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Est prohibido comer, fumar, beber o masticar chicle dentro del laboratorio.
Antes de retirarse del laboratorio los alumnos debern dejar limpio su lugar de
trabajo.
CARRERA:
SEMESTRE:
MAESTRO:
INTRODUCCION:
OBJETIVOS:
MATERIAL:
Durante hace muchas generaciones las ratas de laboratorio se han habituado a ser
manejadas por el hombre. Recuerde pues, que si ste es su primer contacto con la rata
albina, el novicio es usted. Las ratas muerden, sin embargo, las criadas en el laboratorio
raramente lo hacen mientras no se les trate mal. Las siguientes maniobras le permitirn
manejar las ratas sin riesgo. La cola es un apndice muy conveniente para el manejo del
animal y permite levantarlo sin hacerle dao. Incluso, cuando se sujeta de la cola, la rata
trata de alejarse; en este estado inmvil y ocupada en otra cosa, se sujeta poniendo el dedo
ndice y el dedo medio de la otra mano alrededor de la cabeza y extendindolos por debajo
de la mandbula inferior y no sobre la garganta, pues la rata no suele comprender por qu
debera cooperar con quien intenta estrangularla.
Es aconsejable no levantar las ratas por la cola, pues son bastante giles para girar
en el aire y trepar por su propia cola. No es muy sorprendente, que una rata en estas
condiciones se sienta inclinada a morder. Doblando un poco la mano que sujeta a la cabeza,
el cuerpo de la rata queda acostado sobre la palma de la mano. No debe agarrarse o
apretarse el cuerpo del animal con los otros dedos, pues esta presin resulta molesta y
puede desencadenar movimientos de defensa. No es tiempo perdido, sino muy bien
invertido, aquel que se gasta en manejar a la rata, pasndola de una jaula a otra, o de ah a
la mesa, acostumbrndose tanto el animal como el estudiante al conocimiento mutuo.
ANESTESIA
INYECCIONES
c) Inyeccin intraperitoneal: Sujete al animal con una mano y con la otra tmela
de las patas posteriores y extindalas de tal manera que el abdomen del animal quede tenso
y expuesto al compaero que realizar la inyeccin. El compaero que inyecta deber
identificar el cuadrante inferior izquierdo del abdomen, ya que en esta zona no hay rganos
vitales, excepto el intestino delgado. Aplique la punta de la aguja en el sitio escogido y con
un movimiento rpido introduzca la aguja con la jeringa, previamente preparada, a travs
de la pared abdominal, al hacerlo se percibe claramente cuando la pared cede al empuje de
la aguja. Tenga cuidado de introducir solamente la punta de la aguja en la cavidad
peritoneal, ya que existe el riesgo de perforar el intestino. Una vez en el peritoneo, inyecte
la solucin y saque la aguja en la misma direccin en la cual entr. Los lquidos inyectados
en el peritoneo no tienen que estar a la temperatura del cuerpo, pero es mejor calentarlos.
Cada integrante del grupo debe practicar cada tipo de inyeccin sobre la rata
anestesiada y luego cuando menos una en una rata despierta.
SISTEMAS DE RGANOS
Continuando con la anestesia es la misma rata, extindala boca arriba sobre la mesa
de disecciones, amarre las patas con hilos del doble cero y sujtelas a los lados de la mesa.
Identifique el timo sobre el corazn y la cara anterior de la parte baja del cuello.
Seprelo y comente con sus compaeros las funciones de este rgano.
Siguiendo la lnea media extienda hacia arriba la incisin, desde la cavidad torcica
hasta el maxilar inferior. Identifique en el cuello las glndulas salivales submaxilares y
sublinguales y los ganglios linfticos. Extrpelos. Localice la trquea y sgala hacia abajo
desde la laringe hasta su divisin en bronquio derecho e izquierdo y contine, si es posible,
hasta los bronquiolos pequeos, que corresponden a cada segmento grande del pulmn.
Evite cortar los grandes vasos cardiacos. Una vez expuestos los lbulos pulmonares, corte
un fragmento pequeo del pulmn y exprmalo fuertemente entre los dedos. Perciba la
sensacin tctil de crepitacin. Corte otro fragmento pequeo y junto con el anterior
pngalos en un vaso con agua. Observe si flotan o se hunden.
Identifique la glndula tiroides (Fig. 45), localizada por abajo de la laringe delante
de la trquea. Corte la traquea transversalmente un poco por debajo de la glndula tiroides y
brala longitudinalmente hacia arriba incluyendo la laringe. Obsrvela cuidadosamente e
identifique la epiglotis y las cuerdas vocales. Con una tijera fuertes corte por el centro la
mandbula inferior.
Identifique el nacimiento de la aorta y los vasos que emergen del cayado; diseque la
aorta torcica hasta el diafragma (figuras 45 y 41).
Extirpe el corazn, los pulmones y los grandes vasos (Fig. 45), lvelos con agua y
colquelos sobre la tabla de disecciones.
Extirpe uno de los ojos del animal, abra la esclertica y con cuidado extraiga el
cristalino. Mire a travs de l y vea como las imgenes se observan invertidas.
RESULTADOS:
En el dorso de cada hoja, haga un esquema de cada uno de los siguientes sistemas
de rganos: cardiovascular, respiratorio, digestivo, excretor, reproductor, nervioso,
endocrino e inmune), Identifique a cada uno con los nombres de los respectivos rganos
que los conforman.
De una breve explicacin de la funcin de cada uno de los sistemas.
BIBLIOGRAFA
Chiasson R.B. Laboratory Anatomy of the White Rat. WM. C. Brown Company
Publishers. Iowa. 1978.
Hebel R, and Stromberg M.W. Anatomy of the Laboratory Rat. Williams and Wilkins Co.
Baltimore. 1976.
Olds R.J. and Olds J.R. A Colour Atlas of the Rat. Dissection Guide. Wolfe Medical
Publications Ltd (Ed). 1979.
Quintanar Stephano J.L. Anatoma Macroscpica de los Sistemas de rganos. En: Manual
de Prcticas de Laboratorio. Universidad Autnoma de Aguascalientes (Ed). pp 5-10. 1989.
Sharp P.E. and LaRegina M.C. Experimental Methodology. In: The Laboratory Rat.
Suckow M.A. (Ed). CRC Press Boca Raton. 1998.
van Dongen J.J., Remie R., Rensema J.W. and van Wunnik G.H.J. Anesthesia of the
labotarory rat and General techniques. In: Manual of Microsurgery on the Laboratory Rats.
Techniques in the Behavioral and Neural Sciences Vol. 4.. Huston J.P. (Ed). Elsevier.
Amsterdam. pp 61-95. 1990.
Waynforth H.B. and Flecknell P.A. Administration of Substances. In: Experimental and
Surgical Techniques in the Rat. Academic Press. London. pp 1-67. 1992.
Wells T.A.G. The Rat. A dissection manual. Dover Publication, Inc. New York. 1964.
OBJETIVOS:
INTRODUCCIN
ELEMENTOS DE UN CANAL:
PROCEDIMIENTO
NOTA: El registro de una seal conocida se llama calibracin del registro. Ningn registro
puede considerarse completo sin que la calibracin de amplitud y tiempo.
CALIBRACIN DE UN REGISTRO
ESTIMULADOR S1-10
OPERANDO EL ESTIMULADOR S1-10
Peso Desplazamiento
(g) vertical del registro (g)
x y
0
________________________________
5
________________________________
10
________________________________
20
________________________________
40
________________________________
50
________________________________
100
Con los datos obtenidos haga una grfica en papel cuadriculado, en
la que al eje de las x correspondan los valores crecientes de las
pesas y al eje de las y a los valores verticales mximos del registro.
Una los puntos y observe la recta que se forma.
POTENCIAL DE ACCION COMPUESTO
INTRODUCCIN
OBJETIVOS
MATERIAL Y METODOS
Material y equipo
Material biolgico: Rana (aunque tambin pueden emplearse otras especies como la rata o
el gato
Soluciones. 1) Ringer rana. (puede ser suficiente solucin salina isotnica) 2) Solucin de
Xilocana al 2%.
