Produccin de plntulas y semilla prebsica de

variedades comerciales de papa libres de enfermedades

www.gobiernofederal.gob.mx
www.sagarpa.gob.mx Marco Antonio ARELLANO GARCA, Eulalia Edith VILLAVICENCIO GUTIRREZ y
www.inifap.gob.mx Sergio J. GARCA GARZA

Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias

Centro de Investigacin Regional del Noreste
Campo Experimental Saltillo, Febrero 2010
Folleto Tcnico No. MX-0-310702-37-03-15-09-41
ISBN: 978-607-425-301-6

SECRETARIA DE AGRICULTURA, GANADERIA,
DESARROLLO RURAL, PESCA Y ALIMENTACION
LIC. FRANCISCO JAVIER MAYORGA CASTAEDA
Secretario
M. C. MARIANO RUIZ-FUNES MACEDO
Subsecretario de Agricultura
ING. IGNACIO RIVERA RODRIGUEZ
Subsecretario de Desarrollo Rural
Dr. PEDRO ADALBERTO GONZALEZ HERNANDEZ
Subsecretario de Fomento a los Agronegocios
INSTITUTO NACIONAL DE INVESTIGACIONES
FORESTALES, AGRICOLAS Y PECUARIAS
Dr. PEDRO BRAJCICH GALLEGOS
Director General
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Coordinador de Investigacin, Innovacin y Vinculacin
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Encargado de la Coordinacin de Planeacin y Desarrollo
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CENTRO DE INVESTIGACION REGIONAL DEL
NORESTE
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Director de Administracin
CAMPO EXPERIMENTAL SALTILLO
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Director de Coordinacin y Vinculacin en Coahuila
GOBIERNO DEL ESTADO DE COAHUILA
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Gobernador Constitucional del Estado
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Secretario de Fomento Agropecuario
LIC. ELIAS JUAN MARCOS ISSA
Subsecretario de Agricultura y Comercializacin
ING. JOSE CARLOS DESTEVANE MEJIA
Secretario de Agricultura
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Director de Ganadera
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DELEGACION ESTATAL DE SAGARPA
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Delegado en Coahuila
ING. JORGE ALBERTO FLORES BERRUETO
Subdelegado Agropecuario
LIC. REYNOLD MALTOS ROMO
Subdelegado de Planeacin
LIC. REYNALDO PEREZ-NEGRON
Subdelegado de Administracin
FONDO MIXTO DE FOMENTO A LA INVESTIGACION
CIENTIFICA Y TECNOLGICA
CONACYT-GOBIERNO DEL ESTADO DE NUEVO LEON
DR. OSCAR VAZQUEZ MONTIEL
Director Regional Noreste del CONACYT
Secretario Tcnico del Fondo Mixto
C. RODOLFO TENORIO SANCHEZ
Jefe del Departamento de Enlace Tcnico Noreste del
CONACYT
LIC. ROGELIO FLORES DE LA PEA
Secretario Administrativo del Fondo Mixto
Produccin de plntulas
y semilla prebsica de
variedades comerciales
de papa libres de
enfermedades

Dr. Marco Antonio ARELLANO GARCA

M. C. Eulalia Edith VILLAVICENCIO GUTIRREZ
Dr. Sergio J. GARCA GARZA

Instituto Nacional de Investigaciones Forestales,

Agrcolas y Pecuarias
Progreso No. 5, Barrio de Santa Catarina
Delegacin Coyoacn, C.P. 04010 Mxico D. F.
Telfono (55) 3871-8700

Produccin de plntulas y semilla prebsica de variedades

comerciales de papa libres de enfermedades

ISBN: 978-607-425-301-6
Primera Edicin 2010
No. de Registro INIFAP/CIRNE/A-458

Instituto Nacional de Investigaciones Forestales, Agrcolas y Pecuarias

Centro de Investigacin Regional Noreste No est permitida la reproduccin total o parcial de esta publicacin,
Campo Experimental Saltillo ni la transmisin de ninguna forma o por cualquier medio, ya sea
Saltillo Coah., Febrero 2010 electrnico, mecnico, fotocopia, por registro u otros mtodos, sin el
Folleto Tcnico Nm. 41, ISBN: 978-607-425-301-6 permiso previo y por escrito de la Institucin.
 Contenido
Pg. Pg.
Introduccin 1 Metodologa para la produccin de semilla
Origen del cultivo de papa 4 prebsica 29
Taxonoma y botnica 5 Seleccin del sustrato 29
Descripcin de la planta de papa 6 Solucin nutritiva 30
Raz 6 Riegos 31
Tallo 6 Determinacin del cuando regar 33
Hojas 7 Determinacin del cuanto regar 33
Flor 7 Control de plagas 34
Tubrculos 7 Control de enfermedades 34
I. Fase de emergencia 8 Prcticas culturales 36
II. Fase vegetativa 8 Aporque 36
III. Fase de tuberizacin 8 Cosecha 36
IV. Fase de madurez 8 Clasificacin del tamao de minitubrculos 36
Tipos de reproduccin 9 Produccin de semilla prebsica de variedades
Sustento legal para la micropropagacin de papa 9 comerciales de papa bajo condiciones de
I. Produccin de material prenuclear 10 invernadero 37
Obtencin de vitroplntulas libres de virus 10 Efecto de la densidad de poblacin y altura de la
a) Termoterapia 10 plntula, sobre la produccin de minitubrculos-
b) Cultivo de meristemos 12 semilla de papa. 38
c) Pruebas serolgicas para deteccin de virus 13 Nmero de minitubrculos 38
Micropropagacin de papa 14 Peso de minitubrculos 39
Produccin de plntulas in Vitro 15 Efecto del tamao del microtubrculo, sobre la
Medio nutritivo base 16 produccin de minitubrculos-semilla de papa 40
Procedimiento para la elaboracin del medio Proceso de certificacin de tubrculos-semilla
nutritivo 18 bsica en campo 41
Vida del medio 20 Requerimientos de semilla certificada por hectrea
Etapa 1. Seleccin de materiales donantes 20 42
Etapa 2. Multiplicacin de explantes 20 Conclusiones 42
Produccin de material prenuclear 20 Literatura Citada 43
(vitroplantas)
Etapa 3. Enraizamiento 22
3.1) Enraizamiento in vitro 22
3.2) Enraizamiento in vivo 23
Etapa 4. Trasplante al invernadero 24
Aclimatacin 24
Produccin de microtubrculos de papa
(prenuclear) 25
II. Produccin de minitubrculos-semilla 26
Sistemas de produccin de semilla prebsica en
otros pases. 26
Sistema de produccin de minitubrculo-semilla de
papa en invernaderos de la regin papera del
noreste de Mxico 27
 ndice de Cuadros ndice de Figuras
Pg. Pg.
Cuadro 1. Componentes de los medios de cultivo 17 Figura 1. Esquema de la trayectoria de un clon y/o 11
para la produccin de vitroplntulas de variedad de papa para la produccin de
papa (Solanum tuberosum). minitubrculo-semilla libre de virus.
Cuadro 2. Caractersticas de la solucin nutritiva 31 Figura 2. Elaboracin del medio nutritivo para la 19
universal elaborada por Steiner y multiplicacin de papa (Solanum
modificada para su aplicacin por tuberosum) en el Laboratorio de Cultivo
etapas en la produccin de de Tejidos Vegetales del Campo
minitubrculos semilla de papa. Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP.
Cuadro 3. Tensiones de humedad para determinar 32 Figura 3. Obtencin de explantes de papa (Solamun 21
la frecuencia de aplicacin del riego tuberosum) para la multiplicacin
(tensimetros a 10 cm de profundidad) intensiva de vitroplantas en el
y coeficientes de desarrollo del cultivo Laboratorio de Cultivo de Tejidos
(Kc), segn Allen et al., (2006). Vegetales del Campo Experimental
Cuadro 4. Algunos productos recomendados para 35 Saltillo CIRNE-INIFAP.
el control de hongos y bacterias Figura 4. Enraizamiento in vitro de las vitroplantas 23
(aplicacin semanal preventiva). de papa (Solamun tuberosum.) Los factores
Cuadro 5. Clasificacin con base en el dimetro 37 a controlar en esta etapa son: el medio de
polar del minitubrculo (clasificacin crecimiento, temperatura, luz y
propia). fotoperodo. Laboratorio de Cultivo de
Cuadro 6. Produccin de semilla bsica 38 Tejidos Vegetales del Campo
(minitubrculos por m2) de variedades Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP.
comerciales de papa bajo condiciones Figura 5. Enraizamiento in vivo de vitroplantas de 24
de invernadero. papa (Solanum tuberosum) en sustrato
Cuadro 7. Efecto de la altura de las vitroplntulas 39 estril.
y las diferentes densidades de Figura 6. Camas en el interior del invernadero 29
poblacin en el nmero de antes de ser rellenadas con el sustrato de
minitubrculos-semilla obtenidos en la tierra de bosque cribada. Abajo: proceso
categora media (2.5 a 5 cm de de desinfeccin de la tierra y vista del
dimetro). Variedad Gigant. invernadero una vez rellenadas las
Cuadro 8. Efecto de la altura de las vitroplntulas 39 camas.
y las diferentes densidades de Figura 7. Figura 7. 1) Establecimiento de 30
poblacin en el peso de minitubrculos- vitroplntulas; 2) Humedecimiento del
semilla (g) obtenidos en la categora Agribn; 3) Detalle del establecimiento
media (2.5 a 5 cm de dimetro). de las vitroplntulas por debajo del
Variedad Gigant. Agribn; 4) Establecimiento completo de
las vitroplantulas.

