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INSTITUTO DE PESQUISAS ENERGTICAS E NUCLEARES
Autarquia Associada Universidade de So Paulo
DETERMINAO DE ELEMENTOS EM SANGUE DE

HAMSTER DOURADO USANDO AAN
Rodrigo Oliveira de Aguiar
Dissertao apresentada como

parte dos requisitos para
obteno do Grau de Mestre em
Cincias na rea de Tecnologia
Nuclear Aplicaes.
Orientadora:
Dra. Cibele Bugno Zamboni
So Paulo
2009
i
" A mente que se abre a uma nova idia jamais voltar ao seu
tamanho original.
(Albert Einstein)
Dedico com muito amor este
trabalho minha filha Beatriz

ii
Agradecimentos
Gostaria de agradecer primeiramente a Deus pela fora que depositou em mim, e um conjunto
infinito de pessoas que me ajudaram muito:
Dra. Cibele Bugno Zamboni, pela orientao, incentivo e apoio, indispensveis para a
realizao deste trabalho.
Aos colegas do grupo, Agostinho, Ilca, Fred, Guilherme, Laura, Luciana, Roberto, Sabrina,
Tatyana e Wagner pela amizade e auxlio no desenvolvimento deste trabalho.
Aos colegas Cludio e Fbio pela colaborao e amizade.
Ao corpo tcnico do reator IEA-R1 e Proteo Radiolgica pelo pronto atendimento nas
irradiaes.
Ao pessoal da CPG pela colaborao.
Ao IPEN/CNEN por possibilitar a realizao deste trabalho.
Ao Governo do Estado de So Paulo, pelo apoio financeiro.
Bianca Torres pela organizao no suporte financeiro.
s diretoras Clia Paschoal e Lia Soares de Abreu, pelo apoio e colaborao.
Beatriz que me deu muita alegria nos momentos difceis.
Aos meus pais e irm pelo carinho e apoio em todos os momentos.
Priscila pelo companheirismo.
Nina pela motivao.
Aos meus avs Geraldo e Jos Arnaldo Em Memria
s minhas avs Andrelina e Esmeralda.
Ao Vagner, Valria e Enzo pela fora.
Ao Gilson e toda minha famlia e meus amigos que torceram por mim.
iii
DETERMINAO DE ELEMENTOS EM SANGUE DE

HAMSTER DOURADO USANDO AAN
RESUMO
No presente estudo a tcnica de analise por ativao com nutrons foi utilizada para a
determinao simultnea da concentrao de elementos, de relevncia em clnica, em sangue
total de Hamster Dourado. O limite de normalidade obtido para Br, Ca Cl, Mg, Na e S
considerando 2 (Dois Desvios Padro), foi de 0,011 - 0,047 gL-1 (Br); 0,11 - 0,35 gL-1 (Ca);
2,11 - 3,75 gL-1 (Cl); 1,35 - 2,79 gL-1 (K), 0,026 0,090 gL-1 (Mg), 1,03 2,51 gL-1 (Na) e
0,97 2,01 gL-1 (S) . O conhecimento desses limites viabiliza o uso de sangue total em
investigaes clnicas deste modelo animal.
A comparao com as estimativas de normalidade em sangue total em seres humanos

(Hamster & humano) permitiu verificar as similaridades ou diferenas fisiolgicas, dados
importantes em experimentos utilizando este modelo animal.
iv
DETERMINATION OF ELEMENTS IN BLOOD OF GOLDEN

HAMSTER BY NAA
ABSTRACT
In the present study Neutron Activation Analysis technique has been used to determine,
simultaneously, some element concentrations of clinical relevance in whole blood samples of
Golden Hamster. The normal range for Br, Ca, Cl K, Mg, Na and S considering 2 (Two
Standard deviations) was 0.011 0.047 gL-1 (Br); 0.11 0.35 gL-1 (Ca); 2.11 3.75 gL-1 (Cl);
1.35 2.79 gL-1 (K), 0.026 0.090 gL-1 (Mg), 1.03 2.51 gL-1 (Na) e 0.97 2.01 gL-1 (S).
The knowledge of these limits became possible to perform clinical investigation in this animal
model using whole blood.
The comparison with the results from human being whole blood estimation (Hamster &
human) became possible to check the similarities or physiologic differences, an important data
for animal experimentation .
v
SUMRIO
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INTRODUO 1
MOTIVAO 2
OBJETIVO 3
CAPTULO 1: A IMPORTNCIA DOS ELEMENTOS NO ORGANISMO 5
1.1 PRINCIPAIS CARCTERSTICAS DOS ELEMENTOS & RELEVNCIA..........6
1.1.1 Sdio......................................................................................................................6
1.1.2 Potssio 6
1.1.3 Cloretos 7
1.1.4 Clcio 7
1.1.5 Magnsio 8
1.1.6 Bromo 8
1.1.7 Enxofre 8
CAPTULO 2: ANIMAIS DE EXPERIMENTAO 10
CAPTULO 3: HAMSTERS 12
3.1 Hamster Dourado 13
CAPTULO 4: METODOLOGIA NUCLEAR 15
4.1 Mtodo semi-paramtrico 15
4.2 Mtodo instrumental 17
CAPTULO 5 : INSTRUMENTAO NUCLEAR 20
CAPTULO 6 : PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 23
6.1 Calibrao do Espectrmetro 23
6.2 Coleta e Preparo das Amostras Biolgicas 24
6.3 Irradiao utilizando o mtodo semi-paramtrico de AAN....................................24
6.4 Irradiao utilizando o mtodo Instrumental de AAN............................................24
6.5 Material de Referncia 25
CAPTULO 7 : RESULTADOS 27
7.1 Mtodo semi-paramtrico de AAN.........................................................................31
vi
7.2 Mtodo instrumental de AAN.................................................................................43

CAPTULO 8 : DISCUSSO 56
8.1 Anlise comparativa entre os mtodos.............................................................56
8.2 Anlise comparativa: Hamster & Humanos.....................................................60
CAPTULO 9 : CONCLUSES .64

9.1 PERSPECTIVAS .65
ANEXO 1 .66
ANEXO 2 .67
ANEXO 3 .68
ANEXO 4 .69
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS .70
vii
LISTA DE FIGURAS
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Figura 1: Esquema ilustrativo do projeto multidisciplinar..........................................................4
Figura 2: Hamster Dourado macho...........................................................................................14
Figura 3: Hamster Dourado fmea ...........................................................................................14
Figura 4: Instrumental nuclear utilizado no LEER....................................................................20
Figura 5: Arranjo com detetor de Germnio hiperpuro (HPGe)................................................21
Figura 6: Esquema simplificado do arranjo eletrnico..............................................................22
Figura 7: Funo ajustada e eficincia de fotopico experimental ............................................ 23
Figura 8: Espectro parcial de raios de sangue total de Hamster Dourado irradiado por 5
minutos no reator IEA-R1..........................................................................................................27
minutos no reator IEA - R1........................................................................................................28
Figura 13: Concentrao do Br em amostras de sangue total ...................................................33
Figura 14: Concentrao do Ca em amostras de sangue total ..................................................33
Figura 15: Concentrao do Cl em amostras de sangue total....................................................34
Figura 16: Concentrao do K em amostras de sangue total.....................................................34
Figura 17: Concentrao do Mg em amostras de sangue total..................................................35
Figura 18: Concentrao do Na em amostras de sangue total...................................................35
Figura 19: Concentrao do S em amostras de sangue total......................................................36
Figura 20: Histograma das concentraes do Br em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
da funo gaussiana...................................................................................................................36
viii
Figura 21: Histograma das concentraes do Ca em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 22: Histograma das concentraes do Cl em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 23: Histograma das concentraes do K em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 24: Histograma das concentraes do Mg em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 25: Histograma das concentraes do Na em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 26: Histograma das concentraes do S em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 27: Representao via Box-plot para Br.........................................................................40
Figura 28: Representao via Box-plot para Ca........................................................................41
Figura 29: Representao via Box-plot para Cl.........................................................................41
Figura 30: Representao via Box-plot para K..........................................................................42
Figura 31: Representao via Box-plot para Mg.......................................................................42
Figura 32: Representao via Box-plot para Na........................................................................43
Figura 33: Representao via Box-plot para S..........................................................................43
Figura 34: Concentrao do Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela tcnica
de AANI................................................................................................................. 45
Figura 35: Concentrao do Ca em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela tcnica
de AANI..................................................................................................................45
Figura 36: Concentrao do Cl em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela tcnica
de AANI..................................................................................................................46
Figura 37: Concentrao do K em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela tcnica
de AANI..................................................................................................................46
Figura 38: Concentrao do Mg em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela
tcnica de AANI......................................................................................................47
Figura 39: Concentrao do Na em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela tcnica
de AANI..................................................................................................................47
ix
Figura 40: Histograma das concentraes do Br em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
da funo gaussiana obtidos pela tcnica de AANI...................................................................48
Figura 41: Histograma das concentraes do Ca em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 42: Histograma das concentraes do Cl em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 43: Histograma das concentraes do K em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 44: Histograma das concentraes do Mg em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 45: Histograma das concentraes do Na em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 46: Histograma das concentraes do S em sangue total de Hamster Dourado e ajuste
Figura 47: Representao via Box-plot para Br pela tcnica AANI..........................................52
Figura 48: Representao via Box-plot para Ca pela tcnica AANI.........................................52
Figura 49: Representao via Box-plot para Cl pela tcnica AANI..........................................53
Figura 50: Representao via Box-plot para K pela tcnica AANI...........................................53
Figura 51: Representao via Box-plot para Mg pela tcnica AANI........................................54
Figura 52: Representao via Box-plot para Na pela tcnica AANI.........................................54
Figura 53: Representao via Box-plot para S pela tcnica AANI...........................................55
Figura 54: Concentrao de Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado................ 57
Figura 55: Concentrao de Cl em amostras de sangue total de Hamster Dourado................ 57
Figura 56: Concentrao de K em amostras de sangue total de Hamster Dourado................. 58
Figura 57: Concentrao de Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado................ 58
Figura 58: Concentrao de Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Br via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 59
Figura 59: Concentrao de Ca em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Ca via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 59
x
Figura 60: Concentrao de Cl em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Cl via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 60
Figura 61: Concentrao de K em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparada com o intervalo de confiana de K via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 61
Figura 62: Concentrao de Mg em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Mg via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 62
Figura 63: Concentrao de Na em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Na via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 62
Figura 64: Concentrao de S em amostras de sangue total de Hamster Dourado via mtodo
instrumental, comparados com o intervalo de confiana de S via mtodo semi-
paramtrico............................................................................................................................... 63
xi
LISTA DE TABELAS
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Tabela 1: Composio elementar aproximada do corpo de um homem de 70 kg ......................9