A B C
D E F G
Figura 1. Secuencia de fotografas que ilustra la obtencin del nervio citico de la rana. A:
vista de la parte inferior del cuerpo de la rana despus de haber retirado las vsceras
abdominales; B: Acercamiento que ilustra las ltimas races nerviosas, donde se origina el
nervio citico; C: lustracin de la manera como se refiere el nervio citico para su
diseccin; D: ilustracin de la pared posterior de la cavidad abdominal con el nervio citico
referido; E: ilustracin del nervio citico disecado hasta la altura de la rodilla; F: en este
caso se ha seleccionado el nervio tibial, cuya diseccin se contina hasta el tobillo (G).
A B
C D u
o
e
REGISTRO DE DATOS
RESULTADOS
1) Guyton, A.C. and Hall, J.E. Membrane Potentials and Action Potentials. In Textbook of
Medical Physiology. 10a ed., Saunders. Philadelphia. pp 52-66. 2000.
2) Ganong, W.F. Excitable tissue: Nerve. In: Review of Medical Physiology. 20a edition.
Lange Medical Books/McGraw-Hill. New York. pp 49-61. 2001
3) McCormick, D.A. Membrane Potential and Action Potential. In Fundamental
Neuroscience. (Zigmond, M., Bloom, F., Landis, S., Robertis, J. and Squire, L. eds). Ist.
ed. Pp. 129-154. Academic Press, London UK.
4) Koester, J. and Siegelbaum, S.A. Propagated Signaling: The Action Potential. In
Principles of Neural Science.(Kandel, E., Schwartz, J. and Jessell, T. eds.). 4th. ed., pp.
150-170. Mc Graw Hill.
PROPIEDADES DEL MUSCULO ESQUELETICO
INTRODUCCIN
Cuando una fibra muscular es activada por un impulso nervioso proveniente de una
motoneurona, la fibra se contrae completamente (RESPUESTA TODO O NADA). La
graduacin de la contraccin tan caracterstica del msculo completo, est determinada por
variaciones en el nmero de fibras musculares que participan en la contraccin. Bajo
circunstancias normales, la fuerza de la contraccin se lleva a cabo dependiendo del
nmero de fibras que se activan. Siempre debe tenerse en mente que la relacin entre fibras
musculares que inerva una neurona motora es mayor que la unidad; es decir, una
motoneurona inerva siempre ms de una fibra muscular, la relacin de inervacin vara para
cada unidad motora desde 1/100 hasta 1/600 en el msculo esqueltico.
OBJETIVOS
Examinar las propiedades del msculo esqueltico cuando se estimula directamente. Para
llevar a cabo lo anterior se debern realizar las siguientes mediciones:
MATERIAL Y EQUIPO
1) Fisiografo (un canal) 2) Migrafo tipo C 3) Tornillo de tensin 4) Juego de pesas
esas 5) Electrodos de estmulo de tipo alfiler 6) Cable estimulador 7) Tabla para rana 8)
Soporte universal 9) Regla 10) Estilete 11) Disectores de vidrio 12) Hilo camo doble
cero 13) Canalizador de pulsos 14) Ringer rana y 15) Estuche de disecciones.
PROCEDIMIENTO
Ajuste la velocidad del papel a 0.10 cm/seg. Aplique al msculo una tensin de reposo
adecuada, seleccione el estmulo mximo de 2 ms de duracin y aplique un estmulo cada 2
segundos hasta que se aprecie una disminucin clara de la fuerza de contraccin. Grafique
la altura de la contraccin versus al tiempo como una medicin de fatiga(*).
de reposo adecuada.
Ajuste la sensibilidad para poder registrar sacudidas musculares con una amplitud
adecuada. Ajuste la tensin de reposo al punto donde obtuvo la mxima contraccin en el
punto anterior. Seleccione el voltaje del estmulo mximo. Con la velocidad del papel a 0.1
cm/seg estimule al msculo con varias frecuencias iniciando con 2 estmulos/seg durante 3
seg. Detenga el papel, seleccione 5 estmulos/seg, ponga en marcha el papel y estimule
durante 3 seg. Pare el papel y repita las maniobras con frecuencias de 7.5, 10, 20, 25 y 50
estmulos/seg. Observe como las sacudidas no regresan al nivel de reposo, aumentan de
intensidad y se van fundiendo en una sola contraccin cuando aumenta la frecuencia de
estimulacin. Determine la frecuencia con la que se alcanza la contraccin tetnica.
Calibre el registro usando una pesa adecuada y determine la relacin en gramos entre una
sacudida simple y la contraccin tetnica. Determine si el msculo presenta signos de
fatiga (*).
Ajuste el desplazamiento del papel a 0.1 cm/seg. Seleccione el estmulo mximo. Ponga
la perilla de frecuencia del estimulador en 25 pulsos/seg y estimule el msculo nuevamente
durante dos minutos. Repita el procedimiento una vez ms para observar la fatiga de las
fibras musculares.
(*)Aunque es difcil definir la fatiga, suponemos que esta existe cuando la tensin ha cado
un 37% de su valor inicial.
RESULTADOS:
CUESTIONARIO
1. Qu es el umbral de contraccin?
2. Qu es un estmulo mximo?
3. En relacin con la contraccin isotnica e isomtrica, diga que tipo de contraccin
ocurre durante la caracterizacin de la sacudida simple y que tipo de contraccin
cuando se increment la tensin de reposo.
4. Utilizando la grfica intensidad del estmulo-fuerza de la contraccin, explique la
sumacin espacial.
5. Describa brevemente la relacin que hay entre el efecto de estmulos repetitivos con
la suma de las contracciones.
6. Mencione las causas de la fatiga muscular.
7. Que elementos del msculo esqueltico se piensa que son los responsables de la
tensin pasiva?
8. Explique las causas del fenmeno de la escalera.
Diga porque en esta prctica se utiliza el estimulador elctrico.
BIBLIOGRAFA
INTRODUCCIN
OBJETIVOS
1. Estimular al nervio citico con estmulos aislados para encontrar los estmulos
subumbral, umbral, mximo y supramximos capaces de provocar la contraccin
mnima y mxima respectivamente del msculo gastrocnemio.
2. Estimular al msculo directamente con estmulos aislados para encontrar los
estmulos subumbral, umbral, mximo y supramximo.
3. Caracterizar las contracciones musculares al estimular repetitivamente al nervio.
4. Comparar el tiempo de fatiga de la unin neuromuscular y el tiempo de fatiga del
msculo.
5. Observar el efecto del bloqueo de la unin neuromuscular sobre la actividad
muscular.
MATERIAL Y REACTIVOS
Biolgico: Rana
Calibre el canal del fisigrafo con un transductor migrafo tipo C. Utilizando una
pesa adecuada, calibre la amplitud del registro a 2.5 cm = 50 g.
Preparacin neuromuscular
Establezca la velocidad del papel a 0.25 cm/seg y realice las siguientes maniobras:
Con el tornillo de tensin ajuste la tensin del msculo y estimule el nervio con
estmulos nicos de 2 mseg de duracin y con voltaje creciente, desde cero hasta
observar las respuestas mnima y mxima del msculo. Anote la intensidad de los
diferentes estmulos aplicados y la magnitud de las contracciones. Con los datos
llene la Tabla 1 e identifique los voltajes de los estmulos; umbral, mximo y
supramximos.
Con el estmulo mximo del nervio, estimule al nervio con frecuencias de 3, 5, 7.5,
10, 15, 20 y 25 pulsos/seg durante 3 seg en cada punto. Permita que la preparacin
descanse 5 seg entre cada tren de estmulos. Note la suma de las contracciones y
determine si se han presentado el ttanos y la fatiga.
Antes de continuar ajuste la tensin de reposo del msculo y encuentre el estmulo mximo
del nervio y del msculo capaces de provocar una contraccin muscular mxima. Calibre el
registro de tal manera que 2.5 cm de amplitud = 50 gr. Ajuste la velocidad del papel a 0.1
cm/seg.
