You are on page 1of 32

FAKULTAS

KEDOKTERAN DAN
ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS
TADULAKO

PANDUAN PRAKTIKUM
NEFROLOGI, UROLOGI, DAN CAIRAN TUBUH
LAINNYA

NAMA : AISYIAH SARAHDITA SAID


STAMBUK : N 101 14 026
KELOMPOK : 3

DEPARTEMEN PATOLOGI KLINIK


FAKULTAS KEDOKTERAN & ILMU KESEHATAN
UNIVERSITAS TADULAKO
2017

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 1
MATERI PRAKTIKUM

A. URINALISIS RUTIN
B. URIN DIPSTIK
C. UREA - METODE MONOXIME DIACETYL
D. KREATININ - METODE JAFFE'S
E. ASAM URAT FS *

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 2
TIM PENYUSUN

1. dr. Rosa Dwi Wahyuni, M.Kes, Sp.PK


2. dr. Puspitasari
3. dr. Budi Tulaka

A. URINALISIS RUTIN

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 3
Urinalisis rutin dilakukan pada pasien di rumah sakit atau klinik medis, dan untuk setiap
pemeriksaan fisik. Pengujian ini biasanya diulang setiap tahun atau sesering dokter yang
dianggap perlu. Ini adalah salah satu prosedur yang paling berguna yang tersedia untuk dokter
sebagai indikator kesehatan atau penyakit, terutama di bidang gangguan metabolisme dan ginjal.
Urinalisis sering dilakukan pada urin pasien pada saat masuk rumah sakit dan sering
diulang untuk mengevaluasi status kesehatan saat pasien dirawat di rumah sakit.

Pengamatan Dan Penentuan Pada Urinalisis Rutin:


1. Pemeriksaan visual
Penampilan
Warna
Volume

2. Pemeriksaan kimia
pH
Spesifik gravity
Protein

3. Pemeriksaan mikroskopis
Eritrosit
Leukosit
Sel epitel
Kristal
Cast
Ragi
Bakteri
Organisme lain

Jenis spesimen:
Konsentrasi urin bervariasi sepanjang periode 24 jam tergantung pada sebagian asupan
air pasien dan sebagian pada aktivitasnya.

Pengumpulan urin:

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 4
Spesimen pagi pertama;
Sebagian besar terkonsentrasi, kandung kemih diinkubasi.
Terbaik untuk; nitrit, protein, pemeriksaan mikroskopis.
Spesimen acak:
Paling nyaman, paling umum.
Baik untuk; screen kimia, pemeriksaan mikroskopis.
Spesimen kedua:
Spesimen pagi pertama dibuang; spesimen kedua dikumpulkan dan diuji.
Refleksi glukosa darah, membentuk elemen utuh.

1. Pemeriksaan Visual
Penampilan
Pengamatan pertama biasanya dilakukan pada spesimen urin adalah penampilannya.
Awalnya, hal ini dilakukan hampir tanpa berpikir hanya menangani spesimen. Namun, perhatian
ke rincian dan korelasi dengan pengalaman masa lalu dapat memberikan petunjuk berguna pada
adanya berbagai zat dalam spesimen urin. Misalnya, warna gelap menunjukkan banyak urin
pekat, warna yang pucat, urin encer, warna coklat kemerahan, darah, warna kehijauan,
jaundice. Spesimen keruh mungkin menyarankan urin alkali. Pengamat terlatih mampu
mendapatkan petunjuk penting tentang urin hanya dengan penampilannya.

Warna
Warna urin dipengaruhi oleh banyak unsur, termasuk konsentrasi darah, makanan,
pigmen, pewarna; urin normal biasanya berwarna kuning pucat dan terlihat bening. Intensitas
warna urin normal adalah tergantung pada konsentrasinya. Lemak atau warna kuning urin normal
adalah karena adanya pigmen kuning yang disebut urochrome.
Perubahan warna urin dalam keadaan penyakit banyak karena adanya pigmen yang
biasanya tidak muncul. Pigmen empedu dapat menghasilkan warna kuning ke kuning-coklat atau
kehijauan, sedangkan porfirin prodece warna coklat-merah gelap; hemoglobin memberikan
warna raddish-coklat. Melanin menyebabkan urin untuk berubah warna menjadi coklat-hitam.
Alcaptonuria diidentifikasi pada urin yang berubah menjadi coklat tua atau hitam. Urin
kemungkinan berubah warna setelah mengkonsumsi berbagai pewarna, makanan, dan obat.

