Manual de Lab Biol Molecular y Celular en Farmacia

Benemrita Universidad Autnoma de Puebla
Vicerrectora de Docencia
Direccin General de Educacin Superior
Facultad de Ciencias Qumicas
LICENCIATURA EN FARMACIA
AREA: ASIGNATURA BASICA

(Anlisis Clnicos)
ASIGNATURA: MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR DE

LA CELULA
CDIGO: FARM-014L
CRDITOS: 5
FECHA: NOVIEMBRE 2011
Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 1

1. DATOS GENERALES:
Nivel educativo Licenciatura

Nombre del programa educativo: Licenciatura en Farmacia
Modalidad acadmica: Presencial
Nombre de la asignatura: Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula
Ubicacin: Nivel Formativo
Correlacin:
Asignaturas precedentes: No Aplica
Fisiologa 1, Microbiologa Farmacutica,
Asignaturas consecuentes:
Inmunologa y Anatoma Humana
Conocimientos habilidades Reflexin. Responsabilidad, colaborativo,
actitudes y valores previos cooperativo, tico y puntualidad
2. CARGA HORARIA DEL ESTUDIANTE
Horas por periodo Total de Nmero

Concepto horas por de
Teora Prctica periodo crditos
Horas teora y prctica
48 32 80 5
(16 horas = 1 crdito)
Total 48 32 80 5
Bertha Alicia Len Chvez

Ada Osorno Tecpa
Autores:
Martha Alicia Salgado Jurez
Sara Silvia Domnguez Bez
Fecha de diseo: 12 de Marzo de 2008
Fecha de la ltima actualizacin: Agosto 2014
Fecha de aprobacin por parte de la
28 DE Noviembre de 2011
academia de rea
Fecha de aprobacin por parte de CDESCUA 30 de Noviembre de 2011
Fecha de revisin del Secretario Acadmico 30 de Noviembre de 2011
MC SARA SILVIA DOMNGUEZ BAEZ
MC AIDA OSORNO TECPA
DC BERTHA ALICIA LEN CHVEZ
Revisores:
M.C. MARTHA ALICIA SALGADO JUAREZ
M.C.MARICELA TORRES Y SOTO
MC RAFAEL MUOZ BEDOLLA
Sinopsis de la revisin y/o actualizacin Se hace la revisin del presente programa,
revisando la relacin de la asignatura con el perfil de
egreso.

De cada una de las unidades del programa y

revisin del manual de Prcticas del laboratorio
PERFIL DESEABLE DEL PROFESOR (A) PARA IMPARTIR LA ASIGNATURA:
Disciplina profesional: Q.F.B, Q.F. Q.C.

Nivel acadmico: Maestro en Ciencias
Experiencia docente: 1 ao
Experiencia profesional: 1 ao

Reglamento del Laboratorio Biologa Celular y Molecular

El alumno deber:
Siempre presentarse con bata blanca, incluso si en la sesin slo se llevan a cabo
seminarios y o exmenes.
Cumplir con las actividades y o tareas solicitadas por la profesora.
Asistir puntualmente a las sesiones, slo tendr 10 minutos de tolerancia, una vez que
se pase lista, si llega despus, se considerar como falta.
Colocar fuera de las mesas de trabajo, mochilas, suteres, chamarras u otros objetos
que no requiera para la realizacin de la prctica.
Traer el material biolgico o de otro tipo solicitado por la profesora.
Siempre traer guantes, cubre boca y perilla para las pipetas.
Siempre traer jabn y papel sanitario para el aseo de las manos y para la limpieza del
material de vidrio y de las mesas de trabajo.
Solicitar el material que requiere para las prcticas por medio de un vale, ya sea a la
profesora o a la persona encargada del rea del material y reactivos.
Manejar con mucho cuidado el material, las soluciones o reactivos.
Siempre pipetear las soluciones, con la perilla correspondiente y nunca con la boca.
Dejar los frascos de las soluciones en el lugar de donde los tom, despus de su uso.
No desechar soluciones de colorantes, papeles, muestras biolgicas slidas
(vegetales), ni material de vidrio roto (portaobjetos, cubreobjetos, tubos) en las tarjas.
No dejar pipetas contaminadas directamente sobre las mesas.
Colocar el material contaminado en las bolsas o recipientes correspondientes, de
acuerdo a la NOM-087-SEMARNAT-SSA1-2002, Proteccin ambiental-Salud
ambiental- Residuos peligrosos biolgicos infecciosos- Clasificacin y
especificaciones de manejo.
Manejar y cuidar los microscopios de acuerdo a la informacin proporcionada al inicio
del curso.
Anotarse en la libreta que est al lado del microscopio que utilice, y en su caso
reportar cualquier anomala o desperfecto hallado en el microscopio antes o durante
su manejo.
Limpiar el aceite de inmersin de los objetivos del microscopio, de acuerdo a las
indicaciones dadas por la profesora.
Al trmino de la prctica, dejar desconectados los microscopios, cubrir el microscopio
con su correspondiente funda y dejar cerrada la caja con llave.
Al trmino de la prctica, dejar limpias las mesas, libres de papeles, material biolgico
o de otro tipo.
Al concluir la prctica, entregar el material que emple segn las indicaciones de la
profesora, as como solicitar la devolucin del vale.
En caso de romper algn material, deber reponerlo a la brevedad posible, para lo
cual se le retendr el vale.
En caso de algn incidente o accidente, deber informarle a la profesora, para que se
tomen las medidas pertinentes.
Antes de retirarse del laboratorio, checar que no se le olvide algo, ya que la profesora
no se har responsable por manuales, celulares, libros, batas, olvidados, etc.

Los RPBI se consideran como residuos peligrosos y como tal se debe establecer un
plan integral para su manejo, almacenamiento, transporte, tratamiento y disposicin
final.
PRINCIPALES MODIFICACIONES EFECTUADAS EN LA NOM-087-SEMARNAT-

SSA1-2002.
Criterios para considerar un residuo como RPBI
Nueva clasificacin de los RPBI
Cantidad de sangre o fluido corporal en los RPBI
Niveles de los establecimientos generadores
Periodo de almacenamiento temporal de los RPBI en los establecimientos
generadores.
Atribucin a la Secretaria de Salud, para la vigilancia de la norma.
Los lugares que ofrecen atencin mdica y los centros de investigacin, son
considerados establecimientos generadores de materiales contaminados por agentes
biolgico-infecciosos. Estos desechos se denominan Residuos Peligrosos
Biolgico-Infecciosos (RPBIs), su manejo y disposicin inadecuados, representa un
riesgo para la salud del personal que labora en estos sitios, as como para la salud de
la poblacin aledaa, ocasionando adems, el deterioro del medio ambiente. Los
microorganismos patgenos, virus, parsitos y priones (estructuras proteicas) son
ejemplos de agentes biolgicos-infecciosos. Para que un microorganismo sea capaz
de producir enfermedad, es decir, que sea un Agente Biolgico-Infeccioso, debe
ocurrir lo siguiente: tener una concentracin suficiente (inculo), estar en un ambiente
propicio (supervivencia), en presencia de una va de entrada en un hospedero
susceptible.
En la Nueva clasificacin, los RPBIs son:

La sangre y sus componentes nicamente en estado lquido.
Los cultivos de agentes biolgico-infecciosos generados en:
Los procedimientos de diagnstico e investigacin.
La produccin y el control de agentes biolgico-infecciosos.
Los utensilios desechables usados para contener, transferir, inocular y mezclar
cultivos de agentes biolgico-infecciosos.
Los tejidos, rganos y partes que se extirpan o remueven durante las autopsias, las
cirugas o algn otro tipo de intervencin quirrgica que no estn conservados en
solucin de formol.
Las muestras biolgicas empleadas en los anlisis clnicos (excepto las muestras de
orina y de excremento), y aquellas usadas en los anlisis patolgicos.
En los centros de investigacin, los cadveres y las partes de los animales que fueron
inoculados con agentes entero patgenos.
Los residuos no anatmicos:
Los recipientes desechables que contengan sangre lquida.

Los materiales desechables que contengan fluidos y secreciones corporales,

provenientes de los pacientes de quienes se sospechen o exista un diagnstico de
una enfermedad infecto-contagiosa como la tuberculosis.
Los materiales de curacin empapados de sangre lquida o de cualquier otra
secrecin o lquido corporal.
Los materiales absorbentes utilizados en las jaulas de los animales que hayan sido
expuestos a agentes entero patgenos.
Los materiales punzo cortantes desechables como las hojas de bistur, las agujas de
sutura y los estriles de catter. El material de vidrio de laboratorio, que se haya
roto al momento de ser manipulado, se deber desinfectar o esterilizar y ya no se
considerar como RPBIs, por lo que se podr disponer posteriormente como
residuo municipal.
La disposicin general para el desecho de RPBIs en el laboratorio queda de la siguiente
manera:
TIPO DE ESTADO
ENVASADO COLOR
RESIDUO FISICO
Recipientes
Sangre Lquidos Rojo
hermticos
Cultivos y
cepas de Bolsas de
Slidos Rojo
agentes polietileno
infecciosos
Bolsas de
Patolgicos Slidos Amarillo
polietileno
Residuos no Bolsas de
Slidos Rojo
anatmicos polietileno
Recipientes
Objetos
Slidos rgidos Rojo
punzocortantes
polipropileno
I. Para que un material de curacin se considere como RPBIs, debe ser desechable y
estar goteando, chorreando o escurriendo sangre o cualquier lquido corporal
contemplado en la norma.
II. Niveles de los Establecimientos Generadores
NIVEL I NIVEL II NIVEL III

Establecimientos de Unidades hospitalarias Unidades hospitalarias
atencin mdica hasta de 6 hasta 60 camas. de ms de 60 camas.
con 5 camas e
instituciones de
investigacin con
excepcin de los
sealados en el Nivel

