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LA DIVERSIDAD GENTICA Y ESTIMACIONES PUNTUALES A LOS ESFUERZOS

INMEDIATOS PARA LA CONSERVACIN DE LA OVEJA TIBETANO EN PELIGRO DE


EXTINCIN DE LA INDIA

Resumen

Tibetano es una valiosa raza ovina del Himalaya clasificada como en peligro de extincin.
El conocimiento del nivel y la distribucin de la diversidad gentica en el ganado ovino
tibetano son importante para el diseo de estrategias de conservacin para su
supervivencia sostenible y preservar su potencial evolutivo. Por lo tanto, por primera vez,

Se accedi a la variabilidad gentica en la poblacin tibetano con veinticinco inter-


marcadores simples secuencia de repeticin. Todos los microsatlites fueron polimrficos
y se detectaron un total de 148 alelos a travs de estos loci. El nmero observado de
alelos a travs de todos los loci fue ms que el nmero efectivo de alelos y vari de 3
(BM6506) a 11 (BM6526) con 5,920 0,387 nmero de alelos por locus significar. La
heterocigosidad media observada era inferior a la heterocigosidad esperada. Los valores
de heterocigosidad observada y esperada oscil entre 0,150 (BM1314) a 0,9 (OarCP20)
con una media global de 0,473 0,044 y 0,329 de (BM8125) a 0,885 (BM6526) con una
media global de 0,672 0,030, respectivamente. La heterocigosidad inferior apunta hacia
la disminucin de la diversidad gentica en la poblacin.

Trece loci microsatlites mostr significativa salidas (P 0,05 b) a partir de las proporciones
de Hardy-Weinberg en la poblacin. La estimacin de deficiencia de heterocigotos variado
de -0.443 (OarCP20) a 0.668 (OarFCB128) con un valor positivo media de 0,302 0,057.
Un normal "L 'distribucin en forma de prueba de modo de desplazamiento y el exceso de
heterocigotos no significativo sobre la base de diferentes modelos sugiere ausencia de
reciente cuello de botella en la poblacin tibetana existente. En vista de la disminucin de
la poblacin de ovejas tibetano (menos de 250) en el tracto cra, necesidad de la hora es
la gestin cientfica inmediata de la poblacin con el fin de aumentar la parte de la
poblacin de la mano con la retencin de los alelos fundadores en la medida de lo posible.

Introduccin

Biodiversidad ovejas en la India se caracteriza por un alto grado de endemismo como las
variaciones en las condiciones agro climticas han llevado al desarrollo de ms de 40
razas (Acharya, 1982). Esta vasta biodiversidad ovina se est erosionando rpidamente
con ms del 50% de las especies ovinas actualmente bajo amenaza (Bhatia y Arora,
2005). Ovejas proporciona empleo e ingresos a los sectores social y econmicamente
desventajosas de la sociedad siendo criados por los trabajadores sin tierra y los
agricultores marginales. Razas autctonas deben ser consideradas como reservorios
importantes de recursos no explotados debido a la presencia de la variacin gentica
potencialmente beneficioso no reconocido. Por otra parte, las razas autctonas son los
bienes culturales debido a su papel en las formas de tenencia de la agricultura y en la vida
social de las poblaciones rurales. Ovejas tibetano es una de esas castas importantes de la
regin del Himalaya del norte de la India templada. Las ovejas emigraron a la India con
los comerciantes tibetanos que los utilizaron como animales de carga para el transporte
de mercancas diversas, adems de lana (Gobierno de Bengala, 1864). La independencia
de la India en 1947 dio lugar a cambios polticos y econmicos con el cese concomitante
de su migracin en el pas.