Volume
Volume normal urin oleh orang dewasa dalam 24 jam rentang periode dari 750 hingga

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 5
2.000 ml. Volume rata-rata sekitar 1.500 ml. Jumlah selama periode manapun secara langsung
berhubungan dengan asupan cairan individu, suhu dan iklim dan jumlah keringat yang
terjadi. Jumlah pada anak lebih kecil daripada orang dewasa, tetapi total volume lebih besar
secara proporsional dengan ukuran tubuh mereka.

2. Pemeriksaan Kimia
pH
Ginjal dan paru-paru adalah dua organ utama yang mengatur keseimbangan asam-basa
tubuh. Paru-paru mengeluarkan karbon dioksida sedangkan ginjal mengatur ekskresi asam
nonvolatile yang dihasilkan oleh proses metabolisme normal dari jaringan. Keasaman urin
terutama disebabkan asam fosfat, dengan hanya sebagian kecil disumbangkan oleh asam organik
seperti piruvat, laktat, dan asam sitrat. Asam ini akan dikeluarkan melalui urin sebagai garam,
terutama natrium, kalium, kalsium, dan garam amonium. Ginjal mengatur ekskresi selektif dari
berbagai kation untuk memelihara keseimbangan asam-basa normal. Hal ini dicapai terutama
melalui reabsorpsi sejumlah variabel ion natrium oleh tubulus dan sekresi tubular ion hidrogen
dan amonium dalam pertukaran. Urin menjadi semakin asam karena jumlah natrium
dipertahankan oleh tubuh agar tidak meningkat.
Lakmus kertas, kertas nitrazine, atau kertas pH indikator lainnya dapat digunakan. Merah
= asam; Orange = netral; Kuning = basa.

Berat jenis
Berat jenis urin menunjukkan proporsi relatif total volume componen padat terlarut pada
spesimen. Ini mencerminkan tingkat relatif dari konsentrasi atau pengenceran
spesimen. Pengetahuan tentang berat jenis diperlukan dalam menafsirkan hasil tes yang paling
dilakukan di urinalisis rutin. Dalam kondisi yang tepat dan standar restriksi cairan pada
peningkatan asupan cairan pada gravitasi spesifik untuk mengukur kemampuan terkonsentrasi
dan pengenceran dari ginjal.
Filter busa dari urin. Jangan biarkan menyentuh sisi wadah urinometer. Baca graduations
pada uap pada bagian bawah meniskus. Encerkan urin, jika perlu, untuk mendapatkan cukup
untuk mengapungkan urinometer, dan kalikan dua angka terakhir dari pembacaan berat jenis
dengan faktor pengenceran. Jangan gunakan urin yang diencerkan untuk tes kimia.

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 6
Koreksi faktor zat terlarut dan padatan lain: berat jenis 0,001 dinaikkan jika yang
ditambahkan dalam jumlah yang dinyatakan per 1000 ml.
1) Urea, 3.6 Gm
2) Glukosa, 2.7 Gm
3) NaCl, 1.5 Gm
4) Protein, 3.9 Gm

Koreksi faktor suhu: Untuk mengoreksi suhu kamar, tambahkan 0,001 sampai berat jenis
untuk setiap 3C. Meningkat, kurangi 0,001 untuk setiap 3C di bawah suhu standarisasi
urinometer.
Nilai yang diharapkan: gravitasi spesifik urin bisa berkisar 1,003-1,030, tetapi biasanya
tetap antara 1,010 dan 1,025. Berat jenis tertinggi pada spesimen pagi pertama, yang biasanya
lebih besar dari 1,020. Berat jenis 1,025 atau meningkat dalam spesimen urin yang di acak
menunjukkan kemampuan terkonsentrasi normal.

Protein
Sekitar sepertiga dari protein urin normal adalah albumin. Albumin tampaknya identik
dengan albumin serum. Sebagian besar protein normal dalam urin adalah globulin. Hal ini
terutama terdiri dari alfa-1 globulin dan alfa-2 globulin, dengan jumlah yang lebih kecil globulin
beta dan gamma. Globulin urine memiliki berat molekul lebih rendah daripada menjadi globulin
serum yang sesuai, tetapi terkait erat dengan antigen. Jejak jumlah protein lain juga dapat
ditemukan dalam urin. Mucoprotein dengan berat molekul yang tinggi, protein Tamm-Horsfall,
terjadi pada urin normal dalam jumlah sampai dengan 2,5 mg / dl. Dalam nephrosis mungkin
terjadi pada konsentrasi yang lebih tinggi. Hal ini tidak ditemukan dalam plasma dan
diperkirakan berasal dari ginjal.

Tes kepanasan dan asam asetat.