RESULTADOS:
Con los datos de la Tabla 1, haga una grfica con el voltaje en las abscisas y la
amplitud de las contracciones en las ordenadas. Exprese la amplitud en gramos. Seale en
la curva los estmulos subumbrales, umbral, mximo y supramximos.
Con los datos de la Tabla 2, haga una grfica con el voltaje en las abscisas y la
amplitud de las contracciones en las ordenadas. Exprese la amplitud en gramos. Seale en
la curva los estmulos subumbrales, umbral, mximo y supramximos.
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFA
INTRODUCCIN
El msculo liso intestinal est ricamente inervado por plexos nerviosos que rodean
las capas longitudinal y circular. Una parte de este tejido exhibe contracciones circulares y
longitudinales, en adicin a las contracciones peristlticas. El msculo responde al
estiramiento incrementando su longitud pero tendiendo siempre a mantener el contenido
bajo presin constante o en un estado de contraccin isotnica (tono basal). El msculo liso
tambin responde a cambios en la temperatura, cuando esta aumenta, disminuye el umbral
elctrico para la contraccin muscular e incrementa la frecuencia (ritmicidad) y amplitud de
las contracciones. La estimulacin elctrica intensa a menudo da lugar a contracciones
sostenidas.
OBJETIVOS
1) Observar y registrar las contracciones rtmicas espontneas del msculo liso
intestinal aislado de conejo y b) estudiar los cambios en el tono, frecuencia y
amplitud de las contracciones rtmicas en respuesta a las siguientes condiciones:
2) Efecto de drogas que mimetizan y bloquean las acciones del sistema nervioso
parasimptico y simptico.
3) Efectos de cambiar la temperatura del medio
4) Efectos de la hipoxia
MATERIAL Y MTODOSUIPO
PROCEDIMIENTO
Analice, identifique y estudie en la Figura 1 cada una de las partes que componen el
sistema para mantener vivo el intestino aislado de conejo (in Vitro).
Encienda y calibre un canal del Fisigrafo con un migrafo tipo B, de tal manera que
5 gr desplacen la plumilla 4 cm. Ajuste la velocidad del papel a 0.5 cm/seg. Cheque la
plumilla de tiempo y seleccione una marca por segundo. Levante la palanca de las
plumillas, pare el desplazamiento del papel y proceda o obtener el intestino delgado de
un conejo. Disponga adecuadamente del cadver del conejo.
*Nota: Llamaremos llave (1) a la que une al recipiente de Ringer con la cmara de
intestino y llave (2) a la que drena el paso de la cmara de intestino con el recipiente de
desecho. Con la llave 2 cerrada, abra la llave 1 y llene la cmara para msculo hasta la
marca de 50 ml. El Ringer fluir por gravedad. Asegrese que el sistema de aireacin est
burbujeando en el Ringer de la cmara. Proceda a montar el fragmento de intestino segn se
explica en el prrafo anterior.
Con una velocidad del papel de 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo a una marca por
cada 30 segundos obtenga el registro de la actividad contrctil espontnea del msculo liso.
1) RITMICIDAD INHERENTE
Continuando con las condiciones anteriores, con el tornillo de tensin incremente
gradualmente la tensin sobre el msculo y obtenga un registro adecuado. A las
contracciones y relajaciones regulares se les llama movimientos pendulares y son
producidos por las fibras musculares mismas (miognicos). Estos movimientos son
diferentes de los movimientos peristlticos, los cuales dependen de la inervacin de la
pared intestinal (neurognicos). Aplique tensin suficiente hasta observar contracciones de
algunos centmetros de amplitud. Centre el registro sobre el papel. Una vez estabilizado el
registro, obtenga un registro control durante 4 minutos. Determine la amplitud y la
frecuencia de las contracciones. Cheque la temperatura y la oxigenacin (puede ser
necesario esperar algunos minutos para que las contracciones se estabilicen).
2) EFECTO DE LAS DROGAS SIMPATICAS Y PARASIMPATICAS:
b) Efectos de la adrenalina
Con la velocidad del papel a 0.1 cm/seg y la plumilla de tiempo en 1 cada 30
segundos, obtenga un registro control de 2-3 minutos. Incremente la velocidad del papel a 1
cm/seg y ponga la plumilla de tiempo en 1/segundo y vierta en la cmara de intestino 0.1
mg de la solucin de adrenalina. Registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones. No olvide sealar simultneamente con el botn marcador
de eventos para determinar el perodo de latencia. Observe el efecto durante 6-8 minutos,
pare el fisigrafo, proceda a lavar la preparacin dos veces segn se describi y cuantifique
las variables sobre el registro. Espere a que la preparacin recupere la ritmicidad basal.
c) Efectos de la prostigmina
Obtenga un registro control de 2 minutos y vierta 0.05 mg de la solucin de
prostigmina en la cmara de intestino y registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones durante 3-4 minutos. Sin lavar el msculo agregue 0.1 mg
de la solucin de Ach a la cmara de intestino. No olvide sealar simultneamente con el
botn marcador de eventos para determinar los periodos de latencia. Determine si ocurre un
mayor incremento en el tono basal, intensidad y frecuencia de las contracciones. Lave el
msculo 3-4 veces y espere hasta que se recupere la ritmicidad basal.
d) Efectos de la atropina
Obtenga un registro control de 2 minutos y vierta en la cmara 0.05 mg de la
solucin de atropina. Registre los cambios en el tono basal, amplitud y frecuencia de las
contracciones durante unos 5-8 minutos. Sin lavar el msculo agregue 0.5 mg de la
solucin de Ach a la cmara de intestino. No olvide sealar simultneamente con el botn
marcador de eventos para determinar los periodos de latencia. Registre los cambios en el
tono basal, amplitud y frecuencia de las contracciones durante unos 4-5 minutos. Lave 2-3
veces y espere a que se recupere la ritmicidad basal. Observe: a) el efecto bloqueador de la
atropina sobre la actividad muscular y b) si el efecto de la atropina es ms duradero que el
de los dems frmacos.
3) EFECTO DE LA TEMPERATURA:
Obtenga un registro control de 2 minutos y anote la temperatura en la cmara para
msculo liso. Apague la bomba de perfusin, vace la cmara del msculo y vierta Ringer a
4 C. Anote la temperatura y registre los cambio en el tono basal, amplitud y frecuencia de
las contracciones durante unos minutos. Vace la cmara y llnela con Ringer a 40 C.
Anote la temperatura en la cmara y registre los cambios en el tono basal, amplitud y
frecuencia de las contracciones durante 1 minuto. Encienda la bomba de perfusin, lave la
preparacin dos veces y espere a que la ritmicidad basal se restablezca.
EFECTO DE LA HIPOXIA:
Obtenga un registro control de 2 minutos y desconecte la bomba de aireacin.
Observe el efecto de la hipoxia sobre el tono basal, amplitud y frecuencia de las
contracciones. Cuando el efecto se haya hecho aparente, conecte nuevamente el sistema de
oxigenacin y vea si se recupera la ritmicidad basal.
BASAL
ACETILCOLINA
BASAL
ADRENALINA
BASAL
PROSTIGMINA
BASAL
ATROPINA
BASAL
ATROPINA+Ach
BASAL (38oC)
TEMPERATURA
BASAL
HIPOXIA
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFA
1) Andrew B.L. Mammalian Intestinal Muscle in Vitro. In: Experimental Physiology.
Alimentary Canal and Kidney. Churchill Livingstone. Edinburgh. pp 249-250.
1972.
2) Armstrong G.G. Caractersticas del msculo liso. En: Manual de Prcticas de
Fisiologa. Editorial Interamericana. Mxico. pp 37-39. 1970.
3) Ganong F.W. Smooth Muscle. In: Review of Medical Physiology. Lange Medical
Books/McGraw-Hill. New York. pp 78-80. 2001.
4) Guyton C.A. and Hall J.E. Contraction and Excitation of Smooth Muscle. In:
Textbook of Medical Physiology. Saunders. Philadelphia. pp 87-94. 2000.