Figura 8. Equipo Xilema, con la disposicin de los
elementos fertilizantes, cuando se tienen
dos tanques para la concentracin de la
solucin nutritiva.
Figura 9. Detalle de la utilizacin de tensimetros
para el control de la aplicacin del agua.
Figura 10. Detalle de la sanidad lograda en el
interior del invernadero.
Figura 11. Tamao de minitubrculos preferidos
para la siembra, en campo, de semilla
prebsica de papa.
Figura 12. Produccin de minitubrculos/m2,
mediante la siembra directa de
microtubrculos. Invernadero Campo
Experimental Saltillo.
Figura 13. Esquema de certificacin de tubrculos-
semilla de papa.
Produccin de plntulas y semilla prebsica
Pg.
de variedades comerciales de papa libres de
31
enfermedades
Marco Antonio Arellano Garca1
Eulalia Edith Villavicencio Gutirrez2
32 Sergio Javier Garca Garza3
Introduccin
35
La papa es un alimento de gran importancia para
36 el consumo en fresco y procesado que, junto con el
maz, frijol, trigo y arroz forman parte de la dieta
del mexicano. De las 63 mil 919 ha anuales que se
40
siembran con papa en el pas, slo el 20 % de la
superficie utiliza semilla calificada (prebsica,
bsica, registrada, certificada y habilitada)
42 (CONPAPA, 2009). La semilla es el insumo ms
importante en todo cultivo, siendo la disponibilidad
de semilla sana y de buena calidad uno de los
principales factores que limitan la produccin de
este tubrculo. Desde 1982 en el INIA, ahora
INIFAP, se empezaron a establecer proyectos
encaminados a la produccin de semilla de papa.
Posteriormente, en 1988 el sistema de produccin
Laboratorio-Invernadero-Campo fue adoptado por
algunos productores del centro del pas; sin
embargo, an no se ha logrado abastecer de
suficiente semilla con calidad fitosanitaria. Las
principales variedades comerciales de papa de las
que se ha generado semilla calificada en Mxico
han sido variedades como: Alpha, Atlantic, Gigant,
Mondial, Fiana, Caesar, Vivaldi y Felsina, y de una
cantidad reducida de variedades mexicanas como:
Nortea, Montserrat, Zafiro, Malinche y Tollocan.
Entre las dcadas de los 60s y 70s, la produccin
de semilla certificada en nuestro pas se realiz con
materiales importados de Europa, posteriormente
se facilit la importacin de semilla de Holanda y
1
Dr. Ex-investigador del Campo Experimental Saltillo. CIRNE-INIFAP.
2
M.C. Investigadora del Nodo Regional de la Red de Investigacin e
Innovacin de Hortalizas del Campo Experimental Saltillo. CIRNE-INIFAP.
3
Dr. Investigador del Nodo Regional de la Red de Investigacin e Innovacin
de Hortalizas del Campo Experimental Saltillo. CIRNE-INIFAP.
Canad y los productores dejaron de producir
semillas de variedades mexicanas criollas y
mejoradas.
A finales de la dcada de los 80s y principios de
los 90s se presentaron una serie de eventos que
dificultaron en nuestro pas el comercio de
semillas, como fue la restriccin de la semilla
importada, debido a problemas fitosanitarios y la
firma del Tratado de Libre Comercio de Amrica
del Norte (TLCAN). Durante la ltima dcada se
han hecho esfuerzos para consolidar en el sector
agropecuario el sistema-producto papa, generando
normas fitosanitarias para su produccin en
invernadero y campo, lo que ha fortalecido el
programa de produccin de semillas. Esto ha
generado que a nivel nacional se tengan
establecidos 10 laboratorios y 17 invernaderos con
una superficie til de 60 mil m2, en los que se
producen aproximadamente 25 millones de
minitubrculos por ao, con los que se abastece
slo el 1.3% de la superficie cultivada, sin llegar a
satisfacer la demanda nacional (Hernndez, 2008).
En la zona papera del noreste de Mxico
existen 4 laboratorios y 5 invernaderos con una
capacidad instalada de 11,248 m2 y una superficie
de 8,000 m2, donde se llegan a generar hasta tres
cosechas de minitubrculos al ao, obteniendo 1.5
millones de unidades de minitubrculos-semillas
clasificados como semilla con categora prebsica,
mismos que se pueden utilizar para establecer 50
ha.
Esta produccin es baja si se considera que en
el ciclo Primavera-Verano 2007 (P-V) se sembraron
en esta regin 5,000 ha y la produccin de semilla
prbasica slo cubri el 1% de esta superficie.
Algunos productores de la regin papera de
Coahuila y Nuevo Len han invertido en la
2 3
construccin de invernaderos para abastecerse de
semilla, importando plntulas in vitro y/o
minitubrculos a precios altos. En esta
infraestructura se pueden obtener minitubrculos
comerciales con un dimetro mayor a 2.5 cm. Como
lo refiere Ranalli et al., (1994), el potencial gentico
de una variedad o clon se conserva con tubrculos-
semilla libres de virus, en donde la calidad
fitosanitaria repercute en el rendimiento del
cultivo, por lo que la produccin de semilla
prebsica es importante.
La capacidad de produccin de semilla
certificada de papa en la regin corresponde
aproximadamente al 10% de la demanda total de
semilla, valuada en $780 millones de pesos,
considerndose un cultivo clave en la economa y
en la generacin de empleos directos (60 jornales
por hectrea) e indirectos (compaas productoras
de agroqumicos, transportes, comercio e
industria). Recientemente, este cultivo ha sido
seriamente afectado por la enfermedad conocida
como sndrome de la punta morada de la papa
(PMP), la cual reduce el rendimiento y la calidad
del cultivo en ocasiones en ms del 65%.
Durante el ciclo de produccin P-V 2006, el
cultivo de papa tuvo grandes prdidas debido a este
sndrome, el cual, se considera como el factor
limitante de la produccin de este cultivo en
Mxico (CONPAPA, 2009). La PMP se detect en
Mxico en el ao de 1948 y se clasific como un
problema de baja importancia.
Sin embargo, esta enfermedad se ha
incrementado notablemente en los ltimos 15 aos,
afectando al 70% de la superficie sembrada con
papa en Mxico y un gran porcentaje en la regin
papera de Coahuila y Nuevo Len (Flores y Flores,
2008).
 Para seguir apoyando a este sector productivo, es
necesario fortalecer el esquema de produccin de
semilla certificada, ya que este ha sido el insumo
ms afectado con prdidas mayores al 65% debido a
la PMP, por lo que el objetivo de la presente
publicacin es ofrecer a los productores y a los
interesados en esta cadena productiva, una
metodologa para la produccin de minitubrculos-
semilla prebsica libre de agentes patgenos,
describiendo de manera prctica los resultados
obtenidos en el Campo Experimental Saltillo del
INIFAP bajo el esquema de produccin de
Laboratorio-Invernadero.
Origen del cultivo de papa
Existe abundante evidencia arqueolgica que
demuestra que la papa ha sido cultivada en la
regin Andina de Amrica del Sur desde tiempos
muy antiguos. Se considera que el centro de origen
es en las tierras altas del sur de Per, en una zona
comprendida entre El Cuzco y los alrededores del
lago Titicaca. De ah se difundi por el sur hacia
Bolivia, Argentina y Chile; y por el norte hacia
Ecuador, Colombia, Venezuela, Guatemala y
Mxico.
Han transcurrido miles de aos desde que el
hombre andino domestic una o ms especies
silvestres del gnero Solanum con capacidad de
producir tubrculos. Una vez que la agricultura se
hizo ms extensiva, la papa fue difundida a otras
reas geogrficas, en donde se generaron
variedades mas adaptadas a cada lugar.
En estas regiones numerosos cultivares nativos
muestran gran variacin en el tipo de hoja, color de
flor y caracterstica de los tubrculos, tales como
forma, color y sabor.
Dentro de las especies cultivadas, la subespecie
tuberosum se cultiva mundialmente.
4 5
Sin embargo, en el sur de Chile se han cultivado
por varios siglos, cultivares nativos de esta
subespecie.
La subespecie andigena es todava la de mayor
distribucin en la zona andina de Venezuela,
Colombia, Ecuador, Per, Bolivia, el norte de
Argentina y tambin se cultiva en algunas reas de
Guatemala y Mxico. Tradicionalmente se produce