Dapatkan tabung reaksi tiga perempat yang penuh dengan urin dan bagian atas tertutup
selama dua menit. Kekeruhan biasanya disebabkan fosfat atau karbonat, atau protein. Jika
kekeruhan memudar pada pengasaman urin dengan 3 sampai 5 tetes asam asetat 10%, kekeruhan
ini disebabkan fosfat atau karbonat, yang mungkin muncul dalam urin normal. Jejak samar
protein dapat diindikasikan hanya setelah penambahan asam.

Baca tindak lanjut:


- Tidak ada kekeruhan
Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 7
Nyaris tak terlihat keruh
+ Keadaan mulai keruh, namun tidak ada rincian dan tidak flokulasi
Kekeruhan Granular, tapi tidak flokulasi. Terlihat di atas, berkeruh namun
++
tidak opaque. Protein 0,1%
+++ Kekeruhan semakin padat, jelas flokulasi. Protein 0,2 hingga 0,3%
++++ Presipitasi sangat tebal, hampir solid. Protein 0.5% atau lebih

3. Pemeriksaan Mikroskopis
Prosedur pemeriksaan mikroskopis pada sedimen
1) Ukur volume urin tercampur yang akan disentrifugasi.
2) Standarisasi sentrifugasi (Waktu 5-10 Menit dan Kecepatan 2000 rpm)
3) Ukur volume sedimen yang tersisa di tabung
4) Mengukur jumlah sedimen yang ditempatkan pada slide
5) Gunakan coverslip standar
6) Melihat mikroskop perbesaran kuat
7) Menghitung dan mencatat elemen / ml urin

Pewarnaan sedimen
1) Tambahkan 2 tetes campuran pewarna untuk 1 tetes sedimen urin.
2) Campur secara menyeluruh dengan menjentikkan tabung dengan jari.
3) Tempatkan 1 tetes sedimen yang diwarna pada slide yang bersih, coverslip.

RBC
Sel darah merah biasanya terlihat pucat, bias cahaya, cakram cekung ganda bila dilihat di
bawah perbesaran kuat. Mereka tidak memiliki inti. Sel darah merah terlihat di segar, sedimen
tak bercacat yang berwarna pucat. Dalam urin yang tidak segar, hanya terlihat "sel
bayangan". Dalam urin pekat, sel-sel darah merah mungkin kecil dan crenated. Dan dalam urin
encer, tampak terlihat besar dan bengkak, dan kadang-kadang pecah untuk menghasilkan sel
"hantu". Sel darah merah harus dibedakan dari sel ragi, kristal urate, dan tetesan minyak. Sel ragi
biasanya bulat telur dan sering menunjukkan masih tahap awal. Amonium kristal biurate terjadi
dalam jumlah besar, dan ukurannya besar-besar. Mineral tetesan minyak juga sangat bervariasi
dalam ukuran dan lebih refractile dan bulat.
WBC

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 8
Jenis dominan muncul leukosit dalam urin adalah leukosit polimorfonuklear. Leukosit ini
memiliki inti tersegmentasi, biasanya granular, dan sekitar 1 1/2 kali lebih besar sel darah
merah. Neutrofil tertentu yang besar dari leukosit biasa, dan baik butiran sitoplasma
menunjukkan gerakan Brown. Sel-sel ini disebut motilitas granular atau sel "glitter". Awalnya
mereka dianggap pathognomic pielonefritis namun sekarang dianggap sebagai hasil dari urin
hipotonik. Dengan sel darah putih dalam sedimen, urin harus menunjukkan tes kimia positif
untuk esterase leukosit.

Sel epitel
Dengan adany sel epitel tubulus dari kandung kemih, dan uretra dapat diidentifikasi
dengan pencahayaan yang sesuai di bawah mikroskop dengan perbesaran lemah dan kuat.
Sel epitel tubular ginjal berbentuk bulat dan leukosit kemudian sedikit lebih
besar. Masing-masing berisi inti satu yang besar.
Sel epitel kandung kemih lebih besar daripada sel epitel tubular ginjal. Terdapat berbagai
bentuk dari datar, untuk kuboid, atau kolumnar.
Sel epitel skuamosa adalah sel datar besar dengan satu inti dan sitoplasma kecil yang
besar. Mayoritas sel ini kontaminan dari vagina atau vulva, tapi berasal dari uretra.

Kristal
Jenis dan kuantitas endapan kristal bervariasi dengan pH urin. Bahan amorf tidak terlalu
penting. Kristal dalam urin normal terbentuk sebagai spesimen yang membeku. Kristal urin yang
abnormal termasuk sistin, dan tirosin leusin, dan cholesterin.