III.
Centros de produccin
Laboratorios clnicos y Laboratorios clnicos y
e investigacin
bancos de sangre que bancos de sangre que
experimental en
realicen anlisis de 1 a realicen anlisis de 51
enfermedades
50 muestras al da. a 200 muestras al da.
infecciosas.
Bioterios que se Laboratorios clnicos y
dediquen a la bancos de sangre que
Unidades hospitalarias
investigacin con realicen anlisis a ms
psiquitricas.
agentes biolgico- de 200 muestras al
infecciosos. da.
Establecimientos que Establecimientos que
Centros de toma de
generen de 25 a 100 generen ms de 100
muestras para anlisis
kilogramos al mes de kilogramos al mes de
clnicos.
RPBIs. RPBIs
I. Perodo de almacenamiento temporal de los RPBIs en los establecimientos

generadores.
NIVEL I NIVEL II NIVEL III

30 das mximos de 15 das mximos de 7 das mximos de
almacenamiento almacenamiento almacenamiento
temporal. temporal. temporal.
No requiere de rea Si requiere de rea Si requiere de rea
especfica para el especfica para el especfica para el
almacenamiento almacenamiento almacenamiento
temporal. temporal. temporal.
Se podrn ubicar los
Deber cumplir con las Deber cumplir con las
contenedores
especificaciones especificaciones
especficos para los
establecidas en la establecidas en la
RPBIs* en el lugar
NOM-087- NOM-087-
ms apropiado dentro
SEMARNAT-SSA1- SEMARNAT-SSA1-
de sus instalaciones,
2002, para el rea de 2002, para el rea de
de manera tal que no
almacenamiento almacenamiento
obstruyan las vas de
temporal. temporal.
acceso.
*Los contenedores pueden ser plsticos o metlicos, con sealamiento del smbolo
universal de RPBIs y no mezclarlos con la basura municipal.
II. Atribucin a la Secretaria de Salud. Corresponde a la Secretaria de salud regular y

vigilar el equipamiento, instalacin y funcionamiento de los servicios mdicos que son
los principales generadores de los RPBIs, por ello participa complementariamente con
la SEMARNAT en la regulacin y vigilancia de la norma, para lo cual se estableci en

el cuerpo de la misma, la disposicin de crear las Bases de Colaboracin que firmarn
ambas dependencias y que sern publicadas en el Diario Oficial de la Federacin, en
las que se especificarn los puntos de la norma que vigilarn cada una de ellas.
PRESENTACIN
Este manual tiene como finalidad el analizar las diferencias estructurales, funcionales y
evolutivas de una clula procariota y eucariota, as como los distintos mtodos de
observacin microscpica, proporcionara destreza en poner en marcha cualquier microscopio
de luz y su observacin correcta a travs de l en preparaciones citolgicas, explorar
experimentalmente algunas caractersticas de las biomolculas proteicas y nucleares que
permiten su identificacin, manipulacin adecuada de reactivos qumicos utilizando las
reglas de seguridad en el uso de estas sustancias. Analizar algunas de las funciones que se
llevan a cabo a nivel de membrana celular y ncleo, tales como permeabilidad celular y
divisin celular.
Objetivo General:
Conocer la estructura y funciones de los componentes de la clula y la expresin de genes
para la sntesis de protenas de la clula y las herramientas de biologa molecular para su
estudio.

GUA PARA LA PREPARACIN DE LOS SEMINARIOS
SEMINARIO 1: MICROSCOPA.
Revisar la informacin de la prctica 1. Fundamento fsico, manejo y cuidados del
microscopio.
Significado de la palabra microscopio (etimologa).
Concepto de microscopio.
Clasificacin de los microscopios: a) simples y compuestos, b) ptico y electrnico.
Slo explicar las diferencias entre ellos. Los tipos o variantes se vern ms adelante *
Microscopio compuesto: concepto, sistemas que lo constituyen y su funcin. Presentar
una imagen del microscopio, con los nombres de cada una de las partes que lo
constituyen
Sistema mecnico y sus componentes. Funcin de cada componente.
Sistema ptico y sus componentes. Funcin de cada componente. Explicar el por qu
a unos objetivos se les llama secos, y a otros de Inmersin.
Sistema de iluminacin y sus componentes. Funcin de cada componente.
Principio o fundamento ptico o fsico del microscopio compuesto.
Presentar una imagen para explicarlo.
Concepto de imagen virtual, aumentada e invertida.
Concepto de Poder de resolucin.
Concepto de Apertura numrica.
Concepto de Poder de penetracin.
Concepto de Poder de definicin.
Concepto de ndice de refraccin.
Importancia del uso del aceite de inmersin y caractersticas del mismo.
Aplicaciones del microscopio compuesto.
Uso adecuado y cuidados del microscopio para: el transporte, lugar para guardarlo,
para su manejo y para la limpieza.
Iluminacin kohler; que es, su finalidad, as como los pasos a seguir (solo mencionar).
Recomendaciones para el uso de los objetivos: enfoque y los pasos a seguir.
Tipos de microscopios compuestos*: hacer un listado de los mismos ( estereoscopios,
de luz ultravioleta, de fluorescencia, de contraste de fases, de campo obscuro,
de polarizacin, de microscopa por luz reflejada, y otros que se reporten en la
literatura). Explicar brevemente su fundamento y su aplicacin o utilidad.
Presentar imgenes de los mismos.
Microscopio electrnico*: explicar brevemente su fundamento, su aplicacin o utilidad
y sus variantes (de barrido, de transmisin, y otros que se reporten en la literatura).
Presentar una imagen de dichos microscopios.

SEMINARIO 2: OBSERVACIN DE CLULAS PROCARITICAS Y SUS

CARACTERSTICAS TINTORIALES
o Concepto o definicin de clula procaritica y etimologa.

o Caractersticas generales; cmo estn organizadas, qu organelos o estructuras
contienen. (No deben describir stos ltimos). Presentar imgenes
o Clasificacin general de las clulas procariticas, de manera enlistada y slo hablar de
la morfologa y dar dos ejemplos de cada tipo.
o Concepto o definicin de bacteria, tamao, clasificacin morfolgica (cocos, bacilos,
etc.) y dar dos ejemplos de cada forma, y presentar imgenes.
o Tincin de Gram: fundamento.
o Diferencias entre las bacterias Gram positivas y Gram negativas, en cuanto al grosor y
composicin de la pared celular (enfocarse en los peptidoglicanos), y el color que
adquieren con los colorantes Safranina y cristal violeta.
o Importancia mdica o clnica de la identificacin de bacterias Gram positivas y Gram
negativas.
o Dar dos ejemplos de bacterias Gram positivas y 2 de Gram negativas. Presentar
imgenes.
o Concepto o definicin actual de virus
Mencionar la importancia mdica o clnica de los virus y dar dos ejemplos
Complemento SEMINARIO 3: CLULAS EUCARITICAS Y SU DIVERSIDAD.

Concepto o definicin de clula eucaritica y etimologa.
Caractersticas generales; cmo estn organizadas, qu organelos o estructuras
contienen. (No deben describir stos ltimos). Presentar imgenes
Clasificacin general de las clulas eucariticas, de manera enlistada y slo
mencionar.
Clula animal; concepto o definicin, forma, tamao y estructuras que contiene.
Presentar imgenes y 2 ejemplos.
Clasificacin general de los tejidos humanos, slo mencionarla.
Eritrocito o glbulo rojo: forma, tamao y funcin en el organismo humano.
Presentar imgenes.
.Protozoarios; concepto o definicin, forma, tamao y clasificacin (slo
mencionarla). Presentar imgenes y ejemplos (dos de protozoarios parsitos y
varios de protozoarios de agua dulce).
Hongos microscpicos: mohos y levaduras. Concepto o definicin de cada uno,
Morfologa de mohos (micelio, hifas, esporas, esporangios, etc. ) y de levaduras,
tamao, forma y estructuras que contienen. Diferencias con respecto a los
. otros tipos de clulas eucariticas. Dar como ejemplos el moho del pan y de la
tortilla, presentando imgenes de ellos. Dar dos ejemplos de levaduras y presentar
imgenes.
Presentar en una tabla, las diferencias entre clulas eucariticas y clulas

procariticas.
SEMINARIO4: LA CLULA VEGETAL
Concepto de clula eucaritica.

Mencione los organelos de la clula vegetal
3 ejemplos de diferentes formas de clulas vegetales y sus tamaos, presentar
imgenes.

Diferencias entre la clula animal y vegetal.
Importancia de la pared celular de los vegetales y cul es su composicin.
Mencione los tipos de plstidos que se encuentran en la clula vegetal.
Cul es la importancia de los cloroplastos.
Que es la clorofila y cuantos tipos hay.
Que es la fotosntesis.
Mencione cuales son las sustancias inorgnicas que utilizan las plantas para elaborar
energa.
Cules son los productos finales de la fotosntesis.
Mencione 3 ejemplos de plantas unicelulares.
Mencione 5 ejemplos de plantas diferenciadas.
Mencione brevemente cual es la importancia del reino vegetal para la vida en este
planeta.
SEMINARIO5: PERMEABILIDAD CELULAR
Caractersticas generales de la membrana celular: composicin qumica, organizacin

estructural y funciones. Presentar imagen.
Conceptos o definiciones de smosis, presin osmtica y tonicidad.
Concepto de solucin fisiolgica; clasificacin en hipotnicas, hipertnicas e
isotnicas.
Decir cul es la presin osmtica del Lquido extracelular o del plasma sanguneo, en
el humano.
Decir que es osmolalidad y osmolaridad, as como las abreviaturas o smbolos de sus
unidades de medicin (osmoles).
Ejemplo de soluciones fisiolgicas de importancia para el humano: solucin salina
isotnica, solucin Ringer lactato y suero glucosado al 5%; de cada una decir la
composicin qumica y su porcentaje para ser fisiolgicas.

Solucin salina hipotnica para el humano: composicin qumica y su porcentaje.

Solucin salina hipertnica para el humano: composicin qumica y su porcentaje.
Clasificacin del agua destilada dentro de las soluciones fisiolgicas, hipertnicas,
hipotnicas o isotnicas.
Recordar la morfologa de los eritrocitos y presentar imagen.
Efecto de las soluciones fisiolgicas, hipertnica, hipotnica e isotnica (incluyendo el
agua destilada) sobre las clulas del humano, en particular sobre los eritrocitos o
glbulos rojos. Explicar lo que les sucede y por qu, a los eritrocitos, con cada una de
las soluciones hipertnica, hipotnica e isotnica. Presentar imgenes
Qu importancia tiene en el laboratorio clnico el no usar tubos, pipetas o cualquier
otro material, mojado con agua, que vaya a estar en contacto con sangre.
SEMINARIO 6: DIVISIN CELULAR
Tipos de divisin celular en clulas procariticas. Slo mencionarlas

Tipos de divisin celular en clulas eucariticas. Slo mencionarlas
Concepto de cromosoma y estructura. Presentar imagen con nombres de cada parte.
Qu es la mitosis o divisin mittica: fases y explicacin breve de las mismas.
Presentar imgenes.
Objetivos o finalidad de la divisin mittica, en el humano.
Nmero de clulas que se forman al final de la mitosis.
Ejemplo de cuatro clulas del humano que llevan a cabo mitosis.
Concepto de clula haploide y nmero de cromosomas, para el humano.
Concepto de clula diploide y nmero de cromosomas para el humano.
Qu es la meiosis o divisin meitica: fases y explicacin muy breve de las mismas.
Presentar imgenes.
Objetivos o finalidad de la divisin meitica, en el humano.
Nmero de clulas que se forman al final de la meiosis.
Ejemplo de clulas del humano que llevan a cabo meiosis.
Tcnicas de tincin para la observacin de la divisin celular, en clulas de la cebolla.
Slo mencionarlas, sin explicar los pasos.
Investigar que Tcnicas de tincin o mtodos para la observacin de la divisin
celular, en clulas del humano (y en qu tipo de clulas), existen. Slo mencionarlas,
sin explicar los pasos. Presentar imgenes.
Aplicacin o utilidad mdica de las tcnicas de tincin para observar la divisin celular
en clulas del humano, sobre todo para observar los cromosomas. Presentar
imgenes.