animales tibetanos son de tamao mediano, todo blanco con la cara de color negro o
marrn y manchas marrones y blancos en el cuerpo. El velln es relativamente fino y est
entre los mejores obtenidos a partir de las razas ovinas autctonas de subcontinente indio
(Banerjee, 2009). Los animales son nicos de la adaptacin al clima templado duro y
terreno difcil del Himalaya y sobrevivir incluso en el sistema de alojamiento abierta.
Tibetano es considerado como una de las mayora de las razas de ovejas rstico que
prospera en condiciones de extrema dureza y privaciones mientras que proporciona la
carne y abajo para el pueblo. Ellos son la nica fuente de sustento en la zona desde la
agricultura no es adecuado debido a las caractersticas geo-climticas. Sin embargo, la
poblacin de ovejas tibetano ha disminuido drsticamente en un pasado reciente
(Banerjee, 2009) debido a la falta de mercado regulado, la vinculacin de transporte, la
contraccin de los pastizales, el aumento de la endogamia y la aparicin de
enfermedades. La poblacin ha bajado de 30.000 (Acharya, 1982) a menos de 250 en
Sikkim (Ganadera de censo de 2012; Kumar, 2015). Por lo tanto, se requieren medidas
especficas de gestin y conservacin urgentes no slo para la restauracin de la
poblacin natural empobrecido debido a la situacin de peligro, sino tambin por su
importancia biolgica y econmica e importancia ecolgica. El conocimiento de la
variabilidad gentica es muy importante para establecer un programa de conservacin y
manejo. El uso de marcadores genticos moleculares altamente variables, tales como los
microsatlites, es uno de los ms ful de energa significa para el estudio de la diversidad
gentica debido a su alto grado de polimorfismo, la abundancia, la distribucin al azar en
todo el genoma, co-dominante de herencia y la neutralidad con respecto a las seleccin
(Barcaccia et al, 2013;. Putman y Carbone, 2014). Estos se utilizan para estimar la
diversidad de las especies ovinas autctonas en todo el mundo (Ghazyl et al, 2013;.
Ceccobelli et al, 2015). Incluyendo la India (Bhatia y Arora, 2005; Sharma et al., 2010).
Por desgracia, ningn estudio ha sido llevado a cabo hasta ahora para investigar las
caractersticas genticas de las ovejas tibetano utilizando tcnicas de biologa molecular.
Esto es fundamental, ya que se requieren esfuerzos de conservacin urgentes para
conservar y utilizar los recursos genticos ovejas tibetano.

Por lo tanto, el objetivo del presente estudio fue en primer lugar para estimar la
variabilidad intra-raza gentica de ovejas tibetano utilizando 25 marcadores de
microsatlites y en segundo lugar para detectar cuello de botella de la poblacin, si los
hay.

Materiales y mtodos

2.1. Recogida de muestras y de reaccin en cadena de la polimerasa

El tracto cra de ovejas tibetano est confinada a la zona alpina seca, Distrito Norte del
estado de Sikkim en la India (Fig. 1). La poblacin est confinada en slo seis manadas
que se encuentran en el valle Phalung (4697 m, latitud 27 56 'de longitud 88 35'). Las
muestras de sangre fueron adquiridas de veinte ovejas tibetano (aproximadamente el 10%
de la poblacin existente) de la regin de cultivo (Fig. 1) siguiendo las directrices del
MoDAD (medicin de la Diversidad de los Animales Domsticos) programa (FAO, 2004).
La oveja nativa fueron evaluados por sus caractersticas de la raza fenotpica de acuerdo
con el descriptor de la raza y los individuos de cada lote fueron muestreados. Los
propietarios fueron interrogados en detalle para minimizar el muestreo de individuos
estrechamente relacionados. Se recogieron muestras de sangre (5-6 ml) en vacutainer
que contiene cido actico de etileno diamina tetra (0,5 mM, pH 8,0). ADN genmico fue
extrado de la sangre entera usando el protocolo forma phenolchloro (Sambrook et al.,
1989).

