
compuestos electrfilos txicos y en el mantenimiento de la
homeostasis celular[8, 9].
En humanos, los MRPs descritos para el transporte de compuestos
conjugados son: MRP1, MRP2, MRP3, MRP4, MRP5 y MRP6[9].
Los complejos formados con glutatin, glucurnido o sulfato durante la
Fase II son sustratos del MRP1[9], al igual que algunos aniones
orgnicos como las sales biliares monoaninicas. Varios miembros de la
familia de los MRPs pueden participar en la eliminacin de metales
pesados, como Arsenito y Antimonio. El mecanismo propuesto para la
eliminacin de estos metales pesados involucra la conjugacin con
glutatin [10]. MRP1 y posiblemente MRP5 contribuyen a la resistencia
en humanos al Arsenito [11].
Existen xenobiticos presentes en los alimentos que pueden ser

excretados de las clulas a travs de los MRPs. Un ejemplo, es el
producto de la conjugacin de la aflatoxina B1 con glutatin, el cual es
un sustrato de alta afinidad para el MRP1 [12, 13] (Esquema 2.6).
2.3.3 Polipptido transportador de aniones orgnicos (OATP,

organic anion transporting polypeptide)
Los OATPs son una gran familia de transportadores de membrana que
regulan la captacin de una gran cantidad de compuestos tanto
endgenos como exgenos, en especial frmacos [14].
En humanos, se han descrito 11 de estos transportadores: OATP1A2,
1B1, 1B3, 1C1, 2A1, 2B1, 3A1, 4A1, 5C1, 5A1 y 6A1. De ellos, se ha
caracterizado el papel que juegan OATP1B1, 1A2, 1B3 y 2B1 en la
farmacocintica de frmacos. El OATP1A2 facilita la entrada de
sustancias al torrente circulatorio a travs de la pared duodenal [15]. En
humanos, OATP1B1, 1B3, 2B1, estn localizados en los hepatocitos y
permiten la entrada de compuestos de la circulacin sangunea a esta
clula, lo cual representa un paso importante en la posterior
eliminacin del compuesto, ya sea a travs del metabolismo o la
eliminacin biliar [14] (Esquema 2.5).
Entre los sustratos endgenos del OATP1A1 y 1B1 se encuentran, cidos
biliares (colato y taurocolato), esteroides conjugados con glucurnido o
sulfato, eicosanoides y hormonas tiroideas. Sin embargo, hay
compuestos de origen natural que puede inhibir a estos
transportadores; el OATP1A2 se inhibe por los jugos de naranja y
toronja, as como por los flavonoides presentes en ellos: naringina, en el
jugo de toronja y hesperidina en el jugo de naranja, lo cual afecta la

entrada de xenobiticos, como frmacos, a la clula [16]. Adems,
OATP2B1 se inhibe significativamente por el jugo de toronja [17].
2.1.3.4.3. Consecuencias del metabolismo en una intoxicacin

aguda y crnica.
La diferencia entre un proceso de destoxificacin y el de activacin
txica radica en la reactividad qumica de los metabolitos formados. En
el siguiente esquema se muestra la integracin de la Fase I y la Fase II,
en su relacin al proceso de destoxificacin y activacin txica.
La oxidacin no impedida metablicamente de los xenobiticos por el

CYP 2, produce metabolitos los cuales son fcilmente conjugados y por
lo tanto eliminados. La oxidacin de los xenobiticos planares por el
CYP1 (P 448) producen intermediarios reactivos los cuales no son
fcilmente conjugados y eliminados, por lo que interaccionan con
nuclefilos intracelulares provocando toxicidad y carcinogenicidad.
En general los intermediarios reactivos pueden clasificarse en cuatro
grupos principales que son:
a) compuestos electroflicos: (intermediario qumico que presenta
deficiencia de electrones: R3C+)
b) radicales libres (son entidades qumicas que contienen un nmero
impar de electrones. R3C-).
c) carbenos (son molculas en las que el carbono solo tiene seis
electrones: R2C:) y nitrenos (son molculas neutras en las que el
nitrgeno tiene slo seis electrones: R-N:
d) oxgeno activado (cuando el oxgeno molecular se reduce para ganar
un electrn y producir un anin superoxido: O2-)
La mayor parte de los intermediarios reactivos son formados por el