PRACTICA 6. RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS DE IMPORTANCIA BIOLGICA

1.- Cul es funcin principal de los aminocidos en los organismos vivos?
2.- Cul es la parte de la clula en donde se sintetizan los aminocidos que forman las
protenas?
3.- Menciona las principales funciones de las protenas para la clula y los organismos
vivos?
4.- Por qu se utiliza la albmina como modelo para las determinaciones en esta prctica?

PRCTICA 1.
FUNDAMENTO FSICO, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO. APLICACIONES
DEL MICROSCOPIO
INTRODUCCIN.87
El microscopio es el aparato ms importante e indispensable en un laboratorio de Biologa,

su funcin es permitir observar la imagen considerablemente aumentada de un objeto u
organismo que a simple vista pasa desapercibido. La palabra microscopio proviene de dos
races griegas: Micros; que quiere decir pequeo y scopein ; que significa observar. En la
actualidad existe toda una ciencia dedicada a estudiar las caractersticas de estos aparatos
que cada vez son ms precisos y espectaculares, nos referimos a la creacin de la
microscopa; sta es cada da ms importante, ya que el conocer las caractersticas de un
microscopio nos permite sacar el mayor provecho de l, dndole una mayor aplicacin.
Existen dos tipos bsicos de microscopio: el simple y el compuesto.
El microscopio simple est formado tan solo por una lente convergente a la que tambin
se le llama "lupa", la cual nos proporciona una imagen virtual y aumentada.
El microscopio compuesto est constituido por dos sistemas de lentes:
1.- El sistema que est constituido por los objetivos, que son las lentes quedan ms cerca
del objeto de observacin.
2.- El sistema constituido por los oculares, que son las lentes que quedan ms cerca del
observador.
Cada sistema proporciona un aumento independiente y el producto de estos aumentos
parciales dados por oculares y objetivos, determina el aumento total del microscopio.
Para manejar con mayor eficiencia un microscopio, es necesario conocer cmo est
constituido. Las partes que lo constituyen se agrupan en tres sistemas: mecnico, ptico, y
de iluminacin.
A) El sistema mecnico est formado por: una base, la columna, el tubo del microscopio, la
platina, los tornillos para el enfoque y el revlver.
B) El sistema ptico est representado por las lentes oculares y las lentes objetivos.
C) El sistema de iluminacin est representado por la fuente de luz (foco), el condensador
y el diafragma.
Debemos recordar que el objetivo y el ocular del microscopio funcionan como lentes
convergentes biconvexas, por lo que la imagen final que nos proporciona el microscopio
compuesto es virtual, aumentada e invertida.
Toda imagen proporcionada por el sistema ptico de un microscopio, debe reunir tres
caractersticas: poseer un buen poder de resolucin, de penetracin y de definicin.
El poder de resolucin (P.R.): es la caracterstica del microscopio que permite ver con
claridad las estructuras finas y muy cercanas entre s; podemos ver que este poder de
resolucin es directamente proporcional a la longitud de onda media de la luz blanca (550

-6
nm) (1 nm= 10 mm) e inversamente proporcional a la apertura numrica (A.N.) del objetivo.
Esto es: P.R. = O.61
y
A.N.
Donde P.R.: es la distancia mnima entre dos puntos de la muestra que permite verlos
separados; 0.61 es una constante que representa la diferencia mnima en contraste que es
detectable; es la longitud de onda de la luz empleada y A.N: la apertura numrica de
y
la lente del objetivo.
Si las estructuras que se desean precisar, estn colocadas a una distancia menor una de
otra, necesitaremos un objetivo de mayor apertura numrica.
La apertura numrica (A.N.): es una medida del ngulo mximo con que los rayos
provenientes del objeto inciden en la lente del objetivo del microscopio y de ah son llevados
al ojo del observador. Ahora bien, hay dos factores que determinan la apertura numrica: el
ngulo que forman los rayos que penetran por el objetivo y el ndice de refraccin del medio
que exista entre el objeto a observar y el objetivo, dicho de una manera matemtica, la
apertura numrica es el producto del seno del semi ngulo de abertura (que mide la
capacidad de la lente para concentrar la luz) por el ndice de refraccin del medio que existe
entre el objetivo y el objeto a observar. Todos los objetivos traen grabada la apertura
numrica.
El poder de penetracin: es la caracterstica que permite definir simultneamente las
estructuras existentes a diferentes niveles de la preparacin; esto solo se puede lograr con
objetivos de pequeo aumento, a medida que aumenta el poder del objetivo y la apertura
numrica, es menor el poder de resolucin.
El poder de definicin: es la caracterstica que permite una imagen clara, precisa y con
bordes definidos; para esto, el microscopio debe presentar lentes bien pulidas, con sus
aberraciones cromtica y de esfericidad, corregidas.
El ndice de refraccin: es una medida de la velocidad comparativa de luz en un medio.
Cuando existe aire entre la lente y el cubreobjetos, parte de la luz proyectada a travs de la
muestra es desviada (refractada), por lo que a medida que se usa un objetivo de mayor
aumento, la prdida de resolucin tiene un efecto significativo sobre la calidad de la imagen.
El uso de aceite de inmersin (que tiene el mismo ndice de refraccin que el vidrio) entre la
muestra y la lente del objetivo de inmersin, evita el cambio del ndice de refraccin, y por
lo tanto, mejora la resolucin.
OBJETIVO. Que el alumno identifique cada uno de los componentes del microscopio y sepa
qu funcin desempea cada uno, que logre paso a paso un enfoque correcto y que aprenda
a detectar los errores de manejo para corregirlos; adems aprender a tener los cuidados
correspondientes al microscopio.
MATERIAL. Microscopio ptico, portaobjetos, cubreobjetos y alguna muestra para observar

al microscopio.
PROCEDIMIENTO:
a) seale cada componente del microscopio y anote su funcin y a qu sistema pertenece.
b) observe los grabados en los oculares y en los objetivos y anote su significado.
c) ensaye el enfoque de una preparacin, empezando con el objetivo de menor aumento,
anotando el aumento total que logra de su imagen en cada caso.
d) Indique cul es el poder de resolucin de cada objetivo.
e) mida el grosor, largo y ancho del portaobjetos y del cubreobjetos.
f) Ensaye la iluminacin Khler.
AJUSTE: en la actualidad casi todos los microscopistas practican la iluminacin basada en

los principios establecidos por Khler, conocida como iluminacin de Khler. Su finalidad
es obtener una distribucin homognea de la iluminacin, sobre el espcimen a observar, a
pesar de las irregularidades de la fuente de luz.
Pasos a seguir para la iluminacin de Khler:

1. Prender la fuente de luz (foco).
2. Enfocar la preparacin con el objetivo de menor aumento (10X)
3. Subir el condensador hasta el tope, con mucho cuidado.
4. Cerrar por completo el diafragma de la lmpara ( o diafragma de campo) colocado en
la base del microscopio (de dnde sale la luz).
5. Cerrar por completo el diafragma de Iris.
6. Observar la figura geomtrica que aparece en el campo (hexgono), y a la cual se le
llama diafragma.
7. Bajar el condensador lentamente hasta lograr la mxima nitidez de los bordes de la
figura geomtrica o diafragma
8. Si no est centrado el diafragma en el campo, entonces:
9. Centrar el diafragma en el campo con los tornillos de centrado que estn en el
condensador, movindolos simultneamente y lentamente, para evitar que el
diafragma salga del campo.
10. Abrir el diafragma de campo luminoso (o de la lmpara) hasta obtener iluminada un
rea igual al campo visual.
11. Si el diafragma est centrado en el campo, ningn vrtice debe salir del campo y los
espacios que hay entre vrtice y vrtice, deben ser iguales.
12. Si no es el caso, debe cerrarse un poco el diafragma de campo luminoso y repetir los
pasos 9, 10 y 11.
13. Abrir completamente el diafragma de campo luminoso. (ste debe estar siempre,
completamente abierto o ligeramente cerrado, slo se cierra cuando se hace la
iluminacin Khler).
14. Abrir poco a poco el diafragma de Iris, hasta obtener una iluminacin que no lastime a
los ojos.
15. Ajustar la intensidad de la luz con el tornillo de control de la intensidad, hasta donde
no lastime a los ojos.
16. Ajustar la altura del condensador dependiendo del objetivo a utilizar.
17. Verificar el ajuste observando por el ocular, el campo debe estar iluminado total y
homogneamente.
Pasos a seguir para enfocar el espcimen o muestra:
1) Con los tornillos macromtricos, bajar con cuidado la platina hasta el tope.
2) Con el revlver, colocar el objetivo de menor aumento (seco dbil) en direccin del
orificio de la platina.
3) Colocar el portaobjetos que contiene la muestra, en la platina, centrndolo en el rea
del orificio de la platina.
4) Asegurar el portaobjetos con las pinzas que hay en la platina.
5) Con los tornillos macromtricos, sin ver por los oculares, subir lentamente la platina
hasta que llegue al tope (actualmente la mayora de los microscopios compuestos
tienen un tope slo para el objetivo seco dbil, se recomienda verificar esto antes
de colocar un portaobjetos).
6) Sin ver todava por los oculares, verificar hacia qu sentido (si es hacia m, o hacia
fuera) se tienen que mover los tornillos macromtricos para bajar la platina.
7) Prender la fuente de luz (lmpara o foco).
8) Con los tornillos macromtricos, bajar la platina lentamente hasta obtener una imagen
del espcimen.
9) Afinar la imagen con los tornillos micromtricos.
10) Ajustar la altura del condensador.
11) Ajustar la cantidad de luz con el diafragma de iris.
12) Ajustar la intensidad de luz con el tornillo de control de la intensidad.
13) Observar la muestra.
Si se va a observar con los otros objetivos:
14) Con el revlver cambiar primero al objetivo seco fuerte y seguir los pasos 9 a 13.
15) Con el revlver cambiar al objetivo de inmersin y seguir los pasos 9 a 13
16) Antes de colocar el objetivo de inmersin en direccin de la muestra, debe siempre
colocarse una gotita de aceite de inmersin.
Recomendaciones para el uso de los objetivos:
Objetivo Objetivo Objetivo de

Caracterstica
Seco dbil Seco fuerte Inmersin
Aproximadamente Aproximadamente
Altura del de 1- 2 cm por de 1- 2 cm por Condensador
condensador debajo de la debajo de la pegado a la platina
platina platina
Cantidad de luz
Poca X Media XX Mucha XXX
(Diafragma de Iris)

Intensidad de luz
(Tornillo de control Baja X Media XX Alta XXX
de intensidad)
X: significa una medida cualitativa a manera de comparacin.
MICROSCOPIO COMPUESTO Y SUS COMPONENTES PRINCIPALES
OCULARES
CABEZAL
BRAZO
REVOLVER
OBJETIVOS DESPLAZAMIENTO PLATINA
MACROMTRICO
PLATINA
MICROMTRICO
FOCO
CONDENSADOR
BASE
PROCEDIMIENTO:
- Identificar cada componente del microscopio, sealar su funcin.
- Observar y anotar las cifras grabadas en el ocular y objetivos.
- Enfoque de varias preparaciones.