5) Guyton C.A. and Hall J.E. General Principles of Gastrointestinal Function-Motility,
Nervous Control, and Blood Circulation In: Textbook of Medical Physiology.
Saunders. Philadelphia. pp 718-723. 2000.
6) Hoff H.E. Geddes L.A. Properties of Smooth Muscle. In: Experimental Physiology.
Baylor University (Ed). Houston. USA. pp V-1 to V-8. 1971.
7) Martin D.E. Neuromuscular Physiology. Motility of Isolated Intestinal Smooth
Muscle. In: Laboratory Experiments in Human Physiology. Narco Bio System Inc.
(Ed). Huston. pp 61-65. 1975.
8) Quintanar Stephano J.L. Propiedades del Msculo Liso. En: Manual de Prcticas de
Fisiologa General. Universidad Autnoma de Aguascalientes (Ed). Mxico. pp
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9) Sherwood L. Muscle Physiology. Smooth and Cardiac Muscle In: Human
Physiology; From Cells to System. Brooks/Cole. USA. pp 270-278. 2001.
PROPIEDADES DEL MUSCULO CARDIACO
CONOCIMIENTOS PREVIOS:
INTRODUCCIN:
El tejido marcapaso se comporta de esta manera debido a que sus fibras presentan
un potencial de membrana inestable, originada por las propiedades del sarcolema para la
conductancia inica.
Cambios en las caractersticas fsicas del medio extracelular, producen los siguientes
efectos:
A diferencia del msculo esqueltico, las fibras cardiacas son incapaces de sufrir
tetanizacin; esto se debe a que los cardiocitos poseen un perodo refractario prolongado,
lo que constituye un factor de seguridad que protege al corazn contra la aparicin de focos
ectpicos, fibrilacin y tetanizacin.
OBJETIVOS:
MATERIALES Y REACTIVOS:
Biolgico: Tortuga
Equipo:
Soluciones:
Cristalera:
MTODOS:
Calibre un canal del Fisiografo con un acoplador 7173. Con el sistema de pesas
calibre la amplitud del registro de tal manera que 10 g = 1 cm. Recuerde que dependiendo
de las caractersticas contrctiles del corazn, se puede cambiar la sensibilidad del registro.
Si esto es necesario, no olvide volver a calibrar la amplitud del registro.
Destruya el encfalo y la mdula espinal de una tortuga con el estilete. Una vez
sacrificado el animal, serruche los istmos que unen el plastrn con el caparazn. Coloque la
tortuga en decbito dorsal y con los hilos de camo doble cero fije las patas a los extremos
de la tabla de disecciones. Utilizando tijeras, bistur y pinza de diseccin con dientes, con
cuidado desprenda el plastrn a partir del cuello, teniendo cuidado de no lastimar al
corazn. Una vez que ha descubierto el trax, observe el corazn latiendo por debajo del
pericardio. Con cuidado corte el pericardio y exponga al corazn teniendo cuidado de
respetar el frenulum (ligamento que une la punta del corazn con el pericardio). Con el
corazn expuesto, observe e identifique la sstole (contraccin) y la distole (relajacin) y
con su reloj cuente la frecuencia cardiaca. Anote el resultado en la hoja de respuestas.
Pase un hilo delgado de unos 20 cm de longitud por abajo del corazn y amarre
fuertemente el frenulum (deje una pequea masa de pericardio para evitar que el hilo se
resbale cuando se aplique tensin al rgano). Corte el frenulum separndolo del pericardio
y jale el hilo hacia arriba. Sujete el otro extremo del hilo al ganchillo del migrafo e inicie
el registro de la actividad contrctil del corazn.
Con una velocidad del papel a 0.25 cm/seg inicie el registro de la actividad
contrctil del corazn. Presione el botn de Record del amplificador del canal y con el
tornillo de tensin aplique una tensin suficiente al corazn de modo que obtenga registros
de 35 cm de amplitud.
Disminuya la tensin sobre el corazn de tal manera que la amplitud de los registros
sean ahora de aproximadamente de 5 mm. Baje la lnea basal lo ms que pueda; ponga la
unidad del desplazamiento del papel a 0.2 cm/seg. Despus de tomar 3 o 4 registros
empiece a incrementar la tensin sobre el corazn dando media vuelta al tornillo de tensin
entre cada latido. Observe cmo aumenta la fuerza de contraccin conforme aumenta la
tensin. Invierta el proceso cuando obtenga una contraccin de amplitud mxima,
disminuyendo la tensin del tornillo poco a poco hasta alcanzar la lnea basal y una
amplitud de las contracciones semejantes a las primeras. Con los datos obtenidos llene la
Tabla 1 de la hoja de resultados.
Para exponer el nervio vago derecho, haga una incisin a lo largo de la lnea media
del cuello. Esta maniobra expondr la trquea y por abajo de ella el esfago. En paralelo
con estas estructuras, corre el nervio vago y la arteria cartida primitiva. Localice la arteria
cartida derecha y el nervio vago sin tratar de separarlos, ya que esto puede daar el nervio.
Diseque una porcin del paquete vasculo-nervioso de aproximadamente 2 cm y mntelo
sobre los electrodos de ganchillo. Con el cable estimulador conecte los electrodos al
estimulador, cuidando de que el electrodo catdico (rojo) quede hacia el corazn.
Del registro anterior, seleccione el tren de estmulos que haya tenido un efecto
importante sobre la frecuencia cardiaca y antes de estimular, vierta sobre el corazn unas
gotas de sulfato de atropina y espere unos minutos para que la droga bloquee los
receptores de ACh. Ponga la velocidad del papel a 0.5 cm/ seg, estimule nuevamente al
nervio y observe el efecto sobre la frecuencia cardiaca.
Anote los datos en la hoja de resultados
Periodo refractario:
Inserte los electrodos de alfiler en el corazn; uno un poco por arriba del centro del
corazn y el otro cerca del pex. Por el otro extremo conctelos al canalizador de pulsos de
la manera apropiada (asegrese que el estimulador no est mandando estmulos). Cheque
que la amplitud de los registros sea adecuada. Ponga la velocidad del papel a 5 cm/ seg.
Seleccione en el estimulador estmulos a 10 voltios y 2 ms de duracin. Utilizando
estmulos nicos y un desplazamiento del papel a 5 cm/seg, proceda a estimular el corazn
de tal manera que un estmulo coincida con el inicio de la sstole, otros a la mitad y otros al
final de la misma, y otros ms al inicio de la distole, a la mitad y al final. Observe las
extrasstoles (latidos adicionales) y determine en que momento del ciclo cardiaco se
presentaron. Determine el periodo refractario, el cual puede ubicarse en el registro en el
momento que se logre la primera extrasstole al inicio de la distole. Pase los datos
pertinentes a la hoja de respuestas.
Efecto de la temperatura:
Describa los efectos de cada maniobra sobre las caractersticas contrctiles del corazn y
pase los datos a la hoja de resultados.
Una vez que el corazn se ha recuperado, retire el hilo del transductor y con tijeras
finas diseque el corazn. Ya que el la tortuga el marcapaso cardiaco se encuentra en el seno
venoso, cuando extirpe el corazn respete los grandes vasos que llegan y salen del rgano.
Coloque el corazn en una caja de Petri con Ringer a temperatura ambiente y observe los
latidos cardiacos, luego con las tijeras corte un segmento auricular con el seno venoso
incluido, un segmento auricular solo y un segmento ventricular. Observe las contracciones
espontneas y cuantifique la frecuencia cardiaca de cada segmento. Estimule
mecnicamente a los segmentos y observe si se pueden inducir extrasstoles.
RESULTADOS:
Mm g mm g
Con los datos de la Tabla, haga dos grficas. En la primera grafique los gramos de tensin
en el eje de las abscisas y en el de las ordenadas la fuerza de contraccin en gramos. En la
segunda, grafique en las abscisas nmero de veces que cambi de tensin y en las
ordenadas la tensin de reposo y la fuerza de contraccin en cada punto. Haga las
operaciones correspondientes para convertir mm de amplitud a g de fuerza.