Casts
Ini terbentuk di tubulus ginjal dan biasanya signifikan dari penyakit ginjal. Beberapa
varietas dapat diidentifikasi dan signifikansi mereka dinilai berdasarkan sumber kemungkinan
mereka. Hasil inflamasi glomerulus meningkatkan pembentukan sel darah merah di nefron;
tubulus terkait inflamasi atau penyakit degeneratif dapat menyebabkan produksi casts lemak,
waxy casts, dan dari hialin kurang signifikan dan casts granular ketika aliran urin berkurang.

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 9
Leukosit atau urin alkali. Mereka terlihat terbaik cahaya tereduksi. Jumlah casts per bidang daya
rendah.

Yeast
Sel yeast (Candida albicans) mungkin menunjukkan moniliasis urinari, terutama pada
pasien dengan diabetes mellitus. Sering, yeast muncul sebagai kontaminan dalam urin pasien
wanita dengan moniliasis vagina.

Bakteri
Urin normal tidak mengandung bakteri. Jika teknik yang tepat dan hati-hati digunakan
untuk memperoleh sampel, dan jika spesimen dilindungi dari kontaminan sebelum pemeriksaan,
adanya bakteri dalam jumlah yang signifikan dapat menunjukkan infeksi saluran kemih. Adanya
leukosit membantu untuk membedakan antara kontaminasi dan infeksi.

Organisme lain
Bentuk motil dari Trichomonas vaginalis secara morfologis mirip dengan T.hominis atau
telur dari Schistosoma haematobium dapat dilihat.

TUGAS PRAKTIKUM
1). Sebutkan jenis pewarnaan yang digunakan pada pemeriksaan urin mikroskopik!
2). Perubahan apa saja yang dapat terjadi pada urin saat kondisi dehidrasi ?

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 10
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 11
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

B. URIN DIPSTICK

Pendahuluan
Meskipun metode manual mudah beradaptasi dan tersedia untuk analisis urin, tidak
semua perantara tingkat laboratorium memiliki fasilitas untuk mempersiapkan reagen mereka
sendiri. Gula, albumin, urobilinogen dan bilirubin adalah empat zat biokimia yang diuji dalam
sampel urin acak. Meskipun uji kepanasan dan asam asetat mendeteksi adanya protein seperti
albumin, hanya uji semikuantitatif dapat benar-benar berguna. Dengan cara yang sama, uji
Benedict, yang umum digunakan, hanya mendeteksi substansi mengurangi total dan tidak
memprediksi jumlah glukosa yang ada. Teknologi state-of-the-art adalah penggunaan dipstick
untuk mendeteksi zat biokimia dalam cara yang nyaman. Banyak perusahaan manufaktur
sekarang menggunakan strip tes berdasarkan reaksi dasar kimia basah zat biokimia.

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 12
Penyimpanan strip yang benar
Lindungi strip dari kelembaban dan bagian yang berlebihan dan ringan tapi tidak
mendinginkan. Ganti bagian atas pada wadah penyimpanan segera setelah melepaskan strip.

Glukosa
Dibandingkan dengan uji Benedict, yang mendeteksi adanya gula total dalam urin, uji
strip mendeteksi semi-kuantitatif jumlah yang glukosa yang ada dalam urin. Ini adalah cara cepat
dan nyaman pengujian untuk menentukan jumlah glukosa yang terdapat dalam urin. Dua jenis
dipstrips yang tersedia, yaitu. Clinistix dan diastix. Ini adalah cara cepat dan nyaman pengujian
urin untuk menentukan jumlah glukosa diekskresikan dalam urin.

Prinsip
Strip diresapi dengan enzim glukosa oksidase dan peroksida, dan zat indikator 0-
toluidin. O-toluidin dioksidasi menjadi zat hijau-biru (base Schiff) dengan berbagai nuansa
warna, yang kemudian dibandingkan dengan grafik standar yang disediakan dalam kit untuk
melaporkan tingkat perkiraan glukosa yang terdapat dalam urin.

Protein
Beberapa tes penyaringan cepat sedang rutin digunakan. Sebagian besar strip tes telah
dikembangkan untuk mendeteksi albumin dan kemungkinan negatif terhadap adanya protein
lainnya, seperti Protein Bence Jones.
Prinsip
Hal ini didasarkan pada kesalahan indikator pH protein. Pada pH konstan perubahan
warna yang terjadi pada indikator ini disebabkan protein. Daerah uji strip reagen diresapi dengan
indikator tetrabromophenol biru, buffer dengan pH 3.0. Pada pH ini hasilnya adalah berwarna
kuning yang menunjukkan tidak adanya protein. Protein membentuk kompleks dengan pewarna
sehingga mengubah warna menjadi hijau atau hijau kebiruan.