P450. Sin embargo, existen ejemplos, donde la activacin la provocan
reacciones de conjugacin (Fase II).
Esquema 2.7 Separacin en las rutas de intoxicacin y destoxificacin

metablica.
Las consecuencias que se presentan en una exposicin aguda o crnica

a un xenobitico se presentan en el siguiente esquema.
2.4 E LIMINACIN .
La eliminacin de sustancias txicas del cuerpo juega un papel
determinante en sus efectos biolgicos; la excrecin rpida reducir la
probabilidad de efecto toxicolgico y disminuir la extensin del dao.
La excrecin de xenobiticos se ver reflejada en su vida media corporal
y/o plasmtica. Aunque sta ltima incluye tambin, la distribucin y el
metabolismo que pueda presentar este compuesto.
Esquema 2.1.15. Diferencias en el riesgo de una intoxicacin aguda y

una intoxicacin crnica. A. En la toxicidad aguda, el xenobitico A ejerce su
Los factores que afectan la velocidad de excrecin, la distribucin, la

produccin de los metabolitos y la integridad de los rganos y tejidos,
van a influir en las concentraciones del xenobitico en los medios
biolgicos. Cualquier factor que incremente la bioacumulacin del
xenobitico, o sus metabolitos, en tejidos grasos, msculos o huesos,
provocar un decremento en su metabolismo y/o excrecin.
efecto txico por la inhibicin directa de una enzima, y es subsecuentemente

destoxificado y eleminado. B. En la toxicidad crnica, el xenobitico B, es activado
metablicamente hacia un intermediario reactivo el cual se une covalentenmente a
glutatin (GSH), protenas, DNA y posiblemente a receptores reguladores.
Los medios ms importantes para la excrecin de xenobiticos del

cuerpo humano son: orina, bilis y heces fecales, leche materna, sudor,
saliva, va pulmonar.
Para muchos agentes txicos, la duracin de su accin es inversamente

proporcional a la velocidad a la cual ellos son metablicamente
inactivados. En otras palabras, entre ms rpido sea transformado una
sustancia in vivo a sus metabolitos inactivos, ms corta ser la duracin
de su efecto. Las diferencias observadas en la duracin de accin de
muchos agentes activos dentro de la poblacin humana son debidas
primordialmente a la variacin en la composicin y cintica de los
sistemas enzimticos que participan en el metabolismo.
2.4.1 Eliminacin renal.
El rin es el rgano ms importante de excrecin en cuanto al nmero

de compuestos que utilizan esta ruta; y en segundo lugar se encuentran
el hgado (biotransformacin y circulacin entero heptica) y los
pulmones. El rin recibe alrededor de 35% del gasto cardiaco en
sangre. La excrecin renal abarca tres mecanismos que son: filtracin
desde la sangre a travs de los glomrulos, difusin desde el torrente

sanguneo por medio de los tbulos y transporte activo en el fluido
tubular. El 20% de los compuestos son filtrados por el rin, aunque los
liposolubles son reabsorbidos.
2.4.2. Eliminacin por la bilis-heces fecales.
La mayora de las reacciones metablicas de los frmacos ocurren en

los hepatocitos. La bilis es formada por la secrecin activa de los
hepatocitos que fluye al duodeno, para la eliminacin del frmaco.
Diariamente se forma alrededor de 1 litro de bilis.
Las reacciones de conjugacin (metabolismo de Fase II) ayudan a la
excrecin biliar de xenobiticos:
*Incrementando su polaridad
*Incrementando su solubilidad en agua
*Incrementando el tamao molecular
Alrededor del 5% de la dosis administrada de un frmaco, entrara a la
bilis por difusin pasiva. Los compuestos conjugados secretados en la
bilis, no tienden a ser reabsorbidos.
Muchos frmacos (as como sus metabolitos y conjugados) son
excretados va heces fecales. Los xenobiticos (o sus metabolitos de
fase I generados por hidrlisis microbiana o los conjugados de fase II)
son frecuentemente reabsorbidos pasivamente en el intestino delgado,
resultando una recirculacin enteroheptica.
Tabla 2.8 Eliminacin de los derivados de las reacciones de

conjugacin
Metabolito
Excrecin
Glucurnido
Conjugados
del
cido
mercaptrico
Conjugados con glutatin
Sulfatos
Conjugados acetilados
Conjugados con aminocidos
<250 D(rin), >250 D (hgado)