2.2. Genotipado de microsatlites

Un panel que consta de 25 marcadores microsatlites fue seleccionado para el anlisis de


la diversidad de la poblacin tibetana ovejas. Estos fueron seleccionados de la literatura
relacionada con los estudios de diversidad ovejas con el objetivo de analizar marcadores
altamente polimrficos distribuidos en el genoma. Estos marcadores tambin se adhieren
a las directrices de la Sociedad Internacional de Gentica Animal y la FAO
(http://dad.fao.org/en/refer/library/guidelin/marker.pdf). La informacin detallada de
cebadores se presenta en la Tabla 1. Cebador directo de cada marcador fue de 5
'marcado con colorante fluorescente, es decir, FAM, NED, PET y VIC. amplificacin por
PCR se realiz en un volumen de reaccin de 25 l en i-ciclador. La mezcla de reaccin
consista de 50 a 100 ng de ADN genmico, 200 mM de cada dNTP, 50 pM de cada
cebador y 0,5 unidades de Taq ADN polimerasa. La amplificacin se llev a cabo
utilizando un programa de toma de contacto para todos los loci de microsatlites, que
consiste en la desnaturalizacin inicial de 95 C durante 1 minuto; 3 ciclos de 95 C
durante 45 s y 60 C durante 1 min, 3 ciclos de 95 C durante 45 s y 57 C durante 1
minuto; 3 ciclos de 95 C durante 45 s y 54 C durante 1 min, 3 ciclos de 95 C durante
45 s y 51 C durante 1 min y 20 ciclos de 95 C durante 45 s y 48 C durante 1 min . La
amplificacin por PCR se confirm mediante electroforesis los productos en gel de
agarosa al 1,8% seguido de tincin con bromuro de etidio (0,5 mg / ml). Productos de
PCR fueron multiplexados (Tabla 1) y genotipificacin se llev a cabo en un ABI-3100
automatizado secuenciador de ADN (Applied Biosystems, EE.UU.) utilizando LIZ 500
como el interior de tamao estndar (Applied Biosystems, EE.UU.). Alelo de tamao se
realiz utilizando el software de Gene Mapper v 3.7. Tartamudeo error de puntuacin
relacionados, a menudo visto en repeticiones de dinucletidos, estaba ausente y alelos se
pudo calificar de forma inequvoca.

Anlisis de los datos

Parmetros genticos bsicos como las frecuencias de alelos observados (n) y nmero
efectivo de alelos (Ne), observada (Ho) y la heterocigosidad esperada (He) y dficit de
heterocigotos (FIS) en el conjunto de la poblacin se calcularon mediante el anlisis de
los datos genticos con GenAlEx 6.2 software (Peakall y Smouse, 2008). Anlisis of
Hardy-Weinberg y Ewens-Watterson neutralidad se aplicaron usando POPGENE versin
1.31 (Yeh et al., 1999). eventos de cuello de botella en la poblacin fueron probados por
tres mtodos. El primer mtodo consiste en tres pruebas de heterocigosidad exceso
desarrollados por Cornuet y Luikart (1996): (i) prueba de los signos, (ii) las diferencias de
las pruebas estandarizadas, y (iii) una prueba de inicio de sesin de rangos de Wilcoxon.
La distribucin de probabilidad se estableci utilizando simulaciones 1000 menores de
tres aos modelo modelos infinita alelo (IAM), el modelo gradual de mutacin (SMM) y el
modelo de dos fases de la mutacin (TPM). El segundo mtodo es la representacin
grfica del indicador de modo de cambio propuesto originalmente por Luikart et al. (1998).
La prdida de alelos raros en poblaciones congestiones se detecta cuando una o ms de
las clases de alelos comunes tienen un mayor nmero de alelos que la clase alelo raro
(Luikart et al., 1998). Estos dos mtodos se aplicaron usando cuello de botella v1.2.02
(http://www.ensam.inra.fr/URLB).

Resultado y discusin

Mantenimiento de la diversidad gentica es el principal objetivo de los programas de


conservacin, por lo que la poblacin puede hacer frente a los retos medioambientales en
el futuro y puede responder a la seleccin a largo plazo, ya sea natural o artificial para
caracteres de inters econmico y cultural. As, en este estudio, que caracteriza la
gentica de la oveja tibetano basado en 25 loci de microsatlites con el fin de generar
informacin para su conservacin. Por supuesto, es mejor obtener la mayor cantidad de
datos individuales como sea posible para entender la situacin actual de la poblacin en
trminos de diversidad gentica. Sin embargo, en el caso de las ovejas tibetano, slo 215
animales se dejan (Kumar, 2015), que se cran en la regin bastante inaccesible, las
partes ms altas del Distrito Norte del estado de Sikkim. As, los datos genmicos en
veinte animales pueden considerarse suficientes para evaluar la diversidad gentica de la
raza ovina altamente en peligro de extincin.