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 13
Hasil
Warna ini dibandingkan dengan grafik warna yang disediakan, yang menunjukkan
perkiraan konsentrasi protein.
Hasil positif palsu dapat terjadi jika:
spesimen terkontaminasi dengan cairan vagina atau uretra
urin sangat basa saat digunakan
wadah urin terkontaminasi dengan desinfektan seperti chlorohexidine
Hasil negatif palsu akan diamati jika zat asam telah ditambahkan ke urin sebagai pengawet
(misalnya dalam estimasi kalsium urin)

REAGEN STRIP GANDA


Test untuk glukosa, bilirubin, keton, berat jenis, darah, pH, protein dan urobilinogen
menggunakan strip tunggal tes semi-kuantitatif yang tercantum di atas bisa dilakukan.

Prinsip
Plastik strip ini digunakan untuk ditempel pada beberapa daerah reagen yang
terpisah. Tergantung pada reagen yang digunakan, strip ini yang digunakan untuk tes ditunjukkan
di atas.
Glukosa: menggunakan prinsip yang sama seperti dijelaskan untuk Diastix, warna akhir
mulai dari hijau ke coklat.
Bilirubin: didasarkan pada gabungan bilirubin dengan dichloronaniline diazotized dalam
media asam kuat. Rentang warna variasi coklat.
Keton: didasarkan pada prinsip reaksi Rothera dan pada pengembangan warna, mulai dari
pink kekuningan untuk pembacaan negatif menjadi ungu saat asetoasetat bereaksi dengan
nitropruside. Ini juga mendeteksi aseton tetapi tidak betahydroxybutyrate.
Gravitasi spesifik: dengan adanya indikator polielektrolit yang terdapat dalam urin
memberikan warna hijau biru pada konsentrasi ionik urin rendah, dari hijau menjadi hijau
kuning dalam konsentrasi ionik urin meningkat.
PH: Tes ini didasarkan pada prinsip indikator ganda yang memberikan berbagai warna
mencakup rentang pH urin secara keseluruhan. Warna berkisar dari orange ke kuning dan
hijau ke biru.
Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 14
Protein: didasarkan pada kesalahan indikator pH protein. Pada pH konstan, kehadiran
protein mengarah ke pengembangan dari setiap warna hijau. Warna berkisar dari kuning
untuk "negatif" melalui hijau kuning ke hijau biru untuk reaksi "positif".
Urobilinogen: Tes ini didasarkan pada reaksi Ehrlich yang dimodifikasi, di mana p-dimetil
amino benzaldehida dalam hubungannya dengan penambah warna bereaksi dengan
urobilinogen dalam medium asam kuat untuk menghasilkan warna pink-merah.

Prosedur
Jangan gunakan strip berubah warna. Jangan sentuh area uji. Celupkan daerah tes dari
strip dalam urin complete, tetapi secara singkat, untuk menghindari reagen terlarut keluar. Baca
hasil tes hati-hati pada waktu yang ditentukan dalam cahaya yang baik dan dengan daerah uji
ditempatkan di dekat grafik spesimen warna yang sesuai pada label botol. Jangan membaca strip
di bawah sinar matahari langsung.

Gangguan
Glukosa: Askorbat dan keton dapat menyebabkan hasil negatif palsu
Biilirubin: indican (ureloxyl sufate) akan menyebabkan hasil positif palsu, sementara
askorbat akan menyebabkan hasil negatif palsu.
Keton: urin berpigmen atau urin yang mengandung metabolit obat levodopa / sulph-
hidroksil dapat menyebabkan hasil positif palsu.
Protein: terdapat pada gangguan glomerulus atau pun pada kasus pre-eklamsia
Quality Control: Dipstix untuk glukosa dan protein umumnya direkomendasikan untuk
laboratorium menengah serta perifer untuk skrining urin rutin.

TUGAS PRAKTIKUM
1). Sebutkan 3 kondisi yang menyebabkan pH urin menjadi basa!
2). Apa fungsi bilirubin pada proses urinalisis?

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 15
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 16
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

C. UREA - METODE MONOXIME DIACETYL

Pendahuluan
Urea memberikan kontribusi paling besar dari protein nitrogen tubuh, terhitung sekitar
45% dari total. Ini adalah akhir produk utama dari katabolisme protein pada manusia. Hal ini
disintesis dalam hati, dilepaskan ke dalam sirkulasi darah dan diekskresikan oleh ginjal.
Pengukuran urea dalam darah adalah sangat bermanfaat sebagai indikator integritas ginjal dan
hati.