Tabela 2: Concentrao dos elementos obtidos na anlise do material de referncia (NIST
8414) empregando o mtodo semi-paramtrico de AAN.........................................................26
Tabela 3: Elementos identificados no sangue total de Hamster Dourado e energia selecionada
para anlise quantitativa.............................................................................................................30
Tabela 4: Resultado das anlises bioqumicas em sangue de Hamster Dourado pelo mtodo
semi-paramtrico de AAN.........................................................................................................32
Tabela 5: Valores da mdia, mediana e moda das concentraes do Br, Cl, K, Mg, Na e S
obtidas pelo mtodo semi-paramtrico de AAN........................................................................40
Tabela 6: Resultado das anlises bioqumicas em sangue de Hamster Dourado pela tcnica
Instrumental (AANI) e Semi-Paramtrica (SP AAN)...............................................................44
Tabela 7: Valores da mdia, mediana e moda das concentraes do Br, Cl, K, Mg e Na

obtidas pelo mtodo instrumental de AAN...............................................................................51
INTRODUO 1
INTRODUO
Vrios estudos destinam-se a elucidar o metabolismo dos organismos vivos, tanto

em condies de normalidade (organismo saudveis) como em situaes de disfunes
(organismos com patologia). Os constituintes majoritrios da composio sangunea,
principalmente os metais K, Na e ons de Cl, por exemplo, so imprescindveis vida e,
portanto, o conhecimento quantitativo desses elementos no sangue permite uma avaliao
clnica quanto ao bom funcionamento das vrias funes que regulam a fisiologia dos
rgos. Dessa forma, alteraes (excesso ou deficincia) desses elementos no sangue esto
normalmente associadas a algum tipo de patologia em curso.
Por outro lado, a busca pela formulao de novos medicamentos, vacinas, uso de
anestsicos, de suplementos alimentares e outros produtos de interesse na rea mdica,
necessita de vrios testes em organismos in vivo para o acompanhamento clnico das
funes reguladoras dos organismos com relao resposta (reao) geradas por seu uso,
viabilizando ou no sua utilizao em seres humanos.
Usualmente, esses testes in vivo so realizados primeiramente em animais de

pequeno porte (tais como: camundongos, ratos, coelhos) e posteriormente em humanos. A
escolha do animal de experimentao leva em conta tanto a disfuno em questo, como a
composio do produto a ser testado (isso , vacinas, anestsicos, etc) bem como o
material biolgico a ser analisado (sangue, soro, urina, dentes, rgos, etc) e suas
similaridades com humanos. Outros fatores tambm relevantes na escolha dos animais,
dizem respeito s implicaes legais e custos.
Particularmente, em pesquisas na rea mdica que utilizam animais de

experimentao, a realizao de vrios exames clnicos uma necessidade. Usualmente,
nesses experimentos so realizadas anlises bioqumicas em soro e urina, mas em funo
da dificuldade em coletar quantidades necessrias para os procedimentos clnicos
INTRODUO 2
convencionais (da ordem de alguns mililitros de soro e/ou urina), em muitos casos o
procedimento realizado somente ao trmino do estudo (aps o sacrifcio) ou em perodos
muito longos (quando o experimento permite) o que pode aumentar o estresse do animal,
fator que pode alterar o resultado do exame.
Desta forma, justifica-se a busca de mtodos que forneam uma anlise quantitativa
dos elementos constituintes dos fludos corpreos nesses animais de forma gil e
principalmente minimizando o estresse dos mesmos. Alm disso, a maior aproximao
entre as funes e os constituintes fisiolgicos entre as espcies e o homem bem como o
acompanhamento sistemtico das funes biolgicas desses animais tambm de grande
importncia para o sucesso dessas pesquisas.
Com base nisto, nos ltimos anos o Laboratrio de Espectroscopia e Espectrometria

das Radiaes (LEER) do Centro do Reator de Pesquisas (CRPq/IPEN) tem utilizado a
tcnica de Anlise por Ativao com Nutrons (AAN) como alternativa para anlise de
rgos, ossos e fludos corpreos de animais de pequeno e mdio porte [1-10],
simplificando etapas tanto no manuseio como no preparo das amostras alem de fornecer
uma anlise quantitativa precisa de vrios elementos de interesse em bioqumica clnica
simultaneamente. Recentemente, a anlise de Cl, K e Na em soro humano permitiu validar
esta metodologia nuclear para uso em anlises bioqumicas, pois os resultados obtidos [11-
14] encontram-se em acordo com o estabelecido pela clnica convencional [15].
MOTIVAO
O presente estudo dedicado caracterizao da composio sangunea de

Hamster Dourado, com nfase na quantificao de elementos de relevncia para pratica
clnica. A utilizao desse procedimento (AAN) apresenta um diferencial importante no
que se refere s anlises bioqumicas convencionais, a saber: utilizao de sangue total,
que reduz significativamente a quantidade de material biolgico necessrio para sua
execuo. Esta simplificao leva tambm reduo nos custos dos experimentos, pois
INTRODUO 3
dispensa o uso de reagentes, alm de apresentar facilidades no armazenamento da amostras

(no necessita de refrigerao).
OBJETIVO
No presente estudo sero analisados os elementos Br, Ca, Cl, K, Mg, Na e S em

sangue total de Hamster Dourado, pois pequenas oscilaes nesses eletrlitos so
indicadores importantes de sua condio clnica. Pretende-se estabelecer o ndice de
normalidade desses elementos no sangue compondo dados relevantes para sua monitorao
clnica, principalmente porque este modelo animal largamente empregado em testes de
medicamentos, vacinas, etc.
As medidas sero realizadas utilizando o mtodo semi - paramtrico de AAN (AAN

SP). Como procedimento alternativo, para comparao dos resultados, ser empregado o
mtodo Instrumental de AAN (AANI).
Este estudo faz parte de um projeto multidisciplinar denominado Estudo da

Distribuio de Metais em Amostras Biolgica via Metodologia Nuclear: Determinao de
Valores de Referncia, atualmente em desenvolvimento no Laboratrio de Espectroscopia
e Espectrometria das Radiaes (LEER) do IPEN, em colaborao com Universidades e
Centros de Pesquisa de vrias regies do Brasil.
Na Figura 1 apresentado um esquema ilustrativo do projeto multidisciplinar no

qual o presente estudo est inserido.
INTRODUO 4
ESTUDO DA DISTRIBUIO DE METAIS EM AMOSTRAS BIOLGICAS
COLETA DE MATERIAL BIOLGICO
HUMANOS ANIMAIS DE EXPERIMENTOS
SANGUE
SANGUE E SORO
CARACTERIZAO DE TECIDO SANGUNEO VIA METODOLOGIA

NUCLEAR (AAN)
DETERMINAO VALORES DE REFERNCIA DOS

ELEMENTOS MEDIDOS EM SANGUE TOTAL
FIGURA 1 - Esquema ilustrativo do projeto multidisciplinar.