PRCTICA N 2
OBSERVACIN DE CLULAS PROCARITICAS Y SUS
CARACTERSTICAS TINTORIALES
INTRODUCCION.- La fijacin de las clulas o tejidos puede ser definida como el

procedimiento que permite la preservacin selectiva de su organizacin morfolgica y de su
composicin qumica para ser observados al microscopio.
Los mejores fijadores contienen una o ms sustancias que precipitan las protenas de las
clulas, o que las hacen insolubles sin llegar a precipitarlas. Segn cul sea el fijador y las
condiciones bajo las cuales se lo utilice, la fase slida de protoplasma se separa de la
acuosa en forma de fibrillas, grnulos, redes o vacuolas. La separacin de la fase slida se
produce esencialmente debido a las uniones entre las molculas proteicas, aumentando de
esta manera su estabilidad para los tratamientos posteriores y la observacin
El fijador usado debe ser seleccionado de acuerdo a su actividad qumica especfica, de
manera que aquellas estructuras que se deseen conservar, sean preservadas con exclusin
de otros materiales que podran interferir con el efecto deseado. Es necesario tambin evitar
toda destruccin del material que va a ser estudiado y distribuir el efecto del fijador
uniformemente en toda la clula.
Por otro lado, la seleccin de un colorante para el estudio de las clulas por medio del
microscopio ptico, depende de distintos factores, que incluyen la naturaleza del material a
estudiar, el tipo de fijador utilizado y la reactividad qumica del colorante.
La tincin de las bacterias por el mtodo de Gram, permite clasificar a las bacterias
selectivamente en dos grupos: Gram positivas y Gram negativas. Las primeras retienen el
colorante cristal violeta sin decolorarse por los reactivos diferenciadores que se aplican en la
tcnica de tincin.
Las bacterias Gram positivas aparecen en visin microscpica teidas de un color morado
intenso, por el cristal violeta, debido a la capa gruesa de peptidoglicanos
Las bacterias Gram negativas, aparecen en visin microscpica teidas de un color

sonrosado dbil, por la Safranina., debido a la capa fina de peptidoglicanos.
OBJETIVO.- Que el alumno conozca a las bacterias como el principal ejemplo de clulas
procariticas y que aprenda a emplear la tcnica de tincin de Gram para bacterias, como
introduccin a la identificacin morfolgica y afinidad de las clulas a los colorantes.
MATERIAL BIOLGICO: Ndulos de las races de leguminosas, alfalfa, trbol, soya, etc.
Vino agriado, yogurt, infusin vegetal.

REACTIVOS: Alcohol etlico al 96 o alcohol etlico-acetona 1:1, cristal violeta, lugol,

safranina, aceite de inmersin.
PROCEDIMIENTO:
1. Se lavan los ndulos de las races de leguminosas, se parten y colocan sobre
portaobjetos, se agrega una gota de agua, se quitan los residuos y se fijan a la llama
del mechero, se colocan en el puente de tincin y se tien.
2. Con una asa se toma una pequea porcin de la superficie del vino agriado y se
extiende sobre un porta con una gota de agua, se fija a la llama del mechero y se tie.
3. Con una pipeta Pasteur se toma una pequea gota de de yogurt y se coloca en el
portaobjetos en el que previamente se deposit una gota de agua destilada, se mezcla
y se hace una extensin delgada y se seca a la llama del mechero. Lavar la
preparacin con xilol por escurrimiento, para eliminar la grasa que contiene el yogurt y
dejar que se seque al aire.
4. Se toma una pequea porcin de la pelcula fina que aparece en la superficie de la
infusin, haciendo un frote sobre un portaobjetos, se seca a la llama del mechero y se
tie.
TCNICA DE TINCIN DE GRAM
1. Coloque la laminilla en el soporte de la tina de tincin, cuidando que quede completamente

horizontal.
2. Agregue unas gotas del colorante cristal violeta, cubriendo la extensin; el tiempo de
actuacin del colorante es de dos minutos.
3. Lave con agua destilada para arrastrar el colorante, se hace por goteo con una pipeta
Pasteur, sin exceder el lavado y nunca directamente sobre el extendido para evitar el arrastre
del mismo.
4. Vuelva a colocar la laminilla en el soporte de la tina de tincin.
5. Agregue solucin de lugol, cubriendo el frotis y deje actuar durante un minuto.
6. Lave nuevamente con agua destilada.
7.. Agregue unas gotas de alcohol etlico al 96 o alcohol etlico-acetona 1:1, cubriendo el
frotis y deje actuar de 30 segundos a un minuto, para arrastrar el colorante que queda libre y
decolorar.
8. Lave cuidadosamente con agua destilada.
9. Agregue unas gotas de safranina cubriendo el frotis y deje actuar durante un minuto.
10. Lave con agua destilada.
11. Seque al aire, perfectamente.
12. Agregue una gotita de aceite de inmersin y observe a 100 X.
Identifique en cada muestra la forma de las bacterias y, por el color cules son Gram
negativas y cules son Gram positivas.
PREPARACIN DE SOLUCIONES
Solucin A:
Cristal violeta 2 gr.
Alcohol etlico 20 ml.
Solucin B
Oxalato de amonio 0.8 gr
H2O destilada 80 ml.
Mezclar A y B para madurarlo y filtrar.
Lugol
Yodo 1 gr.
Yoduro de potasio 2 gr
H2O destilada 300 ml
Alcohol etlico-acetona 1:1
Safranina.



BACILO
S
estafilococos endospora

PRCTICA 3
CLULAS EUCARITICAS Y SU DIVERSIDAD
INTRODUCCIN.
Las clulas vivas son entidades dinmicas, que cambian y se mueven constantemente. Las clulas fijadas y teidas
son estables, y ya no cambian. Cuando mucho, las imgenes obtenidas con material fijado solo pueden ser
"instantneas" de las clulas dinmicas. A menudo es necesario reconstruir una cadena de acontecimientos por el
estudio cuidadoso de muchas de estas instantneas a intervalos diversos. Las clulas procariticas por su tamao no
pueden ser observadas tan fcilmente sin fijar y teir. En cambio, las clulas eucariticas pueden observarse en
movimiento como algunos seres unicelulares, por ejemplo; los protozoarios, si es que se cuida de conservarlos bajo
las condiciones de su medio natural. Pero la clula vegetal es ms fcil de observar debido a su tamao y a la pared
celular que recubre a la membrana plasmtica. Puede teirse para contrastar sus estructuras ms importantes, tales
como ncleo y plstidos.
El uso de colorantes adecuados para resaltar determinadas estructuras es frecuente, tomando en cuenta la
composicin qumica de tales estructuras.
OBJETIVO. Que el alumno identifique algunos organismos unicelulares (protozoarios) como ejemplo de clula viva,
obtenidos de medios adecuados, y que observe clulas vegetales para identificar en ellas caractersticas que las
hacen tan diferentes de las clulas procariticas. Adems de que conozca e identifique mohos, como ejemplo de
hongos.
MATERIAL. Microscopio, portaobjetos, cubreobjetos, pipetas Pasteur con chuzo, navaja, alfileres o agujas. Como
material biolgico: agua estancada (de florero con agua "podrida"), clulas de cebolla o ptalos de flor, pan o tortilla
con moho y sangre.
PROCEDIMIENTO.

a) Con la pipeta Pasteur tome una gota de agua estancada y colquela en un portaobjetos; cbrala inmediatamente
con un cubreobjetos y observe a seco dbil. Una vez enfocada la muestra, puede pasar a mayor aumento. Bajo el
microscopio podr ver muchas especies de organismos unicelulares nadando activamente en la gota de agua. Estos
organismos son protozoarios que han estado viviendo en el medio adecuado para su crecimiento y proliferacin. Trate
de identificarlos con ayuda de los esquemas anexos.
b) Tome ahora la cebolla o el ptalo de una flor y haga una incisin que le permita separar una capa delgada para
obtener un trocito y extenderlo perfectamente sobre el portaobjetos. A la clula de la cebolla puede agregarle una gota
de colorante como el verde de metilo. Con ste se teirn los ncleos. Al corte de flor no es necesario teirla pues las
clulas poseen una vacuola de pigmento coloreado que las hace muy visibles con su contorno bien delimitado por la
pared celular.
c) Con la punta de un alfiler o de una aguja, tome una porcin muy pequea del moho del pan o de tortilla, colquelo
en un portaobjetos que previamente tendr una gota de agua destilada, luego agregue una gota de colorante azul de
metileno. Identifique las partes que constituyen al moho.
d )observacin de un frotis sanguneo. Identifique la morfologa de las clulas sanguneas
Coloraciones utilizadas en los frotis sanguneos:
Coloracin de Giemsa
1. Fije el frotis con alcohol metlico durante 5 minutos.
2. Agregue solucin diluida de colorante de Giemsa recin preparada (3 gotas de colorante de Giemsa
concentrada por cada ml de agua destilada) y cuente 20 minutos.
3. Lave con agua corriente.
4. Seque al aire y observe con objetivo de inmersin.
Coloracin de Wright
1. Cubra el frotis con un nmero conocido de gotas de colorante de Wright durante 2 minutos.
2. Aada el mismo nmero de gotas de agua destilada, mezcle y deje actuar la mezcla durante 8 minutos.
3. Lave con agua corriente.
4. Seque al aire y observe con objetivo de inmersin.
Mtodo Panptico de Pappenheim
1. Cubra el frotis con 4 gotas de colorante de May Grenwald durante 3 minutos.
2. Aada la misma cantidad de agua destilada procurando que se mezclen y deje actuar la mezcla durante un
minuto.
3. Escurra el lquido y sin previo lavado, aada solucin diluida de Giemsa recin preparada, dejndola actuar
durante 10 minutos.
4. Seque y observe con objetivo de inmersin.
Frotis sanguneo. Linfocito pequeo, mtodo de Wright

Frotis sanguneo. Linfocito mediano, mtodo de Wright
Frotis sanguneo. Monocito y plaquetas, mtodo de Wright
Frotis sanguneo. Polimorfo basfilo, mtodo de Wright

Frotis sanguneo. Polimorfo neutrfilo, mtodo de Wright
Frotis sanguneo. Polimorfo eosinfilo, mtodo de Writgh






PRCTICA NO. 4
LA CLULA VEGETAL.
INTRODUCCIN.
Es de todos conocida la importancia que representa el Reino Vegetal. Los vegetales son casi
los nicos seres vivos capacitados para captar energa, la cual, en unin con las sustancias
inorgnicas que toman del aire y del suelo la emplean para la elaboracin de sus propios
alimentos; la energa as utilizada la obtienen de la luz solar.
Los otros organismos como las plantas no verdes y los animales, obtienen esa energa de los
alimentos que toman de otros seres vivos, donde sta se encuentra almacenada y en estado
potencial. Por lo tanto, casi toda la energa contenida en las substancias de que se hallan
compuestos los organismos, inclusive el hombre, procede en ltimo trmino de la luz solar
captada por los vegetales verdes.
Por consiguiente los vegetales verdes son de capital importancia para el mantenimiento de la
vida.
Los vegetales comprenden desde plantas unicelulares, por ejemplo levaduras y algunas
algas verdes, hasta las plantas mayormente diferenciadas.
Para apreciar la organizacin de los procesos bioqumicos comprendidos en la produccin de
los metabolitos primarios y secundarios de la plantas es necesario tener conocimiento de la
delicada estructura de la clula vegetal.
OBJETIVO: Que el alumno conozca algunas estructuras de la clula vegetal y pueda

identificarlas.
MATERIAL: Microscopio, bistur, agujas, cuentagotas, portaobjetos, cubreobjetos, caja

petri, pipetas Pasteur.
MATERIAL BIOLGICO: Trocitos de cebolla, papa, pltano, semillas de legumbres,

cereales, tallos y ptalos de flores, cscara de ctricos, lechuga, jitomate, zanahoria, pera,
aceituna.
REACTIVOS: Solucin de nitrato de plata al 0.1N. Soln de lugol, soln de EDTA 0.1 M,
glicerina, verde de metilo actico, cido actico, alcohol de 70, carmn alumnico, verde
brillante.