entre los 2,000 y 4,000 metros de altitud (Huamn,
1986).
La diferencia entre andigena y tuberosum reside
en la adaptacin a la longitud del da. La evidencia
experimental expuesta en Europa y Estados Unidos
muestra que las poblaciones de andigena adaptadas
principalmente a das cortos se pueden transformar
en poblaciones tolerantes a das largos.
Este proceso se acompaa de cambios
morfolgicos, tales como disminucin en el
crecimiento de la parte superior, entrenudos ms
cortos, hojas ms grandes, reduccin en su
floracin y produccin de frutos. Esto indica que
las subespecies presentes en Chile, Europa y
Estados Unidos proceden de andigena a travs de
un proceso de adaptacin a los das largos que son
caractersticas en estas zonas (Plaisted, 1971).
Taxonoma y botnica
La papa cultivada y sus parientes silvestres se
clasifican como sigue:
Familia: Solanaceae
Gnero: Solanum
Seccin: Petota (tuberosum)
Sub-Seccin: Potatoe (hyperbasarthrum)
La ltima categora taxonmica se subdivide en
series y stas en especies. La papa es una
dicotilednea herbcea con hbitos de crecimiento
rastrero o erecto, generalmente de tallos gruesos y
leosos, con entrenudos cortos.
 Los tallos son huecos o medulosos, excepto en
los nudos que son slidos, de forma angular y por
lo general verdes o rojo prpura.
El follaje normalmente alcanza una altura entre
0.60 a 1.50 m. Las hojas son compuestas y pignadas.
Las hojas primarias de plntulas pueden ser
simples, pero una planta madura contiene hojas
compuestas en par y alternadas.
Las hojas se ordenan en forma alterna a lo largo
del tallo, dando un aspecto frondoso al follaje,
especialmente en las variedades mejoradas.
Descripcin de la planta de papa
Raiz. La raz puede desarrollarse a partir de una
semilla o de un tubrculo. Cuando crece a partir de
una semilla, forma una delicada raz axonomorfa,
con ramificaciones laterales. Cuando crece de
tubrculos, forma races adventicias, primero en la
base de cada brote y luego encima de los nudos en
la parte subterrnea de cada tallo. El sistema
radical vara de delicado y superficial a fibroso y
profundo
Tallo. Las plantas provenientes de semilla
verdadera tienen un tallo principal, mientras que
las provenientes de tubrculos-semillas pueden
producir varios tallos.
El tallo es generalmente de color verde y algunas
veces puede ser de color marrn-rojizo o morado.
Las yemas que se forman en el tallo a la altura
de las axilas de las hojas pueden desarrollarse para
llegar a formar tallos laterales, estolones,
inflorescencias y, a veces, tubrculos areos.
Los estolones son tallos laterales que crecen
horizontalmente por debajo del suelo a partir de
yemas de la parte subterrnea de los tallos. Los
estolones pueden formar tubrculos mediante un
agrandamiento de su extremo terminal.
6
Sin embargo, no todos los estolones llegan a
formar tubrculos; un estoln no cubierto con
suelo, puede llegar a ser un tallo vertical con follaje
normal.
Hojas. Las hojas estn distribuidas en espiral
sobre el tallo. Normalmente, las hojas son
compuestas, es decir, tienen un raquis central y
varios fololos. Cada raquis puede llevar varios
pares de fololos laterales primarios y un fololo
terminal.
Flor. El pednculo de la inflorescencia est
dividido generalmente en dos ramas, cada una de
las cuales se subdivide en otras dos ramas. Las
flores de papa son bisexuales y poseen las cuatro
partes esenciales de una flor (cliz, corola,
estambres y pistilo). Las flores pueden ser de color
blanco, crema, azul claro, rojo o morado en
diferentes tonos e intensidades. Las flores pueden
llegar a formar frutos llamados baya, que contienen
numerosas semillas conocidas como la semilla
sexual de la papa (Huamn, 1986).
Tubrculos. Morfolgicamente los tubrculos son
tallos modificados y constituyen los principales
rganos de almacenamiento de la planta de papa.
Un tubrculo tiene dos extremos: el basal o
extremo ligado al estoln, que se llama taln, y el
extremo opuesto, llamado apical o distal.
Los ojos del tubrculo de papa se distribuyen
sobre la superficie del mismo en espiral. Los ojos
corresponden morfolgicamente a los nudos de los
tallos, las cejas representan las hojas y las yemas
del ojo representan las yemas axilares.
Los brotes crecen de las yemas que se
encuentran en los ojos del tubrculo. El brote es
una caracterstica varietal importante. La forma y
color del brote es para la papa lo que la huella
digital es en los humanos.
7
 Los brotes pueden ser blancos, parcialmente
coloreados en la base o el pice, o casi totalmente
coloreados. En la mayora de las variedades
comerciales la forma del tubrculo vara entre
redonda, ovalada y oblonga.
La piel del tubrculo o peridermo, es una capa
delgada protectora del exterior del tubrculo; su
color vara entre blanco, crema, caf, amarillo,
naranja, rojo o morado.
En algunas variedades la piel de los tubrculos
tiene dos colores; generalmente es suave y en
algunas variedades es rugosa o spera y, al frotarla
cuando el tubrculo no ha madurado, se desprende
fcilmente. Por eso, el dao de la piel es frecuente
cuando se cosechan tubrculos antes de su
madurez. En la superficie de la piel se encuentran
distribuidas las lenticelas (poros respiratorios) por
los cuales se efecta el intercambio de gases entre
el tubrculo y el ambiente. La pulpa constituye la
carne del tubrculo la cual, en variedades
comerciales, es normalmente de color blanco,
crema o amarillo plido; algunas variedades
andgenas presentan dos colores.
El crecimiento y desarrollo de las plantas
pueden dividirse en cuatro fases:
I. Fase de emergencia. Perodo entre la siembra y
la aparicin de los brotes en el surco.
II. Fase vegetativa. Perodo entre la emergencia y
la iniciacin de la tuberizacin.
III. Fase de tuberizacin. Perodo entre el inicio
de la formacin de tubrculos y el mximo
desarrollo del follaje. En muchas variedades
introducidas este perodo coincide con el inicio
y la finalizacin de la floracin. Esta relacin no
est bien establecida para la mayora de los
cultivares mexicanos.
IV. Fase de madurez. Perodo entre el mximo
desarrollo del follaje y la senescencia total.
8
Tipos de reproduccin
La papa se puede propagar por medio de la
reproduccin sexual (semilla botnica) y asexual
(tubrculo). La sanidad fisiolgica de los
tubrculos-semilla est entre los factores ms
importantes que influyen sobre la produccin.
En los sistemas de produccin convencional, los
tubrculos se utilizan generalmente para la
multiplicacin y produccin. Este mtodo tiene
algunas desventajas como un ndice reducido de
multiplicacin y un alto riesgo de adquirir
enfermedades (fungosas, virales y bacterianas).
Algunas plagas y agentes causales de
enfermedades pueden ser transmitidos y
diseminados por los tubrculos, causando as la
degeneracin de los tubrculos-semilla. La papa es
propensa a la degeneracin de la semilla porque la
propagacin continua disminuye la calidad de los
tubrculos-semilla, causado por un aumento en las
enfermedades, entre las cuales las provocadas por
virus son las ms frecuentes. Algunas de las
ventajas de utilizar tubrculos-semilla para la
multiplicacin de la papa son: la produccin de
plantas sanas, la uniformidad de los tubrculos y el
crecimiento vegetativo vigoroso.
Existen tcnicas de multiplicacin desarrolladas
recientemente. Una de stas es la produccin in
vitro o cultivo de tejidos. Esta tcnica es muy
flexible y produce una tasa de multiplicacin alta,
la cual proporciona vitroplntulas libres de
enfermedades (Roca et al., 1978; Wang y Hu, 1982;
Jones, 1988; Beukema y Van der Zaag, 1990).
Sustento legal para la micropropagacin de
papa
El proceso de produccin de vitroplantas se
inicia en laboratorio, en donde se multiplica de
9
manera intensiva el genotipo o variedad comercial LIMPIEZA
de inters. Cultivo de meristemos y
Termoterapia