CAPTULO I - A IMPORTNCIA DOS ELEMENTOS NO ORGANISMO 5
CAPTULO 1. A IMPORTNCIA DOS ELEMENTOS NO

ORGANISMO
Dos mais de 90 elementos naturalmente existentes, somente 26 so conhecidos como

sendo necessrio a ratos. [16]
Os elementos mais abundantes no organismo, oxignio, carbono, hidrognio e

nitrognio, constituem 96% do peso corpreo total de um mamfero compondo a gua, as
protenas, os cidos nuclicos, as gorduras e os carboidratos. Em menor concentrao tem-
se o clcio, fsforo, potssio, enxofre, sdio, cloro e magnsio que constituem quase 4% ,
sendo que os demais elementos, em quantidade total combinada no corpo dos mamferos,
constituem da ordem de 0,01% da massa corprea. [16]
O cloro, potssio e o sdio so elementos constituintes dos fludos e tecidos moles. O

sdio e o cloro so encontrados em abundncia fora da clula, ao contrrio do potssio,
cuja concentrao maior est no interior celular. O sdio e o potssio atuam numa funo
denominada transporte ativo regulando a entrada e sada de lquidos e nutrientes na clula.
Atuam tambm, em conjunto com o clcio, na contrao muscular e transmisso de
impulsos nervosos. Esses elementos, bem como magnsio, mangans, bromo e enxofre,
dentro outros, so tambm potentes modificadores do pH nos lquidos corporais,
funcionando como instrumentos de manuteno da sade celular, alcalinizam ou
acidificam os fluidos corpreos, conforme a necessidade do organismo: enquanto os sais
de clcio, magnsio, sdio, potssio e mangans so predominantemente alcalinizantes e
atuam como elementos energizantes e neutralizadores, os sais que contm enxofre, cloro,
bromo so agentes mais acidificantes. Portanto, alem de essenciais sade necessitam
estar em equilbrio para manuteno do pH .[16]
1.1 PRINCIPAIS CARACTERSTICAS DOS ELEMENTOS & RELEVNCIA

CLNICA
1.1.1 Sdio (Na)
Os ons sdio so os principais ctions do lquido extracelular representando

aproximadamente 90% dos ctions inorgnicos por litro de plasma em humanos [17].
As principais funes biolgicas do on sdio so:

Manter a presso osmtica do fludo extracelular;
Controlar a reteno de gua nos espaos tissulares;
Auxiliar na manuteno da presso sangunea;
Regular a irritabilidade dos nervos e tecidos musculares e do corao.
1.1.2 Potssio (K)
O potssio o ction intracelular mais abundante e sua influncia se faz sentir em

vrios processos metablicos da clula. A concentrao extracelular do potssio pequena,
entretanto, as repercusses clnicas de pequenas variaes so, no entanto, de grave
repercusso no organismo podendo gerar leses cardacas.
Cabe ao rim grande parte da responsabilidade pelo controle da concentrao desse

eletrlito [18]: o potssio ingerido filtrado nos glomrulos, e quase completamente
reabsorvido nos tbulos proximais, sendo depois secretado nos tbulos distais. A
diminuio da taxa de filtrao glomerular leva a carncia de potssio, sendo tpica da
insuficincia renal [17].
As principais funes dos ons K no corpo relacionam-se com a manuteno de:

Presso osmtica das clulas;
Potencial eltrico das clulas;
Tamanho das clulas;
Contrao adequada do corao;

Transmisso adequada dos impulsos nervosos [19].
1.1.3 Cloretos
O cloreto o principal nion extracelular e representa a maior frao da

concentrao total de nions inorgnicos do plasma humano [17]. Em geral, o cloreto
afetado pelas mesmas condies que afetam o sdio [19].
Uma das principais funes do Cl como um componente do cido clordrico

gstrico. O on cloreto desempenha tambm uma importante funo no transporte de
oxignio e dixido de carbono no sangue [19]. Tambm est significativamente envolvido
na manuteno da distribuio de gua, da presso osmtica e do equilbrio entre nions e
ctions no compartimento lquido extracelular.
Os ons de cloreto no alimento so quase completamente absorvidos no tubo

digestivo, filtrados pelos glomrulos e sofrem reabsoro passiva, junto com Na+ [17].
1.1.4 Clcio (Ca)
O clcio um nutriente vital para uma correta mineralizao ssea. A sua carncia
poder resultar em graves problemas na estrutura ssea. nos ossos que praticamente todo
o clcio est localizado, cerca de 99%, com o restante nos dentes e nas clulas sangunea.
Os ons clcio so necessrios para contrao muscular e auxiliam na coagulao
sangunea alem de controlar a passagem de fludos atravs das paredes celulares. [17]
O clcio essencial na dieta de animais, pois proporciona rigidez aos dentes,

fundamental em roedores. [17]
1.1.5 Magnsio (Mg)
Cerca de 70% do magnsio do organismo encontra-se no esqueleto, enquanto o

restante se distribui pelos vrios lquidos e tecidos moles. Sua principal funo no
organismo esta na formao do esqueleto, mas tambm um elemento indispensvel para
muitas reaes bioqumicas pois esta presente em ambos os compartimentos (extra e
intracelular).[18]
Os sintomas gerais de deficincia de magnsio incluem leses de pele,

hiperirritabilidade, disfuno muscular, calcificao de tecidos moles, ossos e dentes
defeituosos e crescimento retardado. Apesar de ser essencial no organismo, ainda h
poucos estudos sobre a participao e quantificao ideal para cada animal. [18]
1.1.6 Bromo (Br)
O Bromo encontrado em nveis de trao em humanos. considerado um elemento

qumico essencial, entretanto ainda no se conhece exatamente as funes que realiza.
Muitos compostos de bromo tm uma ao fisiolgica importante, por isso so utilizados
como sedativos, anestsicos e anti-spticos. O Br embora no seja majoritrio em sangue
sua avaliao tambm til para o acompanhamento clnico, em animais de
experimentao, por estar presente em medicamentos, tais como antidepressivos e
sonferos, muito utilizados pela populao brasileira. [17]
Sua monitorao clnica esta normalmente relacionada a intoxicao por

medicamentos. [17]
1.1.7 Enxofre (S)
O enxofre um constituinte importante de alguns aminocidos portanto, no pode

faltar para perfeita produo de protenas. Na maioria dos seres vivos, molculas com
tomos desse elemento, atuam como cofator ("estimulador") de reaes qumicas
promovidas por enzimas. Alm disso, o enxofre ajuda o fgado na secreo da blis alm de
participar da sntese do colgeno no organismo.[18]
Em sua forma inorgnica, o enxofre encontra-se no sangue, na saliva e como um

dos componentes das cartilagens. Embora sua avaliao clnica no seja usual sua ingesto
pode ser intensa no organismo: esta presente em medicamentos (principalmente em
laxantes), em vitaminas, alm de ser muito utilizado como conservantes em bebidas
alcolicas.[18]
Na tabela 1 apresentada Composio elementar aproximada do corpo humano.
TABELA 1.- Composio elementar aproximada do corpo de um homem de 70 kg. [16]
Elemento Peso (kg) % do peso corpreo

Oxignio 45,5 65,0
Carbono 12,6 18,0
Hidrognio 7,0 10,0
Nitrognio 2,1 3,0
Clcio 1,35 1,93
Fsforo 0,785 1,12
Potssio 0,245 0,35
Enxofre 0,175 0,25
Sdio 0,105 0,15
Cloro 0,105 0,15
Magnsio 0,035 0,05
Total 70,00 100,00
CAPTULO II - ANIMAIS DE EXPERIMENTAO 10
CAPTULO 2. ANIMAIS DE EXPERIMENTAO
Existe registro do uso de modelo animal desde a antiguidade. Por volta de 500 aC
anatomistas realizavam vivisseces animais com o objetivo de entender o funcionamento
dos rgos: eram realizados estudos comparativos entre rgos de humanos e de animais,
com mesma patologia, para fins didticos. Acredita - se que a primeira pesquisa cientifica
tenha sido realizada por William Hervey sob o ttulo: Exercitatio anatmica de
motucordis et sanguinis in animalibus publicada em 1638, no qual so relatados os
resultados obtidos sobre fisiologia da circulao em dezenas de espcies animais.
Entretanto na realizao desses experimentos no havia uma conduta tica bem definida
com relao a proteo e cuidado dos animais. [20]
Vrios filsofos, entre eles Ren Descartes (1596- 1650), acreditavam que tanto o
pensamento como a sensibilidade fazia parte da alma e como, em sua concepo, os
animais no tinham alma, no sentiam dor [20]. Somente em 1789 com a publicao do
livro Introduction to the principles of morals and legislation, por Benthan, as questes
relacionadas aos cuidados com animais foi devidamente avaliada.
Nos anos seguintes surgiram as primeiras sociedades protetoras dos animais e em

1876, no Reino Unido, foi estabelecida a primeira lei a regulamentar o uso de animais em
pesquisa. [20]
Um marco importante na humanizao do trato com animais vem do

estabelecimento dos trs Rs na pesquisa com animais: Replace, Reduce e Refine,
publicado em 1959 por Russell & Burch mas, somente em 1978 a UNESCO estabeleceu a
Declarao Universal dos Diretos dos Animais [20-22]. Hoje as reas de criao atendem
as normas internacionais de instalao: Current Good Manufacturing (CGM); World
Health Organization (WHO) garantindo o padro SPF (Specific Pathogens Free).
No Brasil, a produo, o manejo e o descarte obedecem ao cdigo de tica animal e

aos princpios dos trs Rs. Alem disso, vrios rgos regem as atividades didtico
cientifica com modelo animal: o Colgio Brasileiro de Experimentao Animal (COBEA)
CAPTULO II - ANIMAIS DE EXPERIMENTAO 11
que aborda o assunto pelo seu aspecto tico e o Conselho Nacional de Controle de
Experimentao Animal (CONCEA) pelo aspecto legal. Portanto a criao/utilizao de
animais em ensino/pesquisa fica restrita as instituies credenciadas pelo CONCEA e
devem seguir os normativos estabelecidos pelo COBEA. Como recurso fiscalizador tem-se
a criao das Comisses de tica no uso de Animais (CEUA) que deve se constituir por
um mdico veterinrio, um representante da Sociedade Protetora dos Animais (SPA) e por
pesquisadores [21-22].
CAPTULO III - HAMSTERS 12
CAPTULO 3. HAMSTERS
A denominao Hamster atribuda a roedores da famlia Cricetidae encontrados

na frica e sia. tambm a denominao popular dado ao roedor nativo da Sria cuja
denominao cientifica Mesocricetus arautus.[23]
Existem diferentes espcies de Hamsters espalhados pelo mundo. Pode se dividir

as espcies de Hamster em duas categorias: selvagens e domesticados, de acordo com sua
a possibilidade ou no da criao em cativeiro. De acordo com este critrio tm 12 espcies
selvagens e 5 domesticveis: [23]
Selvagens
Cricetus crucetus Hamster do Campo Europeu
Mesocricetus newtoni Hamster Romeno
Mesocricetus brandti Hamster Turco
Mesocricetus raddei Hamster Ciscaucasiano
Cricetulus alticola Hamster Ladak
Cricetulus barabensis Hamster Listrado Chins
Cricetulus kamensis Hamster Tibetano
Cricetulus longicaudatus Hamster de Cauda Longa (menor)
Cricetulus migratorius Hamster Armeno
Cricetulus triton
Cricetulus obscurus
Cricetulus pseudogriseus Hamster de Cauda Longa (maior)
Domesticveis
Mesocicetus auratus (Hamster dourado) que compe a espcie mais comum criada
em cativeiro sendo utilizado como animal de experimentao e que ser estudado
neste trabalho.
Phodopus campbelli Hamster Ano Russo de Campbell
Phodopus sungorus Hamster Ano Russo Siberiano