PROCEDIMIENTO:
a) Limpie la cebolla de las hojas exteriores secas, separe una de las hojas
internas y desprenda la membrana tenue que est adherida por su cara interna
cncava. Lleve esta muestra al portaobjetos evitando que se formen burbujas
de aire. Squelo al aire, vierta unas gotas de verde de metilo actico por 5
minutos, lave con agua para quitar el exceso de colorante, agregue una gota de
glicerina, coloque encima el cubreobjetos y observe al microscopio. Observar
las clulas de formas alargadas y bastante grandes. La pared celular celulsica
se destaca muy clara teida por el colorante. Los ncleos son grandes y muy
visibles, en su interior pueden llegar a observarse granulaciones; son los
nucletidos. El citoplasma tiene aspecto bastante claro, en el que se distinguen
algunas vacuolas grandes coloreadas dbilmente.
b) Tome una hoja externa seca de la cebolla y corte un trocito de 1 cm cuadrado,

depostelo sobre un portaobjetos que contenga una gota de glicerina y observe
al microscopio. Observar capas de clulas secas, con poco contenido celular y
las membranas de unas capas de clulas con otras superpuestas. Al enfocar
con cuidado observar unas formas polidricas transparentes con aspecto
cristalino, si enfoca en distintos planos, podr observar las caras de cristales de
oxalato de calcio. Estos son abundantes en los vegetales y tienen formas
variadas, agujas, prismas alargados y puntiagudos, etc. En la cebolla presentan
aspecto de prisma.
c) Para hacer evidentes los cloroplastos y poderlos observar fcilmente, podemos

usar una sustancia que puede ser reducida por ellos, (capacidad reductora de
los plstidos) como el nitrato de plata. Extender nuevamente un pedacito de
membrana de la cebolla en un portaobjetos evitando que se formen burbujas,
agregar una gota de solucin de nitrato de plata 0.1N y observe a 40X. Espere
el efecto de ennegrecimiento de los cloroplastos.
d) Los amiloplastos son importantes porque representan la sustancia de reserva

(almidn), de la clula vegetal, se puede encontrar en mayor proporcin en los
cereales y semillas de legumbres, as como algunos tubrculos o frutos, para
identificarlos parta y raspe el cereal, leguminosa o tubrculo con el bistur,
deposite el producto obtenido en el portaobjetos. Agregue una gota de agua y
una de lugol, coloque el cubreobjetos y observe. Los granos de almidn se
tien de color violeta intenso debido al lugol que contiene yodo.
e) Los cromoplastos contienen sustancias del tipo de los carotenos y pueden

observarse de la siguiente forma: Coloque una pequea muestra de jitomate en
un portaobjetos sin agregar agua, coloque el cubreobjetos y comprima

suavemente, observe al microscopio. La pulpa del jitomate muestra por lo

general las clulas bastante sueltas unas de otras, se percibe en el citoplasma
una serie de grnulos rojizos- anaranjados que son los cromoplastos. Tambin
puede obtener un corte fino de zanahoria, depostelo en un portaobjetos,
agregue una gota de agua, colquele el cubreobjetos y observe al microscopio.
En las clulas de la zanahoria se observan una multitud de corpsculos
irregulares de color rojizo dbil hasta anaranjado.
f) Los tallos o pecolos de las plantas tienen una resistencia mecnica relativa y
sirven de sostn, debido a que las clulas tienen gran cantidad de celulosa que
las engruesa. A este tejido se le da el nombre de colnquima y est formado
por clulas alargadas. Corte secciones transversales de tallo o pecolos de
malva lo ms finamente posible, fije con alcohol de 70 durante dos minutos,
lave con agua y tia con carmn alumnico por 15 minutos, lave
abundantemente con agua y monte el corte en un portaobjetos con una gota de
glicerina, cubra y observe. Con seco dbil observar una especie de granulado
de puntos rojos, cambie a seco fuerte y despus a inmersin.
g) El mesocarpio del fruto de la pera y la aceituna representan el esclernquima.

Este tejido est formado por grupos o nidos de clulas impregnadas de lignina
a esto se debe la dureza de los frutos cuando no estn maduros. La Lignina se
tie con verde brillante. Parta la pera y la aceituna y obtenga un raspado de
cada uno por separado, colquelo en un portaobjetos y agregue una gota de
verde brillante, dejarlo actuar por un minuto y lavar cuidadosamente con agua,
seque el exceso con papel filtro y ponga una gota de glicerina, cubra y observe
al microscopio.
h) La cscara o pericarpio de los frutos ctricos (naranja, mandarina, limn,

toronja, etc.) poseen cavidades hechas por las mismas clulas y estn llenas
del aceite esencial al que deben su aroma. Haga cortes delgados de la cscara
de los frutos, coloque la muestra en un portaobjetos, agregue una gota de
agua, cbralo y observe con poco aumento.
i) Los tallos de lechuga o acelga tienen vasos llenos de ltex que los hace menos
transparentes. Haga cortes longitudinales del tallo de la lechuga o acelga,
colquelos en el portaobjetos con una gota de agua, se observan
ramificaciones irregulares que tienen color ms oscuro que el resto de las
clulas que corresponden a los vasos de ltex.



cloroplastos cromoplastos

Papa

PRCTICA NO 5
PERMEABILIDAD CELULAR.
INTRODUCCIN: Una membrana celular es una capa de macromolculas que

encierra a todas las clulas y muchos organelos, se denomina membrana plasmtica
cuando forma el lmite exterior de una clula, Todas las membranas sin considerar el tipo
de organismo o clula, se construyen del mismo modo a partir de dos tipos de
macromolculas: los fosfolpidos que proveen la estructura; y las protenas, que
proveen las funciones especficas de la membrana. Las membranas animales tambin
contienen colesterol, que estabiliza la capa de fosfolpidos.
La estructura nica de una membrana celular se describe frecuentemente como un
mosaico fluido. Es un fluido porque antes que un slido, el fosfolpido es un lquido, es un
mosaico a causa de la disposicin de diversas protenas dentro de la capa de fosfolpidos.
Una membrana celular es una barrera selectivamente permeable: algunos materiales
cruzan de manera libre y otros cruzan slo en ciertos momentos. El paso es controlado
por la misma bicapa de fosfolpidos, y por el particular ordenamiento de las protenas en
ella empotradas.
La estructura fosfolipdica es impermeable a muchos materiales. Slo materiales muy
pequeos o sin ninguna carga elctrica pueden penetrar esta barrera. Los materiales
cruzan las membranas celulares de cuatro maneras: difusin simple, difusin facilitada,
transporte activo y transporte de volumen, y se resumen en la siguiente tabla:
TIPO DE TIPOS DE
TRANSPORTE MATERIALES DIRECCIN REQUISITOS
Difusin simple Esteroides, grasa,
Altas a bajas Ninguno
O2, CO2, H2O concentraciones
Difusin facilitada Glucosa, Iones Altas a bajas Protena de canal,
concentraciones protena receptora
Transporte activo Aminocidos Bajas a altas Protenas de
concentraciones transporte, energa
Transporte de Hormonas no Dentro o fuera de Energa, algunas
partculas en esteroideas, la clula segn veces protenas
suspensin enzimas, moco, necesidad receptoras.
microbios,
neutronsmisores,
residuos
OSMOSIS: La difusin de agua a travs de una membrana celular tiene un nombre especial,
smosis. Las molculas de agua son suficientemente pequeas para difundirse mediante
orificios en la estructura de fosfolpidos, mientras que muchas molculas e iones no lo son.

El agua se difunde desde el lado de la membrana donde se concentra ms (es decir, donde
hay menos materiales disueltos) al lado donde es menos concentrada (es decir, donde hay
ms materiales disueltos). La direccin de la smosis es muy importante para la clula. El
hecho de que el agua entre o salga de una clula depende de las concentraciones relativas
de materiales disueltos dentro y fuera de la clula. Tres trminos describen estas
concentraciones relativas: isotnico, (mismo), hipertnico, (por encima de), e hipotnico (por
debajo de). Estas concentraciones y sus efectos de definen en la siguiente tabla:
TRMINO CONCENTRACI CONCENTRACI DIRECCIN NETA

N DE N DE AGUA DE FLUJO DE
MATERIALES AGUA
DISUELTOS
Ambiente isotnico Igualdad dentro y Igualdad dentro y Ninguna
fuera de la clula fuera de la clula
Ambiente Ms alta fuera de la Ms baja fuera de Fuera de la clula
Hipertnico clula la clula
Ambiente Ms baja fuera de Ms alta fuera de la Dentro de la clula
Hipotnico la clula clula
OBJETIVO: Que el alumno compruebe la funcin de permeabilidad de la membrana

citoplasmtica, y su funcin de separar dos medios, el intracelular y el extracelular, tanto en
clulas animales como en clulas vegetales, as como observar los efectos que sobre la
clula ejercen sustancias diferentes al medio intracelular.
MATERIAL: Microscopio, tubos de ensaye, lancetas, portaobjetos, cubreobjetos, bistur,

pipetas Pasteur.
MATERIAL BIOLGICO: Sangre capilar, o sangre venosa con anticoagulante (para observar
eritrocitos), ptalos de flores, de preferencia de color fuerte, para que las vacuolas de
antocianinas sean ms visibles con el efecto de las soluciones.
REACTIVOS: Anticoagulante, solucin salina isotnica, solucin salina hipertnica y solucin

salina hipotnica, agua destilada.
PROCEDIMIENTO:

1- Con una pipeta Pasteur deposite una gota de sangre en un portaobjetos, colquele el
cubreobjetos y observe al microscopio con objetivo seco fuerte, la morfologa de los
eritrocitos.
2-Aparte enumere tubos de ensaye del 1 al 4; con la pipeta Pasteur agregue 3 gotas de
sangre a cada tubo, luego agregue 10 gotas de solucin isotnica en el tubo 1, 10 gotas de
solucin hipotnica en el tubo 2, 10 gotas de solucin hipertnica en el tubo 3, y 10 gotas de
agua destilada en el tubo 4.
3- Mezcle agitando cada tubo suavemente (para no romper los eritrocitos). Deje reposar de
un minuto.
4- Luego con una pipeta Pasteur tome una gota de la mezcla del tubo 1 y colquela en un
portaobjetos, coloque un cubreobjetos y observe con seco fuerte. Anote sus resultados, haga
lo mismo con una gota de la mezcla del tubo 2 y luego del tubo 3 y del tubo 4.
Acurdese que tipo de solucin agreg en cada tubo, para hacer la comparacin.
5- Explique el resultado de cada observacin.