Los laboratorios comerciales dedicados a esta Diseccin

actividad deben estar dados de alta, contar con su meristemo Prueba de Elisa

registro fitosanitario, cumplir con la Norma Oficial

Mexicana NOM-041-FITO-2002 y la Ley Federal de BANCO DE GERMOPLASMA
Almacenamiento

Produccin y Certificacin de Semillas SAGARPA-

SNICS. Material libre de virus

I. Produccin de material prenuclear

Obtencin de vitroplntulas libres de virus
En el laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales
del CESAL as como en otros laboratorios MULTIPLICACION
comerciales el mtodo que tradicionalmente se ha
utilizado para obtener vitroplntulas libres de virus PRODUCCION
es mediante la termoterapia, despunte apical y MICROTUBERCULOS

cultivo de pices meristemticos establecidos in

vitro.
Prueba de Elisa
a) Termoterapia
Para la erradicacin de uno o ms virus, se
requiere someter el material vegetativo ya sea
plantas de maceta o vitroplntulas a un perodo de
calor (Escalante, 1989). En el primer caso, se
establecen minitubrculos de papa del genotipo de ACLIMATACION

inters en macetas, luego que las plantas alcanzan

entre 15 a 20 cm se someten a un tratamiento con
calor considerando temperaturas de incubacin
relativamente altas ( 28 hasta 32C) por un
perodo de 3 a 4 semanas (Figura 1). PRODUCCIN SEMILLA PREBASICA

Para promover el desarrollo vegetativo del

PRODUCCIN
vstago, inactivar la multiplicacin del virus y INVERNADERO
camas 10 x 10 cm SEMILLA BASICA EN CAMPO