Periodo refractario:
Efecto de la temperatura:
INTRODUCCION
Ruidos cardiacos. Normalmente en cada latido del corazn se pueden distinguir dos
sonidos o ruidos cardiacos distintos. El primero es de tono bajo y de relativa larga duracin.
El segundo es de un tono ms agudo y de menor duracin. Usualmente ambos se pueden
distinguir claramente con un estetoscopio o un recolector de sonidos adecuado (micrfono
de contacto), colocado en el quinto espacio intercostal izquierdo. Estos ruidos se escuchan
de manera parecida a lo siguiente: pon y tac. El primer sonido (pon) se debe
principalmente a las vibraciones que resultan del cierre de las vlvulas aurculo-
ventriculares (A-V). Se cree que este ruido tambin se debe la contraccin muscular. El
segundo ruido (tac) esta dado principalmente por las vibraciones que resultan del cierre
sbito de las vlvulas artica y pulmonar.
Los ruidos cardiacos estn directamente relacionados con la accin de bomba del
corazn. Con una frecuencia cardiaca lenta, se puede mostrar que el segundo ruido es
coincidente con la muesca dicrtica de la curva de presin artica. La onda c del registro
de la presin auricular nos permite demostrar que el primer ruido cardiaco se asocia
primeramente con el cierre de las vlvulas A-V. Tambin, el ECG nos permite relacionar
ms fcilmente el momento del primer ruido cardiaco durante el ciclo cardiaco. Debe
recordarse que los eventos elctricos del corazn preceden a los eventos mecnicos. As, la
onda P precede a la sstole auricular dando lugar a la onda a de la curva de presin
auricular, mientras que el complejo QRS, es inmediatamente seguido de la sstole
ventricular y la onda T ocurre justo antes de la distole ventricular. Resumiendo; El
complejo QRS coincide con la sstole ventricular y el cierre de las vlvulas A-V con la
contraccin temprana ventricular. Por lo tanto, el primer ruido cardiaco se asocia con la
onda R del ECG. Al final de la sstole las vlvulas artica y pulmonar se cierran dando
lugar al segundo ruido cardiaco. Ya que la onda T precede a la distole ventricular el
segundo ruido se asocia con la onda T. De esta manera, el registro de la muesca dicrtica de
una arteria cercana al corazn, estar cronolgicamente relacionada con el segundo ruido
cardiaco y la onda T.
OBJETIVOS
General:
Establecer las relaciones ms importantes entre el ECG, la presin arterial, la
presin auricular derecha y los ruidos cardiacos durante el ciclo cardiaco.
Particulares:
1. Registrar la actividad elctrica del corazn (electrocardiograma) reconocer las
diferentes ondas electrocardiogrficas, medir los intervalos indicados y establecer
las relaciones que hay entre las ondas del ECG con las otras variables durante el
ciclo cardaco.
2. Registrar la presin arterial directamente de la aorta, medir la presin sistlica y
diastlica, reconocer la muesca dicrtica y relacionar los cambios de la curva de
presin con el resto de las variables durante el ciclo cardaco.
3. Registrar y medir directamente la presin auricular derecha, reconocer las ondas a, c
y v y relacionarlos con las otras variables del ciclo cardaco.
4. Registrar los ruidos cardacos (fonocardiograma), reconocer el 1 y 2 ruido y
establecer su relacin con el cierre de las valvulas A-V, la muesca dicrtica y las
dems variables registradas.
5. Observar y palpar los latidos cardacos directamente del corazn (trax abierto).
6. Inducir y observar directamente el aleteo y fibrilacin cardiaca
MATERIAL Y EQUIPO
Biolgico: Perro
Equipo:
1. Fisigrafo (4 canales)
2. 2 transductores de presin P 1000 A
3. 2 cables conectores # 9
4. 2 acopladores 7173
5. 2 acopladores DC-AC
6. Estimulador con electrodos de ganchillo
7. Ventilador pulmonar
8. Cable para ECG
9. Selector de derivadas
10. Micrfono para ruidos cardacos
11. Mesa de ciruga para perro
12. Estetoscopio
13. Pentobarbital sdico
14. Solucin salina isotnica heparinizada
15. 2 catteres
16. 3 Jeringas de 10 ml
17. Cnula traqueal
18. Hilo camo del cero
19. Gasa
20. Instrumental ciruga
21. Segueta
22. Tijera para costillas
23. Solucin de KCI 0.5 M.
NOTA: Conforme vaya obteniendo el registro calibrado de cada canal, apague el botn de
RECORD y no lo encienda hasta que tome el registro de todas las variables
simultneamente.
PROCEDIMIENTO
1. De su prctica del ECG prepare el canal 1 del fisigrafo y conecte los cables para
obtener un registro electrocardiogrfico en DII. Utilice electrodos de aguja. Una vez
logrado el registro apague el botn de RECORD.
Calibre el canal 2 del Fisigrafo (ver prctica del Fisigrafo). Una vez calibrado el
acoplador con el amplificador y el reproductor, gire la perilla de MV/CM del amplificador
a 20 MV/CM, apague el botn de RECORD del amplificador y proceda a calibrar el canal
con el traductor de presin P100A.
NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor est sobre una superficie firme y as evitar las vibraciones que puedan
modificar la seal.
1. Una vez disecada y expuesta la arteria cartida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura ceflica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirn para fijar el catter intra arterial
una vez que se haya insertado.
2. La longitud del catter debe ser del tamao suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica traccin a las ligaduras ceflicas y proximal para ocluir el flujo
de sangre en el pequeo segmento de cartida que queda entre las ligaduras. Con
unas tijeras pequeas, el cirujano hace una pequea incisin en la arteria, apenas
suficiente para introducir en direccin del corazn el catter.
4. Una vez que la punta del catter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catter ya que si esto ocurre el registro de la presin no se podr
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco ms las ligaduras.
5. Antes de conectar el catter con el transductor, inyecte un poco de solucin salina
heparinizada al animal para remover cualquier cogulo que se haya formado en el
catter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formacin de cogulos.
6. Gire la llave de la vlvula A para conectar el catter con el transductor y encienda el
born de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la presin arterial.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no est registrado con un
trazo claro.
NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y la palanca del motor del
papel.
8. Apague el botn de RECORD del amplificador.
Una vez que ha calibrado el canal 3 del Fisigrafo, proceda a calibrar el transductor
de presin P1000A siguiendo las indicaciones anteriores.
Para cateterizar la aurcula derecha se procede a localizar la vena yugular externa derecha.
1. Tomando como referencia el borde derecho de la herida del cuello, con una tijera
fuerte separe los msculos adheridos a la piel del cuello. Haciendo esto llegar a la
vena yugular externa adherida a la cara interna de la piel.
2. Disquela en una longitud de unos 4-5 cm y pase dos ligaduras por debajo.
3. Una vez anudada la ligadura ceflica, haga un orificio en la vena y pase el catter en
direccin del corazn.
4. Anude el hilo para fijar el catter a la vena.
5. Asegrese de que la longitud del catter sea el adecuado para que la punta del
mismo quede justo en la luz de la aurcula derecha.
6. Proceda a registrar la presin auricular encendiendo el botn de RECORD del
amplificador.
7. Si es necesario reajuste la sensibilidad del amplificador para observar mejor el
registro.
Fonocardiograma
Una vez calibrado el canal 4 del Fisigrafo proceda a colocar al sujeto el micrfono para
los ruidos cardiacos de la siguiente manera:
1. Pase una banda de hule (perforada) alrededor del trax del animal
2. Identifique la proyeccin del corazn sobre el trax y coloque el micrfono sobre el
rea de la pared que corresponde al pex del corazn.
3. Teniendo cuidado de no apretar excesivamete el micrfono (se puede romper o bien
no se podrn captar los ruidos cariacos), proceda a fijarlo con la banda de hule.