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 17
Prinsip
Urea bereaksi secara langsung dengan monoxime diacetyl dalam kondisi asam yang kuat
untuk memberikan produk kondensasi kuning. Reaksi diintensifkan dengan adanya ion besi dan
thiosemicarbazide. Warna merah intens terbentuk dan diukur pada 540nm / penyaring kuning
hijau.

Jenis spesimen, pengumpulan dan penyimpanan


Serum adalah spesimen pilihan. Banyak sampel bertahan tidak lebih dari 8 jam pada suhu
kamar (25-35C) dan 7 hari pada 2-8C. Untuk durasi yang lebih lama, simpan dalam lemari
pendingin. Jika sampel menunjukkan bukti kontaminasi bakteri, jangan gunakan ini untuk
estimasi urea. Plasma juga dapat digunakan untuk estimasi urea.

Reagen: 1. Reagen I Urea


2. Reagen II Urea

Spesimen :
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA, urin. Stabilitas dalam serum / plasma

Alat : 1. Mikropipet 10 l & 100l


2. Blue Tip & yellow Tip
3. Tabung Reaksi
4.Centrifuge
5. Spektrofotometer
6. Cuvet
7. Rak tabung
8. Inkubator

Prosedur :
1. Siapkan 3 tabung reaksi yaitu tabung 1 untuk sampel, tabung 2 untuk standar, dan tabung
3 untuk blanko.

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 18
2. Masukkan serum 10 l hanya pada tabung 1 (sampel)
3. Masukkan larutan standar 10 l hanya pada tabung 1 (standar)
4. Masukkan aquades 10 l hanya pada tabung 1 (Blanko)
5. Masukkan reagen I Urea1000 l pada 3 tabung, yaitu tabung1 (sampel), tabung 2
(standar),dan tabung 3 (blanko).
6. Homogenkan masing-masing tabung, kemudian inkubasi selama 5 menit, dengan suhu
20-25 suhu ruangan.
7. Masukkan 1000 l reagen II Urea pada 3 tabung. Homogenkan, lalu inkubasi pada suhu
ruangan 20-25 selama 10 menit.
8. Ukurlah absorbansi pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 578 nm.

Sampel Standard Blanko


Sampel 10l - -
Standard - 10l -
Aquades 10 l
Reagen I 1000l 1000l 1000l
Homogenkan masing-masing tabung,inkubasikan 10 menit pada suhu 20-25 C
atau 5 menit pada suhu 37C
Reagen II 1000 L 1000 L 1000 L
Homogenkan masing-masing tabung,inkubasikan 10 menit pada suhu 20-25 C
atau 5 menit pada suhu 37C
Ukulah absorbansi standard dan sampel terhadap blanko reagen ( = 578 nm)
hasilnya
dihitung dengan menggunakan rumus:

Absorbansi yang diuji


Urea pada uji sampel = ---------------------------------------- x 80 mg / dl
Absorbansi Standars

Referensi dan berbagai interpretasi klinis


Serum / Plasma Urea ............ 15 - 40 mg / dl
Peningkatan kadar urea serum dapat terjadi karena etiologi pre-ginjal, ginjal atau pasca-
ginjal. Penyebab prerenal bisa menjadi jantung yang berhubungan atau karena katabolisme
protein meningkat, dan dehidrasi. Penyebab ginjal termasuk glomerulonefritis, nefritis kronis,
sindrom nefritik dan penyakit ginjal lainnya. Pasca ginjal penyebabnya antara lain obstruksi pada
saluran urinari. Penurunan kadar urea serum dapat terjadi karena kehamilan, infus intravena,

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 19
asupan hormon antidiuretik rendah, sekresi protein rendah, penyakit hati yang berat, kesalahan
bawaan siklus urea dan SIADH (Sindrom sekresi ADH tidak tepat).

Keterbatasan
Spesimen dengan ikterus kotor tidak dapat diuji karena akan menyebabkan nilai urea palsu yang
tinggi. Jangan melaporkan hasil jika dicurigai adanya campur tangan spesimen.
Menginformasikan dokter mengenai masalah tersebut.

TUGAS PRAKTIKUM
1). Apa fungsi urea pada proses urinalisis?
2). Mengapa pada proses gagal ginjal terjadi peningkatan urea?