mantener el metabolismo de la planta, se

recomienda que en la termoterapia tambin se
considere el fotoperodo y humedad relativa, Figura 1. Esquema de la trayectoria de un clon y/o variedad de papa
debido a que la interaccin de dichos factores para la produccin de minitubrculo-semilla libre de virus.
influye en la sobrevivencia del material (Escalante,
1989).
10 11
 Escalante (1989) y Lpez-Delgado y Zavala
(1988) coinciden en sealar que la termoterapia es
el mtodo ms utilizado para obtener plantas libres
de virus, agregando que algunos virus son ms
estables que otros por lo que su erradicacin se
vuelve un problema, debido a que algunos
genotipos necesitan perodos ms largos de
termoterapia que otros o viceversa.
b) Cultivo de meristemos
Morell y Martn (1952) demostraron que el
tejido meristemtico es capaz de desarrollar
vitroplntulas completas a partir de clulas
aisladas. El meristemo es un tejido no diferenciado
que se divide rpidamente y constituye el punto
activo de la yema vegetal. Esta es una estructura
genticamente estable en donde el nivel de
infeccin viral tiende a ser reducido, debido a que
los primordios foliares no estn en contacto con los
haces vasculares del tallo (tejido ms diferenciado),
originando que la concentracin del virus sea
reducida.
Aunque el cultivo de meristemos se conoce
desde 1955, la tcnica ha sido modificada en papa
por Kartha (1981) y Debergh (1991). Se ha
encontrado que el nmero de plntulas libres de
virus tiene una relacin inversa con el tamao del
meristemo, esto significa que mientras ms grande
sea el meristemo las posibilidades de su
establecimiento in vitro aumentan pero se
disminuye la probabilidad de saneamiento.
Al respecto Kartha (1981) encontr menor
eficiencia (10%) en el saneamiento al establecer
primordios grandes (0.6-0.8 mm), mientras que
Debergh (1991) obtuvo mayor eficiencia (100%)
cuando estableci domos ms pequeos (0.3-0.5
mm).
12
El aislamiento del meristemo y su
establecimiento in vitro son procesos delicados que
requieren mucha prctica. Bajo el esquema
combinado de termoterapia y cultivo de
meristemos, en algunos casos la etiolacin puede
aumentar el margen de seguridad en la obtencin
de plantas sanas.
Despus de la termoterapia, los tallos de las
plantas se fraccionan y disectan extrayendo el
meristemo apical, con uno o dos primordios
foliares, los cuales se transfieren a un medio de
cultivo selectivo hacindolos crecer.
Al desarrollarse forman una planta nueva, de la
cual se extrae una muestra para realizar la prueba
de ELISA (Ensayos Inmunoabsorbentes de Enzimas
Ligadas) y determinar la eficiencia de la limpieza.
Las plantas seronegativas (libres de virus)
continan su fase de multiplicacin hasta obtener el
volumen deseado (Figura 1).
Cuando se tiene un inters particular sobre un
clon o variedad, las yemas tambin pueden tomarse
de plantas en campo.
c) Pruebas serolgicas para deteccin de virus
En el laboratorio se lleva a cabo la termoterapia,
diseccin y cultivo de meristemos, y posteriormente
la prueba de ELISA seleccionando aquellas
vitroplntulas que hayan resultados seronegativas.
Con esta prueba serolgica se determina el
estado fitosanitario del material vegetal. En papa,
se han realizado pruebas serolgicas, las cuales se
basan en la reaccin antgeno-anticuerpo (Lpez-
Delgado et al., 1985).
Entre las ms comunes estn: a) doble difusin
de gel; b) hibridacin molecular; c) micro
precipitacin; d) ltex y e) ELISA. Sin embargo, en
aos recientes esta ltima ha sido la ms utilizada
debido a que requiere menor cantidad de antisuero
13
muestras en menor tiempo y es ms sensible que la
que las otras, permite analizar un mayor nmero de
prueba de ltex (Salazar, 1998; Lpez-Delgado
Zavala, 1988).
En la prueba serolgica de ELISA pueden
utilizarse plntulas de laboratorio y/o de
invernadero, su fundamento se basa en el uso de
enzimas conjugadas a molculas de anticuerpo
(gamma-globulina) para detectar partculas de virus
provenientes de extractos de savia de la planta. En
papa los virus que comnmente se detectan en la
prueba de ELISA son: el PVM, PVS, PVY, PVX y
PLRV (DOF, 2003).
Actualmente existen antisueros comerciales para
virus especficos por lo que esta prueba es igual de
efectiva que los ensayos electroforticos,
hibridacin molecular y microscopa electrnica
(Hooker, 1981; Escalante, 1989).
En caso que el material resulte seropositivo se
aplica termoterapia y/o quimioterapia para
eliminar los patgenos (Figura 1). Despus de la
termoterapia se vuelve a realizar la misma prueba
serolgica con el fin de certificar la limpieza, si el
material resulta seronegativo se procede a su
multiplicacin (Salazar, 1983; Lpez-Delgado y
Zavala 1988). Esta prueba es de mucha importancia
en el sistema laboratorio-invernadero, dentro de la
etapa de multiplicacin, en la produccin de
plantas in vitro y en la produccin de
minitubrculos-semilla prebsica cosechada en
invernadero. Tambin se recomienda su realizacin
en la produccin de tubrculos-semilla bsica
obtenida en campo (Salazar, 1998).
Micropropagacin de papa
La micropropagacin de plantas forma parte de
la biotecnologa moderna, en la cual se utiliza el
cultivo de tejidos vegetales para multiplicar rpida
y masivamente una especie de inters (Figura 1).
14
Mediante esta tcnica se pueden producir
vitroplntulas a partir de pequeos segmentos
(yemas, tallos, hojas) que crecen dentro de un tubo
o frasco en un medio asptico (libre de
microorganismos). El cultivo de tejidos permite
manipular no slo los mecanismos de
diferenciacin celular, sino tambin los factores
fsicos y qumicos que los regulan, por lo que en
papa las tcnicas de micropropagacin pueden
utilizarse para producir en un tiempo corto una
gran cantidad de vitroplntulas y microtubrculos
in vitro, ambos con calidad fitosanitaria.
Produccin de plntulas in vitro
La micropropagacin es el mtodo ms rpido
para producir plntulas manteniendo su calidad
fitosanitaria. La tcnica del cultivo de tejidos
vegetales ha solucionado algunos de los problemas
asociados al sistema convencional de produccin de
tubrculos-semilla, como son la obtencin de una
gran cantidad de vitroplntulas sin virus (Khurana
et al., 2003). Tambin es posible obtener un ndice
ms alto de multiplicacin, material sano,
almacenaje y transporte ms conveniente y
menores espacios durante la multiplicacin.
Adems, la multiplicacin se puede hacer en todo el
ao (Wang y Hu, 1982; Marinus, 1983; Struik y
Wiersema, 1999).
El trmino "cultivo in vitro" se define como el
cultivo de plantas o de alguna de sus partes
(semillas, embriones u rganos superiores) dentro
de recipientes de vidrio en condiciones estriles de
ambiente controlado (Pierik, 1987).
El cultivo in vitro de plantas superiores es una
tcnica que exige un control absoluto del ambiente,
tanto fsico como qumico, en el que se sita al
explante; por lo tanto, los principales factores no
biolgicos que afectarn al desarrollo del cultivo in
vitro son: 1) La composicin del medio y el pH
15
(ambiente qumico) y 2) la temperatura, luz y Cuadro 1. Componentes de los medios de cultivo para la
fotoperodo a los cuales sern sometidos los produccin de vitroplntulas de papa (Solanum
tuberosum).
explantes (ambiente fsico).
Requerimientos
El cultivo de tejidos permite manipular los Peso
para 1 L de medio
mecanismos de diferenciacin celular, as como los Composicin molecular
(g) Milimoles Micromoles
factores fsicos y qumicos que los regulan, por lo (mM) (M)
que en papa las tcnicas de micropropagacin Macroelementos
pueden utilizarse para producir en un tiempo corto NH4NO3 80.40 20.60
no slo una gran cantidad de vitroplntulas, sino KNO3 101.11 18.80
tambin microtubrculos in vitro, ambos con MgSO4.7H20 246.48 1.50
calidad fitosanitaria. KH2PO4 136.09 1.25
Para la multiplicacin in vitro se utilizan Ca(NO3)2 236.15 3.00
segmentos de tallo con al menos una yema axilar Microelementos
como explantes (Figura 1). IK 166.01 1.00
La propagacin de ndulos puede hacerse en H3BO3 61.83 1.00
tubos, frascos, envases o magentas, variando el MnSO4.4H2O 228.00 0.10
nmero de explantes que se establecen, siendo de 4, ZnSO4.7H2O 287.54 0.30
10 y 25, respectivamente. Na2MoO4.2H2O 241.95 0.01
CuS04.5H2O 249.68 0.001
Los explantes, cualquiera que sea su naturaleza,
requieren de un medio que suministre un balance CoCl.6H2O 239.93 0.001
nutricional adecuado, para que a corto plazo se Quelatos
obtenga un crecimiento ptimo (Toledo et al., 1998). Na2EDTA 372.24 1.00
FeSO4.7H2O 278.28 0.90
Existen diferentes medios de cultivo, por lo que
Vitaminas
su seleccin depende del objetivo que se persiga, ya
Acido Nicotnico 123.10 4.06
sea establecimiento in vitro, multiplicacin, cultivo
de meristemos, almacenamiento, Piridoxina 205.60 2.43
microtuberizacin, etc. El medio que ms se ha Tiamina 337.30 0.29
utilizado para la produccin de plntulas in vitro de Myoinositol 180.20 5.54
papa es el propuesto por Murashige y Skoog (1962), Aminocidos
el cual es adicionado con diferentes dosis de Glicina 75.07 0.26
fitohormonas, vitaminas y ajustadores osmticos, Acido 238.30 0.49
dependiendo los intereses establecidos. P i Medio de Cultivo
Sacarosa 342.30 87.64
Medio nutritivo base
Agar (6.0 g/L)
Existen diferentes medios de cultivo, por lo que
su seleccin depende del objetivo que se persiga, ya
sea para el establecimiento in vitro o multiplicacin. En otros laboratorios comerciales y en el del
CESAL el medio nutritivo base que se ha utilizado
16
17
para la produccin de plntulas in vitro de papa es minutos en el autoclave, considerando una
el MS (Murashige y Skoog, 1962), mismo que se temperatura de 120 C y 4 libras de presin
complementa con diferentes dosis de fitohormonas, (Figuras 2g y 2h).
vitaminas y ajustadores osmticos (Cuadro 1).
10) Ya esterilizados, los recipientes se colocan en
Los explantes requieren de un medio que
un lugar limpio.
suministre un balance nutricional adecuado para
que a corto plazo se obtenga un crecimiento a b
ptimo.
Procedimiento para la elaboracin del medio
nutritivo
A continuacin se describe el procedimiento para
la elaboracin del medio nutritivo.
1) En un vaso de precipitado aadir la cuarta
parte de agua destilada de la cantidad que se
c d
desea preparar de medio (Figuras 2a y 2b).
2) Disolver la cantidad de sacarosa.
3) Aadir el volumen correcto de cada una de las
soluciones de microelementos y
macroelementos (Figura 2c).
4) Aadir el volumen correcto de quelatos,
vitaminas y aminocidos (Figura d). e f
5) Aadir las fitohormonas si el medio nutritivo
lo requiere.
6) Mezclar estos componentes y aforar con agua
destilada a la cantidad que se desea preparar
del medio (Figura 2e).
7) Introducir el electrodo del potencimetro en el
medio, esperar que el aparato tome la lectura y g h
ajustar el pH a 5.7. Para bajarlo agregar
algunas gotas de HCl 1N y para subirlo aplicar
algunas gotas de NaOH (Figura 2f).
8) Colocar el medio en una parrilla para calentar
y agregar el agar, mezclar hasta diluirlo, antes
de la ebullicin.
Figura 2. Elaboracin del medio nutritivo para la multiplicacin de papa
9) Vaciar el medio en los recipientes, ya sean (Solanum tuberosum) en el Laboratorio de Cultivo de Tejidos
frascos, tubos o envases y esterilizar por 20 Vegetales del Campo Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP.