3.1. La variabilidad gentica de los loci de microsatlites

Todos los marcadores fueron polimrficos y se detectaron un total de 148 alelos en los 25
loci. Una prueba exacta de vinculacin desequilibrio genotpico no produjo los valores P
significativos en toda la poblacin, y se asumi surtido, por tanto, independiente de todos
los loci. Cantidad razonable de polimorfismo en la raza ovina tibetano era evidente a partir
de los datos de frecuencia de alelo (disponibles bajo peticin) con el nmero medio de
alelos (MNA) de 5,920 0,387 (Tabla 2). BM6526 mostr el mayor nmero de alelos
observados por locus (11), mientras que BM8125, OarVH72 y BM6506 mostraron la ms
baja (3). Nmero esperado de alelos variaron de 1.490 (BM8125) a 8.667 (BM6526) con
la media de 3,70 (Tabla 2). Por lo tanto la seleccin de los microsatlites con una gama de
polimorfismo redujo el riesgo de sobreestimar la variabilidad gentica, lo que podra
ocurrir con el uso selectivo de loci altamente polimrficos. Un microsatlite
preferiblemente debe tener al menos 4 alelos para ser til para la evaluacin de la
diversidad gentica como por la seleccin estndar de microsatlites loci (Barker, 1994).
Sin embargo, 3 alelos por locus tambin se han utilizado para evaluar la diversidad
gentica (Li et al., 2010). Por lo tanto todos los 25 microsatlites se conservaron para su
posterior anlisis. La diversidad allica (nmero medio de alelos observados por locus)
por encima de la observada en el ganado ovino tibetano se ha informado en algunas de
las razas de ovinos de la India (Arora et al, 2008;.. Kumarasamy et al, 2009; Radha et al.,
2011; Sharma et al., 2010). Sin embargo, MNA en raza tibetano es mayor que la
observada en varias otras razas de ovinos indio a saber. 4,94 en Madras ovejas Roja
(Prema et al., 2008), 5,0 en Nilagiri (Girish et al., 2007), 5,04 en Muzaffarnagari (Arora y
Bhatia, 2004), 5,3 en Kheri (Bhatia y Arora, 2008), 5,6 en Shahbad (Pandey et al.,
2009), en 5,7 Magra (Arora y Bhatia, 2006) y 5,88 en Vembur (Pramod et al., 2009) .As,
se puede concluir que existe suficiente variabilidad gentica en el ganado ovino tibetano a
pesar de su disminucin de la poblacin tendencia.

El contenido de informacin polimrfica (PIC) de un marcador revela su utilidad en el


anlisis de la diversidad de una raza. Siguiendo los criterios de Botstein et al. (1980), se
observ un 84% de los marcadores investigados para ser altamente informativo (N0.5
PIC), el 12% como sea razonablemente informativo (0,25 b b PIC 0,5) y slo el 4% fueron
ligeramente informativa (PIC b 0,25) a travs de la raza tibetana (Tabla 2). Un valor medio
de 0,63 para el PIC una vez ms indica la diversidad gentica abundante en esta
poblacin. Cuanto mayor PIC indic, adems, la utilidad de estos marcadores para la
asignacin de poblacin (MacHugh et al., 1997), as como la cartografa del genoma
(Kayang et al., 2002) Estudios en Adems del anlisis de la diversidad gentica.