Cricetulus griseus Hamster Chins
Phodopus roborovski Hamster Roborovski
3.1 Hamster Dourado
Em 1931 exemplares desta espcie (Mesocricetus arautus) foram achados na Sria e

enviados para Inglaterra, onde passaram a ser utilizado como cobaias. Em 1938 chegam
aos Estados Unidos e somente em 1960 ao Brasil. Por muito tempo esta espcie serviu
apenas de cobaia, mas hoje muito procurada como animal de estimao.[23]
O Hamster Dourado um pequeno roedor, de tamanho oscilando de 8 a 12

centmetros e pesando, quando adultos, de 108g (machos) a 120g (fmeas), em mdia. So
animais limpos que apresentam pouco odor. Sua pelagem densa e lustrosa, de um
profundo dourado. A pele do abdmen, embora originalmente cinza claro esta se tornando
muito clara nos Hamsters de hoje em dia, enquanto que a cabea, originalmente estreita,
est cada vez mais reduzida graas seleo de reprodutores. As bochechas possuem
faixas escuras bem como no peito (larga e contnua). A cauda curta e truncada, as orelhas
grandes esto bem separadas e os olhos so brilhantes e escuros. De cada lado da face,
estendendo-se da bochecha at o ombro, o Hamster possui uma bolsa elstica que pode
carregar (suportar) at metade do seu peso em alimentos. A pele bastante malevel, os
ps da frente so como mos e as pernas e os ps traseiros tm trs funes: ajudar
caminhar em terrenos tortuosos, suportar o peso do corpo quando sentado e permitir que
ele se mova para trs. Os machos adultos so mais amigveis, sendo animal de estimao
bastante popular.[23]
A gestao de aproximadamente 16 dias em mdia, e pode chegar at 18 dias,

nascendo de 2 a 15 filhotes. Os jovens deixam a me depois de trs a quatro semanas e
aps um descanso de trs ou quatro dias, ela est pronta para se reproduzir novamente.
Devido curta gestao e ao fato de alcanarem a idade adulta em dois ou trs meses, os
Hamsters so animais de rpida procriao e crescimento; em decorrncia so muito
utilizados em experimentao animal. Embora sejam de hbitos noturnos (90% de suas
atividades so feitas no escuro) so facilmente acordados na presena de algum estmulo.

De comportamento individualista, mesmo com a prpria espcie, pode ser condicionado a
aprender (realizar) alguns procedimentos por tcnica de oferecer recompensas. [23]
FIGURA 2 Hamster Dourado macho.
FIGURA 3 Hamster Dourado fmea.

CAPTULO V INSTRUMENTAO NUCLEAR 15
CAPTULO 4. METODOLOGIA NUCLEAR: AAN
O mtodo nuclear a ser empregado denomina-se Anlise por Ativao com

Nutrons (AAN). Utiliza-se feixe de nutrons, a partir de um reator nuclear, para ativar a
amostra em estudo, que induz reaes nucleares nos ncleos dos elementos constituintes.
Em decorrncia, cada elemento (constituinte da amostra) ao tornar-se radioativo emite
radiao caracterstica, processo este denominado desexcitao nuclear. A identificao
dessas radiaes utilizando propriedades nucleares associadas permite sua avaliao
quantitativa.[24]
4.1 Mtodo semi paramtrico
Para a utilizao deste mtodo de anlise necessrio o conhecimento do fluxo de

nutrons (n). Para a determinao do fluxo de nutrons em reator trmico pode-se
empregar a tcnica de Razo de Cdmio [24]. A utilizao deste mtodo permite a
determinao do fluxo utilizando detetores de ativao (por exemplo, folhas de ouro) por
meio da relao:
A au .M F
n = 1 cd
m.N A . .K t Rcd (1)
Onde:
n fluxo de nutrons
Aau atividade de saturao do detetor de ativao (folha de Ouro)
M peso atmico do ouro (Au)
NA nmero de Avogadro
m massa do detetor de ativao (folha de Au)
Fcd fator de Cdmio (tabelado)

Rcd razo obtida experimentalmente pela irradiao das folhas de Au
(com e sem cobertura de Cd).
seo de choque de ativao (tabelado)
Kt fator de perturbao do fluxo (tabelado)
A medida da atividade pode ser obtida por um sistema de contagem conhecendo-se

a eficincia de deteo da transio de interesse usando a expresso:
C
A=
I (1 e T )e T
(2)
i e
Onde:
A atividade do istopo radioativo;
C rea da transio gama discriminada;
constante de desintegrao (tabelado);
eficincia de deteo na energia da transio gama discriminada;
I intensidade da transio gama discriminada (tabelada);
Ti tempo de irradiao (estabelecido);
Te tempo de espera (intervalo de tempo que decorre entre o final da irradiao
e o incio da contagem da amostra);
Tc tempo de contagem (estabelecido).
A partir da determinao da atividade e de fluxo de nutrons, obtm-se a

concentrao dos elementos ativados, nas amostras biolgicas em questo, extraindo a
frao massa do istopo radioativo [Eq.3] em questo:
.M .C .e .T e
F=
m.N A . . . .I .(1 e .T )( ) (3)
. 1 e .T
i c
Onde:
A atividade do istopo radioativo;
C rea da transio gama discriminada;
F frao do istopo ativado;
fluxo de nutrons
eficincia de deteo na energia da transio gama discriminada;
I intensidade da transio gama discriminada (tabelada);
Ti tempo de irradiao (estabelecido);
Te tempo de espera (intervalo de tempo que decorre entre o final da irradiao
e o incio da contagem da amostra);
Tc tempo de contagem (estabelecido).
m massa da amostra.
NA nmero de Avogadro
4.2 Mtodo Instrumental
Neste mtodo a amostra e padro so irradiados simultaneamente garantindo as

mesmas condies. Desta forma, as concentraes dos elementos na amostra obtida a
partir do obter das concentraes estabelecidas no padro:[24]
(4)
N m f
Aam = A am 1 e Ti
M
( )
onde:
Aam atividade da amostra;
NA nmero de Avogadro;
fluxo de nutrons;
mam massa da amostra;
f frao do istopo que ir sofrer a ativao;
Ti tempo de irradiao;
M massa atmica do elemento;
constante de desintegrao (tabelado).
Apd =
N A m pd f
M
(1 e )
Ti
(5)
onde:
Apd Atividade do padro
NA nmero de Avogadro;
fluxo de nutrons;
mpd massa do padro;
f frao do istopo que ir sofrer a ativao;
F frao do elemento ativado;
Ti tempo de irradiao;
M massa atmica do elemento;
Dividindo a equao (4) pela equao (5) obtm-se:
Aam mam
= (6)
Apd m pd
onde:
Aam Atividade da amostra;
Apd Atividade do padro;
mam massa do elemento na amostra;
mpd massa do elemento no padro.
A partir da atividade da amostra pode-se calcular a concentrao do elemento

utilizando a equao (7), inserindo um fator de correo devido diferena de tempo entre
a medida do padro e da amostra.
(ta t p )
AamostraC padro M padroe
Camostra = (7)
Apadro M amostra
Camostra concentrao do elemento na amostra;
Aamostra taxa de contagem da amostra;
Cpadro concentrao do elemento no padro;
Mpadro massa do padro;
Ta tempo de decaimento da amostra;
Tp tempo de decaimento do padro;
Apadro taxa de contagem do padro;
Mamostra massa da amostra.

CAPTULO 5. INSTRUMENTAO NUCLEAR
A instrumentao nuclear utilizada na aquisio dos espectros da radiao

constituda por um espectrmetro , eletrnica associada e sistema de aquisio de dados
descritos a seguir. A FIGURA 4 ilustra o instrumental nuclear utilizado no LEER.
FIGURA 4 -Instrumentao nuclear utilizada no LEER.
O espectrmetro constitudo por um detetor semicondutor de Germnio

hiperpuro (ORTEC modelo GEM-60195) montado no interior de uma blindagem de
chumbo. Este tipo de blindagem minimiza a radiao de fundo do laboratrio. Um suporte
circular de lucite, centralizado sobre a face do detetor, sustenta a amostra (FIGURA. 5)
FIGURA 5- Arranjo com detetor de HPGe
O sistema de aquisio de dados consiste de um amplificador linear (ORTEC-

671) e um multicanal ADCAM, (ORTEC-918-A) controlado por um microcomputador PC.
Na Figura 6 apresentado um diagrama ilustrativo da instrumentao nuclear.
Para a realizao deste estudo o espectrmetro foi calibrado em energia e

eficincia utilizandose fontes padro [25].
HV
MICRO
DETETOR AMPLIFICADOR ADCAM
COMPUTADOR
FIGURA 6 - Esquema simplificado do arranjo eletrnico.