18 19
Vida del medio Los explantes requieren de un medio que
suministre un balance nutricional adecuado, para
El medio de cultivo se puede almacenar a
que a corto plazo se obtenga un crecimiento
temperatura ambiente por una semana. Si se
ptimo, stos se cultivan en envases de
requiere aumentar el tiempo de almacenamiento el
polipropileno, estableciendo un total de 25
medio de cultivo tendr que refrigerarse.
explantes por envase con 50 mL de medio. El medio
Sin embargo, de preferencia se debe usar medio de multiplicacin que se utiliza para la produccin
fresco, siempre que sea posible. intensiva de plntulas in vitro de papa es el de
Murashige y Skoog (1962), el cual es adicionado
Etapa 1. Seleccin de materiales donantes con diferentes dosis de vitaminas y ajustadores
El material vegetativo puede obtenerse de un osmticos de acuerdo a lo descrito en el cuadro 1.
banco de germoplasma in vitro, seleccionarse de
Dependiendo del genotipo, los subcultivos en
minitubrculos-semilla sanos o de campo.
este medio semislido se realizan despus de un
En el Laboratorio de Cultivo de Tejidos Vegetales perodo de incubacin de 4 a 6 semanas para
del Campo Experimental Saltillo CIRNE-INIFAP se obtener vitroplantas (Figura 3).
han utilizado las variedades; Atlantic, Gigant,
Mondial, Alpha, Felsina, Vivaldi y Caesar adems
de clones del INIFAP provenientes de genotipos
sobresalientes para la zona de Coahuila y Nuevo
Len y otros provenientes del Centro Internacional
de la Papa (CIP).
Todo el material vegetativo utilizado ha sido
sometido a pruebas de indexacin corroborando su
calidad fitosanitaria, realizando las pruebas de
ELISA correspondientes de acuerdo a lo sealado
anteriormente. Despus de obtener plntulas
seronegativas in vitro se procede a su multiplicacin
intensiva para producir material prenuclear.
Etapa 2. Multiplicacin de explantes
Produccin de material prenuclear (vitroplantas)
La multiplicacin in vitro del material vegetativo
de inters se realiza obteniendo explantes de la
planta donadora a partir de cortes transversales.
Figura 3. Obtencin de explantes de papa (Solamun tuberosum) para la
Los segmentos de tallo con yema axilar o apical son multiplicacin intensiva de vitroplantas en el Laboratorio de Cultivo
de 1 cm de longitud, los cuales son sembrados en de Tejidos Vegetales del Campo Experimental Saltillo CIRNE-
INIFAP.
contenedores con medio de multiplicacin
semislido, como se describi en la Figura 1.
20 21
 Las vitroplantas generadas sirven como fuente
donadora de explantes, obteniendo de cada
subcultivo de 4 hasta 8 segmentos de tallo ms
yema por vitroplanta, mismos que pueden
utilizarse como material prenuclear para la
produccin de minituberculos en invernadero o
utilizarse para la produccin de microtubrculos in
vitro.
En esta etapa se vuelve a corroborar el estado
fitosanitario de las vitroplantas producidas; el
material que resulta seronegativo se sigue
multiplicando peridicamente en un medio de
cultivo fresco, realizando estas operaciones
aspticamente. Se recomienda que en esta etapa se
lleve un registro de la produccin semanal de cada
genotipo y de la produccin que genera cada
persona dedicada a la multiplicacin, para
determinar el volumen de produccin en funcin
del tiempo y de este modo programar y coordinar
las labores de la siguiente etapa en invernadero.
Etapa 3. Enraizamiento
3.1) Enraizamiento in vitro
Es importante que el enraizamiento de las
vitroplantas sea inducido dentro del medio de
cultivo, pues de ello depende en gran medida que
se obtengan altas tasas de viabilidad en la siguiente
etapa. En papa no se requieren reguladores de
crecimiento para inducir este proceso; pero s
condiciones mixotrficas que lo favorezcan, como
regular la concentracin de sacarosa del medio en
el ltimo subcultivo y controlar el fotoperodo. Las
races formadas en esta etapa no son 100%
funcionales para la asimilacin de nutrientes, pero
s aseguran un buen sostenimiento en el sustrato
cuando se establecen en invernadero.
22
Las vitroplantas listas para el invernadero se
extraen de sus contenedores, se lavan con
abundante agua para eliminar los restos del medio
de cultivo del sistema radicular y evitar su
contaminacin en el sustrato. Se acomodan en
papel hmedo y se llevan al invernadero para su
trasplante (Figura 4).
Figura 4. Enraizamiento in vitro de las vitroplantas de papa (Solamun
tuberosum.) Los factores a controlar en esta etapa son: el medio de
crecimiento, temperatura, luz y fotoperodo. Laboratorio de Cultivo
de Tejidos Vegetales del Campo Experimental Saltillo CIRNE-
INIFAP.
3.2) Enraizamiento in vivo
En este caso, las vitroplantas se transfieren a
suelo utilizando un sustrato limpio y esterilizado
que se coloca en contenedores de plstico
termoestables acondicionados con un domo.
Dependiendo del tamao del contenedor que se
utilice se establecen entre 25 hasta 60
plantas/contenedor. Como sustrato para el
enraizamiento se puede utilizar peat moss
comercial. Con este mtodo se requiere que las
vitroplantas tengan ms de tres yemas axilares y
que las hojas estn bien desarrolladas, esto, para
que la planta a travs de la fotosntesis obtenga los
23
fotosintatos y energa necesaria para enraizar y
desarrollarse.
Los contenedores con las plantas se llevan al
invernadero para su aclimatacin. En este proceso
es necesario cuidar los factores que controlan el
ambiente de crecimiento, como la temperatura del
invernadero y aplicar riego por nebulizacin
peridicamente con una solucin nutritiva.
Despus de tres semanas las plantas estn listan
para su establecimiento en las camas de
invernadero (Figura 5).
Figura 5. Enraizamiento in vivo de vitroplantas de papa (Solanum tuberosum) en
sustrato estril.
Etapa 4. Trasplante al invernadero
Aclimatacin. Dado que las plntulas obtenidas in
vitro carecen de adaptaciones morfolgicas que les
permitan el traspaso directo a las condiciones
exteriores, stas deben ser transplantadas
manteniendo un control de la temperatura,
humedad relativa e intensidad lumnica en
invernadero.
24
Vitroplantas sanas enraizadas in vitro o in vivo
que presenten ms de 4 nudos cada una se pueden
transplantar a suelo. Al momento que se extraen de
sus contenedores, ambos tipos de plntulas estn
poco adaptadas para crecer en un invernadero, ya
que ambas han crecido en ambientes con una
elevada humedad relativa, por lo que sus estomas
no responden fcilmente al descenso de la
humedad y son susceptibles a la desecacin al
momento del trasplante.
Esto debido a la falta de una cutcula cerosa bien
desarrollada, que es necesaria para evitar la
prdida de agua.
Independientemente del tipo de plantas
utilizadas, stas requieren aclimatarse en
invernadero por un periodo de 2 a 3 semanas en
donde se disminuya progresivamente la humedad
relativa e incremente progresivamente la intensidad
de luz.
Esto se logra colocando una cubierta de Agribn
en la cama del invernadero. Despus de este
perodo se retira el agribn y se levanta el sistema
de riego por microaspersin, para continuar con el
ciclo normal del cultivo.
Aplicando este procedimiento la sobrevivencia
de las plantas al trasplante es alta; sin embargo, el
proceso es delicado y requiere el uso intensivo de
mano de obra.
Produccin de microtubrculos de papa
(prenuclear)
Los microtubrculos representan otra forma de
producir material prenuclear en laboratorio y se
utilizan como fuente de material vegetativo para la
produccin como minitubrculos-semilla prebsica
de papa en invernadero.
25
 Estos son comnmente cosechados aspticamente,
y al envasarse son tratados con fungicidas, secados
y suberizados en la obscuridad a 20C. Este
material se almacena en refrigeradores a 4-5C para
cumplir con sus requerimientos de dormancia.
Por el tamao tan pequeo que caracteriza a este
material vegetativo es ms fcil de manejar en
invernadero; sin embargo, se requiere que los
microtubrculos estn brotados.
Los microtuberculos se producen a partir de
vitroplantas que se subcultivan en un medio base
inductor de tuberizacin adicionado con 5 mg/l
de BAP (6-Bencilaminopurina) y 500 mg/l de CCC
(chlorocholine chloride) incubando los ndulos en
oscuridad por cuatro semanas para obtener de 3 a 5
microtubrculos/ frasco.
II. Produccin de minitubrculos-semilla
Sistemas de produccin de semilla prebsica en
otros pases.
En la Estacin Experimental Sta. Catalina del
Instituto Nacional Autnomo de Investigaciones
Agropecuarias (INIAP), localizado en la ciudad de
Quito, Ecuador, se utilizaba como sistema
convencional para la produccin de mini-
tubrculos, camas de produccin bajo invernadero
con un sustrato a base de tierra negra, pomina y
humus, con fertilizacin slida y riego manual, con
una densidad de 16 vitroplntulas/m2 (arreglo
topolgico de 25 x 25 cm).
Posteriormente, pasaron a un sistema semi-
hidropnico, el cual consisti en colocar un
sustrato liviano en camas de produccin. El agua y
los nutrientes se suministraron por medio de un
sistema de riego por goteo y la densidad utilizada
cambi a 34 plantas/m2 (arreglo topolgico de 15 x
20 cm entre plantas). Actualmente, el INIAP
26
recomienda utilizar el arreglo topolgico de 15 x 15
cm entre plantas.
Sin embargo, no encontraron diferencias
significativas en cuanto a produccin frente al
sistema convencional, pero s se obtuvo un
incremento en la calidad sanitaria de la semilla. En
su sistema de produccin tambin utilizan plantas
in vitro producidas en laboratorio, libres de virus,
plagas y enfermedades, de diferentes variedades
(Paredes et al., 2004).
En la regin de Asia Tropical, se est utilizando
la tecnologa del cultivo de tejidos para producir
tubrculos-semilla de papa libre de virus. Han
observado incrementos en los rendimientos de este
cultivo utilizando esta tcnica (Nagib et al., 2003).
De igual manera sucede en la India, en donde
desde 1999 se encuentran aplicando el cultivo de
tejidos (Khan et al., 1999).
En todas las regiones del mundo en donde se
produce este cultivo, ya se encuentran utilizando
este tipo de tecnologas para erradicar las
enfermedades o virus.
Sistema de produccin de minitubrculo-
semilla de papa en invernaderos de la
regin papera del noreste de Mxico
El rendimiento de la regin papera de Coahuila
y Nuevo Len es de los ms altos del pas; sin
embargo, el beneficio econmico para el productor
se reduce, debido a que el costo por hectrea es alto
($100,000 ha-1, aproximadamente). Una parte
importante de este costo (25 al 35%) se destina a la
compra de semilla. Para satisfacer las necesidades
de este insumo se requieren de aproximadamente
42 mil toneladas de semilla, que es insuficiente,
importndose de otras regiones paperas del pas y
del extranjero.
27
 La falta de semilla sana de variedades mexicanas
adaptadas a la regin y tolerantes a enfermedades
obliga a los productores a introducir materiales de
dudosa calidad fitosanitaria, incrementando los
problemas fitopatolgicos en la regin.
Dada la apertura del Tratado de Libre Comercio
de Amrica del Norte (TLCAN), se requiere que la
zona papera del noreste cuente con semilla de
buena calidad que compita con la semilla que se
importa de Estados Unidos y Canad.
La produccin de semilla de papa bajo
condiciones de invernadero, puede realizarse a
partir de plntulas in vitro, microtubrculos
(material prenuclear) y minitubrculos, de los
cuales, de acuerdo a la Norma Oficial Mexicana
NOM-041-FITO-2002, se puede obtener de semilla
prebsica.
El material prenuclear se recomienda
establecerlo en camas de invernadero con ambiente
controlado para promover el desarrollo de las
plantas bajo condiciones de aislamiento.
Los requerimientos de este material vegetativo
dependen de la capacidad instalada del
invernadero, el cual puede estar compuesto por un
determinado nmero de naves, con un nmero
especfico de camas, las cuales conforman la
superficie til del invernadero.
En los cinco invernaderos comerciales de la
zona, el material prenuclear se establece
generalmente bajo el mismo diseo de plantacin o
arreglo topolgico, con una distancia de 10 x 10 cm
entre plantas e hileras. Considerando dicho
esquema de plantacin, en una cama de 42 m de
largo por 1.25 m de ancho se podrn establecer
5,100 plntulas y/o minitubrculos.
Por cada planta establecida se producirn en
promedio 3 minitubrculos de semilla prebsica de
28
papa. Este rendimiento fluctuar de acuerdo con el
genotipo a utilizar.
Metodologa para la produccin de semilla
prebsica
Con el propsito de producir semilla prebsica
de papa libre de agentes patgenos, a continuacin
se describe el proceso de produccin
minitubrculos a partir de material prenuclear.
Seleccin del sustrato
La eleccin del sustrato se basa en sus
caractersticas de retencin de humedad, aereacin
y permeabilidad, adems de asegurar su condicin
de asepsia.
Puede emplearse el peat moss indicado para la
germinacin de plntulas, o bien utilizar tierra de
bosque cribada y desinfectada para darle las
condiciones de aereacin y retencin de humedad
al suelo.
Esto, para promover un ptimo desarrollo y
crecimiento de la planta de papa. El sustrato estril
se extiende en las camas y se humedece al
momento del trasplante (Figura 6).
Figura 6. Camas en el interior del invernadero antes de ser rellenadas con el
sustrato de tierra de bosque cribada. Abajo: proceso de
desinfeccin de la tierra y vista del invernadero una vez rellenadas
las camas.
29
 Despus del trasplante las plantas se cubren con la conductividad elctrica de la solucin a un valor
una pelcula de Agribn a una altura de 20 a 30 cm de 2 milisiemens cm-1 (Figura 8).
del sustrato. Esto para asegurar el mayor Cuadro 2. Caractersticas de la solucin nutritiva universal
establecimiento de las plntulas en el invernadero, elaborada por Steiner y modificada para su
e incrementar las condiciones de humedad relativa aplicacin por etapas en la produccin de
para su rpido desarrollo (Figura 7). minitubrculos semilla de papa.
ETAPA (g/L)*
Elemento
1 2 3 4 5
Nitrgeno Ntrico 150 200 180 160 0
Nitrgeno Amoniacal 20 20 20 20 0
Fsforo (P) 50 50 40 40 0
Potasio (K) 200 220 250 273 273
Calcio (Ca) 180 180 180 180 0
Magnesio (Mg) 48 48 48 48 0
Azufre (S) 112 112 112 112 0
Hierro (Fe) 3.0 3.0 3.0 3.0 0
Manganeso (Mn) 1.0 1.0 1.0 1.0 0
Cobre (Cu) 0.20 0.20 0.20 0.20 0
Zinc (Zn) 0.40 0.40 0.40 0.40 0
Boro (B) 0.50 0.50 0.50 0.50 0
Molibdeno (Mo) 0.10 0.10 0.10 0.10 0