PRCTICA NO. 6.
DIVISIN CELULAR POR MITOSIS
INTRODUCCIN: Toda clula procede de otra clula preexistente. Las clulas vegetales
crecen debido sobre todo a la toma de agua. Cuando alcanzan un tamao determinado se
dividen, formando cada una de ellas dos clulas hijas idnticas. Las diversas partes de la
clula a menudo estn distribuidas asimtricamente y han de repartirse entre las dos clulas
hijas de tal modo que las nuevas clulas sean copias exactas de la clula original.
En los eucariontes, el material hereditario forma parte de cromosomas complejos, la
reparticin equitativa de este material requiere por tanto un mecanismo ms complicado,
mediante el cual los cromosomas se dupliquen, se separen y se distribuyan de una manera
precisa entre dos clulas hijas, este mecanismo es la MITOSIS.
La mitosis o divisin celular, apareci evolutivamente como una solucin al problema de
asegurar una reparticin equitativa del material nuclear entre las clulas hijas, en los
organismos eucariticos. Es un proceso continuo que convencionalmente se divide en cuatro
fases principales, profase, metafase, anafase y telofase. En el tiempo antes y despus de la
mitosis la clula est en interfase. En la mitosis los cromosomas aparecen como largas fibras
estiradas que se van acortando a medida que avanza su enrollamiento y que se dirigen
hacia el centro de la clula cuando se han contrado completamente. Entonces se escinden
longitudinalmente en las dos mitades idnticas, las cuales son llevadas a los polos opuestos
de la clula mediante una serie de microtbulos. En estos dos grupos equivalentes
genticamente, los cromosomas se desenrollan y se establecen en los ncleos de las clulas
hijas.
Una planta conserva la mayora de las clulas que se forman durante su vida y va
produciendo otras nuevas en regiones en activa divisin celular, localizadas en los pices de
las ramas y las races.
En los pices se localizan reas especializadas de divisin celular activa, llamadas
meristemas (del griego meristos = dividido). En el extremo de cada tallo hay un meristema
apical que produce un flujo continuo de clulas hijas a medida que el tallo se alarga ms y
ms. Este alargamiento es el resultado no solo de la divisin celular, sino tambin de que las
clulas nuevas absorben agua y aumentan de tamao. Luego las clulas se diferencian en
formas adaptadas a la funcin que desempean en la planta adulta.
El meristema apical de la raz produce clulas hijas hacia delante y hacia atrs. Hacia
delante originan la pilorriza, una cubierta dura de clulas que se desgasta continuamente a
medida que la raz avanza a travs del suelo y que es regenerada desde atrs por divisin
celular por el sistema apical.
OBJETIVO: Que el alumno observe en clulas vegetales las diferentes etapas de la mitosis.

MATERIAL.- Microscopio, tubos pyrex chicos, portaobjetos, cubreobjetos, bistur o navaja de

un filo nueva y 2-4 agujas largas, aplicadores de madera, pinzas para los tubos, mechero
Bunsen, caja de petri.
MATERIAL BIOLOGICO.- Un bulbo de cebolla tierna (de cambray), con raz.
REACTIVOS.- Solucin de acetocarmn en frascos goteros, esmalte transparente

para uas.
PROCEDIMIENTO:
1. Con tres das de anticipacin a la prctica, coloque un bulbo de cebolla (fresca y que
tenga races largas de ms de 3 cm) en un recipiente con agua, para estimular el
crecimiento de las races.
2. Elija la parte final de una raz de 4 cm de longitud, crtela por la base con un bistur y
colquela sobre un portaobjetos.
3. Sujtela por la base y con el bistur elimine perfectamente la cofia (cubierta protectora
cuyas clulas no estn en divisin).
4. Inmediatamente por debajo de la cofia se encuentran ya las clulas meristemticas, corte
con el bistur una porcin de 0.5 cm de la parte apical y colquela dentro de un tubo de
ensaye pyrex.
Es recomendable procesar de 2 a 3 races, para asegurar el obtener clulas en
divisin.
5. Agregar la solucin carmn-actica a que cubra la porcin de raz (aproximadamente 2
ml).
6. Se calienta el tubo hasta que la solucin carmn-actica entre en ebullicin y se
mantiene durante 15 segundos. Tenga cuidado de que no se vote el contenido del tubo.
7. Transcurrido este tiempo se pasa el contenido a una caja Petri y se coloca la raz con una
pinza sobre un portaobjetos.
8. Coloque sobre el portaobjetos que contiene las races otro portaobjetos y presione
firmemente para lograr el aplastamiento y por lo tanto la separacin de las capas
celulares.
9. Retire con mucho cuidado el portaobjetos de encima de la raz, coloque un cubreobjetos y
presione nuevamente, cuidando de no romperlo.
10. Selle los bordes del cubreobjetos con el esmalte para uas, transparente. (Para evitar
que se seque la muestra y que al enfocar con los objetivos se vaya a mover el cubreobjetos y
las capas celulares)
11. Examine al microscopio con objetivo de inmersin, colocando una pequea gota de
aceite de inmersin sobre el cubreobjetos, para observar clulas meristemticas en mitosis
12. Tenga paciencia para revisar clula por clula en busca de las diferentes fases de la
divisin celular.


PRCTICA NO. 7

IDENTIFICACIN DE CARBOHIDRATOS, PROTENAS Y LPIDOS.
INTRODUCCIN: Los compuestos orgnicos ms importantes de las clulas son: los

carbohidratos, las protenas, los lpidos, las vitaminas y los cidos nucleicos. Dentro de ellos,
algunos como los carbohidratos y lpidos son necesarios como fuente de energa, las
protenas tambin se pueden considerar como fuente de energa, pero no directamente,
puesto que esencialmente actan como reguladoras del metabolismo (enzimas) o para
preservar la integridad de las clulas (protenas estructurales), y como anticuerpos del
sistema inmune.
Las protenas son los constituyentes orgnicos ms abundantes y hay varios tipos. En casi
todas las partes de la clula, las protenas estn presentes de alguna manera. Ciertos tipos
que se encuentran en el citoplasma, constituyen el ingrediente principal de los geles
protoplsmicos, entre ellos se incluyen las globulinas. Otras protenas simples se encuentran
en el ncleo, como las histonas, importantes en cuanto a la estructura y funcin de los
cromosomas, algunas protenas son complejos formados por una protena y otra sustancia.
Estas protenas se llaman protenas conjugadas. Las nucleoprotenas del ncleo y del
citoplasma, las lipoprotenas de la membrana citoplasmtica, las cromoprotenas como la
hemoglobina y muchas enzimas, constituyen ejemplos de este tipo.
Los carbohidratos incluyen varios azcares, almidones y celulosa de la pared de las clulas
vegetales.
Los lpidos son componentes estructurales de las membranas citoplasmticas y aparecen
tambin como inclusiones insolubles en el hialoplasma. Los fosfolpidos son compuestos
importantes que se encuentran en distintos organelos celulares.
OBJETIVO Comprobar la presencia (macroscpicamente), de carbohidratos, lpidos y

protenas en productos comestibles.
MATERIAL: Gradilla, tubos de ensaye, pinzas para tubo, mortero, parrilla elctrica, Vaso de
precipitado de 600 ml.
MATERIAL BIOLGICO: Muestras de pan, frutos, cereales, semillas, frutas secas y frescas,
lcteos.
REACTIVOS: Benedict, cido ntrico, solucin de yodo 0.1N, cloroformo, Sudn III, solucin
de sacarosa, de almidn y de gelatina.
PROCEDIMIENTO:
1. Marque 4 tubos y en ellas realizar las reacciones testigo o patrn que le permitir
observar fcilmente la presencia de azcares, lpidos, y protenas.

Tubo 1. Deposite 5 ml de solucin de sacarosa y agregar 1 ml de reactivo de Benedict.

Caliente a bao mara y observe el cambio de color.
Tubo 2. Deposite 5 ml de solucin de almidn y agregue 1 ml de solucin de yodo 0.1N.
Observe el cambio de color.
Tubo 3. Deposite 5 ml de solucin de gelatina, agregue 1 ml de cido ntrico y caliente el
tubo. Anote el cambio de color.
Tubo 4. Deposite 1 ml de aceite y agregue 3 ml de agua y 3 de cloroformo, enseguida
agregue unas gotas e Sudn III y agite cuidadosamente. (LEJOS DE CUALQUIER
MECHERO O FLAMA) y observe el resultado.
Los 6 tubos restantes le servirn para determinar en los comestibles que llev,
triturndolos previamente en un mortero, la presencia de protena, lpidos, carbohidratos
sencillos y polisacridos, Anote sus resultados y compare con sus determinaciones
testigo.
Las pruebas anteriores demostrarn macroscpicamente, las substancias orgnicas que
se encuentran en forma ms abundante en los productos comestibles que le permitirn
relacionar a stos con su origen qumico.
REPORTE: ALIMENTOS Y ENERGA.

ESTIMA:
Cada da hay que ingerir un cierto nmero de caloras si se desea mantener una buena
condicin fsica. La energa que t necesitas depende de tu edad, sexo, tamao, y el tipo de
actividades que realizas. En promedio, una persona como t requiere cerca de 1 800 kcal al
da solo para mantener el calor del cuerpo y asegurar que continen todas las funciones
metablicas, (metabolismo basal). Esto es lo mnimo que tienes que tomar para sobrevivir
durmiendo todo el da en una cama. Pero si haces otras cosas, hay que sumar las caloras
extras que se necesitan. La siguiente tabla indica el consumo de caloras al realizar algunas
actividades:
ACTIVIDAD KCAL POR HORA ACTIVIDAD KCAL POR HORA

Sentado(ver tv o 25 Tender la cama 230
leer)
Sentado 35 Nadar 320
(comiendo)
De pie 40 Bailar 400
Caminar 100 Andar en bicicleta 200
Correr 400 Jugar ftbol 520
Subir escaleras 800 Jugar basquetbol 400
Baarse 25 Jugar voleibol 120

Haz una lista de tus actividades diarias y del nmero de horas que gastas en cada una de
ellas. Estima la cantidad del total de caloras que requieres para hacer cada una de ellas y
anota tus resultados en la siguiente tabla.
ACTIVIDA NO. KCAL ACTIVIDA NO. KCAL

D HORAS REQUERIDA D HORAS REQUERIDA
S S
A) Cuntas kcal extras requieres al da?