CAPTULO VI PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL 23
CAPTULO 6. PROCEDIMENTO EXPERIMENTAL
6.1 Calibrao do Espectrmetro
Para a obteno da curva de calibrao em energia do espectrmetro utiliza-se

fontes padro [25] de: 60Co, 109Cd, 133Ba,137Cs e 152Eu, para que se possa associar a posio
dos fotopicos das fontes padro, ao longo dos 4096 canais, com suas respectivas energias.
A calibrao de eficincia do detetor foi obtida a partir dos dados das fontes padro
de 152Eu e 57Co, que possuem valores de intensidade obtidas na compilao da IAEA [25].
A curva obtida apresentada na FIGURA 7 e a funo dada por:
(E ) = a.e b.E + c.e d .E (9)
E
f
i
c
i

n
c
i
a
Energia
FIGURA 7 - Funo ajustada e eficincia de fotopico experimental.

6.2 Coleta e Preparo das Amostras Biolgicas
Para o desenvolvimento deste estudo foi feita a coleta de 20 amostras de sangue de

Hamster Dourado adultos, sem o uso de qualquer tipo de anticoagulante. Imediatamente
aps a coleta, antes do processo de coagulao, alquotas 100L foram pipetadas em papel
de filtro Whatman, no 41 (3,5 x 4,0 cm), em duplicata, e submetidas secagem por alguns
segundos utilizando luz infravermelho.
6.3 Irradiao utilizando o mtodo semi paramtrico de AAN
Para determinar simultaneamente a concentrao dos elementos Br, Ca, Cl, K, Mg

Na e S, cada amostra biolgica foi acondicionada em cpsula de polietileno, junto com os
detetores de ativao (duas folhas metlicas de Au de 1mg nua e coberta com Cd),
usados para medida do fluxo de nutrons [24] e irradiados por 5 minutos no reator do IPEN
(IEA-R1, 2-4MW) num fluxo de ~10 12ncm-2s-1, permitindo a ativao simultnea desses
materiais. Usando esse procedimento a atividade dos raios gama induzida na amostra de
sangue e nos detetores de Au, so obtidas sob as mesmas condies de irradiao.
Imediatamente aps a irradiao, tempo de decaimento de 1 minuto, as amostras

biolgicas foram contadas por 10 minutos, permitindo o clculo simultneo dos elementos
de interesse. Na seqncia, as amostras de Au (nu) e de Au coberto com Cd foram
contadas no espectrmetro gama por um minuto, permitindo a identificao e clculo da
197
rea da transio gama de 411 keV do Au para determinao da Razo de Cdmio e
posteriormente clculo do fluxo de nutrons. O clculo da rea foi realizado utilizando o
software IDFIX (apndice I) e o clculo da concentrao utilizando o software Ativao
(apndice II, III e IV).
6.4 Irradiao utilizando o mtodo Instrumental de AAN
As amostras biolgicas foram irradiadas por 4 minutos juntas com o padro de

msculo bovino (NIST 8414) preparado seguindo o mesmo procedimento descrito no item
6.2. Aps a ativao e tempo de espera de 2minutos foram feitas aquisies de 5 minutos
para o padro e na seqncia para a amostra. O clculo da rea foi realizado utilizando o
software IDFIX e o clculo da concentrao utilizando a equao (7).
A realizao desta medida permite uma comparao dos resultados entre os dois
procedimentos de AAN.
6.5 Material de Referncia
Para verificar o desempenho do aparato experimental bem como para o

controle de qualidade das medidas foi utilizado material de referncia NIST 8414. Este
material foi escolhido por apresentar valores certificados para todos os elementos medidos.
Para esta anlise os valores das concentraes elementares medidas no material

de referncia foi comparada com os valores certificados usando o teste estatstico Z - Score
[26]. Este teste permite avaliar o nmero de desvios padro que o resultado experimental
(E) est do valor esperado com dado certificado (C) :
E C
Z= onde, = E2 + C2

Os resultados obtidos neste estudo para o procedimento semi - paramtrico de AAN

so apresentados na Tabela 2.
TABELA 2 - Concentrao dos elementos obtidos na anlise do material de referncia

(NIST 8414) empregando o mtodo semi-paramtrico de AAN.
Presente Valores
Elemento estudo DPR, Certificados ER, % Z-score
Media DP % Media DP
gL-1 gL-1
Br 0,0014 0,0001 7,1 0,0011 0,0002 27,3 1,5
Ca 0,164 0,015 9,2 0,145 0,020 13,10 0,95
Cl 1,93 0,08 4,8 1,88 0,15 2,39 0,3
K 14,76 1,05 7,1 15,17 0,37 -2,6 1,1
Mg 0,935 0,049 5,2 0,960 0,095 -2,7 0,26
Na 2,11 0,10 4,7 2,10 0,08 0,5 0,1
S 6,97 0,72 10,3 7,95 0,41 -12,3 2,4
ER: erro relativo

DPR: desvio padro relativo medido
Considerando-se o intervalo de confiana de 95% adotado para pratica clnica (Z-

score<2) os dados encontram-se em boa concordncia.
CAPTULO VII RESULTADOS 27
CAPTULO 7. RESULTADOS
O resultado da anlise espectroscpica da amostra de sangue total de Hamster,

utilizando a instrumentao descrita na seo 5, apresentado na TABELA 3. Esta anlise
permite a identificar e selecionar a energia da transio gama de interesse para clculo da
concentrao.
Nas figuras 8 - 12 so apresentados os espectros parciais de raios de sangue total

de Hamster Dourado irradiado por 5 minutos com nutrons no reator IEA - R1. As
transies no identificadas compem o espectro de fundo do laboratrio.
6400
Hamster Dourado Br 616 keV
Sangue total
Bg
5600
80
Br 554 keV
Br 666 keV
contagens
1000
82
80
500
0
600 650 700 750
canal
FIGURA 8 - Espectro parcial de raios de sangue total de Hamster Dourado irradiado por
5 minutos no reator IEA-R1.
Mg 844 keV
Br 776 keV
1200 Hamster Dourado
Mn 847 keV
Mg 1014 keV
Sangue total
Bg
82
27
800
56
27
contagens
400
900 1000 1100
canal
FIGURA 9 - Espectro parcial de raios de sangue total de Hamster Dourado irradiado por
5 minutos no reator IEA - R1.
16000
Hamster Dourado
Na 1368 keV
Sangue total
Cl 1642 keV
Bg
1657 keV SE Cl
14000
Al 1779 keV
38
Na
24
24
contagens
1732 keV DE
K 1525 keV
38
12000
28
1000
42
1600 1800 2000
canal
FIGURA 10 - Espectro parcial de raios de sangue total de Hamster Dourado irradiado

por 5 minutos no reator IEA - R1.
13030
Cl 2167 keV
Na 2754 keV
13020
Hamster Dourado
Sangue total
38
contagens
Bg
24
2242 keV SE Na
13010
24
4000
3000
2000
1000
0
2400 2600 2800 3000 3200
canal

120
Ca 3084 keV
Hamster Dourado
Sangue total
Bg
S 3104 keV
80
contagens
49
37
40
3300 3400 3500 3600
canal

TABELA 3. Elementos identificados no sangue total de Hamster (coluna 1) e

energia selecionada para anlise quantitativa (coluna 2) .
CARACTERSTICAS DOS
ELEMENTO RADIONUCLDEOS
T1/2; E (keV) [24]
28
Alumnio Al (2,24min); 1779
80
Bromo Br (17,68 min); 616
Clcio 49
Ca (8,7min); 3084
Cloro 38
Cl (37min); 1642
Magnsio 27
Mg (9.4m); 843
56
Mangans Mn (2,5 h); 846
Potssio 42
K (12,2 h); 1525
24
Sdio Na (15 h); 1368
37
Enxofre S (5,05 min); 3104
Embora o Alumnio tenha sido identificado sua avaliao quantitativa no foi

obtida em funo da reao interferente 31P (n, ) 28 Al causada pela presena de fsforo no
56
sangue. Da mesma forma para o Mangans devido presena de ferro em sangue, Fe (n,
p)56 Mn.
7.1 Mtodo semi paramtrico de AAN
As concentraes obtidas no presente estudo de Br, Ca, Cl, K, Mg, Na e S em

amostras de sangue total de Hamster Dourado esto na Tabela 4. Todos os resultados
foram obtidos pela mdia das anlises em duplicatas. Estes dados foram correlacionados
com o intervalo de referncia em sangue total de humanos [27]. A apresentao dos
resultados encontra-se de acordo com o Guia para Expresso da Incerteza de Medio [28]
que tem como objetivo estabelecer critrios e regras gerais, harmonizar mtodos e
procedimentos relacionados a expresso de incertezas associadas ao processo de medio.
As figuras 13 - 19 ilustram as concentraes de Br, Ca, Cl, K, Mg, Na e S,

respectivamente, das amostras de sangue total do Hamster Dourado, onde o intervalo de
referncia obtido no presente estudo foi includo considerando-se 1 e 2 DP (Desvio
Padro).
Nas figuras 20 26 so apresentados os histogramas com as curvas gaussianas para

os elementos medidos.
TABELA 4 - Resultado das anlises bioqumicas em sangue de Hamster Dourado pelo

mtodo semi - paramtrico de AAN.
Elemento VM V Mn. V Mx. 1 DP Intervalo de

Referncia
Br, g L-1 0,020 0,038

0,029 0,014 0,055 0,009
[0,0067 0,026]*
0,17 0,29
Ca, g L-1 0,23 0,14 0,35 0,06
[0,080 0,258]** , a
Cl, g L-1 2,52 3,34