Figura 7. 1) Establecimiento de vitroplntulas; 2) Humedecimiento del *(g/L) = Gramos por litro; etapa 1= desarrollo de plntula, (10 das); etapa 2=
Agribn; 3) Detalle del establecimiento de las vitroplntulas por desarrollo de tallos (20 das); etapa 3= tuberizacin y floracin (30 das); etapa
debajo del Agribn; 4) Establecimiento completo de las 4= desarrollo de tubrculos (30 das); etapa 5= cosecha (10 das).
vitroplantulas.
Esta pelcula se humedece cada 30 minutos, Tambin deber de ajustarse a rangos de pH
aproximadamente durante 12 horas en el perodo entre 5 y 6 (Cuadro 2). Posteriormente se aplica al
diurno. Para evitar probables deficiencias de cultivo por medio del sistema de riego.
nutrientes, en la etapa temprana durante la primera
semana y cada tercer da se aplican 150 ppm de
nitrato de calcio (para favorecer el crecimiento de
la raz). En la segunda semana y cada tercer da se
aplican 150 ppm de nitrato de amonio ms 50 ppm
de sulfato de magnesio (para acelerar el
crecimiento de la planta); la aplicacin foliar de
estos fertilizantes se suspende cuando las plntulas
muestran un crecimiento vigoroso.
Figura 8. Equipo Xilema, con la disposicin de los elementos fertilizantes,
Solucin nutritiva cuando se tienen dos tanques para la concentracin de la
solucin nutritiva.
La solucin nutritiva a utilizar es de carcter Riegos
universal del tipo Steiner ajustndola a las
necesidades de nutricin del cultivo de la papa. La aplicacin de los riegos se realiza
considerando los registros de humedad de los
Esta solucin nutritiva se concentra 100 veces en tensimetros (Figura 9), mismos que se distribuyen
un tanque de 1000 litros de capacidad y se controla en toda la cama.
30 31
 El cundo regar est determinado por la tensin
de la humedad del suelo y el cuanto regar se
encuentra determinado por las condiciones de
evaporacin en el interior del invernadero
asociadas al factor de desarrollo del cultivo kc
(Cuadro 3).
Ejemplo para determinar el cuando y el cuanto
regar.
Determinacin del cuando regar:
Datos necesarios:
a) Lectura del tensimetro.
Procedimiento:
El cundo regar lo indica la lectura del
tensimetros en cada etapa de desarrollo del
Figura 9. Detalle de la utilizacin de tensimetros para el control de la cultivo. Es decir en este ejemplo el riego se va a
aplicacin del agua. aplicar cada vez que el tensimetro alcance la
Es posible utilizar otro tipo de sensores para fijar lectura de 20 cb.
la frecuencia del mismo. En cuanto a la cantidad de Determinacin del cuanto regar:
aplicacin (lmina de riego), sta se determina por Datos necesarios:
medio de la estimacin de la evapotranspiracin a) rea de las camas de siembra (18 m2).
del cultivo (existen varios mtodos). Un mtodo b) Etapa de desarrollo del cultivo (kc=0.8)
sencillo que es menos preciso, pero que es el ms c) Lectura de la evaporacin del agua (10 mm)
utilizado, es el de introducir un recipiente con agua Procedimiento:
en el interior del invernadero, en donde se puede 1. Determinar la lmina de riego por aplicar
medir los milmetros de agua evaporados y por (LR): LR = Ev x kc
medio de la multiplicacin por un coeficiente de Donde: Ev = Evap. del agua (mm) y kc = 0.8
desarrollo del cultivo y se estima la lmina de riego Por lo tanto, la lmina de riego por aplicar = 8
a aplicar (Cuadro 3), mm.
Cuadro 3. Tensiones de humedad para determinar la 2. Calculo del volumen de agua a aplicar:
frecuencia de aplicacin del riego (tensimetros a Volumen = rea de riego x lmina de riego
10 cm de profundidad) y coeficientes de desarrollo Volumen = 18 m2 x 0.008 m = 0.144 m3 = 144
del cultivo (Kc), segn Allen et al., (2006).
litros a aplicar.
Coeficiente de
Etapas de crecimiento Tensin de 3. Calculo del tiempo de riego:
desarrollo del
del cultivo humedad (cb) Datos necesarios:
cultivo (Kc)
Desarrollo de plntula. 10 0.5 -Gasto del gotero = 16.6 mililitros por minuto (1
Desarrollo de tallos. 20 0.8 litro por hora).
Tuberizacin y
- Nmero de cintillas x cama = 6
floracin. 25-30 1.15
Desarrollo de - Nmero de goteros por cintilla = 60
tubrculos. 30-40 0.95 - Nmero total de goteros por cama = 360.
5. Cosecha. 70 0.75
32 33
-Por lo tanto, el volumen de aplicacin de agua por Los fungicidas de contacto, protegen el rea
cama por minuto = 5.9 litros. foliar de las plantas. Lo que hacen es dejar una
Tiempo de Riego = volumen de agua a aplicar / molcula en la parte tratada de las hojas, que inhibe
volumen de aplicacin de agua por cama por tanto las fases tempranas de las esporas como su
minuto. Por lo tanto el Tiempo de Riego = 144/5.9 = inoculacin ingreso en los tejidos de la planta.
24 minutos aprox.
Control de plagas
Aunque el invernadero acta como barrera para
la entrada de plagas al mismo, se recomienda como
medida preventiva la aplicacin de productos
orgnicos tales como el Neem 25%, el cual es un
bioinsecticida orgnico efectivo en el control de
fidos, chupadores, trips, caros, araa roja,
gusanos y larvas en general, pulgones, chapulines,
pslidos, escama, larvas de mosquita blanca entre
otros (concentracin de ingrediente activo: aprox.
3% de azaridachtina). Se utilizan de 5 a 10 ml por
litro de agua para control, asegurando una buena Figura 10. Detalle de la sanidad lograda en el interior del invernadero.
cobertura en el haz y el envs de las hojas. El Ejemplo de este tipo de productos son el Manzate
Nemafin es un nematicida orgnico para todo tipo (en dosis de 2 a 4 kg/ha), y el Ridomil Gold Bravo
de suelo, aumenta la masa radicular y multiplica los (en dosis de 2.5 kg/ha), entre otros.
organismos benficos mejorando la disponibilidad Cuadro 4. Algunos productos recomendados para el control
de nutrientes. Se aplica en dosis de 20 ml por litro de hongos y bacterias (aplicacin semanal
de agua (su concentracin de ingrediente activo: preventiva).
Polfenos naturales 15%; Halgenos extrados de Producto
Ingrediente
Accin Control
algas 25% y cidos carboxlicos 10%). Los extractos Activo
Fungibac Extracto de Candelilla Gran
de ajo actan como repelentes de insectos y evitan Fungicida variedad de
Plus 29%; extracto de Limn
su entrada al invernadero (Phc bug balancer en (Dosis 1-2 29% y extracto de Bactericida hongos y
dosis de 2 litros/ha. Su ingrediente activo est litros/ha) Gobernadora 29%. bacterias
representado por: extracto acuoso de ajo 87% y Manzate
extracto acuoso de manzanilla y ruda 10%. 200 Mancozeb 80%
Fungicida Hongos Fito-
(Dosis 1-4 (contacto) patgenos
kg/ha)
Control de enfermedades Ridomil
Gold Phytophthora
Para evitar la proliferacin de enfermedades en 45g/kg Mefenoxam Fungicida
Bravo Spp;
el interior del invernadero, se recomienda la 76.5 PH
(Metalaxil-M) + 720
(sistemico) Alternaria
g/kg Clorotalonil.
aplicacin preventiva de fungicidas, bactericidas y (Dosis 1 solani
antivirus, con una frecuencia de aplicacin semanal, kg/ha)
para lograr la sanidad del cultivo (Figura 10).
Algunos productos especificados para tal fin se
presentan en el Cuadro 4.
35
34
Prcticas culturales Con base en esta preferencia se elaboraron las
siguientes clasificaciones (Cuadro 5).
Aporque. Cuando las plantas presenten una
altura aproximada de 15 cm se proceder al Cuadro 5. Clasificacin con base en el dimetro polar del
minitubrculo (clasificacin propia).
aporcado de las mismas, con el mismo sustrato u
otro que se tenga a la mano, slo hay que verificar Categoras Dimetro polar
que efectivamente haya sido esterilizado. (cm)
Esta prctica se realiza con el objetivo de Canicas < 1.0
favorecer la produccin de minitubrculos en la Chico 1 1.1 - 1.9
zona de aporcado y dar mayor sostn a la planta. Chico 2 2.0 - 2.4
Cosecha. Al llegar al tamao deseado de Medio 2.5 5.0
minitubrculos se procede a desecar el follaje de las Grande > 5.1
plantas (90 a 100 das despus del trasplante) y a
promover la suberizacin de la papa. Despus de Produccin de semilla prebsica de variedades
15 das de la prctica anterior se realiza la comerciales de papa bajo condiciones de
extraccin de minitubculos, de esta forma se invernadero
evitan daos en la piel (Figura 11). Durante los ciclos de produccin 2006 y 2007, se
establecieron algunas pruebas de produccin de
minitubrculos-semilla prebsica de variedades de
papa libres del sndrome punta morada.
Se encontr que la variedad Mondial produce 7
minitubrculos-semilla de la categora grande por
m2; siendo el nico material que produjo este tipo
de categora, bajo estas condiciones de produccin
(Cuadro 6).
La categora correspondiente al tamao del
minitubrculo-semilla para siembra, es la de
tamao medio y se busca la mayor produccin de
esta categora. Los materiales que produjeron
Figura 11. Tamao de minitubrculos preferidos para la siembra en campo,
de semilla prebsica de papa. mayores cantidades de minitubrculos-semilla de
papa son las variedades Mondial y Fabula, con
Clasificacin del tamao de minitubrculos aproximadamente una produccin de 115
Existen varias clasificaciones de minitubrculos, minitubrculos-semilla/m2 (Cuadro 6).
algunas de ndole nacional y otras de ndole Gigant produjo alrededor de 80
internacional. minitubrculos/m2 y Alpha produjo tan slo 50
minitubrculos/m2.
Por lo general el productor de semilla de papa
requiere de un tamao de minitubrculos de 2.5 a
5.0 cm de dimetro polar.
36 37
 La clasificacin correspondiente al tamao Chico De los tres tamaos de vitroplntulas evaluados
1 y 2, y Canicas, podrn ser utilizadas como se encontr que con las densidades de poblacin de
material reproductivo para el siguiente esquema de 400 y 200 vitroplntulas/m2 se produce 30% ms
produccin bajo invernadero. minitubrculos-semilla, en comparacin al resto de
Cuadro 6. Produccin de semilla bsica (minitubrculos por las densidades evaluadas, si se utilizan vitroplantas
m2) de variedades comerciales de papa bajo con alturas mayores de 7 cm (Cuadro 7).
condiciones de invernadero. Cuadro 7. Efecto de la altura de las vitroplntulas y las
Tamao (cm) diferentes densidades de poblacin en el nmero
Grande Medio Chico Canicas de minitubrculos-semilla obtenidos en la categora
Variedad (> 5.1) (2.5-5) (1.1-2.4) (< 1) media (2.5 a 5 cm de dimetro). Variedad Gigant.
Gigant 0 80 ab 209 a 67 a
Mondial 7 115 a 176 ab 47 a Altura de vitroplntulas
Alpha 1 50 b 61 c 4b 3 a 5 cm 5 a 7 cm > de 7 cm
Fabula 0 118 a 110 bc 28 a T1) 400 77 a 57 a 64 a
T2) 200 62 a 89 a 64 a
T3) 100 40 a 74 a 44 ab
Efecto de la densidad de poblacin y altura T4) 66 43 a 34 a 26 b
de la plntula, sobre la produccin de T5) 44 50 a 73 a 43 ab
minitubrculos-semilla de papa DMS0.05 35 60 19