3.2. Heterocigosidad y el equilibrio de Hardy-Weinberg

La variabilidad gentica tambin se mide como la cantidad de heterocigosidad real


o potencial, que se presenta en la Tabla 2. La heterocigosis esperada era ms alta
que la heterocigosidad observada en todos los loci. Los valores de
heterocigosidad observada y esperada oscil entre 0,150 (BM1314) a 0.842
(CSSM31) y de 0.329 (BM8125) a 0,885 (BM6526) con una media global de 0,473
0,044 y 0,672 0,030, respectivamente. La variacin gentica de una magnitud
similar (0,46-0,55) tambin se ha informado en el peligro de extincin ovejas
namaqua afrikaner originario de frica del Sur (Qwabe et al., 2015). Considerando
que, con mayor heterocigosidad se ha informado en las dos razas espaolas en
peligro de extincin, Churra Tensina (0.659) y Lebrijana Churra (0.674) a pesar de
su pequeo tamao de la poblacin (Calvo et al., 2011). La mayora de las razas
de ovinos de la India con la suficiente exposicin de la poblacin mayor
heterocigosidad (Ho) de la oveja tibetana (Arora et al., 2011). Tibetano pertenece a
las razas de ovinos de la regin templada del norte de la India. Tiene las
estimaciones de mnimos diversidad entre las razas de regin templada del Norte
tambin (Tabla 3). Del mismo modo, mucho ms alta heterocigosidad se ha
informado en varios viz ovejas extico. razas ovinas Baleares (0,62, Pons y Landi,
2015), animales de 12 ovejas de Croacia, Bosnia y Herzegovina (0,643 a 0,743,
Salamon et al., 2014) y las especies ovinas turcos (0,66, Yilmaz y Sezenler, 2015).
Sin embargo, en la evaluacin de las estimaciones de diversidad de diferentes
estudios, se debe mencionar que los valores no son directamente comparables, ya
que diferentes conjuntos de microsatlites se han utilizado por diferentes
trabajadores. Estos valores tienen nica indicacin sugerente de la diversidad de
la poblacin.

Heterocigosidad observada fue inferior al esperado que muestra un equilibrio de


Hardy-Weinberg (HWE) y la posibilidad de endogamia. Se observ desviacin
significativa de HWE en 13 de los 25 loci en P b 0,05 (Tabla 2). Desviaciones de
HWE de la magnitud similar tambin se reportaron en las razas ovinas espaolas
en peligro de extincin (Calvo et al., 2011), Italiano (Ceccobelli et al., 2015),
Turqua (Yilmaz y Sezenler, 2015) y en varias razas de ovinos de la India ( Radha
et al., 2011). Hay varios factores que pueden contribuir a un exceso de
homocigotos. Primero, el locus es bajo seleccin. En segundo lugar, 'alelos nulos'
pueden estar presentes que estn dando lugar a una falsa observacin de un
exceso de homocigotos. En tercer lugar, la endogamia puede ser comn en la
poblacin. En cuarto lugar, la presencia de poblacin subestructura puede llevar a
efecto Wahlunds '. (Nei, 1987;. Peter et al, 2007). Distinguir entre stos es
generalmente difcil (Christiansen et al., 1974). La probabilidad de que cada una
de estas explicaciones debe evaluarse a partir de datos adicionales, como
informacin demogrfica, es decir, distribucin de la poblacin. Los alelos nulos
aremost poco probable que se segrega en todos los loci. Del mismo modo
possibleWahlunds 'no effectsmay representan significativamente al dficit de
heterocigotos observada, ya que todos los seis rebaos estaban en el mismo
lugar. Ewens-Watterson prueba de la neutralidad revel que todos los
microsatlites, excepto OarHH47 y INRA63 (Tabla S1, observ valores de F se
encuentran fuera de los lmites superior e inferior de la regin de confianza del
95% de los valores esperados F) fueron neutrales. Desde 92% loci fueron
neutrales, la seleccin como una causa de la disminucin de la heterocigosidad
observada fue descartado. As, la diferencia entre la heterocigosidad observada y
esperada se puede atribuir a la de apareamiento no aleatoria entre los individuos
de la poblacin. Esto tambin se refleja en el valor de FIS positivo (0,302 0,057),
que vari -0,443-,687. Al igual que en nuestras suposiciones, el alto valor de FIS
(0,143) en el mufln espaol fue considerado como la principal causa del
desequilibrio de Hardy-Weinberg en esa poblacin (Calvo et al., 2011).