4. Conecte el enchufe del micrfono a la entrada del preamplificador DC-AC 7170.
Tambin se puede utilizar el preamplificador Hi-Gain Coupler 7171. Para cualquier
preamplificador que se use, deber ponerse la ganancia en X10 y la constante de
tiempo en 0.3.
5. Mueva la palanca de ON OFF/CAL del preamplificador a la posicin ON
6. Antes de encender el amplificador ponga la perilla de sensibilidad en 100 MV/CM y
el FILTER en 100Hz.
7. Encienda el botn de RECORD del amplificador y proceda a registrar los ruidos
cardiacos.
1. Con la ligadura de referencia del nervio vago jale al nervio y coloque sobre el los
electrodos de estmulo de ganchillo cuidando que el electrodo negativo quede hacia
el corazn.
2. Conecte los cables de los electrodos al estimulador respetando su polaridad.
3. Con la ayuda del ECG, seleccione en el estimulador pulsos de 0.2 ms de duracin y
un voltaje y frecuencia tales que solo induzcan bradicardia.
PROCEDIMIENTO
Ponga el papel a 0.25 cm/seg y encienda el botn de RECORD del canal 2 para
registrar la presin arterial. Observe la subida y la cada de la presin sangunea. Con una
velocidad de papel de 2.5 cm/seg tome otro registro. Identifique la muesca dicrtica y mida
las presiones sistlica y diastlica.
Registro simultneo del ECG, presin arterial, presin auricular derecha y ruidos cardiacos
durante el ciclo cardiaco
RESULTADOS
Una. vez calibrado el canal 2 del fisigrafo y dispuestos los cables para registrar el
EKG, obtenga 10 registros en la derivacin II y proceda a identificar las ondas P, Q, R, S y
T, mida los voltajes de cada una y los intervalos antes mencionados. Establezca las
relaciones que hay entre las ondas electrocardiogrficas y las variables de los objetivos
anteriores durante el cielo cardaco.
OBJETIVO 3
OBJETIVO 4
RESULTADOS:
PRESION AORTICA:
Calibracin cm mm/Hg.
Presin sistlica mm/Hg.
Presin diastlica mm/Hg.
Presin media mm/Hg.
Presin diferencial mm/Hg.
Presin sistlica:
Presin distlica:
EKG.
Onda P
Onda Q
Onda R
Onda S
Onda T
Establezca la relacin de la onda "a" de la presin auricular, con la onda P del EKG.
El complejo QRS con la sstole artica.
Mida los intervalos PQ QRS, y QT y diga qu significa cada uno de ellos.
FONOCARDIOGRAMA:
En el registro de los ruidos cardacos identifique el lo. y 2o. ruidos, ayudndose con
el estetoscopio. Ahora relacione el primer ruido, con la sstole artica y la muesca dicrtica
con el 2o. ruido. Asimismo, identifique el primer ruido con la onda C auricular.
PRESIN SANGUNEA Y SU CONTROL SIMPTICO Y PARASIMPTICO
INTRODUCCIN
La presin sangunea (PS) es la fuerza que la sangre ejerce contra las paredes de los
vasos sanguneos, y resulta de la accin de bomba del corazn contra una resistencia
perifrica variable as como de un reservorio elstico. La PS vara en relacin con el
volumen sanguneo relativo, la elasticidad del sistema arterial, la resistencia perifrica, la
frecuencia cardiaca y el volumen sistlico, siempre y cuando el volumen sanguneo relativo
permanezca constante. La importancia del reservorio elstico radica en que cierta cantidad
de la energa de la contraccin cardiaca se convierte en energa almacenada cuando parte de
la sangre expulsada durante la sstole es retenida bajo presin en el reservorio arterial
expandido. Durante la distole, la sangre es impulsada a travs de las arterias para mantener
el flujo capilar durante todo el ciclo cardiaco. A causa de esto, la presin en el rbol arterial
es mxima durante la sstole, pero no caer a cero durante la distole debido al rebote
elstico de los vasos y al cierre de la vlvula artica. La magnitud de la cada en la presin,
depender de la diferencia entre la oposicin al flujo (resistencia perifrica), el volumen de
sangre bombeado al sistema arterial cada latido y la frecuencia cardiaca. Si la presin
arterial se est registrando, el final de la eyeccin sangunea al sistema arterial, queda
sealada por una muesca pasajera en la curva de presin producido por el cierre sbito de la
vlvula artica. A esta muesca se le llama muesca dicrtica.
La PS esta bajo el control del sistema nervioso autnomo. La activacin de la
divisin parasimptica, reduce la presin sangunea por disminucin de la frecuencia
cardiaca. Por otro lado, la activacin de la divisin simptica aumenta la presin sangunea
al incrementar: a) la fuerza de contraccin, b) la frecuencia cardiaca y c) la resistencia
perifrica. Aunque existen otros factores humorales (hormonales) que participan en la
regulacin de la PS, el sistema nervioso autnomo es el ms importante.
El centro nervioso ms importante para el control de la PS se localiza en la
protuberancia y el bulbo raqudeo y se le denomina centro vasomotor o cardiorregulador.
Aqu se integran los reflejos cardiovasculares ms importantes como el reflejo del seno
carotdeo en el que impulsos aferentes desde los presorreceptores (receptores de presin)
del seno carotdeo y del arco artico, mandan en cada sstole impulsos por los nervios
glosofarngeos y nervios vagos respectivamente, hasta el bulbo. Despus de ser integrados,
los impulsos son trasmitidos desde el centro vasomotor por las ramas cardiacas del sistema
parasimptico (nervios vagos) o simptico al corazn, al que inhibirn o excitarn
respectivamente. Al estimular mecnicamente al seno carotdeo se mimetiza un incremento
de la presin sangunea, la seal nerviosa viaja por los nervios correspondientes hasta el
centro cardiorregulador el cual responde por un lado, activando al sistema nervioso
parasimptico, que disminuye de la frecuencia cardiaca, y por el otro inhibiendo el tono
simptico, que disminuye la resistencia perifrica.
Cuando el nervio vago es estimulado directamente la frecuencia cardiaca disminuye
y si la intensidad del estmulo es lo suficientemente grande puede producir paro cardaco.
Cuando esto ocurre, la presin sangunea comenzar a caer. La rapidez con la que la
presin sangunea cae refleja el grado de la resistencia perifrica. Por otro lado, si la
frecuencia cardiaca disminuye, la fuerza de contraccin en cada latido ser mayor debido al
mayor volumen diastlico final (Ley de Starling). Con una frecuencia cardiaca disminuida,
la muesca dicrtica es ms claramente visible.
Ya que el sistema parasimptico es colinrgico, sus efectos pueden ser mimetizados
por drogas que inhiben a la enzima acetilcolinesterasa, permitiendo que la acetilcolina
(ACh) permanezca actuando por ms tiempo, prolongando as, sus efectos en el sitio de
liberacin. Por lo tanto, la administracin de prostigmina (un inactivador de la enzima
acetilcolinesterasa), remedar un incremento de la actividad vagal, lo que se traduce en una
disminucin de la frecuencia cardiaca y cada de la presin arterial. La administracin de la
ACh u otras drogas colinrgicas producirn efectos similares. Por otro lado, tambin
existen drogas que pueden bloquear las acciones de la ACh, como la atropina, alcaloide
derivado de la planta llamada bella dona, la cual tiene una gran afinidad por los receptores
colinrgicos post ganglionares, localizados en los rganos efectores de la divisin
parasimtica del sistema nervioso autnomo. De esta manera, se dice que la atropina es un
bloqueador por competencia de la ACh.
La actividad perifrica del sistema nervioso simptico es mediada por los
neurotransmisores noradrenalina (norepinefrina) y adrenalina (epinefrina), de tal manera
que drogas que alteren su sntesis, secrecin, recaptura, o bien, compitan con los receptores
simpticos correspondientes, alterarn los efectos de este sistema sobre la presin arterial.