B) Cuntas kcal totales requieres al da?
Esta energa la obtienes de los alimentos que ingieres, consulta un libro de nutricin donde
encontrars el contenido de carbohidratos, grasas y protenas de algunos alimentos
comunes. Organzate en equipo con tus compaeros de equipo y usen esta informacin para
disear un men balanceado (desayuno, comida y cena) que les proporcione las caloras que
requieren al da.

PRCTICA N8
OBSERVACIN DE CROMOSOMAS
INTRODUCCIN
En biologa, se denomina cromosoma (del griego , - chroma, color y , -

soma, cuerpo o elemento) a cada uno de los pequeos cuerpos en forma de bastoncillos en
que se organiza la cromatina del ncleo celular durante las divisiones celulares (mitosis y
meiosis). La cromatina es un material microscpico que lleva la informacin gentica de los
organismos eucariotas y est constituida por ADN asociado a protenas especiales llamadas
histonas. Este material se encuentra en el ncleo de las clulas eucariotas y se visualiza
como una maraa de hilos delgados. Cuando el ncleo celular comienza el proceso de
divisin (cariocinesis), esa maraa de hilos inicia un fenmeno de condensacin progresivo
que finaliza en la formacin de entidades discretas e independientes: los cromosomas. Por lo
tanto, cromatina y cromosoma son dos aspectos morfolgicamente distintos de una misma
entidad celular.
Cuando se examinan con detalle durante la mitosis, se observa que los cromosomas
presentan una forma y un tamao caractersticos. Cada cromosoma tiene una regin
condensada, o constreida, llamada centrmero, que confiere la apariencia general de cada
cromosoma y que permite clasificarlos segn la posicin del centrmero a lo largo del
cromosoma. Otra observacin que se puede realizar es que el nmero de cromosomas de
los individuos de la misma especie es constante. Esta cantidad de cromosomas se denomina
nmero diploide y se simboliza como 2n. Cuando se examina la longitud de tales
cromosomas y la situacin del centrmero surge el segundo rasgo general: para cada
cromosoma con una longitud y una posicin del centrmero determinada existe otro
cromosoma con rasgos idnticos, o sea, casi todos los cromosomas se encuentran formando
parejas. Los miembros de cada par se denominan cromosomas homlogos.
En la figura de la derecha se presentan todos los cromosomas mitticos de una nia,
ordenados por parejas de homlogos y por su longitud, lo que se denomina cariotipo. Puede
observarse que en ese cariotipo hay 46 cromosomas (o sea, 2n=46) que es el nmero
cromosmico de la especie humana. Se puede advertir, tambin, que cada cromosoma tiene
una estructura doble, con dos cromtidas hermanas que yacen paralelas entre s y unidas
por un nico centrmero. Durante la mitosis las cromtidas hermanas, que son idnticas, se
separan una de otra hacia dos nuevas clulas. Las parejas de cromosomas homlogos que
se observan en la imagen tienen, adems, una semejanza gentica fundamental: presentan
los mismos genes situados en los mismos lugares a lo largo del cromosoma (tales lugares se
denominan locus o loci en plural). Esto indica que cada miembro del par de homlogos lleva
informacin gentica para las mismas caractersticas del organismo. En organismos con
reproduccin sexual, uno de los miembros del par de cromosomas homlogos proviene de la
madre (a travs del vulo) y el otro del padre (a travs del espermatozoide). Por ello, y como

consecuencia de la herencia biparental, cada organismo diploide tiene dos copias de cada
uno de los genes, cada una ubicada en uno de los cromosomas homlogos. Una excepcin
importante en el concepto de parejas de cromosomas homlogos es que en muchas
especies los miembros de una pareja, los cromosomas que determinan el sexo o
cromosomas sexuales, no tienen usualmente el mismo tamao, igual situacin del
centrmero, la misma proporcin entre los brazos o, incluso, los mismos loci. En la imagen
puede observarse, por ejemplo, que el cromosoma Y (que determina el sexo masculino en
humanos) es de menor tamao y carece de la mayora de los loci que se encuentran en el
cromosoma X.
Para conocer o estudiar los cromososmas, se pueden usar distintos tejidos o muestras
biolgicas, ya sea de humanos, vegetales o animales; por ejemplo, en el humano, sangre
perifrica, medula sea, fluido amnitico y productos de la concepcin (para fines de
diagnstico). En vegetales el clsico estudio se hace en clulas de cebolla. Y en animales el
clsico estudio se hace en la mosca de la fruta o del vinagre, Drosophila melanogaster.
Aunque las tcnicas especficas difieren segn el tejido usado, el mtodo bsico para
obtener preparaciones de cromosomas es as:
Recoleccin de la muestra y preparacin inicial.

Cultivo celular.
Adicin de un inhibidor de la mitosis para detener las clulas en metafase.
Recogida de las clulas. Este paso es muy importante para obtener preparaciones de
alta calidad. Implica exponer las clulas a una disolucin hipotnica, seguida de una
serie de disoluciones fijadoras. Esto hace que las clulas se expandan, de modo que
los cromosomas se extiendan y puedan examinarse individualmente.
Tincin de las preparaciones cromosmicas para detectar los posibles cambios
numricos y estructurales.
OBJETIVO.-
Que el alumno conozca los cromosomas, su morfologa e importancia a nivel biolgico, as
como el que aprenda a realizar una tcnica de estudio de los cromosomas.
MATERIAL.- Microscopio, laminillas de coleccin permanentes, material de acuerdo a la

tcnica a realizar y de acuerdo al material biolgico (sangre, cebolla o la mosca de la fruta o
del vinagre, Drosophila melanogaster)
Procedimiento:
Cuando se trata de los glbulos blancos, se toma una muestra de sangre por su fcil

accesibilidad.
Siembra: se realiza agregando aproximadamente 1 mililitro de sangre entera heparinizada a
un medio de cultivo enriquecido con suero fetal bobino, antibiticos y nitrgenos, lo cual
estimular el crecimiento y divisin de las clulas.
Incubacin: Se mantiene a 38.0 grados centgrados con una atmsfera de CO2 al 5 % y
humedad por 72 horas idealmente.
Cosecha: Se agrega colchicina a la muestra para detener los ncleos celulares en metafase,
posteriormente se cenfrifuga la mezcla para retirar el sobrenadante (suero sanguneo y
medio de cultivo). Se agrega solucin hipotnica de cloruro de potasio para romper las
membranas celulares y para finalizar el paso de la cosecha se realizan 3 lavados con una
solucin de metanol-cido actico 3:1.
Goteo: Posterior a los lavados, por medio de centrifugacin, se obtiene un botn celular
blanco, el cual se suspende en la misma solucin fijadora metanol-cido actico 3:1 y se
procede a gotear en un portaobjetos a unos cuantos centmetros, esto es con el objetivo de
"reventar" las clulas y obtener los cromosomas.
Envejecimiento: En este paso se espera a que los cromosomas pierdan humedad. Se puede
aplicar calor al portaobjetos para deshidratar la muestra.
Tincin: Existen muchos tipos de tinciones para observar los cromosomas. La ms utilizada
es la tincin con colorante Giemsa, se conoce como tcnica de bandas GTG. En este caso
se expone la muestra del portaobjetos a tripsina, con el objetivo de desnaturalizar algunas de
las protenas constitucionales de los cromosomas. Posteriormente se tien con dos
colorantes, Giemsa y Wrigth, en algunos laboratorios puede emplearse un solo colorante,
pero el empleo de los dos mejora la calidad del resultado, puesto que facilita el anlisis al
microscopio para el citogenetista creando un contraste de color en las bandas que se
formaron al emplear la tripsina. Por medio de estas bandas podemos distinguir las
caractersticas de un cromosoma y determinar si es normal o presenta alguna anomala
estructural. Existen otras tcnicas de tincin, como bandas NOR, ICH, bandas Q, bandas R,
tcnicas para teir centrmero y heterocromatina. Con este tipo de tcnicas se puede llegar a
realizar un diagnstico citogentico acerca de una enfermedad cromosmica.
Lectura: El ltimo paso consiste en leer por lo menos 20 metafases, es decir 20 clulas
reventadas y formar un cariotipo o cariograma, donde se acomodan los cromosomas por
grpos segn el tamao y la localizacin del centrmero.
REPORTE:
Dibuje los cromosomas que observo y anote los nombres de cada de las partes que lo
constituyen.

BANCO DE PREGUNTAS PARA LOS EXMENES
PRCTICA1: FUNDAMENTO FSICO, MANEJO Y CUIDADOS DEL MICROSCOPIO
1 Diga qu es un microscopio.
2 Qu significa la palabra microscopio.
3 Diga que es un microscopio compuesto.
4 Diga cuntos y cules son los sistemas que constituyen a un microscopio compuesto.
5 Diga cules son las partes que constituyen al sistema ptico.
6 Diga cul es la funcin de cada una de las partes que constituyen al sistema ptico.
7 Diga cules son las partes que constituyen al sistema mecnico.
8 Diga cul es la funcin de cada una de las partes que constituyen al sistema
mecnico.
9 Diga cules son las partes que constituyen al sistema de iluminacin.
10 Diga cul es la funcin de cada una de las partes que constituyen al sistema de
iluminacin.
11 Por qu a los objetivos de 10X y de 40X se les llama seco dbil y seco fuerte,
respectivamente.
12 Por qu al objetivo de 100X se le llama objetivo de inmersin.
13 Cul es la funcin del aceite de inmersin.
14 Diga por qu para enfocar una preparacin, debe iniciarse con el objetivo seco dbil.
15 Diga los cuidados que se deben tener para el uso y manejo del microscopio.
DEL SEMINARIO 2: MTODOS Y TCNICAS DE ESTUDIO DE LAS CLULAS.

1Concepto de colorante.
2Concepto de fijacin de las clulas.
3Concepto de colorante bsico y colorante cido.
4Diga la importancia de teir a las clulas y tejidos.
5Diga una aplicacin de las tcnicas de tincin de las clulas y tejidos en el rea mdica,
de diagnstico y/o de investigacin.
6-Diga el fundamento de la tcnica de tincin de Gram.
7Diga el color que adquieren las bacterias con la tincin de Gram y por qu sucede eso.