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 20
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 21
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

D. KREATININ - METODE JAFFE'S

Pendahuluan
Kreatinin adalah produk limbah yang terbentuk di otot dari senyawa penyimpanan energi
tinggi, kreatin fosfat. Kreatin fosfat dapat disimpan dalam otot di sekitar empat kali konsentrasi
adenosin trifosfat. Konsentrasi kreatinin dalam darah dan ekskresi dalam urin sangat konstan
dalam individu normal. Oleh karena tingkat kreatinin serum digunakan sebagai indikator untuk
menilai fungsi ginjal.

Prinsip

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 22
Kreatinin terdapat dalam serum atau plasma langsung bereaksi dengan alkali picrate
mengakibatkan pembentukan warna merah, intensitas yang diukur pada 505 nm / filter
hijau. Protein interference dihilangkan menggunakan sodium laurilsulfat. Membaca absorbansi
kedua setelah pengasaman dengan asam asetat 30% mengoreksi non-spesifik chromogens dalam
sampel.

Jenis spesimen, pengumpulan dan penyimpanan


Serum atau dapat digunakan. Hindari menggunakan sampel haemolysed atau lipaemic.
Stabil selama 12 jam pada suhu kamar (25-35C), satu minggu pada 2-8C dan selama 3 bulan
-20C.

Reagen: Working Reagen : 1. 750 l Reagen I


2. 250 L Reagen II

Spesimen :
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA, urin. Stabilitas dalam serum / plasma

Alat : 1. Mikropipet 10 l & 100l


2. Blue Tip & yellow Tip
3. Tabung Reaksi
4.Centrifuge
5. Spektrofotometer
6. Cuvet
7. Rak tabung
8. Inkubator

Prosedur :
1. Siapkan 3 tabung reaksi yaitu tabung 1 untuk sampel, tabung 2 untuk standar, dan tabung
3 untuk blanko.
2. Masukkan serum 100 l hanya pada tabung 1 (sampel)
3. Masukkan larutan standar 100 l hanya pada tabung 1 (standar)
4. Masukkan aquades 100 l hanya pada tabung 1 (Blanko)

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 23
5. Masukkan Working reagen 1000 l pada 3 tabung, yaitu tabung1 (sampel), tabung 2
(standar),dan tabung 3 (blanko).
6. Homogenkan masing-masing tabung, kemudian tunggu dan hitung menggunakan
stopwatch 30 detik.
7. Baca absorbansi Ab 1 (Sampel) dengan panjang gelombang 505 nm, lalu catat nilainya
8. Setelah 2 menit cata Ab 2, dengan panjang gelombang 505 nm.
9. Setelah itu lanjutkan baca Ab1 dan Ab2 (Standar).

Sampel Standard Blanko


Sampel 100l - -
Standard - 100l -
Aquades 100 l
WR 1000l 1000l 1000l
Homogenkan masing-masing tabung, kemudian tunggu dan hitung
menggunakan stopwatch 30 detik
Baca absorbansi Ab 1 (Sampel) dengan panjang gelombang 505 nm, lalu catat
nilainya
Setelah 2 menit cata Ab 2, dengan panjang gelombang 505 nm.
Setelah itu lanjutkan baca Ab1 dan Ab2 (Standar).

Hasilnya dihitung dengan menggunakan rumus berikut.

Absorbansi yang di uji


Kreatnin dalam uji sampel = ------------------------------------ x 2 mg / dl
Absorbansi Standars

Cat :
Absorbansi yang di uji = A2-A1
Absorbansi standar = A2-A1

Referensi jangkauan dan interpretasi klinis


Kreatinin serum / plasma: Pria 0,7-1,4 mg%
Wanita 0,4-1,2 mg%

Konsentrasi kreatinin serum berhubungan dengan massa otot dan nilai-nilai lebih rendah pada

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 24
anak. Kreatinin serum meningkat dikaitkan dengan penurunan laju filtrasi glomerulus (GFR),
apakah penyebabnya adalah pra-ginjal, ginjal atau pasca-ginjal. Faktor pra-ginjal termasuk
kondisi seperti gagal jantung kongestif, syok, diare, diabetes mellitus yang tidak terkontrol,
penggunaan diuretik, dll. Faktor ginjal melibatkan terutama kerusakan pada glomeruli. Faktor
pasca ginjal mungkin hipertrofi prostat, kalkuli menghalangi ureter atau neoplasma menekan
ureter. Konsentrasi kreatinin serum dipantau ketat setelah transplantasi ginjal karena konsentrasi
meningkat, bahkan jika meningkat sedikit saja, mungkin merupakan indikasi dari penolakan.

TUGAS PRAKTIKUM
1). Bagaimana sehingga kreatinin mempengaruhi fungsi ginjal?
2). Bagaimana mengukur derajat gagal ginjal melalui hasil kreatinin dan urea?