2,93 2,05 3,5 0,41
[2,54 3,5]*
K, g L-1 1,71 2,43

2,07 1,51 2,98 0,36
[1,33 1,89]*
0,042 0,074
Mg, g L-1 0,058 0,041 0,088 0,016
[0,027- 0,0455] ** , b
Na, g L-1 1,40 2,14

1,77 1,02 2,58 0,37
[1,48 2,06]*
1,23 1,75
S, g L-1 1,49 1,15 2,09 0,26
[0,10 0,74] ** , a
* Valor de referncia para sangue total de humanos [27].
** [Valor mnimo - Valor mximo]
a
[ref. 29]
b
[ref. 30]
VM - Valor mdio
1 DP 1 Desvio padro.
Intervalo de confiana
0,08
dos dados experimentais:
68%
95%
-1
Concentrao de Br, gL
Limite superior
0,04
Limite inferior
0,00
0 5 10 15 20
Amostras de Sangue Total
FIGURA 13- Concentrao de Br em amostras de sangue total.
0,6
0,5 68%
95%
-1
Concentrao de Ca, gL
0,4
Limite superior
0,3
0,2
0,1
Limite inferior
0,0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 14 - Concentrao de Ca em amostras de sangue total.

5
68%
95%
-1
Concentrao de Cl, gL
4 Limite superior
Limite inferior
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 15 - Concentrao de Cl em amostras de sangue total.
4 Intervalo de confiana
68%
95%
-1
Concentrao de K, gL
3 Limite superior
Limite inferior
1
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
FIGURA 16 - Concentrao de K em amostras de sangue total.

0,15
dos dados esperimentais:
68%
-1
95%
Concentrao de Mg, gL
0,10
Limite superior
0,05
Limite inferior
0,00
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 17 - Concentrao de Mg em amostras de sangue total.
68%
-1
95%
Concentrao de Na, gL
Limite superior
1
Limite inferior
0 5 10 15 20
FIGURA 18 - Concentrao de Na em amostras de sangue total.

68%
95%
-1
Concentrao de S, gL 3
Limite superior
2
1
Limite inferior
0 5 10 15 20
FIGURA 19 - Concentrao de S em amostras de sangue total.
12
10
8
Frequncia
0
-0,01 0,00 0,01 0,02 0,03 0,04 0,05 0,06 0,07
-1
Br,gL
FIGURA 20 Histograma das concentraes de Br em sangue total de Hamster e ajuste

da funo gaussiana.
Frequncia
4
0
0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50
-1
Ca, gL
FIGURA 21 Histograma das concentraes de Ca em sangue total de Hamster e ajuste

da funo gaussiana.
4
Frequncia
0
1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5
-1
Cl, gL
FIGURA 22 - Histograma das concentraes de Cl em sangue total de Hamster e ajuste da

funo gaussiana.
Frequncia 3
0
0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 2,4 2,6 2,8 3,0 3,2
-1
K,gL
FIGURA 23 - Histograma das concentraes de K em sangue total de Hamster e ajuste da

funo gaussiana.
5
Frequncia
0
0,00 0,02 0,04 0,06 0,08 0,10 0,12
-1
Mg, gL
FIGURA 24 - Histograma das concentraes de Mg em sangue total de Hamster e ajuste

da funo gaussiana.
Frequncia
3
0
0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 2,4 2,6 2,8 3,0
-1
Na, gL
FIGURA 25 - Histograma das concentraes de Na em sangue total de Hamster e ajuste

da funo gaussiana.
4
Frequncia
0
0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0 2,2 2,4
-1
S, gL
FIGURA 26 - Histograma das concentraes de S em sangue total de Hamster e ajuste da

funo gaussiana.
Na tabela 5 so apresentados os parmetros estatsticos das distribuies para cada

elemento (media, mediana, moda). Esses parmetros permitem uma avaliao quanto a
distribuio normal desses elementos no sangue (isto : media ~ mediana ~ moda). Nas
figuras 27-33 esses parmetros so apresentados via Box-plot.
TABELA 5 Valores da mdia, mediana e moda das concentraes de Br, Ca, Cl, K, Mg,
Na e S obtidas pelo mtodo semi - paramtrico de AAN.
ELEMENTO MDIA MEDIANA MODA Desvio

gL-1 gL-1 gL-1 padro
(68%)
Br 0,029 0,028 0,024* 0,009
Ca 0,23 0,21 0,24* 0,06
Cl 2,93 2,92 2,75 0,41
K 2,07 2,06 1,92 0,36
Mg 0,058 0,056 0,041* 0,016
Na 1,77 1,73 2,10 0,37
S 1,49 1,47 1,46* 0,26
* Distribuio com mais de um valor de moda.
0,06
0,05
-1
Concentrao, gL
0,04
0,03
0,02
0,01
Br
FIGURA 27 - Representao via Box-plot para Br.

0,40
0,35
-1
0,30
Concentrao, gL 0,25
0,20
0,15
0,10
Ca
FIGURA 28 - Representao via Box-plot para Ca.
3,8
3,6
3,4
3,2
-1
Concentrao, gL
3,0
2,8
2,6
2,4
2,2
2,0
1,8
Cl
FIGURA 29 - Representao via Box-plot para Cl.

3,4
3,2
3,0
2,8
-1
2,6
Concentrao, gL
2,4
2,2
2,0
1,8
1,6
1,4
1,2
K
FIGURA 30 - Representao via Box-plot para K.
0,09
0,08
-1
Concentrao, gL
0,07
0,06
0,05
0,04
Mg
FIGURA 31 - Representao via Box-plot para Mg.

3,0
2,5
-1
Concentrao, gL
2,0
1,5
1,0
0,5
Na
FIGURA 32 - Representao via Box-plot para Na.
2,2
2,0
-1
1,8
Concentrao, gL
1,6
1,4
1,2
1,0
FIGURA 33 - Representao via Box-plot para S.
7.2 Mtodo Instrumental de AAN
As concentraes de Br, Ca, Cl, K, Mg, Na e S em amostras de sangue total de

Hamster Dourado so apresentadas na Tabela 6. Os resultados foram obtidos pela mdia
das anlises em duplicatas. Os resultados obtidos via mtodo semi - paramtrico foram
includos para comparao.
As figuras 34 - 39 ilustram as concentraes de Br, Ca, Cl, K, Mg e Na,

respectivamente, das amostras de sangue total do Hamster Dourado, onde o intervalo de
referncia obtido no presente estudo foi includo considerando-se 1 e 2 DP (Desvio
Padro).
Nas figuras 40 47 so apresentados os histogramas com as curvas gaussianas para

os elementos medidos.
TABELA 6 - Resultado das anlises bioqumicas em sangue de Hamster Dourado pela

tcnica Instrumental (AANI) e Semi-Paramtrica (AAN SP).
Elementos AANI AAN SP

(gL-1) Mdia 1DP Mdia 1DP
(n) (n)
Br 0,020 0,006 0,029 0,009
(20) (20)
Ca 0,19 0,07 0,23 0,06
(17) (20)
Cl 3,12 0,51 2,93 0,41
(20) (20)
K 2,26 0,39 2,07 0,36
(20) (20)
0,067 0,016 0,058 0,016
Mg
(20) (20)
Na 2,00 0,41 1,77 0,37
(20) (20)
S 1,01 0,28 1,49 0,26
(5) (20)
n: nmero de amostras analisadas
0,12
68%
95%
0,08
-1
concentrao de Br, gL
Limite superior
0,04
0,00
Limite inferior
0 5 10 15 20
FIGRURA 34 - Concentrao de Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado

pela tcnica de AANI.
0,6
0,5 68%
95%
-1
0,4
Limite superior
0,3
0,2
0,1
Limite inferior
0,0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
FIGURA 35 - Concentrao de Ca em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela

tcnica de AANI.
6
68%
5 95%
-1
Limite superior
4
2
Limite inferior
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 36 - Concentrao de Cl em amostras de sangue total de Hamster Dourado pela

tcnica de AANI.
68%
95%
-1
Concentrao de K, gL
Limite superior
3
Limite inferior
1
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
FIGURA 37 - Concentrao de K em amostras de sangue total de Hamster Dourado

68%
95%
-1
Limite superior
0,1
Limite inferior
0,0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 38 - Concentrao de Mg em amostras de sangue total de Hamster Dourado

68%
-1
95%
3 Limite superior
1 Limite inferior
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 39 - Concentrao de Na em amostras de sangue total de Hamster Dourado

Frequncia 5
0
0,000 0,005 0,010 0,015 0,020 0,025 0,030 0,035 0,040
-1
Br, gL
FIGURA 40 Histograma das concentraes de Br em sangue total de Hamster e ajuste

da funo gaussiana obtidos pela tcnica de AANI.
4
Frequncia
0
-0,05 0,00 0,05 0,10 0,15 0,20 0,25 0,30 0,35 0,40 0,45 0,50
-1
Ca, gL
FIGURA 41 - Histograma das concentraes de Ca em sangue total de Hamster e ajuste