Orina
Bilis
Orina
Bilis
Orina
B IBLIOGRAFA .
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2.4.2. Eliminacin por la bilis-heces fecales. .................................. 31

DE AGEN TES TXICOS

TIPOS DE TOXICIDAD ........ 1

2.1 Clasificacin de agentes txicos .................................................... 1

De acuerdo con el enfoque requerido por los especialistas en

2.4.1. Ruta y sitio de la exposicin .................................................. 5

T ABLA 1. C RITERIOS DE CLASIFICACIN DE AGENTES TXICOS . T OMADO DE

Por el rgano diana

Por sus efectos

Por su mecanismo de accin

2.3 La Fase III. Transporte o excrecin .......................................... 26

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Para el criterio de la dosis letal media se utiliza un rango de valores que

XENOBITICOS SEGN LA DOSIS LETAL MEDIA .

Dosis letal media (roedores)

> 15 000 mg/kg de peso corporal

5 000 15 000 mg/kg de peso corporal

500 5000 mg/kg de peso corporal

50 500 mg/ kg de peso corporal

5 50 mg/ kg de peso corporal

< 5 mg/kg de peso corporal

A continuacin se muestran ejemplos de la dosis letal media de algunos

Es importante mencionar que el valor de DL50 que presente una

T ABLA 4. I NFLUENCIA DE LA RUTA DE ADMINISTRACIN EN

DL50 (mg/kg de peso)

Toxicologa Forense, LCF,UNAM

Los metales pesados causan toxicidad directa al

Por lo que se refiere a la clasificacin segn los mecanismos de accin

El tetracloruro de carbono (CCl4 ) y el cloroformo

Aminoglucsidos son sustancias

F IGURA 1. S USTANCIAS QUE EJERCEN EFECTOS TXICOS SOBRE EL RIN

Una clasificacin comn de los compuestos txicos toma en cuenta un

Toxicologa Forense, LCF,UNAM

RIESGO, FRECUENCIA, DOSIS

El edema pulmonar puede ser causado

INTERACCIN DEL AGENTE

El paraquat es liberado por la sangre y

F IGURA 3 E TAPAS DE LA ACCIN TXICA .

F IGURA 2. S USTANCIAS QUE EJERCEN EFECTOS TXICOS SOBRE EL PULMN

Aunque la secuencia de este esquema la siguen de manera general la

La exposicin es el conjunto de factores que permiten la penetracin o

Toxicologa Forense, LCF,UNAM

T ABLA 5. D URACIN DE LA EXPOSICIN

Las caractersticas de la exposicin suelen dividirse en dos apartados

Para muchos xenobiticos, los efectos seguidos de una simple

Es pertinente sealar que algunas veces las circunstancias en que se

T ABLA 6. E JEMPLOS DE EFECTOS EN LA EXPOSICIN AGUDA Y CRNICA .

2.4.2. Duracin y frecuencia de la exposicin

Depresin del sistema

Depresin del SNC

Existen diferentes escenarios en los tipos de exposicin y efectos que se

Toxicologa Forense, LCF,UNAM

Dosis nica: Se trata de realizar una sola administracin de un

Dosis fraccionada: El ingreso de una cantidad determinada de una

F IGURA 4. P ROCESOS INVOLUCRADOS EN LA TOXICOCINTICA

Un aspecto importante a considerar una vez que el xenobitico ha

Toxicologa Forense, LCF,UNAM

F IGURA 6. M ECANISMOS DE TRANSPORTE PARA

Hay una forma adicional de ingreso de sustancias, primordialmente en

La forma en que los xenobiticos se trasladan a travs de las diferentes

Difusin simple transcelular

Un hecho importante a considerar es que los procesos de traslado de