Efectos muscarnicos y nicotnicos de la ACh. Histricamente se observ que la
administracin de muscarina (extrada del hongo amanita muscaria) a un sujeto de
experimentacin, mimetiza las acciones del sistema nervioso parasimptico a nivel de sus
efectores perifricos (efectos colinrgicos). Por otro lado, tambin se sabe que la nicotina
mimetiza los efectos de la ACh al actuar especficamente a nivel de los receptores
colinrgicos de las neuronas post ganglionares simpticas y parasimpticas del sistema
nervioso autnomo. En base a lo anterior, los efectos de muchas drogas se clasificaron
como muscarnicos o nicotnicos. Actualmente estos trminos se utilizan poco, pero una
demostracin de la accin muscarnica y nicotnica de la ACh es de inters fisiolgico
debido a que pone en evidencia el papel de la ACh en el mecanismo de la transmisin
sinptica de la neurona pre a la post ganglionar en ambas divisiones del sistema nervioso
autnomo (la divisin simptica como parasimptica) y del nervio post ganglionar
parasimptico al efector.
Hay que recordar que el sistema nervioso parasimtico es totalmente colinrgico, es
decir la ACh es el neurotransmisor tanto a nivel ganglionar como perifrico, mientras que
el simptico es colinrgico en la sinpsis de la neurona pre a la post ganglionar, y
noradrenrgico (adrenrgico) en las terminales post ganglionares (periferia). Si la ACh se
administra a un animal normal, la PS sangunea cae. Sin embargo si el animal es
previamente atropinizado, bloqueando as el efecto perifrico de la ACh, esta no tendr
efecto a nivel de los efectores post ganglionares parasimpticos. As, poco efecto se
observar en la presin arterial (PA) y en la frecuencia cardiaca, es decir, los efectos
muscarnicos de la ACh se han bloqueado.
Si se utilizan grandes dosis de ACh en un animal atropinizado, las sinpsis de las
neuronas ganglionares de ambos sistemas seguirn siendo sensibles a la ACh. Sin embargo,
ya que los receptores colinrgicos de los efectores de la divisin parasimptica han sido
bloqueados con la atropina, el efecto de la ACh se observar solo en la divisin simptica,
es decir un incremento de la PA y de la frecuencia cardiaca, provocada por la activacin de
los ganglios simpticos, que a su vez inducen libracin de noradrenalina y adrenalina a
nivel de las terminales nerviosas post ganglionares. Esta respuesta demuestra los efectos
nicotnicos (ganglionares) de la acetilcolina.
OBJETIVOS
MATERIAL Y EQUIPO
Equipo:
1) Fisigrafo (1 canal), 2) Transductor de presin P 1000-A con llaves de 3 vas, 3)
Cable conector # 9, 4) Acoplador 7173, 5) Estimulador con electrodos de estmulo de
ganchillo, 6) Mesa de ciruga para perro, 7) Pentobarbital sdico, 8) Solucin salina
isotnica heparinizada, 9) Dos catteres (para arteria y vena), 10) Jeringas de 10 y 3 ml, 11)
Cnula traqueal, 12) Hilo camo del cero, 13) Gasa, 14) Instrumental ciruga, 15)
Solucin ACh (1 mg/ml), 16) Adrenalina (1 mg/ml), 17) Prostigmina (1 mg/ml), 18)
Atropina (1mg/ml), 19) Solucin de KCI 0.5 M.
PROCEDIMIENTO
Antes de pasar al procedimiento quirrgico calibre un canal del Fisigrafo (ver prctica
del Fisigrafo). Una vez calibrado el acoplador, con el amplificador y el reproductor,
gire la perilla de MV/CM del amplificador a 20 MV/CM, apague el botn de RECORD
del amplificador y proceda a calibrar el canal con el traductor de presin P1000-A.
Calibracin del transductor P1000-A
NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor est sobre una superficie firme y as evitar las vibraciones que puedan
modificar la seal.
1. Una vez disecada y expuesta la arteria cartida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura ceflica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirn para fijar el catter arterial una
vez que este se haya insertado en la cartida.
2. La longitud del catter debe ser del tamao suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica traccin a las ligaduras ceflica y proximal para ocluir el flujo de
sangre en el pequeo segmento de cartida que queda entre las ligaduras. Con unas
tijeras pequeas, el cirujano hace una pequea incisin en la arteria, apenas
suficiente para introducir en direccin del corazn el catter.
4. Una vez que la punta del catter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catter ya que si esto ocurre el registro de la presin no se podr
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco ms las ligaduras.
5. Antes de conectar el catter con el transductor, inyecte un poco de solucin salina
heparinizada al animal para remover cualquier cogulo que se haya formado en el
catter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formacin de cogulos en el sistema.
6. Gire la llave de la vlvula A para conectar el catter con el transductor y encienda el
botn de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la PA.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no est registrando con
un trazo claro.
NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y pare el movimiento
del papel.
a) Ponga el papel a 0.25 cm/seg. Observe la subida y la cada de la presin. Con una
velocidad de papel de 5 cm/seg, tome unos 10 registros y determine la frecuencia
cardiaca. Tomando coma base la calibracin de 3 cm de desplazamiento de la
plumilla=100 mmHg, determine las presiones sistlica, diastlica y del pulso. Si es
necesario ajuste los controles de AMPLITUD y POSITION para obtener un mejor
registro. Si hacen ajustes, la recalibracin es necesaria.
b) Identifique en el registro la muesca dicrtica. Con una pinza hemosttica haga
presin gradual sobre el catter que conduce el transductor. Note la disminucin en el
tamao de la muesca dicrtica, luego una disminucin en la amplitud del pulso.
Utilizando la frmula para la presin arterial media (PAM) determnela y pase sus
resultados a la hoja de respuestas (PAM= presin diastlica +1/3 de la presin del
pulso).
c) Mueva en el transductor la palanca a la posicin MEAN y mida la presin arterial
media. Compare y diga si hay diferencias en las mediciones calculada y registrada.
Regrese la palanca a la posicin de PULSATILE. Pase sus resultados a la hoja de
respuestas
El reflejo del seno carotdeo generalmente se deprime por las sustancias anestsicas y
en ocasiones es difcil observarlo en la anestesia profunda.
a) Con la velocidad del papel 0.25 cm/seg tome un registro control. Un compaero
indicar con el botn marcador de eventos el momento en que inicia la induccin del
reflejo.
b) Para inducir el reflejo, aplique presin a ambos senos carotdeos del perro
presionando fuertemente con los dedos ndice y medio hacia dentro y hacia arriba y
abajo en el punto del cuello donde se juntan la rama horizontal y vertical del hueso
mandibular inferior. Simultneamente, con los dedos pulgares presione fuertemente
hacia adentro los glbulos oculares para obtener accin vagal adicional (reflejo
culovagal). Si no se obtuvo el reflejo, repita el procedimiento despus de la
administracin de prostigmina.
c) Mida la frecuencia cardiaca y las presiones sistlica, diastlica y media antes y
despus de la estimulacin de los senos. Identifique las caractersticas de la muesca
dicrtica. Pase sus resultados a la hoja de respuestas.
6) Efectos de la atropina
a) Con la velocidad del papel a 0.5 cm/seg, inyecte 500 g de acetilcolina por va
endovenosa y registre los cambios sobre la PA y FC (note que esta dosis de
acetilcolina es 100 veces mayor que la empleada para inducir bradicardia e
hipotensin).
RESULTADOS
INTRODUCCIN
Los riones regulan la composicin de los lquidos corporales por los siguientes
procesos: a) filtracin, b) reabsorcin y c) secrecin y excrecin. Muchos factores afectan
el volumen y la composicin de la orina. El flujo sanguneo arterial entra a los glomrulos
bajo presin haciendo que el agua y ciertos solutos sean filtrados hacia el espacio de
Bowman (filtrado glomerular) y al sistema tubular de la nefrona, en donde ocurren los
procesos mencionados. As, el filtrado experimenta cambios conforme fluye por el sistema
tubular. Cambios en la presin arterial y en la cantidad de lquido y concentracin de los
solutos en la sangre modifican la cantidad y concentracin de solutos de la orina formada a
travs del tiempo. Algunas de estos cambios ocurren en respuesta a la presencia de
hormonas, tales como la aldosterona, encargada de reabsorber de Na+ y secretar K+ y la
hormona antidiurtica (tambin llamada vasopresina) encargada de reabsorber el agua de
los tbulos colectores.