Frequncia 5
0
1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5 4,0 4,5 5,0
-1
Cl, gL
FIGURA 42 - Histograma das concentraes de Cl em sangue total de Hamster e ajuste da

funo gaussiana obtidos pela tcnica de AANI.
4,0
3,5
3,0
2,5
Freqncia
2,0
1,5
1,0
0,5
0,0
0,8 1,2 1,6 2,0 2,4 2,8 3,2
-1
K, gL
FIGURA 43 - Histograma das concentraes de K em sangue total de Hamster e ajuste da

Frequncia
4
0
0,00 0,05 0,10 0,15
-1
Mg, gL
FIGURA 44 - Histograma das concentraes de Mg em sangue total de Hamster e ajuste

5
Frequncia
0
0,5 1,0 1,5 2,0 2,5 3,0 3,5
-1
Na, gL
FIGURA 45 - Histograma das concentraes de Na em sangue total de Hamster e ajuste

2,0
1,5
Frequncia
1,0
0,5
0,0
0,0 0,2 0,4 0,6 0,8 1,0 1,2 1,4 1,6 1,8 2,0
-1
S, gL
FIGURA 46 - Histograma das concentraes de S em sangue total de Hamster e ajuste da

Na tabela 7 so apresentados os parmetros estatsticos das distribuies para cada

elemento e nas figuras 47 - 52 esses parmetros so apresentados via Box-plot.
TABELA 7 Valores da mdia, mediana e moda das concentraes do Br, Ca, Cl, K, Mg
e Na obtidas pelo mtodo instrumental.
Desvio
ELEMENTO, MDIA MEDIANA MODA padro
gL-1 gL-1 gL-1 (68%)
Br 0,020 0,021 0,021* 0,006
Ca 0,19 0,18 --- 0,07
Cl 3,12 3,19 2,75 0,51
K 2,26 2,23 1,89 0,39
Mg 0,067 0,063 --- 0,016
Na 2,00 2,02 2,08* 0,41
* Distribuio com mais de um valor de moda.

0,035
0,030
-1 0,025
Concentrao, gL
0,020
0,015
0,010
0,005
Br
FIGURA 47 - Representao via Box-plot para Br pela tcnica de AANI.
0,40
0,35
-1
0,30
Concentrao, gL
0,25
0,20
0,15
0,10
Ca
FIGURA 48 - Representao via Box-plot para Ca pela tcnica de AANI.

4,0
3,5
-1
Concentrao, gL
3,0
2,5
2,0
1,5
Cl
FIGURA 49 - Representao via Box-plot para Cl pela tcnica de AANI.
3,4
3,2
3,0
2,8
-1
Concentrao, gL
2,6
2,4
2,2
2,0
1,8
1,6
1,4
K
FIGURA 50 - Representao via Box-plot para K pela tcnica de AANI.

0,11
0,10
0,09
0,08
-1
Concentrao, gL
0,07
0,06
0,05
0,04
0,03
0,02
Mg
FIGURA 51 - Representao via Box-plot para Mg pela tcnica de AANI.
3,5
3,0
-1
Concentrao, gL
2,5
2,0
1,5
1,0
Na
FIGURA 52 - Representao via Box-plot para Na pela tcnica de AANI.

1,6
1,4
-1
Concentrao, gL
1,2
1,0
0,8
0,6
FIGURA 53 - Representao via Box-plot para S pela tcnica de AANI.

CAPTULO VIII DISCUSSO 56
CAPTULO 8. DISCUSSO
8.1 ANLISE COMPARATIVA ENTRE OS MTODOS
Quando os procedimentos semi - paramtrico e instrumental de AAN foram

comparados (TABELA 6) pode-se observar que os resultados so compatveis para o
intervalo de confiana de 68%. Nas figuras 54 a 60 possvel visualizar essa concordncia:
so apresentados os valores da concentrao para os elementos medidos pelo procedimento
instrumental considerando-se o intervalo de confiana de 1DP obtido via procedimento
semi- paramtrico .
Para o S, s foi possvel determinar a concentrao pelo mtodo instrumental para 5

amostras; isso deve - se meia-vida curta do istopo de enxofre ativado (37S, T1/2 ~5
minutos) e ao tempo de espera (Te = 2 minutos), necessrio para manipulao dos materiais
irradiados, o que faz com que os mesmos decaiam substancialmente, inviabilizando a
aquisio para a amostra e padro com boa estatstica. Embora o tempo de irradiao possa
ser alterado (aumentado) existe um limite em termos de tempo de irradiao taxa de
exposio, em anlises de meia vida curta, que torna invivel sua execuo. Neste caso
usual o emprego de soluo padro do elemento a ser analisado, ou a realizao de uma
separao radioqumica das meias vidas mais longas, ou o emprego do mtodo SP AAN
(adotado no presente estudo).
0,12
68%
0,08 95%
-1
Concentrao de Br, gL Limite superior (semi-paramtrico)
0,04
0,00 Limite inferior (semi-paramtrico)
-0,04
0 5 10 15 20
Amostras de Sangue Total de Hamster (Instrumental)
FIGURA 54 - Concentrao de Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado via

mtodo instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Br via mtodo semi-
paramtrico.
0,6
0,5 68%
95%
-1
0,4
Limite superior (semi-paramtrico)
0,3
0,2
0,1
Limite inferior (semi-paramtrico)
0,0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18
FIGURA 55 - Concentrao de Ca em amostras de sangue total de Hamster Dourado via

mtodo instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Ca via mtodo semi-
paramtrico.
.
5
68%
95%
-1
4 Limite superior (semi-paramtrico)
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 56 - Concentrao de Cl em amostras de sangue total de Hamster Dourado via

mtodo instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Cl via mtodo semi-
paramtrico.
68%
95%
-1
Concentrao de K, gL
3 Limite superior (semi-paramtrico)

1
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
FIGURA 57 - Concentrao de K em amostras de sangue total de Hamster Dourado via

mtodo instrumental, comparada com o intervalo de confiana de K via mtodo semi-
paramtrico.
dos dados esperimentais:
68%
95%
-1
0,1
0,0
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 58 - Concentrao de Mg em amostras de sangue total de Hamster Dourado via

mtodo instrumental, comparada com o intervalo de confiana de Mg via mtodo semi-
paramtrico.
68%
-1
95%
3
1
0 5 10 15 20
FIGURA 59 - Concentrao de Na em amostras de sangue total de Hamster Dourado,

comparada com o intervalo de confiana de Na via mtodo semi-paramtrico.
3
68%
95%
-1
Concentrao de S, gl
2
0
0 1 2 3 4 5 6 7 8
FIGURA 60 Concentrao de S em amostras de sangue total de Hamster Dourado via

mtodo instrumental, comparada com o intervalo de confiana de S via mtodo semi-
paramtrico
8.2 ANLISE COMPARATIVA: Hamster & Humanos
Os valores das concentraes obtidas no presente estudo, para Br, Cl, K e Na em

sangue total de Hamster Dourado, permitem uma comparao com as estimativas em
sangue de humanos, ambos obtidos pelo procedimento semi - paramtrico de AAN. Esta
comparao apresentada nas Figuras 61 a 64, respectivamente, onde o intervalo de
referncia adotado corresponde os valores obtidos para humanos [27], evidenciando as
similaridades desses elementos no sangue desta espcie e de humanos.
Para os demais elementos (Ca, Mg e S) s foi possvel realizar uma comparao em

termos de valores de mnimo e de mximo disponveis na literatura para sangue total de
humanos. Estes dados so apresentados na tabela 4 e sugerem que as estimativas para
Hamster encontram-se um pouco acima da estimativa para humanos: enquanto o limite
superior para Ca em sangue de Hamster (0,29gL-1) compatvel dentro de 1DP com o
valor mximo estabelecido para Ca (0,26gL-1) em sangue humano [29], para o limite
inferior, mesmo considerando o intervalo de confiana de 95% (0,11gL-1) adotado na
pratica clnica, o valor mnimo estabelecido para humanos uma ordem de grandeza
menor [29]; para Mg, o que se observa que os valor de mximo em humanos (0,045gL-1)
[30] encontra-se prximo ao limite inferior em Hamster (0,042gL-1) considerando 1DP; da
mesma forma para S, o que se observa que os valores de mximo em humanos (0,74gL-1)
[29] encontra-se prximo ao limite inferior em Hamster somente quando se considera o
intervalo de confiana de 99% (0,71gL-1 2,27gL-1).
O mesmo comportamento observado quando a comparao envolve os resultados

obtidos pela tcnica AANI.
0,08
68%
95%
-1
concentrao de Br, gL
0,04 Limite superior de Humanos
0,00
Limite inferior de Humanos
0 5 10 15 20
Amostras de Sangue Total de Hamster
FIGURA 61 - Concentrao de Br em amostras de sangue total de Hamster Dourado

6
68%
5 95%
-1
Concentrao de Cl, gL Limite superior de Humanos
4
2
1
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20 22
FIGURA 62 - Concentrao de Cl em amostras de sangue total de Hamster Dourado
68%
95%
-1
Concentrao de K, gL
Limite superior de Humanos
1
0 2 4 6 8 10 12 14 16 18 20
FIGURA 63 - Concentrao de K em amostras de sangue total de Hamster Dourado