El tamao de las vitroplntulas provenientes de Peso de minitubrculos

laboratorios comerciales es variable, presentando La densidad de poblacin de 200
una altura por vitroplanta que va desde 3 a 9 cm vitroplntulas/m2 producen un 32.74 % ms peso de
considerando tres categoras; vitroplantas chicas (3 minitubrculos-semilla en comparacin con la
a 5 cm de altura); medianas (5 a 7 cm) y grandes (> densidad de 100 vitroplntulas/m2, si se utilizan en
de 7 cm). invernadero vitroplantas con alturas mayores de 7
Para analizar el efecto del tamao de las cm (Cuadro 8).
vitroplantas y las diferentes densidades de Cuadro 8. Efecto de la altura de las vitroplntulas y las
poblacin que se utilizan el invernadero sobre la diferentes densidades de poblacin en el peso de
produccin de minitubrculos semilla, se realiz minitubrculos-semilla (g) obtenidos en la categora
una evaluacin utilizando los siguientes media (2.5 a 5 cm de dimetro). Variedad Gigant.
Vitroplntulas Altura de vitroplntulas
tratamientos: T1) 5 cm x 5 cm= 400 por m2 3 a 5 cm 5 a 7 cm > de 7 cm
vitroplntulas/m2; T2) 7 x 7 = 200; T3) 10 x 10 = 100; T1) 400 800 a 700 a 785 ab
T4) 10 x 15 = 66; y T5) 15 x 15 = 44 vitroplntulas/m2. T2) 200 820 a 1065 a 855 a
Nmero de minitubrculos T3) 100 545 a 895 a 575 abc
T4) 66 600 a 420 a 350 c
Considerando que los minitubrculos-semilla de T5) 44 585 a 840 a 520 bc
papa de inters para el productor son los de DMS0.05 286 689 283
tamao medio (2.5 a 5 cm de dimetro), a La variable tamao de la vitroplntula (altura)
continuacin se analiza la produccin de por si sola no tiene influencia sobre el nmero y
minitubrculos para esta categora. peso de los tubrculos-semilla, pero su desventaja
38 39
 principal est representada al momento del
trasplante, las pequeas (3 a 5 cm), necesitan
mayores cuidados para lograr su sobrevivencia
cuando se realiza el transplante al invernadero.
Efecto del tamao del microtubrculo,
sobre la produccin de minitubrculos-
semilla de papa
Para evaluar la factibilidad de utilizar
microtubrculos en los programas de reproduccin
de minitubrculos-semilla de papa, se utilizaron
microtubrculos de la variedad Mondial en dos
tamaos: grande (mayores de 5 mm de dimetro) y
mediano (< de 5 mm), establecindose en un solo
arreglo topolgico (10 x 10 cm = 100
microtubrculos/m2).
Los resultados mostraron que es factible
producir minitubrculos-semilla de papa, por
medio del establecimiento de los microtubrculos
en el invernadero.
El potencial de produccin para la variedad
Mondial encontrado fue de 120 minitubrculos/m2
de superficie, de la categora media, para ambos
tamaos de microtubrculos (Figura 12).
160
140
120
minitubrculos/m2
Estos resultados confirman la factibilidad del
empleo de microtubrculos como material
prenuclear para llevar a cabo la produccin de
minis bajo condiciones de invernadero.
La produccin de microtubrculos, representa
un gran potencial para los programas de semilla de
papa, por su fcil manipulacin debido a su tamao
y a su calidad sanitaria.
Adems, los microtubrculos pueden ser usados
como semillas para la conservacin del Banco de
Germoplasma (Borda et al. 2001), slo que en este
caso, se estaran utilizando los minitubrculos de
las clasificaciones chica y canicas libres de
patgenos para iniciar el programa de produccin
de semilla prebsica bajo condiciones de
invernadero.
Proceso de certificacin de tubrculos-
semilla bsica en campo
El proceso de certificacin de semilla depende de
la produccin en las etapas de laboratorio e
invernadero.
Del volumen total de minitubrculos producidos
como semilla prebsica durante un ciclo de
produccin en invernadero, slo el 40% es
considerado como semilla prebsica til y puede
establecerse en campo para producir semilla bsica
el ciclo siguiente.

100
Nmero de

80 Los minitubrculos, considerados como semilla

60 prebsica til, se incluyen bsicamente en dos
40 categoras diamtricas (minis y minis comercial),
20
que registran un dimetro superior a 2.5 cm. La
0
Grande Media Chico1 Chico 2 Canicas
semilla prebsica de las categoras inferiores puede
Categoras
seguirse incrementando en invernadero cuidando
su calidad fitosanitaria.
Mondial mediano Mondial grande

Figura 12. Produccin de minitubrculos/m2, mediante la siembra directa de

microtubrculos. Invernadero Campo Experimental Saltillo.
40 41
Requerimientos de semilla certificada por Por su tamao y peso, las categoras de
hectrea minitubrculos medianos y grandes producidos en
invernadero pueden ser utilizados en el programa
Se requieren aproximadamente 40,000 unidades de produccin de semilla bsica, registrada y
de semilla certificada por hectrea. certificada en campo.
Este volumen se genera considerando cuatro El lote de minitubrculos-semilla prebsica con
ciclos de produccin en campo, en donde la sus diferentes categoras puede ser movilizado si
produccin total de cada ciclo tiene que clasificarse cumple con la inspeccin y diagnstico de plagas
para obtener la materia prima til que se reglamentado y cuenta con el Certificado
establecer en el ciclo siguiente (Figura 13). Para Fitosanitario de Movilizacin.
esta produccin deben seleccionarse lugares fros y
sin problemas de enfermedades y paratrioza. Estos lotes pueden incrementarse en campo en
lugares de climas fros sin problemas de
SEMILLA SEMILLA SEMILLA enfermedades, insectos vectores y paratrioza en
PREBSICA
INVERNADERO
BSICA
CAMPO
REGISTRADA
(0)
donde el cultivo exhibe un mayor potencial
(Ciclo 1) (Ciclo 2) productivo.
Literatura Citada
SEMILLA SEMILLA SEMILLA
REGISTRADA REGISTRADA REGISTRADA Allen, R.G.; L. Pereira S.; D. Raes y M. Smith. 2006.
(II) (II) (I)
(Ciclo 5) (Ciclo 4) (Ciclo 3)
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SEMILLA
CERTIFICADA Beukema, H. P. and D.E. Van der Zaag. 1990.
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Borda, C.C.; J. Toledo; A. Golmirzaie and W. Roca. 2001.
Conclusiones Efecto de inductores de tuberizacin y
Uno de los factores limitantes de este cultivo es fotoperodo sobre la microtuberizacin de
la renovacin de la semilla, por lo que del avance Solanum tuberosum L. in vitro. Centro
tecnolgico que se tenga en la produccin de Internacional de la Papa (CIP). Lima, Per.
minitubrculos-semilla prebsica y tubrculos- http://redepapa.org/produccionred3.html (15 de
marzo de 2007).
semilla bsica depender la calidad de este cultivo.
Esto hace que el esquema de laboratorio- CONPAPA, 2009. Panorama de la produccin en
invernadero sea bsico para garantizar la calidad Mxico.
en la produccin de minitubrculos-semilla http://www.conpapa.org.mx/panoramexico.html
prebsica de papa, en donde se pueden producir (17 marzo de 2009)
minitubrculos de cinco categoras.

42 43
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Sede de Centro de Investigacin Regional

Centro Nacional de Investigacin Disciplinaria
Campo Experimental

46
 Edicin Campo Experimental Saltillo
Dr. Marco Antonio Arellano Garca
M. C. Eulalia Edith Villavicencio Gutirrez
M. C. Gustavo J. Lara Guajardo
Director de Coordinacin y Vinculacin en Coahuila
Revisin Tcnica
Ph. D. Jorge Elizondo Barrn
Dr. Oswaldo A. Rubio Covarrubias
Dr. Guillermo Fuentes Dvila Isaac Snchez Valdez
Jefe de Operacin
Comit Editorial del Campo Experimental Saltillo

Presidente
M. C. Francisco J. Contreras de la Re
Mara de Lourdes Briones Pea
Secretario Jefe Administrativo
M. C. Gustavo J. Lara Guajardo

Vocales
M. C. Oscar U. Martnez Burciaga Personal investigador
M. C: Luis Mario Torres Espinosa
M. C. Pedro Hernndez Rojas
M. C. Eulalia Edith Villavicencio Gutirrez
Fotografa Carlos Alejandro Berlanga Reyes
Dr. Marco Antonio Arellano Garca Antonio Cano Pineda
M. C. Eulalia Edith Villavicencio Gutirrez David Castillo Quiroz
Francisco J. Contreras de la Ree
Eutimio de Jess Cuellar Villarreal
Juan M. Covarrubias Ramrez
Cdigo INIFAP Sergio J. Garca Garza
MX-0-310702-37-03-15-09-41 Hernndez Rojas Pedro
Miriam P. Luevanos Escareo
Oscar Mares Arreola
Esta publicacin se termin de imprimir en el mes de febrero del 2010 Oscar Ulises Martnez Burciaga
en los talleres de: Emigdio Morales Olais
Victor Manuel Parga Torres
IMPRENTA SANCHEZ Carlos Ros Quiroz
Nueva Espaa 514 David Snchez Aspeytia
Fraccionamiento Urdiola
CP 25020, Saltillo Coah. Isaac Snchez Valdez
Tel. /fax (844) 4-14-61-51 Luis Mario Torres Espinoza
Jos Antonio Vzquez Ramos
Eulalia Edith Villavicencio Gutirrez
Mara del Rosario Ziga Estrada
Su tiraje consta de 250 ejemplares
Red de Investigacin
e Innovacin
Manejo Forestal Sustentable
Manejo Forestal Sustentable
Manejo Forestal Sustentable
Agua y Suelo
Pastizales y Recursos Forrajeros
Agua y Suelo
Hortalizas
Pastizales y Recursos Forrajeros
Transferencia de Tecnologa
Manejo Forestal Sustentable
Modelaje
Frutales Caducifolios
Hortalizas
Ovinos y Caprinos
Hortalizas
Frijol y otras Leguminosas
Manejo Forestal Sustentable
Frutales Caducifolios
Manejo Forestal Sustentable
Agua y Suelo