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 25
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 26
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

E. ASAM URAT FS *

Metode
Enzimatik tes TSHBS menggunakan fotometrik (asam 2,4,6-tribromo-3-hidroksibenzoat)

Prinsip
Asam urat dioksidasi menjadi allantoin oleh uricase. Hidrogen peroksida yang dihasilkan
bereaksi dengan 4-aminoantipyrine dan asam 2,4,6-tribomo-hidroksibenzoat (TBHBA) untuk
quinoneimine

Reagen

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 27
Komponen dan Konsentrasi
NB: Konsentrasi adalah mereka dalam campuran tes akhir.

R1 : buffer fosfat pH 7,0 100 mmol / l


TBHBA (asam 2,4,6-Tribromo-3-hidroksibenzoat) 1 mmol / l

R2 : buffer fosfat pH 7.0 100 mmol / l


4-Aminoantipyrine 0,3 mmol / l
K4 [Fe(CN)6] 10 mmol / l
Peroksidase (POD) 2 kU / l
Uricase 30 U / l
Standar 6 mg / dl (357 mmol / l)

Instruksi Penyimpanan dan Stabilitas Reagen :


Reagen dan standar yang stabil sampai dengan akhir bulan tercantum ezpiry, jika
disimpan pada 2-8C, terlindung dari cahaya dan menghindari kontaminasi. Jangan membekukan
reagen!

Catatan: Ini harus disebutkan, bahwa pengukuran tidak dipengaruhi oleh kadang-kadang terjadi
perubahan warna, selama absorbansi monoreagent adalah <0,5 pada 546 nm.
Alat : 1. Mikropipet 10 l & 100l
2. Blue Tip & yellow Tip
3. Tabung Reaksi
4.Centrifuge
5. Spektrofotometer
6. Cuvet
7. Rak tabung
8. Inkubator

Spesimen :
Serum, plasma heparin atau plasma EDTA, urin. Stabilitas dalam serum / plasma
Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 28
Prosedur :
1. Siapkan 3 tabung reaksi yaitu tabung 1 untuk sampel, tabung 2 untuk standar, dan tabung
3 untuk blanko.
2. Masukkan serum 20 l hanya pada tabung 1 (sampel)
3. Masukkan larutan standar 20 l hanya pada tabung 1 (standar)
4. Masukkan aquades 20 l hanya pada tabung 1 (Blanko)
5. Masukkan reagen asam urat 1000 l pada 3 tabung, yaitu tabung1 (sampel), tabung 2
(standar),dan tabung 3 (blanko).
6. Homogenkan masing-masing tabung, kemudian inkubasi selama 5 menit, dengan suhu
20-25 suhu ruangan.
7. Ukurlah absorbansi pada spektrofotometer dengan panjang gelombang 520 nm.

Sampel Standard Blanko


Sampel 20l - -
Standard - 20l -
Aquades 20 l
Reagen 1000l 1000l 1000l
Homogenkan masing-masing tabung,inkubasikan 10 menit pada suhu 20-25 C
atau 5 menit pada suhu 37C
Ukulah absorbansi standard dan sampel terhadap blanko reagen ( = 520 nm)
PERHITUNGAN
Dengan standar atau kalibrator

sampel
Asam Urat [mg / dl] = --------------------------- x 8 / Cal [mg / dl]
std / Cal

Faktor conversation
Asam urat [mg / dl] x 59,48 = asam urat [mmol / l]

Rentang Referensi
Serum plasma

Adults Female Male

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 29
Mg/dl (mmol/l) Mg/dl (mmol/l)
2.3-6.1 (137-363) 3.6-8.2 (214-488)
Children
0-5 hari 1.9-7.9 (113-470) 1.9-7.9 (113-470)
1-4 tahun 1.7-5.1 (101-303) 2.2-5.7 (131-340)
5-11 tahun 3.0-6.4 (178-381) 3.0-6.4 (178-381)
12-14 tahun 3.2-6.1 (190-363) 3.2-7.4 (190-440)
15-17 tahun 3.2-6.4 (190-381) 4.5-8.1 (268-482)

TUGAS PRAKTIKUM
1). Bagaimana hubungan asam urat dengan batu ginjal serta proses gagal ginjal?
2). Apa fungsi asam urat dalam proses urinalisis?

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 30
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

LAPORAN PRAKTIKUM

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 31
Komentar Dosen Pembimbing

Nama/Paraf Dosen
Pembimbing

Praktikum Patologi
Klinik Blok 15
PROGRAM STUDI KEDOKTERAN UNIV.TADULAKO | 32

You might also like