68%
-1
95%
3
Limite superior de Humanos
1
0 5 10 15 20
FIGURA 64 - Concentrao de Na em amostras de sangue total de Hamster Dourado
.
CAPTULO IX CONCLUSO 64
CAPTULO 9. CONCLUSES
Os resultados obtidos no presente estudo evidenciam as similaridades/discrepncias entre

os constituintes majoritrios de sangue total entre esta espcie de rato e o homem.
Esses dados compem informaes valiosas para a bioqumica clnica pelo papel desses
eletrlitos no metabolismo e nas patologias associadas.
A tcnica de AAN para caracterizao do tecido sanguneo deste animal de

experimentao mostrou-se ferramenta gil e precisa, tanto para uso em medicina
veterinria para prtica clnica como em patologia clnica e reas afins, pois o pesquisador
poder otimizar sua pesquisa, em tempo e em custo, selecionando o animal (espcime) que
melhor se adapta ao experimento.
A tcnica ANN pode ser empregada como procedimento analtico alternativo, em

bioqumica clnica, quando o material biolgico escasso.
O emprego dos procedimentos semi paramtrico e/ou instrumental de AAN apresentam

simplificaes e vantagens comparativamente aos procedimentos convencionais para
prtica clnica, tais como:
utilizao de sangue total, em pequena quantidade (100 L) comparativamente ao

procedimento convencional (1 a 2 mL de soro/anlise) ;
agilidade: elimina a etapa de obteno de soro;
reduo nos custos dispensa o uso de reagente e permite a obteno simultnea de

vrios elementos (procedimento AAN SP);
facilidades no armazenamento e transporte das amostras de sangue: em funo

do procedimento de preparo da amostra no h necessidade de refrigerao
podendo ser armazenada por longos perodos , pois s depende da durabilidade
do papel;
por se tratar de mtodos no destrutivo pode-se, ainda, repetir a anlise aps o

trmino de sua atividade residual (~72 horas);
CAPTULO IX CONCLUSO 65
o descarte da amostra no necessita de nenhum tratamento :pode ser incinerada e

descartada como rejeito hospitalar
As duas tcnicas utilizadas foram compatveis na determinao dos elementos. Entretanto,

utilizando-se o procedimento semi- paramtrico foi possvel medir simultaneamente a
concentrao dos elementos Br, Ca, Cl, Mg, K, Na e S simplificando o procedimento
experimental no laboratrio; alm disso, a determinao do enxofre, de meia vida curta
(T1/2 ~5 minutos) praticvel sem a necessidade da realizao de separao radioqumica.
Embora as incertezas possam ser menores utilizando o procedimento Instrumental de

Ativao, pois so expressas principalmente em funo das incertezas associadas ao
padro, na pratica clnica da ordem de 5 a 10% so adotadas em funo da combinao
eletroltico& mtodo analtico empregado.
9.1. Perspectivas
Realizar medidas com soluo padro de enxofre com objetivo de complementar a medida
INAA em sangue total de Hamster. Com este procedimento experimental espera-se
diminuir a taxa de exposio a radiao, na manipulao das amostras, logo aps a
irradiao, tornando vivel o uso do procedimento comparativo de AAN.
Dar continuidade as anlises: obteno da concentrao de ferro e iodo, tambm relevantes

em bioqumica clnica; para esta anlise necessrio coletar amostra de 500L e irradiao
de 4hs em fluxo de nutrons trmicos da ordem de 10 12ncm-2s-1 .
Pretende-se avaliar a presena dos elementos Br, Ca, Cl, K, Mg, Na e S na rao utilizada.
Submeter as amostras (utilizadas no presente estudo) a outros procedimentos analticos:

atualmente encontra-se em fase de teste a anlise de amostras de sangue total por
fluorescncia de Raio X.
ANEXO 1. CLCULO DAS REAS DOS FOTOPICOS 66
Anexo 1 : Clculo das reas dos fotopicos
Para esta tarefa foi utilizado o programa IDFIX [31] que permite ajuste de um fotopico
utilizando uma funo gaussiana.
Seleo do pico para se calcular sua rea.

ANEXO 2. CLCULO DA CONCENTRAO DOS ELEMENTOS E DO FLUXO 67
Anexo 2 : Clculo da concentrao dos elementos e do fluxo
Para esta tarefa foi utilizado o programa Ativao [32] que calcula o fluxo de nutrons e a
concentrao do elemento desejado.
ANEXO 3. TELA DO SOFTWARE PARA CLCULO DE CONCENTRO 68
Anexo 3 : Tela do software para clculo do fluxo de nutrons.

ANEXO 4 TELA DO SOFTWARE PARA CLCULO DO FLUXO DE NUTRONS 69
Anexo 4 : Tela do software para clculo da concentrao

REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS 70
REFERNCIAS BIBLIOGRFICAS
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[28] ISO - GUM Organizao Internacional para Padronizao - Guia para Expresso de
Incerteza de Medio.
[29] MOUSAVI-YEGANEH, S., EBRAHIMY-FAKLAR, F., ENAYATI, F. Nuclear

instruments and Methods in Physics Research B, 3 (1984) 364.
[30] BESTMAN, A. D., BRYAN, G.K., N, WINEFORDNER, J.D. Microchemical

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[31] GOUFFON, P. Manual do programa Idefix. Universidade de So Paulo, Instituto de

Fsica, Laboratrio do Acelerador Linear, So Paulo, 1987.
[32] MEDEIROS, J. A. G; ZAMBONI, C. B; ZAHN, G. S; OLIVEIRA, L. C; DALAQUA

Jr, L. Software para realizao de analises hematolgicas utilizando processo
radioanaltico. 39 Congresso Brasileiro de Patologia Clnica / Medicina Laboratorial, So
Paulo SP, Brasil, 2005.

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INSTITUTO DE PESQUISAS ENERGTICAS E NUCLEARES

Autarquia Associada Universidade de So Paulo

DETERMINAO DE ELEMENTOS EM SANGUE DE

Rodrigo Oliveira de Aguiar

Dissertao apresentada como

Dra. Cibele Bugno Zamboni

Dedico com muito amor este

trabalho minha filha Beatriz

Aos colegas Cludio e Fbio pela colaborao e amizade.

Ao pessoal da CPG pela colaborao.

Ao IPEN/CNEN por possibilitar a realizao deste trabalho.

Ao Governo do Estado de So Paulo, pelo apoio financeiro.

Bianca Torres pela organizao no suporte financeiro.

s diretoras Clia Paschoal e Lia Soares de Abreu, pelo apoio e colaborao.

Beatriz que me deu muita alegria nos momentos difceis.

Aos meus pais e irm pelo carinho e apoio em todos os momentos.

Priscila pelo companheirismo.

Nina pela motivao.

Aos meus avs Geraldo e Jos Arnaldo Em Memria

s minhas avs Andrelina e Esmeralda.

Ao Vagner, Valria e Enzo pela fora.

DETERMINAO DE ELEMENTOS EM SANGUE DE

Rodrigo Oliveira de Aguiar

A comparao com as estimativas de normalidade em sangue total em seres humanos

DETERMINATION OF ELEMENTS IN BLOOD OF GOLDEN

Rodrigo Oliveira de Aguiar

7.2 Mtodo instrumental de AAN.................................................................................43

8.2 Anlise comparativa: Hamster & Humanos.....................................................60

CAPTULO 9 : CONCLUSES .64

Tabela 1: Composio elementar aproximada do corpo de um homem de 70 kg ......................9

Tabela 7: Valores da mdia, mediana e moda das concentraes do Br, Cl, K, Mg e Na

Vrios estudos destinam-se a elucidar o metabolismo dos organismos vivos, tanto

Usualmente, esses testes in vivo so realizados primeiramente em animais de

Particularmente, em pesquisas na rea mdica que utilizam animais de

Com base nisto, nos ltimos anos o Laboratrio de Espectroscopia e Espectrometria

O presente estudo dedicado caracterizao da composio sangunea de

dispensa o uso de reagentes, alm de apresentar facilidades no armazenamento da amostras

No presente estudo sero analisados os elementos Br, Ca, Cl, K, Mg, Na e S em

As medidas sero realizadas utilizando o mtodo semi - paramtrico de AAN (AAN

Este estudo faz parte de um projeto multidisciplinar denominado Estudo da

Na Figura 1 apresentado um esquema ilustrativo do projeto multidisciplinar no

ESTUDO DA DISTRIBUIO DE METAIS EM AMOSTRAS BIOLGICAS

COLETA DE MATERIAL BIOLGICO

HUMANOS ANIMAIS DE EXPERIMENTOS

CARACTERIZAO DE TECIDO SANGUNEO VIA METODOLOGIA

DETERMINAO VALORES DE REFERNCIA DOS

FIGURA 1 - Esquema ilustrativo do projeto multidisciplinar.

CAPTULO 1. A IMPORTNCIA DOS ELEMENTOS NO

Dos mais de 90 elementos naturalmente existentes, somente 26 so conhecidos como

Os elementos mais abundantes no organismo, oxignio, carbono, hidrognio e

O cloro, potssio e o sdio so elementos constituintes dos fludos e tecidos moles. O

1.1 PRINCIPAIS CARACTERSTICAS DOS ELEMENTOS & RELEVNCIA

1.1.1 Sdio (Na)

Os ons sdio so os principais ctions do lquido extracelular representando

As principais funes biolgicas do on sdio so:

1.1.2 Potssio (K)

O potssio o ction intracelular mais abundante e sua influncia se faz sentir em

Cabe ao rim grande parte da responsabilidade pelo controle da concentrao desse

As principais funes dos ons K no corpo relacionam-se com a manuteno de:

Contrao adequada do corao;

O cloreto o principal nion extracelular e representa a maior frao da

Uma das principais funes do Cl como um componente do cido clordrico

Os ons de cloreto no alimento so quase completamente absorvidos no tubo