PRCTICAS 3 y 4 DE: CLULAS EUCARITICAS Y CLULAS PROCARITICAS

1.- Diga que significa el trmino eucaritica o eucariota.
2.- Diga que significa el trmino procaritica o procariota.
3.- A manera de tabla, diga cules son las diferencias entre las clulas eucariticas y las
procariticas.
4.- Diga dos ejemplos de clulas eucariticas.
5.-Diga dos ejemplos de clulas procariticas.
6.- Diga qu tipo de organismos son los virus; eucariticos o procariticos.
PRCTICA5: PERMEABILIDAD CELULAR.

1. Diga qu es una solucin salina isotnica (para el humano), en cuanto a composicin y
concentracin.
2. Qu significan los trminos solucin isotnica, solucin hipotnica y solucin hipertnica.
3. Cul de las tres soluciones mencionadas en la pregunta anterior es la que mantiene sin
cambios a las clulas de nuestro organismo.
4. Cul es la forma normal de los glbulos rojos.
5. Qu les pasa a los eritrocitos con la solucin salina isotnica y por qu ocurre dicho
fenmeno.
6. Qu les pasa a los eritrocitos con la solucin salina hipertnica y por qu ocurre dicho
fenmeno
7. Qu les pasa a los eritrocitos con la solucin salina hipotnica y por qu ocurre dicho
fenmeno.
8. Qu tipo de solucin es el agua destilada: iso, hipo o hipertnica.
9. Qu les pasa a los glbulos rojos si los mezcla con agua destilada y a que se debe dicho
evento.
10. Qu es permeabilidad celular.
11. Diga qu es la smosis.
12. Diga qu es una solucin fisiolgica, para el caso del humano.
PRCTICA 6: DE DIVISIN CELULA

1.- Concepto de cromosoma.

2.- Qu es la mitosis o divisin mittica.
3.- Objetivos o finalidad de la divisin mittica, en el humano.
4.- Nmero de clulas que se forman al final de la mitosis
5.- Slo mencionar las fases de la mitosis, (NO EXPLICAR)
6.-Concepto de clula haploide y nmero de cromosomas, para el humano
7.- Concepto de clula diploide y nmero de cromosomas para el humano
8.- Ejemplo de clulas del humano que llevan acabo mitosis.
PRACTICA 7 RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS DE IMPORTANCIA BIOLGICA

1.- Cul es funcin principal de los aminocidos en los organismos vivos?
2.- Cul es la parte de la clula en donde se sintetizan los aminocidos que forman las
protenas?
3.- Menciona las principales funciones de las protenas para la clula y los organismos
vivos?
4.- Por qu se utiliza la albmina como modelo para las determinaciones en esta prctica?
Practica 8 .Aislamiento de DNA en tejido vegetal y animal
1.-Cual es la funcin principal del ADN?
2.-Que es un gen?
3.-Quienes constituyen el material gentico?
4.-Que es la transcripcin?
5.-Describir que es el cdigo gentico?
6.-Nombra algunas de las aplicaciones de la gentica en la medicina

PARA LAS OBSERVACIONES DEBE ANOTARSE LO SIGUIENTE:
Nmero y ttulo de la prctica.

Observaciones.
Comentario: debe hacer referencia a lo que se aprendi en la prctica, a que tan
interesante le pareci o que tan difcil es la identificacin de las clulas y/o la
importancia de las mismas. Y debe ser un comentario por prctica, no por hoja.
En cuanto a las observaciones los datos que deben incluir son:

1 El dibujo de la clula o estructura o tejido, tal como lo observ microscpicamente.
2 Nombre de la clula, sin abreviar: vegetal, bacteria, protozoario, etc.
3 Clasificacin de la clula: procaritica o eucaritica.
4 Muestra biolgica usada para la bsqueda e identificacin de la clula: yogur, sangre,
cebolla, agua estancada, etc.
5 Mtodo empleado para observar a la clula: preparado hmedo (u observacin
directa), frotis, etc
6 Colorante o Tcnica de tincin empleado; azul de metileno, tincin de Gram, etc.
7 Otra sustancia, que no sea colorante, usada para mezclarse con la muestra biolgica:
agua destilada, solucin salina isotnica, etc.
8 Objetivo del microscopio empleado para la bsqueda e identificacin de la clula: seco
dbil 10X, seco fuerte 40X o inmersin 100X
9 Aumento total, es decir con cuntos aumentos se observ a la clula: 100X, 400X o
1000X
10 Sealar y poner nombre de las estructuras identificadas: ncleo, pared celular, etc.
11 En el caso de que no se haya usado otra sustancia o ningn colorante, debe ponerse:
ninguno o una lnea ---------


COMO DEBEN SER LOS REPORTES
NMERO Y TTULO DE LA PRCTICA:
Nombre de uno de los alumnos integrantes del equipo:
Nombre de la clula: Nombre de la clula:
Clasificacin: Clasificacin:
Muestra biolgica: Muestra biolgica:
Mtodo: Mtodo:

Colorante o tincin: Colorante o tincin:
Otra sustancia: Otra sustancia:
Objetivo: Objetivo:
Aumento total: Aumento total:
Nombre de la clula: Nombre de la clula:
Clasificacin: Clasificacin:
Muestra biolgica: Muestra biolgica:

Mtodo: Mtodo:
Colorante o tincin: Colorante o tincin:
Otra sustancia: Otra sustancia:
Objetivo: Objetivo:
Aumento total: Aumento total:
COMENTARIO:
Otras indicaciones:
Los dibujos deben ser a mano

Colorear los dibujos de acuerdo a lo observado.
No presentar nada a lpiz.
Usar letra grande y legible.
Ejemplos:

Nombre de la clula: bacteria Nombre de la clula: eritrocito
Clasificacin: procaritica Clasificacin: eucaritica
Muestra biolgica: yogur Muestra biolgica: sangre
Mtodo: frotis Mtodo: observacin directa
Colorante o tincin: tincin de Gram Colorante o tincin: -----------
Otra sustancia: ----------- Otra sustancia: solucin salina
isotnica
Objetivo: inmersin 100X Objetivo: seco fuerte 40X
Aumento total: 1000X Aumento total: 400X

CRITERIOS DE EVALUACIN
La acreditacin del Laboratorio de Biologa te da derecho a la evaluacin de la teora.

Asistencia 100%. (dos retardos equivalen a una falta).
Entrega de reportes por equipo.
Examen final
Exposiciones por equipo
BIBLIOGRAFA
1- Thompson, James S. Gentica mdica. Barcelona: Salvat Editores, 1975
2- Wells, Albert Laurence The microscope made easy . New York : Frederick Warne, 1957
3- Bernis Matev, J. Atlas de microscopa . Barcelona : Juver, 1973.
4- De Haro Vera, A. Atlas de biologa / Barcelona : Jover, 1974.
5- Castillo, Luis Felipe del. El fenmeno mgico de la smosis / Mxico: F.C.E. ; 1986, reimpresin
6- Herrath, Ernest Von. Atlas de citologa, histologa y anatoma. Barcelona : Cientfico Mdica, 1975.
7.- Karp Gerald. Biologa celular y molecular. Edit. Mc Graw-Hill Interamericana.
8.- Albert Bruce, Bray Denis. Biologa molecular de la clula. Edit. Omega.
9.- De Robertis, Eduardo D.P. Biologa molecular. Edit. El ateneo. ltima edicin
10.- Lodish, Harvey. Biologa molecular y celular. Edit. Mdica Panamericana.
11.- Paulsen Douglas F.. Histologa Bsica. Edit. Manual Moderno
12.- Jawetz, Melnick y Adelberg. Microbiologa mdica. Edit. Manual Moderno

Manual de Lab Biol Molecular y Celular en Farmacia

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Benemrita Universidad Autnoma de Puebla

AREA: ASIGNATURA BASICA

ASIGNATURA: MANUAL DE LABORATORIO DE BIOLOGIA MOLECULAR DE

FECHA: NOVIEMBRE 2011

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 1

Nivel educativo Licenciatura

2. CARGA HORARIA DEL ESTUDIANTE

Horas por periodo Total de Nmero

Bertha Alicia Len Chvez

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 2

De cada una de las unidades del programa y

PERFIL DESEABLE DEL PROFESOR (A) PARA IMPARTIR LA ASIGNATURA:

Disciplina profesional: Q.F.B, Q.F. Q.C.

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 3

Reglamento del Laboratorio Biologa Celular y Molecular

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 5

PRINCIPALES MODIFICACIONES EFECTUADAS EN LA NOM-087-SEMARNAT-

En la Nueva clasificacin, los RPBIs son:

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 6

Los materiales desechables que contengan fluidos y secreciones corporales,

II. Niveles de los Establecimientos Generadores

NIVEL I NIVEL II NIVEL III

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 7

I. Perodo de almacenamiento temporal de los RPBIs en los establecimientos

NIVEL I NIVEL II NIVEL III

II. Atribucin a la Secretaria de Salud. Corresponde a la Secretaria de salud regular y

la SEMARNAT en la regulacin y vigilancia de la norma, para lo cual se estableci en

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 9

GUA PARA LA PREPARACIN DE LOS SEMINARIOS

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 10

SEMINARIO 2: OBSERVACIN DE CLULAS PROCARITICAS Y SUS

o Concepto o definicin de clula procaritica y etimologa.

Complemento SEMINARIO 3: CLULAS EUCARITICAS Y SU DIVERSIDAD.

Presentar en una tabla, las diferencias entre clulas eucariticas y clulas

SEMINARIO4: LA CLULA VEGETAL

Concepto de clula eucaritica.

SEMINARIO5: PERMEABILIDAD CELULAR

Caractersticas generales de la membrana celular: composicin qumica, organizacin

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 12

Solucin salina hipotnica para el humano: composicin qumica y su porcentaje.

SEMINARIO 6: DIVISIN CELULAR

Tipos de divisin celular en clulas procariticas. Slo mencionarlas

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 13

PRACTICA 6. RECONOCIMIENTO DE PROTEINAS DE IMPORTANCIA BIOLGICA

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 14

El microscopio es el aparato ms importante e indispensable en un laboratorio de Biologa,

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 15

MATERIAL. Microscopio ptico, portaobjetos, cubreobjetos y alguna muestra para observar

AJUSTE: en la actualidad casi todos los microscopistas practican la iluminacin basada en

Pasos a seguir para la iluminacin de Khler:

Pasos a seguir para enfocar el espcimen o muestra:

Recomendaciones para el uso de los objetivos:

Objetivo Objetivo Objetivo de

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 18

X: significa una medida cualitativa a manera de comparacin.

MICROSCOPIO COMPUESTO Y SUS COMPONENTES PRINCIPALES

OBJETIVOS DESPLAZAMIENTO PLATINA

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 19

INTRODUCCION.- La fijacin de las clulas o tejidos puede ser definida como el

Las bacterias Gram negativas, aparecen en visin microscpica teidas de un color

Laboratorio de Biologa Molecular de la Clula 20

REACTIVOS: Alcohol etlico al 96 o alcohol etlico-acetona 1:1, cristal violeta, lugol,

TCNICA DE TINCIN DE GRAM

1. Coloque la laminilla en el soporte de la tina de tincin, cuidando que quede completamente