La deficiencia de heterocigotos ms alta se observa generalmente en las especies


ovinas de la India; Magra (16%, Arora y Bhatia, 2006); Shahbad (21,5%, Pandey
et al., 2009); Rampur Bushair (22,7%, Pandey et al., 2008), y las especies ovinas
de Rajasthan-Nali (28,4%) y Chokla (28,6%) (Sodhi et al., 2006). Sin embargo,
ovejas tibetano (30,2%) present el mayor deficiencia de heterocigotos entre las
razas indias, investigado hasta ahora. Los autores estn de acuerdo en que el
principal factor que contribuye a la deficiencia de heterocigotos observado en
ovejas tibetano puede ser debido a la endogamia de la poblacin extremadamente
pequea (B250) y la ignorancia de los ganaderos sobre la gestin cientfica. En
condiciones de campo, slo se monta natural se practica cuando el macho
dominante generalmente excluye machos subordinados, y presumiblemente la
mayora de los toros de la descendencia. La prctica de cra en general en la
regin fue de castrar la mayora de los varones. Esto condujo a una reduccin de
la poblacin efectiva tamao / o el apareamiento entre parientes y la consiguiente
deriva gentica. La consanguinidad producido por el apareamiento entre parientes
puede ser una de las principales causas de la prdida de heterocigotos, pero tiene
que ser evaluado con cautela, ya que la consanguinidad con dficit significativo de
heterocigotos afecta a todos o la mayora de los loci de una manera similar. Desde
el ochenta por ciento de los loci representada dficit de heterocigotos (Tabla 2),
por lo que podramos considerar la consanguinidad como la primera causa de
deficiencia de heterocigotos. Salamon et al. (2014) tambin han llegado a la
conclusin de que la prctica de cra de plomo con el valor ms alto de esqu
alpino en el estudio participaron 12 razas ovinas Adritico oriental y occidental
Dinaric nativas. Este alto nivel de endogamia es arriesgado, ya que podra dar
lugar a enfermedades genticas y, adems, puede afectar negativamente a la
aptitud de los animales.

3.3. El anlisis cuello de botella gentico

Cuello de botella influye en la distribucin de la variacin gentica dentro y entre


poblaciones. Poblacin de ovejas tibetano se ha reducido drsticamente, lo que
indica la posibilidad de cuello de botella demogrfico. En las poblaciones
recientemente por congestiones, la mayora de los loci exhibir un exceso de
heterocigotos, superando la heterocigosidad esperada en un equilibrio deriva
atmutation poblacin. Para la estimacin se utilizaron el exceso de dicha sesin
heterocigosidad, las diferencias estandarizadas y pruebas de rango de signos de
Wilcoxon. El modelo de mutacin real de la evolucin seguida por nuestros
microsatlites no se conoce, por tanto, se seleccionaron los tres modelos (IAM,
TPM y SMM) para ejecutar el programa de cuello de botella. Los valores de
heterocigosidad promedio (He) y sus probabilidades (H N He) en la prueba de
firmar, bajo tres modelos de evolucin de microsatlites se calcularon y se utilizan
para medir el nmero esperado de loci con exceso de heterocigosidad (Tabla 4). El
nmero esperado de loci con exceso de heterocigosidad fueron 14,77, 14,94 y
14,62 en el IAM, TPM y SMM con probabilidades de 0,13211, 0,10276 y 0,39403
respectivamente, lo que significa que la hiptesis nula fue aceptada cuando se
utiliza la prueba de los signos. Estos resultados indican que, debido al equilibrio
mutacin-deriva, la poblacin tibetano no ha sido objeto de un cuello de botella
gentico reciente. La prueba de la diferencia estandarizada proporciona las
estadsticas T2 igual a 2,252, 0,269 y -2,667 para los modelos de IAM, TPM y
SMM, respectivamente. Los valores de probabilidad fueron menos de 0,05 para
IAM y SMM, por tanto, la hiptesis de equilibrio mutacin-deriva fue aceptada bajo
TPM solamente. Utilizando el test de rangos de Wilcoxon (una prueba no
paramtrica) los valores de probabilidad fueron 0,00441 (IAM), 0,28009 (TPM) y
0,91775 (SMM) en virtud de estos tres modelos, lo que indica que la hiptesis nula
es aceptada en virtud de TPM y SMM y por lo tanto la poblacin en estudio no se
ha sometido a un cuello de botella reciente. Se ha considerado que los
marcadores ms tiles para la deteccin de cuello de botella son los que
evolucionan bajo IAM, y proporcionar directrices para la seleccin de tamaos de
las muestras de los individuos y loci (Cornuet y Luikart, 1996; Di Rienzo et al,
1994;.. Spencer et al, 2000); Mientras tanto, los TPMis pensaron para simular ms
estrechamente mutacin de microsatlites (Estoup y Cornuet, 2000). A diferencia
de la SMM, que predice todas las mutaciones correspondientes al incremento o
decremento de una sola repeticin de pares de bases, el TPM predice la
ocurrencia de un ocasional repeticin mltiple de pares de bases (Di Rienzo et al.,
1994). La estricta SMM es, obviamente, el modelo ms conservador para las
pruebas para un exceso de heterocigosidad significativo producido por los cuellos
de botella, ya que en algunas condiciones puede producir una deficiencia de
heterocigosidad, y debido al exceso de heterocigosidad es siempre ms bajo que
otros modelos de mutacin. Por lo tanto, hemos considerado todos los resultados
de las tres pruebas en conjunto y est claro que los graves cuellos de botella
demogrficos tienen ms probable es que no se produjeron en esta raza.