Se entiende por excrecin a la eliminacin de una sustancia del cuerpo, en este caso,
en la orina. Una sustancia es excretada si pasa al sistema tubular formando parte del filtrado
glomerular y no es reabsorbida, o bien, es excretada por secrecin activa del espacio
peritubular a la luz tubular.
Entre los factores que determinan la tasa de filtracin glomerular est la presin
arterial, que aumenta la presin de filtracin, con el consecuente aumento del filtrado
glomerular y del volumen lquido eliminado. Por otro lado, un aumento en la presin
coloidosmtica del plasma disminuir la presin de filtracin, lo que a su vez producir una
disminucin del filtrado glomerular y una disminucin del volumen lquido eliminado.
Por otro lado, cambios en la capacidad del epitelio tubular para reabsorber
sustancias desde el lquido tubular, tambin afectar el volumen de orina formado. As, en
condiciones normales toda la glucosa es reabsorbida, por lo que no se detectar en la orina;
sin embargo, cuando la carga tubular de glucosa aumenta ms all de cierto lmite
(transporte mximo), esta aparecer en la orina (glucosuria), adems, al aumentar su
concentracin en el sistema tabular ejercer presin osmtica, lo que retiene agua en el
sistema tubular, teniendo como resultado final un aumento en la excrecin de agua (diuresis
osmtica).
OBJETIVOS:
MATERIAL:
Biolgico: Perra
PROCEDIMIENTO:
Calibre un canal del Fisigrafo (ver prctica del Fisigrafo). Una vez calibrado gire
la perilla de MV/CM del amplificador a 20 MV/CM, apague el botn de RECORD del
amplificador y proceda a calibrar el canal con el traductor de presin P1000-A.
NOTA: El transductor es muy sensible por lo que hay que asegurarse de que el
transductor est sobre una superficie firme y as evitar las vibraciones que puedan
modificar la seal.
1. Una vez disecada y expuesta la arteria cartida izquierda, coloque tres ligaduras sin
anudar alrededor de la misma. Cuide de no lesionar la arteria. La ligadura ceflica
(distal), se anuda fuertemente para ocluir la arteria completamente. Las ligaduras
media y proximal, se anudan sin apretar y servirn para fijar el catter intra arterial
una vez que se haya insertado.
2. La longitud del catter debe ser del tamao suficiente para que al desplazarlo por la
arteria la punta quede a nivel del cayado de la aorta.
3. El ayudante aplica traccin a las ligaduras ceflicas y proximal para ocluir el flujo
de sangre en el pequeo segmento de cartida que queda entre las ligaduras. Con
unas tijeras pequeas, el cirujano hace una pequea incisin en la arteria, apenas
suficiente para introducir en direccin del corazn el catter.
4. Una vez que la punta del catter ha quedado en el cayado de la aorta, amarre las
ligaduras central y proximal. Lo apretado de los nudos no deben ocluir ni
parcialmente el catter ya que si esto ocurre el registro de la presin no se podr
realizar adecuadamente. Cuide que no haya escurrimiento de sangre. Si esto ocurre
apriete un poco ms las ligaduras.
5. Antes de conectar el catter con el transductor, inyecte un poco de solucin salina
heparinizada al animal para remover cualquier cogulo que se haya formado en el
catter. Esta maniobra se repite cuantas veces sea necesario para desprender y evitar
la formacin de cogulos.
6. Gire la llave de la vlvula A para conectar el catter con el transductor y encienda el
botn de RECORD del amplificador para iniciar el registro de la presin arterial.
7. Ajuste la perilla de FILTER del amplificador si la plumilla no est registrado con un
trazo claro.
NOTA: Cuando no este haciendo registro eleve las plumillas y la palanca del motor
del papel.
Abra la cavidad abdominal desde el apndice xifoides hasta la snfisis del pubis,
rechace las visceras con una gasa e identifique la vejiga, riones y ureteros. Asle uno de
los ureteros y pase dos ligaduras por debajo. Anude la ligadura ms distal del uretero y
proceda ha hacer una pequea incisin en el uterero e inserte un catter en direccin del
rin. Una vez que el catter ha sido introducido, sujtelo con la ligadura proximal. Repita
la maniobra en el uretero opuesto. Disponga los catteres ureterales de tal manera que
desemboquen en un tubo en Y (Fig. 1) y colecte la orina en un vaso de precipitado de 500
ml. Interponga la malla del transductor cuentagotas entre el tubo en Y y el vaso de
precipitado y proceda a registrar en el Fisigrafo el flujo urinario midiendo el nmero de
gotas de orina por minuto
Si el flujo de orina es muy lento o no hay, inyecte lentamente solucin salina al
0.9% a travs de la vena, para estabilizar el flujo urinario.
MANIOBRAS EXPERIMENTALES:
NOTA. Dado que lo que en esta prctica lo que importa son los cambios en la presin
arterial media, mueva la palanca del transductor para medir la presin media
Cada gota de nitrato de plata que tuvo que aadir equivale aproximadamente a 1 g
de NaCl por litro de orina. La cantidad total de NaCl en una muestra de orina se calcula de
la siguiente manera:
4. Diuresis osmtica
Una vez restablecido el flujo urinario basal, determine la presin arterial y el flujo
urinario y proceda a inyectar por el catter venoso 20 mg de furosemide. Determine los
cambios en la presin sangunea y el flujo urinario. Pase los resultados a la hoja de
respuestas.
Sacrifique al animal con una sobredosis de pentobarbital sdico, y disponga de el
adecuadamente. Recoja, lave y limpie el material utilizado y la superficie de trabajo.
RESULTADOS:
Observaciones
CONTROL ADRENALINA
Observaciones
Observaciones
5. Diuresis osmtica
________________mg ______________mg
Observaciones
CONTROL ADH
Observaciones
CONTROL FUROSEMIDE
Observaciones
8. Conteste lo siguiente:
INTRODUCCIN
MATERIAL
MANIOBRAS EXPERIMENTALES
Calibre dos canales del fisigrafo con sendos transductores de presin (P-1000-A),
de tal manera que 1 cm = 10 mm de Hg. Conecte uno de los transductores con una de las
mangueras del tubo en Y que corresponde a la va area. El otro transductor se conecta con
el tubo en Y del espacio intrapleural. Identifique sobre el papel a que presin corresponde
cada uno de los registros.
Abra la pinza del tubo que va al espacio intrapleural y aspire el aire, esto har que el
globo se infle. nflelo hasta que llene la cuarta parte de la cavidad torcica. Cierre la pinza
para separar el espacio intrapleural de la atmsfera. Lea y anote la presin intrapleural en
reposo. Observe el tamao del globo y la posicin que ha adoptado el diafragma.
Lentamente proceda a jalar (inspiracin) y a empujar (espiracin) el diafragma hacia
fuera y hacia adentro del trax. Observe los cambios de volumen del globo durante la
inspiracin y la espiracin. Lea y anote los cambios en las presiones intrapulmonar e
intrapleural. Mueva el diafragma en ambos sentidos, un poco ms rpido que antes. Anote
los cambios de presin intrapulmonar e intrapleural a esta nueva velocidad. Explique las
diferencias que se observan en las presiones intrapulmonares e intrapleural cuando se
respira con una frecuencia frecuencia.
RESULTADOS
MECNICA DE LA REPIRACIN
ESTADO DEL MODELO PRESIN PRESIN
DEL PULMN INTRAPULMONAR INTRAPLEURAL
Reposo (pulmn distendido)
Inspiracin lenta
Espiracin lenta
Inspiracin rpida
Espiracin rpida
Comparacin de las presiones intrapulmonar e intrapleural del modelo con las del humano
(compare con los datos del libro de texto)
EXPERIMENTAL TEXTO
CUESTIONARIO
BIBLIOGRAFA