La prueba del indicador de modo de desplazamiento tambin se utiliz como un


segundo mtodo para detectar posibles cuellos de botella, ya que se espera que
las poblaciones no cuello de botella que estn cerca del equilibrio mutacin-deriva
de tener una gran proporcin de alelos con una frecuencia baja. Esta prueba
discrimina muchas poblaciones afectadas por congestiones de poblaciones
estables (Luikart, 1997; Luikart y Cornuet, 1997). Una representacin grfica de la
utilizacin de clase allica y la proporcin de alelos mostr una normal "L 'en forma
de la distribucin (Fig. 2). La curva en forma de L indica la abundancia de alelos
(b0.10) de baja frecuencia. Este hallazgo sugiere la ausencia de cualquier forma
detectable grandes recientes cuello de botella gentico (ltimos 40-80
generaciones), en la disminucin de la poblacin, donde la probabilidad de prdida
de baja frecuencia del alelo fue muy alta. Tomados en conjunto todos los
resultados indican la ausencia de eventos de cuello de botella en la reciente
historia pasada de esta raza.
La contraccin de los pastos, la endogamia, la ausencia de prcticas y gestin de
la cra de animales cientficas en clima muy duro haber resultado en beneficios
para la disminucin de los pastores de ovejas tibetanas. Como resultado, la cra
de ovejas ha logrado atraer a las generaciones ms jvenes. Adems, la falta de
una poltica adecuada lleva a un rpido declive de la poblacin tibetana ovejas que
son menos de doscientos cincuenta en la actualidad. Por lo tanto, es necesaria
una intervencin oportuna para evitar la extincin de esta valiosa raza de ovejas,
lo que ayuda en el mantenimiento de la subsistencia de las tierras altas y la
fragilidad de los ecosistemas agrcolas. La informacin presentada aqu es
importante para los criadores de ovejas para el establecimiento de estrategias de
conservacin.

Conclusin

El presente trabajo por primera vez generado el conocimiento de la diversidad


gentica existente en la oveja tibetano en peligro de extincin basado en el
anlisis de microsatlites. Se trata de un acervo gentico nico, con buena
adaptacin a las condiciones de oxgeno extremadamente fras y bajas. Los
parmetros genticos muestran un alto valor de la endogamia y por lo tanto esta
raza debe ser monitoreada debido al escaso nmero de individuos que lo
componen. Todava hay margen para la reactivacin de la raza debido a la alta
diversidad alelo que sugiere que los alelos nicos presentes en esta raza no se
pueden haber perdido y la ausencia de cuello de botella.

Los datos complementarios a este artculo se pueden encontrar en lnea en


http://dx.doi.org/10.1016/j.mgene.2016.01.002.

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